1.一种用于培养T细胞的方法，所述方法包括：
(a)在受体结合剂的存在下孵育包含T细胞的组合物，所述受体结合剂i)可逆结合包含能够可逆结合所述受体结合剂的多个结合位点的反应剂，且ii)能够以诱导或调节所述组合物中T细胞中信号的方式特异性结合所述T细胞表面上的分子；和
b)在开始所述孵育后5天内，破坏所述受体结合剂和所述反应剂之间的可逆结合，由此产生培养的T细胞。
2.如权利要求1所述的方法，其中，孵育在一定条件下进行，在该条件下所述受体结合剂特异性结合所述分子，由此诱导或调节组合物中一个或多个T细胞中的信号。
3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中，所述破坏在开始所述孵育后大于30分钟时发生。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中：
所述破坏在开始所述孵育后1小时～4天时进行，在开始所述孵育后6小时～3天时进行，在开始所述孵育后12小时～2天时进行，在开始所述孵育后1天～3天时进行；或所述破坏在开始所述孵育后约1小时～约4天时进行，在开始所述孵育后约6小时～约3天时进行，在开始所述孵育后约12小时～约2天时进行，在开始所述孵育后约1天～约3天时进行；或
所述破坏在所述孵育开始后的大于或等于约1小时且在所述孵育开始后的1天、2天、3天或4天内进行。
5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中：
所述受体结合剂与所述分子的结合在T细胞中引发TCR/CD3复合物相关的信号；和/或所述受体结合剂特异性结合TCR/CD3复合物成员；和/或
所述受体结合剂特异性结合CD3。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中，所述分子是TCR/CD3复合物的组成部分或是CD3。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中，所述分子是第一分子，且所述受体结合剂还能特异性结合一个或多个所述T细胞表面上的第二分子，其中第二分子可选地能够诱导或增强、抑制或改变通过T细胞中所述第一分子递送的信号。
8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中：
所述受体结合剂包含结合伴侣C1；且
多个结合位点包含两个或多个结合位点Z1，它们各自能够结合于结合伴侣C1以形成受体结合剂与反应剂之间的可逆键。
9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中，所述破坏包括使细胞接触包含物质的组合物，所述物质能够逆转所述受体结合剂和反应剂之间的键。
10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中，所述受体结合剂是第一受体结合剂，且在第二受体结合剂的存在下进一步进行孵育，该第二受体结合剂能够特异性结合于一个或多个T细胞表面上的第二分子。
11.如权利要求10所述的方法，其中，第二受体结合剂与第二分子的结合促进、抑制、或改变通过T细胞中第一分子递送的信号。
12.如权利要求10或权利要求11所述的方法，其中，所述反应剂包含能够可逆结合第二受体结合剂的多个结合位点，由此所述第二受体结合剂可逆结合所述反应剂。
13.如权利要求12所述的方法，其中，能够可逆结合第一受体结合剂的多个结合位点与能够可逆结合第二受体结合剂的多个结合位点可相同或不同。
14.如权利要求12或13所述的方法，其中：
第二受体结合剂包含结合伴侣C1或C2，其能够可逆结合所述两个或多个结合位点Z1，由此第一和第二受体结合位点通过所述两个或多个结合位点Z1可逆结合所述反应剂；和/或
第二受体结合剂包含结合伴侣C2，所述反应剂还包含多个结合位点Z2，其能够可逆结合结合伴侣C2以形成第二受体结合剂和所述反应剂之间的可逆键。
15.如权利要求14所述的方法，其中：
C1和C2相同或基本相同、或者包含相同或基本相同的部分；和/或
Z2和Z1相同或基本相同、或者包含相同或基本相同的部分。
16.如权利要求10或权利要求11中任一项所述的方法，其中，所述反应剂是第一反应剂，且所述孵育在至少一种第二反应剂的存在下进行，该第二反应剂可逆结合第二受体结合剂。
17.如权利要求10-15中任一项所述的方法，其中，孵育在一定条件下进行，在该条件下第二受体结合剂特异性结合于第二分子，由此诱导或调节T细胞中的第二信号。
18.如权利要求10-17中任一项所述的方法，其中，第二信号增强、抑制或改变T细胞中通过第一分子递送的信号。
19.如权利要求10-18中任一项所述的方法，其中，所述破坏包括：将组合物加入细胞，该组合物含有能逆转第一受体结合剂和反应剂之间的键和/或第二受体结合剂和反应剂之间的键的物质。
20.如权利要求10-19中任一项所述的方法，其中，所述破坏终止或减弱由第一受体结合剂诱导或调节的信号，且终止或减弱由第二受体结合剂诱导或调节的信号。
21.一种用于培养T细胞的方法，所述方法包括：
(a)在如下物质的存在下孵育包含T细胞的组合物：
i)第一受体结合剂，其以诱导或调节所述T细胞中TCR/CD3复合物相关信号的方式特异性结合所述T细胞表面上表达的第一分子；和
ii)第二受体结合剂，其中，所述第二受体结合剂i)可逆结合包含能够可逆结合第二受体结合剂的多个结合位点的反应剂，且ii)能够以诱导或调节所述组合物中T细胞中第二信号的方式特异性结合所述T细胞表面上的第二分子；和
(b)在开始所述孵育后5天内，破坏第二受体结合剂和所述反应剂之间的可逆结合，由此产生培养的T细胞。
22.如权利要求21所述的方法，其中，第二信号增强、抑制或改变T细胞中通过第一分子递送的信号。
23.如权利要求21或权利要求22所述的方法，其中，在第一受体结合剂特异性结合第一分子和/或第二受体结合剂特异性结合第二分子的条件下进行孵育，由此诱导或调节T细胞中的一种或多种信号。
24.如权利要求21-23中任一项所述的方法，其中，所述破坏在开始所述孵育后大于30分钟时发生。
25.如权利要求21-24中任一项所述的方法，其中：
所述破坏在开始所述孵育后1小时～4天时进行，在开始所述孵育后6小时～3天时进行，在开始所述孵育后12小时～2天时进行，在开始所述孵育后1天～4天时进行；或所述破坏在开始所述孵育后约1小时～约4天时进行，在开始所述孵育后约6小时～约3天时进行，在开始所述孵育后约12小时～约2天时进行，在开始所述孵育后约1天～约3天时进行；或
所述破坏在所述孵育开始后的大于或等于约1小时且在所述孵育开始后的1天、2天、3天或4天内进行。
26.如权利要求21-25中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂包含结合伴侣C1；且
多个结合位点包含两个或多个结合位点Z1，它们各自能够结合于结合伴侣C1以形成第二受体结合剂与反应剂之间的可逆键。
27.如权利要求7-26中任一项所述的方法，其中：
所述第二信号是除了TCR/CD3复合物相关信号以外的其他信号；
所述第二信号能够增强或加强TCR/CD3复合物相关信号；或
所述第二分子是共刺激分子、辅助分子、细胞因子受体、趋化因子受体、免疫检查点分子、或是TNF家族或TNF受体家族成员。
28.如权利要求7-27中任一项所述的方法，其中，所述第二分子选自：CD28、CD90(Thy-
1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40和HVEM。
29.如权利要求7-28中任一项所述的方法，其中，所述第二分子是CD28。
30.如权利要求7-29中任一项所述的方法，其中，第二分子是粘附分子或包含粘附分子，或是诱导细胞因子产生、趋化因子产生和/或粘附分子表达的因子。
31.如权利要求27或权利要求30所述的方法，其中，第二受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-2R、IL-1R、IL-15R、IFN-γR、TNF-αR、IL-4R、IL-10R、I型IFNR、IL-
12R、IL-15R、IL-17R、TNFR1和TNFR2。
32.如权利要求27、30和31中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：IL-2R、IL-1R、IL-
15R、IFN-γR、TNF-αR、IL-4R、IL-10R、I型IFNR、IL-12R、IL-15R、IL-17R、TNFR1和TNFR2；和/或
第二受体结合剂为选自下组的配体：IL-2、IL-1、IL-15、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-12、IL-15、IL-17和TNF，或为其生物活性片段。
33.如权利要求27和30-32中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-12R、IFN-γR、IL-4R和IL-
17R；或
第二受体结合剂为选自下组的配体：IL-2、IL-4、IL-7、IL-10、IL-15和IL-17，或为其生物活性片段。
34.如权利要求27或权利要求30所述的方法，其中，第二受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)。
35.如权利要求27、30和34中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)；和/或
第二受体结合剂为选自下组的配体：IL-7、IL-21、IL-2、IL-4、IL-9和IL-15，或为其生物活性片段。
36.如权利要求27、30、34和35中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)；或
第二受体结合剂为选自下组的配体：IL-7、IL-21、IL-2、IL-4、IL-9和IL-15，或为其生物活性片段。
37.如权利要求27或权利要求30所述的方法，其中，第二受体结合剂特异性结合选自下组的趋化因子受体：CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR1、CXCR3和CXCR4。
38.如权利要求27、30和37中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂是特异性结合选自下组的趋化因子受体的配体：CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR1、CXCR3和CXCR4；或
第二受体结合剂为选自下组的配体：CXCL9、CXCL10、CCL19、CCL21和CCL25，或为其生物活性片段。
39.如权利要求27、30、37和38中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂特异性结合选自下组的趋化因子受体：CXCR3、CCR7、CXCR1和CXCR4；或第二受体结合剂为选自下组的配体：CXCL9、CXCL10、CCL19、CCL21和CCL25，或为其生物活性片段。
40.如权利要求27或权利要求30所述的方法，其中，所述粘附分子选自：CD44、CD31、CD18/CD11a(LFA-1)、CD29、CD54(ICAM-1)、CD62L(L-选择素)和CD29/CD49d(VLA-4)、CD106(VCAM-1)，或为其生物活性片段。
41.如权利要求27、30和40中任一项所述的方法，其中，所述粘附分子选自：LFA-1、L-选择素、VCAM-1和VLA-4，或为其生物活性片段。
42.如权利要求27或权利要求30所述的方法，其中，所述因子是核因子。
43.如权利要求27、30或权利要求42所述的方法，其中，所述因子是维甲酸受体相关孤儿受体γ(RORγ)或RORα。
44.如权利要求7-43中任一项所述的方法，其中，所述破坏包括使细胞接触包含物质的组合物，所述物质能够逆转第二受体结合剂和反应剂之间的键。
45.如权利要求44所述的方法，其中，所述破坏终止或减弱由第二受体结合剂诱导或调节的信号。
46.如权利要求44或权利要求45所述的方法，其中，第二分子是CD28，该破坏在T细胞内终止或减弱CD28共刺激信号。
47.如权利要求7-46中任一项所述的方法，其中，所述孵育进一步在第三受体结合剂的存在下进行，该第三受体结合剂能特异性结合一个或多个T细胞表面上的第三分子。
48.如权利要求47所述的方法，其中：
第一受体结合剂以诱导或调节所述T细胞中TCR/CD3复合物相关信号的方式特异性结合所述T细胞表面上表达的第一分子；
第二受体结合剂特异性结合第二分子，从而诱导或调节T细胞中的第二信号；和
第三受体结合剂特异性结合T细胞表面上的第三分子，所述第三分子诱导或调节所述细胞中的其他信号。
49.如权利要求47或权利要求48所述的方法，其中，第一分子是CD3。
50.如权利要求47-49中任一项所述的方法，其中，第二信号增强、抑制或改变通过第一分子递送的信号。
51.如权利要求47-50中任一项所述的方法，其中，第二分子是共刺激分子、辅助分子、细胞因子受体、趋化因子受体、免疫检查点分子、或是TNF家族或TNF受体家族成员。
52.如权利要求47-51中任一项所述的方法，其中，第二分子选自：CD28、CD90(Thy-1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40和HVEM。
53.如权利要求47-52中任一项所述的方法，其中，第二分子是CD28。
54.如权利要求47-53中任一项所述的方法，其中，第三分子是细胞因子受体、趋化因子受体，或是粘附分子或包含粘附分子，或是诱导细胞因子产生、趋化因子产生和/或粘附分子表达的因子。
55.如权利要求54所述的方法，其中，第三受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-2R、IL-1R、IL-15R、IFN-γR、TNF-αR、IL-4R、IL-10R、I型IFNR、IL-12R、IL-15R、IL-
17R、TNFR1和TNFR2。
56.如权利要求54或权利要求55所述的方法，其中：
第三受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：IL-2R、IL-1R、IL-
15R、IFN-γR、TNF-αR、IL-4R、IL-10R、I型IFNR、IL-12R、IL-15R、IL-17R、TNFR1和TNFR2；和/或
第三受体结合剂为选自下组的配体：IL-2、IL-1、IL-15、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-12、IL-15、IL-17和TNF，或为其生物活性片段。
57.如权利要求54-56中任一项所述的方法，其中：
第三受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-12R、IFN-γR、IL-4R和IL-
17R；或
第三受体结合剂为选自下组的配体：IL-2、IL-4、IL-7、IL-10、IL-15和IL-17，或为其生物活性片段。
58.如权利要求54所述的方法，其中，第三受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)。
59.如权利要求54或权利要求58所述的方法，其中：
第三受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)；和/或
第三受体结合剂为选自下组的配体：IL-7、IL-21、IL-2、IL-4、IL-9和IL-15，或为其生物活性片段。
60.如权利要求54、58和59中任一项所述的方法，其中：
第三受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)；或
第三受体结合剂为选自下组的配体：IL-7、IL-21、IL-2、IL-4、IL-9和IL-15，或为其生物活性片段。
61.如权利要求54所述的方法，其中，第三受体结合剂特异性结合选自下组的趋化因子受体：CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR1、CXCR3和CXCR4。
62.如权利要求54或权利要求61所述的方法，其中：
第三受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR1、CXCR3和CXCR4；或
第三受体结合剂为选自下组的配体：CXCL9、CXCL10、CCL19、CCL21和CCL25，或为其生物活性片段。
63.如权利要求54、61和62中任一项所述的方法，其中：
第三受体结合剂特异性结合选自下组的趋化因子受体：CXCR3、CCR7、CXCR1和CXCR4；或第三受体结合剂为选自下组的配体：CXCL9、CXCL10、CCL19、CCL21和CCL25，或为其生物活性片段。
64.如权利要求54所述的方法，其中，所述粘附分子选自：CD44、CD31、CD18/CD11a(LFA-
1)、CD29、CD54(ICAM-1)、CD62L(L-选择素)和CD29/CD49d(VLA-4)、CD106(VCAM-1)，或为其生物活性片段。
65.如权利要求54或权利要求64所述的方法，其中，所述粘附分子选自：LFA-1、L-选择素、VCAM-1和VLA-4，或为其生物活性片段。
66.如权利要求54所述的方法，其中，所述因子是核因子。
67.如权利要求54或权利要求66所述的方法，其中，所述因子是维甲酸受体相关孤儿受体γ(RORγ)或RORα。
68.如权利要求47-67中任一项所述的方法，其中：
第三受体结合剂可能结合第一反应剂或第二反应剂；或
孵育在可逆结合第三受体结合剂的其他反应剂的存在下进行。
69.如权利要求1-68中任一项所述的方法，包括：在所述破坏后，进一步孵育包含所述T细胞的组合物。
70.如权利要求69所述的方法，其中：
所述孵育和进一步孵育在相同的容器中进行；和/或
所述进一步孵育在所述物质的存在下进行；和/或
所述方法不包括：在进一步孵育前，从细胞组合物中去除所述物质、受体结合剂、第二受体结合剂和/或反应剂。
71.如权利要求1-70中任一项所述的方法，其中：
所述孵育和/或进一步孵育在37℃±2℃或约37℃±2℃下进行；和/或
所述孵育和/或进一步孵育在能够将信号递送到T细胞的其他作用剂的存在下进行。
72.如权利要求71所述的方法，其中，所述其他作用剂能够增强或诱导T细胞、CD4+细胞和/或CD8+细胞的增殖。
73.如权利要求72所述的方法，其中，所述其他作用剂是选自IL-2、IL-15和IL-7的细胞因子。
74.如权利要求69-73中任一项所述的方法，其中，所述进一步孵育的进行时间不超过
14天、不超过12天、不超过10天、不超过8天或不超过6天。
75.一种用于培养T细胞的方法，包括：
在特异性结合T细胞表面上CD28分子的受体结合剂的存在下，在使所述细胞中通过CD28的信号转导发生的条件下，孵育包含T细胞的组合物；和
在所述孵育开始后5天内，消除或减少所述受体结合剂和CD28分子的结合，由此终止或减少所述细胞中的CD28信号转导，从而产生培养的T细胞。
76.如权利要求75所述的方法，其中，所述消除或减弱在开始孵育后4天内、3天内、2天内或1天内产生。
77.如权利要求75或权利要求76所述的方法，其中，所述消除或减弱包括：
洗涤所述细胞，由此从组合物中去除或减少未特异性结合CD28的任何受体结合剂；或逆转所述受体结合剂和CD28分子间的结合相互作用，可选地进一步包括洗涤所述细胞以去除或减少组合物中的受体结合剂。
78.如权利要求75-77中任一项所述的方法，其中，在孵育的至少部分期间和/或在孵育后，在特异性结合TCR/CD3复合物的分子的作用剂的存在下，孵育组合物中的T细胞，由此诱导或调节所述细胞中TCR/CD3复合物相关的信号。
79.一种培养目标细胞的方法，包括：在受体结合剂的存在下孵育包含目标细胞的组合物，所述受体结合剂i)可逆结合包含能够可逆结合所述受体结合剂的多个结合位点的反应剂，且ii)以诱导或调节目标细胞中信号和/或改变目标细胞功能的方式特异性结合所述目标细胞表面上除CD28、CD3、或CD40以外的分子，从而产生培养的目标细胞。
80.如权利要求79所述的方法，其中，所述分子不是CD137和/或所述受体结合剂不特异性结合CD137。
81.如权利要求79或权利要求80所述的方法，其中，孵育在一定条件下进行，在该条件下所述受体结合剂特异性结合于所述分子，由此诱导或调节目标细胞中的信号。
82.如权利要求79-81中任一项所述的方法，其中，所述信号不是TCR/CD3复合物相关的信号。
83.如权利要求79-82中任一项所述的方法，其中，所述受体结合剂包含结合伴侣C1，且多个结合位点包括两个或多个结合位点Z1，它们各自能够结合于结合伴侣C1以形成所述受体结合剂和反应剂之间的可逆键。
84.如权利要求79-83中任一项所述的方法，其中：
所述分子选自：CD90(Thy-1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40和HVEM；和/或
所述受体结合剂特异性结合CD90(Thy-1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40或HVEM。
85.如权利要求79-84中任一项所述的方法，其中，所述受体结合剂是第二受体结合剂，所述分子是第二分子，孵育在第一受体结合剂的存在下进一步进行，所述第一受体结合剂能够特异性结合一个或多个T细胞表面上的第一分子，该第一分子可选地能够诱导或调节组合物中一个或多个T细胞中的第一信号。
86.如权利要求85所述的方法，其中：
所述第一受体结合剂可逆结合所述反应剂，所述反应剂包含针对第一受体结合剂和第二受体结合剂的多个结合位点；或
第一受体结合剂可逆结合第二反应剂，所述第二反应剂包含能够可逆结合第一受体结合剂的多个结合位点。
87.如权利要求85或权利要求86所述的方法，其中：
第一受体结合剂能够在所述T细胞中引发TCR/CD3复合物相关的信号；和/或
第一受体结合剂特异性结合TCR/CD3复合物成员；和/或
第一受体结合剂特异性结合CD3。
88.如权利要求85-87中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂与第二分子的特异性结合能够增强、抑制或改变通过第一分子递送的信号；或
第二受体结合剂与第二分子的特异性结合能够增强或强化TCR/CD3复合物相关的信号。
89.一种用于培养T细胞的方法，包括在如下物质的存在下孵育包含T细胞的组合物：
i)第一受体结合剂，其中，所述第一受体结合剂i)可逆结合包含能够可逆结合第一受体结合剂的多个结合位点的反应剂，且ii)能够以诱导或调节所述组合物中T细胞中TCR/CD3复合物相关信号的方式特异性结合所述T细胞表面上的第一分子；和
ii)第二受体结合剂，其中，所述第二受体结合剂i)可逆结合(a)反应剂，所述反应剂进一步包含针对第二受体结合剂的多个结合位点，或(b)第二反应剂，其包含能够可逆结合第二受体结合剂的多个结合位点，且ii)以诱导或调节所述组合物中T细胞中第二信号的方式特异性结合所述T细胞表面上的第二分子，以及
其中，所述孵育在如下条件下进行：所述条件使得所述信号和/或第二信号在组合物中的T细胞中被诱导或调节，由此产生培养的T细胞。
90.如权利要求89所述的方法，其中，第一受体结合剂特异性结合TCR/CD3复合物成员和/或第一受体结合剂特异性结合CD3。
91.如权利要求89或权利要求90所述的方法，其中：
第二受体结合剂与第二分子的特异性结合能够诱导或调节除TCR/CD3复合物相关信号以外的其他信号；和/或
第二受体结合剂与第二分子的特异性结合能够增强、抑制或改变通过第一分子递送的信号；或
第二受体结合剂与第二分子的特异性结合能够增强或强化TCR/CD3复合物相关的信号。
92.如权利要求85-91中任一项所述的方法，其中：
所述第二分子选自：CD90(Thy-1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40和HVEM；和/或
第二受体结合剂特异性结合CD90(Thy-1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40或HVEM。
93.如权利要求85-92中任一项所述的方法，其中，所述第二分子不是CD137和/或第二受体结合剂不特异性结合CD137。
94.如权利要求85-93中任一项所述的方法，其中：
第一受体结合剂和第二受体结合剂可逆结合所述反应剂；以及
以下之一：
i)第一受体结合剂和第二受体结合剂各自独立地包含结合伴侣C1，且多个结合位点包括两个或多个结合位点Z1，它们各自能够结合于结合伴侣C1以形成第一和第二受体结合剂和所述反应剂之间的可逆键；或
ii)第一受体结合剂包含结合伴侣C1，第二受体结合剂包含结合伴侣C2，且多个结合位点包括两个或多个结合位点Z1，它们各自能够结合于结合伴侣C1和结合伴侣C2以形成第一和第二受体结合剂和所述反应剂之间的可逆键；或
iii)第一受体结合剂包含结合伴侣C1，第二受体结合剂包含结合伴侣C2，且多个结合位点包括两个或多个结合位点Z1以及两个或多个结合位点Z2，其中Z1各自能够结合于结合伴侣C1以形成第一受体结合剂和所述反应剂之间的可逆键，Z2各自能够结合于结合伴侣C2以形成第二受体结合剂和所述反应剂之间的可逆键。
95.如权利要求79-83中任一项所述的方法，其中，所述受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-2R、IL-1R、IL-15R、IFN-γR、TNF-αR、IL-4R、IL-10R、I型IFNR、IL-
12R、IL-15R、IL-17R、TNFR1和TNFR2。
96.如权利要求79-83和95中任一项所述的方法，其中：
所述受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：IL-2R、IL-1R、IL-
15R、IFN-γR、TNF-αR、IL-4R、IL-10R、I型IFNR、IL-12R、IL-15R、IL-17R、TNFR1和TNFR2；和/或
所述受体结合剂为选自下组的配体：IL-2、IL-1、IL-15、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-12、IL-15、IL-17和TNF，或为其生物活性片段。
97.如权利要求79-83、95和96中任一项所述的方法，其中：
所述受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子：IL-12R、IFN-γR、IL-4R和IL-17R；
或
所述受体结合剂为选自下组的配体：IL-2、IL-4、IL-7、IL-10、IL-15和IL-17，或为其生物活性片段。
98.如权利要求79-83中任一项所述的方法，其中，所述受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)。
99.如权利要求79-83和98中任一项所述的方法，其中：
所述受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)；和/或
所述受体结合剂为选自下组的配体：IL-7、IL-21、IL-2、IL-4、IL-9和IL-15，或为其生物活性片段。
100.如权利要求79-83、98和99中任一项所述的方法，其中：
所述受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)；或
所述受体结合剂为选自下组的配体：IL-7、IL-21、IL-2、IL-4、IL-9和IL-15，或为其生物活性片段。
101.如权利要求79-83中任一项所述的方法，其中，所述受体结合剂特异性结合选自下组的趋化因子受体：CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR1、CXCR3和CXCR4。
102.如权利要求79-83和101中任一项所述的方法，其中：
所述受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR1、CXCR3和CXCR4；或
所述受体结合剂为选自下组的配体：CXCL9、CXCL10、CCL19、CCL21和CCL25，或为其生物活性片段。
103.如权利要求79-83、101和102中任一项所述的方法，其中：
所述受体结合剂特异性结合选自下组的趋化因子受体：CXCR3、CCR7、CXCR1和CXCR4；或所述受体结合剂为选自下组的配体：CXCL9、CXCL10、CCL19、CCL21和CCL25，或为其生物活性片段。
104.如权利要求79-83中任一项所述的方法，其中，所述粘附分子选自：CD44、CD31、CD18/CD11a(LFA-1)、CD29、CD54(ICAM-1)、CD62L(L-选择素)和CD29/CD49d(VLA-4)、CD106(VCAM-1)，或为其生物活性片段。
105.如权利要求79-83和104中任一项所述的方法，其中，所述粘附分子选自：LFA-1、L-选择素、VCAM-1和VLA-4，或为其生物活性片段。
106.如权利要求79-83中任一项所述的方法，其中，所述因子是核因子。
107.如权利要求79-83和106中任一项所述的方法，其中，所述因子是维甲酸受体相关孤儿受体γ(RORγ)或RORα。
108.如权利要求79-83和95-107中任一项所述的方法，其中，孵育在如下条件下进行：
在所述条件下，受体结合剂特异性结合所述分子，由此诱导或调节目标细胞中的信号和/或改变目标细胞中的功能。
109.如权利要求79-83和95-108中任一项所述的方法，其中，所述受体结合剂包含结合伴侣C1，且多个结合位点包括两个或多个结合位点Z1，它们各自能够结合于结合伴侣C1以形成所述受体结合剂和反应剂之间的可逆键。
110.如权利要求79-83和95-109中任一项所述的方法，其中，所述受体结合剂是额外受体结合剂，所述分子是额外分子，所述孵育在第一受体结合剂的存在下进一步进行，所述第一受体结合剂能够特异性结合一个或多个T细胞表面上的第一分子，该第一分子可选地能够诱导或调节组合物中一个或多个T细胞中的第一信号。
111.如权利要求110所述的方法，其中：
第一受体结合剂可逆结合所述反应剂，所述反应剂包含针对第一受体结合剂和第二受体结合剂的多个结合位点；或
第一受体结合剂可逆结合第二反应剂，所述第二反应剂包含能够可逆结合第一受体结合剂的多个结合位点。
112.如权利要求110或权利要求111所述的方法，其中：
第一受体结合剂能够在所述T细胞中引发TCR/CD3复合物相关的信号；和/或
第一受体结合剂特异性结合TCR/CD3复合物成员；和/或
第一受体结合剂特异性结合CD3。
113.如权利要求110-112中任一项所述的方法，其中，第一受体结合剂包含结合伴侣C2，且多个结合位点包括两个或多个结合位点Z1，它们各自能够结合于结合伴侣C2以形成所述受体结合剂和反应剂之间的可逆键。
114.如权利要求110-113中任一项所述的方法，其中，在第二受体结合剂的存在下进行进一步孵育，所述第二受体结合剂能够可逆结合一个或多个T细胞表面上的第二分子，所述第二分子可选地能够诱导或调节组合物中目标细胞中的信号，从而增强、减弱或改变通过第一分子递送的信号。
115.如权利要求114所述的方法，其中：
所述第二信号是除了TCR/CD3复合物相关信号以外的其他信号；
所述第二信号能够增强或加强TCR/CD3复合物相关信号；或
所述第二分子是共刺激分子、辅助分子、细胞因子受体、趋化因子受体、免疫检查点分子、或是TNF家族或TNF受体家族成员。
116.如权利要求114或权利要求115所述的方法，其中：
所述第二分子选自：CD90(Thy-1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40和HVEM；和/或
第二受体结合剂特异性结合CD90(Thy-1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40或HVEM。
117.如权利要求114-116中任一项所述的方法，其中，所述第二分子选自CD28和CD137。
118.如权利要求114-117中任一项所述的方法，其中，第二分子是CD28。
119.一种用于培养目标细胞的方法，包括：在一种或多种受体结合剂的存在下孵育包含目标细胞的组合物，其中，所述受体结合剂i)可逆结合反应剂，所述反应剂为包含能够可逆结合所述受体结合剂的多个结合位点的链霉亲和素类似物或突变蛋白；且ii)以诱导或调节所述组合物中目标细胞中信号的方式特异性结合目标细胞表面上的分子，其中，所述链霉亲和素突变蛋白包含净负电荷或其等电点小于SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6所示链霉亲和素突变蛋白等电点，由此产生培养的目标细胞。
120.一种用于培养目标细胞的方法，包括：在一种或多种受体结合剂的存在下孵育包含目标细胞的组合物，所述受体结合剂i)可逆结合反应剂，所述反应剂为包含能够可逆结合所述受体结合剂的多个结合位点的链霉亲和素类似物或突变蛋白；且ii)以诱导或调节所述组合物中目标细胞中信号的方式特异性结合目标细胞表面上的分子，其中，所述链霉亲和素类似物或突变蛋白对包含氨基酸序列Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:8)的链霉亲和素结合肽的亲和力高于包含SEQ ID NO:1-6中任一项所示氨基酸序列的链霉亲和素或突变蛋白，从而产生培养的目标细胞。
121.如权利要求119或权利要求120所述的方法，其中，所述孵育在一定条件下进行，在该条件下所述受体结合剂特异性结合所述分子，由此诱导或调节组合物中一个或多个目标细胞中的信号。
122.如权利要求119-121中任一项所述的方法，其中：
所述多个结合位点包含两个或更多个结合位点Z1；和
所述结合受体剂包含结合伴侣C1，其能够可逆结合结合位点Z1，其中C1和Z1之间的可逆结合引起所述受体结合剂和所述反应剂之间的可逆结合。
123.如权利要求122所述的方法，其中，所述链霉亲和素类似物或突变蛋白包含多个结合位点Z1，其中多个受体结合剂可逆结合所述反应剂。
124.如权利要求79-88和95-123中任一项所述的方法，其中，所述目标细胞包括免疫细胞。
125.如权利要求79-88和95-124中任一项所述的方法，其中：
所述目标细胞包括血细胞；
所述目标细胞包括白细胞；
所述目标细胞包括淋巴细胞；
所述目标细胞包括B细胞；
所述目标细胞包括B细胞群；
所述目标细胞包括T细胞；
所述目标细胞包括T细胞群；和/或
所述目标细胞包括天然杀伤(NK)细胞。
126.如权利要求79-88和95-125中任一项所述的方法，其中，所述目标细胞包括：抗原特异性T细胞或其细胞群、辅助T细胞或其细胞群，细胞毒性T细胞或其细胞群、记忆T细胞或其细胞群、调节性T细胞或其细胞群、NK细胞或其细胞群、抗原特异性B细胞或其细胞群、记忆B细胞或其细胞群、或调节性B细胞或其细胞群。
127.如权利要求79-88和95-126中任一项所述的方法，其中，所述目标细胞是T细胞。
128.如权利要求79-88和95-127中任一项所述的方法，其中，所述分子递呈在T细胞表面上，且所述受体结合剂能够诱导或调节所述组合物中T细胞中的信号。
129.如权利要求79-88和95-128中任一项所述的方法，其中：
所述受体结合剂能够在T细胞中引发TCR/CD3复合物相关的信号；和/或
所述受体结合剂特异性结合TCR/CD3复合物成员；和/或
所述受体结合剂特异性结合CD3。
130.如权利要求79-88和95-129中任一项所述的方法，其中，所述分子是第一分子，且受体结合剂能够特异性结合一个或多个目标细胞表面上的第一分子以及第二分子，其中与第二分子的结合诱导或调节目标细胞中的信号。
131.如权利要求130所述的方法，其中，第二分子的结合可选地能够增强、减弱或改变通过第一分子递送的信号。
132.如权利要求79-88和95-129中任一项所述的方法，其中，所述受体结合剂是第一受体结合剂，所述孵育进一步在第二受体结合剂的存在下进行，所述第二受体结合剂能够特异性结合一个或多个所述目标细胞表面上的第二分子，与第二分子的结合可选地能够诱导或调节目标细胞中的信号。
133.如权利要求132所述的方法，其中，第二分子的结合可选地能够增强、减弱或改变通过第一分子递送的信号。
134.如权利要求132或权利要求133所述的方法，其中，孵育在一定条件下进行，在该条件下第二受体结合剂特异性结合于第二分子，由此诱导或调节组合物中目标细胞中的信号。
135.如权利要求134所述的方法，其中，第二分子的结合增强、减弱或改变通过第一分子递送的信号。
136.如权利要求132-135中任一项所述的方法，其中，链霉亲和素突变蛋白或类似物包括能够可逆结合第二受体结合剂的多个结合位点，由此所述第二受体结合剂可逆结合所述链霉亲和素突变蛋白或类似物。
137.如权利要求136所述的方法，其中，第二受体结合剂包括结合伴侣C1或C2，其能够可逆结合链霉亲和素类似物或突变蛋白中存在的所述两个或更多个结合位点Z2。
138.如权利要求130-137中任一项所述的方法，其中：
第二分子选自：CD28、CD90(Thy-1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40和HVEM；和/或
第二受体结合剂特异性结合CD28、CD90(Thy-1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40或HVEM。
139.如权利要求130-138中任一项所述的方法，其中，第二分子是CD28。
140.如权利要求130-138中任一项所述的方法，其中：
第二分子选自CD40和CD137；和/或
第二受体结合剂特异性结合CD40或CD137。
141.如权利要求130-137中任一项所述的方法，其中，第二分子是粘附分子或包含粘附分子，或是诱导细胞因子产生、趋化因子产生和/或粘附分子表达的因子。
142.如权利要求130-137和141中任一项所述的方法，其中，第二受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-2R、IL-1R、IL-15R、IFN-γR、TNF-αR、IL-4R、IL-10R、I型IFNR、IL-12R、IL-15R、IL-17R、TNFR1和TNFR2。
143.如权利要求130-137、141和142中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：IL-2R、IL-1R、IL-
15R、IFN-γR、TNF-αR、IL-4R、IL-10R、I型IFNR、IL-12R、IL-15R、IL-17R、TNFR1和TNFR2；和/或
第二受体结合剂为选自下组的配体：IL-2、IL-1、IL-15、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-12、IL-15、IL-17和TNF，或为其生物活性片段。
144.如权利要求130-137、141和142中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子：IL-12R、IFN-γR、IL-4R和IL-17R；
或
第二受体结合剂为选自下组的配体：IL-2、IL-4、IL-7、IL-10、IL-15和IL-17，或为其生物活性片段。
145.如权利要求130-137和141中任一项所述的方法，其中，第二受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)。
146.如权利要求130-137和145中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)；和/或
第二受体结合剂为选自下组的配体：IL-7、IL-21、IL-2、IL-4、IL-9和IL-15，或为其生物活性片段。
147.如权利要求130-137、145和146中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)；或
第二受体结合剂为选自下组的配体：IL-7、IL-21、IL-2、IL-4、IL-9和IL-15，或为其生物活性片段。
148.如权利要求130-137和141中任一项所述的方法，其中，第二受体结合剂特异性结合选自下组的趋化因子受体：CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR1、CXCR3和CXCR4。
149.如权利要求130-137和148中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR1、CXCR3和CXCR4；或
第二受体结合剂为选自下组的配体：CXCL9、CXCL10、CCL19、CCL21和CCL25，或为其生物活性片段。
150.如权利要求130-137、145和146中任一项所述的方法，其中：
第二受体结合剂特异性结合选自下组的趋化因子受体：CXCR3、CCR7、CXCR1和CXCR4；或第二受体结合剂为选自下组的配体：CXCL9、CXCL10、CCL19、CCL21和CCL25，或为其生物活性片段。
151.如权利要求130-137和141中任一项所述的方法，其中，所述粘附分子选自：CD44、CD31、CD18/CD11a(LFA-1)、CD29、CD54(ICAM-1)、CD62L(L-选择素)和CD29/CD49d(VLA-4)、CD106(VCAM-1)，或为其生物活性片段。
152.如权利要求130-137、141和151中任一项所述的方法，其中，所述粘附分子选自：
LFA-1、L-选择素、VCAM-1和VLA-4，或为其生物活性片段。
153.如权利要求130-137和141中任一项所述的方法，其中，所述因子是核因子。
154.如权利要求130-137、141和153中任一项所述的方法，其中，所述因子是维甲酸受体相关孤儿受体γ(RORγ)或RORα。
155.如权利要求10-78、85-94和116-154中任一项所述的方法，其中，第二受体结合剂包括多种不同的受体结合剂，其各自能够独立地结合组合物中T细胞表面上相同或不同的第二分子，从而共同诱导或调节细胞中的一个或多个信号。
156.如权利要求1-155中任一项所述的方法，还包括破坏第一和/或第二受体结合剂与所述反应剂之间的可逆结合。
157.如权利要求156所述的方法，其中，所述破坏在开始孵育后14天内进行，在开始孵育后12天内进行，在开始孵育后10天内进行，在开始孵育后8天内进行，或在开始孵育后6天内进行。
158.如权利要求1-157中任一项所述的方法，其中，至少一部分孵育在能够将信号递送到T细胞的其他作用剂的存在下进行。
159.如权利要求158所述的方法，其中，所述其他作用剂能够增强或诱导T细胞、CD4+细胞和/或CD8+细胞的增殖。
160.如权利要求158或权利要求159所述的方法，其中，所述其他作用剂是选自IL-2、IL-15和IL-7的细胞因子。
161.如权利要求158-160中任一项所述的方法，其中，所述其他作用剂不特异性结合CD28和/或诱导CD28信号转导。
162.如权利要求1-161中任一项所述的方法，其中，所述T细胞或目标细胞是获自对象的原代细胞。
163.如权利要求1-162中任一项所述的方法，其中，所述T细胞或目标细胞是直接分离自对象。
164.如权利要求1-93和127-163中任一项所述的方法，其中，所述T细胞是未分级的T细胞，富含CD3+T细胞或为分离的CD3+T细胞，富含CD4+T细胞或为分离的CD4+T细胞，或富含CD8+T细胞或为分离的CD8+T细胞。
165.如权利要求1-93和127-164中任一项所述的方法，其中，在孵育前，所述T细胞不富含CD62L+细胞和/或不富含初始T细胞。
166.如权利要求1-165中任一项所述的方法，其中，所述T细胞或目标细胞是人细胞。
167.如权利要求1-166中任一项所述的方法，其中：
所述反应剂的大小为小于20nm、小于10nm、小于5nm或小于1nm；或
3 3
所述反应剂的密度小于1.2g/cm或小于1.0g/cm。
168.如权利要求1-167中任一项所述的方法，其中：
在孵育过程中，所述反应剂不是或不结合于或接合于固体支持物、固定相、珠、微粒、磁性颗粒和/或基质；和/或
所述反应剂是柔性的，不含金属或磁性核心，完全或主要由有机多聚体组成，不为球形，基本上不为球形或形状不均一，和/或不坚硬。
169.如权利要求1-168中任一项所述的方法，其中，在所述孵育期间，所述反应剂不结合于支持物或固体支持物。
170.如权利要求1-168中任一项所述的方法，其中，在孵育的至少部分过程中，所述反应剂结合于支持物，由此在孵育的至少部分过程中多个T细胞或目标细胞可逆固定在支持物上。
171.如权利要求170所述的方法，其中：
所述支持物为或包含固定相；和/或
所述支持物为或包含固体支持物。
172.如权利要求1-171中任一项所述的方法，其中，各受体结合剂自独立地选自：抗体片段、单价抗体片段、具有抗体样结合特征的蛋白质类结合分子、包含Ig结构域的分子、细胞因子、趋化因子、适体、和MHC分子、及其结合片段。
173.如权利要求1-172中任一项所述的方法，其中：
所述受体结合剂包含抗体片段；
所述受体结合剂包含Fab片段；
所述受体结合剂为选自F(ab')2片段和二价单链Fv(scFV)片段的二价抗体片段；
所述受体结合剂为选自Fab片段、Fv片段或scFV片段的单价抗体片段；和/或
所述受体结合剂为选自下组的具有抗体样结合特征的蛋白质类结合分子：适体、基于脂质运载蛋白家族多肽的突变蛋白、糖体、基于锚定蛋白骨架的蛋白质、基于晶体骨架的蛋白质、附着连接蛋白和阿维多聚体。
174.如权利要求1-118和155-173中任一项所述的方法，其中，所述反应剂是或含：可逆结合生物素、生物素类似物或其生物活性片段的链霉亲和素、亲和素、链霉亲和素类似物或突变蛋白；可逆结合链霉亲和素结合肽的亲和素或链霉亲和素类似物或突变蛋白；包含至少两个螯合基团K的反应剂，其中所述至少两个螯合基团能够结合过渡金属离子；能够结合寡聚组氨酸亲和标签的物质；能够结合谷胱甘肽-S转移酶的物质；钙调蛋白或其类似物；能够结合钙调蛋白结合肽(CBP)的物质；能够结合FLAG肽的物质；能够结合HA标签的物质；能够结合麦芽糖结合蛋白(MBP)的物质；能够结合HSV表位的物质；能够结合myc表位的物质；
或能够结合生物素化载体蛋白的物质。
175.如权利要求1-118和155-174中任一项所述的方法，其中：
所述反应剂为或包含：可逆结合生物素或其生物活性片段的链霉亲和素类似物或突变蛋白或亲和素类似物或突变蛋白。
所述反应剂为或包含：可逆结合生物素类似物或其生物活性片段的链霉亲和素类似物或突变蛋白或亲和素类似物或突变蛋白；和/或
所述反应剂为或包含：可逆结合链霉亲和素结合肽的链霉亲和素类似物或突变蛋白或亲和素类似物或突变蛋白。
176.如权利要求1-118和155-175中任一项所述的方法，其中，所述反应剂是或含如下物质的寡聚体或多聚体：可逆结合生物素、或其生物活性片段的链霉亲和素、亲和素、链霉亲和素类似物或突变蛋白；可逆结合链霉亲和素结合肽的链霉亲和素或亲和素类似物或突变蛋白；包含至少两个螯合基团K的反应剂，其中所述至少两个螯合基团能够结合过渡金属离子；能够结合寡聚组氨酸亲和标签的物质；能够结合谷胱甘肽-S转移酶的物质；钙调蛋白或其类似物；能够结合钙调蛋白结合肽(CBP)的物质；能够结合FLAG肽的物质；能够结合HA标签的物质；能够结合麦芽糖结合蛋白(MBP)的物质；能够结合HSV表位的物质；能够结合myc表位的物质；或能够结合生物素化载体蛋白的物质。
177.如权利要求1-118和155-176中任一项所述的方法，其中，所述反应剂包括：链霉亲和素、亲和素、链霉亲和素类似物或突变蛋白、或和亲和素类似物或突变蛋白的寡聚体或多聚体。
178.如权利要求1-177中任一项所述的方法，其中，所述反应剂包含链霉亲和素类似物或突变蛋白的寡聚体或多聚体。
179.如权利要求176、177和178中任一项所述的方法，其中，寡聚体或多聚体中的个体分子通过多糖或双官能接头交联。
180.如权利要求174-179中任一项所述的方法，其中，所述链霉亲和素结合肽选自下组：Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:8)、Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys-(GlyGlyGlySer)3-Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:17)、Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys-(GlyGlyGlySer)2-Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:18)和Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys-(GlyGlyGlySer)2Gly-Gly-Ser-Ala-Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:19)。
181.如权利要求1-180中任一项所述的方法，其中：
所述反应剂包含链霉亲和素类似物或突变蛋白，其在对应于SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的链霉亲和素中的第44-47位的序列位置处包含氨基酸序列Va144-Thr45-Ala46-Arg47或
44 45 46 47
lle -Gly -Ala -Arg ；或
所述链霉亲和素类似物或突变蛋白在对应于SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的链霉亲和素中的第44-47位的序列位置处包含氨基酸序列Va144-Thr45-Ala46-Arg47。
182.如权利要求1-118和155-181中任一项所述的方法，其中，所述链霉亲和素类似物或突变蛋白包含：
a)SEQ ID NO:3-6、27和28中任一项所示的氨基酸序列；
b)氨基酸序列，其与SEQ ID NO:3-6、27和28中任一序列显示至少85％、86％、87％、
88％、89％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更大序列相同性、且包含对应于Va144-Thr45-Ala46-Arg47或lle44-Gly45-Ala46-Arg47的氨基酸序列、且可逆结合生物素或其生物活性形式、生物素类似物或突变蛋白或其生物活性片段或链霉亲和素结合肽；或
c)a)或b)的功能性片段，其可逆结合生物素或其生物活性形式、生物素类似物或突变蛋白或其生物活性片段或链霉亲和素结合肽。
183.如权利要求181或权利要求182所述的方法，其中，所述链霉亲和素类似物或突变蛋白还包含一处或多处氨基酸置换，所述置换的位置对应于SEQ ID NO:1所示氨基酸序列中链霉亲和素内第117、120和/或121位。
184.如权利要求183所述的方法，其中：
所述一处或多处氨基酸置换选自：Glu117、Asp117、Arg117、Ser120、Ala120、Gly120、Trp121、Tyr121或Phe121；或
所述一处或多处氨基酸置换为选自Glu117、Gly120或Tyr121中的一种或多种；或
所述氨基酸置换选自Glu117、Gly120或Tyr121。
185.如权利要求119-184中任一项所述的方法，其中，所述链霉亲和素类似物或突变蛋白包含：
SEQ ID NO:27或28所示的氨基酸序列；
b)氨基酸序列，其与SEQ ID NO:28显示至少85％、86％、87％、88％、89％、89％、90％、
91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更大序列相同性、且包含对应于Va144、Thr45、Ala46、Arg47、Glu117、Gly120和Tyr121的氨基酸序列、且可逆结合生物素或其生物活性片段、生物素类似物或突变蛋白或其生物活性片段或链霉亲和素结合肽；或c)a)或b)的功能性片段，其可逆结合生物素或其生物活性片段、生物素类似物或突变蛋白或其生物活性片段或链霉亲和素结合肽。
186.如权利要求1-118和155-185中任一项所述的方法，其中：
所述反应剂是或包含链霉亲和素类似物或突变蛋白；且
所述结合伴侣C1和/或结合伴侣C2独立地包含选自下组的链霉亲和素结合肽：Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:8)、Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys-(GlyGlyGlySer)3-Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:17)、Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys-(GlyGlyGlySer)2-Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:18)和Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys-(GlyGlyGlySer)2Gly-Gly-Ser-Ala-Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:19)。
187.如权利要求1-78和156-186中任一项所述的方法，其中，所述破坏包括使细胞接触包含物质的组合物，所述物质能够逆转所述受体结合剂和反应剂之间的键。
188.如权利要求187所述的方法，其中，所述物质是游离结合伴侣和/或为竞争剂。
189.如权利要求187或权利要求188所述的方法，其中，所述物质在组合物中对T细胞或对目标细胞无害，和/或与在可比或相同条件下不含该物质分别孵育T细胞或目标细胞相比，加入该物质不会令存活T细胞或目标细胞百分比降至低于90％、80％、70％、60％或
50％。
190.如权利要求1-78和156-189中任一项所述的方法，其中，该破坏终止或减少T细胞或目标细胞中由受体结合剂或第二受体结合剂中一者或两者诱导或调节的信号。
191.如权利要求1-190中任一项所述的方法，其中：
所述反应剂是或包括链霉亲和素类似物或突变蛋白或其生物活性片段；且
所述物质包含链霉亲和素结合肽、生物素或其生物活性片段、可选地D-生物素、或生物素类似物或生物活性片段。
192.如权利要求191所述的方法，其中：
所述物质是选自下组的链霉亲和素结合肽：Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:8)、Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys-(GlyGlyGlySer)3-Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:17)、Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys-(GlyGlyGlySer)2-Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:18)和Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys-(GlyGlyGlySer)2Gly-Gly-Ser-Ala-Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:
19)；和/或
所述物质为C1或其类似物，或者为C2或其类似物。
193.如权利要求1-192中任一项所述的方法，其中：
所述结合位点Z1和所述结合伴侣C1之间可逆结合的解离常数(KD)和/或所述结合位点Z2和所述结合伴侣C2之间可逆结合的解离常数(KD)为10-2M～10-13M。
194.如权利要求1-193中任一项所述的方法，其中：
在孵育前，使细胞与特异性结合组合物中T细胞或目标细胞所含标志物的选择剂接触，从而产生或获得含有T细胞或目标细胞的组合物；或
至少部分孵育在选择剂的存在下进一步进行，所述选择剂特异性结合组合物中T细胞或目标细胞所含的标志物，其中培养的T细胞富集了含有该标志物的T细胞或目标细胞。
195.如权利要求194所述的方法，其中：
所述选择剂可逆结合所述反应剂，且所述反应剂还包含能够特异性结合该选择剂的多个结合位点；或
所述选择剂可逆结合其他反应剂，且所述其他反应剂还包含能够特异性结合该选择剂的多个结合位点。
196.如权利要求1-195中任一项所述的方法，其中，与没有信号的诱导或调节下的T细胞孵育相比，所述信号的诱导或调节使得培养T细胞的扩增和/或活化增加。
197.如权利要求196所述的方法，其中，所述增加为至少2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍或更多倍。
198.如权利要求7-197中任一项所述的方法，其中，与没有额外或第二信号的诱导或调节下的T细胞孵育相比，所述额外或第二信号的诱导或调节使得培养T细胞的扩增和/或活化增加。
199.如权利要求198所述的方法，其中，所述增加为至少2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍或更多倍。
200.如权利要求1-199中任一项所述的方法，其中，所述方法增加组合物中T细胞的扩增和/或增殖，改变组合物中T细胞的代谢谱，改变组合物中CD8+T细胞的亚组；和/或，增加组合物中长寿记忆T细胞，以上各自与孵育前组合物中的T细胞相比，与孵育后但未进行破坏或孵育后但在特异性结合CD28和/或诱导或调节CD28信号转导的物质的存在下相比。
201.如权利要求1-200中任一项所述的方法，其中，所述方法获得培养的T细胞，其中：
分别与孵育前、孵育后但未进行破坏、或在类似但在特异性结合CD28和/或诱导或调节CD28信号转导的物质存在下进行孵育后的组合物中的CD3+T细胞、CD4+T细胞或CD8+细胞的数量或百分比相比，CD3+T细胞、CD4+T细胞或CD8+细胞的数量或百分比提高至少2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍；
与孵育前、孵育后但未进行破坏、或在类似但在特异性结合CD28和/或诱导或调节CD28信号转导的作用剂存在下进行孵育后的组合物中的CD8+细胞比例或相对比例或标准化比例相比，CD8+T细胞的比例或相对比例或标准化比例提高至少2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。
与孵育前、孵育后但未进行破坏、或在类似但在特异性结合CD28和/或诱导或调节CD28信号转导的物质存在下进行孵育后的组合物中的相应细胞群体，CD62L+、长寿记忆T细胞或记忆干细胞(Tscm))的数量或百分比相比，CD62L+、可选的长寿记忆T细胞或记忆干细胞Tscm的数量或百分比提高至少2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。
202.如权利要求1-201中任一项所述的方法，其中，培养的T细胞包含多于35％、40％、
45％、50％、60％、70％、80％或90％含CD62L表面阳性表型(CD62L+)的T细胞亚组，以占组合物中总T细胞或占组合物中总细胞的百分比计。
203.如权利要求202所述的方法，其中，所述T细胞亚组还包含如下表型：
a)CD127+；和/或
b)CD45RA+、CD45RO-、CCR7+和CD27+中的任何一种或多种，以及t-bet低、IL-7Ra+、CD95+、IL-2Rβ+、CXCR3+和LFA-1+中的任何一种或多种。
204.如权利要求202或权利要求203所述的方法，其中，所述T细胞亚组：
a)包含低水平的TCR重排删除环(TREC)；和/或
b)表达增殖标志物，其可选地为Ki-67；和/或
c)在刺激剂的存在下显示增殖能力；和/或
d)在刺激剂的存在下显示产生选自IFN-γ、TNF和IL-2的细胞因子的能力。
205.如权利要求204所述的方法，其中，所述刺激剂是抗原、稳态细胞因子，可选地IL-
15和/或IL-17，或者是能够在T细胞中引发TCR/CD3复合物相关信号的物质。
206.如权利要求202-205中任一项所述的方法，其中，所述T细胞亚组为或含长寿记忆T细胞。
207.如权利要求202-206中任一项所述的方法，其中，所述T细胞亚组为或含记忆T干细胞(TSCM)。
208.如权利要求1-207中任一项所述的方法，还包括将重组核酸分子导入T细胞或目标细胞群，其中该核酸分子编码重组蛋白，由此细胞表达该重组蛋白。
209.如权利要求208所述的方法，其中，重组受体是嵌合抗原受体或转基因T细胞受体(TCR)。
210.如权利要求1-209中任一项所述的方法，其中，所述方法在体外或离体进行。
211.如权利要求1-210中任一项所述的方法，还包括将所述培养的细胞给予患有疾病或病症的对象。
212.一种组合物，其包含通过权利要求1-211中任一项所述的方法生产的多个培养的T细胞或目标细胞，以及可选的药学上可接受的赋形剂。
213.如权利要求212所述的方法，其中，加入所述物质后，细胞未在体外或离体于高于
30℃的温度下孵育超过24小时、超过48小时、超过72小时或超过96小时。
214.一种制品，其包含：
a)反应剂，其包含能够结合受体结合剂的多个结合位点；
b)受体结合剂，其i)可逆结合所述反应剂，且ii)能够以诱导或调节T细胞中信号的形式特异性结合T细胞表面上的分子，其中，所述分子不是CD28、CD3或CD40。
215.如权利要求215中所述的制品，其中：
结合所述分子诱导或调节T细胞中除TCR/CD3复合物相关信号以外的信号；和/或
结合所述分子增强或强化TCR/CD3复合物相关信号。
216.如权利要求214或权利要求215所述的制品，其中，所述分子选自：CD90(Thy-1)、CD95(Apo-/Fas)、CD137(4-1BB)、CD154(CD40L)、ICOS、LAT、CD27、OX40和HVEM。
217.如权利要求130-132中任一项所述的制品，其中，所述分子不是CD137。
218.如权利要求217所述的制品，其中，所述受体结合剂特异性结合细胞因子受体、特异性结合趋化因子受体，为粘附分子或包含粘附分子，或为诱导细胞因子产生、趋化因子产生和/或粘附分子表达的因子。
219.如权利要求214或218所述的制品，其中，所述受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-2R、IL-1R、IL-15R、IFN-γR、TNF-αR、IL-4R、IL-10R、I型IFNR、IL-12R、IL-15R、IL-17R、TNFR1和TNFR2。
220.如权利要求214、218或219所述的制品，其中，
所述受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：IL-2R、IL-1R、IL-
15R、IFN-γR、TNF-αR、IL-4R、IL-10R、I型IFNR、IL-12R、IL-15R、IL-17R、TNFR1和TNFR2；和/或
所述受体结合剂为选自下组的配体：IL-2、IL-1、IL-15、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-12、IL-15、IL-17和TNF，或为其生物活性片段。
221.如权利要求214和218-220中任一项所述的制品，其中，
所述受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子：IL-12R、IFN-γR、IL-4R和IL-17R；
或
所述受体结合剂为选自下组的配体：IL-2、IL-4、IL-7、IL-10、IL-15和IL-17，或为其生物活性片段。
222.如权利要求214或权利要求218所述的制品，其中，第二受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)。
223.如权利要求214、218或222所述的制品，其中，
第二受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)；和/或
第二受体结合剂为选自下组的配体：IL-7、IL-21、IL-2、IL-4、IL-9和IL-15，或为其生物活性片段。
224.如权利要求214、218、222或223所述的制品，其中，
第二受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子受体：IL-7R、IL-21R和CD132(IL受体共同γ链)；或
第二受体结合剂为选自下组的配体：IL-7、IL-21、IL-2、IL-4、IL-9和IL-15，或为其生物活性片段。
225.如权利要求214或权利要求218所述的制品，其中，所述受体结合剂特异性结合选自下组的趋化因子受体：CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR1、CXCR3和CXCR4。
226.如权利要求214、218或225所述的制品，其中，
所述受体结合剂是特异性结合选自下组的细胞因子受体的配体：CCR1、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR1、CXCR3和CXCR4；或
所述受体结合剂为选自下组的配体：CXCL9、CXCL10、CCL19、CCL21和CCL25，或为其生物活性片段。
227.如权利要求214、218、225或226所述的制品，其中，
所述受体结合剂特异性结合选自下组的细胞因子：CXCR3、CCR7、CXCR1和CXCR4；或所述受体结合剂为选自下组的配体：CXCL9、CXCL10、CCL19、CCL21和CCL25，或为其生物活性片段。
228.如权利要求214或权利要求218所述的制品，其中，所述粘附分子选自：CD44、CD31、CD18/CD11a(LFA-1)、CD29、CD54(ICAM-1)、CD62L(L-选择素)和CD29/CD49d(VLA-4)、CD106(VCAM-1)，或为其生物活性片段。
229.如权利要求214、218和228中任一项所述的制品，其中，所述粘附分子选自：LFA-1、L-选择素、VCAM-1和VLA-4，或为其生物活性片段。
230.如权利要求214或权利要求218所述的制品，其中，所述因子是核因子。
231.如权利要求214、218和230中任一项所述的制品，其中，所述因子是维甲酸受体相关孤儿受体γ(RORγ)或RORα。
232.一种制品，其包含：
a)反应剂，其为包含能够结合作用剂的多个结合位点的链霉亲和素类似物或突变蛋白，其中所述链霉亲和素类似物或突变蛋白包含净负电荷、或显示的等电点小于包含SEQ ID NO:4或6所示氨基酸序列的链霉亲和素突变蛋白的等电点、和/或显示比包含SEQ ID NO:4或6任一所示氨基酸序列的链霉亲和素突变蛋白对包含氨基酸序列Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:8)的链霉亲和素结合肽的更高的亲和力；和
b)作用剂，其i)可逆结合所述反应剂，且ii)能特异性结合细胞表面上的分子。
233.如权利要求214-232中任一项所述的制品，其中：
所述受体结合剂或作用剂包含结合伴侣C1；且
所述多个结合位点包含两个或多个结合位点Z1，它们各自能够结合于结合伴侣C1以形成受体结合剂或作用剂与所述反应剂之间的可逆键。
234.如权利要求214-233中任一项所述的制品，其中，所述作用剂是选择剂或受体结合剂。
235.如权利要求234所述的制品，其中，所述作用剂是特异性结合如下分子的受体结合剂：所述分子为或包含TCR/CD3复合物成员、CD3、共刺激分子、辅助分子、细胞因子受体、趋化因子受体、免疫检查点分子，或为TNF家族或TNF受体家族成员，或者所述分子为或包含粘附分子，或者为诱导细胞因子产生、趋化因子产生和/或粘附分子表达的因子。
236.如权利要求214-235中任一项所述的制品，其中，所述受体结合剂是第二受体结合剂，且所述分子是第二分子，所述反应剂还包含：c)能够可逆结合第一受体结合剂的多个结合位点，和d)第一受体结合剂，其i)可逆结合所述反应剂，且ii)能够特异性结合T细胞表面上的第一分子。
237.如权利要求232或权利要求236所述的制品，其中，所述作用剂或第一受体结合剂特异性结合TCR/CD3复合物成员和/或第一受体结合剂特异性结合CD3。
238.如权利要求236或权利要求237所述的制品，其中：
i)第一受体结合剂和第二受体结合剂各自独立地包含结合伴侣C1，且多个结合位点包括两个或多个结合位点Z1，它们各自能够结合于结合伴侣C1以形成第一和第二受体结合剂和所述反应剂之间的可逆键；或
ii)第一受体结合剂包含结合伴侣C1，第二受体结合剂包含结合伴侣C2，且多个结合位点包括两个或多个结合位点Z1，它们各自能够结合于结合伴侣C1和结合伴侣C2以形成第一和第二受体结合剂和所述反应剂之间的可逆键；或
iii)第一受体结合剂包含结合伴侣C1，第二受体结合剂包含结合伴侣C2，且多个结合位点包括两个或多个结合位点Z1以及两个或多个结合位点Z2，其中Z1各自能够结合于结合伴侣C1以形成第一受体结合剂和所述反应剂之间的可逆键，Z2各自能够结合于结合伴侣C2以形成第二受体结合剂和所述反应剂之间的可逆键。
239.如权利要求214-238中任一项所述的制品，其中：
所述反应剂的大小为小于20nm、小于10nm、小于5nm或小于1nm；或
所述反应剂的密度小于1.2g/cm3或小于1.0g/cm3。
240.如权利要求214-239中任一项所述的制品，其中，所述反应剂不结合于支持物或固体支持物。
241.如权利要求214-240中任一项所述的制品，其中，所述反应剂不结合于或固定于支持物。
242.如权利要求241所述的制品，其中，所述支持物是固体支持物或固定相。
243.如权利要求241或权利要求242所述的制品，其中，所述支持物包括珠、颗粒、纳米颗粒或微球。
244.如权利要求214-243中任一项所述的制品，其中，所述作用剂单独选自抗体片段、单价抗体片段、具有抗体样结合特征的蛋白质类结合分子、包含Ig结构域的分子，及其结合片段。
245.如权利要求214-244中任一项所述的制品，其中，所述抗体片段是选自F(ab')2片段和二价单链Fv(scFV)片段的二价抗体片段，或是选自Fab片段、Fv片段和scFv片段的单价抗体片段。
246.如权利要求214-245中任一项所述的制品，其中：
所述反应剂为或包含链霉亲和素、亲和素、链霉亲和素类似物或突变蛋白或和亲和素类似物或突变蛋白；或
所述反应剂包括：链霉亲和素类似物或突变蛋白、或和亲和素类似物或突变蛋白、亲和素、链霉亲和素的寡聚体或多聚体。
247.一种试剂盒，其包含如权利要求214-246中任一项所述的制品和可选的使用说明。
248.如权利要求247所述的试剂盒，其还包含能够逆转所述受体结合剂和所述反应剂之间键的物质。
249.一种组合物，其包含多个T细胞，所述T细胞经基因工程化改造以表达特异性结合目标抗原的重组受体，其中：
以占组合物中总T细胞或占组合物中总细胞的百分比计，大于35％、40％、50％、60％、
70％、80％或90％的细胞包括包含如下表型的T细胞亚组：CD3+、CD4+或CD8+和CD62L+，以及CD127+、CD45RA+、CD45RO-、CCR7+和CD27+中的一种或多种，以及t-bet低、IL-7Ra+、CD95+、IL-2Rβ+、CXCR3+和LFA-1+中的一种或多种；以及以下一者或两者：
a)在基因工程化改造前或过程中，所述多个T细胞包含T细胞亚组：
i)未在GSK-P抑制剂的存在下孵育；
ii)未在重组稳态细胞因子，可选地IL-7或IL-15的存在下孵育；
iii)未富集CD62L+细胞；或
b)所述组合物不含GSK-P抑制剂或重组稳态细胞因子，可选地IL-7或IL-15。
250.如权利要求251所述的组合物，其中，所述T细胞亚组包含至少5×106、至少1×106或至少2×106个细胞。
251.一种组合物，其包含多个T细胞，所述T细胞经基因工程化改造以表达特异性结合目标抗原的重组受体，其中：
所述基因工程化改造的T细胞衍生自对包含具有如下表面表型的T细胞亚组的T细胞群的转导：CD3+、CD4+或CD8+和CD62L+以及CD127+、CD45RA+、CD45RO-、CCR7+和CD27+中的一种或多种以及t-bet低、IL-7Ra+、CD95+、IL-2Rβ+、CXCR3+和LFA-1+中的一种或多种，其中，与如下的任何一者相比，所述T细胞亚组在细胞群中总T细胞中所占百分比更大或在细胞群中的总T细胞数更大：
a)包含分离或富集自人对象的原代T细胞的群，所述分离或富集基于包含所述表型的一种或多种标志物的表面表达；
b)在GSK-P抑制剂存在下孵育的T细胞群；
c)在重组稳态细胞因子，可选地IL-7或IL-15的存在下孵育的T细胞群；或
d)用抗CD3和抗CD8刺激的T细胞群，但其中所述刺激大于1天、2天、3天、4天或5天和/或所述刺激不在生物素或生物素类似物的存在下被破坏。
252.如权利要求251所述的组合物，其中：
所述T细胞亚组以占细胞群中总T细胞等于或约大于35％、40％、50％、60％、70％、80％或90％的百分比存在；或
所述T细胞亚组包含至少5×106个细胞、1×106个细胞、2×106个细胞或更多个细胞。
253.如权利要求249-252中任一项所述的组合物，其为药物组合物。
254.一种治疗方法，其包括给予患有疾病或病症的对象权利要求212、213和249-253中任一项所述的组合物。
255.如权利要求254所述的治疗方法，其中，所述细胞包含重组受体、嵌合抗原受体或TCR，且所述重组受体、嵌合抗原受体或转基因TCR特异性结合与所述疾病或病症相关的抗原。
256.如权利要求254或权利要求255所述的治疗方法，其中，所述疾病或病症是癌症，和自身免疫性疾病或紊乱，或感染性疾病。