选择性糖苷酶抑制剂及其用途
阅读：58发布：2023-01-26
专利汇可以提供选择性糖苷酶抑制剂及其用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供用于选择性地抑制糖苷酶且具有提高的渗透率的化合物、该化合物的前药、以及包含该化合物或该化合物的前药的药物组合物。本发明还提供了 治疗 与O-GlcNAcase的缺乏或过表达、O-GlcNAc的累积或缺乏有关的 疾病 和病症的方法。，下面是选择性糖苷酶抑制剂及其用途专利的具体信息内容。
1.式(I)化合物或其药学上可接受的盐：
其中
R1和R2独立地是H或F；
R3是OR5且R4是H，或者R3是H且R4是OR5；
每个R5独立地是H或C1-6酰基；
R6是H、F或OR5；
R7选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F之外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；
R8选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R7和R8与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且
每个R9独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者
两个R9基团与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；
其中当R6是OR5时，R7不为F。
2.权利要求1的化合物，其中：
R1和R2是H，或者R1是H且R2是F，或者R1是F且R2是H，或者R1是OH且R2是H；
R3是H且R4是OH，或者R3是OH且R4是H；
R6是H或OH；
R7是H或CH3；
R8是CH3或CF3；且
每个R9独立地选自：H、CH3和CH2CH3，或者NR92是氮杂环丁烷-1-基。
3.权利要求1的化合物，其中，R1、R2和R6中的至少一个是F。
4.权利要求1的化合物，其中：
R1是H且R2是F，或者R1是F且R2是H；
R3是H；且
R4是OR5。
5.权利要求1的化合物，其中所述化合物选自：
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
或任一前述化合物的药学上可接受的盐。
6.权利要求1的化合物，其中所述化合物选自：
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((S)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-2-(乙基氨基)-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-2-(乙基氨基)-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-乙基-7-氟-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-( 二 甲 基 氨 基 )-5-((R)-2,2,2- 三 氟 -1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-( 二 甲 基 氨 基 )-5-((S)-2,2,2- 三 氟 -1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((S)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二 甲 基 氨 基)-7- 氟 -5-(1,1,1-三 氟 -2-羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((R)-1,1,1- 三 氟 -2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((S)-1,1,1- 三 氟 -2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-( 氮 杂 环 丁 烷 -1- 基 )-7- 氟 -5-((S)-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(氮杂环丁烷-1-基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-氨基-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((S)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-乙基-7-氟-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-5-(2-羟基丙烷-2-基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7aR)-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((S)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(二 甲 基 氨 基)-7- 氟 -5-(1,1,1-三 氟 -2-羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-( 氮 杂 环 丁 烷 -1- 基 )-7- 氟 -5-((S)-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(氮杂环丁烷-1-基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(吡咯烷-1-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(吡咯烷-1-基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7- 氟 -5-((R)-2- 氟 -1- 羟 基 乙 基 )-2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-5-((R)-2,2- 二 氟 -1- 羟 基 乙 基)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7- 氟 -5-((R)-2- 氟 -1- 羟 基 乙 基 )-2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-5-((R)-2,2- 二 氟 -1- 羟 基 乙 基)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基丙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-((S)-3,3- 二 氟 -1- 羟 基 丙 基)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-3,3,3- 三 氟-1- 羟 基 丙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-((S)- 环 丙 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-((S)- 环 丁 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-((S)- 环 戊 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基丙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-((S)-3,3- 二 氟 -1- 羟 基 丙 基)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-3,3,3- 三 氟-1- 羟 基 丙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-((S)- 环 丙 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-((S)- 环 丁 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-((S)- 环 戊 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-乙烯基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-(2,2,2-三氟乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
或任一前述化合物的药学上可接受的盐。
7.权利要求1的化合物，其中所述化合物是前药。
8.权利要求1至7中任一项的化合物，其中所述化合物选择性地抑制O-糖蛋白2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷酶(O-GlcNAcase)。
9.权利要求1至8中任一项的化合物，其中所述化合物选择性地结合O-GlcNAcase。
10.权利要求1至9中任一项的化合物，其中所述化合物选择性地抑制2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷(O-GlcNAc)的裂解。
11.权利要求9的化合物，其中所述O-GlcNAcase是哺乳动物O-GlcNAcase。
12.权利要求1至11中任一项的化合物，其中所述化合物基本上不抑制哺乳动物β-己糖胺酶。
13.药物组合物，其包含权利要求1至12中任一项的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
14.式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于选择性地抑制有此需要的受试者的O-GlcNAcase的药物中的用途：
其中
1 2
R和R 独立地是H或F；
3 5 4 3 4 5
R是OR 且R 是H，或者R 是H且R 是OR ；
5
每个R独立地是H或C1-6酰基；
6 5
R是H、F或OR ；
7
R选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F之外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；
8
R选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取
7 8
代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且
9
每个R独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者
9
两个R基团与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；
6 5 7
其中当R是OR 时，R 不是F。
15.式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于升高有此需要的受试者的O-GlcNAc水平的药物中的用途：
其中
R1和R2独立地是H或F；
R3是OR5且R4是H，或者R3是H且R4是OR5；
每个R5独立地是H或C1-6酰基；
R6是H、F或OR5；
R7选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；
8
R选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取
7 8
代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且
9
每个R独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者
9
两个R基团与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；
6 5 7
其中当R是OR 时，R 不是F。
16.式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗有此需要的受试者的由O-GlcNAcase调节的疾病状况的药物中的用途：
其中
R1和R2独立地是H或F；
R3是OR5且R4是H，或者R3是H且R4是OR5；
每个R5独立地是H或C1-6酰基；
R6是H、F或OR5；
R7选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；
R8选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R7和R8与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且
每个R9独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者
两个R9基团与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；
其中当R6是OR5时，R7不是F。
17.权利要求16的用途，其中所述疾病状况选自以下疾病状况中的一种或多种：炎性疾病、变态反应、哮喘、变态反应性鼻炎、超敏性肺疾病、超敏性肺炎、嗜酸细胞性肺炎、迟发型超敏反应、动脉粥样硬化、间质性肺病(ILD)、特发性肺纤维化、风湿性关节炎相关ILD、系统性红斑狼疮、强直性脊柱炎、系统性硬化病、斯耶格伦氏综合症、多肌炎或皮肌炎、全身性过敏或超敏反应、药物变态反应、昆虫叮咬变态反应、自身免疫性疾病、风湿性关节炎、牛皮癣关节炎、多发性硬化、格-巴二氏综合征、系统性红斑狼疮、重症肌无力、肾小球肾炎、自身免疫性甲状腺炎、移植物排斥、同种异体移植物排斥、移植物抗宿主病、炎性肠疾病、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、脊椎关节病、硬皮病、银屑病、T细胞介导的银屑病、炎性皮肤病、皮炎、湿疹、特应性皮炎、变应性接触性皮炎、荨麻疹、脉管炎、坏死性脉管炎、皮肤性脉管炎和超敏性脉管炎、嗜酸细胞性肌炎、嗜酸细胞性筋膜炎、实体器官移植物排斥、心脏移植物排斥、肺移植物排斥、肝移植物排斥、肾移植物排斥、胰腺移植物排斥、肾同种异体移植物、肺同种异体移植物、癫痫症、疼痛、纤维肌痛、中风、神经保护。
18.式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗有此需要的受试者的疾病状况的药物中的用途，所述疾病状况选自神经退行性疾病、tau病变、癌症和应激：
其中
1 2
R和R 独立地是H或F；
3 5 4 3 4 5
R是OR 且R 是H，或者R 是H且R 是OR ；
5
每个R独立地是H或C1-6酰基；
6 5
R是H、F或OR ；
7
R选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；
8
R选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取
7 8
代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且
9
每个R独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者
9
两个R基团与它们所连接的氮原子连接在一起以形成环，所述环任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；
6 5 7
其中当R是OR 时，R 不是F。
19.权利要求18的用途，其中所述疾病状况选自以下疾病状况中的一种或多种：
阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、具有认知功能缺损的肌萎缩性侧索硬化症(ALSci)、嗜银颗粒痴呆、布鲁伊特病、皮质基底节变性(CBD)、拳击员痴呆、伴有钙化的弥散性神经原纤维缠结、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与染色体17相关联的伴有帕金森症的额颞叶痴呆(FTDP-17)、葛兹曼-史特劳塞-史萘克病、瓜德罗普帕金森症、哈勒沃登-施帕茨病(1型脑铁积聚性神经变性)、多系统萎缩、强直性肌营养不良、尼曼-皮克病(C型)、苍白球-脑桥-黑质变性、关岛震颤麻痹痴呆综合征、皮克氏病(PiD)、脑炎后帕金森症(PEP)、朊病毒病(包括克雅氏病(CJD)、变异型克雅氏病(vCJD)、家族性致命性失眠症和库鲁病)、进行性超皮质性神经胶质增生、进行性核上性麻痹(PSP)、理查德森氏综合征、亚急性硬化性全脑炎、单纯缠结性痴呆症、亨廷顿氏病、帕金森氏病、精神分裂症、轻度认知障碍(MCI)、神经病变(包括周围神经病变、自主神经病变、神经炎和糖尿病性神经病变)或青光眼。
20.权利要求18的用途，其中所述应激是心脏病症。
21.权利要求20的用途，其中所述心脏病症选自缺血；出血；低血容量性休克；心肌梗塞；介入性心脏病学程序；心脏搭桥手术；纤维蛋白溶解疗法；血管成形术；和支架放置中的一种或多种。
22.权利要求18所述的用途，其中所述疾病状况为阿尔茨海默病。
23.权利要求18所述的用途，其中所述疾病状况为PSP。
24.权利要求14至23中任一项的用途，其中所述化合物选自：
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((S)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-2-(乙基氨基)-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-2-(乙基氨基)-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-乙基-7-氟-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-( 二 甲 基 氨 基 )-5-((R)-2,2,2- 三 氟 -1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-( 二 甲 基 氨 基 )-5-((S)-2,2,2- 三 氟 -1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((S)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二 甲 基 氨 基)-7- 氟 -5-(1,1,1-三 氟 -2-羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((R)-1,1,1- 三 氟 -2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((S)-1,1,1- 三 氟 -2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-( 氮 杂 环 丁 烷 -1- 基 )-7- 氟 -5-((S)-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(氮杂环丁烷-1-基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-氨基-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((S)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-乙基-7-氟-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-5-(2-羟基丙烷-2-基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7aR)-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((S)-1,1,1- 三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(二 甲 基 氨 基)-7- 氟 -5-(1,1,1-三 氟 -2-羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-( 氮 杂 环 丁 烷 -1- 基 )-7- 氟 -5-((S)-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(氮杂环丁烷-1-基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(氮杂环丁烷-1-基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(吡咯烷-1-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(吡咯烷-1-基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7- 氟 -5-((R)-2- 氟 -1- 羟 基 乙 基 )-2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-5-((R)-2,2- 二 氟 -1- 羟 基 乙 基)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7- 氟 -5-((R)-2- 氟 -1- 羟 基 乙 基 )-2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-5-((R)-2,2- 二 氟 -1- 羟 基 乙 基)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基丙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-((S)-3,3- 二 氟 -1- 羟 基 丙 基)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-3,3,3- 三 氟-1- 羟 基 丙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-((S)- 环 丙 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-((S)- 环 丁 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-((S)- 环 戊 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基丙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-((S)-3,3- 二 氟 -1- 羟 基 丙 基)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((S)-3,3,3- 三 氟-1- 羟 基 丙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-((S)- 环 丙 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-((S)- 环 丁 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-((S)- 环 戊 基 ( 羟 基 ) 甲 基 )-7- 氟 -2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-乙烯基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-(2,2,2-三氟乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
或任一前述化合物的药学上可接受的盐。
25.权利要求14至23中任一项的用途，其中所述化合物选自：
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6S,7aR)-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-( 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-7-氟-5-((R)-2,2,2- 三 氟-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇；
或任一前述化合物的药学上可接受的盐。
26.权利要求14至25中任一项的用途，其中所述施用使受试者的O-GlcNAc水平增加。
27.权利要求14至26中任一项的方法，其中所述受试者是人。
28.用于筛选O-GlcNAcase的选择性抑制剂的方法，所述方法包括：
a)使第一样品与供试化合物接触；
b)使第二样品与式(I)化合物接触
其中
1 2
R和R 独立地是H或F；
3 5 4 3 4 5
R是OR 且R 是H，或者R 是H且R 是OR ；
5
每个R独立地是H或C1-6酰基；
6 5
R是H、F或OR ；
7
R选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；
8
R选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取
7 8
代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且
9
每个R独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者
9
两个R基团与它们所连接的氮原子连接在一起以形成环，所述环任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；
6 5 7
其中当R是OR 时，R 不是F；
c)测定第一样品和第二样品中O-GlcNAcase的抑制水平，
其中，如果供试化合物显示出与式(I)化合物相同的或更大的O-GlcNAcase的抑制，则供试化合物是O-GlcNAcase的选择性抑制剂。
选择性糖苷酶抑制剂及其用途
发明领域
[0001] 本申请涉及选择性地抑制糖苷酶的化合物及其用途。
[0002] 发明背景
[0003] 许多不同的细胞蛋白(核蛋白和胞质蛋白二者)通过添加经由O-糖苷键连接的单糖2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷(β-N-乙酰基葡糖胺)进行翻译后修饰1
。这种修饰一般被称为O-链接的N-乙酰基葡糖胺或O-GlcNAc。负责使β-N-乙酰基葡糖胺(GlcNAc)翻译后链接至多种核细胞质蛋白(nucleocytoplasmic proteins)的特异性
2-5
丝氨酸和苏氨酸残基的酶是O-GlcNAc转移酶(OGT) 。被称为糖蛋白2-乙酰氨基-2-脱
6,7
氧-β-D-吡喃葡萄糖苷酶(O-GlcNAcase) 的第二酶除去此翻译后修饰以释放出蛋白，使
8
O-GlcNAc-修饰在蛋白质的寿命期间发生多次动态循环 。
。这种修饰一般被称为O-链接的N-乙酰基葡糖胺或O-GlcNAc。负责使β-N-乙酰基葡糖胺(GlcNAc)翻译后链接至多种核细胞质蛋白(nucleocytoplasmic proteins)的特异性
2-5
丝氨酸和苏氨酸残基的酶是O-GlcNAc转移酶(OGT) 。被称为糖蛋白2-乙酰氨基-2-脱
6,7
氧-β-D-吡喃葡萄糖苷酶(O-GlcNAcase) 的第二酶除去此翻译后修饰以释放出蛋白，使
8
O-GlcNAc-修饰在蛋白质的寿命期间发生多次动态循环 。
[0004] O-GlcNAc-修饰的蛋白调节大量的重要细胞功能，包括例如转录9-12、蛋白酶体降13 14 15-17
解 和细胞信号传导 。在许多结构蛋白上也发现了O-GlcNAc 。例如，其已在许多细胞
18,19 6,20 7
骨架蛋白(包括神经丝蛋白 、突触蛋白 、突触蛋白-特异性网格蛋白装配蛋白AP-3
14 21,22
和锚定蛋白G(ankyrinG) )上被发现。已在脑中发现丰富的O-GlcNAc修饰 。其还在明确牵涉进许多疾病(包括阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease；AD)和癌症)的病因学的蛋白上被发现。
解 和细胞信号传导 。在许多结构蛋白上也发现了O-GlcNAc 。例如，其已在许多细胞
18,19 6,20 7
骨架蛋白(包括神经丝蛋白 、突触蛋白 、突触蛋白-特异性网格蛋白装配蛋白AP-3
14 21,22
和锚定蛋白G(ankyrinG) )上被发现。已在脑中发现丰富的O-GlcNAc修饰 。其还在明确牵涉进许多疾病(包括阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease；AD)和癌症)的病因学的蛋白上被发现。
[0005] 例如，充分确定的是，AD和许多相关的tau病变(包括唐氏综合征(Downs’syndrome)、皮克氏病(Pick’s disease)、C型尼曼-皮克病(Niemann-Pick Type C disease)和肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis，ALS)部分地以神经纤维缠结(NFT)的出现为特征。这些NFT是成对螺旋丝(PHF)的聚集体且由异常形式的细胞骨架蛋白“tau”组成。通常，tau稳定微管的关键细胞网络，其是在神经元内分布蛋白质和营养素所必需的。然而，在AD患者中，tau变成高度磷酸化(hyperphosphorylated)的，扰乱其正常功能，形成PHF，并最终聚集形成NFT。在人脑中发现了tau的六种同种型。
在AD患者中，tau的所有6种同种型皆在NFT中被发现且所有6种皆被明显地高度磷酸化
23,24
。健康脑组织中的tau仅携带2或3个磷酸酯基团，而在AD患者脑中发现的tau平均
25,26
携带8个磷酸酯基团 。AD患者脑中的NFT水平与痴呆症的严重程度之间清楚的相似性
27-29
有利地支持tau功能障碍在AD中的关键作用 。tau的这种高度磷酸化的确切原因仍是
30
不确定的。据此，已进行了大量的工作，以：a)阐明tau高度磷酸化的分子生理学基础 ；
及b)确定能限制tau高度磷酸化的策略，希望这些策略能停止或甚至逆转阿尔茨海默病的
31-34
进展 。到目前为止，一些证据迹象表明tau的高度磷酸化可能涉及到许多激酶的上调
21,35,36 21
，虽然最近已提出这种高度磷酸化的替代基础 。
在AD患者中，tau的所有6种同种型皆在NFT中被发现且所有6种皆被明显地高度磷酸化
23,24
。健康脑组织中的tau仅携带2或3个磷酸酯基团，而在AD患者脑中发现的tau平均
25,26
携带8个磷酸酯基团 。AD患者脑中的NFT水平与痴呆症的严重程度之间清楚的相似性
27-29
有利地支持tau功能障碍在AD中的关键作用 。tau的这种高度磷酸化的确切原因仍是
30
不确定的。据此，已进行了大量的工作，以：a)阐明tau高度磷酸化的分子生理学基础 ；
及b)确定能限制tau高度磷酸化的策略，希望这些策略能停止或甚至逆转阿尔茨海默病的
31-34
进展 。到目前为止，一些证据迹象表明tau的高度磷酸化可能涉及到许多激酶的上调
21,35,36 21
，虽然最近已提出这种高度磷酸化的替代基础 。
[0006] 具体地说，已出现通过tau上的O-GlcNAc水平来调节tau的磷酸酯水平。O-GlcNAc在tau上的存在促进了对O-GlcNAc水平与tau磷酸化水平的相关性的研究。对该领域的兴趣起源于以下观察：已发现在很多蛋白上在已知被磷酸化的氨基酸残基上出现
37-39
了O-GlcNAc修饰 。与这种观察一致的是，已发现磷酸化水平的增加导致O-GlcNAc水平
40
的降低，相反，增加的O-GlcNAc水平与降低的磷酸化水平相关联 。O-GlcNAc与磷酸化之
41 4
间的这种互反关系被称为“阴-阳(Yin-Yang)假说”，且已通过酶OGT与用于从蛋白除
42
去磷酸酯基团的磷酸酶形成功能性复合物的发现而得到有力的生物化学支持 。与磷酸化类似的，O-GlcNAc是一种动态修饰，其在蛋白的寿命期间能够被多次除去和重建。这表明，
7,43
已将编码O-GlcNAcase的基因标定成与AD相关联的染色体位点 。在人AD脑中的高度
21
磷酸化的tau比健康人脑中所发现的具有明显更低的O-GlcNAc水平 。已表明患有AD的人脑的可溶性tau蛋白的O-GlcNAc水平明显低于健康脑部的可溶性tau蛋白的O-GlcNAc
21 21
水平 。而且还表明，患病脑部的PHF完全不存在任何O-GlcNAc修饰 。tau的这种低糖化的分子基础是未知的，虽然其可能起源于增加的激酶活性和/或参与加工O-GlcNAc的酶之一的功能障碍。支持后一观点的是，在小鼠的PC-12神经元细胞和脑组织切片中，均使用了选择性N-乙酰基葡糖胺酶抑制剂来增加tau O-GlcNAc水平，此时观察到磷酸化水平
21
降低 。这些集合结果的含意是，通过维持AD患者中的健康O-GlcNAc水平，例如通过抑制O-GlcNAcase的作用，应该能阻断tau的高度磷酸化和tau高度磷酸化的所有相关效应，包括NFT的形成和下游效应。然而，因为β-己糖胺酶正常发挥作用是至关重要的，所以通过阻断O-GlcNAcase的作用来治疗AD的任何潜在的治疗性介入必须避免伴随的对己糖胺酶A和B的抑制。
37-39
了O-GlcNAc修饰 。与这种观察一致的是，已发现磷酸化水平的增加导致O-GlcNAc水平
40
的降低，相反，增加的O-GlcNAc水平与降低的磷酸化水平相关联 。O-GlcNAc与磷酸化之
41 4
间的这种互反关系被称为“阴-阳(Yin-Yang)假说”，且已通过酶OGT与用于从蛋白除
42
去磷酸酯基团的磷酸酶形成功能性复合物的发现而得到有力的生物化学支持 。与磷酸化类似的，O-GlcNAc是一种动态修饰，其在蛋白的寿命期间能够被多次除去和重建。这表明，
7,43
已将编码O-GlcNAcase的基因标定成与AD相关联的染色体位点 。在人AD脑中的高度
21
磷酸化的tau比健康人脑中所发现的具有明显更低的O-GlcNAc水平 。已表明患有AD的人脑的可溶性tau蛋白的O-GlcNAc水平明显低于健康脑部的可溶性tau蛋白的O-GlcNAc
21 21
水平 。而且还表明，患病脑部的PHF完全不存在任何O-GlcNAc修饰 。tau的这种低糖化的分子基础是未知的，虽然其可能起源于增加的激酶活性和/或参与加工O-GlcNAc的酶之一的功能障碍。支持后一观点的是，在小鼠的PC-12神经元细胞和脑组织切片中，均使用了选择性N-乙酰基葡糖胺酶抑制剂来增加tau O-GlcNAc水平，此时观察到磷酸化水平
21
降低 。这些集合结果的含意是，通过维持AD患者中的健康O-GlcNAc水平，例如通过抑制O-GlcNAcase的作用，应该能阻断tau的高度磷酸化和tau高度磷酸化的所有相关效应，包括NFT的形成和下游效应。然而，因为β-己糖胺酶正常发挥作用是至关重要的，所以通过阻断O-GlcNAcase的作用来治疗AD的任何潜在的治疗性介入必须避免伴随的对己糖胺酶A和B的抑制。
[0007] 神经元不储存葡萄糖，因此脑部依赖血液供给的葡萄糖来维持其基本的代谢功44
能。值得注意的是，已表明在脑内部，葡萄糖的摄取及代谢随着年龄增加而降低 。在AD患
45
者的脑内部，出现葡萄糖利用的明显降低且这被认为是神经变性的可能原因 。AD脑部中
46-48 49,50
的这种降低的葡萄糖供给的基础 被认为起源于降低的葡萄糖转运 、受损的胰岛素
51,52 53
信号传导 和降低的血流量 中的任意一种。
能。值得注意的是，已表明在脑内部，葡萄糖的摄取及代谢随着年龄增加而降低 。在AD患
45
者的脑内部，出现葡萄糖利用的明显降低且这被认为是神经变性的可能原因 。AD脑部中
46-48 49,50
的这种降低的葡萄糖供给的基础 被认为起源于降低的葡萄糖转运 、受损的胰岛素
51,52 53
信号传导 和降低的血流量 中的任意一种。
[0008] 按照这种受损的葡萄糖代谢，值得注意的是在进入细胞的所有葡萄糖中，2-5%被分流至己糖胺生物合成途径中，由此调节该途径的最终产物尿苷二磷酸-N-乙酰基葡糖胺54
(UDP-GlcNAc)的细胞浓度 。UDP-GlcNAc为核细胞质酶O-GlcNAc转移酶(OGT)的底物
2-5
，其用于在翻译后将GlcNAc添加至多种核细胞质蛋白的特异性丝氨酸和苏氨酸残基中。
58,59 55,56 42,57
OGT通过其三十四肽重复(TPR)域 识别许多其底物 及结合伴侣 。如上文所述，
6,7
O-GlcNAcase 除去这种翻译后修饰，以释放出蛋白，使得O-GlcNAc-修饰在蛋白寿命期间
8 10,38,39,60
发生多次动态循环 。已经在若干蛋白中在已知的磷酸化位点上发现了O-GlcNAc ，
61
包括tau和神经纤丝 。另外，OGT表现出不寻常的动力学行为，使其对细胞内UDP-GlcNAc
42
底物浓度极其敏感，并因此对葡萄糖供给极其敏感 。
(UDP-GlcNAc)的细胞浓度 。UDP-GlcNAc为核细胞质酶O-GlcNAc转移酶(OGT)的底物
2-5
，其用于在翻译后将GlcNAc添加至多种核细胞质蛋白的特异性丝氨酸和苏氨酸残基中。
58,59 55,56 42,57
OGT通过其三十四肽重复(TPR)域 识别许多其底物 及结合伴侣 。如上文所述，
6,7
O-GlcNAcase 除去这种翻译后修饰，以释放出蛋白，使得O-GlcNAc-修饰在蛋白寿命期间
8 10,38,39,60
发生多次动态循环 。已经在若干蛋白中在已知的磷酸化位点上发现了O-GlcNAc ，
61
包括tau和神经纤丝 。另外，OGT表现出不寻常的动力学行为，使其对细胞内UDP-GlcNAc
42
底物浓度极其敏感，并因此对葡萄糖供给极其敏感 。
[0009] 与己糖胺生物合成途径的已知性质、OGT的酶性质及O-GlcNAc与磷酸化之间的互45
反关系一致，已表明脑中降低的葡萄糖利用率造成tau高度磷酸化 。因此，逐渐受损的葡萄糖转运和代谢(无论其原因如何)造成O-GlcNAc降低和tau(及其它蛋白)的高度磷酸化。据此，在健康个体以及患有AD或相关神经退行性疾病的患者的脑内，O-GlcNAcase的抑制应补偿与年龄相关的葡萄糖代谢受损。
反关系一致，已表明脑中降低的葡萄糖利用率造成tau高度磷酸化 。因此，逐渐受损的葡萄糖转运和代谢(无论其原因如何)造成O-GlcNAc降低和tau(及其它蛋白)的高度磷酸化。据此，在健康个体以及患有AD或相关神经退行性疾病的患者的脑内，O-GlcNAcase的抑制应补偿与年龄相关的葡萄糖代谢受损。
[0010] 这些结果表明，调节tau O-GlcNAc水平的机制中的功能失常在NFT的形成和相关神经变性中可能非常重要。从近期研究中获得阻断tau高度磷酸化作为治疗上有用的介入62
的良好支持 ，这些研究表明当包含有人类tau的转基因小鼠用激酶抑制剂处理时，其未出
34 33
现典型的运动缺陷 ，而在另一情况中 ，显示不溶性tau的水平降低。这些研究提供了在这种疾病的鼠类模型中降低tau磷酸化水平与减轻AD样行为症状之间清楚的关联性。事实上，tau高度磷酸化的药理调节被广泛认定为治疗AD和其它神经退行性病症的有效治疗
63
策略 。
的良好支持 ，这些研究表明当包含有人类tau的转基因小鼠用激酶抑制剂处理时，其未出
34 33
现典型的运动缺陷 ，而在另一情况中 ，显示不溶性tau的水平降低。这些研究提供了在这种疾病的鼠类模型中降低tau磷酸化水平与减轻AD样行为症状之间清楚的关联性。事实上，tau高度磷酸化的药理调节被广泛认定为治疗AD和其它神经退行性病症的有效治疗
63
策略 。
[0011] 限制tau高度磷酸化的小分子O-GlcNAcase抑制剂已被考虑用于治疗AD和相关64
的tau病变 。具体地，O-GlcNAcase抑制剂thiamet-G已与在培养的PC-12细胞中病理
64
相关位点上的tau磷酸化的减少有牵连 。此外，向健康Sprague-Dawley大鼠经口施用
64
thiamet-G与在大鼠皮质和海马体中Thr231、Ser396和Ser422上减少的tau磷酸化 有牵连。
的tau病变 。具体地，O-GlcNAcase抑制剂thiamet-G已与在培养的PC-12细胞中病理
64
相关位点上的tau磷酸化的减少有牵连 。此外，向健康Sprague-Dawley大鼠经口施用
64
thiamet-G与在大鼠皮质和海马体中Thr231、Ser396和Ser422上减少的tau磷酸化 有牵连。
[0012] 还有大量的证据表明增加的O-GlcNAc蛋白修饰水平在心脏组织中提供保护抵抗应激(stress)的致病作用，所述应激包括由缺血、出血、高血容量性休克(hypervolemic shock)和钙反常所引起的应激。例如，已证明通过施用葡糖胺而激活己糖胺生物合成路径65-71 72-74 75 65,76
(HBP)在缺血/再灌注 、创伤性出血 、高血容量性休克 和钙反常 的动物模型
中发挥保护作用。此外，强有力的证据表明这些心脏保护作用是通过升高的蛋白O-GlcNAc
65,66,68,71,73,76-79
修饰水平介导的 。还有证据表明O-GlcNAc修饰在各种神经退行性疾病包括
帕金森氏病(Parkinson’s disease)和亨廷顿氏病(Huntington’s disease)中发挥作用
80
。
(HBP)在缺血/再灌注 、创伤性出血 、高血容量性休克 和钙反常 的动物模型
中发挥保护作用。此外，强有力的证据表明这些心脏保护作用是通过升高的蛋白O-GlcNAc
65,66,68,71,73,76-79
修饰水平介导的 。还有证据表明O-GlcNAc修饰在各种神经退行性疾病包括
帕金森氏病(Parkinson’s disease)和亨廷顿氏病(Huntington’s disease)中发挥作用
80
。
[0013] 人类有三种编码从糖轭合物(glycoconjugates)裂解末端β-N-乙酰基-葡糖胺残基的酶的基因。这些基因中的第一种编码O-GlcNAcase。O-GlcNAcase为糖苷水解酶的家族84中的一员，该家族包括来自从原核病原体到人的多样化的有机体的酶(关于糖苷水解酶的家族分类，参见Coutinho，P.M.&Henrissat，B.(1999)Carbohydrate-Active81,82
Enzymes，服务器网址：http://afmb.cnrs-mrs.fr/CAZY/) 。O-GlcNAcase用于水解除去
1,6,7,83,84
翻译后修饰的蛋白的丝氨酸和苏氨酸残基的O-GlcNAc 。与在许多细胞内蛋白上存
14,85 16,21,86
在O-GlcNAc一致，酶O-GlcNAcase似乎在一些疾病(包括II型糖尿病 、AD 和癌症
22,87 18,19
)的病因学中发挥作用。虽然有可能更早地分离出O-GlcNAcase ，但是在约20年后才
6
理解其从蛋白的丝氨酸和苏氨酸残基裂解O-GlcNAc的生化作用 。在更近期，O-GlcNAcase
7 20 20
已被克隆 、部分表征 并表明具有另外的作为组织蛋白乙酰基转移酶的活性 。然而，对于这种酶的催化机制所知甚少。
Enzymes，服务器网址：http://afmb.cnrs-mrs.fr/CAZY/) 。O-GlcNAcase用于水解除去
1,6,7,83,84
翻译后修饰的蛋白的丝氨酸和苏氨酸残基的O-GlcNAc 。与在许多细胞内蛋白上存
14,85 16,21,86
在O-GlcNAc一致，酶O-GlcNAcase似乎在一些疾病(包括II型糖尿病 、AD 和癌症
22,87 18,19
)的病因学中发挥作用。虽然有可能更早地分离出O-GlcNAcase ，但是在约20年后才
6
理解其从蛋白的丝氨酸和苏氨酸残基裂解O-GlcNAc的生化作用 。在更近期，O-GlcNAcase
7 20 20
已被克隆 、部分表征 并表明具有另外的作为组织蛋白乙酰基转移酶的活性 。然而，对于这种酶的催化机制所知甚少。
[0014] 其它两种基因(HEXA和HEXB)编码了催化从糖轭合物水解裂解末端β-N-乙酰基葡糖胺残基的酶。HEXA和HEXB的基因产物主要产生两种二聚体同功酶，分别为己糖胺酶A和己糖胺酶B。己糖胺酶A(αβ)(一种异源二聚体同功酶)由α-与β-亚单元组成。己糖胺酶B(ββ)(一种同源二聚物同功酶)由两个β-亚单元组成。α-和β-两种亚单元具有高度的序列一致性。将这两种酶均分类成糖苷水解酶的家族20的成员且通常位于溶酶体内。这些溶酶体β-己糖胺酶正常发挥功能对人类发育至关重要，分别起源于己糖胺酶A和己糖胺酶B的功能障碍的不幸的遗传病戴萨克斯氏(Tay-Sach’s)病和山德霍夫氏88
(Sandhoff)病 强调了该事实。这些酶缺乏引起糖脂质和糖轭合物在溶酶体中累积，导致
89
神经受损和变形。有机体水平上的神经节苷脂累积的有害作用仍未被揭露 。
(Sandhoff)病 强调了该事实。这些酶缺乏引起糖脂质和糖轭合物在溶酶体中累积，导致
89
神经受损和变形。有机体水平上的神经节苷脂累积的有害作用仍未被揭露 。
[0015] 由于这些β-N-乙酰基-氨基葡萄糖苷酶的生物学重要性，小分子的糖苷酶抑制90-93
剂 作为用于阐明这些酶在生物过程中及在开发潜在的治疗应用中的作用的工具已经受
94
到极大的关注 。使用小分子控制糖苷酶功能相对于基因敲除研究带来了若干优点，包括快速改变剂量或完全终止治疗的能力。
剂 作为用于阐明这些酶在生物过程中及在开发潜在的治疗应用中的作用的工具已经受
94
到极大的关注 。使用小分子控制糖苷酶功能相对于基因敲除研究带来了若干优点，包括快速改变剂量或完全终止治疗的能力。
[0016] 然而，开发阻断哺乳动物糖苷酶(包括O-GlcNAcase)功能的抑制剂的主要挑战为在高等真核细胞的组织中存在大量的功能相关酶。因此，使用非选择性抑制剂研究一种特定酶的细胞和有机体生理作用是复杂的，因为这些功能相关酶的伴随的抑制会引起复杂的表型。在β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶的情况中，用于阻断O-GlcNAcase功能的许多化合物是非特异性的且有效地用于抑制溶酶体β-己糖胺酶。
[0017] 已用于在细胞和组织内研究O-GlcNAc翻译后修饰的β-N-乙酰基氨基葡糖苷酶的一些表征更充分的抑制剂为链脲霉素(STZ)、2’-甲基-α-D-葡糖吡喃
并-[2,1-d]-Δ2’-噻唑啉(NAG-噻唑啉)和O-(2-乙酰氨基-2-脱氧-D-吡喃葡萄糖亚
14,95-98
基)氨基N-苯基氨基甲酸酯(PUGNAc) 。
并-[2,1-d]-Δ2’-噻唑啉(NAG-噻唑啉)和O-(2-乙酰氨基-2-脱氧-D-吡喃葡萄糖亚
14,95-98
基)氨基N-苯基氨基甲酸酯(PUGNAc) 。
[0018] 长期以来，STZ被用作致糖尿病化合物，因为其对β-胰岛细胞具有特别不利的作99 99,100 101
用 。STZ通过细胞DNA的烷基化作用 以及产生包括氧化氮在内的自由基物质 这两方面发挥其细胞毒性作用。所产生的DNA链断裂促进聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的激活
102 103,104
，其净效应为损耗细胞NAD+水平并最终导致细胞死亡 。而其他研究者提出，STZ毒
95,105
性为O-GlcNAcase的不可逆抑制的结果，O-GlcNAcase在β-胰岛细胞内被高度表达 。
106,107
然而，已有两个独立研究小组对这种假说提出质疑 。因为蛋白上的细胞O-GlcNAc水平
108
响应于许多形式的细胞应激而增加 ，所以似乎有可能STZ通过诱导细胞应激而非通过对O-GlcNAcase的任何特异性和直接作用而导致蛋白上O-GlcNAc-修饰水平增加。实际上，
109
Hanover和同事们已表明，STZ充当O-GlcNAcase的较差的和低选择性抑制剂 ，并且虽然
110
其他人已提出STZ用于不可逆地抑制O-GlcNAcase ，但是该作用模式尚未得到明确的证
111
明。更近期地，已表明STZ并非不可逆地抑制O-GlcNAcase 。
用 。STZ通过细胞DNA的烷基化作用 以及产生包括氧化氮在内的自由基物质 这两方面发挥其细胞毒性作用。所产生的DNA链断裂促进聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的激活
102 103,104
，其净效应为损耗细胞NAD+水平并最终导致细胞死亡 。而其他研究者提出，STZ毒
95,105
性为O-GlcNAcase的不可逆抑制的结果，O-GlcNAcase在β-胰岛细胞内被高度表达 。
106,107
然而，已有两个独立研究小组对这种假说提出质疑 。因为蛋白上的细胞O-GlcNAc水平
108
响应于许多形式的细胞应激而增加 ，所以似乎有可能STZ通过诱导细胞应激而非通过对O-GlcNAcase的任何特异性和直接作用而导致蛋白上O-GlcNAc-修饰水平增加。实际上，
109
Hanover和同事们已表明，STZ充当O-GlcNAcase的较差的和低选择性抑制剂 ，并且虽然
110
其他人已提出STZ用于不可逆地抑制O-GlcNAcase ，但是该作用模式尚未得到明确的证
111
明。更近期地，已表明STZ并非不可逆地抑制O-GlcNAcase 。
[0019] 已发现NAG-噻唑啉为家族20己糖胺酶的有效抑制剂93,1人人，并且在更近期发现为111
家族84O-GlcNAcase的有效抑制剂 。尽管有效，但是在复杂的生物环境中使用NAG-噻唑啉的缺点在于其缺乏选择性且因此扰乱多种细胞过程。
家族84O-GlcNAcase的有效抑制剂 。尽管有效，但是在复杂的生物环境中使用NAG-噻唑啉的缺点在于其缺乏选择性且因此扰乱多种细胞过程。
[0020] PUGNAc为遇到相同的缺乏选择性问题的另一化合物，但仍被用作人6,113 114
O-GlcNAcase 和家族20人β-己糖胺酶 的抑制剂。已发现，Vasella和同事们开
发的这种分子为来自直生刀豆(Canavalia ensiformis)、鲁氏毛霉菌(Mucor rouxii)的
91
β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶和来自牛肾的β-己糖胺酶的有效竞争性抑制剂 。已证明在创伤性出血的大鼠模型中施用PUGNAc降低了促炎细胞因子TNF-α和IL-6的循环水
115
平 。还已表明在基于细胞的淋巴细胞激活模型中施用PUGNAc降低了细胞因子IL-2的
116
生成量 。后续的研究已表明，能够在动物模型中使用PUGNAc，以减小在左冠状动脉阻
117
塞之后的心肌梗塞大小 。具特殊意义的事实是，通过在创伤性出血的大鼠模型中施用
115,118
PUGNAc(O-GlcNAcase的抑制剂)升高O-GlcNAc水平，改善了心脏功能 。此外，与未治疗的细胞相比，通过在使用新生大鼠心室肌细胞的缺血/再灌注损伤的细胞模型中用
119
PUGNAc进行治疗升高O-GlcNAc水平，改善了细胞活力且减少了坏死和凋亡 。
O-GlcNAcase 和家族20人β-己糖胺酶 的抑制剂。已发现，Vasella和同事们开
发的这种分子为来自直生刀豆(Canavalia ensiformis)、鲁氏毛霉菌(Mucor rouxii)的
91
β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶和来自牛肾的β-己糖胺酶的有效竞争性抑制剂 。已证明在创伤性出血的大鼠模型中施用PUGNAc降低了促炎细胞因子TNF-α和IL-6的循环水
115
平 。还已表明在基于细胞的淋巴细胞激活模型中施用PUGNAc降低了细胞因子IL-2的
116
生成量 。后续的研究已表明，能够在动物模型中使用PUGNAc，以减小在左冠状动脉阻
117
塞之后的心肌梗塞大小 。具特殊意义的事实是，通过在创伤性出血的大鼠模型中施用
115,118
PUGNAc(O-GlcNAcase的抑制剂)升高O-GlcNAc水平，改善了心脏功能 。此外，与未治疗的细胞相比，通过在使用新生大鼠心室肌细胞的缺血/再灌注损伤的细胞模型中用
119
PUGNAc进行治疗升高O-GlcNAc水平，改善了细胞活力且减少了坏死和凋亡 。
[0021] 最近，已表明选择性O-GlcNAcase抑制剂NButGT在基于细胞的缺血/再灌注和细120
胞应激(包括氧化应激)模型中表现出保护活性 。该研究表明，使用O-GlcNAcase抑制剂升高蛋白O-GlcNAc水平并因而在心脏组织中预防应激的致病作用。
胞应激(包括氧化应激)模型中表现出保护活性 。该研究表明，使用O-GlcNAcase抑制剂升高蛋白O-GlcNAc水平并因而在心脏组织中预防应激的致病作用。
[0022] 于2006年3月1日提交的、2006年9月8日以编号WO 2006/092049公布的国际专利申请PCT/CA2006/000300；于2007年8月31日提交的、2008年3月6日以编号
WO 2008/025170公布的国际专利申请PCT/CA2007/001554；于2009年7月31日提交的、
2010年2月4日以编号WO 2010/012106公布的国际专利申请PCT/CA2009/001087；于
2009年7月31日提交的、2010年2月4日以WO 2010/012107公布的国际专利申请PCT/CA2009/001088；于2009年9月16日提交的、2010年4月8日以WO 2010/037207公布的国际专利申请PCT/CA2009/001302；于2011年5月10日提交的、2011年11月17日以编号WO 2011/140640公布的PCT/CA2011/000548；于2011年11月8日提交的、2012年5月18日以WO 2012/061927公布的PCT/CA/2011/001241；和于2011年11月8日提交的、2012年
5月18日以WO 2012/064680公布的PCT/US2011/059668描述了O-GlcNAcase的选择性抑制剂。
WO 2008/025170公布的国际专利申请PCT/CA2007/001554；于2009年7月31日提交的、
2010年2月4日以编号WO 2010/012106公布的国际专利申请PCT/CA2009/001087；于
2009年7月31日提交的、2010年2月4日以WO 2010/012107公布的国际专利申请PCT/CA2009/001088；于2009年9月16日提交的、2010年4月8日以WO 2010/037207公布的国际专利申请PCT/CA2009/001302；于2011年5月10日提交的、2011年11月17日以编号WO 2011/140640公布的PCT/CA2011/000548；于2011年11月8日提交的、2012年5月18日以WO 2012/061927公布的PCT/CA/2011/001241；和于2011年11月8日提交的、2012年
5月18日以WO 2012/064680公布的PCT/US2011/059668描述了O-GlcNAcase的选择性抑制剂。
发明内容
[0023] 本发明的一部分提供了用于选择性地抑制糖苷酶的化合物、该化合物的前药、该化合物和该前药的用途、包括该化合物或该化合物的前药的药物组合物以及治疗与O-GlcNAcase的缺乏或过表达和/或O-GlcNAc的累积或缺乏有关的疾病和病症的方法。
[0024] 在一个方面，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐：
[0025]
[0026] 其中R1和R2可以独立地为H或F；R3可以为OR5且R4可以为H，或者R3可以为H4 5 5 6 5 7
且R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量
8
的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳
7 8
基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 及
9
它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个
9
至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲
6 5 7
基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。
且R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量
8
的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳
7 8
基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 及
9
它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个
9
至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲
6 5 7
基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。
[0027] 在可选的实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐：
[0028]
[0029] 其中R1可以为H且R2可以为F；或者R1可以为F且R2可以为H；R3可以为OR5且R4可以为H，或者R3可以为H且R4可以为OR5；每个R5可以独立地为H或C1-6酰基；R6可以为H、F或OR5；R7可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；R8可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R7和R8与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R9可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R9基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；其中当R6为OR5时，R7不为F。
[0030] 在可选的实施方案中，本发明提供了式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐：
[0031]1 2 1 2 5
[0032] 其中R可以为H且R 可以为F，或者R 可以为F且R 可以为H；每个R 可以独立6 5 7
地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除
8
了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代
7 8
基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成
9
乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中
9
的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述
6
环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；其中当R为
5 7
OR时，R 不为F。
地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除
8
了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代
7 8
基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成
9
乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中
9
的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述
6
环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；其中当R为
5 7
OR时，R 不为F。
[0033] 在可选的实施方案中，本发明提供了式(Ib)化合物或其药学上可接受的盐：
[0034]1 2 5 8
[0035] 其中，R和R 可以独立地为H或F；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量9
的氟或OH中的一种或多种取代；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大取
9
代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代。
的氟或OH中的一种或多种取代；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大取
9
代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代。
[0036] 在可选的实施方案中，本发明提供了式(Ic)化合物或其药学上可接受的盐：
[0037]
[0038] 其中每个R5可以独立地为H或C1-6酰基；R8可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取9
代；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一
9
种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代。
代；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一
9
种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代。
[0039] 在可选的实施方案中，本发明提供了式(Id)化合物或其药学上可接受的盐：
[0040]
[0041] 其中每个R5可以独立地为H或C1-6酰基；R6可以为H、F或OR5；R7可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的8
氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基
7 8
和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与
9
它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个
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至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲
6 5 7
基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。
氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基
7 8
和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与
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它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个
9
至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲
6 5 7
基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。
[0042] 在可选的实施方案中，本发明提供了式(Ie)化合物或其药学上可接受的盐：
[0043]
[0044] 其中每个R5可以独立地为H或C1-6酰基；R6可以为H、F或OR5；R7可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的8
氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基
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和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与
9
它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个
9
至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲
6 5 7
基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。
氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基
7 8
和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与
9
它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个
9
至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲
6 5 7
基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。
[0045] 在可选的实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐：
[0046]
[0047] 其中R1和 2可以独立地为H或F；R3可以为OR5且R4可以为H，或者R3可以为H且4 5 5 6 5 7
R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟和OH
8
取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至
9
最大取代基数量的氟和OH取代；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基
9 6
或C1-6烷氧基；以及两个R 基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环；其中当R
5 7
为OR时，R 不为F。
R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟和OH
8
取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至
9
最大取代基数量的氟和OH取代；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基
9 6
或C1-6烷氧基；以及两个R 基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环；其中当R
5 7
为OR时，R 不为F。
[0048] 在可选的实施方案中，化合物可以为前药；化合物可以选择性地抑制O-糖蛋白2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷酶(O-GlcNAcase)；化合物可以选择性地结合O-GlcNAcase(例如，哺乳动物O-GlcNAcase)；化合物可以选择性地抑制2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷(O-GlcNAc)的裂解；化合物可以基本上不抑制哺乳动物β-己糖胺酶。
[0049] 在可选的实施方案中，根据式(I)、式(Ia)、式(Ib)、式(Ic)、式(Id)或式(Ie)的化合物可以具有提高的渗透率。
[0050] 在可选的方面，本发明提供了一种药物组合物，其包括与药学上可接受的载体组合的根据本发明的化合物。
[0051] 在可选的方面，本发明提供了通过向受试者施用有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐而选择性地抑制O-GlcNAcase或抑制有需要的受试者的O-GlcNAcase或者增加O-GlcNAc的水平或者治疗有需要的受试者的神经退行性疾病、tau病变、癌症或应激的方法：
[0052]
[0053] 其中R1和R2可以独立地为H或F；R3可以为OR5且R4可以为H，或者R3可以为H且4 5 5 6 5 7
R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的
8
氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和
7 8
杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与它们
9
所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大
9
取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与同它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中
6 5 7
的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。疾病状况(condition)可以为阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、具有认知功能缺损的肌萎缩性侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis with cognitive impairment，ALSci)、嗜银颗粒痴呆(Argyrophilic grain dementia)、布鲁伊特病(Bluit disease)、皮质基底节变性(Corticobasal degeneration，CBD)、拳击员痴呆(Dementia pugilistica)、伴有钙化的弥散性神经原纤维缠结(Diffuse neurofibrillary tangles with calcification)、唐氏综合征、家族性英国型痴呆(Familial British dementia)、家族性丹麦型痴呆(Familial Danish dementia)、与染色体17相关联的伴有帕金森症的额颞叶痴呆(Frontotemporal dementia with parkinsonism linked to chromosome 17，FTDP-17)、葛兹曼-史特劳塞-史萘克病(Gerstmann-Straussler-Scheinker disease)、瓜德罗普帕金森症(Guadeloupean parkinsonism)、哈勒沃登-施帕茨病(Hallevorden-Spatz disease)(1型脑铁积聚性神经变性(neurodegeneration with brain iron accumulation type 1))、多系统萎缩(Multiple system atrophy)、强直性肌营养不良(Myotonic dystrophy)、尼曼-皮克病(Niemann-Pick disease，C型)、苍白球-脑桥-黑质变性(Pallido-ponto-nigral degeneration)、关岛震颤麻痹痴呆综合征(Parkinsonism-dementia complex of Guam)、皮克氏病(Pick′s disease，PiD)、脑炎后帕金森症(Post-encephalitic parkinsonism，PEP)、朊病毒病(Prion diseases)(包括克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob Disease；CJD)、变异型克雅氏病(Variant Creutzfeldt-Jakob Disease，vCJD)、家族性致命性失眠症(Fatal Familial Insomnia)和库鲁病(Kuru))、进行性超皮质性神经胶质增生(Progressive supercortical gliosis)、进行性核上性麻痹(Progressive supranuclear palsy，PSP)、理查德森氏综合征(Richardson’s syndrome)、亚急性硬化性全脑炎(Subacute sclerosing panencephalitis)、单纯缠结性痴呆症(Tangle-only dementia)、亨廷顿氏病(Huntington’s disease)、帕金森氏病、精神分裂症(Schizophrenia)、轻度认知障碍(Mild Cognitive Impairment，MCI)、神经病变(Neuropathy)(包括周围神经病变(peripheral neuropathy)、自主神经病变(autonomic neuropathy)、神经炎(neuritis)和糖尿病性神经病变(diabetic neuropathy))或青光眼(Glaucoma)。应激可以为心脏病症，例如缺血(ischemia)；出血(hemorrhage)；低血容量性休克(hypovolemic shock)；
心肌梗塞(myocardial infarction)；介入性心脏病学操作(interventional cardiology procedure)；心脏搭桥手术(cardiac bypass surgery)；纤维蛋白溶解疗法(fibrinolytic therapy)；血管成形术angioplasty()；或支架放置(stent placement)。
R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的
8
氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和
7 8
杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与它们
9
所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大
9
取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与同它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中
6 5 7
的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。疾病状况(condition)可以为阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、具有认知功能缺损的肌萎缩性侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis with cognitive impairment，ALSci)、嗜银颗粒痴呆(Argyrophilic grain dementia)、布鲁伊特病(Bluit disease)、皮质基底节变性(Corticobasal degeneration，CBD)、拳击员痴呆(Dementia pugilistica)、伴有钙化的弥散性神经原纤维缠结(Diffuse neurofibrillary tangles with calcification)、唐氏综合征、家族性英国型痴呆(Familial British dementia)、家族性丹麦型痴呆(Familial Danish dementia)、与染色体17相关联的伴有帕金森症的额颞叶痴呆(Frontotemporal dementia with parkinsonism linked to chromosome 17，FTDP-17)、葛兹曼-史特劳塞-史萘克病(Gerstmann-Straussler-Scheinker disease)、瓜德罗普帕金森症(Guadeloupean parkinsonism)、哈勒沃登-施帕茨病(Hallevorden-Spatz disease)(1型脑铁积聚性神经变性(neurodegeneration with brain iron accumulation type 1))、多系统萎缩(Multiple system atrophy)、强直性肌营养不良(Myotonic dystrophy)、尼曼-皮克病(Niemann-Pick disease，C型)、苍白球-脑桥-黑质变性(Pallido-ponto-nigral degeneration)、关岛震颤麻痹痴呆综合征(Parkinsonism-dementia complex of Guam)、皮克氏病(Pick′s disease，PiD)、脑炎后帕金森症(Post-encephalitic parkinsonism，PEP)、朊病毒病(Prion diseases)(包括克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob Disease；CJD)、变异型克雅氏病(Variant Creutzfeldt-Jakob Disease，vCJD)、家族性致命性失眠症(Fatal Familial Insomnia)和库鲁病(Kuru))、进行性超皮质性神经胶质增生(Progressive supercortical gliosis)、进行性核上性麻痹(Progressive supranuclear palsy，PSP)、理查德森氏综合征(Richardson’s syndrome)、亚急性硬化性全脑炎(Subacute sclerosing panencephalitis)、单纯缠结性痴呆症(Tangle-only dementia)、亨廷顿氏病(Huntington’s disease)、帕金森氏病、精神分裂症(Schizophrenia)、轻度认知障碍(Mild Cognitive Impairment，MCI)、神经病变(Neuropathy)(包括周围神经病变(peripheral neuropathy)、自主神经病变(autonomic neuropathy)、神经炎(neuritis)和糖尿病性神经病变(diabetic neuropathy))或青光眼(Glaucoma)。应激可以为心脏病症，例如缺血(ischemia)；出血(hemorrhage)；低血容量性休克(hypovolemic shock)；
心肌梗塞(myocardial infarction)；介入性心脏病学操作(interventional cardiology procedure)；心脏搭桥手术(cardiac bypass surgery)；纤维蛋白溶解疗法(fibrinolytic therapy)；血管成形术angioplasty()；或支架放置(stent placement)。
[0054] 在可选的方面，本发明提供了一种通过向受试者施用有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐而治疗有需要的受试者的O-GlcNAcase-介导的疾病状况的方法，所述O-GlcNAcase-介导的疾病状况不包括神经退行性疾病、tau病变、癌症或应激：
[0055]1 2 3 5 4 3
[0056] 其中R和R 可以独立地为H或F；R 可以为OR 且R 可以为H，或者R 可以为4 5 5 6 5 7
H且R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取
8
代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或
7 8 9
者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧
9
基可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代
6 5 7
基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。在一些实施方案中，疾病状况可以为炎性疾病或变态反应性疾病，如哮喘(asthma)、变态反应性鼻炎(allergic rhinitis)、超敏性肺疾病(hypersensitivity lung diseases)、超敏性肺炎(hypersensitivity pneumonitis)、嗜酸细胞性肺炎(eosinophilic pneumonias)、迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity)、动脉粥样硬化(atherosclerosis)、间质性肺病(interstitial lung disease，ILD)(例如特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis)、风湿性关节炎相关ILD(ILD associated with rheumatoid arthritis)、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus)、强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis)、系统性硬化病(systemic sclerosis)、斯耶格伦氏综合症(Sjogren’s syndrome)、多肌炎(polymyositis)或皮肌炎(dermatomyositis))；全身性过敏或超敏反应(systemic anaphylaxis or hypersensitivity responses)、药物变态反应(drug allergies)、昆虫叮咬变态反应(insect sting allergies)；自身免疫性疾病(autoimmune diseases)，如风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)、牛皮癣关节炎(psoriatic arthritis)、多发性硬化(multiple sclerosis)、格-巴二氏综合征(Guillain-Barré syndrome)、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus)、重症肌无力(myastenia gravis)、肾小球肾炎(glomerulonephritis)、自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis)、移植物排斥(graft rejection)包括同种异体移植物排斥(allograft rejection)或移植物抗宿主病(graft-versus-host disease)；炎性肠疾病(inflammatory bowel diseases)，如克罗恩氏病(Crohn’s disease)和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis)；脊椎关节病(spondyloarthropathies)；硬皮病(scleroderma)；银屑病(psoriasis)(包括T-细胞介导的银屑病)和炎性皮肤病(inflammatory dermatoses)，如皮炎(dermatitis)、湿疹(eczema)、特应性皮炎(atopic dermatitis)、变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis)、荨麻疹(urticaria)；脉管炎(vasculitis)(例如坏死性、皮肤性和超敏性脉管炎)；嗜酸细胞性肌炎(eosinphilic myotis)和嗜酸细胞性筋膜炎(eosiniphilic fasciitis)；移植物排斥，特别是但不限于实体器官移植物，如心、肺、肝、肾和胰腺移植物(例如肾和肺同种异体移植物)；癫痫症(epilepsy)；疼痛；纤维肌痛(fibromyalgia)；中风，例如中风后神经保护。
H且R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取
8
代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或
7 8 9
者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧
9
基可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代
6 5 7
基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。在一些实施方案中，疾病状况可以为炎性疾病或变态反应性疾病，如哮喘(asthma)、变态反应性鼻炎(allergic rhinitis)、超敏性肺疾病(hypersensitivity lung diseases)、超敏性肺炎(hypersensitivity pneumonitis)、嗜酸细胞性肺炎(eosinophilic pneumonias)、迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity)、动脉粥样硬化(atherosclerosis)、间质性肺病(interstitial lung disease，ILD)(例如特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis)、风湿性关节炎相关ILD(ILD associated with rheumatoid arthritis)、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus)、强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis)、系统性硬化病(systemic sclerosis)、斯耶格伦氏综合症(Sjogren’s syndrome)、多肌炎(polymyositis)或皮肌炎(dermatomyositis))；全身性过敏或超敏反应(systemic anaphylaxis or hypersensitivity responses)、药物变态反应(drug allergies)、昆虫叮咬变态反应(insect sting allergies)；自身免疫性疾病(autoimmune diseases)，如风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)、牛皮癣关节炎(psoriatic arthritis)、多发性硬化(multiple sclerosis)、格-巴二氏综合征(Guillain-Barré syndrome)、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus)、重症肌无力(myastenia gravis)、肾小球肾炎(glomerulonephritis)、自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis)、移植物排斥(graft rejection)包括同种异体移植物排斥(allograft rejection)或移植物抗宿主病(graft-versus-host disease)；炎性肠疾病(inflammatory bowel diseases)，如克罗恩氏病(Crohn’s disease)和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis)；脊椎关节病(spondyloarthropathies)；硬皮病(scleroderma)；银屑病(psoriasis)(包括T-细胞介导的银屑病)和炎性皮肤病(inflammatory dermatoses)，如皮炎(dermatitis)、湿疹(eczema)、特应性皮炎(atopic dermatitis)、变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis)、荨麻疹(urticaria)；脉管炎(vasculitis)(例如坏死性、皮肤性和超敏性脉管炎)；嗜酸细胞性肌炎(eosinphilic myotis)和嗜酸细胞性筋膜炎(eosiniphilic fasciitis)；移植物排斥，特别是但不限于实体器官移植物，如心、肺、肝、肾和胰腺移植物(例如肾和肺同种异体移植物)；癫痫症(epilepsy)；疼痛；纤维肌痛(fibromyalgia)；中风，例如中风后神经保护。
[0057] 在可选的实施方案中，R1和R2可以独立地为H或F；R3可以为OR5且R4可以为H，或3 4 5 5 6 5
者R可以为H且R 可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；
7
R可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至
8
最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取
7 8 9
代；或者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R 可以独立地选自：
H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧
9
基可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基
6 5 7
数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。施用可以增加受试者的O-GlcNAc水平。受试者可以为人。
者R可以为H且R 可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；
7
R可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至
8
最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取
7 8 9
代；或者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R 可以独立地选自：
H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧
9
基可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基
6 5 7
数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。施用可以增加受试者的O-GlcNAc水平。受试者可以为人。
[0058] 在可选的方面，本发明提供了有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备药物中的用途：
[0059]
[0060] 其中R1和R2可以独立地为H或F；R3可以为OR5且R4可以为H，或者R3可以为H且4 5 5 6 5 7
R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的
8
氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和
7 8
杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与它们
9
所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大
9
取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的
6 5 7
一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。药物可以用于选择性地抑制O-GlcNAcase，用于增加O-GlcNAc水平，用于治疗由O-GlcNAcase介导的疾病状况，用于治疗神经退行性疾病、tau病变、癌症或应激。
R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的
8
氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和
7 8
杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R 与它们
9
所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个至最大
9
取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的
6 5 7
一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F。药物可以用于选择性地抑制O-GlcNAcase，用于增加O-GlcNAc水平，用于治疗由O-GlcNAcase介导的疾病状况，用于治疗神经退行性疾病、tau病变、癌症或应激。
[0061] 在可选的方面，本发明提供了用于筛选O-GlcNAcase的选择性抑制剂的方法，该方法包括a)使第一样品与供试化合物接触；b)使第二样品与式(I)化合物接触
[0062]
[0063] 其中R1和R2可以独立地为H或F；R3可以为OR5且R4可以为H，或者R3可以为H4 5 5 6 5 7
且R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：
H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数
8
量的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、
7 8
芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R
9
与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一
9
个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或
6 5 7
甲基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F；c)测定在第一样品和第二样品中的O-GlcNAcase的抑制水平，其中如果供试化合物表现出与式(I)化合物相同的或更大的O-GlcNAcase抑制，则供试化合物是O-GlcNAcase的选择性抑制剂。
且R可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R 可以选自：
H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最大取代基数
8
量的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、
7 8
芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；或者R和R
9
与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一
9
个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或
6 5 7
甲基中的一种或多种取代；其中当R为OR 时，R 不为F；c)测定在第一样品和第二样品中的O-GlcNAcase的抑制水平，其中如果供试化合物表现出与式(I)化合物相同的或更大的O-GlcNAcase抑制，则供试化合物是O-GlcNAcase的选择性抑制剂。
[0064] 本发明的这种概述并不必然描述本发明的所有特征。
具体实施方式
[0065] 本发明的一部分提供了能够抑制O-糖蛋白2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷酶(O-GlcNAcase)的新型化合物。在一些实施方案中，O-GlcNAcase是哺乳动物O-GlcNAcase，如大鼠、小鼠或人O-GlcNAcase。
[0066] 在一些实施方案中，一个或多个根据本发明的化合物表现出提高的渗透率。渗透率可以采用各种标准实验技术进行评估，包括但不限于原位灌注、离体组织扩散、体外细胞单层(例如Caco-2细胞、MDCK细胞、LLC-PK1细胞)和人工细胞膜(例如PAMPA试验)；适合用于测量有效渗透率(Peff)或表观渗透率(Papp)的技术综述在例如Volpe的The AAPS Journal,2010,12(4),670-678中。在一些实施方案中，一个或多个根据本发明的化合物在一种或多种用于测定Peff或Papp的这些试验中进行测试时显示出提高的渗透率。在一些实施方案中，表现出提高的渗透率的化合物表现出更大的口服吸收性。在一些实施方案中，表现出提高的渗透率的化合物在体内施用时表现出更高的脑部穿透性。在一些实施方案中，表现出提高的渗透率的化合物在体内施用时达到更高的脑部浓度。在一些实施方案中，表现出提高的渗透率的化合物在体内施用时表现出更高的脑/血浆浓度比。在一些实施方案中，“提高的渗透率”表示与例如WO 2006/092049或WO 2008/025170中公开的适合的参考化合物相比，所测量的Peff或Papp增加了10%至100%之间的任意值或10%至100%之间的任意整数值，例如10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%，或者超过100%，或者增加了1倍、2倍或3倍或更多倍。适合的参考化合物可以是例如(3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(羟基甲基)-2-丙基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6,7-二醇或(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6,7-二醇或(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6,7-二醇。在一些实施方案中，“提高的渗透率”表示在下面描述的在LLC-PK1细胞中测定Papp的试验中可测量的Papp值(即大于0的值)。在一些实施方案中，“提高的渗透率”表示在下面描述的在LLC-PK1细胞中-6
测定Papp的试验中大于2x10 cm/s的Papp值。在可选的实施方案中，“提高的渗透率”表示-6 -6
在下面描述的在LLC-PK1细胞中测定Papp的试验中在2x10 cm/s至35x10 cm/s范围内的Papp值。
测定Papp的试验中大于2x10 cm/s的Papp值。在可选的实施方案中，“提高的渗透率”表示-6 -6
在下面描述的在LLC-PK1细胞中测定Papp的试验中在2x10 cm/s至35x10 cm/s范围内的Papp值。
[0067] 在一些实施方案中，根据本发明的化合物在抑制O-GlcNAcase方面表现出极好的选择性。在一些实施方案中，一个或多个根据本发明的化合物对O-GlcNAcase比对β-己糖胺酶更有选择性。在一些实施方案中，一个或多个化合物相对于哺乳动物β-己糖胺酶选择性地抑制哺乳动物O-GlcNAcase的活性。在一些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂基本上不抑制β-己糖胺酶。在一些实施方案中，β-己糖胺酶是哺乳动物β-己糖胺酶，如大鼠、小鼠或人β-己糖胺酶。“选择性地”抑制O-GlcNAcase的化合物是抑制O-GlcNAcase的活性或生物学功能但基本上不抑制β-己糖胺酶的活性或生物学功能的化合物。例如，在一些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂选择性地抑制从多肽裂解2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷(O-GlcNAc)。在一些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂选择性地结合至O-GlcNAcase。在一些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂抑制tau蛋白的高度磷酸化和/或抑制NFT形成。“抑制”(“inhibits”,“inhibition”或“inhibiting”)表示降低10%至90%之间的任意值，或30%至60%之间的任意整数值，或超过100%，或者降低1倍、2倍、5倍、10倍或更多倍。可以理解，抑制不要求完全抑制。在一些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂升高或提高细胞、组织、或器官(例如脑、肌肉或心(心脏)组织)以及动物中的O-GlcNAc水平，例如O-GlcNAc-修饰的多肽或蛋白水平。“升高”或“提高”表示增加10%至90%之间的任意值，或30%至60%之间的任意整数值，或超过100%，或者增加1倍、2倍、5倍、10倍、15倍、25倍、50倍、100倍或更多倍。在一些实施方案中，O-GlcNAcase的选择性抑制剂表现出如本文所述的选择性比，在10至100000范围内，或在100至100000范围内，或在1000至100000范围内，或至少10、20、50、100、
200、500、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、6000、7000、10,000、25,000、
50,000、75,000，或为所述范围内或左右的任意值。
200、500、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、6000、7000、10,000、25,000、
50,000、75,000，或为所述范围内或左右的任意值。
[0068] 一个或多个本发明化合物具体地通过与O-GlcNAcase酶的相互作用而在体内升高O-GlcNAc-修饰的多肽或蛋白上的O-GlcNAc水平，并且在治疗需要抑制O-GlcNAcase活性或对抑制O-GlcNAcase活性有反应的疾病状况方面是有效的。
[0069] 在一些实施方案中，一个或多个本发明化合物用作导致tau磷酸化和NFT形成减少的作用剂。在一些实施方案中，一个或多个化合物因而用于治疗阿尔茨海默病和相关的tau病变。在一些实施方案中，一个或多个化合物因此能够通过增加tau O-GlcNAc水平而降低tau磷酸化和减少NFT形成来治疗阿尔茨海默病和相关的tau病变。在一些实施方案中，一个或多个化合物导致O-GlcNAc-修饰的多肽或蛋白质上的O-GlcNAc修饰水平增加并因而用于治疗对这种O-GlcNAc修饰增加有反应的病症；这些病症包括但不限于神经退行性疾病、炎性疾病、心血管疾病和免疫调节疾病。在一些实施方案中，化合物还由于与它们抑制糖苷酶活性的能力有关的其它生物活性而有用。在可选的实施方案中，本发明的一个或多个化合物是在细胞和有机体水平上研究O-GlcNAc的生理作用中的有价值的工具。
[0070] 在可选的实施方案中，本发明提供了提高或升高动物受试者如兽或人受试者的蛋白O-GlcNAc修饰水平的方法。在可选的实施方案中，本发明提供了选择性地抑制动物受试者如兽和人受试者的O-GlcNAcase酶的方法。在可选的实施方案中，本发明提供了在动物受试者如兽和人受试者中抑制tau多肽的磷酸化或抑制NFT形成的方法。
[0071] 在具体实施方案中，本发明提供了通过式(I)所概括描述的化合物及其盐、前药和对映异构体形式：
[0072]
[0073] 如式(I)中所述：R1和R2可以独立地为H或F；R3可以为OR5且R4可以为H，或者3 4 5 5 6 5 7
R可以为H且R 可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最
8
大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；
7 8 9
或者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基
9
可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数
6 5 7
量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；其中当R是OR 时，R 不为F。
R可以为H且R 可以为OR ；每个R 可以独立地为H或C1-6酰基；R 可以为H、F或OR ；R可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢和F以外的每个基团任选被一个至最
8
大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；R可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代；
7 8 9
或者R和R 与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基；且每个R 可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基
9
可以任选被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代，或者两个R基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数
6 5 7
量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代；其中当R是OR 时，R 不为F。
[0074] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的R1可以为H或F。在一些实施方案中，R1可以为F。
[0075] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的R2可以为H或F。在一些实施方案中，R2可以为F。
[0076] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的R3可以为H、OH或OC(O)R10，其中R10可以3 3
为H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在一些实施方案中，R 可以为H或OH。在一些实施方案中，R可以为H。
为H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在一些实施方案中，R 可以为H或OH。在一些实施方案中，R可以为H。
[0077] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的R4可以为H、OH或OC(O)R10，其中R10可以4 4
为H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在一些实施方案中，R 可以为H或OH。在一些实施方案中，R可以为OH。
为H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在一些实施方案中，R 可以为H或OH。在一些实施方案中，R可以为OH。
[0078] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的R6可以为H、F、OH或OC(O)R10，其中R10可6
以为H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在一些实施方案中，R 可以为H或OH。
以为H、C1-6烷基或C3-6环烷基。在一些实施方案中，R 可以为H或OH。
[0079] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的R7可以选自：H、F、C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基，除了氢以外的每个基团任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取7
代。在一些实施方案中，R可以为H或CH3。
代。在一些实施方案中，R可以为H或CH3。
[0080] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的R8可以选自：C1-8烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、C3-6环烷基、芳基和杂芳基，任选被一个至最大取代基数量的氟或OH中的一种或多种取代。8
在一些实施方案中，R可以为CH3或CF3。
在一些实施方案中，R可以为CH3或CF3。
[0081] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的R7和R8与它们所连接的碳原子可以一起形成乙烯基。
[0082] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的每个R9可以独立地选自：H、C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基和C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C3-6烯基、C3-6炔基或C1-6烷氧基可以任选被一个9
至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代。在一些实施方案中，每个R可以独立地为H、CH3或CH2CH3。
至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代。在一些实施方案中，每个R可以独立地为H、CH3或CH2CH3。
[0083] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的两个R9基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环，所述环任选独立地被一个至最大取代基数量的氟、OH或甲基中的一种或多种取代。9
[0084] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的NR2可以为任选取代的 其中X可以为CR112、NR11、O、C=O、O(C=O)、(C=O)O、NR11(C=O)或(C=O)NR11；其中每个R11可以独立地为H或C1-4烷基；且n可以为0和3之间的整数。在一些实施方案中，NR92可以为任选取代的1-氮丙啶基、1-氮杂环丁基、1-吡咯烷基、1-哌啶基、吗啉-4-基、1-哌嗪基、氮杂环丁-2-酮-1-基、吡咯烷-2-酮-1-基或哌啶-2-酮-1-基。在一些实施方案中，NR92可以为 或
[0085] 在本发明的具体实施方案中，根据式(I)的化合物包括表1中所述的化合物。
[0086] 表1
[0087]
[0088]
[0089]
[0090]
[0091]
[0092]
[0093]
[0094]
[0095]
[0096]
[0097]
[0098] 如本领域技术人员所理解的，上面的式(I)也可以可选地如下所表示：
[0099]
[0100] 除非上下文另有明确规定，如本文所用的单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数指示物。例如，“化合物”是指一个或多个这样的化合物，而“该酶”包括特定的酶以及本领域技术人员已知的其他家族成员和其同等物。
[0101] 在整个本申请中，预期术语“化合物(“compound”或“compounds”)”是指本文所讨论的化合物且包括该化合物的前体和衍生物(包括酰基保护的衍生物)以及该化合物、前体和衍生物的药学上可接受的盐。本发明还包括该化合物的前药，包含该化合物和药学上可接受的载体的药物组合物，以及包括该化合物的前药和药学上可接受的载体的药物组合物。
[0102] 本发明的化合物可以含有一个或多个不对称中心并因此能够出现外消旋体和外消旋混合物、单个的对映异构体、非对映异构体混合物及单个的非对映异构体。根据分子上的各种取代基的性质可以存在其它不对称中心。每个这样的不对称中心将独立地产生两种光学异构体，并且意欲使混合物中所有可能的光学异构体和非对映异构体及纯的或部分纯化的化合物都包括在本发明的范围内。在本说明书中所述的但未指明具体立体化学的化合物的任何式、结构或名称意在包括上面所述的任何及全部存在的异构体及其任意比例的混合物。当指明立体化学时，则本发明意在包括纯形式或作为以任何比例与其它异构体形成的混合物的一部分的特定异构体。
[0103] “烷基”是指仅由碳和氢原子组成、不含不饱和性且包括例如1至10个碳原子(如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子)，并且通过单键与分子的其余部分连接的直链或支链烃链基团。在可选的实施方案中，烷基可以含有1至8个碳原子，如1、2、3、4、5、6、7或8个碳原子。在可选的实施方案中，烷基可以含有1至6个碳原子，如1、2、3、4、5或6个碳原子。
除非在说明书中另有明确声明，如本文所述烷基可以任选被一个或多个取代基取代。除非本文另有明确声明，可以理解可以在烷基的任何碳上发生取代。
除非在说明书中另有明确声明，如本文所述烷基可以任选被一个或多个取代基取代。除非本文另有明确声明，可以理解可以在烷基的任何碳上发生取代。
[0104] “烯基”是指仅由碳和氢原子组成、含有至少一个双键且包括例如2至10个碳原子(如2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子)，并且通过单键或双键与分子的其余部分连接的直链或支链烃链基团。在可选的实施方案中，烯基可以含有2至8个碳原子，如2、3、4、5、6、7或8个碳原子。在可选的实施方案中，烯基可以含有3至6个碳原子，如3、4、5或6个碳原子。除非在说明书中另有明确声明，烯基可以如本文所述任选被一个或多个取代基取代。
除非本文另有明确声明，可以理解可以在烯基的任何碳上发生取代。
除非本文另有明确声明，可以理解可以在烯基的任何碳上发生取代。
[0105] “炔基”是指仅由碳和氢原子组成、含有至少一个叁键且包括例如2至10个碳原子的直链或支链烃链基团。在可选的实施方案中，炔基可以含有2至8个碳原子，如2、3、4、5、6、7或8个碳原子。在可选的实施方案中，炔基可以含有3至6个碳原子，如3、4、5或6个碳原子。除非在说明书中另有明确声明，炔基可以如本文所述任选被一个或多个取代基取代。
[0106] “芳基”是指苯基，包括6个碳原子的芳环。除非本文另有明确声明，术语“芳基”表示包括如本文所述任选被一个或多个取代基取代的芳基。
[0107] “杂芳基”是指在环中含有一个或多个杂原子(例如N、O、S)的单个芳环基团，包括例如5-6元，如5元或6元。杂芳基的实例包括呋喃、噻吩、吡咯、噁唑、噻唑、咪唑、吡唑、异噁唑、异噻唑、1,2,3-噁二唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,3,4-噻二唑、四唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、1,3,5-三嗪、咪唑。除非本文另有明确声明，术语“杂芳基”表示包括如本文所述任选被一个或多个取代基取代的杂芳基。
[0108] “酰基”是指式-C(O)Ra的基团，其中Ra为如本文所述的C1-10烷基或C1-6烷基或C3-15环烷基。烷基或环烷基可以如本文所述被任选取代。
[0109] “烷氧基”是指式-ORb的基因，其中Rb为如本文所述的C1-10烷基或C1-6烷基。烷基可以如本文所述被任选取代。
[0110] “环烷基”是指仅由碳和氢原子组成、具有例如3至15个碳原子且为饱和的并通过单键与分子的其余部分连接的稳定一价单环、双环或三环烃基团。在可选的实施方案中，环烷基可以含有3至6个碳原子，如3、4、5或6个碳原子。除非在本文另有明确声明，术语“环烷基”表示包括如本文所述被任选取代的环烷基。
[0111] 在一些实施方案中，如式(I)中所述的两个R9基团可以与它们所连接的氮原子连接起来以形成环。在这些实施方案中，“环”是指可以为饱和的或单不饱和的3至6元稳定含氮单环基团。在可选的实施方案中，环可以包括C、H和N原子。在其它实施方案中，环可以包括杂原子，例如O和S。这些实施方案中的环的实例包括1-氮丙啶基、1-氮杂环丁基、1-吡咯烷基、2,5-二氢-1H-吡咯-1-基、1-哌啶基、1,2,3,6-四氢吡啶-1-基、吗啉-4-基、硫代吗啉-4-基、1-哌嗪基、氮杂环丁烷-2-酮-1-基、吡咯烷-2-酮-1-基、哌啶-2-酮-1-基、1,2-氧氮杂环丁烷-2-基、异噁唑烷-2-基和1,2-氧氮杂己环-2-基。这些实施方案中的环可以如本文所述被任选取代。
[0112] “任选的”或“任选地”表示随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，并且该描述包括其中所述事件或情况发生一或多次的实例以及其中所述事件或情况不发生的实例。例如，“任选取代的烷基”表示烷基可以被取代或可以不被取代，并且该描述包括取代的烷基和不具有取代的烷基，并且所述烷基可以被取代一次或多次。任选取代的烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基等，并包括环烷基，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等；任选取代的烯基的实例包括烯丙基、巴豆基、2-戊烯基、3-己烯基、2-环戊烯基、2-环己烯基、2-环戊烯基甲基、2-环己烯基甲基等。在一些实施方案中，任选取代的烷基和烯基包括C1-6烷基或烯基。
[0113] 治疗适应症
[0114] 本发明提供了治疗由O-GlcNAcase酶或由O-GlcNAc-修饰的蛋白水平直接或间接调节的疾病状况(例如通过抑制O-GlcNAcase酶或通过升高O-GlcNAc-修饰的蛋白水平而受益的疾病状况)的方法。这样的疾病状况包括但不限于青光眼、精神分裂症、tau病变，如阿尔茨海默病、神经退行性疾病、心血管疾病、与炎症相关的疾病、与免疫抑制相关的疾病和癌症。一个或多个本发明化合物也可用于治疗与O-GlcNAcase的缺乏或过表达或者与O-GlcNAc的累积或耗损有关的疾病或病症，或者任何对糖苷酶抑制疗法产生反应的疾病或病症。这样的疾病和病症包括但不限于青光眼、精神分裂症、神经退行性病症如阿尔茨海默病(AD)、或癌症。这样的疾病和病症还可以包括与酶OGT的累积或缺乏有关的疾病或病症。还包括保护或治疗靶细胞的方法，所述靶细胞表达被O-GlcNAc残基修饰的蛋白，所述修饰的失调导致疾病或病变。如本文所用的术语“治疗”包括治疗、预防和改善。
[0115] 在可选的实施方案中，本发明提供了提高或升高动物受试者如兽和人受试者的蛋白O-GlcNAc修饰水平的方法。O-GlcNAc水平的这种升高可以用于预防或治疗阿尔茨海默病；预防或治疗其它神经退行性疾病(如帕金森氏病、亨廷顿氏病)；提供神经保护作用；预防对心脏组织的损伤；以及治疗与炎症或免疫抑制相关的疾病。
[0116] 在可选的实施方案中，本发明提供了选择性地抑制动物受试者如兽和人受试者的O-GlcNAcase酶的方法。
[0117] 在可选的实施方案中，本发明提供了在动物受试者如兽和人受试者中抑制tau多肽的磷酸化或抑制NFT形成的方法。因此，本发明的化合物可以用于研究和治疗AD和其它tau病变。
[0118] 一般而言，本发明的方法通过向有需要的受试者施用根据本发明的化合物，或通过使细胞或样品与根据本发明的化合物(例如包含治疗有效量的根据式(I)的化合物的药物组合物)接触而实现的。更具体地，它们可用于治疗其中涉及O-GlcNAc蛋白修饰的调节的病症，或如本文所述的任何疾病状况。所关注的病症包括阿尔茨海默病(AD)和相关神经退行性tau病变，其中疾病发病机理涉及到微管相关蛋白tau的异常高度磷酸化。在一些实施方案中，化合物可以通过维持tau上升高的O-GlcNAc水平而用于阻断tau的高度磷酸化，由此提供治疗益处。
[0119] 治疗与毒性tau种类的累积相关的病理(例如阿尔茨海默病和其它tau病变)的121-123 33,34
化合物的有效性可以通过测试化合物在建立的疾病的细胞 和/或转基因动物模型
中阻断毒性tau种类形成的能力来证实。
化合物的有效性可以通过测试化合物在建立的疾病的细胞 和/或转基因动物模型
中阻断毒性tau种类形成的能力来证实。
[0120] 可以用根据本发明的化合物治疗的tau病变包括：阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、具有认知功能缺损的肌萎缩性侧索硬化症(ALSci)、嗜银颗粒痴呆、布鲁伊特病、皮质基底节变性(CBD)、拳击员痴呆、伴有钙化的弥散性神经原纤维缠结、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与染色体17相关联的伴有帕金森症的额颞叶痴呆(FTDP-17)、葛兹曼-史特劳塞-史萘克病、瓜德罗普帕金森症、哈勒沃登-施帕茨病(1型脑铁积聚性神经变性)、多系统萎缩、强直性肌营养不良、尼曼-皮克病(C型)、苍白球-脑桥-黑质变性、关岛震颤麻痹痴呆综合征、皮克氏病(PiD)、脑炎后帕金森症(PEP)、朊病毒病(包括克雅氏病(CJD)、变异型克雅氏病(vCJD)、家族性致命性失眠症和库鲁病)、进行性超皮质性神经胶质增生、进行性核上性麻痹(PSP)、理查德森氏综合征、亚急性硬化性全脑炎、单纯缠结性痴呆症和青光眼。
[0121] 一个或多个本发明的化合物还可用于治疗与组织损伤或应激相关的疾病状况、刺激细胞或促进细胞分化。因此，在一些实施方案中，本发明的化合物可以用于提供在多种涉及心脏组织中应激的疾病状况或医学程序中的治疗益处，所述应激包括但不限于缺血；出血；低血容量性休克；心肌梗塞；介入性心脏病学程序；心脏搭桥手术；纤维蛋白溶解疗法；血管成形术；和支架放置。
[0122] 化合物治疗与细胞应激相关的病理(包括缺血、出血、低血容积性休克、心肌梗塞108,119,120
和其它心血管病症)的有效性可以通过试验化合物在确立的细胞应激试验 中预防
71,117 73,115,118
细胞损伤以及在缺血-再灌注 和创伤-出血 的动物模型中预防组织损伤并促
进功能恢复的能力来证实。
和其它心血管病症)的有效性可以通过试验化合物在确立的细胞应激试验 中预防
71,117 73,115,118
细胞损伤以及在缺血-再灌注 和创伤-出血 的动物模型中预防组织损伤并促
进功能恢复的能力来证实。
[0123] 选择性地抑制O-GlcNAcase活性的化合物可以用于治疗与炎症相关的疾病，其包括但不限于炎性或变态反应性疾病，如哮喘，变态反应性鼻炎，超敏性肺疾病，超敏性肺炎，嗜酸细胞性肺炎，迟发型超敏反应，动脉粥样硬化，间质性肺病(ILD)(例如特发性肺纤维化，或风湿性关节炎相关ILD，系统性红斑狼疮，强直性脊柱炎，系统性硬化病，斯耶格伦氏综合症，多肌炎或皮肌炎)；全身性过敏或过敏反应，药物变态反应，昆虫叮咬变态反应；自身免疫性疾病，如风湿性关节炎，牛皮鲜关节炎，多发性硬化，格-巴二氏综合征，系统性红斑狼疮，重症肌无力，肾小球肾炎，自身免疫性甲状腺炎，移植物排斥，包括同种异体移植物排斥或移植物抗宿主疾病；炎性肠疾病，如克罗恩病和溃疡性结肠炎；脊椎关节病；硬皮病；银屑病(包括T-细胞介导的银屑病)和炎性皮肤病，如皮肤炎、湿疹、特应性皮炎、变应性接触性皮炎、荨麻疹；脉管炎(例如坏死性、皮肤性和超敏性脉管炎)；嗜酸细胞性肌炎，嗜酸细胞性筋膜炎；以及癌症。
[0124] 此外，影响蛋白O-GlcNAc修饰水平的化合物可用于治疗与免疫抑制有关的疾病，例如在进行化学疗法、放射疗法、提高伤口愈合和烧伤治疗、自身免疫疾病的疗法或其它药物疗法(例如皮质类固醇疗法)、或用于治疗自身免疫疾病和引起免疫抑制的移植/移植物排斥的常规药物组合的个体中；或者由于受体功能先天性缺乏或其它原因而导致的免疫抑制。
[0125] 一个或多个本发明的化合物可用于治疗神经退行性疾病，包括帕金森氏病和亨廷顿氏病。可以治疗的其它疾病状况为那些被O-GlcNAc翻译后蛋白修饰水平触发、影响或以任何其它方式相关的疾病状况。期望一个或多个本发明的化合物可以用于治疗这样的疾病状况，特别是但不限于以下已确立了与蛋白上O-GlcNAc水平的关联性的疾病状况：移植物排斥，特别是但不限于实体器官移植物，如心脏、肺、肝、肾和胰腺移植物(例如肾和肺同种异体移植物)；癌症，特别是但不限于乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、结肠癌、直肠癌、膀胱癌、肾癌、卵巢癌；以及非霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin′s lymphoma)和黑色素瘤；癫痫、疼痛、纤维肌痛或中风，例如用于中风后的神经保护。
[0126] 药物&兽用组合物、剂量和施用
[0127] 包括根据本发明的化合物或用于根据本发明的用途的药物组合物预期包含在本发明的范围内。在一些实施方案中，提供了包括有效量的式(I)化合物的药物组合物。
[0128] 式(I)化合物及其药学上可接受的盐、对映异构体、溶剂化物和衍生物是有用的，因为它们在动物(包括人)中具有药理活性。在一些实施方案中，一个或多个根据本发明的化合物当施用于受试者时在血浆中是稳定的。
[0129] 在一些实施方案中，可以提供与任何其它活性剂或药物组合物组合的根据本发明的化合物或用于根据本发明的用途的化合物，其中这样的组合疗法用于调节O-GlcNAcase活性，用于治疗例如神经退行性疾病、炎性疾病、心血管疾病或免疫调节疾病，或本文所述的任何疾病状况。在一些实施方案中，可以提供与一种或多种用于预防或治疗阿尔茨海默病的作用剂组合的根据本发明的化合物或用于根据本发明的用途的化合物。这样的作用剂的实例包括但不限于：
[0130] ·乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)，如Aricept (多奈哌齐(Donepezil))、Exelon (利 斯 的明(Rivastigmine))、Razadyne (Razadyne ER Reminyl
Nivalin 加兰他敏(Galantamine))、Cognex (他克林(Tacrine))、帝脉隆(Dimebon)、石杉碱甲(Huperzine A)、苯丝氨酸(Phenserine)、Debio-9902 SR(ZT-1 SR)、扎那哌齐(Zanapezil)(TAK0147)、更斯的明(ganstigmine)、NP7557等；
Nivalin 加兰他敏(Galantamine))、Cognex (他克林(Tacrine))、帝脉隆(Dimebon)、石杉碱甲(Huperzine A)、苯丝氨酸(Phenserine)、Debio-9902 SR(ZT-1 SR)、扎那哌齐(Zanapezil)(TAK0147)、更斯的明(ganstigmine)、NP7557等；
[0131] ·NMDA受体拮抗剂，如Namenda (Axura Akatinol Ebixa 美金刚(Memantine))、帝脉隆、SGS-742、奈拉美生(Neramexane)、Debio-9902SR(ZT-1 SR)等；
[0132] ·γ-分泌酶抑制剂和/或调节剂，如FlurizanTM(他氟比尔(Tarenflurbil)、MPC-7869、R-氟比 洛芬 (R-flurbiprofen))、LY450139、MK 0752、E2101、BMS-289948、BMS-299897、BMS-433796、LY-411575、GSI-136等；
[0133] ·β-分泌酶抑制剂，如ATG-Z1、CTS-21166、MK-8931等；
[0134] ·α-分泌酶激活剂，如NGX267等；
[0135] ·β-淀粉样蛋白聚集和或纤维化抑制剂，如AlzhemedTM(3APS，曲米沙特(Tramiprosate)，3-氨基-1-丙磺酸)、AL-108、AL-208、AZD-103、PBT2、(R)-(-)-2-丙基辛酸(Cereact)、ONO-2506PO、PPI-558等；
[0136] ·tau聚集抑制剂，如亚甲蓝等；
[0137] ·微管稳定剂，如AL-108、AL-208、紫杉醇(paclitaxel)等；
[0138] ·RAGE抑制剂，如TTP488等；
[0139] ·5-HT1a受体拮抗剂，如扎利罗登(Xaliproden)、来考佐坦(Lecozotan)等；
[0140] ·5-HT4受体拮抗剂，如PRX-03410等；
[0141] ·激酶 抑制剂，如SRN-003-556、amfurindamide、LiCl、AZD1080、NP031112、SAR-502250等；
[0142] ·人源化单克隆抗-Aβ抗体，如巴匹珠单抗Bapineuzumab(AAB-001)、LY2062430、RN1219、ACU-5A5等；
[0143] ·淀粉样蛋白疫苗，如AN-1792、ACC-001等；
[0144] ·神经保护剂，如施普善(Cerebrolysin)、AL-108、AL-208、石杉碱甲等；
[0145] ·L-型钙通道拮抗剂，如MEM-1003等；
[0146] ·烟碱受体拮抗剂，如AZD3480、GTS-21等；
[0147] ·烟碱受体激动剂，如MEM3454、奈非西坦(Nefiracetam)等；
[0148] ·过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)γ激动剂，如Avandia (罗格列酮(Rosglitazone))等；
[0149] ·磷酸二酯酶IV(PDE4)抑制剂，如MK-0952等；
[0150] ·激素替代疗法，如雌激素(倍美力(Premarin))等；
[0151] ·单胺氧化酶(MAO)抑制剂，如NS2330、雷沙吉兰(Rasagiline)(Azilect )、TVP-1012等；
[0152] ·AMPA受体调节剂，如安帕来斯(Ampalex)(CX 516)等；
[0153] ·神经生长因子或NGF增效剂，如CERE-110(AAV-NGF)、T-588、T-817MA等；
[0154] ·阻止垂体释放促黄体激素(LH)的作用剂，如亮丙瑞林(leuoprolide)(VP-4896)等；
[0155] ·GABA受体调节剂，如AC-3933、NGD 97-1、CP-457920等；
[0156] ·苯二氮卓受体反向激动剂，如SB-737552(S-8510)、AC-3933等；
[0157] ·去甲肾上腺素释放剂，如T-588、T-817MA等。
[0158] 应当理解，根据本发明的化合物或用于根据本发明的用途的化合物与阿尔茨海默病作用剂的组合不限于本文所述的实例，但包括与用于治疗阿尔茨海默病的任何作用剂的组合。根据本发明的化合物或用于根据本发明的用途的化合物与其它阿尔茨海默病作用剂的组合可以单独或联合施用。一种作用剂的施用可以在施用其它(一种或多种)作用剂之前、同时或之后进行。
[0159] 在可选的实施方案中，化合物可以作为“前药”或受保护的形式供应，其在向受试者施用之后释放化合物。例如，化合物可以携带保护基团，该保护基团通过在体液中(例如在血流中)水解而离开，因此释放活性化合物，或者在体液中被氧化或还原以释放化合物。因此，“前药”是指可以在生理条件下或通过溶剂分解而转化成本发明的生物活性化合物的化合物。因此，术语“前药”是指药学上可接受的本发明化合物的代谢前体。前药可以在向有需要的受试者施用时是无活性的但在体内转化成本发明的活性化合物。通常，前药在体内通过例如在血液中水解而快速转化以产生本发明的母体化合物。前药化合物常在受试者中提供溶解度、组织相容性或延迟释放的优点。
[0160] 术语“前药”还表示包括任何共价结合的载体，在向受试者施用这样的前药时，所述共价结合的载体在体内释放本发明的活性化合物。本发明化合物的前药可以通过修饰在本发明化合物中存在的官能团而进行制备，所述修饰的方式为使得修饰以常规操作或在体内裂解成本发明的母体化合物。前药包括其中羟基、氨基或巯基与任何基团结合的本发明化合物，当向哺乳动物受试者施用本发明化合物的前药时，所述基团发生裂解，分别形成游离羟基、游离氨基或游离巯基。前药的实例包括但不限于在本发明的一个或多个化合物中的醇官能团的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物和胺官能团的乙酰胺、甲酰胺和苯甲酰胺衍生物，等等。
[0161] 前药的讨论可见于“Smith and Williams’Introduction to the Principles of Drug Design,”H.J.Smith,Wright,Second Edition,London(1988)；Bundgard,H.,Design of Prodrugs(1985),pp.7-9,21-24(Elsevier,Amsterdam)；The Practice of Medicinal Chemistry,Camille G.Wermuth et al.,Ch31,(Academic Press,1996)；A Textbook of Drug Design and Development,P.Krogsgaard-Larson and H.Bundgaard,eds,Ch 5,pgs113 191(Harwood Academic Publishers,1991)；Higuchi,T.,et al., ″ Pro-drugs as Novel Delivery Systems,″A.C.S.Symposium Series,Vol.14；或者见于Bioreversible Carriers in Drug Design,ed.Edward B.Roche,American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987，所有这些通过引用以其全文并入本文。
[0162] 一个或多个本发明化合物的适合的前药形式包括其中如式(I)所述的一个或多5
个R为(CO)R，其中R为任选取代的烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基的实施方案。在这些情
5
况中，酯基团可以在体内(例如体液中)水解，释放其中每个R为H的活性化合物。优选
5
的本发明前药实施方案包括其中一个或多个R为C(O)CH3的式(I)化合物。
个R为(CO)R，其中R为任选取代的烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基的实施方案。在这些情
5
况中，酯基团可以在体内(例如体液中)水解，释放其中每个R为H的活性化合物。优选
5
的本发明前药实施方案包括其中一个或多个R为C(O)CH3的式(I)化合物。
[0163] 根据本发明的化合物或用于根据本发明的用途的化合物能够在脂质体、佐剂或任何药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的存在下以适合于向受试者(如哺乳动物，例如人、牛、绵羊等)施用的形式单独提供或与其它化合物组合提供。若需要，使用根据本发明的化合物的治疗可以与更多传统的和现有的用于本文所述的治疗适应症的治疗组合。可以长期或间歇地提供根据本发明的化合物。“长期”施用是指以与短时间模式相反的连续模式施用化合物，从而在较长的时间周期内维持最初的治疗效果(活性)。“间歇”给药不是不中断的连续进行的治疗，而是本质上循环的治疗。本文所用的术语“施用(administration)”、“可施用(administrable)”或“施用(administering)”应当理解为表示向需要治疗的受试者提供本发明的化合物。
[0164] “药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂”包括但不限于已被例如美国食品和药物管理局或其它政府机构批准为可接受用于人或家畜的任何佐剂、载体、赋形剂、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、增味剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂、等渗剂、溶剂或乳化剂。
[0165] 可以以药学上可接受的盐形式施用本发明化合物。在这样的情况中，根据本发明的药物组合物可以包含这样的化合物的盐，优选为本领域已知的生理学上可接受的盐。在一些实施方案中，本文所用的术语“药学上可接受的盐”表示包含以其盐形式使用的式I化合物的活性成分，尤其是当与活性成分的游离形式或其它先前所公开的盐形式相比，所述盐形式赋予活性成分改善的药代动力学性质。
[0166] “药学上可接受的盐”包括酸和碱两种加成盐。“药学上可接受的酸加成盐”是指那些保留游离碱的生物学有效性和性质的盐，其不是生物学或在其它方面不希望的，并且其是与无机酸和有机酸形成的，无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，有机酸如乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。
[0167] “药学上可接受的碱加成盐”是指那些保留游离酸的生物学有效性和性质的盐，其不是生物学或在其它方面不希望的。这些盐是由向游离酸添加无机碱或有机碱而制备的。衍生自无机碱的盐包括但不限于钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等。优选的无机盐为铵盐、钠盐、钾盐、钙盐和镁盐。衍生自有机碱的盐包括但不限于以下物质的盐：伯胺、仲胺、叔胺、取代胺(包括自然存在的取代胺)、环胺和碱性离子交换树脂，如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、多胺树脂等。特别优选的有机碱为异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己胺、胆碱和咖啡因。
[0168] 因此，术语“药学上可接受的盐”包括所有可接受的盐，包括但不限于乙酸盐、乳糖酸盐、苯磺酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、苹果酸盐、碳酸氢盐、马来酸盐、硫酸氢盐、扁桃酸盐、酒石酸氢盐、甲磺酸盐、硼酸盐、甲基溴化物、溴化物、甲基亚硝酸盐、依地酸钙、甲基硫酸盐、樟脑磺酸盐、粘酸盐、碳酸盐、萘磺酸盐、氯化物、硝酸盐、克拉维酸盐、N-甲基葡糖胺、柠檬酸盐、铵盐、二氢氯化物、油酸盐、依地酸盐、草酸盐、乙二磺酸盐、双羟萘酸盐(双羟萘酸盐(embonate))、依托酸盐、棕榈酸盐、乙磺酸盐、泛酸盐、富马酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐、葡庚糖酸盐、聚半乳糖醛酸盐、葡糖酸盐、水杨酸盐、谷氨酸盐(glutame)、硬脂酸盐、乙醇酰基对氨基苯基胂酸盐(glycolleylarsanilate)、硫酸盐、己基间苯二酸盐(hexylresorcinate)、次醋酸盐、海巴明(hydradamine)、琥珀酸盐、氢溴酸盐、鞣酸盐、盐酸盐、酒石酸盐、羟基萘甲酸盐、8-氯茶碱盐(teoclate)、碘化物、甲苯磺酸盐、异硫代硫酸盐(isothionate)、三乙基碘化物、乳酸盐、扑酸盐(panoate)、戊酸盐等。
[0169] 本发明化合物的药学上可接受的盐能够用作用于改良溶解度或水解特性的剂型，或用于缓释或前药配方中。本发明化合物的药学上可接受的盐可以包括那些由阳离子如钠、钾、铝、钙、锂、镁、锌以及由碱如氨、乙二胺、N-甲基-谷氨酰胺、赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸、胆碱、N,N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、二乙醇胺、普鲁卡因、N-苄基苯乙胺、二乙胺、哌嗪、三(羟基甲基)氨基甲烷和四甲基氢氧化铵形成的盐。
[0170] 药物制剂通常包括一或多种对于制剂的给药方式可接受的载体，所述给药方式为注射、吸入、局部施用、灌洗或适用于所选治疗的其它方式。适合的载体为本领域已知的用于这样的给药方式的载体。
[0171] 适合的药物组合物可以根据本领域已知的方法以及本领域从业技术人员决定的给药方式及剂量来配制。对于肠胃外施用，可以将化合物溶解于无菌水或盐水中或用于施用非水溶性化合物的药学上可接受的溶媒中如用于维生素K的那些溶媒中。对于肠内施用，可以以片剂、胶囊或溶解于液体形式中施用化合物。片剂或胶囊可以为肠包衣的或者是用于缓释的制剂。许多适合的制剂是已知的，包括封装待释放的化合物的聚合物或蛋白微粒、软膏、凝胶、水凝胶或能够外用或局部用于施用化合物的溶液。缓释贴片或植入物可以用于提供在相对更长时间内的释放。本领域从业技术人员已知的许多th技术描述于Alfonso Gennaro的Remington:the Science&Practice of Pharmacy,20 ed.,Williams&Wilkins,(2000)中。用于胃肠外施用的制剂可以含有例如赋形剂、聚亚烷基二醇如聚乙二醇、植物来源的油或氢化萘。可以使用生物相容的、生物可降解的丙交酯聚合物、丙交酯/乙交酯共聚物或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物来控制化合物的释放。用于调节性化合物的其它潜在可用的肠胃外递送体系包括乙烯-乙酸乙烯酯共聚物颗粒、渗透泵、可植入输注体系和脂质体。用于吸入的制剂可以含有赋形剂例如乳糖，或者可以为含有例如聚氧乙烯-9-月桂基醚、甘胆酸盐和脱氧胆酸盐的水溶液，或者可以为以滴鼻剂形式或者作为凝胶施用的油性溶液。
[0172] 根据本发明的化合物或药物组合物可以经口或非经口例如肌肉内、腹膜内、静脉内、脑池内注射或输注、皮下注射、经皮或经黏膜途径施用。在一些实施方案中，根据本发明的或用于本发明的用途的化合物或药物组合物可以借助于医疗装置或器械如植入物、移植物、假体、支架等施用。植入物可以被设计成旨在含有和释放这样的化合物或组合物。实例可以为由适于使化合物在一段时间内释放的聚合物材料制成的植入物。可以单独或作为与药学上可接受的载体的混合物例如作为固体制剂如片剂、胶囊、颗粒剂、粉剂等；液体制剂如糖浆、注射液等；注射液、滴剂、栓剂、阴道栓施用化合物。在一些实施方案中，根据本发明的或用于本发明的化合物或药物组合物可以通过吸入喷雾、鼻、阴道、直肠、舌下或局部途径施用，并且可以单独或一起配制成含有适于各种施用途径的常规无毒性的药学上可接受的载体、佐剂和溶媒的适合的单位剂量制剂。
[0173] 本发明化合物可以用于治疗动物，包括小鼠、大鼠、马、牛、绵羊、狗、猫和猴子。然而，本发明化合物也能够用于其它有机体，如鸟类物种(例如鸡)。一个或多个本发明化合物也可以有效地用于人类。术语“受试者”或可选地在本文被称为“患者”预期是指已经成为治疗、观察或实验对象的动物，优选为哺乳动物，最优选为人。然而，一个或多个本发明化合物、本发明方法和本发明药物组合物可以用于治疗动物。因此，本文所用的“受试者”可以是人、非人灵长类、大鼠、小鼠、牛、马、猪、绵羊、山羊、狗、猫等。受试者可以是疑似患有需要调节O-GlcNAcase活性的疾病状况或处于患有该疾病状况的风险中。
[0174] 本发明化合物的“有效量”包括治疗有效量或预防有效量。“治疗有效量”是指在必要的剂量下经必要的时间周期而有效实现所需治疗结果如抑制O-GlcNAcase、升高O-GlcNAc水平、抑制tau磷酸化或本文所述的任何病症的量。化合物的治疗有效量可以随着诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重以及化合物在个体中引发所需反应的能力的因素而改变。可以调整剂量方案以提供最佳治疗响应。治疗有效量也是其中化合物的任何毒性或有害作用不超过治疗有益效果的量。“预防有效量”是指在必要的剂量下经过必要的时间周期而有效实现所需预防结果如抑制O-GlcNAcase、升高O-GlcNAc水平、抑制tau磷酸化或本文所述的任何疾病状况的量。通常，预防剂量在疾病的早期阶段之前或在疾病的早期阶段用于受试者，使得预防有效量可以低于治疗有效量。化合物的治疗或预防有效量的适当范围可以为0.1nM至0.1M、0.1nM至0.05M、0.05nM至15μM或0.01nM至10μM的任意整数。
[0175] 在可选的实施方案中，在治疗或预防需要调节O-GlcNAcase活性的疾病状况中，适当的剂量水平一般为约0.01mg至500mg/kg受试者体重/天，并且能够以单剂量或多剂量施用。在一些实施方案中，剂量水平为每天约0.1mg/kg至约250mg/kg。应理解，对于任何特定患者的具体剂量水平和给药频率可以改变且会取决于许多因素，包括所用的具体化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用时间、年龄、体重、总体健康状况、性别、饮食、施用方式和时间、排泄速率、联合用药、特定疾病状况的严重程度以及患者正在进行的治疗。
[0176] 应注意的是，剂量值可以随着待缓解的疾病状况的严重程度而改变。对于任何特定受试者，具体的剂量方案可以根据个体需要及管理或监督施用组合物的人员的专业判断而随时间调整。本文所述的剂量范围仅为示例性的，并且不限制可以由医学从业人员选择的剂量范围。活性化合物在组合物中的量可以根据诸如受试者的疾病状态、年龄、性别和体重的因素而改变。可以调整剂量方案以提供最佳的治疗响应。例如，可以施用单次推注，可以随时间施用几次分份剂量，或者可以根据治疗情况的紧急状态所示按比例减少或增加剂量。有利的是可以配制剂量单位形式的肠胃外组合物以便于给药和剂量均匀。一般地，应在不引起大量毒性的情况下使用本发明化合物，并且如本文所述，一个或多个化合物表现出适于治疗用途的安全特性。能够使用标准技术例如通过在细胞培养物或实验动物中测试并测定治疗指数即LD50(50%群体的致死剂量)与LD100(100%群体的致死剂量)之比来测定本发明化合物的毒性。然而，在一些情况下，如在严重的疾病状况中，可能需要施用大量过量的组合物。
[0177] 在通式(I)的化合物中，原子可以表现出其天然同位素丰度，或者一个或多个原子可以通过人工方式富集具有相同原子数但与自然界中最主要发现的原子质量或质量数不同的原子质量或质量数的特定同位素。本发明意在包括通式(I)化合物的所有适合的同1 2 3
位素变体。例如，氢(H)的不同同位素形式包括氕(H)、氘(H)和氚(H)。氕为自然界中发现的最主要的氢同位素。富集氘可以提供某些治疗优势，如增加体内半衰期或减少剂量要求，或者可以提供用作表征生物学样品的标准品的化合物。通式(I)内的同位素富集化合物可以在无需过度试验的情况下通过本领域技术人员公知的常规技术或通过与本文方案和实施例中所述的那些方法类似的方法使用适当的同位素富集的试剂和/或中间体来制备。
位素变体。例如，氢(H)的不同同位素形式包括氕(H)、氘(H)和氚(H)。氕为自然界中发现的最主要的氢同位素。富集氘可以提供某些治疗优势，如增加体内半衰期或减少剂量要求，或者可以提供用作表征生物学样品的标准品的化合物。通式(I)内的同位素富集化合物可以在无需过度试验的情况下通过本领域技术人员公知的常规技术或通过与本文方案和实施例中所述的那些方法类似的方法使用适当的同位素富集的试剂和/或中间体来制备。
[0178] 其它用途和试验
[0179] 式(I)化合物可以用于调节糖苷酶(优选O-GlcNAcase酶)的活性的化合物的筛选试验。供试化合物抑制O-GlcNAc从模型底物的O-GlcNAcase-依赖性裂解的能力可以使用如本文所述的或本领域普通技术人员已知的任何试验来测量。例如，可以使用本领域已知的荧光或基于UV的试验。“供试化合物”为任何天然存在的或人工衍生的化合物。供试化合物可以包括但不限于肽、多肽、合成有机分子、天然存在的有机分子、和核酸分子。供试化合物可以与已知化合物(例如式(I)化合物)“竞争”，例如通过干扰对O-GlcNAc的O-GlcNAcase-依赖性裂解的抑制或通过干扰式(I)化合物所诱导的任何生物反应。
[0180] 一般而言，当与式(I)化合物或其它参考化合物比较时，供试化合物通常能够表现出10％至200％之间或超过500％调节的任意值。例如，供试化合物可以表现出至少10％至200％调节的任意正或负整数，或至少30％至150％调节的任意正或负整数，或至少60％至100％调节的任意正或负整数，或超过100％调节的任意正或负整数。为负调节剂的化合物相对于已知化合物一般会降低调节，而为正调节剂的化合物相对于已知化合物一般会增加调节。
[0181] 一般而言，根据本领域已知的方法从天然产物或合成(或半合成)提取物或化学物库中鉴定供试化合物。药物发现及开发领域的技术人员将理解，供试萃取物或化合物的确切来源对于本发明方法并非至关重要。因此，实际上使用本文所述的示例性方法能够筛选任何数量的化学提取物或化合物。这样的提取物或化合物的实例包括但不限于基于植物、真菌、原核生物或动物的提取物、发酵液和合成化合物，以及现有化合物的修饰物。许多方法也可用于产生任何数量的化合物的随机或直接合成(例如半合成或全合成)，该化合物包括但不限于基于糖、脂质、肽和核酸的化合物。合成化合物库是可商购获得的。可选地，细菌、真菌、植物和动物提取物形式的天然化合物库可以从许多来源商购获得，包括Biotics(Sussex，UK)、Xenova(Slough，UK)、Harbor Branch Oceanographic Institute(Ft.Pierce，FL，USA)和PharmaMar，MA，USA。另外，若需要，根据本领域已知的方法例如通过标准提取和分馏方法生产天然或合成产物库。而且，若需要，可以使用标准的化学、物理或生化方法容易地对任何库或化合物进行修饰。
[0182] 当发现粗提取物调节对O-GlcNAc的O-GlcNAcase-依赖性裂解的抑制或式(I)化合物所诱导的任何生物响应时，则有必要进一步分馏阳性先导提取物以分离对所观察到的效应负责的化学成分。因此，提取、分馏和纯化方法的目标为在具有O-GlcNAcase-抑制活性的粗提取物内仔细表征和鉴定化学个体。本文所述用于检测化合物混合物的活性的相同试验能够用于纯化活性组分并测试其衍生物。分馏和纯化这些由不同成分形成的提取物的方法是本领域已知的。若需要，根据本领域已知的方法对已表明可用作治疗剂的化合物进行化学修饰。随后可以使用如本文所述的或本领域已知的适合的动物模型对鉴定为具有治疗、预防、诊断或其它价值的化合物进行分析。
[0183] 在一些实施方案中，一个或多个化合物可以用于开发动物模型，以用于研究与O-GlcNAcase的缺乏、O-GlcNAcase的过表达、O-GlcNAc的累积、O-GlcNAc的耗损有关的疾病或病症，以及用于研究与O-GlcNAcase的缺乏或过表达或O-GlcNAc的累积或耗损有关的疾病或病症的治疗。这些疾病和病症包括神经退行性疾病，包括阿尔茨海默病，和癌症。
[0184] 本文描述了本发明的多种可选的实施方案和实施例。这些实施方案和实施例是示例性的，且不应解释为限制本发明的范围。
[0185] 实施例
[0186] 下列实施例预期用于举例说明本发明的实施方案，且预期不以限制性方式进行解释。
[0187] 缩略语
[0188]
[0189] 实施例1&2
[0190] (3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0191]
[0192] 向(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-( 甲 基 氨 基 )-5-( 羟 基 甲 基 )-5,6,7,7a- 四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6,7-二醇(8.50g，37.0mmol)的DMF(60mL)悬浮液中添加DIPEA(2.0mL)、Boc2O(23.0g，105mmol)和MeOH(2.0mL)。将混合物在室温下搅拌3h，然后添加MeOH(50mL)。将反应混合物在～35℃下减压浓缩。将残留物在硅胶上通过快速柱层析法(MeOH/DCM，1:8)纯化，接着从EtOAc/己烷重结晶，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-二羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(11.8g，96%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.14(d,J=6.9Hz,1H),4.20(d,J=6.4Hz,1H),4.11(d,J=5.6Hz,1H),3.85-3.70(m,2H),3.63-3.55(m,1H),3.31(s,3H),1.53(s,9H)。
[0193] 在 0 ℃ 下 向 上 述 物 质 (11.7g，35.1mmol)、DIPEA(10.3g，80.0mmol) 和DMAP(0.040g，0.33mmol)的DCM(180mL)溶液中缓慢添加BzCl(10.1g，72.0mmol)。添加之后将混合物在室温下搅拌5h。添加饱和NH4Cl水溶液(100mL)，并收集有机层。进一步将水层用DCM(3×50mL)萃取。将合并的萃取液经无水Na2SO4干燥。过滤后，将溶剂减压蒸发，在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:4至1:1)对残留物进行分离，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-7-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯，为白色固体(4.20g，
22%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01-7.99(m,4H),7.60-7.55(m,1H),7.54-7.50(m,1H),7.
45-7.41(m,2H),7.37-7.35(m,2H),6.21(d,J=7.1Hz,1H),5.23-5.20(m,1H),4.55-4.51(m,
2H),4.48-4.42(m,2H),4.15-4.07(m,2H),3.36(s,3H),1.56(s,9H)。
22%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01-7.99(m,4H),7.60-7.55(m,1H),7.54-7.50(m,1H),7.
45-7.41(m,2H),7.37-7.35(m,2H),6.21(d,J=7.1Hz,1H),5.23-5.20(m,1H),4.55-4.51(m,
2H),4.48-4.42(m,2H),4.15-4.07(m,2H),3.36(s,3H),1.56(s,9H)。
[0194] 在N2、-78℃下向上述物质(7.91g，14.6mmol)的无水DCM(100mL)溶液添加DAST(11.8g，73.0mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌72h。然后在-78℃下冷却反应混合物，用DCM(100mL)稀释，然后用饱和NaHCO3(150mL)水溶液淬灭。收集有机层并将水层用DCM(2×100mL)萃取。将合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，然后在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:4)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯，为白色固体(6.10g，77%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01-7.98(m,4H),7.60-7.56(m,1H),7.56-7.52(m,1H),7.45-7.41(m,2H),7.38-7.35(m,2H),6.19(d,J=7.2Hz,1H),5.52-5.46(m,1H),5.40-5.28(m,1H),4.61-4.56(m,1H),4.52(dd,J=3.6,12.0Hz,1H),4.43(dd,J=5.7,12.0Hz,1H),4.03-3.99(m,1H),3.36(s,3H),1.56(s,9H)。
[0195] 将上述物质(6.10g，11.2mmol)和K2CO3(1.00g，7.25mmol)在无水MeOH(50mL)中的混合物在室温下搅拌3h。添加干冰，并在减压下除去溶剂。在硅胶上通过快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:1至10:1)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-6-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸1
叔丁基酯，为白色固体(3.25g，86%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.06(d,J=6.8Hz,1H),5.15(ddd,J=2.4,4.4,45.7Hz,1H),4.46-4.41(m,1H),3.96-3.89(m,1H),3.83(dd,J=3.2,11.8Hz,1H),3.73(dd,J=5.4,11.8Hz,1H),3.46-3.42(m,1H),3.32(s,3H),1.54(s,9H)。
叔丁基酯，为白色固体(3.25g，86%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.06(d,J=6.8Hz,1H),5.15(ddd,J=2.4,4.4,45.7Hz,1H),4.46-4.41(m,1H),3.96-3.89(m,1H),3.83(dd,J=3.2,11.8Hz,1H),3.73(dd,J=5.4,11.8Hz,1H),3.46-3.42(m,1H),3.32(s,3H),1.54(s,9H)。
[0196] 在0℃下，向上述物质(0.880g，2.61mmol)和咪唑(0.354g，5.20mmol)的无水DMF(15mL)溶液中添加TBDMSCl(0.452g，3.00mmol)。将混合物在室温下搅拌72h，并用Et2O(100mL)和盐水(100mL)稀释。收集有机层，将水层用Et2O(50mL)萃取。将合并的萃取物用H2O(50mL)洗涤，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-羟
基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白
1
色泡沫(1.10g，93%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.06(d,J=6.8Hz,1H),5.19-5.02(m,1H),4.
43-4.38(m,1H),3.98-3.93(m,1H),3.85(dd,J=5.0,10.6Hz,1H),3.73(dd,J=5.2,10.6Hz,1H),3.45-3.43(m,1H),3.34(s,3H),1.54(s,9H),0.89(s,9H),0.08(s,6H)。
基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白
1
色泡沫(1.10g，93%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.06(d,J=6.8Hz,1H),5.19-5.02(m,1H),4.
43-4.38(m,1H),3.98-3.93(m,1H),3.85(dd,J=5.0,10.6Hz,1H),3.73(dd,J=5.2,10.6Hz,1H),3.45-3.43(m,1H),3.34(s,3H),1.54(s,9H),0.89(s,9H),0.08(s,6H)。
[0197] 在0℃下，向上述物质(1.06g，2.35mmol)和Bu4NI(0.087g，0.24mmol)的无水DMF(15mL)溶液中添加NaH(60%，在矿物油中，0.118g，2.94mmol)。添加NaH后，向反应混合物中添加BnBr(0.703g，4.11mmol)。将混合物在室温下搅拌16h，并用Et2O(60mL)和饱和NH4Cl(50mL)稀释。收集有机层，并将水层用Et2O(2×30mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(40mL)稀释，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:4)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为粘稠油状物(1.22g，96%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.27(m,5H),6.10(d,J=7.0Hz,1H),5.30-5.16(m,1H),4.80(d,J=11.0Hz,1H),4.55(d,J=11.0Hz,1H),4.48-4.42(m,1H),3.88-3.80(m,1H),3.78-3.69(m,
2H),3.46-3.44(m,1H),3.31(s,3H),1.53(s,9H),0.89(s,9H),0.04(s,6H)。
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为粘稠油状物(1.22g，96%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.27(m,5H),6.10(d,J=7.0Hz,1H),5.30-5.16(m,1H),4.80(d,J=11.0Hz,1H),4.55(d,J=11.0Hz,1H),4.48-4.42(m,1H),3.88-3.80(m,1H),3.78-3.69(m,
2H),3.46-3.44(m,1H),3.31(s,3H),1.53(s,9H),0.89(s,9H),0.04(s,6H)。
[0198] 在0℃下，向上述物质(1.22g，2.25mmol)的THF(15mL)溶液中添加TBAF(1.0M在THF中，5.0mL，5.0mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌2h，并用EtOAc(20mL)和盐水(50mL)稀释。收集有机层，将水层用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白1
色固体(0.96g，100%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.29(m,5H),6.09(d,J=6.7Hz,1H),5.
32(ddd,J=1.8,3.6,45.4Hz,1H),4.80(d,J=11.6Hz,1H),4.55(d,J=11.6Hz,1H),4.53-4.48(m,1H),3.81-3.72(m,2H),3.61-3.55(m,1H),3.49-3.45(m,1H),3.31(s,3H),1.53(s,9H)。
色固体(0.96g，100%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.29(m,5H),6.09(d,J=6.7Hz,1H),5.
32(ddd,J=1.8,3.6,45.4Hz,1H),4.80(d,J=11.6Hz,1H),4.55(d,J=11.6Hz,1H),4.53-4.48(m,1H),3.81-3.72(m,2H),3.61-3.55(m,1H),3.49-3.45(m,1H),3.31(s,3H),1.53(s,9H)。
[0199] 向上述物质(1.50g，3.52mmol)的DCM(40mL)溶液中添加DMP(2.20g，5.20mmol)。在室温下搅拌1h后，将反应混合物用Et2O(20mL)稀释，然后浓缩至干。添加含有
Na2S2O3(2g)的饱和NaHCO3水溶液(30mL)，然后将混合物用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为
1
白色固体(1.02g，68%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.60(s,1H),7.35-7.29(m,5H),6.12(d,J=7.0Hz,1H),5.39-5.27(m,1H),4.78(d,J=11.4Hz,1H),4.66(d,J=11.4Hz,1H),4.57-4.51(m,1H),4.00-3.95(m,2H),3.31(s,3H),1.53(s,9H)。
Na2S2O3(2g)的饱和NaHCO3水溶液(30mL)，然后将混合物用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为
1
白色固体(1.02g，68%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.60(s,1H),7.35-7.29(m,5H),6.12(d,J=7.0Hz,1H),5.39-5.27(m,1H),4.78(d,J=11.4Hz,1H),4.66(d,J=11.4Hz,1H),4.57-4.51(m,1H),4.00-3.95(m,2H),3.31(s,3H),1.53(s,9H)。
[0200] 在N2下向上述物质(0.150g，0.350mmol)的无水THF(10mL)溶液中添加MeMgBr(1.4M在THF/甲苯中，0.60mL，0.84mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌2h。
用饱和NH4Cl水溶液(10mL)淬灭反应，然后用EtOAc(3×15mL)萃取。合并的萃取物
经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到混合的((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R&S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)
1
(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为米白色泡沫(0.115g，75%)，基于 H NMR，非对映异构体比率为1:3.2。
用饱和NH4Cl水溶液(10mL)淬灭反应，然后用EtOAc(3×15mL)萃取。合并的萃取物
经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到混合的((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R&S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)
1
(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为米白色泡沫(0.115g，75%)，基于 H NMR，非对映异构体比率为1:3.2。
[0201] 在N2、-78℃下向上述物质(0.115g，0.260mmol)和PMB(0.115g，0.777mmol)的无水DCM(4mL)中添加BCl3(1.0M在DCM中，0.8mL，0.8mmol)。将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度加温至0℃。将反应混合物在-78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:12)对残留物进行纯化，得到标题化合物的混合物，为淡黄色固体(0.055g，85%)。然后在Agilent 1200上通过制备-HPLC法(色谱柱，C18，19×50mm，5um；流动相，含0.03%NH4OH的水和CH3CN(在15min内从3%至100%)；检测器，220nm)对混合物进行分离，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]
噻唑-6-醇(19mg)和(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(5.5mg)，二者均为白色固体。实
1
施例1：HNMR(400MHz,CD3OD)δ6.34(d,J=6.6Hz,1H),4.83(td,J=4.2Hz,45.4Hz,1H),4.37
13
-4.31(m,1H),4.00-3.91(m,2H),3.31-3.28(m,1H),2.84(s,3H),1.22(d,J=6.6Hz,1H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.52(d,J=1.6Hz),96.10(d,J=177.3Hz),90.82(d,J=3.0Hz),77.1
1(d,J=3.0Hz),73.90(d,J=25.3Hz),69.06(d,J=23.5Hz),62.61,30.63,19.90；MS,(ES,m/+ 1
z)[M+H]251.1。实施例2：H NMR(400MHz,D2O)δ6.29(d,J=6.9Hz,1H),4.83(td,J=4.2,45.4Hz,1H),4.44-4.29(m,1H),4.08-3.91(m,1H),3.89-3.78(m,1H),3.61-3.50(m,1H),2.76+
(s,3H),1.10(d,J=6.6Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]251.1。
噻唑-6-醇(19mg)和(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(5.5mg)，二者均为白色固体。实
1
施例1：HNMR(400MHz,CD3OD)δ6.34(d,J=6.6Hz,1H),4.83(td,J=4.2Hz,45.4Hz,1H),4.37
13
-4.31(m,1H),4.00-3.91(m,2H),3.31-3.28(m,1H),2.84(s,3H),1.22(d,J=6.6Hz,1H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.52(d,J=1.6Hz),96.10(d,J=177.3Hz),90.82(d,J=3.0Hz),77.1
1(d,J=3.0Hz),73.90(d,J=25.3Hz),69.06(d,J=23.5Hz),62.61,30.63,19.90；MS,(ES,m/+ 1
z)[M+H]251.1。实施例2：H NMR(400MHz,D2O)δ6.29(d,J=6.9Hz,1H),4.83(td,J=4.2,45.4Hz,1H),4.44-4.29(m,1H),4.08-3.91(m,1H),3.89-3.78(m,1H),3.61-3.50(m,1H),2.76+
(s,3H),1.10(d,J=6.6Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]251.1。
[0202] 实施例3&4
[0203] (3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢 -3aH- 吡 喃 并 [3,2-d] 噻 唑 -6- 醇 和 (3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-( 乙 基 氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0204]
[0205] 向 在15 ℃ 下冷 却 的(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-( 乙 基氨 基 )-5-(羟 基 甲基)-5,6,7,7a- 四 氢-3aH- 吡 喃 并[3,2-d] 噻 唑-6,7- 二 醇(35.0g，141mmol) 的DMF(300mL)悬浮液中添加DIPEA(6.0mL)、Boc2O(61.5g，282mmol)和MeOH(6.0mL)。将混合物在室温下搅拌16h，然后添加MeOH(50mL)。将反应混合物在～35℃下减压浓缩。在硅胶上通过快速柱层析法(EtOAc/己烷1:1，然后MeOH/DCM，1:5)对残留物进行纯化，接着从EtOAc/己烷重结晶，得到叔丁基((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-二羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸酯，为白色固体1
(31.5g，收率为64%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.12(d,J=6.8Hz,1H),4.23-4.22(m,1H),4.
17-4.14(m,1H),3.91-3.86(m,2H),3.81-3.77(m,3H),3.59-3.55(m,1H),3.17-3.16(m,1H,OH),1.53(s,9H),1.16(t,J=7.0Hz,3H)。
(31.5g，收率为64%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.12(d,J=6.8Hz,1H),4.23-4.22(m,1H),4.
17-4.14(m,1H),3.91-3.86(m,2H),3.81-3.77(m,3H),3.59-3.55(m,1H),3.17-3.16(m,1H,OH),1.53(s,9H),1.16(t,J=7.0Hz,3H)。
[0206] 在 0 ℃ 下 向 上 述 物 质 (1.64g，4.73mmol)、DIPEA(1.34g，10.4mmol) 和DMAP(0.010g，0.082mmol)的DCM(50mL)溶液中缓慢添加BzCl(1.33g，9.50mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌过夜。添加饱和NH4Cl水溶液(50mL)，并收集有机层。将水层用DCM(2×40mL)进一步萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，在硅胶上通过快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:4至1:2)对残留物进行分离，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-7-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯，为白色固体(0.67g，
1
26%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(d,J=8.1Hz,4H),7.57-7.35(m,6H),6.19(d,J=7.1Hz,
1H),5.21(dd,J=2.8,9.2Hz,1H),4.56-4.51(m,2H),4.47-4.42(m,2H),4.14-4.10(m,1H),3.99-3.92(m,2H),1.55(s,9H),1.19(t,J=7.2Hz,3H)。
1
26%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(d,J=8.1Hz,4H),7.57-7.35(m,6H),6.19(d,J=7.1Hz,
1H),5.21(dd,J=2.8,9.2Hz,1H),4.56-4.51(m,2H),4.47-4.42(m,2H),4.14-4.10(m,1H),3.99-3.92(m,2H),1.55(s,9H),1.19(t,J=7.2Hz,3H)。
[0207] 在N2、-78℃下向上述物质(3.00g，5.39mmol)的无水DCM(30mL)溶液添加DAST(5.44g，33.8mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌48h。然后将反应混合物在-78℃下冷却，用DCM(50mL)稀释，然后用饱和NaHCO3水溶液(70mL)淬灭。收集有机层，将水层用DCM(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:4)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯，为白色固
1
体(2.15g，71%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00-7.98(m,4H),7.59-7.57(m,1H),7.52-7.48(m,1H),7.43-7.39(m,2H),7.37-7.33(m,2H),6.15(d,J=7.2Hz,1H),5.51-5.43(m,1H),5.3
8-5.26(m,1H),4.59-4.55(m,1H),4.50(dd,J=3.6,12.0Hz,1H),4.41(dd,J=5.7,12.0Hz,1H),4.02-3.92(m,3H),1.56(s,9H),1.19(t,J=7.0Hz,3H)。
1
体(2.15g，71%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00-7.98(m,4H),7.59-7.57(m,1H),7.52-7.48(m,1H),7.43-7.39(m,2H),7.37-7.33(m,2H),6.15(d,J=7.2Hz,1H),5.51-5.43(m,1H),5.3
8-5.26(m,1H),4.59-4.55(m,1H),4.50(dd,J=3.6,12.0Hz,1H),4.41(dd,J=5.7,12.0Hz,1H),4.02-3.92(m,3H),1.56(s,9H),1.19(t,J=7.0Hz,3H)。
[0208] 在 室 温 下 将 上 述 物 质(2.15g，3.85mmol) 和K2CO3(0.531g，3.85mmol) 在无水MeOH(40mL)中的混合物搅拌3h。添加干冰，并在减压下除去溶剂。在硅胶上通过快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:1，然后10:1)对残留物进行纯化，得到
((3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-6-羟基-5-(羟 基甲 基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡 喃
1
并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(1.25g，93%)。H
NMR(400MHz,CDCl3)δ6.05(d,J=6.8Hz,1H),5.24-5.12(m,1H),4.48-4.43(m,1H),3.99-3.
82(m,4H),3.73(dd,J=5.5,11.4Hz,1H),3.45-3.41(m,1H),1.54(s,9H),1.18(t,J=7.0Hz,
3H)。
((3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-6-羟基-5-(羟 基甲 基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡 喃
1
并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(1.25g，93%)。H
NMR(400MHz,CDCl3)δ6.05(d,J=6.8Hz,1H),5.24-5.12(m,1H),4.48-4.43(m,1H),3.99-3.
82(m,4H),3.73(dd,J=5.5,11.4Hz,1H),3.45-3.41(m,1H),1.54(s,9H),1.18(t,J=7.0Hz,
3H)。
[0209] 在0℃下，向上述物质(1.25g，3.58mmol)和咪唑(0.488g，7.16mmol)的无水DMF(25mL)溶液中添加TBDMSCl(0.583g，3.87mmol)。将混合物在室温下搅拌72h，然后用Et2O(100mL)和盐水(100mL)稀释。收集有机层，将水层用Et2O(50mL)萃取。将合并的萃取物用H2O(50mL)洗涤，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为无
1
色粘稠油状物(1.66g，100%)。H NMR(500MHz,CDCl3)δ6.03(d,J=6.8Hz,1H),5.10(ddd,J=
2.8,4.2,45.5Hz),4.43-4.40(m,1H),3.99-3.88(m,3H),3.85(dd,J=5.0,10.5Hz,1H),3.71(dd,J=5.6,10.5Hz,1H),3.41-3.38(m,1H),2.39(d,J=5.6Hz,1H),1.54(s,9H),1.17(t,J=7.0Hz,3H),0.89(s,9H),0.080(s,3H),0.078(s,3H)。
1
色粘稠油状物(1.66g，100%)。H NMR(500MHz,CDCl3)δ6.03(d,J=6.8Hz,1H),5.10(ddd,J=
2.8,4.2,45.5Hz),4.43-4.40(m,1H),3.99-3.88(m,3H),3.85(dd,J=5.0,10.5Hz,1H),3.71(dd,J=5.6,10.5Hz,1H),3.41-3.38(m,1H),2.39(d,J=5.6Hz,1H),1.54(s,9H),1.17(t,J=7.0Hz,3H),0.89(s,9H),0.080(s,3H),0.078(s,3H)。
[0210] 在0℃下，向上述物质(1.63g，3.51mmol)和Bu4NI(0.13g，0.35mmol)的无水DMF(15mL)溶液中添加NaH(60%在矿物油中，0.182g，4.56mmol)。添加NaH后，向反应混合物添加BnBr(1.20g，7.00mmol)。将混合物在室温下搅拌16h，并用Et2O(60mL)和饱和NH4Cl(50mL)稀释。收集有机层，将水层用Et2O(2×30mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(40mL)洗涤，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:4)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为粘稠油状物(1.90g，98%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),6.08(d,J=7.0Hz,1H),5.31-5.18(m,1H),4.79(d,J=11.5Hz,1H),4.55(d,J=11.5Hz,1H),4.49-4.43(m,1H),3.92-3.78(m,3H),3.75(dd,J=2.
2,11.5Hz,1H),3.70(dd,J=4.5,11.5Hz,1H),3.41-3.38(m,1H),1.52(s,9H),1.12(t,J=7.0Hz,3H),0.88(s,9H),0.038(s,3H),0.036(s,3H)。
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为粘稠油状物(1.90g，98%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),6.08(d,J=7.0Hz,1H),5.31-5.18(m,1H),4.79(d,J=11.5Hz,1H),4.55(d,J=11.5Hz,1H),4.49-4.43(m,1H),3.92-3.78(m,3H),3.75(dd,J=2.
2,11.5Hz,1H),3.70(dd,J=4.5,11.5Hz,1H),3.41-3.38(m,1H),1.52(s,9H),1.12(t,J=7.0Hz,3H),0.88(s,9H),0.038(s,3H),0.036(s,3H)。
[0211] 在0℃下，向上述物质(1.89g，3.41mmol)的THF(20mL)溶液中添加TBAF(1.0M在THF中，5.0mL，5.0mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌2h，并用EtOAc(20mL)和盐水(50mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为白1
色固体(1.43g，95%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.28(m,5H),6.06(d,J=7.1Hz,1H),5.
32(ddd,J=1.3,3.1,45.2Hz,1H),4.79(d,J=11.6Hz,1H),4.55(d,J=11.6Hz,1H),4.53-4.48(m,1H),3.91-3.85(m,2H),3.81-3.73(m,2H),3.59-3.55(m,1H),3.46-3.41(m,1H),1.53(s,9H),1.12(t,J=7.0Hz,3H)。
色固体(1.43g，95%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.28(m,5H),6.06(d,J=7.1Hz,1H),5.
32(ddd,J=1.3,3.1,45.2Hz,1H),4.79(d,J=11.6Hz,1H),4.55(d,J=11.6Hz,1H),4.53-4.48(m,1H),3.91-3.85(m,2H),3.81-3.73(m,2H),3.59-3.55(m,1H),3.46-3.41(m,1H),1.53(s,9H),1.12(t,J=7.0Hz,3H)。
[0212] 向 上 述 物 质 (0.441g，1.00mmol)的DCM(10mL) 溶 液 中 添 加 DMP(0.630g，1.49mmol)。在室温下搅拌1.5h后，将反应混合物用Et2O(20mL)稀释，然后浓缩至干。添加含Na2S2O3(2g)的饱和NaHCO3水溶液(20mL)，并将混合物用EtOAc(2×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基
1
甲酸叔丁基酯，为白色固体(0.36g，81%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.60(s,1H),7.36-7.27(m,5H),6.11(d,J=7.0Hz,1H),5.39-5.26(m,1H),4.76(d,J=11.4Hz,1H),4.66(d,J=11.4Hz,1H),4.57-4.51(m,1H),3.99-3.93(m,1H),3.93-3.91(m,1H),3.89-3.83(m,2H),1.52(s,9H),1.08(t,J=7.0Hz,3H)。
1
甲酸叔丁基酯，为白色固体(0.36g，81%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.60(s,1H),7.36-7.27(m,5H),6.11(d,J=7.0Hz,1H),5.39-5.26(m,1H),4.76(d,J=11.4Hz,1H),4.66(d,J=11.4Hz,1H),4.57-4.51(m,1H),3.99-3.93(m,1H),3.93-3.91(m,1H),3.89-3.83(m,2H),1.52(s,9H),1.08(t,J=7.0Hz,3H)。
[0213] 在N2下 向上述物 质(0.357g，0.85mmol)的无水THF(10mL)溶 液中添 加MeMgBr(1.4M在THF/甲苯中，1.4mL，2.0mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌2h。将反应用饱和NH4Cl水溶液(10mL)淬灭，然后用EtOAc(3×15mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:3)纯化后，获得((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R&S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.22g，1
60%)，其中基于 H NMR，非对映异构体比率为1:2.2。
60%)，其中基于 H NMR，非对映异构体比率为1:2.2。
[0214] 在N2和-78℃下向上述物质(0.215g，0.473mmol)和PMB(0.115g，0.777mmol)的无水DCM(4mL)中添加BCl3(1.0M在DCM中，0.8mL，0.8mmol)。将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度加温至0℃。将反应混合物在-78℃下冷却，并用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:15)纯化后，获得标题化合物的混合物，为白色固体(0.110g，88%)。然后在Agilent1200上通过制备-HPLC(色谱柱，C18，19×50mm，5um；流动相，含0.03%NH4OH的水和CH3CN(在10min内从10%到45%)；检测器，220nm)对混合物进行分离，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇1
(45mg)，为白色固体；HNMR(400MHz,D2O)δ6.25(d,J=6.6Hz,1H),4.80(td,J=4.2,45.4Hz,1H),4.43-4.35(m,1H),4.94-3.83(m,2H),3.27(dd,J=3.9,9.3Hz,1H),3.19-3.11(m,+
2H),1.12(d,J=6.6Hz,3H),1.07(t,J=7.2Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]265.0。 还 分 离 得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(30mg)，为白色固体；H NMR(400MHz,D2O)δ6
.28(d,J=6.6Hz,1H),4.80(td,J=4.2,45.4Hz,1H),4.44-4.36(m,1H),4.03-4.00(
m,1H),3.98-3.82(m,1H),3.52(dd,J=3.0,12.3Hz,1H),3.13-3.20(m,2H),1.11(d
+
,J=6.9Hz,3H),1.07(t,J=7.2Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]265.0。
(45mg)，为白色固体；HNMR(400MHz,D2O)δ6.25(d,J=6.6Hz,1H),4.80(td,J=4.2,45.4Hz,1H),4.43-4.35(m,1H),4.94-3.83(m,2H),3.27(dd,J=3.9,9.3Hz,1H),3.19-3.11(m,+
2H),1.12(d,J=6.6Hz,3H),1.07(t,J=7.2Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]265.0。 还 分 离 得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(30mg)，为白色固体；H NMR(400MHz,D2O)δ6
.28(d,J=6.6Hz,1H),4.80(td,J=4.2,45.4Hz,1H),4.44-4.36(m,1H),4.03-4.00(
m,1H),3.98-3.82(m,1H),3.52(dd,J=3.0,12.3Hz,1H),3.13-3.20(m,2H),1.11(d
+
,J=6.9Hz,3H),1.07(t,J=7.2Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]265.0。
[0215] 实施例5&6
[0216] (3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-( 二 甲 基 氨 基 )-7- 氟 -5-((S)-1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇[0217]
[0218] 在 0 ℃ 下，向 (3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-( 二 甲 基 氨 基 )-5-( 羟 基 甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6,7-二醇(5.20g，21.0mmol)和咪唑(8.0g，117mmol)的无水DMF(65mL)溶液中添加TBDMSCl(10.0g，66.3mmol)。将混合物在室温下搅拌24h，并用Et2O(100mL)和盐水(100mL)稀释。收集有机层，并将水层用Et2O(100mL)萃取。将合并的萃取物用H2O(100mL)洗涤并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:1)对残留物进行纯化，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-6-醇，为无色粘稠油状物(5.95g，60%)。H NMR(500MHz,CDCl3)δ6.15(d,J=5.9Hz,1H),4.34-4.33(m,1H),4.21-4.19(m,1H),3.80-3.72(m,2H),3.48-3.47(m,1H),3.01(s,6H),0.897(s,9H),0.893(s,9H),0.124(s,3H),0.120(s,3H),0.068(s,6H)。
1
唑-6-醇，为无色粘稠油状物(5.95g，60%)。H NMR(500MHz,CDCl3)δ6.15(d,J=5.9Hz,1H),4.34-4.33(m,1H),4.21-4.19(m,1H),3.80-3.72(m,2H),3.48-3.47(m,1H),3.01(s,6H),0.897(s,9H),0.893(s,9H),0.124(s,3H),0.120(s,3H),0.068(s,6H)。
[0219] 在0℃ 下，向 上述 物 质(5.95g，12.5mmol)和DMAP(0.10g，0.81mmol)的 吡啶(50mL)溶液中添加BzCl(3.00g，21.3mmol)。将混合物在室温下搅拌24h，并用EtOAc(100mL)和饱和NaHCO3水溶液(100mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(100mL)萃取。将合并的萃取物用H2O(100mL)洗涤，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，在减压下与己烷一起蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:4)对残留物进行纯化，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]
1
噻唑-6-基苯甲酸酯，为白色固体(6.85g，88%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05-8.02(m,2H),7.56-7.52(m,1H),7.43-7.39(m,2H),6.27(d,J=6.3Hz,1H),5.06-5.03(m,1H),4.40(dd,J=2.2,3.8Hz,1H),4.32-4.30(m,1H),3.82-3.79(m,1H),3.71(d,J=4.8Hz,2H),3.03(s,6H),0.89(s,9H),0.85(s,9H),0.17(s,3H),0.13(s,3H),0.02(s,3H),0.00(3H)。
1
噻唑-6-基苯甲酸酯，为白色固体(6.85g，88%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05-8.02(m,2H),7.56-7.52(m,1H),7.43-7.39(m,2H),6.27(d,J=6.3Hz,1H),5.06-5.03(m,1H),4.40(dd,J=2.2,3.8Hz,1H),4.32-4.30(m,1H),3.82-3.79(m,1H),3.71(d,J=4.8Hz,2H),3.03(s,6H),0.89(s,9H),0.85(s,9H),0.17(s,3H),0.13(s,3H),0.02(s,3H),0.00(3H)。
[0220] 向上述物质(9.30g，16.0mmol)的MeOH(100mL)溶液中鼓入HCl(g)2min。然后将反应混合物在室温下搅拌2h。除去溶剂，并将残留物用饱和NaHCO3水溶液(150mL)中和。将水层用EtOAc(6×80mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂以得到(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡1
喃并[3,2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯，为白色固体(5.4g，96%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03-
8.01(m,2H),7.56-7.53(m,1H),7.44-7.39(m,2H),6.37(d,J=4.5Hz,1H),5.12-5.09(m,1H),4.41-4.37(m,2H),3.92-3.89(m,1H),3..78-3.73(m,1H),3.69-3.65(m,1H),3.00(s,6H)。
喃并[3,2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯，为白色固体(5.4g，96%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03-
8.01(m,2H),7.56-7.53(m,1H),7.44-7.39(m,2H),6.37(d,J=4.5Hz,1H),5.12-5.09(m,1H),4.41-4.37(m,2H),3.92-3.89(m,1H),3..78-3.73(m,1H),3.69-3.65(m,1H),3.00(s,6H)。
[0221] 在0℃下，向上述物质(5.35g，15.2mmol)和DMAP(0.050g，0.41mmol)的吡啶(50mL)溶液中添加BzCl(2.88g，15.8mmol)。将混合物在室温下搅拌4h，并用EtOAc(100mL)和饱和NaHCO3水溶液(100mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，在减压下与己烷一起蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至10:1)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-(二甲基氨基)-7-羟基-5,6,7,7a-四
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯，为白色固体(4.20g，67%)。
1
HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.04-8.00(m,4H),7.58-7.50(m,2H),7.44-7.37(m,4H),6.38(d,J=
6.6Hz,1H),5.23-5.20(m,1H),.4.56(dd,J=3.2,12.0Hz,1H),4.48-4.41(m,3H),4.27-4.22(m,1H),3.03(s,6H)。
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯，为白色固体(4.20g，67%)。
1
HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.04-8.00(m,4H),7.58-7.50(m,2H),7.44-7.37(m,4H),6.38(d,J=
6.6Hz,1H),5.23-5.20(m,1H),.4.56(dd,J=3.2,12.0Hz,1H),4.48-4.41(m,3H),4.27-4.22(m,1H),3.03(s,6H)。
[0222] 采用实施例3所描述的操作，通过用DAST进行处理将上述物质(0.410g，0.898mmol)转化成对应的氟化物。将反应混合物在室温下搅拌16h。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:3至1:2)纯化后，获得((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯
1
甲酸酯，为白色泡沫(0.380g，92%)。H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.03-8.00(m,4H),7.58-7.55(m,1H),7.44-7.41(m,1H),7.44-7.41(m,2H),7.39-7.36(m,2H),6.36(d,J=6.8Hz,1H),5.5
1-5.45(m,1H),5.28-5.19(m,1H),4.69-4.67(m,1H),4.51(dd,J=3.4,12.0Hz,1H),4.40(dd,J=5.9,12.0Hz,1H),4.13-4.10(m,1H),3.05(s,6H)。
1
甲酸酯，为白色泡沫(0.380g，92%)。H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.03-8.00(m,4H),7.58-7.55(m,1H),7.44-7.41(m,1H),7.44-7.41(m,2H),7.39-7.36(m,2H),6.36(d,J=6.8Hz,1H),5.5
1-5.45(m,1H),5.28-5.19(m,1H),4.69-4.67(m,1H),4.51(dd,J=3.4,12.0Hz,1H),4.40(dd,J=5.9,12.0Hz,1H),4.13-4.10(m,1H),3.05(s,6H)。
[0223] 采用实施例3所描述的操作，对上述物质(0.375g，0.818mmol)进行脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:12)纯化后，获得
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃
1
并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.190g，93%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.35(d,J=6.
7Hz,1H),4.78(td,J=5.0Hz,48.1Hz,1H),4.34-4.28(m,1H),3.79(dd,J=2.0,12.0Hz,1H),3.77-3.64(m,2H),3.61-3.57(m,1H),3.01(s,6H)。
(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃
1
并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.190g，93%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.35(d,J=6.
7Hz,1H),4.78(td,J=5.0Hz,48.1Hz,1H),4.34-4.28(m,1H),3.79(dd,J=2.0,12.0Hz,1H),3.77-3.64(m,2H),3.61-3.57(m,1H),3.01(s,6H)。
[0224] 采用实施例3所描述的操作，将上述物质(1.30g，5.19mmol)转化成对应的甲硅烷基醚。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:1)纯化后，获得(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(1.84g，97%)。
1
H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.22(d,J=6.3Hz,1H),5.07(ddd,J=2.2,4.2,45.8Hz,1H),4.52-4.
49(m,1H),3.86-3.81(m,1H),3.78(d,J=4.8Hz,2H),3.50-3.46(m,1H),3.02(s,6H),0.089(s,9H),0.07(s,6H)。
1
H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.22(d,J=6.3Hz,1H),5.07(ddd,J=2.2,4.2,45.8Hz,1H),4.52-4.
49(m,1H),3.86-3.81(m,1H),3.78(d,J=4.8Hz,2H),3.50-3.46(m,1H),3.02(s,6H),0.089(s,9H),0.07(s,6H)。
[0225] 采用实施例3所描述的操作，对上述物质(1.80g，4.94mmol)进行苄基保护，然后裂解甲硅烷基醚。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，2:3至5:1)纯化后，获得((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲醇，为白色固体(2.02g，经过2步收率为91%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.28(m,5H),6.27(d,J=6.7Hz,1H),5.21(ddd,J=2.5,3.9,46.1Hz,1H),4.82(d,J=11.6Hz,1H),4.59-4.53(m,1H),3.77-3.69(m,2H),3.66-3.57(m,2H),3.
00(s,6H)。
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲醇，为白色固体(2.02g，经过2步收率为91%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.28(m,5H),6.27(d,J=6.7Hz,1H),5.21(ddd,J=2.5,3.9,46.1Hz,1H),4.82(d,J=11.6Hz,1H),4.59-4.53(m,1H),3.77-3.69(m,2H),3.66-3.57(m,2H),3.
00(s,6H)。
[0226] 在N2、-78℃下向DMSO(0.172g，2.20mmol)的无水DCM(10mL)溶液缓慢添加乙二酰氯(0.261g，2.06mmol)，并将混合物在～-30℃下搅拌45min。然后将混合物在-78℃下冷却，并缓慢添加上述物质(0.290g，0.852mmol)的无水DCM(5mL)溶液。在～-30℃下搅拌2h后，将反应混合物冷却回到-78℃，并添加Et3N(0.334g，3.31mmol)。将混合物在～-30℃下再搅拌30min，然后用H2O(20mL)淬灭。收集有机层，并将水层用DCM(2×10mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂以得到粗产物(3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-甲醛，为淡黄色泡沫。在N2下，将该醛溶解于无水THF(20mL)，并添加MeMgBr(1.4M在THF/甲苯中，1.5mL，2.1mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌2h。将反应用饱和NaHCO3水溶液(20mL)淬灭，然后用EtOAc(3×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，2:3至5:1)对残留物进行纯化，得到混合的(R&S)-1-((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)乙醇，1
为淡黄色固体(0.24g，79%)，其中基于 H NMR，非对映异构体比率为1:4。
为淡黄色固体(0.24g，79%)，其中基于 H NMR，非对映异构体比率为1:4。
[0227] 采用实施例3所描述的操作，用BCl3对上述物质(0.240g，0.677mmol)进行脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:12)纯化后，获得标题化合物的混合物，为白色固体(0.161g，90%)。然后通过制备-手性-HPLC(色谱柱，Chiralpak IC(SFC)，2×25cm，5um，Chiral-P(IC)002S09IC00CJ-MI001；流 动 相，A相，己烷；B相，含0.1%DEA的乙醇(10%乙醇，30min)；检测器，220nm)分离混合物，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(68mg)，为白色固体；H NMR(400MHz,D2O)δ6.24(d,J=6.9Hz,1H),4.79(td,J=4.2,45.4Hz,1H),4.41-4.36(m,1H),3.93-3.83(m,2H),3.2+
9-3.24(m,1H),2.90(s,6H),1.13(d,J=6.6Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]265.0。还分离得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(22mg)，为白色固体；H NMR(400MHz,D2O)δ6.26(d,J=6.9Hz,1H),4.78(td,J=4.2,45.4Hz,1H),4.42-4.34(m,1H),3.99-3.95(m,1H),3.89-3.80(+
m,1H),3.54-3.50(m,1H),2.91(s,6H),1.14(d,J=6.6Hz,3H)。MS,(ES,m/z)[M+H]265.0。
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(68mg)，为白色固体；H NMR(400MHz,D2O)δ6.24(d,J=6.9Hz,1H),4.79(td,J=4.2,45.4Hz,1H),4.41-4.36(m,1H),3.93-3.83(m,2H),3.2+
9-3.24(m,1H),2.90(s,6H),1.13(d,J=6.6Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]265.0。还分离得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(22mg)，为白色固体；H NMR(400MHz,D2O)δ6.26(d,J=6.9Hz,1H),4.78(td,J=4.2,45.4Hz,1H),4.42-4.34(m,1H),3.99-3.95(m,1H),3.89-3.80(+
m,1H),3.54-3.50(m,1H),2.91(s,6H),1.14(d,J=6.6Hz,3H)。MS,(ES,m/z)[M+H]265.0。
[0228] 实施例7&8
[0229] (3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0230]
[0231] 向 ((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄 氧 基 )-7- 氟 -5- 甲 酰 基 -5,6,7,7a- 四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.410g，0.936mmol)和TMSCF3(0.266g，1.87mmol)的无水THF(8mL)溶液中添加TBAF(1.0M在THF中，0.040mL，0.040mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌2h。添加另一批TBAF(1.0M在THF中，
1.5mL，1.5mmol)，并将混合物在室温下再搅拌16h。然后将反应溶液用EtOAc(20mL)和盐水(30mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(20mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R&S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸
1
叔丁基酯，为淡黄色油状物(0.355g，75%)，其中基于 H NMR，非对映异构体比率为1:1.05。
1.5mL，1.5mmol)，并将混合物在室温下再搅拌16h。然后将反应溶液用EtOAc(20mL)和盐水(30mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(20mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R&S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸
1
叔丁基酯，为淡黄色油状物(0.355g，75%)，其中基于 H NMR，非对映异构体比率为1:1.05。
[0232] 采用实施例3所描述的操作，用BCl3对上述物质(0.350g，0.688mmol)进行脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:15)纯化和分离后，得到(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙
1
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(0.082g，37%)，为白色固体；H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.34(d,J=6.6Hz,1H),4.93-4.78(m,1H),4.39-4.33(m,1H),4.26-4.20(m,1H),4.07-4.00(m,1H),3.79(d,J=9.6Hz,1H),3.34-3.23(m,2H),1.18(t,J=7.2Hz,
13
3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.67,126.42(q,J=281.0Hz),96.08(d,J=177.7Hz),90.22(d,J=1.3Hz),73.66(d,J=25.4Hz),71.74-71.67(m),69.08(q,J=30.3Hz),68.00(d,J=24.1+
Hz),39.77,14.87；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。还分离得到(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]
1
噻唑-6-醇(0.074g，34%)，为白色固体；H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.28(d,J=6.6Hz,1H),4.9
8-4.84(m,1H),4.49-4.43(m,1H),4.12-4.04(m,2H),3.75(dd,J=5.4,8.8Hz,1H),3.34-3.2
13
3(m,2H),1.18(t,J=7.2Hz,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.43,126.14(q,J=280.8Hz),9
4.24(d,J=176.5Hz),89.42(d,J=1.4Hz),73.84(d,J=26.3Hz),72.91-72.88(m),72.10(q,J+
=29.9Hz),69.74(d,J=24.7Hz),39.87,14.93；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。
1
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(0.082g，37%)，为白色固体；H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.34(d,J=6.6Hz,1H),4.93-4.78(m,1H),4.39-4.33(m,1H),4.26-4.20(m,1H),4.07-4.00(m,1H),3.79(d,J=9.6Hz,1H),3.34-3.23(m,2H),1.18(t,J=7.2Hz,
13
3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.67,126.42(q,J=281.0Hz),96.08(d,J=177.7Hz),90.22(d,J=1.3Hz),73.66(d,J=25.4Hz),71.74-71.67(m),69.08(q,J=30.3Hz),68.00(d,J=24.1+
Hz),39.77,14.87；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。还分离得到(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]
1
噻唑-6-醇(0.074g，34%)，为白色固体；H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.28(d,J=6.6Hz,1H),4.9
8-4.84(m,1H),4.49-4.43(m,1H),4.12-4.04(m,2H),3.75(dd,J=5.4,8.8Hz,1H),3.34-3.2
13
3(m,2H),1.18(t,J=7.2Hz,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.43,126.14(q,J=280.8Hz),9
4.24(d,J=176.5Hz),89.42(d,J=1.4Hz),73.84(d,J=26.3Hz),72.91-72.88(m),72.10(q,J+
=29.9Hz),69.74(d,J=24.7Hz),39.87,14.93；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。
[0233] 根据与实施例7和8所描述的相类似的操作合成以下实施例。
[0234] 表2
[0235]
[0236] 实施例11&12
[0237] (3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0238]
[0239] 如实 施例5所 述，对((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄 氧基)-2-(二 甲基 氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲醇(0.290g，0.852mmol)进行斯文氧化(Swern oxidation)以提供粗产物(3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-甲醛，如实施例9所述用TMSCF3对其进行处理。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，2:3至4:1)纯化后，获得((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R&S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(二甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为1
淡黄色固体(0.230g，66%)，其中基于 H NMR，非对映异构体比率为1.4:1。
淡黄色固体(0.230g，66%)，其中基于 H NMR，非对映异构体比率为1.4:1。
[0240] 采用实施例3所描述的操作，用BCl3对上述物质(0.230g，0.563mmol)进行脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:16)进行纯化和分离，得到(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙1
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(0.060g，33%)，为白色固体；H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.36(d,J=6.6Hz,1H),4.84(td,J=4.8,47.8Hz,1H),4.45(td,J=4.
5,14.0Hz,1H),4.25-4.19(m,1H),4.05-3.97(m,1H),3.76(d,J=9.6Hz,1H),3.01(s,6H)；
13
C NMR(100MHz,CD3OD)δ166.08,126.42(q,J=281.1Hz),96.22(d,J=177.9Hz),91.23(d,J=3.5Hz),74.13(d,J=25.3Hz),71.87-71.80(m),69.04(q,J=30.3Hz),67.97(d,J=24.1+
Hz),40.38；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。还分离得到(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-6-醇(0.074g，41%)，为白色固体；H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.32(d,J=6.4Hz,1H),4.90(ddd,J=3.2,4.3,46.2Hz,1H),4.51-4.45(m,1H),4.14-4.04(m,2H),3.74(dd,J=4.9,8.8Hz,
13
1H),3.04(s,6H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ165.93(d,J=2.7Hz),126.13(q,J=280.8Hz),94.28(d,J=176.7Hz),90.28(d,J=1.6Hz),74.07(d,J=26.3Hz),73.09-73.05(m),71.97(q,J=+
29.9Hz),69.63(d,J=24.9Hz),40.50；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(0.060g，33%)，为白色固体；H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.36(d,J=6.6Hz,1H),4.84(td,J=4.8,47.8Hz,1H),4.45(td,J=4.
5,14.0Hz,1H),4.25-4.19(m,1H),4.05-3.97(m,1H),3.76(d,J=9.6Hz,1H),3.01(s,6H)；
13
C NMR(100MHz,CD3OD)δ166.08,126.42(q,J=281.1Hz),96.22(d,J=177.9Hz),91.23(d,J=3.5Hz),74.13(d,J=25.3Hz),71.87-71.80(m),69.04(q,J=30.3Hz),67.97(d,J=24.1+
Hz),40.38；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。还分离得到(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-6-醇(0.074g，41%)，为白色固体；H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.32(d,J=6.4Hz,1H),4.90(ddd,J=3.2,4.3,46.2Hz,1H),4.51-4.45(m,1H),4.14-4.04(m,2H),3.74(dd,J=4.9,8.8Hz,
13
1H),3.04(s,6H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ165.93(d,J=2.7Hz),126.13(q,J=280.8Hz),94.28(d,J=176.7Hz),90.28(d,J=1.6Hz),74.07(d,J=26.3Hz),73.09-73.05(m),71.97(q,J=+
29.9Hz),69.63(d,J=24.9Hz),40.50；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。
[0241] 实施例13&14
[0242] (3aR,5R,6S,7aR)-2-(乙 基 氨 基 )-5-((S)-1-羟 基 乙 基 )-5,6,7,7a- 四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5R,6S,7aR)-2-(乙基氨基)-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0243]
[0244] 将((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-7-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯(2.60g，
4.68mmol)和硫代-CDI(90%工业级，2.0g，10.0mmol)在甲苯(60mL)中的混合物在95℃下搅拌16h。冷却后，减压除去溶剂，并将残留物经自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:3至
2:3)纯化，得到(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-((1H-咪唑-1-硫代碳酰基)氧基)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]
1
噻唑-6-基苯甲酸酯，为黄色固体(3.00g，96%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(s,1H),8.0
8-7.94(m,4H),7.70(s,1H),7.57-7.37(m,6H),7.18(s,1H),6.36(dd,J=1.9,3.7Hz,1H),6.
17(d,J=7.1Hz,1H),5.54(td,J=1.2,9.2Hz,1H),4.70-4.67(m,1H),4.60(dd,J=3.2,12.1Hz,1H),4.42(dd,J=5.1,12.1Hz,1H),4.11-4.08(m,1H),4.05-3.97(m,2H),1.56(s,9H),1.22(t,J=7.2Hz,3H)。
4.68mmol)和硫代-CDI(90%工业级，2.0g，10.0mmol)在甲苯(60mL)中的混合物在95℃下搅拌16h。冷却后，减压除去溶剂，并将残留物经自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:3至
2:3)纯化，得到(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-((1H-咪唑-1-硫代碳酰基)氧基)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]
1
噻唑-6-基苯甲酸酯，为黄色固体(3.00g，96%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(s,1H),8.0
8-7.94(m,4H),7.70(s,1H),7.57-7.37(m,6H),7.18(s,1H),6.36(dd,J=1.9,3.7Hz,1H),6.
17(d,J=7.1Hz,1H),5.54(td,J=1.2,9.2Hz,1H),4.70-4.67(m,1H),4.60(dd,J=3.2,12.1Hz,1H),4.42(dd,J=5.1,12.1Hz,1H),4.11-4.08(m,1H),4.05-3.97(m,2H),1.56(s,9H),1.22(t,J=7.2Hz,3H)。
[0245] 将 上 述 物 质 (3.00g，4.50mmol)、三 丁 基 氢 化 锡(2.91g，10.0mmol) 和ABCN(0.085mg，0.35mmol)在混合的无水甲苯/THF(30/40mL)中的混合物在回流下搅拌4h。冷却后，减压除去溶剂，将残留物经自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:3)纯化，得到((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(乙基)氨基)-5,6,7,7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯，为白色固体(1.60g，66%)。H
NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03-7.94(m,4H),7.57-7.52(m,2H),7.44-7.35(m,4H),6.07(d,J=7.2Hz,1H),5.44-5.40(m,1H),4.52-4.41(m,3H),4.06-3.96(m,3H),2.70-2.64(m,1H),2.47-2.40(m,1H),1.56(s,9H),1.18(t,J=7.2Hz,3H)。
1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯，为白色固体(1.60g，66%)。H
NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03-7.94(m,4H),7.57-7.52(m,2H),7.44-7.35(m,4H),6.07(d,J=7.2Hz,1H),5.44-5.40(m,1H),4.52-4.41(m,3H),4.06-3.96(m,3H),2.70-2.64(m,1H),2.47-2.40(m,1H),1.56(s,9H),1.18(t,J=7.2Hz,3H)。
[0246] 采用实施例3所描述的操作，用K2CO3对上述物质(1.6g，3.0mmol)进行苯甲酰基脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(MeOH/DCM，1:20)纯化后，获得
((3aR,5R,6S,7aR)-6-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
唑-2-基)氨基甲酸叔丁基乙基酯(0.86g，87%)，为白色固体。
((3aR,5R,6S,7aR)-6-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
唑-2-基)氨基甲酸叔丁基乙基酯(0.86g，87%)，为白色固体。
[0247] 采用实施例3所描述的操作，对上述物质(0.820g，2.48mmol)进行单-TBDMS保护。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:2)纯化后，获得((3aR,5R,6S,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.71g，64%)，为白色固体。
[0248] 采用实施例3所描述的操作，对上述物质(0.710g，2.24mmol)进行苄基保护。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:4)纯化后，获
得((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧 基)-5-(((叔 丁基 二甲 基甲 硅烷 基)氧基) 甲
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.77g，
64%)，为无色粘稠油状物。
得((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧 基)-5-(((叔 丁基 二甲 基甲 硅烷 基)氧基) 甲
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.77g，
64%)，为无色粘稠油状物。
[0249] 采用实施例3所描述的操作，用TBAF对上述物质(0.770g，1.43mmol)进行甲硅烷基脱保护。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:1)纯化后，获得((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并1
[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为无色粘稠泡沫(0.61g，100%)。H NMR(400MHz,CDl3)δ7.33-7.25(m,5H),5.97(d,J=7.2Hz,1H),4.66(d,J=11.6Hz,1H),4.38(d,J=11.6Hz,1H),4.36-4.33(m,1H),3.86(q,J=7.0Hz,2H),3.75-3.71(m,2H),3.60-3.56(m,1H),3.60-3.50(m,1H),2.53-2.49(m,1H),2.06-2.01(m,1H),1.90(t,J=6.7Hz,1H),1.52(s,9H),1.10(t,J=7.0Hz,3H)。
[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为无色粘稠泡沫(0.61g，100%)。H NMR(400MHz,CDl3)δ7.33-7.25(m,5H),5.97(d,J=7.2Hz,1H),4.66(d,J=11.6Hz,1H),4.38(d,J=11.6Hz,1H),4.36-4.33(m,1H),3.86(q,J=7.0Hz,2H),3.75-3.71(m,2H),3.60-3.56(m,1H),3.60-3.50(m,1H),2.53-2.49(m,1H),2.06-2.01(m,1H),1.90(t,J=6.7Hz,1H),1.52(s,9H),1.10(t,J=7.0Hz,3H)。
[0250] 在0℃下，向上述物质(0.098g，0.24mmol)、四丁基溴化铵(TBAB)(5.3mg，0.017mmol)、2,2,6,6-四甲基哌啶-N-氧基(2,2,6,6-tetramethylpiperidine-N-oxyl；
TEMPO)(2.6mg，0.017mmol)、NaHCO3(0.12g,，1.2mmol)在H2O/DCM(3/5mL)中的混合物添加N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)(0.054g，0.30mmol)。将混合物在～12℃下搅拌30min，并用DCM(2×10mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:1)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为米白色泡沫(0.075g，75%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.61(s,1H),7.35-7.26(m,5H),6.00(d,J=7.2Hz,1H),4.67(d,J=11.6Hz,1H),4.49(d,J=
11.6Hz,1H),4.40-4.37(m,1H),4.01-3.98(m,2H),3.85(q,J=7.0Hz,2H),2.62-2.59(m,1H),2.05-2.01(m,1H),1.52(s,9H),1.08(t,J=7.0Hz,3H)。
TEMPO)(2.6mg，0.017mmol)、NaHCO3(0.12g,，1.2mmol)在H2O/DCM(3/5mL)中的混合物添加N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)(0.054g，0.30mmol)。将混合物在～12℃下搅拌30min，并用DCM(2×10mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:1)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为米白色泡沫(0.075g，75%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.61(s,1H),7.35-7.26(m,5H),6.00(d,J=7.2Hz,1H),4.67(d,J=11.6Hz,1H),4.49(d,J=
11.6Hz,1H),4.40-4.37(m,1H),4.01-3.98(m,2H),3.85(q,J=7.0Hz,2H),2.62-2.59(m,1H),2.05-2.01(m,1H),1.52(s,9H),1.08(t,J=7.0Hz,3H)。
[0251] 采用实施例3所描述的操作，用MeMgBr对上述物质(0.065g，0.15mmol)进行处理。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:3)纯化后，获得((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-((R&S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并1
[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.046g，70%)，其中基于 H NMR，非对映异构体比率为1:1.3。
[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.046g，70%)，其中基于 H NMR，非对映异构体比率为1:1.3。
[0252] 采用实施例3所描述的操作，用BCl3对上述物质(0.170g，0.389mmol)进行脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:14)纯化后，获得标题化合物的混合物，为白色固体(0.084g，88%)。然后将混合物经Agilent1200制备-HPLC(色谱柱，C18，19×50mm，5um；流动相，含0.03%NH4OH的水，和CH3CN(在8min内从10%到70%)；检测器，220nm)分离，得到(3aR,5R,6S,7aR)-2-(乙基氨基)-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(26mg)，为白色固体；
1
HNMR(400MHz,D2O)δ6.20(d,J=6.3Hz,1H),4.33-4.28(m,1H),3.93-3.85(m,2H),3.40(dd,J=3.9,7.8Hz,1H),3.33-3.20(m,2H),2.14-2.04(m,2H),1.20(d,J=6.6Hz,3H),1.17+
(t,J=7.2Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]247.0。还分离得到(3aR,5R,6S,7aR)-2-(乙基氨基)-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(22mg)，为
1
白色固体；H NMR(400MHz,D2O)δ6.20(d,J=6.3Hz,1H),4.33-4.31(m,1H),3.95-3.87(m,2H),3.33-3.32(m,1H),3.31-3.19(m,2H),2.12(t,J=4.8Hz,2H),1.20(d,J=6.6Hz,3H),1.17(+
t,J=7.2Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]247.0。
1
HNMR(400MHz,D2O)δ6.20(d,J=6.3Hz,1H),4.33-4.28(m,1H),3.93-3.85(m,2H),3.40(dd,J=3.9,7.8Hz,1H),3.33-3.20(m,2H),2.14-2.04(m,2H),1.20(d,J=6.6Hz,3H),1.17+
(t,J=7.2Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]247.0。还分离得到(3aR,5R,6S,7aR)-2-(乙基氨基)-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(22mg)，为
1
白色固体；H NMR(400MHz,D2O)δ6.20(d,J=6.3Hz,1H),4.33-4.31(m,1H),3.95-3.87(m,2H),3.33-3.32(m,1H),3.31-3.19(m,2H),2.12(t,J=4.8Hz,2H),1.20(d,J=6.6Hz,3H),1.17(+
t,J=7.2Hz,3H)；MS,(ES,m/z)[M+H]247.0。
[0253] 实施例15
[0254] (3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-乙基-7-氟-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0255]
[0256] 在95 ℃ 下 将 如 实 施 例1所 述 获 得 的((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-( 苄 氧基)-7-氟-5-((R&S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯的非对映异构体混合物(0.560g，1.27mmol)和硫代-CDI(90%工业级，0.60g，3.3mmol)在无水DMF(20mL)中搅拌5h。冷却后，减压除去溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:3至1:1)对残留物进行纯化，得到淡黄色粘稠油状物。将粘稠油状物的混合物、Bu3SnH(0.873g，3.00mmol)和ABCN(0.030g，0.12mmol)在无水THF(20mL)中在回流下搅拌4h。冷却后，减压除去溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:4)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-5-乙基-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲1
酸叔丁基酯，为无色油状物(0.28g，52%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.27(m,5H),6.09(d,J=7.3Hz,1H),5.32-5.19(m,1H),4.79(d,J=11.5Hz,1H),4.52(d,J=11.5Hz,1H),4.50-4.46(m,1H),3.54-3.47(m,1H),3.31(s,3H),3.30-3.26(m,1H),1.76-1.70(m,1H),1.53(s,9H),1.45-1.37(m,1H),0.89(t,J=7.4Hz,3H)。
酸叔丁基酯，为无色油状物(0.28g，52%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.27(m,5H),6.09(d,J=7.3Hz,1H),5.32-5.19(m,1H),4.79(d,J=11.5Hz,1H),4.52(d,J=11.5Hz,1H),4.50-4.46(m,1H),3.54-3.47(m,1H),3.31(s,3H),3.30-3.26(m,1H),1.76-1.70(m,1H),1.53(s,9H),1.45-1.37(m,1H),0.89(t,J=7.4Hz,3H)。
[0257] 在N2、-78℃下向上述物质(0.280g，0.660mmol)和PMB(0.30g，2.0mmol)的无水DCM(10mL)溶液中添加BCl3(1.0M在DCM中，2.5mL，2.5mmol)。将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度加温至0℃。将反应混合物在-78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:15)对残留物进行纯化，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-乙基-7-氟-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃1
并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.099g，64%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.30(d,J=6.6Hz,1H),4.72(dt,J=4.9,48.0Hz,1H),4.32-4.25(m,1H),3.57-3.49(m,1H),3.42(dt,J=2
13
.8,8.8Hz,1H),2.84(s,3H),1.89-1.82(m,1H),1.50-1.42(m,1H),0.94(t,J=7.4Hz,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.64(d,J=1.3Hz),96.39(d,J=177.2Hz),91.16(d,J=3.7Hz),75.2
0(d,J=4.7Hz),73.79(d,J=24.7Hz),72.94(d,J=22.3Hz),30.53,26.30,10.11；MS,(ES,m/+
z)[M+H]235.1。
并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.099g，64%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.30(d,J=6.6Hz,1H),4.72(dt,J=4.9,48.0Hz,1H),4.32-4.25(m,1H),3.57-3.49(m,1H),3.42(dt,J=2
13
.8,8.8Hz,1H),2.84(s,3H),1.89-1.82(m,1H),1.50-1.42(m,1H),0.94(t,J=7.4Hz,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.64(d,J=1.3Hz),96.39(d,J=177.2Hz),91.16(d,J=3.7Hz),75.2
0(d,J=4.7Hz),73.79(d,J=24.7Hz),72.94(d,J=22.3Hz),30.53,26.30,10.11；MS,(ES,m/+
z)[M+H]235.1。
[0258] 实施例16&17
[0259] (3aR,5R,6S,7aR)-5-((S)-1-羟 基 乙 基 )-2-(甲 基 氨 基 )-5,6,7,7a- 四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5R,6S,7aR)-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0260]
[0261] 采用实施例 20 所描述的操作，用 BCl3对上文所述物质1-((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)乙醇(0.180g，0.558mmol)进行脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:12)纯化后，获得(3aR,5R,6S,7aR)-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.105g，81%)，并且为对映异构体的混合物。
[0262] 通过制备-HPLC在以下条件下对上文的非对映异构体混合物(95mg，0.41mmol)进行分离：[(Agilent1200)：色谱柱，X-Bridge C18；流动相，50mmol/L NH4HCO3的含0.05%NH4OH的水溶液和CH3CN(在10min内CH3CN从5%直到20%)；检测器，220nm UV]，得到(3aR,5R,6S,7aR)-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡
喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较快洗脱出来的异构体，33.8mg)，为白色固体。(ES,m/z)：
+ 1
[M+H]233.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.12(d,J=6.6Hz,1H),4.34-4.39(m,1H),3.88-3.94(m,1H),3.77-3.85(m,1H),3.12-3.16(m,1H),2.76(s,3H),2.04-2.08(m,2H),1.12(d,J=6.6Hz,3H)。(3aR,5R,6S,7aR)-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较慢洗脱出来的异构体，21.7mg)，为白色固体。(ES,m/z)：
+ 1
[M+H]233.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.15(d,J=6.6Hz,1H),4.36-4.40(m,1H),3.90-3.99(m,2H),3.35-3.39(m,1H),2.78(s,3H),2.01-2.09(m,2H),1.09(d,J=6.6Hz,3H)。
喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较快洗脱出来的异构体，33.8mg)，为白色固体。(ES,m/z)：
+ 1
[M+H]233.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.12(d,J=6.6Hz,1H),4.34-4.39(m,1H),3.88-3.94(m,1H),3.77-3.85(m,1H),3.12-3.16(m,1H),2.76(s,3H),2.04-2.08(m,2H),1.12(d,J=6.6Hz,3H)。(3aR,5R,6S,7aR)-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较慢洗脱出来的异构体，21.7mg)，为白色固体。(ES,m/z)：
+ 1
[M+H]233.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.15(d,J=6.6Hz,1H),4.36-4.40(m,1H),3.90-3.99(m,2H),3.35-3.39(m,1H),2.78(s,3H),2.01-2.09(m,2H),1.09(d,J=6.6Hz,3H)。
[0263] 实施例18&19
[0264] (3aR,5R,6S,7aR)-2-(二甲基 氨基)-5-((S)-1-羟 基乙基)-5,6,7,7a- 四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5R,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0265]
[0266] 在0℃下向(3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-甲醛(1.04g)的无水THF(30mL)溶液中逐滴添加MeMgBr溶液(1.4M在1:3THF/甲苯中，5.80mL，8.13mmol)。然后将反应在室温下搅拌20h。将混合物用H2O(50mL)稀释，用EtOAc(2×40mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂，并通过硅胶柱层析法对残留物进行纯化，用2%-5%2M NH3MeOH在DCM中的溶液洗脱，得到1-((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃
1
并[3,2-d]噻唑-5-基)乙醇(0.840g，77%)，为淡黄色泡沫。MS m/z337.2(M+1，100%)；H NMR(400MHz，CDCl3)显示这是比率为～60:40的两种非对映异构体的混合物。
1
并[3,2-d]噻唑-5-基)乙醇(0.840g，77%)，为淡黄色泡沫。MS m/z337.2(M+1，100%)；H NMR(400MHz，CDCl3)显示这是比率为～60:40的两种非对映异构体的混合物。
[0267] 在-78℃下向上述物质(0.260g，0.774mmol)的DCM(5mL)溶液中添加BCl3的DCM溶液(1.0M，1.55mL，1.55mmol)。将混合物缓慢加温升高至室温并搅拌17h。将反应再次冷却至-78℃，并逐滴添加MeOH-DCM的1:1混合物(2mL)以淬灭反应。蒸发溶剂并将残留物用MeOH再处理3次。通过硅胶柱层析法对粗产物进行纯化，用2%-5% 2M NH3 MeOH在DCM中的溶液洗脱，得到(3aR,5R,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(0.086g，45%)，为白色固体。MS m/z247.1(M+1，100%)；1
H NMR(400MHz，MeOD)显示出这是比率为～60:40的两种非对映异构体的混合物。
H NMR(400MHz，MeOD)显示出这是比率为～60:40的两种非对映异构体的混合物。
[0268] 通过制备-HPLC采用以下条件[(Agilent1200制备HPLC；色谱柱：Sun Fire Prep C18，19*50mm 5um；流动相：含0.03% NH4OH的水，和CH3CN(在10min内5% CH3CN直到35%；检测器：UV220nm))]对上述混合物(77.3mg)进行分离，得到(3aR,5R,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较快
+ 1
洗脱出来的异构体)，为白色固体(26.3mg)；[M+H]247.1；H NMR(300MHz，D2O)δ6.22(d，J=6.9Hz，1H)，4.43-4.48(m，1H)，3.93-3.97(m，1H)，3.80-3.85(m，1H)，3.16-3.20(m，1H)，
3.04(s，6H)，2.05-2.12(m，2H)，1.13(d，J=6.6Hz，3H)；和(3aR,5R,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较慢洗脱+ 1
出来的异构体)，为白色固体(18mg)。[M+H]247.1；H NMR(300MHz,D2O)δ6.23(d,J=6.9Hz,1H),4.47-4.49(m,1H),3.95-4.05(m,1H),3.91-3.94(m,1H),3.38-3.41(m,1H),3.06(s,6H),1.97-2.12(m,2H),1.08(d,J=6.3Hz,3H)。
+ 1
洗脱出来的异构体)，为白色固体(26.3mg)；[M+H]247.1；H NMR(300MHz，D2O)δ6.22(d，J=6.9Hz，1H)，4.43-4.48(m，1H)，3.93-3.97(m，1H)，3.80-3.85(m，1H)，3.16-3.20(m，1H)，
3.04(s，6H)，2.05-2.12(m，2H)，1.13(d，J=6.6Hz，3H)；和(3aR,5R,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较慢洗脱+ 1
出来的异构体)，为白色固体(18mg)。[M+H]247.1；H NMR(300MHz,D2O)δ6.23(d,J=6.9Hz,1H),4.47-4.49(m,1H),3.95-4.05(m,1H),3.91-3.94(m,1H),3.38-3.41(m,1H),3.06(s,6H),1.97-2.12(m,2H),1.08(d,J=6.3Hz,3H)。
[0269] 实施例20&21
[0270] (3aR,5S,6S,7aR)-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((R)-2,2,2- 三 氟 -1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇[0271]
[0272] 将((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-7-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯(5.00g，
9.21mmol)和硫代-CDI(90%工业级，3.40g，19.1mmol)在无水DMF(30mL)中的混合物在
95℃下搅拌4h。冷却后，减压除去溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，
1:10至2:3)对残留物进行纯化，得到(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-((1H-咪唑-1-硫代碳酰基)氧基)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-5,6,7,7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯，为淡黄色固体(5.60g，93%)。H
NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(s,1H),8.03-8.01(m,2H),7.97-7.95(m,2H),7.64-7.60(m,1H),7.54-7.50(m,1H),7.45(t,J=7.7Hz,2H),7.34(t,J=7.7Hz,2H),7.02(s,1H),6.38-6.37(m,1H),6.15(d,J=7.1Hz,1H),5.56(td,J=1.2,9.2Hz,1H),4.70-4.67(m,1H),4.58(dd,J=3.2,12.1Hz,1H),4.42(dd,J=5.1,12.1Hz,1H),4.08-4.03(m,1H),3.43(s,3H),1.56(s,9H)。
9.21mmol)和硫代-CDI(90%工业级，3.40g，19.1mmol)在无水DMF(30mL)中的混合物在
95℃下搅拌4h。冷却后，减压除去溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，
1:10至2:3)对残留物进行纯化，得到(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-((1H-咪唑-1-硫代碳酰基)氧基)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-5,6,7,7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯，为淡黄色固体(5.60g，93%)。H
NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(s,1H),8.03-8.01(m,2H),7.97-7.95(m,2H),7.64-7.60(m,1H),7.54-7.50(m,1H),7.45(t,J=7.7Hz,2H),7.34(t,J=7.7Hz,2H),7.02(s,1H),6.38-6.37(m,1H),6.15(d,J=7.1Hz,1H),5.56(td,J=1.2,9.2Hz,1H),4.70-4.67(m,1H),4.58(dd,J=3.2,12.1Hz,1H),4.42(dd,J=5.1,12.1Hz,1H),4.08-4.03(m,1H),3.43(s,3H),1.56(s,9H)。
[0273] 在90 ℃ 下 将 上 述 物 质(5.60g，8.58mmol)、Bu3SnH(5.84g，17.0mmol) 和ABCN(0.15g，0.60mmol)在混合的无水甲苯/THF(50/50mL)中的混合物搅拌16h。冷却后，减压除去溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲基苯甲酸酯，为白色固体1
(3.20g，71%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03-7.98(m,4H),7.58-7.49(m,2H),7.44-7.40(m,4H),6.08(d,J=7.3Hz,1H),5.44-5.40(m,1H),4.49-4.40(m,3H),4.07-4.03(m,1H),3.35(s,3H),2.64-2.59(m,1H),2.44-2.37(m,1H),1.56(s,9H)。
(3.20g，71%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03-7.98(m,4H),7.58-7.49(m,2H),7.44-7.40(m,4H),6.08(d,J=7.3Hz,1H),5.44-5.40(m,1H),4.49-4.40(m,3H),4.07-4.03(m,1H),3.35(s,3H),2.64-2.59(m,1H),2.44-2.37(m,1H),1.56(s,9H)。
[0274] 在室温下将上述物质(3.20g，6.08mmol)和K2CO3(0.840g，6.08mmol)在无水MeOH(40mL)中的混合物搅拌3h。添加干冰，并在减压下除去溶剂。在硅胶上通过快速柱层析法(MeOH/DCM，1:50至1:20)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7aR)-6-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，1
为白色固体(1.82g，94%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.91(d,J=6.9Hz,1H),4.36-4.32(m,1H),3.89-3.85(m,1H),3.81-3.75(m,1H),3.65-3.59(m,1H),3.38-3.34(m,1H),3.33(s,3H),
2.48-2.43(m,1H),2.32(d,J=10.7Hz,1H),2.17-2.11(m,1H),1.84(t,J=6.3Hz,1H),1.54(s,9H)。
为白色固体(1.82g，94%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.91(d,J=6.9Hz,1H),4.36-4.32(m,1H),3.89-3.85(m,1H),3.81-3.75(m,1H),3.65-3.59(m,1H),3.38-3.34(m,1H),3.33(s,3H),
2.48-2.43(m,1H),2.32(d,J=10.7Hz,1H),2.17-2.11(m,1H),1.84(t,J=6.3Hz,1H),1.54(s,9H)。
[0275] 在0℃下，向上述物质(1.82g，5.72mmol)和咪唑(1.17g，17.2mmol)的无水DMF(30mL)溶液中添加TBDMSCl(0.952g，6.32mmol)。将混合物在室温下搅拌16h，并用Et2O(100mL)和盐水(100mL)稀释。收集有机层，并将水层用Et2O(50mL)萃取。将合并的萃取物用H2O(50mL)洗涤，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为无色粘稠油状物1
(2.30g，93%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.92(d,J=6.8Hz,1H),4.31-4.28(m,1H),3.92-3.9
0(m,1H),3.73(d,J=4.6Hz,2H),3.35-3.31(m,1H),3.33(s,3H),2.41(d,J=9.4Hz,1H),2.41-2.36(m,1H),2.18-2.12(m,1H),1.54(s,9H),0.89(s,9H),0.06(s,6H)。
(2.30g，93%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.92(d,J=6.8Hz,1H),4.31-4.28(m,1H),3.92-3.9
0(m,1H),3.73(d,J=4.6Hz,2H),3.35-3.31(m,1H),3.33(s,3H),2.41(d,J=9.4Hz,1H),2.41-2.36(m,1H),2.18-2.12(m,1H),1.54(s,9H),0.89(s,9H),0.06(s,6H)。
[0276] 在0℃下，向上述物质(2.78g，6.45mmol)和Bu4NI(0.238g，0.645mmol)的无水DMF(25mL)溶液中添加NaH(60%在矿物油中，0.335g，8.38mmol)。添加NaH后，向反应混合物添加BnBr(1.93g，11.3mmol)。将混合物在室温下搅拌16h，并用Et2O(100mL)和饱和NH4Cl(100mL)稀释。收集有机层，并将水层用Et2O(2×40mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(80mL)洗涤，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:4)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并1
[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为无色粘稠油状物(2.76g，82%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),6.02(d,J=7.1Hz,1H),4.67(d,J=11.6Hz,1H),4.4
0(d,J=11.6Hz,1H),4.34-4.30(m,1H),3.83-3.78(m,1H),3.77-3.69(m,2H),3.53-3.50(m,
1H),3.29(s,3H),2.44-2.39(m,1H),2.14-2.08(m,1H),1.52(s,9H),0.88(s,9H),0.04(s,
6H)。
[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为无色粘稠油状物(2.76g，82%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),6.02(d,J=7.1Hz,1H),4.67(d,J=11.6Hz,1H),4.4
0(d,J=11.6Hz,1H),4.34-4.30(m,1H),3.83-3.78(m,1H),3.77-3.69(m,2H),3.53-3.50(m,
1H),3.29(s,3H),2.44-2.39(m,1H),2.14-2.08(m,1H),1.52(s,9H),0.88(s,9H),0.04(s,
6H)。
[0277] 在0℃下，向上述物质(2.7g，5.2mmol)的THF(20mL)溶液中添加TBAF(1.0M在THF中，12.0mL，12.0mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌2h，并用EtOAc(40mL)和盐水(80mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:1)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为无色粘稠泡沫(2.0g，1
94%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.27(m,5H),6.01(d,J=7.2Hz,1H),4.69(d,J=11.6Hz,1H),4.40(d,J=11.6Hz,1H),4.36-4.34(m,1H),3.77-3.72(m,2H),3.62-3.54(m,2H),3.30(s,3H),2.53-2.48(m,1H),2.09-2.02(m,1H),1.71(t,J=6.3Hz,1H),1.53(s,9H)。
94%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.27(m,5H),6.01(d,J=7.2Hz,1H),4.69(d,J=11.6Hz,1H),4.40(d,J=11.6Hz,1H),4.36-4.34(m,1H),3.77-3.72(m,2H),3.62-3.54(m,2H),3.30(s,3H),2.53-2.48(m,1H),2.09-2.02(m,1H),1.71(t,J=6.3Hz,1H),1.53(s,9H)。
[0278] 在0℃下，向上述物质(0.663g，1.62mmol)的DCM(20mL)溶液中添加DMP(1.17g，2.76mmol)。在室温下搅拌1.5h后，将反应混合物用Et2O(30mL)稀释，然后浓缩至干。添加含Na2S2O3(2g)的饱和NaHCO3水溶液(30mL)，并将混合物用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为
1
白色泡沫(0.57g，86%)。H NMR(500MHz,CDCl3)δ9.63(s,1H),7.36-7.27(m,5H),6.04(d,J=7.2Hz,1H),4.69(d,J=11.5Hz,1H),4.50(d,J=11.5Hz,1H),4.43-4.39(m,1H),4.07(d,J=8.0Hz),4.02-3.99(m,1H),3.29(s,3H),2.64-2.59(m,1H),2.10-2.03(m,1H),1.53(s,9H)。
1
白色泡沫(0.57g，86%)。H NMR(500MHz,CDCl3)δ9.63(s,1H),7.36-7.27(m,5H),6.04(d,J=7.2Hz,1H),4.69(d,J=11.5Hz,1H),4.50(d,J=11.5Hz,1H),4.43-4.39(m,1H),4.07(d,J=8.0Hz),4.02-3.99(m,1H),3.29(s,3H),2.64-2.59(m,1H),2.10-2.03(m,1H),1.53(s,9H)。
[0279] 向上述物质(0.17g，0.42mmol)和TMSCF3(0.12g，0.84mmol)的无水THF(6mL)溶液添加TBAF(1.0M在THF中，0.020mL，0.020mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌2h。添加另一批TBAF(1.0M在THF中，0.60mL，0.60mmol)，并将混合物在室温下再搅拌16h。然后将反应溶液用EtOAc(20mL)和盐水(30mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(20mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:4至1:1)对残留物进行纯化和分离，得到((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.060g，30%)，为淡黄1
色油状物；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.33-7.27(m,5H),6.01(d,J=7.4Hz,1H),4.69(d,J=11.0Hz,1H),4.43-4.35(m,2H),4.08-3.99(m,2H),3.75(dd,J=5.6,7.9Hz,1H),3.26(s,3H),2.63-2.57(m,1H),2.09-2.03(m,1H),1.52(s,9H)。还分离得到((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]
1
噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.052g，26%)，为淡黄色油状物；H
NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),6.05(d,J=7.2Hz,1H),4.79(d,J=11.5Hz,1H),4.4
1(d,J=11.5Hz,1H),4.35-4.31(m,1H),4.03-3.98(m,1H),3.93-3.89(m,1H),3.77(d,J=8.6Hz,1H),3.29(s,3H),2.45-2.39(m,1H),2.15-2.09(m,1H),1.52(s,9H)。
色油状物；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.33-7.27(m,5H),6.01(d,J=7.4Hz,1H),4.69(d,J=11.0Hz,1H),4.43-4.35(m,2H),4.08-3.99(m,2H),3.75(dd,J=5.6,7.9Hz,1H),3.26(s,3H),2.63-2.57(m,1H),2.09-2.03(m,1H),1.52(s,9H)。还分离得到((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]
1
噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.052g，26%)，为淡黄色油状物；H
NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),6.05(d,J=7.2Hz,1H),4.79(d,J=11.5Hz,1H),4.4
1(d,J=11.5Hz,1H),4.35-4.31(m,1H),4.03-3.98(m,1H),3.93-3.89(m,1H),3.77(d,J=8.6Hz,1H),3.29(s,3H),2.45-2.39(m,1H),2.15-2.09(m,1H),1.52(s,9H)。
[0280] 在 -78 ℃、N2下 向 在 无 水 DCM(5mL)中 的 ((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄 氧基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.052g，0.11mmol)和PMB(0.10g，0.67mmol)
添加BCl3(1.0M在DCM中，0.60mL，0.60mmol)。将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度加温至0℃。将反应混合物在-78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后
浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:12)对残留物
进行纯化，得到(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙
1
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.023g，74%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.21(d,J=6.4Hz,1H),4.29-4.24(m,1H),4.21-4.15(m,1H),4.01-3.96(m,1H),3.70(d,J=8.8Hz,1H),2.83(s,3H),2.22-2.16(m,1H),2.08-2.01(m,1H)；
13
CNMR(100MHz,CD3OD)δ163.69,126.47(q,J=281.2Hz),91.73,73.5(br.),69.62(q,J=30.+
1Hz),69.34,64.60,35.16,30.60；MS,(ES,m/z)[M+H]287.1。
添加BCl3(1.0M在DCM中，0.60mL，0.60mmol)。将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度加温至0℃。将反应混合物在-78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后
浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:12)对残留物
进行纯化，得到(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙
1
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.023g，74%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.21(d,J=6.4Hz,1H),4.29-4.24(m,1H),4.21-4.15(m,1H),4.01-3.96(m,1H),3.70(d,J=8.8Hz,1H),2.83(s,3H),2.22-2.16(m,1H),2.08-2.01(m,1H)；
13
CNMR(100MHz,CD3OD)δ163.69,126.47(q,J=281.2Hz),91.73,73.5(br.),69.62(q,J=30.+
1Hz),69.34,64.60,35.16,30.60；MS,(ES,m/z)[M+H]287.1。
[0281] 在N2、-78 ℃ 下，向 在 无 水 DCM(4mL) 中 的 ((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄 氧基)-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.060g，0.13mmol)和PMB(0.10g，0.67mmol)添加BCl3(1.0M在DCM中，0.60mL，0.60mmol)。将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度加温至0℃。将反应混合物在-78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过纯化快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:12)对残留物进行纯化，得到(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四
1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.030g，82%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.15(d,J=6.5Hz,1H),4.38-4.34(m,1H),4.11-4.07(m,1H),4.05-3.98(m,1H),3.68(dd,J=5
13
.6,7.1Hz),2.84(s,3H),2.20-2.09(m,2H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.99,126.24(q,J=
280.7Hz),91.08,75.0(br.),72.12(q,J=29.7Hz),70.17,67.00,33.65,30.80；MS,(ES,m/+
z)[M+H]287.1。
1
氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.030g，82%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.15(d,J=6.5Hz,1H),4.38-4.34(m,1H),4.11-4.07(m,1H),4.05-3.98(m,1H),3.68(dd,J=5
13
.6,7.1Hz),2.84(s,3H),2.20-2.09(m,2H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.99,126.24(q,J=
280.7Hz),91.08,75.0(br.),72.12(q,J=29.7Hz),70.17,67.00,33.65,30.80；MS,(ES,m/+
z)[M+H]287.1。
[0282] 实施例22&23
[0283] (3aR,5S,6S,7aR)-2-( 二 甲 基 氨 基)-5-((R)-2,2,2- 三 氟 -1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5S,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇[0284]
[0285] 在室温下向(3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-甲醛(0.650g)的无水THF(15mL)溶液中 添加TMSCF3(0.750mL，5.08mmol)，接着添加TBAF(1.0M在THF中，0.10mL，0.10mmol)。将反应在室温下搅拌2h。添加另一份2.50mL的TBAF(1.0M在THF中)，并将混合物在室温下搅拌18h。将溶液用饱和NaHCO3水溶液(30mL)稀释，用EtOAc(2×20mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂，通过硅胶柱层析法对残留物进行纯化，用
1%-3%2MNH3MeOH在DCM中的溶液洗脱，得到1-((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)-2,2,2-三氟乙醇(0.274g，
1
35%)，为淡黄色泡沫。MS m/z391.1(M+1,100%)。基于其 H NMR(400MHz,CDCl3)光谱，估计两种对映异构体的比率为70:30。
1%-3%2MNH3MeOH在DCM中的溶液洗脱，得到1-((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)-2,2,2-三氟乙醇(0.274g，
1
35%)，为淡黄色泡沫。MS m/z391.1(M+1,100%)。基于其 H NMR(400MHz,CDCl3)光谱，估计两种对映异构体的比率为70:30。
[0286] 在-78℃下向上述物质(0.260g，0.774mmol)的DCM(5mL)溶液中添加BCl3的DCM溶液(1.0M，1.34mL，1.34mmol)。将混合物缓慢加温升至室温，并搅拌17h。将反应再次冷却至-78℃，并逐滴添加MeOH-DCM的1:1混合物(2mL)以淬灭反应。蒸发溶剂，并将残留物用MeOH再处理三次。通过硅胶柱层析法对粗产物进行纯化，用2%-5%2M NH3MeOH在DCM中的溶液洗脱，得到(3aR,5S,6S,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(0.044g，22%)，为淡黄色泡沫。MS1
m/z 301.1(M+1,100%)。基于其 H NMR(400MHz,MeOD)光谱，估计两种非对映异构体的比率为70:30。
m/z 301.1(M+1,100%)。基于其 H NMR(400MHz,MeOD)光谱，估计两种非对映异构体的比率为70:30。
[0287] 实施例24&25
[0288] (3aR,5S,6R,7R,7aR)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨 基 )-5-((R)-1,1,1- 三氟-2- 羟 基 丙 烷 -2-基 )-5,6,7,7a- 四 氢-3aH- 吡 喃 并 [3,2-d]噻 唑 -6- 醇和(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7- 氟-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((S)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0289]
[0290] 在0 ℃ 和N2下，向 ((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-( 苄 氧 基 )-7- 氟-5- 甲 酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.930g，2.19mmol)的无水THF(15mL)溶液中添加MeMgBr(1.4M在THF/甲苯中，3.0mL，5.2mmol)。
添加后，将混合物在室温下搅拌3h。将反应用饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭，然后用EtOAc(3×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并将残留物溶解于DCM(40mL)，并添加Boc2O(2.0g，9.2mmol)。将混合物在室温下搅拌16h。浓缩后，在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为米白色泡沫(0.767g，80%)，其含有两种非对映异构体。
添加后，将混合物在室温下搅拌3h。将反应用饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭，然后用EtOAc(3×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并将残留物溶解于DCM(40mL)，并添加Boc2O(2.0g，9.2mmol)。将混合物在室温下搅拌16h。浓缩后，在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为米白色泡沫(0.767g，80%)，其含有两种非对映异构体。
[0291] 采用实施例29所描述的操作，用DMP对上述物质(0.767g，1.74mmol)进行氧化。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)纯化后，获得((3aR,5S,6R,7R,7aR)-5-乙酰基 -6-(苄氧基)-7- 氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡 喃
1
并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.39g，51%)。H
NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),6.14(d,J=7.2Hz,1H),5.37-5.25(m,1H),4.76(d,J=11.2Hz,1H),4.65(d,J=11.2Hz,1H),4.57-4.55(m,1H),4.07-4.00(m,1H),3.86(d,J=8.5Hz,1H),3.26(s,3H),2.19(s,3H),1.53(s,9H)。
1
并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.39g，51%)。H
NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),6.14(d,J=7.2Hz,1H),5.37-5.25(m,1H),4.76(d,J=11.2Hz,1H),4.65(d,J=11.2Hz,1H),4.57-4.55(m,1H),4.07-4.00(m,1H),3.86(d,J=8.5Hz,1H),3.26(s,3H),2.19(s,3H),1.53(s,9H)。
[0292] 如实施例29所述，对上述物质(0.375g，0.856mmol)进行TMSCF3加成。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:20至1:4)对产物混合物进行纯化和分离，得到((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基
1
酯(0.13g，30%)，为白色泡沫；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.29(m,5H),6.18(d,J=7.3Hz,1H),5.55-5.44(m,1H),4.84(d,J=10.6Hz,1H),4.65-4.62(m,1H),4.49(d,J=10.6Hz,1H),4.08-4.01(m,1H),3.63(d,J=8.5Hz,1H),3.32(s,3H),3.14(s,1H),1.53(s,9H),1.32(s,
3H)。还分离得到((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁
1
基酯(0.20g，46%)，为白色泡沫；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.30(m,5H),6.15(d,J=7.2Hz,1H),5.57-5.46(m,1H),4.83(d,J=10.6Hz,1H),4.64-4.62(m,1H),4.52(d,J=10.6Hz,1H),4.08-4.01(m,1H),3.64(d,J=8.6Hz,1H),3.34(s,3H),3.00(s,1H),1.54(s,9H),1.34(s,
3H)。
1
酯(0.13g，30%)，为白色泡沫；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.29(m,5H),6.18(d,J=7.3Hz,1H),5.55-5.44(m,1H),4.84(d,J=10.6Hz,1H),4.65-4.62(m,1H),4.49(d,J=10.6Hz,1H),4.08-4.01(m,1H),3.63(d,J=8.5Hz,1H),3.32(s,3H),3.14(s,1H),1.53(s,9H),1.32(s,
3H)。还分离得到((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁
1
基酯(0.20g，46%)，为白色泡沫；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.30(m,5H),6.15(d,J=7.2Hz,1H),5.57-5.46(m,1H),4.83(d,J=10.6Hz,1H),4.64-4.62(m,1H),4.52(d,J=10.6Hz,1H),4.08-4.01(m,1H),3.64(d,J=8.6Hz,1H),3.34(s,3H),3.00(s,1H),1.54(s,9H),1.34(s,
3H)。
[0293] 采用实施例20所描述的操作，用BCl3对上述物质((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.130g，0.256mmol)进行
脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:15)纯化后，获
得(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7- 氟-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((S)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.073g，90%)。
1
H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.32(d,J=6.8Hz,1H),5.04-4.91(m,1H),4.55-4.50(m,1H),4.20-
13
4.13(m,1H),3.61(d,J=8.5Hz,1H),2.86(s,3H),1.36(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.36(d,J=2.5Hz),127.43(q,J=285.3Hz),93.67(d,J=177.4Hz),89.21,75.77(q,J=27.0Hz),74.71(d,J=1.4Hz),73.70(d,J=26.7Hz),68.14(d,J=25.0Hz),30.90,18.90(q,J=2.1Hz)；
+
MS,(ES,m/z)[M+H]318.1。
脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:15)纯化后，获
得(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7- 氟-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((S)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.073g，90%)。
1
H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.32(d,J=6.8Hz,1H),5.04-4.91(m,1H),4.55-4.50(m,1H),4.20-
13
4.13(m,1H),3.61(d,J=8.5Hz,1H),2.86(s,3H),1.36(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.36(d,J=2.5Hz),127.43(q,J=285.3Hz),93.67(d,J=177.4Hz),89.21,75.77(q,J=27.0Hz),74.71(d,J=1.4Hz),73.70(d,J=26.7Hz),68.14(d,J=25.0Hz),30.90,18.90(q,J=2.1Hz)；
+
MS,(ES,m/z)[M+H]318.1。
[0294] 采用实施例20所描述的操作，用BCl3对上述物质((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.200g，0.394mmol)进行
脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:15)纯化后，获
得(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7- 氟-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((R)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.114g，91%)。
1
H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.29(d,J=6.8Hz,1H),5.05-4.93(m,1H),4.55-4.51(m,1H),4.15-
13
4.08(m,1H),3.73(d,J=8.6Hz,1H),2.85(s,3H),1.34(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.35(d,J=2.7Hz),127.35(q,J=284.3Hz),93.14(d,J=175.8Hz),89.65,75.73(q,J=27.3Hz),73.40(d,J=27.2Hz),72.90,68.88(d,J=25.6Hz),30.85,16.75(q,J=1.3Hz)；MS,(ES,m/z)+
[M+H]318.1。
脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:15)纯化后，获
得(3aR,5S,6R,7R,7aR)-7- 氟-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((R)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.114g，91%)。
1
H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.29(d,J=6.8Hz,1H),5.05-4.93(m,1H),4.55-4.51(m,1H),4.15-
13
4.08(m,1H),3.73(d,J=8.6Hz,1H),2.85(s,3H),1.34(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.35(d,J=2.7Hz),127.35(q,J=284.3Hz),93.14(d,J=175.8Hz),89.65,75.73(q,J=27.3Hz),73.40(d,J=27.2Hz),72.90,68.88(d,J=25.6Hz),30.85,16.75(q,J=1.3Hz)；MS,(ES,m/z)+
[M+H]318.1。
[0295] 实施例26&27
[0296] (3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-( 乙 基 氨 基 )-7- 氟 -5-((R)-1,1,1- 三氟-2- 羟 基 丙 烷 -2-基 )-5,6,7,7a- 四 氢-3aH- 吡 喃 并 [3,2-d]噻 唑 -6- 醇和(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-( 乙 基 氨 基 )-7-氟 -5-((S)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0297]
[0298] 如实施例24所述对醛((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.42g，
0.96mmol)进行MeMgBr加成。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:3)纯化之后，获得((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.30g，
69%)，其含有两种非对映异构体。
0.96mmol)进行MeMgBr加成。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:3)纯化之后，获得((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.30g，
69%)，其含有两种非对映异构体。
[0299] 采用实施例29所描述的操作，将上述物质(0.30g，0.66mmol)用DMP氧化。在硅胶上通过自动快速柱层析法((EtOAc/己烷，1:10至1:2)纯化后，获得
((3aR,5S,6R,7R,7aR)-5-乙酰基 -6-(苄氧基)-7- 氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡 喃
1
并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为澄清油状物(0.20g，67%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.27(m,5H),6.14(d,J=7.2Hz,1H),5.43-5.32(m,1H),4.77(d,J=11.1Hz,1H),4.65(d,J=11.1Hz,1H),4.60-4.55(m,1H),4.07-4.00(m,1H),3.92-3.85(m,
2H),3.84(d,J=8.3Hz,1H),2.19(s,3H),1.53(s,9H),1.08(t,J=7.0Hz,3H)。
((3aR,5S,6R,7R,7aR)-5-乙酰基 -6-(苄氧基)-7- 氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡 喃
1
并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为澄清油状物(0.20g，67%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.27(m,5H),6.14(d,J=7.2Hz,1H),5.43-5.32(m,1H),4.77(d,J=11.1Hz,1H),4.65(d,J=11.1Hz,1H),4.60-4.55(m,1H),4.07-4.00(m,1H),3.92-3.85(m,
2H),3.84(d,J=8.3Hz,1H),2.19(s,3H),1.53(s,9H),1.08(t,J=7.0Hz,3H)。
[0300] 如实施例29所述，对上述物质(0.200g，0.442mmol)进行TMSCF3加成。在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:20至1:4)对产物混合物进行纯化和分离，得到((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁
1
基酯(0.057g，25%)，为白色泡沫；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.28(m,5H),6.13(d,J=7.4Hz,1H),5.45-5.33(m,1H),4.77(d,J=10.9Hz,1H),4.62-4.58(m,1H),4.52(d,J=10.9Hz,1H),4.05-3.98(m,1H),3.86-3.81(m,2H),3.58(d,J=8.7Hz,1H),3.20(s,1H),1.5
3(s,9H),1.32(s,3H),1.05(t,J=7.0Hz,3H)。还分离得到((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.10g，43%)，为白色泡沫；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.29(m,5H),6.09(d,J=7.4Hz,1H),5.46-5.34(m,1H),4.78(d,J=10.9Hz,1H),4.62-4.57(m,1H),4.53(d,J=10.9Hz,1H),4.06-3.99(m,1H),3.91-3.79(m,
2H),3.57(d,J=8.9Hz,1H),3.15(s,1H),1.53(s,9H),1.34(s,3H),1.06(t,J=7.0Hz,3H)。
1
基酯(0.057g，25%)，为白色泡沫；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.28(m,5H),6.13(d,J=7.4Hz,1H),5.45-5.33(m,1H),4.77(d,J=10.9Hz,1H),4.62-4.58(m,1H),4.52(d,J=10.9Hz,1H),4.05-3.98(m,1H),3.86-3.81(m,2H),3.58(d,J=8.7Hz,1H),3.20(s,1H),1.5
3(s,9H),1.32(s,3H),1.05(t,J=7.0Hz,3H)。还分离得到((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.10g，43%)，为白色泡沫；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.29(m,5H),6.09(d,J=7.4Hz,1H),5.46-5.34(m,1H),4.78(d,J=10.9Hz,1H),4.62-4.57(m,1H),4.53(d,J=10.9Hz,1H),4.06-3.99(m,1H),3.91-3.79(m,
2H),3.57(d,J=8.9Hz,1H),3.15(s,1H),1.53(s,9H),1.34(s,3H),1.06(t,J=7.0Hz,3H)。
[0301] 采用实施例20所描述的操作，用BCl3对上述物质((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.057g，0.11mmol)进行
脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:17)纯化后，获
得(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-( 乙 基 氨 基 )-7-氟 -5-((S)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.031g，85%)。
1
H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.30(d,J=6.8Hz,1H),5.03-4.90(m,1H),4.54-4.49(m,1H),4.20-4.13(m,1H),3.61(d,J=8.5Hz,1H),3.30-3.22(m,2H),1.36(s,3H),1.17(t,J=7.2Hz,3H)；
13
C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.48(d,J=1.7Hz),127.48(q,J=285.5Hz),93.70(d,J=177.4Hz),88.94,75.79(q,J=27.0Hz),74.76(d,J=1.4Hz),73.79(d,J=26.7Hz),68.15(d,J=25.1+
Hz),40.02,18.92(q,J=2.2Hz),14.95；MS,(ES,m/z)[M+H]333.1。
脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:17)纯化后，获
得(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-( 乙 基 氨 基 )-7-氟 -5-((S)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.031g，85%)。
1
H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.30(d,J=6.8Hz,1H),5.03-4.90(m,1H),4.54-4.49(m,1H),4.20-4.13(m,1H),3.61(d,J=8.5Hz,1H),3.30-3.22(m,2H),1.36(s,3H),1.17(t,J=7.2Hz,3H)；
13
C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.48(d,J=1.7Hz),127.48(q,J=285.5Hz),93.70(d,J=177.4Hz),88.94,75.79(q,J=27.0Hz),74.76(d,J=1.4Hz),73.79(d,J=26.7Hz),68.15(d,J=25.1+
Hz),40.02,18.92(q,J=2.2Hz),14.95；MS,(ES,m/z)[M+H]333.1。
[0302] 采用实施例20所描述的操作，用BCl3对上述物质((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.100g，0.191mmol)进行
脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:17)纯化后，获
得(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-( 乙 基 氨 基 )-7-氟 -5-((R)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.053g，84%)。
1
H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.26(d,J=6.8Hz,1H),5.04-4.92(m,1H),4.54-4.50(m,1H),4.15-4.07(m,1H),3.73(d,J=8.6Hz,1H),3.34-3.21(m,2H),1.33(s,3H),1.17(t,J=7.2Hz,3H)；
13
C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.47(d,J=2.2Hz),127.40(q,J=284.2Hz),93.11(d,J=175.6Hz),89.36,75.75(q,J=27.3Hz),73.50(d,J=27.2Hz),72.90,68.94(d,J=25.7Hz),39.95,16.+
72(q,J=1.5Hz),14.98；MS,(ES,m/z)[M+H]333.1。
脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:17)纯化后，获
得(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-( 乙 基 氨 基 )-7-氟 -5-((R)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.053g，84%)。
1
H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.26(d,J=6.8Hz,1H),5.04-4.92(m,1H),4.54-4.50(m,1H),4.15-4.07(m,1H),3.73(d,J=8.6Hz,1H),3.34-3.21(m,2H),1.33(s,3H),1.17(t,J=7.2Hz,3H)；
13
C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.47(d,J=2.2Hz),127.40(q,J=284.2Hz),93.11(d,J=175.6Hz),89.36,75.75(q,J=27.3Hz),73.50(d,J=27.2Hz),72.90,68.94(d,J=25.7Hz),39.95,16.+
72(q,J=1.5Hz),14.98；MS,(ES,m/z)[M+H]333.1。
[0303] 实施例28
[0304] (3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-(1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0305]
[0306] 在-78℃、N2下向DMSO(0.275g，3.50mmol)的无水DCM(5mL)溶液中逐滴添加乙二酰氯(0.422g，3.32mmol)。将混合物在～-30℃下搅拌30min并再次冷却至-78℃。添加((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)甲醇(0.465g，1.37mmol)的无水DCM(5mL)溶液。在～-30℃下搅拌2h后，使反应混合物冷却回到-78℃，并添加Et3N(0.624g，6.18mmol)。将混合物在～-30℃下再搅拌30min，然后用H2O(20mL)淬灭。收集有机层，并将水层用DCM(2×10mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂得到粗醛。通过硅胶柱层析法对其进行纯化，用30%-60%在己烷中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-甲醛(0.190g，41%)，为淡黄色泡沫。MS m/z 339.1(M+1,100%)。
[0307] 在0℃下向上述醛(0.170g，0.503mmol)的无水THF(5mL)溶液中逐滴添加MeMgBr溶液(1.4M在1:3THF/甲苯中，0.90mL，1.26mmol)。然后将反应在室温下搅拌2h。将混合物用H2O(10mL)洗脱，用EtOAc(2×10mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂，并通过硅胶柱层析法对残留物进行纯化，用1%-2%的2M NH3 MeOH在DCM中的溶液洗脱，得到1-((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)乙醇(0.115g，65%)，为淡黄色泡沫。MS m/z1
355.2(M+1,100%)；H NMR(400MHz，CDCl3)显示其为比率为～4:1的两种非对映异构体的混合物。
355.2(M+1,100%)；H NMR(400MHz，CDCl3)显示其为比率为～4:1的两种非对映异构体的混合物。
[0308] 在0℃下轩昂上述物质(0.110g，0.311mmol)的干燥DCM(3mL)溶液中添加DMP(0.198g，0.467mmol)。然后将混合物在室温下搅拌4h。将反应用饱和NaHCO3水溶液(10mL)和1M Na2S2O3(3mL)稀释，然后用DCM(2×10mL)萃取。萃取物经Na2SO4干燥，并蒸发溶剂得到粗产物。在硅胶上通过柱层析法对粗产物进行纯化，用1%的在1:1己烷-EtOAc中的NH4OH洗脱，得到1-((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)乙酮(0.0786g，72%)，为白色泡沫。该物质无需进一步纯化即可直接用于下一步骤中。MS m/z 353.1(M+1,100%)。
1
H NMR(400MHz,CDCl3)7.28-7.38(m,2H),6.32(d,J=6.7Hz,1H),5.29(d,J=44.3H
z,1H),4.81(d,J=11.3Hz,1H),4.66(m,1H),4.64(d,J=11.3Hz,1H),3.95-4.03(m,
2H),3.01(s,6H),2.16(s,3H)。
1
H NMR(400MHz,CDCl3)7.28-7.38(m,2H),6.32(d,J=6.7Hz,1H),5.29(d,J=44.3H
z,1H),4.81(d,J=11.3Hz,1H),4.66(m,1H),4.64(d,J=11.3Hz,1H),3.95-4.03(m,
2H),3.01(s,6H),2.16(s,3H)。
[0309] 在室温下向上述物质(0.074g，0.21mmol)的无水THF(4mL)溶液中添加TMSCF3(0.075g，0.53mmol)，然后添加TBAF(1.0M在THF中，0.03mL，0.03mmol)。将反应在室温下搅拌2h。添加另一份0.24mL的TBAF(1.0M在THF中)，并将混合物在室温下搅拌5h。将溶液用饱和NaHCO3水溶液(10mL)稀释，用EtOAc(2×10mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂，并通过硅胶柱层析法对残留物进行纯化，用
30%的在己烷中的EtOAc洗脱，得到2-((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)-1,1,1-三氟丙-2-醇
1
(0.055g，62%)，为淡黄色糖浆状物。MS m/z423.1(M+1,100%)。H NMR(400MHz，CDCl3)光谱显示其为比率为～56:44的两种非对映异构体的混合物。
30%的在己烷中的EtOAc洗脱，得到2-((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-(苄氧基)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)-1,1,1-三氟丙-2-醇
1
(0.055g，62%)，为淡黄色糖浆状物。MS m/z423.1(M+1,100%)。H NMR(400MHz，CDCl3)光谱显示其为比率为～56:44的两种非对映异构体的混合物。
[0310] 在-78℃下向上述物质(0.055g,0.13mmol)的DCM(2mL)溶液中添加BCl3的DCM溶液(1.0M，0.16mL，0.16mmol)。将混合物缓慢加温至室温，并搅拌5h。将反应再次冷却至-78℃，并逐滴添加MeOH-DCM的1:1混合物(1mL)以淬灭反应。蒸发溶剂，并将残留物再用MeOH处理三次。通过硅胶柱层析法对粗产物进行纯化，用30%-100%的在己烷中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5S,6R,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-7-氟-5-(1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(0.0344g，80%)，为白色固1
体。MS m/z333.1(M+1，100%)；H NMR(400MHz，MeOD)光谱显示其为比率为～56:44的两种非对映异构体的混合物。
体。MS m/z333.1(M+1，100%)；H NMR(400MHz，MeOD)光谱显示其为比率为～56:44的两种非对映异构体的混合物。
[0311] 实施例29&30
[0312] (3aR,5S,6S,7aR)-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((R)-1,1,1- 三 氟 -2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0313]
[0314] 在15℃下向((3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.920g，2.26mmol)的无水THF(20mL)溶液中逐滴添加MeMgBr溶液(1.4M在THF/甲苯中，4.1mL，5.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h，然后用饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭。将混合物用EtOAc(2×30mL)萃取，并将合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(MeOH/DCM，0:4至1:4)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨
1
基甲酸叔丁基酯(0.350g，37%)，为白色泡沫；该物质的 H NMR(400MHz，CDCl3)显示其含有两种非对映异构体，比率为1:2。还分离得到脱保护的副产物1-((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)乙醇(0.300g，
1
41%)，为白色固体；该物质的 H NMR(400MHz，CDCl3)显示其含有两种非对映异构体，比率为
1:1.4。
1
基甲酸叔丁基酯(0.350g，37%)，为白色泡沫；该物质的 H NMR(400MHz，CDCl3)显示其含有两种非对映异构体，比率为1:2。还分离得到脱保护的副产物1-((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-5-基)乙醇(0.300g，
1
41%)，为白色固体；该物质的 H NMR(400MHz，CDCl3)显示其含有两种非对映异构体，比率为
1:1.4。
[0315] 向((3aR,5R,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.406g，0.961mmol)的干燥DCM(20mL)溶液中添加DMP(0.615g，1.45mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h，然后浓缩。将残留物用饱和NaHCO3水溶液(20mL)和1MNa2S2O3水溶液(5mL)洗涤，并用EtOAc(2×20mL)萃取。合并的萃取物经Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:4至2:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6S,7aR)-5-乙酰基-6-(苄氧基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯
(0.32g)，其是不纯的且无需经过进一步纯化即可用于下一步骤中。
(0.32g)，其是不纯的且无需经过进一步纯化即可用于下一步骤中。
[0316] 向上述物质和TMSCF3(0.251g，1.77mmol)的无水THF(15mL)溶液中添加TBAF(1.0M在THF中，0.030mL，0.030mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌16h。添加另一批TBAF(1.0M在THF中，1.2mL，1.2mmol)，并将混合物在室温下再搅拌3h。然后将反应溶液用EtOAc(20mL)和盐水(30mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(20mL)萃取。
合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:4至1:1)对残留物进行纯化和分离，得到((3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.11g，经两个步骤收率为23%)，为淡黄色油状
1
物；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.27(m,5H),6.06(d,J=7.7Hz,1H),4.70(d,J=10.8Hz,
1H),4.46-4.42(m,1H),4.32(d,J=10.8Hz,1H),4.08-4.05(m,1H),3.67(d,J=7.8Hz,1H),
3.26(s,3H),2.70-2.66(m,1H),1.98-1.92(m,1H),1.52(s,9H),1.31(s,3H)。还分离得到((3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.16g，经两个步骤收率
1
为34%)，为淡黄色油状物；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.34-7.27(m,5H),6.05(d,J=7.6Hz,1H),4.71(d,J=10.8Hz,1H),4.45-4.42(m,1H),4.35(d,J=10.8Hz,1H),4.08-4.05(m,1H),3.6
9(d,J=8.0Hz,1H),3.27(s,3H),2.71-2.67(m,1H),2.03-1.98(m,1H),1.53(s,9H),1.32(s,
3H)。
合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:4至1:1)对残留物进行纯化和分离，得到((3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.11g，经两个步骤收率为23%)，为淡黄色油状
1
物；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.27(m,5H),6.06(d,J=7.7Hz,1H),4.70(d,J=10.8Hz,
1H),4.46-4.42(m,1H),4.32(d,J=10.8Hz,1H),4.08-4.05(m,1H),3.67(d,J=7.8Hz,1H),
3.26(s,3H),2.70-2.66(m,1H),1.98-1.92(m,1H),1.52(s,9H),1.31(s,3H)。还分离得到((3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.16g，经两个步骤收率
1
为34%)，为淡黄色油状物；H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.34-7.27(m,5H),6.05(d,J=7.6Hz,1H),4.71(d,J=10.8Hz,1H),4.45-4.42(m,1H),4.35(d,J=10.8Hz,1H),4.08-4.05(m,1H),3.6
9(d,J=8.0Hz,1H),3.27(s,3H),2.71-2.67(m,1H),2.03-1.98(m,1H),1.53(s,9H),1.32(s,
3H)。
[0317] 如实施例20所述，使用BCl3对受保护物质((3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.105g，0.214mmol)进行脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:12)纯化后，得到(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-6-醇，为白色固体(0.051g，79%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.18(d,J=6.8Hz,1H),4.4
6-4.42(m,1H),4.20-4.17(m,1H),3.53(d,J=7.2Hz,1H),2.85(s,3H),2.32-2.27(m,1H),2.
13
09-2.02(m,1H),1.33(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.34,127.46(q,J=285.3Hz),91.
10,77.04,75.83(q,J=26.9Hz),70.56,66.52,33.66,30.94,18.67(q,J=2.2Hz)；MS,(ES,m/+
z)[M+H]301.1。
1
唑-6-醇，为白色固体(0.051g，79%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.18(d,J=6.8Hz,1H),4.4
6-4.42(m,1H),4.20-4.17(m,1H),3.53(d,J=7.2Hz,1H),2.85(s,3H),2.32-2.27(m,1H),2.
13
09-2.02(m,1H),1.33(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.34,127.46(q,J=285.3Hz),91.
10,77.04,75.83(q,J=26.9Hz),70.56,66.52,33.66,30.94,18.67(q,J=2.2Hz)；MS,(ES,m/+
z)[M+H]301.1。
[0318] 如实施例20所述，使用BCl3对受保护物质((3aR,5S,6S,7aR)-6-(苄氧基)-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.160g，0.326mmol)进行脱保护。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:12)纯化后，获得(3aR,5S,6S,7aR)-2-(甲基氨基)-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-6-醇，为白色固体(0.072g，73%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.18(d,J=6.8Hz,1H),4.4
4-4.41(m,1H),4.19-4.15(m,1H),3.67(d,J=7.4Hz,1H),2.85(s,3H),2.29-2.24(m,1H),2.
13
09-2.03(m,1H),1.31(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.14,127.51(q,J=284.3Hz),91.
42,75.71(q,J=27.0Hz),75.53,70.18,66.58,33.47,30.89,16.96(q,J=1.5Hz)；MS,(ES,m/+
z)[M+H]301.1。
1
唑-6-醇，为白色固体(0.072g，73%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.18(d,J=6.8Hz,1H),4.4
4-4.41(m,1H),4.19-4.15(m,1H),3.67(d,J=7.4Hz,1H),2.85(s,3H),2.29-2.24(m,1H),2.
13
09-2.03(m,1H),1.31(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.14,127.51(q,J=284.3Hz),91.
42,75.71(q,J=27.0Hz),75.53,70.18,66.58,33.47,30.89,16.96(q,J=1.5Hz)；MS,(ES,m/+
z)[M+H]301.1。
[0319] 根据类似于上面所概述的方案和实施例的程序合成以下实施例。
[0320] 表3
[0321]
[0322]
[0323] 实施例33
[0324] (3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-氨 基-7- 氟-5-((S)-1-羟 基 乙 基)-5,6,7,7a- 四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0325]
[0326] 向(2S,3R,4R,5S,6R)-6-(乙酰氧基甲基)-3-氨基四氢-2H-吡喃-2,4,5-三基三乙酸酯盐酸盐(14.0g，36.5mmol)的MeCN(160mL)悬浮液中添加DIPEA(5.16g，40.0mmol)和异硫氰酸烯丙酯(7.92g，79.9mmol)。在80℃下将混合物搅拌3h之后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:2至2:1)对残留物进行纯化，得到白色泡沫(16.7g)。将该白色泡沫溶解在DCM(120mL)中，添加TFA(8.5mL)。将混合物在室温下搅拌16h，然后减压浓缩。将残留物用DCM(60mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(60mL)洗涤。收集有机层，将水层用DCM(40mL)萃取一次。合并的有机萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，将溶剂减压蒸发至干。将残留物溶解在DCM(160mL)中，并添加Boc2O(21.8g，100mmol)以及DIPEA(3.0mL)。将混合物在室温下搅拌16h。然后将溶剂减压蒸发，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:3)对残留物进行纯化，得到白色泡沫。将白色泡沫溶解在干燥MeOH(150mL)中，并采用NH3(g)向其中鼓泡5min。在室温下搅拌3h后，浓缩混合物，并将残留物通过重结晶从MeOH/EtOAc中纯化，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-二羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁
1
基烯丙基酯，为白色固体(9.02g，经4个步骤的收率为69%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.1
2(d,J=6.2Hz,1H),5.88-5.79(m,1H),5.18-5.12(m,2H),4.54-4.41(m,2H),4.30-4.26(m,2H),3.84(dd,J=2.8,11.9Hz,1H),3.74-3.67(m,2H),3.50-3.46(m,1H),2.37(s,br.1H),2.2
2(s,br.1H),2.00(s,br.1H),1.53(s,9H)。
1
基烯丙基酯，为白色固体(9.02g，经4个步骤的收率为69%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.1
2(d,J=6.2Hz,1H),5.88-5.79(m,1H),5.18-5.12(m,2H),4.54-4.41(m,2H),4.30-4.26(m,2H),3.84(dd,J=2.8,11.9Hz,1H),3.74-3.67(m,2H),3.50-3.46(m,1H),2.37(s,br.1H),2.2
2(s,br.1H),2.00(s,br.1H),1.53(s,9H)。
[0327] 在 15 ℃ 下 向 上 述 物 质 (7.02g，19.4mmol)、DIPEA(6.29g，48.7mmol) 和DMAP(0.040g，0.33mmol)的DCM(150mL)溶液中缓慢添加BzCl(6.03g，42.9mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌5h。添加饱和NH4Cl水溶液(40mL)，并收集有机层。萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:3)对残留物进行分离，得到(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(烯丙基(叔丁氧基羰基)氨基)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-7-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-基
1
苯甲酸酯，为白色固体(2.80g，25%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01-7.99(m,4H),7.59-7.5
6(m,1H),7.54-7.50(m,1H),7.44-7.40(m,2H),7.39-7.35(m,2H),6.20(d,J=7.0Hz,1H),5.
88-5.81(m,1H),5.17-5.07(m,3H),4.54-4.48(m,4H),4.45-4.40(m,2H),4.12-4.06(m,1H),2.70(d,J=6.4Hz,1H),1.53(s,9H)。
1
苯甲酸酯，为白色固体(2.80g，25%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01-7.99(m,4H),7.59-7.5
6(m,1H),7.54-7.50(m,1H),7.44-7.40(m,2H),7.39-7.35(m,2H),6.20(d,J=7.0Hz,1H),5.
88-5.81(m,1H),5.17-5.07(m,3H),4.54-4.48(m,4H),4.45-4.40(m,2H),4.12-4.06(m,1H),2.70(d,J=6.4Hz,1H),1.53(s,9H)。
[0328] 在–78℃、N2下，向上述物质(2.40g，4.22mmol)的无水DCM(30mL)溶液中添加DAST(4.32g，2.68mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌2天。在–78℃下，将反应混合物用DCM(20mL)稀释，然后通过逐滴添加饱和NaHCO3水溶液进行淬灭。收集有机层，并将水层用DCM(2×30mL)萃取。将合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:20至1:4)对残留物进行纯化，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(烯丙基(叔丁氧基羰基)氨基)-5-((苯甲酰氧基)甲基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯，为白色固体1
(1.70g，70%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00-7.98(m,4H),7.60-7.56(m,1H),7.53-7.50(m,1H),7.44-7.40(m,2H),7.38-7.34(m,2H),6.17(d,J=7.1Hz,1H),5.92-5.82(m,1H),5.46(dd,J=9.4,21.3Hz,1H),5.36-5.25(m,1H),5.16-5.08(m,2H),4.59-4.44(m,4H),4.40(dd,J=6.0,12.0Hz,1H),3.99-3.95(m,1H),1.53(s,9H)。
(1.70g，70%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00-7.98(m,4H),7.60-7.56(m,1H),7.53-7.50(m,1H),7.44-7.40(m,2H),7.38-7.34(m,2H),6.17(d,J=7.1Hz,1H),5.92-5.82(m,1H),5.46(dd,J=9.4,21.3Hz,1H),5.36-5.25(m,1H),5.16-5.08(m,2H),4.59-4.44(m,4H),4.40(dd,J=6.0,12.0Hz,1H),3.99-3.95(m,1H),1.53(s,9H)。
[0329] 将上述物质(1.70g，2.98mmol)和K2CO3(0.40g，2.9mmol)在无水MeOH(30mL)中的混合物在室温下搅拌3h。添加干冰，并在减压下除去溶剂。在硅胶上通过快速柱层析法(MeOH/DCM，1:20)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-6-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基烯丙基酯，为1
白色固体(1.07g，99%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.12(d,J=6.6Hz,1H),5.95-5.85(m,1H),
5.16-5.10(m,2H),5.00-4.86(m,1H),4.54-4.37(m,3H),3.81-3.73(m,2H),3.60(d,J=6.0,
12.1Hz,1H),3.39-3.34(m,1H),1.51(s,9H)。
白色固体(1.07g，99%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.12(d,J=6.6Hz,1H),5.95-5.85(m,1H),
5.16-5.10(m,2H),5.00-4.86(m,1H),4.54-4.37(m,3H),3.81-3.73(m,2H),3.60(d,J=6.0,
12.1Hz,1H),3.39-3.34(m,1H),1.51(s,9H)。
[0330] 在0℃下，向上述物质(1.06g，2.94mmol)和咪唑(0.600g，8.82mmol)的无水DMF(15mL)溶液中添加TBDMSCl(0.478g，3.17mmol)。将混合物在室温下搅拌5h，并用Et2O(100mL)和盐水(100mL)稀释。收集有机层，并将水层用Et2O(50mL)萃取。将合并的萃取物用H2O(50mL)稀释，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基烯丙基酯，为白色
1
固体(1.36g，97%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.05(d,J=6.8Hz,1H),5.90-5.80(m,1H),5.18-5.04(m,3H),4.51-4.39(m,3H),3.93-3.84(m,1H),3.81-3.72(m,2H),3.31-3.26(m,1H),2.14(d,J=8.1Hz,1H),1.53(s,9H),0.89(s,9H),0.07(s,6H)。
1
固体(1.36g，97%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.05(d,J=6.8Hz,1H),5.90-5.80(m,1H),5.18-5.04(m,3H),4.51-4.39(m,3H),3.93-3.84(m,1H),3.81-3.72(m,2H),3.31-3.26(m,1H),2.14(d,J=8.1Hz,1H),1.53(s,9H),0.89(s,9H),0.07(s,6H)。
[0331] 在0℃下，向上述物质(0.720g，1.51mmol)和Bu4NI(0.056g，0.151mmol)的无水DMF(8mL)溶液中添加NaH(60%在矿物油中，0.078g，1.96mmol)，随后添加烯丙基溴(0.365g，3.02mmol)。将混合物在室温下搅拌5h，用Et2O(50mL)稀释并用饱和NaHCO3(50mL)洗涤。收集有机层，并将水层用Et2O(30mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(50mL)洗涤，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:20至1:4)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(烯丙基氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并1
[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基烯丙基酯，为淡黄色粘稠油状物(0.675g，87%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.08(d,J=7.0Hz,1H),5.93-5.82(m,2H),5.30-5.08(m,5H),4.46-4.
40(m,3H),4.22(dd,J=5.3,12.6Hz,1H),4.03(dd,J=5.8,12.6Hz,1H),3.80-3.70(m,3H),3.
39-3.35(m,1H),1.51(s,9H),0.89(s,9H),0.05(s,6H)。
[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基烯丙基酯，为淡黄色粘稠油状物(0.675g，87%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.08(d,J=7.0Hz,1H),5.93-5.82(m,2H),5.30-5.08(m,5H),4.46-4.
40(m,3H),4.22(dd,J=5.3,12.6Hz,1H),4.03(dd,J=5.8,12.6Hz,1H),3.80-3.70(m,3H),3.
39-3.35(m,1H),1.51(s,9H),0.89(s,9H),0.05(s,6H)。
[0332] 在0℃下，向上述物质(0.675g，1.31mmol)的THF(10mL)溶液中添加TBAF(1.0M在THF中，2.5mL，2.5mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌3h，并用EtOAc(30mL)和盐水(30mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(20mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(烯丙基氧基)-7-氟-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基烯丙基酯，为无
1
色油状物(0.53g，100%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.07(d,J=7.1Hz,1H),5.92-5.82(m,2H),5.31-5.10(m,5H),4.52-4.40(m,3H),4.22(dd,J=5.2,12.6Hz,1H),4.03(dd,J=5.9,12.6Hz,1H),3.82-3.77(m,1H),3.74-3.61(m,2H),3.42-3.38(m,1H),1.52(s,9H)。
1
色油状物(0.53g，100%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.07(d,J=7.1Hz,1H),5.92-5.82(m,2H),5.31-5.10(m,5H),4.52-4.40(m,3H),4.22(dd,J=5.2,12.6Hz,1H),4.03(dd,J=5.9,12.6Hz,1H),3.82-3.77(m,1H),3.74-3.61(m,2H),3.42-3.38(m,1H),1.52(s,9H)。
[0333] 在0℃下，向上述物质(0.53g，1.3mmol)的DCM(25mL)溶液中添加DMP(0.81g，1.9mmol)。在室温下搅拌1.5h后，将反应混合物用Et2O(30mL)稀释，然后浓缩至干。添加含Na2S2O3(2g)的饱和NaHCO3水溶液(30mL)，并将混合物用EtOAc(2×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:4至2:3)对残留物进行纯化，得到相应的醛，为无色油状物(0.47g)。
向0℃下的该物质的无水THF(15mL)中添加MeMgBr溶液(1.4M在THF/甲苯中，2.5mL，
3.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h，然后用饱和NaHCO3溶液(30mL)淬灭。将混合物用EtOAc(2×30mL)萃取，并将合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(烯丙基氧基)-7-氟-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基烯丙基酯(0.29g，53%)，通过 H NMR显示其为比率为2.6:1的两种非对映异构体的混合物。
向0℃下的该物质的无水THF(15mL)中添加MeMgBr溶液(1.4M在THF/甲苯中，2.5mL，
3.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h，然后用饱和NaHCO3溶液(30mL)淬灭。将混合物用EtOAc(2×30mL)萃取，并将合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(烯丙基氧基)-7-氟-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基烯丙基酯(0.29g，53%)，通过 H NMR显示其为比率为2.6:1的两种非对映异构体的混合物。
[0334] 在Ar下，向上述物质(0.168g，0.403mmol)的1,4-二氧杂环己烷(10mL)中添加Et3N(0.164g，1.62mmol)、HCOOH(0.118g，2.43mmol)。采用Ar向溶液中鼓泡30秒，并添加Pd(PPh3)4(0.187g，0.162mmol)。在60℃下搅拌16h后，浓缩反应混合物，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(MeOH/DCM，1:40至1:20)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-6-羟基-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯，为米白色固体(0.083g，85%)。H
NMR(400MHz,CD3OD)δ6.21(d,J=7.1Hz,1H),4.90(td,J=3.8,46.7Hz,1H),4.35-4.31(m,
1H),4.01-3.90(m,2H),3.14(dd,J=3.0,9.6Hz,1H),1.49(s,9H),1.22(d,J=6.6Hz,1H)；
13
C NMR(100MHz,CD3OD)δ162.83,155.73,94.85(d,J=177.4Hz),87.24(d,J=1.4Hz),82.
88,77.22(d,J=3.3Hz),69.29(d,J=27.8Hz),68.92(d,J=24.1Hz),67.08,28.54,19.77；
+
MS,(ES,m/z)[M+Na]359.1。
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯，为米白色固体(0.083g，85%)。H
NMR(400MHz,CD3OD)δ6.21(d,J=7.1Hz,1H),4.90(td,J=3.8,46.7Hz,1H),4.35-4.31(m,
1H),4.01-3.90(m,2H),3.14(dd,J=3.0,9.6Hz,1H),1.49(s,9H),1.22(d,J=6.6Hz,1H)；
13
C NMR(100MHz,CD3OD)δ162.83,155.73,94.85(d,J=177.4Hz),87.24(d,J=1.4Hz),82.
88,77.22(d,J=3.3Hz),69.29(d,J=27.8Hz),68.92(d,J=24.1Hz),67.08,28.54,19.77；
+
MS,(ES,m/z)[M+Na]359.1。
[0335] 采用HCl(g)向上述物质(0.0562g，0.167mmol)的干燥MeOH(5mL)溶液鼓泡30秒。在室温下搅拌5h后，将反应混合物浓缩至干。将残留物用1.0M在MeOH中
的NH3中和，并在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH 3在MeOH/DCM中，1:5)纯化，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-氨基-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并
1
[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.0387g，98%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.36(d,J=7.0Hz,1H),4.85(td,J=4.2,47.1Hz,1H),4.38-4.32(m,1H),4.00-3.92(m,2H),3.28(dd,J=2.7
13
,9.3Hz,1H),1.21(d,J=6.6Hz,1H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ165.10(d,J=2.3Hz),95.64(d,J=177.3Hz),91.13(d,J=2.5Hz),77.17(d,J=3.8Hz),73.41(d,J=26.0Hz),69.02(d,J=23.+
8Hz),66.73,19.88；MS,(ES,m/z)[M+H]237.1。
的NH3中和，并在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH 3在MeOH/DCM中，1:5)纯化，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-氨基-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并
1
[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.0387g，98%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.36(d,J=7.0Hz,1H),4.85(td,J=4.2,47.1Hz,1H),4.38-4.32(m,1H),4.00-3.92(m,2H),3.28(dd,J=2.7
13
,9.3Hz,1H),1.21(d,J=6.6Hz,1H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ165.10(d,J=2.3Hz),95.64(d,J=177.3Hz),91.13(d,J=2.5Hz),77.17(d,J=3.8Hz),73.41(d,J=26.0Hz),69.02(d,J=23.+
8Hz),66.73,19.88；MS,(ES,m/z)[M+H]237.1。
[0336] 实施例34
[0337] (3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0338]
[0339] 在0℃下，向((3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-6-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(9.00g，26.8mmol)和咪唑(9.09g，133mmol)的无水DMF(60mL)溶液中添加TBDMSCl(14.1g，93.5mmol)。将混合物在室温下搅拌16h，用Et2O(200mL)稀释并用盐水(2×200mL)洗涤。收集有机层，并将水层用Et2O(2×100mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(100mL)洗涤，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，0至1:6)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)1
(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为无色油状物(16.0g，100%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.10(d,J=6.9Hz,1H),4.89(td,J=4.3,47.3Hz,1H),4.38-4.31(m,1H),4.01-3.93(m,1H),3.81-3.70(m,2H),3.41-3.37(m,1H),3.32(s,3H),1.53(s,9H),0.89(s,18H),0.144(s,3H),0.087(s,3H),0.048(s,6H)。
(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为无色油状物(16.0g，100%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.10(d,J=6.9Hz,1H),4.89(td,J=4.3,47.3Hz,1H),4.38-4.31(m,1H),4.01-3.93(m,1H),3.81-3.70(m,2H),3.41-3.37(m,1H),3.32(s,3H),1.53(s,9H),0.89(s,18H),0.144(s,3H),0.087(s,3H),0.048(s,6H)。
[0340] 在0℃下，向上述物质(16.0g)的混合DCM/MeOH(100mL，1:4)溶液中添加AcCl(0.32g，4.1mmol)。在将混合物在室温下搅拌24h之后，添加NaHCO3粉末(1g)，并将悬浮液搅拌30min。然后减压蒸发溶剂，并将残留物溶解于DCM(100mL)中，并用饱和NaHCO3水溶液(50mL)洗涤。收集有机层，并将水层用DCM(2×80mL)萃取。将合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液用Boc2O(4.0g，18mmol)处理3h。然后减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-7-氟-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白
1
色泡沫(11.6g，96%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.10(d,J=7.1Hz,1H),4.99(ddd,J=2.7,4.1,46.0Hz,1H),4.46-4.40(m,1H),3.96-3.88(m,1H),3.78(dd,J=2.3,11.8Hz,1H),3.62(dd,J=5.2,11.8Hz,1H),3.46-3.41(m,1H),3.32(s,3H),1.54(s,9H),0.89(s,9H),0.16(s,3H),
0.09(s,3H)。
1
色泡沫(11.6g，96%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.10(d,J=7.1Hz,1H),4.99(ddd,J=2.7,4.1,46.0Hz,1H),4.46-4.40(m,1H),3.96-3.88(m,1H),3.78(dd,J=2.3,11.8Hz,1H),3.62(dd,J=5.2,11.8Hz,1H),3.46-3.41(m,1H),3.32(s,3H),1.54(s,9H),0.89(s,9H),0.16(s,3H),
0.09(s,3H)。
[0341] 在0℃下向上述物质(11.3g，25.1mmol)的DCM(200mL)溶液中添加DMP(14.8g，34.9mmol)。在室温下搅拌2h之后，在室温下浓缩反应混合物至约100mL，然后用
Et2O(300mL)稀释。将得到的悬浮液通过硅藻土饼过滤，并将室温下将滤液浓缩至干。并将残留物用Et2O(200mL)萃取，并将固体滤出。将醚溶液用饱和NaHCO3水溶液(200mL)洗涤，并将水层用Et2O(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水MgSO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，得到粗产物((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-7-氟-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(11.8g)。
该粗物质无需经过进一步纯化即可用于下一步骤中。
Et2O(300mL)稀释。将得到的悬浮液通过硅藻土饼过滤，并将室温下将滤液浓缩至干。并将残留物用Et2O(200mL)萃取，并将固体滤出。将醚溶液用饱和NaHCO3水溶液(200mL)洗涤，并将水层用Et2O(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水MgSO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，得到粗产物((3aR,5S,6R,7R,7aR)-6-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-7-氟-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(11.8g)。
该粗物质无需经过进一步纯化即可用于下一步骤中。
[0342] 在N2、0℃下向上述物质(11.8g)的无水THF(200mL)溶液中添加MeMgBr(1.4M在THF/甲苯中，42.0mL，58.8mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌2h。用饱和NaHCO3水溶液(200mL)淬灭反应，并将反应混合物用EtOAc(200mL)和DCM(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂。将残留物溶解于DCM(100mL)中，并用Boc2O(3g)处理3h。然后将溶剂减压蒸发，并在硅胶上通过快速柱层析法(EtOAc/己烷，0至1:4)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-7-氟-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为两种非对映异构体的混合物(6.60g，两个步骤收率为57%)。
[0343] 在0℃下向上述物质(6.60g，14.2mmol)的无水THF(80mL)溶液中添加TBAF(1.0M在THF中，28.0mL，28.0mmol)。将混合物在室温下搅拌3h。将反应用盐水(100mL)稀释，然后用EtOAc(3×80mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过快速柱层析法(EtOAc/己烷/25%DCM，1:2至1:1/)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-6-羟基-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃1
并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(3.77g，76%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.09(d,J=6.9Hz,1H),5.24-5.12(m,1H),4.48-4.43(m,1H),3.97-3.87(m,2H),3.34(s,3H),3.15(dd,J=5.0,8.0Hz,1H),2.12(s,br.,2H,(OH)),1.55(s,9H),1.26(d,J=6.5Hz,3H)。
并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(3.77g，76%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.09(d,J=6.9Hz,1H),5.24-5.12(m,1H),4.48-4.43(m,1H),3.97-3.87(m,2H),3.34(s,3H),3.15(dd,J=5.0,8.0Hz,1H),2.12(s,br.,2H,(OH)),1.55(s,9H),1.26(d,J=6.5Hz,3H)。
[0344] 在0℃下向上述物质(0.930g，2.65mmol)和咪唑(0.726g，10.7mmol)的无水DMF(20mL)溶液中添加TBDMSCl(0.502g，3.33mmol)。将混合物在室温下搅拌16h，用Et2O(100mL)稀释并用盐水(2×100mL)洗涤。收集有机层，并将水层用Et2O(50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，0至1:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6R,7R,7aR)-5-((S)-1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]1
噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.919g，75%)。HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.09(d,J=6.9Hz,1H),5.04(td,J=4.0,46.8Hz,1H),4.41-4.36(m,1H),4.08-4.03(m,2H),3.32(s,3H),3.32-3.30(m,1H),2.64(s,br.,1H,(OH)),1.54(s,9H),1.20(d,J=6.4Hz,3H),0.89(s,9H),0.087(s,3H),0.083(s,3H)。
噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.919g，75%)。HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.09(d,J=6.9Hz,1H),5.04(td,J=4.0,46.8Hz,1H),4.41-4.36(m,1H),4.08-4.03(m,2H),3.32(s,3H),3.32-3.30(m,1H),2.64(s,br.,1H,(OH)),1.54(s,9H),1.20(d,J=6.4Hz,3H),0.89(s,9H),0.087(s,3H),0.083(s,3H)。
[0345] 向上述物质(0.900g，1.94mmol)的DCM(30mL)溶液中添加DMP(1.23g，2.91mmol)。在室温下搅拌45min后，将反应用Et2O(100mL)稀释。将得到的悬浮液通过硅藻土饼过滤，并将滤液在室温下浓缩至干。将残留物装载到硅胶短柱上，并用(EtOAc/己烷，1:4)洗脱产物，得到((3aR,5R,7R,7aR)-5-((S)-1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙
基)-7-氟-6-氧代-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲
1
酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.90g，100%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.47(d,J=6.9Hz,1H),5.
11(dd,J=5.5,48.4Hz,1H),4.68-4.61(m,1H),4.54-4.49(m,1H),3.90-3.89(m,1H),3.32(s,3H),1.54(s,9H),1.26(d,J=6.5Hz,3H),0.84(s,9H),0.074(s,3H),0.043(s,3H)。
基)-7-氟-6-氧代-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲
1
酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.90g，100%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.47(d,J=6.9Hz,1H),5.
11(dd,J=5.5,48.4Hz,1H),4.68-4.61(m,1H),4.54-4.49(m,1H),3.90-3.89(m,1H),3.32(s,3H),1.54(s,9H),1.26(d,J=6.5Hz,3H),0.84(s,9H),0.074(s,3H),0.043(s,3H)。
[0346] 向上述物质(0.900g，1.94mmol)的干燥MeOH(25mL)溶液中添加NaH(60%在矿物油中，0.0155g，0.388mmol)，并将混合物在室温下搅拌10min(接着进行TLC)。然后在0℃下冷却反应混合物，并添加NaBH4(0.140g，3.70mmol)。在0℃下搅拌混合物20min之后，添加干冰片，并蒸发溶剂。将残留物溶解于DCM(50mL)中，并用饱和NH4Cl水溶液(50mL)洗涤。收集有机层，并将水层用DCM(2×20mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:5)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6R,7S,7aR)-5-((S)-1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲1
酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.793g，88%)。HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.11(d,J=6.9Hz,1H),4.9
9(td,J=4.3,47.2Hz,1H),4.48-4.42(m,1H),4.15-4.09(m,1H),4.02-3.96(m,1H),3.48-3.
45(m,1H),3.37(s,3H),2.80(s,br.,1H,(OH)),1.55(s,9H),1.22(d,J=6.4Hz,3H),0.89(s,
9H),0.084(s,3H),0.075(s,3H)。
酸叔丁基酯，为白色泡沫(0.793g，88%)。HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.11(d,J=6.9Hz,1H),4.9
9(td,J=4.3,47.2Hz,1H),4.48-4.42(m,1H),4.15-4.09(m,1H),4.02-3.96(m,1H),3.48-3.
45(m,1H),3.37(s,3H),2.80(s,br.,1H,(OH)),1.55(s,9H),1.22(d,J=6.4Hz,3H),0.89(s,
9H),0.084(s,3H),0.075(s,3H)。
[0347] 采用HCl(g)向上述物质(0.780g，1.68mmol)的干燥MeOH(20mL)溶液鼓泡30秒。将混合物在室温下搅拌6h。减压蒸发溶剂后，将残留物用1.0M在MeOH中的NH3中和，并在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:10)纯化，得到(3aR,5R,6R,7S,
7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]
1
噻唑-6-醇，为白色固体(0.410g，98%)。H NMR(500MHz,CD3OD)δ6.41(d,J=6.7Hz,1H),
4.84(td,J=3.6Hz,50.1Hz,1H),4.40-4.34(m,1H),4.04-3.93(m,2H),3.60(dd,J=2.7,8.6
13
Hz,1H),2.86(s,3H),1.22(d,J=6.6Hz,1H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ165.56,91.07(d,J=
183.5Hz),90.92(d,J=4.4Hz),76.33(d,J=3.2Hz),71.56(d,J=16.2Hz),67.39(d,J=17.2+
Hz),66.88,30.58,19.70；MS,(ES,m/z)[M+H]251.1。
7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]
1
噻唑-6-醇，为白色固体(0.410g，98%)。H NMR(500MHz,CD3OD)δ6.41(d,J=6.7Hz,1H),
4.84(td,J=3.6Hz,50.1Hz,1H),4.40-4.34(m,1H),4.04-3.93(m,2H),3.60(dd,J=2.7,8.6
13
Hz,1H),2.86(s,3H),1.22(d,J=6.6Hz,1H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ165.56,91.07(d,J=
183.5Hz),90.92(d,J=4.4Hz),76.33(d,J=3.2Hz),71.56(d,J=16.2Hz),67.39(d,J=17.2+
Hz),66.88,30.58,19.70；MS,(ES,m/z)[M+H]251.1。
[0348] 实施例35
[0349] (3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0350]
[0351] 在 0 ℃、N2下 向 ((3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-( 苄 氧 基 )-7- 氟 -5- 甲 酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.35g，0.83mmol)的无水THF(15mL)溶液中添加MeMgBr(1.4M在THF/甲苯中，3.0mL，
4.2mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌2h。将反应用饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭，然后用EtOAc(30mL)和DCM(3×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并将残留物在高真空下干燥。在–78℃、N2下向残留物和PMB(0.50g，
3.4mmol)的干燥DCM(8mL)中添加BCl3(1.0M在DCM中，3.0mL，3.0mmol)。将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。在–78℃下冷却反应混合物，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，
1:10)对残留物进行纯化，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.039g，19%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.40(d,J=6.7Hz,1H),4.78(td,J=3.6,49.3Hz,1H),4.40(ddd,J=3.6,6.6,18.0Hz,1H),4.00-3.89(m,2H),3.79(dd,J=3.2,8.0Hz,1H),2.86(s,3H),1.19(d,J=6.6Hz,1H)；13C NMR(100MHz,CD3OD)δ165.99,91.11(d,J=5.31Hz),90.74(d,J=184.1Hz),76.85(q,J=3.7Hz),71.64(d,J=16.4Hz),68.64,68.22(d,J=16.9Hz),30.55,17.74；
MS,(ES,m/z)[M+H]+251.1。
4.2mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌2h。将反应用饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭，然后用EtOAc(30mL)和DCM(3×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并将残留物在高真空下干燥。在–78℃、N2下向残留物和PMB(0.50g，
3.4mmol)的干燥DCM(8mL)中添加BCl3(1.0M在DCM中，3.0mL，3.0mmol)。将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。在–78℃下冷却反应混合物，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，
1:10)对残留物进行纯化，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(0.039g，19%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.40(d,J=6.7Hz,1H),4.78(td,J=3.6,49.3Hz,1H),4.40(ddd,J=3.6,6.6,18.0Hz,1H),4.00-3.89(m,2H),3.79(dd,J=3.2,8.0Hz,1H),2.86(s,3H),1.19(d,J=6.6Hz,1H)；13C NMR(100MHz,CD3OD)δ165.99,91.11(d,J=5.31Hz),90.74(d,J=184.1Hz),76.85(q,J=3.7Hz),71.64(d,J=16.4Hz),68.64,68.22(d,J=16.9Hz),30.55,17.74；
MS,(ES,m/z)[M+H]+251.1。
[0352] 实施例36&37
[0353] (3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢 -3aH- 吡 喃 并 [3,2-d] 噻 唑 -6- 醇 和 (3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-( 乙 基 氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0354]
[0355] 在0℃下向(3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-7-氟-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁基酯(600mg，1.3mmol)的DCM(30mL)溶液中添加DMP(806mg，1.9mmol)。在室温下搅拌2h后，用混合的饱和NaHCO3水溶液(20mL)和Na2S2O3(20mL)淬灭反应。将得到的溶液用DCM(3×30mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩得到粗产物醛。将醛溶解于THF(30mL)中，用MeMgCl(3M在THF中，1.1mL，3.3mmol)在0℃～25℃下处理3h。然后将反应用H2O(50mL)淬灭并用EtOAc(3×40mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过硅胶柱对残留物进行纯化，用3%-30%的在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为黄+ 1
色油状物(355mg，2个步骤收率为57%)。(ES,m/z)[M+H]479.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.20-6.14(m,1H),4.95-4.65(m,1H),4.44-4.25(m,2H),4.08-3.79(m,4H),1.51(s,9H),1.2
5-1.14(m,6H),0.87(s,9H),0.12-0.06(m,6H)。
色油状物(355mg，2个步骤收率为57%)。(ES,m/z)[M+H]479.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.20-6.14(m,1H),4.95-4.65(m,1H),4.44-4.25(m,2H),4.08-3.79(m,4H),1.51(s,9H),1.2
5-1.14(m,6H),0.87(s,9H),0.12-0.06(m,6H)。
[0356] 在室温下将上述物质(350mg，0.73mmol)的MeOH(用HCl气体饱和)(10mL)溶液搅拌3h。蒸馏出挥发物，得到残留物，将残留物溶解于MeOH(5mL)中。用饱和K2CO3水溶液将溶液的pH值调节至9。用THF(3×10mL)萃取得到的溶液。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过制备-HPLC采用以下条件[(Agilent1200)：色谱柱，X-Bridge Prep-C18；流动相，含0.05%氨的水和10min内3%直至13%的乙腈；检测器，220、254nm]对粗产物进行纯化，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(63mg，32%)；(ES,m/+ 1z)：[M+H]265.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.25(d,J=6.6Hz,1H),4.78(td,J=3.9,48.3Hz,1H),4.42-4.33(m,1H),4.00-3.91(m,2H),3.71-3.68(m,1H),3.22-3.05(m,2H),1.07(d,J=6.6Hz,3H),1.02(d,J=7.2Hz,3H)和(3aR,5R,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(77mg，39%)；
+ 1
(ES,m/z)：[M+H]265.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.20(d,J=6.6Hz,1H),4.85(td,J=3.6,49.2Hz,1H),4.41-4.31(m,1H),3.98-3.89(m,2H),3.47-3.43(m,1H),3.17-3.09(m,2H),1.10(d,J=6.6Hz,3H),1.02(d,J=7.2Hz,3H)。
+ 1
(ES,m/z)：[M+H]265.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.20(d,J=6.6Hz,1H),4.85(td,J=3.6,49.2Hz,1H),4.41-4.31(m,1H),3.98-3.89(m,2H),3.47-3.43(m,1H),3.17-3.09(m,2H),1.10(d,J=6.6Hz,3H),1.02(d,J=7.2Hz,3H)。
[0357] 实施例38
[0358] (3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0359]
[0360] 向((3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-((( 叔 丁 基 二 甲 基 甲 硅 烷 基) 氧 基) 甲基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(9.28g，20.6mmol)的DCM(150mL)溶液中添加DMP(13.1g，30.9mmol)。在室温下搅拌1h后，用Et2O(400mL)稀释反应。将得到的悬浮液通过硅藻土饼过滤，并将滤液在室温下浓缩至干。将残留物装载在分层的NaHCO3/硅胶短柱上，并且用(EtOAc/己烷，1:4)洗脱产物，得到((3aR,5R,7R,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-氧代-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白1
色结晶状固体(8.96g，97%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.29(d,J=7.0Hz,1H),5.09(dd,J=4.
7,48.4Hz,1H),4.75-4.69(m,1H),4.12-4.05(m,2H),3.96-3.93(m,1H),3.28(s,3H),1.54(s,9H),0.86(s,9H),0.056(s,3H),0.050(s,3H)。
色结晶状固体(8.96g，97%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.29(d,J=7.0Hz,1H),5.09(dd,J=4.
7,48.4Hz,1H),4.75-4.69(m,1H),4.12-4.05(m,2H),3.96-3.93(m,1H),3.28(s,3H),1.54(s,9H),0.86(s,9H),0.056(s,3H),0.050(s,3H)。
[0361] 向上述物质(8.96g，20.0mmol)的干燥MeOH(250mL)溶液中添加NaH(60%在矿物油中，0.158g，3.95mmol)，并将混合物在室温下搅拌15min(接着进行TLC)。然后在0℃下冷却反应混合物，并添加NaBH4(1.32g，34.9mmol)。在0℃下搅拌混合物20min后，添加干冰片并蒸发溶剂。将残留物溶解于DCM(100mL)，并用饱和NH4Cl水溶液(100mL)洗涤。收集有机层，并将水层用DCM(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:5)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白1
色泡沫(6.84g，76%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.06(d,J=6.7Hz,1H),5.01(td,J=4.3,46.8Hz,1H),4.49-4.44(m,1H),4.17-4.13(m,1H),3.80-3.79(m,2H),3.66-3.63(m,1H),3.38(s,3H),2.72(s,br.,1H,(OH)),1.54(s,9H),0.89(s,9H),0.062(s,3H),0.057(s,3H)。
色泡沫(6.84g，76%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.06(d,J=6.7Hz,1H),5.01(td,J=4.3,46.8Hz,1H),4.49-4.44(m,1H),4.17-4.13(m,1H),3.80-3.79(m,2H),3.66-3.63(m,1H),3.38(s,3H),2.72(s,br.,1H,(OH)),1.54(s,9H),0.89(s,9H),0.062(s,3H),0.057(s,3H)。
[0362] 在0℃下，向上述物质(1.30g，2.89mmol)和Bu4NI(0.107g，0.290mmol)的无水DMF(12mL)溶液中添加NaH(60%在矿物油中，0.145g，3.63mmol)。添加NaH后，添加BnBr(0.989g，5.78mmol)。在0℃下搅拌30min然后在室温下过夜后，用Et2O(100mL)洗脱混合物。用饱和NH4Cl水溶液(2×50mL)洗涤混合物。水层用Et2O(2×40mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(50mL)洗涤，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:20至1:4)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲
基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基
1
酯，为粘稠的油状物(1.44g，92%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),6.21(d,J=7.2Hz,1H),5.30-5.16(m,1H),4.80(d,J=11.4Hz,1H),4.56(d,J=11.4Hz,1H),4.50-4.42(m,
1H),3.95-3.78(m,4H),3.44(s,3H),1.54(s,9H),0.89(s,9H),0.049(s,6H)。
基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基
1
酯，为粘稠的油状物(1.44g，92%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.27(m,5H),6.21(d,J=7.2Hz,1H),5.30-5.16(m,1H),4.80(d,J=11.4Hz,1H),4.56(d,J=11.4Hz,1H),4.50-4.42(m,
1H),3.95-3.78(m,4H),3.44(s,3H),1.54(s,9H),0.89(s,9H),0.049(s,6H)。
[0363] 在0℃下，向上述物质(1.44g，2.66mmol)的THF(25mL)溶液中添加TBAF(1.0M在THF中，3.5mL，3.5mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌2h并用盐水(50mL)稀释。将混合物用EtOAc(2×40mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:2至1:1)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(1.08g，95%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.27(m,5H),6.18(d,J=7.4Hz,1H),5.17-5.04(m,1H),4.84(d,J=11.6Hz,1H),4.55(d,J=11.6Hz,1H),4.50-4.43(m,1H),3.95-3.91(m,1H),3.883.82(m,
1H),3.79-3.75(m,1H),3.71-3.67(m,1H),3.37(s,3H),1.53(s,9H)。
1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(1.08g，95%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.27(m,5H),6.18(d,J=7.4Hz,1H),5.17-5.04(m,1H),4.84(d,J=11.6Hz,1H),4.55(d,J=11.6Hz,1H),4.50-4.43(m,1H),3.95-3.91(m,1H),3.883.82(m,
1H),3.79-3.75(m,1H),3.71-3.67(m,1H),3.37(s,3H),1.53(s,9H)。
[0364] 在0℃下向上述物质(2.57g，6.03mmol)的DCM(60mL)溶液中添加DMP(3.82g，9.00mmol)。在室温下搅拌1h后，用Et2O(100mL)稀释反应混合物。将得到的悬浮液通过硅藻土饼过滤，并将滤液在室温下浓缩至干。残留物用EtOAc(3×50mL)萃取，并滤出固体。用混合的饱和NaHCO3水溶液(30mL)和Na2S2O3(5mL)洗涤萃取物。收集萃取物并经无水MgSO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，得到粗产物((3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯。这
1
种粗物质无需经过进一步纯化即可用于下一步骤。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.65(s,1H),7.39-7.29(m,5H),6.04(d,J=7.0Hz,1H),5.08(td,J=4.2,46.7Hz,1H),4.84(d,J=11.4Hz,1H),4.64(d,J=11.4Hz,1H),4.55-4.49(m,1H),4.31(d,J=7.5Hz,1H),4.19-4.15(m,1H),3.30(s,3H),1.52(s,9H)。)
1
种粗物质无需经过进一步纯化即可用于下一步骤。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.65(s,1H),7.39-7.29(m,5H),6.04(d,J=7.0Hz,1H),5.08(td,J=4.2,46.7Hz,1H),4.84(d,J=11.4Hz,1H),4.64(d,J=11.4Hz,1H),4.55-4.49(m,1H),4.31(d,J=7.5Hz,1H),4.19-4.15(m,1H),3.30(s,3H),1.52(s,9H)。)
[0365] 向上述物质(1.94g，4.57mmol)和TMSCF3(1.80g，12.7mmol)的无水THF(50mL)溶液中添加TBAF(1.0M在THF中，0.75mL，0.75mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌16h。在0℃下冷却反应混合物，并添加另一批TBAF(1.0M在THF中，11.0mL，11.0mmol)。
将混合物在室温下再搅拌2h，然后用EtOAc(100mL)和盐水(100mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:3)对残留物进行纯化和分离，得到((3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为淡
1
黄色固体(0.761g，34%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.28(m,5H),6.20(d,J=7.5Hz,1H),5.06(td,J=3.5,49.5Hz,1H),4.80(d,J=11.6Hz,1H),4.57(d,J=11.6Hz,1H),4.38-4.30(m,1H),4.23(d,J=8.8Hz,1H),4.15-4.10(m,1H),3.91-3.84(m,1H),3.32(s,3H),2.96(d,J=1
0.1Hz,1H(OH)),1.52(s,9H)。
将混合物在室温下再搅拌2h，然后用EtOAc(100mL)和盐水(100mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:3)对残留物进行纯化和分离，得到((3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为淡
1
黄色固体(0.761g，34%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.28(m,5H),6.20(d,J=7.5Hz,1H),5.06(td,J=3.5,49.5Hz,1H),4.80(d,J=11.6Hz,1H),4.57(d,J=11.6Hz,1H),4.38-4.30(m,1H),4.23(d,J=8.8Hz,1H),4.15-4.10(m,1H),3.91-3.84(m,1H),3.32(s,3H),2.96(d,J=1
0.1Hz,1H(OH)),1.52(s,9H)。
[0366] 在–78℃、N2下向上述物质(0.760g，1.54mmol)和PMB(0.70g，4.7mmol)的无水DCM(10mL)溶液中添加BCl3(1.0M在DCM中，10.0mL，10.0mmol)。将混合物搅拌～5h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:8)对残留物进行纯化，得到(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙1
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为米白色固体(0.373g，80%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.43(d,J=6.7Hz,1H),4.86(ddd,J=2.9,3.6,51.5Hz,1H),4.34-4.26
13
(m,2H),4.17(d,J=9.3Hz,1H),3.99-3.90(m,1H),2.85(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ16
5.65,126.48(q,J=281.2Hz),91.27(d,J=183.2Hz),90.42(d,J=2.2Hz),70.54(d,J=16.2Hz),69.70-69.65(m),69.20(d,J=30.4Hz),65.91(d,J=17.6Hz),30.37；MS,m/z=305.1(M+1)。
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为米白色固体(0.373g，80%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.43(d,J=6.7Hz,1H),4.86(ddd,J=2.9,3.6,51.5Hz,1H),4.34-4.26
13
(m,2H),4.17(d,J=9.3Hz,1H),3.99-3.90(m,1H),2.85(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ16
5.65,126.48(q,J=281.2Hz),91.27(d,J=183.2Hz),90.42(d,J=2.2Hz),70.54(d,J=16.2Hz),69.70-69.65(m),69.20(d,J=30.4Hz),65.91(d,J=17.6Hz),30.37；MS,m/z=305.1(M+1)。
[0367] 实施例39
[0368] (3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0369]
[0370] 向 ((3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-(苄 氧 基 )-7- 氟 -5- 甲 酰 基 -5,6,7,7a- 四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.352g，0.829mmol)和TMSCF3(0.290g，2.04mmol)的无水THF(15mL)溶液中添加TBAF(1.0M在THF中，0.050mL，0.050mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌16h。在0℃下冷却反应混合物，并添加另一批TBAF(1.0M在THF中，1.5mL，1.5mmol)。将混合物在室温下再搅拌2h，然后用EtOAc(20mL)和盐水(50mL)稀释。收集有机层，并将水层用EtOAc(20mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至2:3)对残留物进行纯化和分离，得到((3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为淡黄色固体(0.141g，34%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.28(m,5H),6.14(d,J=7.5Hz,1H),5.09(td,J=4.1,46.4Hz,1H),4.87(d,J=1
0.8Hz,1H),4.38-4.30(m,1H),4.50(d,J=10.8Hz,1H),4.25-4.22(m,1H),4.10-4.06(m,2H),3.27(s,3H),1.52(s,9H)。
1
唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为淡黄色固体(0.141g，34%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.28(m,5H),6.14(d,J=7.5Hz,1H),5.09(td,J=4.1,46.4Hz,1H),4.87(d,J=1
0.8Hz,1H),4.38-4.30(m,1H),4.50(d,J=10.8Hz,1H),4.25-4.22(m,1H),4.10-4.06(m,2H),3.27(s,3H),1.52(s,9H)。
[0371] 在–78℃、N2下向上述物质(0.141g，0.285mmol)和PMB(0.20g，1.3mmol)的无水DCM(6mL)溶液中添加BCl3(1.0M在DCM中，2.5mL，2.5mmol)。将混合物搅拌～4h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:10)对残留物进行纯化，得到(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为米白色固体(0.076g，78%)。1
H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.34(d,J=6.6Hz,1H),4.85(td,J=3.8,48.2Hz,1H),4.52-4.46(m
13
,1H),4.20-4.14(m,2H),4.02(dd,J=4.3,7.5Hz,1H),2.87(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ166.00,126.09(q,J=280.7Hz),90.39(d,J=6.2Hz),89.99(d,J=185.0Hz),74.54(d,J=4.7Hz),72.12(d,J=16.6Hz),71.40(q,J=30.0Hz),67.57(d,J=17.0Hz),30.72；MS,m/z=305.1(M+1)。
H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.34(d,J=6.6Hz,1H),4.85(td,J=3.8,48.2Hz,1H),4.52-4.46(m
13
,1H),4.20-4.14(m,2H),4.02(dd,J=4.3,7.5Hz,1H),2.87(s,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ166.00,126.09(q,J=280.7Hz),90.39(d,J=6.2Hz),89.99(d,J=185.0Hz),74.54(d,J=4.7Hz),72.12(d,J=16.6Hz),71.40(q,J=30.0Hz),67.57(d,J=17.0Hz),30.72；MS,m/z=305.1(M+1)。
[0372] 实施例40&41
[0373] (3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0374]
[0375] 在25℃下向(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6,7-二醇(88g，358mmol)的MeOH(500mL)悬浮液中依次添加Et3N(48.9g，484mmol)和Boc2O(139g，637mmol)。搅拌10h后，蒸馏出挥发物得到残留物，通过硅胶柱对残留物进行纯化，用1%～3%在DCM中的MeOH洗脱，得到粗产物，为糖浆状物。将糖浆状物从EtOAc/石油醚(1:3)重结晶，得到(3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-二羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，+ 1
为白色固体(90g，73%)。(ES,m/z):[M+H]349.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.13(d,J=6.6Hz,1H),4.23-4.22(m,1H),4.17-4.14(m,1H),3.91-3.86(m,2H),3.81-3.77(m,3H),3.59-3.5
5(m,1H),3.16-3.17(m,1H,OH),1.53(s,9H),1.15(t,J=7.5Hz,3H)。
为白色固体(90g，73%)。(ES,m/z):[M+H]349.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.13(d,J=6.6Hz,1H),4.23-4.22(m,1H),4.17-4.14(m,1H),3.91-3.86(m,2H),3.81-3.77(m,3H),3.59-3.5
5(m,1H),3.16-3.17(m,1H,OH),1.53(s,9H),1.15(t,J=7.5Hz,3H)。
[0376] 在50℃下将上述物质(80g，230mmol)和咪唑(62.5g，919mmol)的DMF(300mL)溶液用TBDMSCl(76g，506mmol)处理3h。将反应用饱和NaHCO3水溶液(1L)淬灭并用EtOAc(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×300mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过硅胶柱对残留物进行纯化，用3%-10%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基+ 1
甲酸叔丁基酯，为黄色油状物(78g，59%)。(ES,m/z):[M+H]577.0；HNMR(300MHz,CDCl3)δ5.95(d,J=6.0Hz,1H),4.25-4.21(m,1H),4.01-4.09(m,1H),3.98-3.83(m,2H),
3.81-3.65(m,3H),3.45-3.35(m,1H),1.50(s,9H),1.15(t,J=7.5Hz,3H),0.92(s,
9H),0.89(s,9H),0.15(s,6H),0.08(s,6H)。
甲酸叔丁基酯，为黄色油状物(78g，59%)。(ES,m/z):[M+H]577.0；HNMR(300MHz,CDCl3)δ5.95(d,J=6.0Hz,1H),4.25-4.21(m,1H),4.01-4.09(m,1H),3.98-3.83(m,2H),
3.81-3.65(m,3H),3.45-3.35(m,1H),1.50(s,9H),1.15(t,J=7.5Hz,3H),0.92(s,
9H),0.89(s,9H),0.15(s,6H),0.08(s,6H)。
[0377] 在0℃下向上述物质(75g，130mmol)的吡啶(200mL)溶液添加DMAP(1.6g，13mmol)和BzCl(36.5g，261mmol)。在25℃下搅拌6h后，将反应用饱和NaHCO3水溶液(600mL)淬灭并用EtOAc(3×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×200mL)洗涤，
经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对粗残留物进行纯化，用1%-5%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(叔丁氧基羰基)-7-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃
+ 1
并[3,2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯，为黄色油状物(80g，90%)。(ES,m/z)：[M+H]681.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.03(d,J=6.0Hz,2H),7.57-7.54(m,1H),7.44-7.39(m,2H),6.06(d,J=4.8Hz,1H),5.17(d,J=6.9Hz,1H),4.49(s,1H),4.19-4.16(m,1H),3.95(q,J=4.8Hz,
2H),3.74-3.73(m,1H),3.71-3.68(m,2H),1.55(s,9H),1.15(t,J=4.8Hz,3H),0.92(s,9H),
0.87(s,9H),0.20(s,3H),0.16(s,3H),0.03(s,6H)。
经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对粗残留物进行纯化，用1%-5%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-2-(叔丁氧基羰基)-7-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃
+ 1
并[3,2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯，为黄色油状物(80g，90%)。(ES,m/z)：[M+H]681.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.03(d,J=6.0Hz,2H),7.57-7.54(m,1H),7.44-7.39(m,2H),6.06(d,J=4.8Hz,1H),5.17(d,J=6.9Hz,1H),4.49(s,1H),4.19-4.16(m,1H),3.95(q,J=4.8Hz,
2H),3.74-3.73(m,1H),3.71-3.68(m,2H),1.55(s,9H),1.15(t,J=4.8Hz,3H),0.92(s,9H),
0.87(s,9H),0.20(s,3H),0.16(s,3H),0.03(s,6H)。
[0378] 在室温下将上述物质(80g，117mmol)用1.5M HCl(g)的MeOH(300mL)溶液处理12h。在室温下真空除去溶剂得到残留物，将残留物溶解于MeOH(500mL)中，接着在室温下添加Et3N(23.5g，232mmol)和Boc2O(50.8g，233mmol)。另经10h后，蒸馏出挥发物，得到残留物，通过硅胶柱对残留物进行纯化，用10%-20%在DCM中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(叔丁氧基羰基)-7-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-基苯甲酸酯，为黄色油状物(47g，88%)。(ES,m/z)：
+ 1
[M+H]453.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.03(d,J=6.0Hz,2H),7.57-7.54(m,1H),7.44-7.39(m,2H),6.17(d,J=7.2Hz,1H),5.13(d,J=8.4Hz,1H),4.56-4.55(m,1H),4.39-4.37(m,1H),
3.95(q,J=4.8Hz,2H),3.80-3.60(m,3H),1.55(s,9H),1.15(t,J=4.8Hz,3H)。
+ 1
[M+H]453.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.03(d,J=6.0Hz,2H),7.57-7.54(m,1H),7.44-7.39(m,2H),6.17(d,J=7.2Hz,1H),5.13(d,J=8.4Hz,1H),4.56-4.55(m,1H),4.39-4.37(m,1H),
3.95(q,J=4.8Hz,2H),3.80-3.60(m,3H),1.55(s,9H),1.15(t,J=4.8Hz,3H)。
[0379] 在-10℃下向上述物质(47g，104mmol)和DMAP(0.6g，4.9mmol)的吡啶(300mL)溶液添加BzCl(11.6g，82mmol)。在室温下搅拌12h后，将反应用饱和NaHCO3水溶液(800mL)淬灭，并用EtOAc(3×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×300mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对粗残留物进行纯化，用10%-20%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到[(3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-{[(叔丁氧基)羰基](乙基)氨基}-7-羟基-3aH,5H,6H,7H,7aH-吡喃并[3,2-d][1,3]噻唑-5-基]甲基苯甲酸酯，为黄色糖浆状+ 1物(35g，61%)。(ES,m/z)：[M+H]557.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.03-8.01(m,4H),7.61-7.
52(m,2H),7.45-7.37(m,4H),6.20(d,J=5.4Hz,1H),5.19-5.17(m,1H),4.57-4.53(m,2H),4.48-4.43(m,2H),4.17-4.13(m,1H),4.00-3.90(m,2H),1.57(s,9H),1.19(t,J=5.4Hz,3H)。
52(m,2H),7.45-7.37(m,4H),6.20(d,J=5.4Hz,1H),5.19-5.17(m,1H),4.57-4.53(m,2H),4.48-4.43(m,2H),4.17-4.13(m,1H),4.00-3.90(m,2H),1.57(s,9H),1.19(t,J=5.4Hz,3H)。
[0380] 在-78℃下将上述物质(20g，36mmol)的DCM(200mL)溶液用DAST(23.2g，144mmol)处理。在25℃下搅拌36h后，将反应用饱和NaHCO3溶液(400mL)淬灭并用
DCM(3×200mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对粗残留物进行纯化，用1%-5%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到[(3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-{[(叔丁氧基)羰基](乙基)氨基}-7-氟-3aH,5H,6H,7H,7aH-吡喃并[3,2-d]+ 1
[1,3]噻唑-5-基]甲基苯甲酸酯，为黄色油状物(14g，70%)。(ES,m/z)：[M+H]559.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.02-8.00(m,4H),7.61-7.51(m,2H),7.45-7.36(m,4H),6.18(d,J=5.4Hz,1H),5.54-5.40(m,1H),5.35(d,J=36Hz,1H),4.61-4.59(m,1H),4.57-4.41(m,2H),4.
03-3.94(m,3H),1.57(s,9H),1.21(t,J=5.1Hz,3H)。
DCM(3×200mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对粗残留物进行纯化，用1%-5%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到[(3aR,5R,6R,7R,7aR)-6-(苯甲酰氧基)-2-{[(叔丁氧基)羰基](乙基)氨基}-7-氟-3aH,5H,6H,7H,7aH-吡喃并[3,2-d]+ 1
[1,3]噻唑-5-基]甲基苯甲酸酯，为黄色油状物(14g，70%)。(ES,m/z)：[M+H]559.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.02-8.00(m,4H),7.61-7.51(m,2H),7.45-7.36(m,4H),6.18(d,J=5.4Hz,1H),5.54-5.40(m,1H),5.35(d,J=36Hz,1H),4.61-4.59(m,1H),4.57-4.41(m,2H),4.
03-3.94(m,3H),1.57(s,9H),1.21(t,J=5.1Hz,3H)。
[0381] 在25℃下将上述物质(26g，46.5mmol)的MeOH(200mL)溶液用K2CO3(0.7g，5mmol)处理3h。将得到的溶液用乙酸中和，并在室温下真空除去溶剂。通过硅胶柱对粗残留物进行纯化，用1%-3%在DCM中的MeOH洗脱，得到((3aR,5R,6R,7R,7aR)-7-氟-6-羟基-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基乙基酯，为+ 1白色固体(15g，92%)。(ES,m/z)：[M+H]351.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.10(d,J=5.1Hz,1H),4.95(td,J=4.3,45Hz,1H),4.43-4.37(m,1H),3.96-3.87(m,2H),3.80-3.73(m,2H),3.6
2-3.57(m,1H),3.38-3.35(m,1H),1.53(s,9H),1.13(t,J=5.1Hz,3H)。
2-3.57(m,1H),3.38-3.35(m,1H),1.53(s,9H),1.13(t,J=5.1Hz,3H)。
[0382] 在室温下向上述物 质(3g，8.5mmol)的DCM(50mL)溶液添加Et3N(1.3g，13mmol)、DMAP(0.2g，1.7mmol)和TBDMSCl(1.93g，12.7mmol)。搅拌10h后，将反应用饱和NaHCO3水溶液(50mL)淬灭并用DCM(2×30mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对残留物进行纯化，用10%-20%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7R,7aR)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为黄色油+ 1
状物(3.6g，90%)。(ES,m/z)：[M+H]465.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.98(d,J=6.6Hz,1H),4.96(td,J=4.9,48Hz,1H),4.45-4.37(m,2H),3.96-3.87(m,2H),3.88-3.75(m,1H),3.64-3.
55(m,1H),3.38-3.35(m,1H),1.51(s,9H),1.15(t,J=5.1Hz,3H),0.85(s,9H),0.02(s,6H)。
状物(3.6g，90%)。(ES,m/z)：[M+H]465.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.98(d,J=6.6Hz,1H),4.96(td,J=4.9,48Hz,1H),4.45-4.37(m,2H),3.96-3.87(m,2H),3.88-3.75(m,1H),3.64-3.
55(m,1H),3.38-3.35(m,1H),1.51(s,9H),1.15(t,J=5.1Hz,3H),0.85(s,9H),0.02(s,6H)。
[0383] 在0℃下向上述物质(2.2g，4.7mmol)的DCM(40mL)溶液添加DMP(3g，7.1mmol)。在室温下搅拌2h后，将反应用混合的饱和NaHCO3水溶液(20mL)和Na2S2O3(20mL)淬灭。将得到的溶液用DCM(3×30mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对残留物进行纯化，用2%-15%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,7R,7aR)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-7-氟-6-氧代-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]+
噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为黄色固体(1.9g，89%)。(ES,m/z)：[M+H]463.0；
1
H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.24(d,J=6.9Hz,1H),5.05(dd,J=4.5,48.6Hz,1H),4.75-4.68(m,
1H),4.11-4.06(m,1H),4.04-3.99(m,1H),3.93-3.79(m,3H),1.51(s,9H),1.07(t,J=6.9Hz,3H),0.84(s,9H),0.03(s,6H)。
噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为黄色固体(1.9g，89%)。(ES,m/z)：[M+H]463.0；
1
H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.24(d,J=6.9Hz,1H),5.05(dd,J=4.5,48.6Hz,1H),4.75-4.68(m,
1H),4.11-4.06(m,1H),4.04-3.99(m,1H),3.93-3.79(m,3H),1.51(s,9H),1.07(t,J=6.9Hz,3H),0.84(s,9H),0.03(s,6H)。
[0384] 向上述物质(1.8g，3.9mmol)的MeOH(30mL)溶液中添加NaH(70%在矿物油中，11mg，0.3mmol)。在室温下搅拌40min后，然后将反应混合物冷却至0℃，并添加NaBH4(296mg，7.8mmol)。另经1小时后，将反应用冰水(30mL)淬灭，并用DCM(3×30mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对残留物进行纯化，用
3%-20%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨+ 1
基甲酸叔丁基酯，为黄色固体(1.2g，67%)。(ES,m/z)：[M+H]465.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.01(d,J=6.6Hz,1H),4.93(td,J=4.3,46.8Hz,1H),4.44-4.35(m,2H),4.17-4.08(m,1H),3.96-3.87(m,1H),3.86-3.77(m,1H),3.56-3.47(m,1H),3.42-3.37(m,1H),1.51(s,9H),1.13(t,J=5.1Hz,3H),0.85(s,9H),0.02(s,6H)。
3%-20%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨+ 1
基甲酸叔丁基酯，为黄色固体(1.2g，67%)。(ES,m/z)：[M+H]465.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.01(d,J=6.6Hz,1H),4.93(td,J=4.3,46.8Hz,1H),4.44-4.35(m,2H),4.17-4.08(m,1H),3.96-3.87(m,1H),3.86-3.77(m,1H),3.56-3.47(m,1H),3.42-3.37(m,1H),1.51(s,9H),1.13(t,J=5.1Hz,3H),0.85(s,9H),0.02(s,6H)。
[0385] 在室温下向上述物质(2.6g，5.6mmol)的DCM(50mL)溶液中添加咪唑(816mg，12mmol)和TBDMSCl(1.3g，8.4mmol)。搅拌6h后，将反应用饱和NaHCO3水溶液(50mL)淬灭并用DCM(3×30mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通
过短硅胶柱对残留物进行纯化，用1%-20%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到粗产物
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔
+
丁基酯，为黄色油状物，其直接用于下一步骤中；(ES,m/z)：[M+H]579.1。
过短硅胶柱对残留物进行纯化，用1%-20%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到粗产物
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔
+
丁基酯，为黄色油状物，其直接用于下一步骤中；(ES,m/z)：[M+H]579.1。
[0386] 在0℃下向上述粗物质的DCM(10mL)和MeOH(20mL)溶液中缓慢添加AcCl(2mL)。在20℃下搅拌30min后(之后进行TLC)，用Et3N将溶液的pH值调节至8-9。在室温
下真空除去溶剂。通过硅胶柱对残留物进行纯化，用3%-20%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-7-氟-5-(羟基甲
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为黄+ 1
色油状物(1.3g，2步收率为50%)。(ES,m/z)：[M+H]465.1；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.17(d,J=6.3Hz,1H),4.99-4.82(m,1H),4.22-4.13(m,1H),4.09-4.03(m,1H),3.88-3.75(m,2H),3.73-3.67(m,1H),3.55-3.41(m,1H),3.38-3.35(m,1H),1.55(s,9H),1.17(t,J=5.1Hz,3H),0.91(s,9H),0.09(s,6H)。
下真空除去溶剂。通过硅胶柱对残留物进行纯化，用3%-20%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-7-氟-5-(羟基甲
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(乙基)氨基甲酸叔丁基酯，为黄+ 1
色油状物(1.3g，2步收率为50%)。(ES,m/z)：[M+H]465.1；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.17(d,J=6.3Hz,1H),4.99-4.82(m,1H),4.22-4.13(m,1H),4.09-4.03(m,1H),3.88-3.75(m,2H),3.73-3.67(m,1H),3.55-3.41(m,1H),3.38-3.35(m,1H),1.55(s,9H),1.17(t,J=5.1Hz,3H),0.91(s,9H),0.09(s,6H)。
[0387] 在0℃下向上述物质(1.3g，2.8mmol)的DCM(30mL)溶液中添加DMP(1.8g，4.2mmol)。在室温下搅拌2h后，将反应用混合的饱和NaHCO3水溶液(20mL)和Na2S2O3(20mL)淬灭。将得到的溶液用DCM(3×30mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩得到粗产物醛。将醛溶解于THF(30mL)，用TMSCF3(2g，14mmol)和TBAF(350mg，1.1mmol)以及4A分子筛在0℃～25℃下处理12h，然后添加另外的TBAF(1.3g，4.2mmol)。另经2h后，将反应用H2O(50mL)稀释并用EtOAc(3×40mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对残留物进行纯化，用3%-30%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到((3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-6-羟基-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基乙基酯，为黄色油状物(970mg，2步+ 1
收率为39%)。(ES,m/z)：[M+H]419.1；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.26-6.13(m,1H),5.01-4.
80(m,1H),4.39-4.23(m,2H),4.21-3.99(m,2H),3.68-3.52(m,2H),1.55(s,9H),1.19-1.13(m,3H)。
收率为39%)。(ES,m/z)：[M+H]419.1；H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.26-6.13(m,1H),5.01-4.
80(m,1H),4.39-4.23(m,2H),4.21-3.99(m,2H),3.68-3.52(m,2H),1.55(s,9H),1.19-1.13(m,3H)。
[0388] 在室温下向上述物质(380mg，0.9mmol)的DCM(20mL)溶液添加TFA(4mL)。在室温下2h后，蒸馏出挥发物得到残留物，将残留物溶解于MeOH(3mL)中并用浓氨水中和。真空浓缩后，通过制备-HPLC采用以下条件[(Agilent 1200)：色谱柱，X-Bridge Prep-C18；流动相，含0.05%氨的水和10min内由10%乙腈直至22%乙腈；检测器，220nm、254nm]对粗混合物进行纯化，得到(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((S)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(70.3mg，24%)；+ 1
(ES,m/z)：[M+H]319.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.15(d,J=6.6Hz,1H),4.89(td,J=4.2,44.1Hz,1H),4.48-4.39(m,1H),4.32-4.16(m,2H),3.95-3.90(m,1H),3.20-3.10(m,2H),1.02(t,J=7.5Hz,3H)；和(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(81.9mg，28%)；
+ 1
(ES,m/z)：[M+H]319.0；HNMR(300MHz,D2O)δ6.24(d,J=6.6Hz,1H),4.92(ddd,J=2.7,4.
2,50.7Hz,1H),4.37-4.26(m,2H),4.09-3.97(m,2H),3.19-3.07(m,2H),1.02(t,J=7.2Hz,
3H)。
(ES,m/z)：[M+H]319.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.15(d,J=6.6Hz,1H),4.89(td,J=4.2,44.1Hz,1H),4.48-4.39(m,1H),4.32-4.16(m,2H),3.95-3.90(m,1H),3.20-3.10(m,2H),1.02(t,J=7.5Hz,3H)；和(3aR,5S,6R,7S,7aR)-2-(乙基氨基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体(81.9mg，28%)；
+ 1
(ES,m/z)：[M+H]319.0；HNMR(300MHz,D2O)δ6.24(d,J=6.6Hz,1H),4.92(ddd,J=2.7,4.
2,50.7Hz,1H),4.37-4.26(m,2H),4.09-3.97(m,2H),3.19-3.07(m,2H),1.02(t,J=7.2Hz,
3H)。
[0389] 实施例42
[0390] (3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-乙基-7-氟-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0391]
[0392] 在 0 ℃ 下 向 ((3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-( 苄 氧 基 )-7- 氟 -5-( 羟 基 甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(500mg，1.17mmol)的DCM(20mL)溶液中添加DMP(746mg，1.76mmol)。在室温下搅拌
2h后，将反应用混合的饱和NaHCO3水溶液(10mL)和Na2S2O3(10mL)淬灭。将得到的溶液用DCM(3×30mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩，得到粗产物醛(3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并
[3,2-d]噻唑-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁基酯。该粗产物醛无需经过进一步纯化即可用
1
于下一步骤。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.65(s,1H),7.39-7.29(m,5H),6.04(d,J=7.0Hz,1H),5.08(td,J=4.2,46.7Hz,1H),4.84(d,J=11.4Hz,1H),4.64(d,J=11.4Hz,1H),4.55-4.49(m,1H),4.31(d,J=7.5Hz,1H),4.19-4.15(m,1H),3.30(s,3H),1.52(s,9H)。
2h后，将反应用混合的饱和NaHCO3水溶液(10mL)和Na2S2O3(10mL)淬灭。将得到的溶液用DCM(3×30mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩，得到粗产物醛(3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并
[3,2-d]噻唑-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁基酯。该粗产物醛无需经过进一步纯化即可用
1
于下一步骤。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.65(s,1H),7.39-7.29(m,5H),6.04(d,J=7.0Hz,1H),5.08(td,J=4.2,46.7Hz,1H),4.84(d,J=11.4Hz,1H),4.64(d,J=11.4Hz,1H),4.55-4.49(m,1H),4.31(d,J=7.5Hz,1H),4.19-4.15(m,1H),3.30(s,3H),1.52(s,9H)。
[0393] 在10℃下将上述粗物质(1.17mmol)的THF(20mL)溶液用MeMgCl(1M，2.34mL，2.34mmol)处理3h。然后将反应用H2O(20mL)淬灭，并用EtOAc(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对残留物进行纯化，用5%-20%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基
(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为浅黄色油状物(273mg，经2个步骤收率为53%)。(ES,m/z)+ 1
[M+H]441.1；H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.40-7.31(m,5H),6.21-6.03(m,1H),5.12-4.93(m,
2H),4.65-4.42(m,2H),4.35-4.15(m,2H),3.96-3.65(m,1H),3.38-3.29(m,3H),1.57-1.54(m,9H),1.34-1.29(m,3H)。
(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为浅黄色油状物(273mg，经2个步骤收率为53%)。(ES,m/z)+ 1
[M+H]441.1；H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.40-7.31(m,5H),6.21-6.03(m,1H),5.12-4.93(m,
2H),4.65-4.42(m,2H),4.35-4.15(m,2H),3.96-3.65(m,1H),3.38-3.29(m,3H),1.57-1.54(m,9H),1.34-1.29(m,3H)。
[0394] 在0℃下向上述物质(150mg，0.34mmol)的DCM(15mL)溶液中缓慢添加吡啶(107mg，1.36mmol)和O-苯基硫代氯甲酸酯(O-phenyl carbonochloridothioate)(248mg，1.45mmol)。在室温下搅拌24h后，将反应用饱和NaHCO3水溶液(20mL)淬灭。将得到的溶液用DCM(3×50mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥并真空浓缩。通过硅胶柱对残留物进行纯化，用2%-5%在石油醚中的EtOAc洗脱，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1-(phenoxy硫代碳酰基氧基)乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为黄色油状物(116mg，59%)。(ES,m/z)+ 1
[M+H]577.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.46-7.29(m,8H),7.20-7.10(m,2H),6.23(d,J=7.5Hz,1H),5.58-5.52(m,1H),5.19-5.00(m,1H),4.93(d,J=11.1Hz,1H),4.68-4.60(m,1H),4.
57(d,J=11.1Hz,1H),4.10-3.98(m,2H),3.29(s,3H),1.55(s,9H),1.38-1.34(m,3H)。
[M+H]577.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.46-7.29(m,8H),7.20-7.10(m,2H),6.23(d,J=7.5Hz,1H),5.58-5.52(m,1H),5.19-5.00(m,1H),4.93(d,J=11.1Hz,1H),4.68-4.60(m,1H),4.
57(d,J=11.1Hz,1H),4.10-3.98(m,2H),3.29(s,3H),1.55(s,9H),1.38-1.34(m,3H)。
[0395] 向 上 述物 质 (110mg，0.19mmol)的 甲 苯(10mL)溶 液 添 加SnBu3H(277mg，0.95mmol)、AIBN(31mg，0.19mmol)。在80℃下搅拌2h后，蒸馏出溶剂以得到残
留物，通过硅胶柱对残留物进行纯化，用2%-10%在石油醚中的EtOA洗脱，得到
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄 氧 基)-5- 乙 基-7-氟 -5,6,7,7a-四 氢-3aH-吡 喃 并[3,2-d]噻唑-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为浅黄色油状物(57mg，70%)。(ES,m/z)+ 1
[M+H]425.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.38-7.31(m,5H),6.12(d,J=7.5Hz,1H),5.19-5.01(m,1H),4.88(d,J=11.1Hz,1H),4.54(d,J=11.4Hz,1H),4.50-4.44(m,1H),3.73-3.64(m,2H),3.33(s,3H),1.58-1.49(m,2H),1.51(s,9H),0.93(t,J=7.5Hz,3H)。
留物，通过硅胶柱对残留物进行纯化，用2%-10%在石油醚中的EtOA洗脱，得到
(3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄 氧 基)-5- 乙 基-7-氟 -5,6,7,7a-四 氢-3aH-吡 喃 并[3,2-d]噻唑-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为浅黄色油状物(57mg，70%)。(ES,m/z)+ 1
[M+H]425.0；H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.38-7.31(m,5H),6.12(d,J=7.5Hz,1H),5.19-5.01(m,1H),4.88(d,J=11.1Hz,1H),4.54(d,J=11.4Hz,1H),4.50-4.44(m,1H),3.73-3.64(m,2H),3.33(s,3H),1.58-1.49(m,2H),1.51(s,9H),0.93(t,J=7.5Hz,3H)。
[0396] 在-78℃～-30℃下将上述物质(110mg，0.26mmol)的DCM(10mL)溶液用BCl3(1M，1.3mL，1.3mmol)处理2h。然后将反应用MeOH(10mL)淬灭。蒸馏出挥发物得到残留物，将残留物溶解于MeOH(3mL)中并用浓氨水中和。真空浓缩后，通过制备-HPLC采用以下条件[(Agilent 1200)：色谱柱，X-Bridge Prep-C18；流动相，含0.05%氨的水和8min内18%乙腈直至38%乙腈；检测器，220nm、254nm]对粗产物进行纯化，得到(3aR,5R,6R,7S,7aR)-5-乙基-7-氟-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]+ 1
噻唑-6-醇，为白色固体(60.9mg，55%)；(ES,m/z)：[M+H]235.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.1
9(d,J=6.3Hz,1H),4.89(td,J=3.3,53.4Hz,1H),4.40-4.31(m,1H),3.83-3.70(m,2H),2.78(s,3H),1.74-1.65(m,1H),1.60-1.49(m,1H),0.85(t,J=7.5Hz,3H)。
噻唑-6-醇，为白色固体(60.9mg，55%)；(ES,m/z)：[M+H]235.0；H NMR(300MHz,D2O)δ6.1
9(d,J=6.3Hz,1H),4.89(td,J=3.3,53.4Hz,1H),4.40-4.31(m,1H),3.83-3.70(m,2H),2.78(s,3H),1.74-1.65(m,1H),1.60-1.49(m,1H),0.85(t,J=7.5Hz,3H)。
[0397] 实施例43
[0398] (3aR,5S,6R,7S,7aR)-7- 氟 -5-(2- 羟 基 丙 烷 -2- 基 )-2-( 甲 基 氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0399]
[0400] 在 0 ℃ 和 N2下 向 ((3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-(苄 氧 基)-7- 氟 -5- 甲 酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(2.0g，4.7mmol)的无水THF(40mL)溶液添加MeMgBr(1.4M在THF/甲苯中，8.0mL，11.2mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌3h。将反应用Et2O(50mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(50mL)淬灭。收集有机层，并将水层用DCM(3×40mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，将残留物溶解于DCM(40mL)，并添加Boc2O(2.0g，9.2mmol)。将混合物在室温下搅拌16h。浓缩后，在硅胶上通过纯化自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:2至
3:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(1.0g，
48%)，为对映异构体的混合物。
3:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(1.0g，
48%)，为对映异构体的混合物。
[0401] 向上述物质(1.0g，2.3mmol)的干燥DCM(20mL)溶液中添加DMP(1.2g，2.8mmol)。在室温下将反应混合物搅拌1.5h，然后用Et2O(80mL)稀释。通过硅藻土饼过滤后，将滤液用饱和NaHCO3水溶液(30mL)洗涤，并收集。将水层用EtOAc(2×40mL)萃取。合并的萃取物经Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:8至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6R,7S,7aR)-5-乙酰基-6-(苄氧基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基
1
酯(0.49g，49%)，为白色固体。H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.39-7.37(m,2H),7.34-7.31(m,2H),7.31-7.29(m,1H),6.02(d,J=7.1Hz,1H),5.15-5.04(m,1H),4.84(d,J=11.1Hz,1H),4.62(d,J=11.1Hz,1H),4.54-4.51(m,1H),4.25-4.20(m,2H),3.33(s,3H),2.23(s,3H),1.54(s,
9H)。
1
酯(0.49g，49%)，为白色固体。H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.39-7.37(m,2H),7.34-7.31(m,2H),7.31-7.29(m,1H),6.02(d,J=7.1Hz,1H),5.15-5.04(m,1H),4.84(d,J=11.1Hz,1H),4.62(d,J=11.1Hz,1H),4.54-4.51(m,1H),4.25-4.20(m,2H),3.33(s,3H),2.23(s,3H),1.54(s,
9H)。
[0402] 在N2下向上述物质(0.153g，0.348mmol)的无水THF(10mL)溶液添加MeMgBr(1.4M在THF/甲苯中，0.50mL，0.70mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌3h。将反应用饱和NaHCO3水溶液(20mL)淬灭，然后用DCM(2×20mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并将残留物在高真空下干燥。在–78℃、N2下向残留物和PMB(0.15g，1.0mmol)的干燥DCM(4mL)溶液添加BCl3(1.0M在DCM中，2.6mL，2.6mmol)。将混合物搅拌～5h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:12)对残留物进行纯化，得到(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-5-(2-羟基丙烷-2-基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固
1
体(0.073g，79%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.15(d,J=6.5Hz,1H),4.38-4.34(m,1H),4.11-
13
4.07(m,1H),4.05-3.98(m,1H),3.68(dd,J=5.6,7.1Hz),2.84(s,3H),2.20-2.09(m,2H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.99,126.24(q,J=280.7Hz),91.08,75.0(br.),72.12(q,J=29.7+
Hz),70.17,67.00,33.65,30.80；MS,(ES,m/z)[M+H]265.1。
1
体(0.073g，79%)。H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.15(d,J=6.5Hz,1H),4.38-4.34(m,1H),4.11-
13
4.07(m,1H),4.05-3.98(m,1H),3.68(dd,J=5.6,7.1Hz),2.84(s,3H),2.20-2.09(m,2H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ163.99,126.24(q,J=280.7Hz),91.08,75.0(br.),72.12(q,J=29.7+
Hz),70.17,67.00,33.65,30.80；MS,(ES,m/z)[M+H]265.1。
[0403] 实施例44&45
[0404] (3aR,5S,6R,7S,7aR)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨 基 )-5-((S)-1,1,1- 三氟-2- 羟 基 丙 烷 -2-基 )-5,6,7,7a- 四 氢-3aH- 吡 喃 并 [3,2-d]噻 唑 -6- 醇和(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7- 氟-2-( 甲 基 氨 基 )-5-((R)-1,1,1-三 氟-2- 羟 基 丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0405]
[0406] 向 ((3aR,5S,6R,7S,7aR)-5-乙 酰 基 -6-( 苄 氧 基 )-7- 氟 -5,6,7,7a- 四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.310g，0.704mmol)和TMSCF3(0.299g，2.10mmol)的无水THF(12mL)溶液添加TBAF(1.0M在THF中，0.040mL，0.040mmol)。添加后，将反应混合物在室温下搅拌16h。在0℃下添加另一批TBAF(1.0M在THF中，1.2mL，1.2mmol)，并将混合物在室温下再搅拌2h。然后将反应溶液用盐水(50mL)稀释，并用EtOAc(2×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化和分离，得到((3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸
1
叔丁基酯(0.178g，50%)，为白色泡沫，H NMR(主要异构体)(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.2
8(m,5H),6.18(d,J=7.7Hz,1H),5.08(td,J=4.3,45.6Hz,1H),4.92(d,J=10.7Hz,1H),4.6
7-4.60(m,1H),4.49(d,J=10.7Hz,1H),4.27-4.22(m,1H),3.66-3.92(m,1H),3.28(s,3H),3.05(s,br.1H),1.54(s,9H),1.38(s,3H)；和叔丁基((3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并
1
[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(0.136g，38%)，为白色泡沫，H NMR(次要异构体 )(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.28(m,5H),6.19(d,J=7.7Hz,1H),5.05(td,J=4.3,45.7Hz,1H),4.94(d,J=10.7Hz,1H),4.64-4.60(m,1H),4.49(d,J=10.7Hz,1H),4.26-4.24(m,1H),3.9
0(d,J=7.5Hz,1H),3.29(s,3H),3.25(s,br.1H),1.54(s,9H),1.37(s,3H)。随机指定每种异构体的立体化学。
1
叔丁基酯(0.178g，50%)，为白色泡沫，H NMR(主要异构体)(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.2
8(m,5H),6.18(d,J=7.7Hz,1H),5.08(td,J=4.3,45.6Hz,1H),4.92(d,J=10.7Hz,1H),4.6
7-4.60(m,1H),4.49(d,J=10.7Hz,1H),4.27-4.22(m,1H),3.66-3.92(m,1H),3.28(s,3H),3.05(s,br.1H),1.54(s,9H),1.38(s,3H)；和叔丁基((3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并
1
[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(0.136g，38%)，为白色泡沫，H NMR(次要异构体 )(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.28(m,5H),6.19(d,J=7.7Hz,1H),5.05(td,J=4.3,45.7Hz,1H),4.94(d,J=10.7Hz,1H),4.64-4.60(m,1H),4.49(d,J=10.7Hz,1H),4.26-4.24(m,1H),3.9
0(d,J=7.5Hz,1H),3.29(s,3H),3.25(s,br.1H),1.54(s,9H),1.37(s,3H)。随机指定每种异构体的立体化学。
[0407] 在–78℃、N2下向((3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(来自TMSCF3加成步骤的主要异构体)(0.18g，0.35mmol)和PMB(0.15g，
1.0mmol)的干燥DCM(5mL)溶液添加BCl3(1.0M在DCM中，2.0mL，2.0mmol)。将混合物搅拌～
4h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:13)对残留物进行纯化，得到(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体
1
(0.086g，77%)。H NMR(600MHz,CD3OD)δ6.37(d,J=6.7Hz,1H),4.83(ddd,J=3.5,4.6,46.7Hz,1H),4.61-4.57(m,1H),4.33-4.30(m,1H),3.90(d,J=6.9Hz),2.88(s,3H),1.34(s,3H)；
13
C NMR(150.9MHz,CD3OD)δ165.55,127.29(q,J=286.0Hz),90.86(d,J=8.4Hz),89.66(d,J=186.5Hz),76.23(d,J=4.0Hz),75.41(q,J=27.4Hz),72.65(d,J=16.6Hz),67.79(d,J=16.6+
Hz),30.84,17.28；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。
1.0mmol)的干燥DCM(5mL)溶液添加BCl3(1.0M在DCM中，2.0mL，2.0mmol)。将混合物搅拌～
4h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:13)对残留物进行纯化，得到(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为白色固体
1
(0.086g，77%)。H NMR(600MHz,CD3OD)δ6.37(d,J=6.7Hz,1H),4.83(ddd,J=3.5,4.6,46.7Hz,1H),4.61-4.57(m,1H),4.33-4.30(m,1H),3.90(d,J=6.9Hz),2.88(s,3H),1.34(s,3H)；
13
C NMR(150.9MHz,CD3OD)δ165.55,127.29(q,J=286.0Hz),90.86(d,J=8.4Hz),89.66(d,J=186.5Hz),76.23(d,J=4.0Hz),75.41(q,J=27.4Hz),72.65(d,J=16.6Hz),67.79(d,J=16.6+
Hz),30.84,17.28；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。
[0408] 在–78℃、N2下向((3aR,5S,6R,7S,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(来自TMSCF3加成步骤的次要异构体)(0.136g，0.277mmol)和PMB(0.10g，0.68mmol)的干燥DCM(5mL)溶液添加BCl3(1.0M在DCM中，2.0mL，2.0mmol)。
将混合物搅拌～4h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:13)对残留物进行纯化，得到(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-6-醇，为白色固体(0.081g，92%)。H NMR(600MHz,CD3OD)δ6.34(d,J=6.7Hz,1H),4.84(ddd,J=3.5,5.0,46.3Hz,1H),4.63-4.60(m,1H),4.36-4.33(m,1H),3.75(d,J=6.9Hz),2.8
13
8(s,3H),1.35(s,3H)；C NMR(150.9MHz,CD3OD)δ165.25,127.26(q,J=287.0Hz),90.46(d,J=9.1Hz),89.55(d,J=186.4Hz),79.12(d,J=4.0Hz),75.77(q,J=27.3Hz),73.26(d,J=16.+
6Hz),67.35(d,J=16.9Hz),30.96,18.72；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。
将混合物搅拌～4h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:13)对残留物进行纯化，得到(3aR,5S,6R,7S,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙烷-2-基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-6-醇，为白色固体(0.081g，92%)。H NMR(600MHz,CD3OD)δ6.34(d,J=6.7Hz,1H),4.84(ddd,J=3.5,5.0,46.3Hz,1H),4.63-4.60(m,1H),4.36-4.33(m,1H),3.75(d,J=6.9Hz),2.8
13
8(s,3H),1.35(s,3H)；C NMR(150.9MHz,CD3OD)δ165.25,127.26(q,J=287.0Hz),90.46(d,J=9.1Hz),89.55(d,J=186.4Hz),79.12(d,J=4.0Hz),75.77(q,J=27.3Hz),73.26(d,J=16.+
6Hz),67.35(d,J=16.9Hz),30.96,18.72；MS,(ES,m/z)[M+H]319.1。
[0409] 实施例46&47
[0410] (3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇和(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0411]
[0412] 在0℃下向((3aR,5R,7R,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-氧代-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲
酸叔丁基酯(2.57g，5.72mmol)的干燥MeOH(50mL)溶液添加NaBH4(0.295g，7.80mmol)。在
0℃下将混合物搅拌20min后，添加干冰片，并蒸发溶剂。将残留物溶解于DCM(50mL)并用饱和NaHCO3水溶液(50mL)洗涤。收集有机层，并将水层用DCM(2×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)
1
(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.95g，37%)，为粘稠的油状物。HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.11(d,J=6.7Hz,1H),4.84(ddd,J=3.2,6.7,48.2Hz,1H),4.45(td,J=6.7,16.6Hz,1H),4.32-4.2
9(m,1H),4.00-3.93(m,2H),3.90-3.86(m,1H),3.36(s,3H),3.19(s,br.,1H,(OH)),1.53(s,9H),0.90(s,9H),0.093(s,3H),0.087(s,3H)。
酸叔丁基酯(2.57g，5.72mmol)的干燥MeOH(50mL)溶液添加NaBH4(0.295g，7.80mmol)。在
0℃下将混合物搅拌20min后，添加干冰片，并蒸发溶剂。将残留物溶解于DCM(50mL)并用饱和NaHCO3水溶液(50mL)洗涤。收集有机层，并将水层用DCM(2×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-6-羟基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)
1
(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.95g，37%)，为粘稠的油状物。HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.11(d,J=6.7Hz,1H),4.84(ddd,J=3.2,6.7,48.2Hz,1H),4.45(td,J=6.7,16.6Hz,1H),4.32-4.2
9(m,1H),4.00-3.93(m,2H),3.90-3.86(m,1H),3.36(s,3H),3.19(s,br.,1H,(OH)),1.53(s,9H),0.90(s,9H),0.093(s,3H),0.087(s,3H)。
[0413] 在0℃下，向上述物质(0.852g，1.89mmol)和Bu4NI(0.070g，0.189mmol)的无水DMF(8mL)溶液添加NaH(60%在矿物油中，0.945g，2.36mmol)。添加NaH后，向反应混合物添加BnBr(0.646g，3.78mmol)。在室温下搅拌16h后，将混合物用盐水(60mL)稀释并用Et2O(2×60mL)萃取。将合并的萃取物用盐水(60mL)洗涤，并经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:5)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苄氧基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-7-氟-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁1
基酯，为无色粘稠油状物(0.980g，95%)。H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.38-7.29(m,5H),5.98(d,J=6.0Hz,1H),4.89(ddd,J=2.1,7.1,48.6Hz,1H),4.87(d,J=11.8Hz,1H),4.64(d,J=11.8Hz,1H),4.43(td,J=6.6,18.1Hz,1H),4.17-4.10(m,1H),4.01-3.98(m,1H),3.81(dd,J=7.0,10.5Hz,1H),3.77-3.73(m,1H),3.36(s,3H),1.52(s,9H),0.88(s,9H),0.05(s,6H)。
基酯，为无色粘稠油状物(0.980g，95%)。H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.38-7.29(m,5H),5.98(d,J=6.0Hz,1H),4.89(ddd,J=2.1,7.1,48.6Hz,1H),4.87(d,J=11.8Hz,1H),4.64(d,J=11.8Hz,1H),4.43(td,J=6.6,18.1Hz,1H),4.17-4.10(m,1H),4.01-3.98(m,1H),3.81(dd,J=7.0,10.5Hz,1H),3.77-3.73(m,1H),3.36(s,3H),1.52(s,9H),0.88(s,9H),0.05(s,6H)。
[0414] 在0℃下，向上述物质(0.980g，1.81mmol)的THF(10mL)溶液添加TBAF(1.0M在THF中，3.0mL，3.0mmol)。在室温下搅拌2h后，将反应混合物用盐水(50mL)稀释，并用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至2:3)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(0.79g，100%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.39-7.32(m,5H),5.98(d,J=5.88Hz,1H),5.11(ddd,J=2.9,6.2,48.
6Hz,1H),4.88(d,J=11.6Hz,1H),4.61(d,J=11.6Hz,1H),4.45(td,J=6.0,15.9Hz,1H),4.08-3.98(m,2H),3.92-3.88(m,1H),3.70(dd,J=4.6,11.6Hz,1H),1.51(s,9H)。
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(0.79g，100%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.39-7.32(m,5H),5.98(d,J=5.88Hz,1H),5.11(ddd,J=2.9,6.2,48.
6Hz,1H),4.88(d,J=11.6Hz,1H),4.61(d,J=11.6Hz,1H),4.45(td,J=6.0,15.9Hz,1H),4.08-3.98(m,2H),3.92-3.88(m,1H),3.70(dd,J=4.6,11.6Hz,1H),1.51(s,9H)。
[0415] 向上述物质(0.790g，1.85mmol)的DCM(10mL)溶液添加DMP(1.14g,2.69mmol)。在室温下搅拌1h后，将反应混合物用Et2O(100mL)稀释，并通过硅藻土饼过滤。减压浓缩滤液，并在硅胶上通过快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:5至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-甲酰基-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(0.73g，93%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.76(d,J=3.1Hz,1H),7.39-7.31(m,5H),5.93(d,J=4.3Hz,1H),5.39(ddd,J=1.8,4.5,48.7Hz,1H),4.85(d,J=11.6Hz,1H),4.66(d,J=11.6Hz,1H),4.28-4.20(m,3H),3.33(s,3H),1.53(s,9H)。
1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(0.73g，93%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.76(d,J=3.1Hz,1H),7.39-7.31(m,5H),5.93(d,J=4.3Hz,1H),5.39(ddd,J=1.8,4.5,48.7Hz,1H),4.85(d,J=11.6Hz,1H),4.66(d,J=11.6Hz,1H),4.28-4.20(m,3H),3.33(s,3H),1.53(s,9H)。
[0416] 在N2下向上述物质(0.390g，0.919mmol)的无水THF(8mL)溶液添加MeMgBr(1.4M在THF/甲苯中，3.0mL，4.2mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌2h。将反应用饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭，然后用EtOAc(40mL)和DCM(2×30mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。过滤后，减压蒸发溶剂，并将残留物溶解于DCM(5mL)中。添加Boc2O(0.38g，1.7mmol)，并将混合物在室温下搅拌16h。减压除去溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)
1
(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.116g，29%)，为白色固体，H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.39-7.
33(m,5H),6.00(d,J=6.2Hz,1H),5.00(ddd,J=2.8,6.2,48.4Hz,1H),4.94(d,J=11.5Hz,1H),4.65(d,J=11.5Hz,1H),4.48(td,J=6.6,16.7Hz,1H),4.26-4.22(m,1H),4.08-4.04(m,1H),3.56(dd,J=3.1,8.3Hz,1H),3.36(s,3H),1.51(s,9H),1.20(d,J=6.3Hz,3H)；还分离得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.186g，46%)，为白色固体，H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.38-7.30(m,5H),6.12(d,J=6.3Hz,1H),5.10-4.99(m,1H),4.96(d,J=11.8Hz,1H),4.61(d,J=11.8Hz,1H),4.54(td,J=6.6,17.2Hz,1H),4.15-4.07(m,2H),3.6
0(dd,J=3.1,6.3Hz,1H),3.48(s,3H),1.54(s,9H),1.08(d,J=6.3Hz,3H)。
1
(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.116g，29%)，为白色固体，H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.39-7.
33(m,5H),6.00(d,J=6.2Hz,1H),5.00(ddd,J=2.8,6.2,48.4Hz,1H),4.94(d,J=11.5Hz,1H),4.65(d,J=11.5Hz,1H),4.48(td,J=6.6,16.7Hz,1H),4.26-4.22(m,1H),4.08-4.04(m,1H),3.56(dd,J=3.1,8.3Hz,1H),3.36(s,3H),1.51(s,9H),1.20(d,J=6.3Hz,3H)；还分离得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡
1
喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.186g，46%)，为白色固体，H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.38-7.30(m,5H),6.12(d,J=6.3Hz,1H),5.10-4.99(m,1H),4.96(d,J=11.8Hz,1H),4.61(d,J=11.8Hz,1H),4.54(td,J=6.6,17.2Hz,1H),4.15-4.07(m,2H),3.6
0(dd,J=3.1,6.3Hz,1H),3.48(s,3H),1.54(s,9H),1.08(d,J=6.3Hz,3H)。
[0417] 在–78℃、N2下向((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.116g，0.264mmol)和PMB(0.20g，1.3mmol)的无水DCM(6mL)溶液中添加BCl3(1.0M在DCM中，1.2mL，1.2mmol)。将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃下冷却，并用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:10)对残留物进行纯化，得到(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-氟-5-((R)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-6-醇，为白色固体(0.064g，97%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.43(dd,J=1.4,6.5Hz,1H),4.51(ddd,J=3.2,8.2,48.2Hz,1H),4.35-4.32(m,1H),4.30-4.22(m,1H),4.03-3.96(m,1H
13
),3.57(d,J=8.2Hz,1H),2.86(s,3H),1.20(d,J=6.3Hz,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.
40,95.50(d,J=183.3Hz),92.85(d,J=8.6Hz),78.33(d,J=6.2Hz),69.39(d,J=20.8Hz),66.+
14(d,J=16.5Hz),65.95(d,J=8.4Hz),30.23,20.71；MS,(ES,m/z)[M+H]251.1。
1
唑-6-醇，为白色固体(0.064g，97%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.43(dd,J=1.4,6.5Hz,1H),4.51(ddd,J=3.2,8.2,48.2Hz,1H),4.35-4.32(m,1H),4.30-4.22(m,1H),4.03-3.96(m,1H
13
),3.57(d,J=8.2Hz,1H),2.86(s,3H),1.20(d,J=6.3Hz,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.
40,95.50(d,J=183.3Hz),92.85(d,J=8.6Hz),78.33(d,J=6.2Hz),69.39(d,J=20.8Hz),66.+
14(d,J=16.5Hz),65.95(d,J=8.4Hz),30.23,20.71；MS,(ES,m/z)[M+H]251.1。
[0418] 在–78℃、N2下向((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.180g，0.409mmol)和PMB(0.20g，1.3mmol)的无水DCM(6mL)溶液添加BCl3(1.0M在DCM中，2.0mL，2.0mmol)。将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0MNH3在MeOH/DCM中，1:10)对残留物进行纯化，得到(3aR,5R,6S,7R,7aR)-7-氟-5-((S)-1-羟基乙基)-2-(甲基氨基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇，为
1
白色固体(0.092g，90%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.45(dd,J=1.1,6.4Hz,1H),4.59(ddd,J=3.2,8.1,48.0Hz,1H),4.30-4.22(m,1H),4.18-4.14(m,1H),4.08-4.02(m,1H),3.66(d,J=
13
7.4Hz,1H),2.83(s,3H),1.22(d,J=6.8Hz,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.73,95.14(d,J=183.0Hz),92.31(d,J=8.7Hz),79.15(d,J=6.2Hz),69.62(d,J=20.7Hz),67.98(d,J=2.9H+
z),67.56(d,J=16.7Hz),30.28,18.92；MS,(ES,m/z)[M+H]251.1。
1
白色固体(0.092g，90%)。H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.45(dd,J=1.1,6.4Hz,1H),4.59(ddd,J=3.2,8.1,48.0Hz,1H),4.30-4.22(m,1H),4.18-4.14(m,1H),4.08-4.02(m,1H),3.66(d,J=
13
7.4Hz,1H),2.83(s,3H),1.22(d,J=6.8Hz,3H)；C NMR(100MHz,CD3OD)δ164.73,95.14(d,J=183.0Hz),92.31(d,J=8.7Hz),79.15(d,J=6.2Hz),69.62(d,J=20.7Hz),67.98(d,J=2.9H+
z),67.56(d,J=16.7Hz),30.28,18.92；MS,(ES,m/z)[M+H]251.1。
[0419] 实施例48&49
[0420] (3aR,5S,6S,7R,7aR)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨 基 )-5-((R)-2,2,2- 三氟 -1- 羟 基 乙 基 )-5,6,7,7a- 四 氢 -3aH- 吡 喃 并 [3,2-d] 噻 唑 -6- 醇 和(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7- 氟 -2-( 甲 基 氨 基 )-5-((S)-2,2,2- 三 氟 -1- 羟 基 乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇
[0421]
[0422] 向 ((3aR,5S,6S,7R,7aR)-6-(苄 氧 基 )-7- 氟 -5- 甲 酰 基 -5,6,7,7a- 四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.320g，0.754mmol)和TMSCF3(0.208g，1.46mmol)的无水THF(8mL)溶液添加TBAF(1.0M在THF中，0.030mL，0.030mmol)。添加后，在室温下将反应混合物搅拌2h。添加另一批TBAF(1.0M在THF中，
1.0mL，1.0mmol)，并将混合物在室温下再搅拌2h。然后用EtOAc(20mL)和盐水(30mL)稀释反应溶液。收集有机层，并将水层用EtOAc(20mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。
过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，
1
为淡黄色泡沫，基于 H NMR为6.8:1的非对映异构体混合物。在–78℃、N2下向黄色泡沫和PMB(0.20g，1.3mmol)的无水DCM(6mL)溶液添加BCl3(1.0M在DCM中，2.0mL，2.0mmol)。
将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:10)对残留物进行纯化，得到(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-6-醇，为白色固体(0.118g，77%)，基于 H NMR非对映异构体比率为6.8:1。通过制备-HPLC采用以下条件对该混合物进行分离：色谱柱，XBridge Prep.C18，19×150mm；
流动相，含0.05%NH4OH的水和CH3CN(在10min内从5%到25%)；检测器，UV220nm，
得到(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7-氟-2-(甲 基氨基)-5-((S)-2,2,2-三 氟-1-羟基 乙
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较快洗脱出来的异构体)，为
1
白色固体(65mg，总收率为28%)，H NMR(300MHz,CD3OD)δ6.46(d,J=6.3Hz,1H),4.66(td,J=3.0,48.3Hz,1H),4.44-4.42(m,3H),4.12(d,J=6.0Hz,1H),2.85(s,3H),MS,(ES,m/z)+
[M+H]305.0；和(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较慢洗脱出来的异构体)
1
(6.5mg，总收率为2.8%)，H NMR(300MHz,CD3OD)δ6.41(d,J=6.3Hz,1H),4.63(td,J=3.3,48+
.0Hz,1H),4.36-4.19(m,3H),4.08-4.05(m,1H),2.85(s,3H)。(ES,m/z)[M+H]305.0。
1.0mL，1.0mmol)，并将混合物在室温下再搅拌2h。然后用EtOAc(20mL)和盐水(30mL)稀释反应溶液。收集有机层，并将水层用EtOAc(20mL)萃取。合并的萃取物经无水Na2SO4干燥。
过滤后，减压蒸发溶剂，并在硅胶上通过自动快速柱层析法(EtOAc/己烷，1:10至1:2)对残留物进行纯化，得到((3aR,5R,6S,7R,7aR)-6-(苄氧基)-7-氟-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯，
1
为淡黄色泡沫，基于 H NMR为6.8:1的非对映异构体混合物。在–78℃、N2下向黄色泡沫和PMB(0.20g，1.3mmol)的无水DCM(6mL)溶液添加BCl3(1.0M在DCM中，2.0mL，2.0mmol)。
将混合物搅拌～3h，同时将冷却浴的温度缓慢加温至室温。将反应混合物在–78℃下冷却，用混合的MeOH/DCM淬灭，然后浓缩至干。在硅胶上通过快速柱层析法(1.0M NH3在MeOH/DCM中，1:10)对残留物进行纯化，得到(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻
1
唑-6-醇，为白色固体(0.118g，77%)，基于 H NMR非对映异构体比率为6.8:1。通过制备-HPLC采用以下条件对该混合物进行分离：色谱柱，XBridge Prep.C18，19×150mm；
流动相，含0.05%NH4OH的水和CH3CN(在10min内从5%到25%)；检测器，UV220nm，
得到(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7-氟-2-(甲 基氨基)-5-((S)-2,2,2-三 氟-1-羟基 乙
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较快洗脱出来的异构体)，为
1
白色固体(65mg，总收率为28%)，H NMR(300MHz,CD3OD)δ6.46(d,J=6.3Hz,1H),4.66(td,J=3.0,48.3Hz,1H),4.44-4.42(m,3H),4.12(d,J=6.0Hz,1H),2.85(s,3H),MS,(ES,m/z)+
[M+H]305.0；和(3aR,5S,6S,7R,7aR)-7-氟-2-(甲基氨基)-5-((R)-2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6-醇(较慢洗脱出来的异构体)
1
(6.5mg，总收率为2.8%)，H NMR(300MHz,CD3OD)δ6.41(d,J=6.3Hz,1H),4.63(td,J=3.3,48+
.0Hz,1H),4.36-4.19(m,3H),4.08-4.05(m,1H),2.85(s,3H)。(ES,m/z)[M+H]305.0。
[0423] 可以根据类似于上面所述的方案和实施例的程序合成以下实施例。
[0424] 表4
[0425]
[0426]
[0427]
[0428]
[0429]
[0430]
[0431] 生物活性
[0432] 测定抑制O-GlcNAcase活性的KI值的试验
[0433] 动力学分析的实验操作：在含有50mM NaH2PO4、100mM NaCl和0.1%BSA(pH7.0)的反应中使用溶于ddH2O中的2mM4-甲基伞形酮基N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷二水合物(4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-glucosaminide dihydrate)(Sigma M2133)作为底物进行酶反应。在反应中使用的纯化人O-GlcNAcase酶的量为0.7nM。在反应开始之前将不同浓度的供试化合物添加到酶中。反应在室温下在96孔板中进行，并通过添加底物而引发。采用Tecan Infinite M200读板仪，在355nM下激发和在460nM下检测发射，每60秒测量荧光产物的生成量，持续45min，使用4-甲基伞形酮(Sigma M1381)生成标准曲线。使用S形剂量响应曲线的标准曲线拟合算法测定每种浓度的供试化合物的产物生成量的斜率并绘图。
[0434] 测定数据的4参数逻辑曲线拟合的值。
[0435] 使用Cheng-Prusoff方程测定KI值；O-GlcNAcase对底物的Km为0.2mM。
[0436] 在上文所述的试验中测试了实施例1至49，并表现出在0.1nM-10μM范围内的抑制O-GlcNAcase的KI值。
[0437] 测定抑制β-己糖胺酶活性的KI值的试验
[0438] 动力学分析的实验操作：在含有50mM NaH2PO4、100mM NaCl和0.1%BSA(pH7.0)的试验中使用溶解于ddH2O的2mM4-甲基伞形酮基N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷二水合物(Sigma M2133)作为底物进行酶反应。在反应中使用的纯化人β-己糖胺酶酶的量为24nM。在反应开始之前将不同浓度的供试化合物添加到酶中。反应在室温下在96孔板中进行并通过添加底物而引发。采用Tecan Infinite M200读板仪，在355nM下激发和在460nM下检测发射，每60秒测量荧光产物的生成量，持续45min，使用4-甲基伞形酮(Sigma M1381)生成标准曲线。使用S形剂量响应曲线的标准曲线拟合算法测定每种浓度的供试化合物的产物生成量的斜率并绘图。测定数据的4参数逻辑曲线拟合的值。
[0439] 使用Cheng-Prusoff方程测定KI值。
[0440] 当在该试验中测试时，本文所描述的许多化合物表现出在10nM至大于100uM范围内的抑制β-己糖胺酶的KI值。
[0441] 相对于β-己糖胺酶，对O-GlcNAcase的抑制作用的选择比在此如下所定义：
[0442] KI(β-己糖胺酶)/KI(O-GlcNAcase)
[0443] 通常，本文所述化合物表现出在约10至100000范围内的选择比。因此，许多本发明化合物表现出相对于β-己糖胺酶，对O-GlcNAcase抑制的高选择性。
[0444] 测定抑制O-GlcNAcase活性的化合物的细胞活性的试验
[0445] 对O-GlcNAcase(其从细胞蛋白除去O-GlcNAc)的抑制导致细胞中O-GlcNAc化(O-GlcNAcylated)蛋白的水平增加。可以通过与O-GlcNAc化蛋白结合的抗体(如RL-2)测量O-GlcNAc化蛋白的增加。可以通过酶联免疫吸附测定(ELISA)操作来测量O-GlcNAc化蛋白:RL2抗体相互作用的量。
[0446] 可以使用表达O-GlcNAcase内源性水平的各种组织培养细胞系；实例包括大鼠PC-12和人U-87或SK-N-SH细胞。在该试验中，将大鼠PC-12细胞以约10,000个细胞/孔涂在96孔板中。将待测试的化合物溶解于DMSO中(2或10mM储备溶液)，然后使用Tecan工作站以两步法用DMSO和水进行稀释。将细胞用稀释后的化合物处理24h(每孔体积200μL中加入5.4μL)，为获得测量化合物浓度依赖响应所需的最终抑制剂浓度，通常使用以10μM开始的10个3倍稀释步骤来测定浓度响应曲线。为了制备细胞裂解物，从经化合物处理的细胞除去培养基，将细胞用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤一次，然后在室温下在50μL具有蛋白酶抑制剂和PMSF的Phosphosafe试剂(Novagen Inc，Madison，WI)中裂解5分钟。收集细胞裂解物并转移至新的板，然后将其直接涂布至测定板或在-80℃下冷冻直至在ELISA操作中使用。若需要，采用BCA方法使用20μL样品测定样品的总蛋白浓度。
[0447] 试验的ELISA部分在黑色Maxisorp96孔板中进行，该黑色Maxisorp96孔板在4℃下用100μL/孔细胞裂解物(该裂解物用含有蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂和PMSF的PBS以1:10稀释)涂布过夜。第二天将孔用300μL/孔洗涤缓冲液(含0.1%吐温20的
Tris-缓冲盐水)洗涤3次。将孔用100μL/孔封闭缓冲液(含0.05%吐温20和2.5%牛
血清蛋白的Tris缓冲盐水)封闭。然后将每个孔用300μL/孔洗涤缓冲液洗涤两次。以
100μL/孔添加在封闭缓冲液中1:1000稀释的抗O-GlcNAc抗体RL-2(Abcam，Cambridge，MA)。将板密封并在37℃下通过温和摇动孵育2h。然后将孔用300μL/孔洗涤缓冲液洗涤3次。为了检测键合的RL-2的量，以100μL/孔添加结合辣根过氧化物酶(HRP)的山羊抗小鼠二级抗体(在封闭缓冲液中以1:3000稀释)。在温和摇动下，将板在37℃下孵育60min。
然后将每个孔用300μL/洗涤缓冲液洗涤3次。添加检测试剂，100μL/孔的Amplex Ultra RED试剂(通过将30μL的10mM Amplex Ultra Red储备溶液添加到含18μL3%过氧化氢(H2O2)的10mL PBS而制备)。将检测反应在室温下孵育15分钟，然后通过530nm激发和
590nm发射进行读取。
Tris-缓冲盐水)洗涤3次。将孔用100μL/孔封闭缓冲液(含0.05%吐温20和2.5%牛
血清蛋白的Tris缓冲盐水)封闭。然后将每个孔用300μL/孔洗涤缓冲液洗涤两次。以
100μL/孔添加在封闭缓冲液中1:1000稀释的抗O-GlcNAc抗体RL-2(Abcam，Cambridge，MA)。将板密封并在37℃下通过温和摇动孵育2h。然后将孔用300μL/孔洗涤缓冲液洗涤3次。为了检测键合的RL-2的量，以100μL/孔添加结合辣根过氧化物酶(HRP)的山羊抗小鼠二级抗体(在封闭缓冲液中以1:3000稀释)。在温和摇动下，将板在37℃下孵育60min。
然后将每个孔用300μL/洗涤缓冲液洗涤3次。添加检测试剂，100μL/孔的Amplex Ultra RED试剂(通过将30μL的10mM Amplex Ultra Red储备溶液添加到含18μL3%过氧化氢(H2O2)的10mL PBS而制备)。将检测反应在室温下孵育15分钟，然后通过530nm激发和
590nm发射进行读取。
[0448] 使用S形剂量响应曲线的标准曲线拟合算法，通过ELISA试验检测的O-GlcNAc化蛋白的量对每种浓度的供试化合物制图。测定数据的四参数逻辑曲线拟合值，其中曲线的拐点为供试化合物的效力值。
[0449] 测定表观渗透率(Papp)的试验
[0450] 为了测定表观渗透率(Papp)，在LLC-PK1细胞中评价双向转运。LLC-PK1细胞能够形成紧密的单层，从而能够用于评估化合物从底侧到顶端(B→A)和从顶端到底侧(A→B)的向量转运。
[0451] 为了测定Papp，将LLC-PK1细胞培养在96-孔transwell培养板(Millipore)中。在含10mM HEPES的汉克式平衡盐溶液(Hank’s Balanced Salt Solution)中制备含有供试化合物(1μM)的溶液。向培养板的顶端(A)或底侧(B)隔室添加底物溶液(150μL)，并且向与含化合物的隔室相对的隔室添加缓冲液(150μL)。在t=3h时，从给予供试化合物的单层的双侧取出50μL样品并置于96孔板中，向样品添加闪烁剂(200μL)或内标(100μL的1μM拉贝洛尔(labetolol))，并通过液体闪烁计数法在MicroBeta Wallac Trilux闪烁计数器(Perkin Elmer Life Sciences,Boston,MA)中或者通过LCMS/3
MS(Applied Biosystems SCIEX API5000三重四级杆质谱仪)来测定浓度。使用[H]维拉帕米(Verapamil)(1μM)作为阳性对照。以三重复制进行实验。
MS(Applied Biosystems SCIEX API5000三重四级杆质谱仪)来测定浓度。使用[H]维拉帕米(Verapamil)(1μM)作为阳性对照。以三重复制进行实验。
[0452] 通过以下公式对t=3h时取出的样品计算表观渗透率Papp：
[0453]2
[0454] 其中：受体室的体积为0.15mL；膜面积为0.11cm；初始浓度为t=3h时在供体隔室中测量的浓度加上在接受者隔室中测量的浓度的总和；Δ浓度是在3h时接受者隔室中的-6浓度；以及Δ时间是孵育时间(3×60×60=10800s)。Papp以10 cm/s表示。Papp(LLC-PK1细胞)是t=3h时从A转运到B的Papp和从B转运到A的Papp的平均值：
[0455]
[0456] 在下表中显示上文所述的来自结合试验、基于细胞的试验以及渗透率试验中的代表性数据。本发明的某些化合物在这些试验中的一个或多个试验中表现出极好的效力或渗透率。为了进行比较，表中前两个示出的是WO2008/025170中公开的化合物(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(乙基氨基)-5-(羟基甲基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6,7-二醇和(3aR,5R,6S,7R,7aR)-2-(二甲基氨基)-5-(羟基甲
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6,7-二醇的数据。
基)-5,6,7,7a-四氢-3aH-吡喃并[3,2-d]噻唑-6,7-二醇的数据。
[0457] 表5
[0458]
[0459]
[0460]
[0462] 参考文献
[0463] 1.C.R.Torres,G.W.Hart,J Biol Chem1984,259,3308-17.
[0464] 2.R.S.Haltiwanger,G.D.Holt,and G.W.Hart,J Biol Chem1990,265,2563-8.[0465] 3.L.K.Kreppel,M.A.Blomberg,and G.W.Hart,J Biol Chem1997,272,9308-15.[0466] 4.W.A.Lubas,et al.,J Biol Chem1997,272,9316-24.
[0467] 5.W.A.Lubas,J.A.Hanover,J Biol Chem2000,275,10983-8.
[0468] 6.D.L.Dong,G.W.Hart,J Biol Chem1994,269,19321-30.
[0469] 7.Y.Gao,et al.,J Biol Chem2001,276,9838-45.
[0470] 8.E.P.Roquemore,et al.,Biochemistry1996,35,3578-86.
[0471] 9.S.P.Jackson,R.Tjian,Cell1988,55,125-33.
[0472] 10.W.G.Kelly,M.E.Dahmus,and G.W.Hart,J Biol Chem1993,268,10416-24.[0473] 11.M.D.Roos,et al.,Mol Cell Biol1997,17,6472-80.
[0474] 12.N.Lamarre-Vincent,L.C.Hsieh-Wilson,J Am Chem Soc2003,125,6612-3.[0475] 13.F.Zhang,et al.,Cell2003,115,715-25.
[0476] 14.K.Vosseller,et al.,Proc Natl Acad Sci U S A2002,99,5313-8.
[0477] 15.W.A.Lubas,et al.,Biochemistry1995,34,1686-94.
[0478] 16.L.S.Griffith,B.Schmitz,Biochem Biophys Res Commun1995,213,424-31.[0479] 17.R.N.Cole,G.W.Hart,J Neurochem1999,73,418-28.
[0480] 18.I.Braidman,et al.,Biochem J1974,143,295-301.
[0481] 19.R.Ueno,C.S.Yuan,Biochim Biophys Acta1991,1074,79-84.
[0482] 20.C.Toleman,et al.,J Biol Chem2004,279,53665-73.
[0483] 21.F.Liu,et al.,Proc Natl Acad Sci U S A2004,101,10804-9.
[0484] 22.T.Y.Chou,G.W.Hart,Adv Exp Med Biol2001,491,413-8.
[0485] 23.M.Goedert,et al.,Neuron1992,8,159-68.
[0486] 24.M.Goedert,et al.,Neuron1989,3,519-26.
[0487] 25.E.Kopke,et al.,J Biol Chem1993,268,24374-84.
[0488] 26.H.Ksiezak-Reding,W.K.Liu,and S.H.Yen,Brain Res1992,597,209-19.[0489] 27.P.V.Arriagada,et al.,Neurology1992,42,631-9.
[0490] 28.K.P.Riley,D.A.Snowdon,and W.R.Markesbery,Ann Neurol2002,51,567-77.[0491] 29.I.Alafuzoff,et al.,Acta Neuropathol(Berl)1987,74,209-25.
[0492] 30.C.X.Gong,et al.,J Neural Transm2005,112,813-38.
[0493] 31.K.Iqbal,et al.,J Neural Transm Suppl2002,309-19.
[0494] 32.K.Iqbal,et al.,J Mol Neurosci2003,20,425-9.
[0495] 33.W.Noble,et al.,Proc Natl Acad Sci U S A2005,102,6990-5.
[0496] 34.S.Le Corre,et al.,Proc Natl Acad Sci U S A2006,103,9673-8.
[0497] 35.S.J.Liu,et al.,J Biol Chem2004,279,50078-88.
[0498] 36.G.Li,H.Yin,and J.Kuret,J Biol Chem2004,279,15938-45.
[0499] 37.T.Y.Chou,G.W.Hart,and C.V.Dang,J Biol Chem1995,270,18961-5.
[0500] 38.X.Cheng,G.W.Hart,J Biol Chem2001,276,10570-5.
[0501] 39.X.Cheng,et al.,Biochemistry2000,39,11609-20.
[0502] 40.L.S.Griffith,B.Schmitz,Eur J Biochem1999,262,824-31.
[0503] 41.K.Kamemura,G.W.Hart,Prog Nucleic Acid Res Mol Biol2003,73,107-36.[0504] 42.L.Wells,et al.,J Biol Chem2004,279,38466-70.
[0505] 43.L.Bertram,et al.,Science2000,290,2302-3.
[0506] 44.S.Hoyer,et al.,Journal of Neural Transmission1998,105,423-438.[0507] 45.C.X.Gong,et al.,Journal of Alzheimers Disease2006,9,1-12.
[0508] 46.W.J.Jagust,et al.,Journal of Cerebral Blood Flow andMetabolism1991,11,323-330.
[0509] 47.S.Hoyer,Experimental Gerontology2000,35,1363-1372.
[0510] 48.S.Hoyer,in Frontiers in Clinical Neuroscience:Neurodegeneration and Neuroprotection,Vol.541,2004,135-152.
[0511] 49.R.N.Kalaria,S.I.Harik,Journal of Neurochemistry1989,53,1083-1088.[0512] 50.I.A.Simpson,et al.,Annals of Neurology1994,35,546-551.
[0513] 51.S.M.de la Monte,J.R.Wands,Journal of AlzheimersDisease2005,7,45-61.
[0514] 52.X.W.Zhu,G.Perry,and M.A.Smith,Journal of AlzheimersDisease2005,7,81-84.
[0515] 53.J.C.de la Torre,Neurological Research2004,26,517-524.
[0516] 54.S.Marshall,W.T.Garvey,and R.R.Traxinger,Faseb J1991,5,3031-6.[0517] 55.S.P.Iyer,Y.Akimoto,and G.W.Hart,J Biol Chem2003,278,5399-409.[0518] 56.K.Brickley,et al.,J Biol Chem2005,280,14723-32.
[0519] 57.S.Knapp,C.H.Yang,and T.Haimowitz,TetrahedronLetters2002,43,7101-7104.
[0520] 58.S.P.Iyer,G.W.Hart,J Biol Chem2003,278,24608-16.
[0521] 59.M.Jinek,et al.,Nat Struct Mol Biol2004,11,1001-7.
[0522] 60.K.Kamemura,et al.,J Biol Chem2002,277,19229-35.
[0523] 61.Y.Deng,et al.,FASEB J.2007,fj.07-8309com.
[0524] 62.L.F.Lau,et al.,Curr Top Med Chem2002,2,395-415.
[0525] 63.M.P.Mazanetz,P.M.Fischer,Nature Reviews DrugDiscovery2007,6,464-479.
[0526] 64.S.A.Yuzwa,et al.,Nat Chem Biol2008,4,483-490.
[0527] 65.P.Bounelis,et al.,Shock2004,21170Suppl.2,58-58.
[0528] 66.N.Fulop,et al.,Circulation Research2005,97,E28-E28.
[0529] 67.J.Liu,R.B.Marchase,and J.C.Chatham,Faseb Journal2006,20,A317-A317.[0530] 68.R.Marchase,et al.,PCT Int.Appl.WO20060169042006.
[0531] 69.N.Fulop,et al.,Journal of Molecular and CellularCardiology2004,37,286-287.
[0532] 70.N.Fulop,et al.,Faseb Journal2005,19,A689-A690.
[0533] 71.J.Liu,R.B.Marchase,and J.C.Chatham,Journal of Molecular and Cellular Cardiology2007,42,177-185.
[0534] 72.L.G.Not,et al.,Faseb Journal2006,20,A1471-A1471.
[0535] 73.S.L.Yang,et al.,Shock2006,25,600-607.
[0536] 74.L.Y.Zou,et al.,Faseb Journal2005,19,A1224-A1224.
[0537] 75.R.B.Marchase,et al.,Circulation2004,110,1099-1099.
[0538] 76.J.Liu,et al.,Journal of Molecular and CellularCardiology2006,40,303-312.
[0539] 77.J.Liu,J.C.Chatham,and R.B.Marchase,Faseb Journal2005,19,A691-A691.[0540] 78.T.Nagy,et al.,American Journal of Physiology-CellPhysiology2006,290,C57-C65.
[0541] 79.N.Fulop,R.B.Marchase,and J.C.Chatham,CardiovascularResearch2007,73,288-297.
[0542] 80.T.Lefebvre,et al.,Expert Review of Proteomics2005,2,265-275.[0543] 81.B.Henrissat,A.Bairoch,Biochem J1993,293(Pt3),781-8.
[0544] 82.B.Henrissat,A.Bairoch,Biochem J1996,316(Pt2),695-6.
[0545] 83.L.Wells,K.Vosseller,and G.W.Hart,Science2001,291,2376-8.
[0546] 84.J.A.Hanover,FASEB J2001,15,1865-76.
[0547] 85.D.A.McClain,et al.,Proc Natl Acad Sci U S A2002,99,10695-9.
[0548] 86.P.J.Yao,P.D.Coleman,J Neurosci1998,18,2399-411.
[0549] 87.W.H.Yang,et al.,Nature Cell Biology2006,8,1074-U53.
[0550] 88.B.Triggs-Raine,D.J.Mahuran,and R.A.Gravel,AdvGenet2001,44,199-224.
[0551] 89.D.Zhou,et al.,Science2004,1786-89.
[0552] 90.G.Legler,et al.,Biochim Biophys Acta1991,1080,89-95.
[0553] 91.M.Horsch,et al.,Eur J Biochem1991,197,815-8.
[0554] 92.J.Liu,et al.,Chem Biol2001,8,701-11.
[0555] 93.S.Knapp,et al.,J.Am.Chem.Soc.1996,118,6804-6805.
[0556] 94.V.H.Lillelund,et al.,Chem Rev2002,102,515-53.
[0557] 95.R.J.Konrad,et al.,Biochem J2001,356,31-41.
[0558] 96.K.Liu,et al.,J Neurochem2004,89,1044-55.
[0559] 97.G.Parker,et al.,J Biol Chem2004,279,20636-42.
[0560] 98.E.B.Arias,J.Kim,and G.D.Cartee,Diabetes2004,53,921-30.
[0561] 99.A.Junod,et al.,Proc Soc Exp Biol Med1967,126,201-5.
[0562] 100.R.A.Bennett,A.E.Pegg,Cancer Res1981,41,2786-90.
[0563] 101.K.D.Kroncke,et al.,Biol Chem Hoppe Seyler1995,376,179-85.
[0564] 102.H.Yamamoto,Y.Uchigata,and H.Okamoto,Nature1981,294,284-6.
[0565] 103.K.Yamada,et al.,Diabetes1982,31,749-53.
[0566] 104.V.Burkart,et al.,Nat Med1999,5,314-9.
[0567] 105.M.D.Roos,et al.,Proc Assoc Am Physicians1998,110,422-32.
[0568] 106.Y.Gao,G.J.Parker,and G.W.Hart,Arch BiochemBiophys2000,383,296-302.
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
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