[001] 本发明涉及新氨基酸衍生物及其药学上可接受的盐。

[002] 更具体地说，本发明涉及对肾素具有抑制活性的新氨基酸衍生物及其药学上可接受的盐；涉及它们的制备方法、药用组合物以及治疗和/或预防人或动物下述疾病的方法：高血压、心力衰竭、肾病(例如肾衰竭、糖尿性肾病、肾小球性肾炎、肾盂肾炎、肾综合症、Bartter′s综合症、肾素分泌性肾瘤、肾水肿、血尿酸过多症、痛风等)、青光眼等。此外，本发明化合物可望用于痴呆的治疗剂。

[003] 本发明的第一个目的是提供有用的新氨基酸衍生物及其药学上可接受的盐，所述的衍生物和盐具有抑制肾素的活性，可用作降压药和心力衰竭、肾病、青光眼等的治疗剂，最好口服给药。

[004] 本发明的第二个目的是提供制备所述氨基酸衍生物及其盐的方法。

[005] 本发明的第三个目的是提供含所述氨基酸衍生物及其药学上可接受的盐(作为活性成分)的药用组合物。

[006] 本发明的第四个目的是提供治疗和/或预防高血压、心力衰竭、肾脏疾病、青光眼等的方法。

[007] 现有文献已经介绍了一些对肾素具有抑制活性的氨基酸衍生物，例如，欧洲专利申请公告0172346、0283970、030189和0391180号，国际公告WO87/04349号和日本专利申请公告2/243674号。

[008] 本发明的目标化合物氨基酸衍生物是新的，并可以用下式(I)表示：

[I]其中R1是吗啉代羰基、硫代吗啉代羰基、六氢-1H-吖庚因-1-基羰基、八氢吖辛因-1-基羰基、哌啶子基羰基、低级烷酰基、二丙基氨基甲酰基、四氢异喹啉羰基或杂环基，

[009] R2是低级烷基，

[010] R3是低级烷基，所述基团可以被一个或多个下述基团取代：芳基和环(低级)烷基，

[011] R4是低级烷基，

[012] X是低级亚烷基，

[013] Y1是单键或

[014] 其中R5是低级烷基，和

[015] Y2是-NH-或-O-，

[016] 条件是

[017] 1)当R1是吗啉代羰基和Y1是

时；

[018] 2)当R1是吗啉代羰基或硫代吗啉代羰基，Y1是单键和Y2是-O-时；或

[019] 3)当R1是低级烷酰基和Y2是-O-时；

[020] R3是异丁基、2-乙基丁基或具有一个或多个取代基的低级烷基，所述取代基选自芳基和环(低级)烷基。

[021] 目标化合物(I)或其盐可以按下列反应路线所示的方法制备，但是目标化合物(I)的制备并不局限于下述方法。

[022] 方法1

[023] 步骤1

或其羧基的反应    或其氨基的反应     或其它衍生物或其盐        衍生物或其盐

[024] 4

[025] 步骤2

[026] [IV]                             [V]

[027] 或其盐                          或其盐

[028] 步骤3

[029] [V]                                       [V]或其氨基的反应                        或其羟基的反应衍生物或其盐                           衍生物或其盐

[030]                                 或其盐其中R6是N-保护基，

[031] R7是氢或N-保护基，和

[032] R1、R2、R3、R4、X、Y1和Y2的定义同上文。

[033] 在本发明说明书的上、下文中，本发明范围包括的各种定义的适宜例子详细说明如下：

[034] 除特别规定外，“低级”一词是指含1—6个碳原子的基团。

[035] 在“环(低级)烷基”中，低级部分是指含3—6个碳原子的基团。

[036] 适宜的“低级烷基”可以是直链或支链烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、己基、异丁基、特丁基、戊基、异戊基、新戊基、2-乙基丁基等。

[037] 适宜的“环(低级)烷基”可以是环丙基、环丁基、环戊基或环己基，其中优选的是环己基。

[038] 适宜的“低级烷酰基”可以是甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、4-甲基戊酰基等。

[039] 适宜的“芳基”可以是苯基、萘基、低级烷基取代的苯基(如甲苯基、二甲苯基、茉基、异丙苯基等)等，其中优选苯基。

[040] 适宜的“杂环基”可以是含至少一个杂原子的基团，所述杂原子选自氮、硫和氧原子，杂环基可以包括饱和或不饱和、单环或多环的杂环基，优选的杂环基可以是含氮杂环基如含1—4个氮原子的不饱和3—6元杂单环基，例如，吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基(例如，4H-1，2，4-三唑基、1H-1，2，3-三唑基、2H-1，2，3-三唑基等)、四唑基(例如1H-四唑基、2H-四唑基)等；

[041] 含1—4个氮原子的饱和3—6个杂单环基(例如吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶子基、哌嗪基等)；含1—5个氮原子的不饱和稠杂环基，例如吲哚基、异吲哚基、中氮茚基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑哒嗪基(例如四唑(1，5-b)哒嗪基)等；含氧原子的不饱和3—6元杂单环基，例如，吡喃基、呋喃基等；

[042] 含1—2个氧原子和1—3个氮原子的不饱和3—6元杂单环基，例如噁唑基、异噁唑基、噁二唑基(例如1，2，4-氧杂二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，5-氧杂二唑基)等；

[043] 含1—2个氧原子的饱和3—6元杂单环基(例如吗啉基等)；

[044] 含1—2个氧原子和1—3氮原子的不饱和稠杂环基(例如苯并噁唑基、苯并噁二唑基等)；

[045] 含1—2个硫原子和1—3个氮原子的不饱和3—6元杂单环基，例如噻唑基、噻二唑基(例如1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基)等；

[046] 含1—2个硫原子和1—3个氮原子的饱和3—6元杂单环基(例如噻唑烷基等)；

[047] 含1—2个硫原子和1—3个氮原子的不饱和稠杂环基(例如，苯并噻唑基、苯并噻二唑基)等。

[048] 在所述的杂环基中，优选的是吡啶基。

[049] 优选的“取代的低级烷基”(基取代基选自芳基和环(低级)烷基)是二芳基(低级)烷基、环(低级)烷基(低级)烷基和二环(低级)烷基(低级)烷基，其中更优选的是二苯基乙基、环己基甲基和二环己基乙基。

[050] 适宜的“低级亚烷基”可以是直链或支链亚烷基如亚甲基、亚乙基、三亚甲基、四亚甲基、五亚甲基、六亚甲基、亚丙基、甲基亚甲基、乙基亚甲基、丙基亚甲基等，其中更优选的可以是C1—C4亚烷基，最优选的是亚甲基、亚乙基、三亚甲基、四亚甲基和甲基亚甲基。

[051] 适宜的“N-保护基”可以是取代的或未取代的低级烷酰基(例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、三氟乙酰基等)、邻苯二甲酰基、低级烷氧基羰基(例如丁氧基羰基、特戊氧基羰基等)、取代或未取代的芳烷氧基羰基(例如苄氧基羰基、对硝基苄氧基羰基等、取代或未取代的芳磺酰基(例如苯磺酰基、甲苯磺酰基等)硝基苯亚磺酰基、芳烷基(例如三苯甲基、苄基)等。

[052] 优选的化合物(I)是下述化合物：R1是硫代吗啉代羰基、六氢-1H-吖庚因-1-基羰基、哌啶子基羰基或低级烷酰基，R2是低级烷基，R3是低级烷基；R4是低级烷基，X是低级亚烷基，Y1是-N-(其中R5是低级烷基)，Y2是-NH-R1是吗啉代羰基、硫代吗啉代羰基、六氢-1H-吖庚因-1-基羰基、八氢吖辛因-1-基羰基、哌啶子基羰基或低级烷酰基，R2是低级烷基，R3是低级烷基，R4是低级烷基，X是低级亚烷基，Y1是单键或-N-(其中R5是低级烷基)，Y2是-NH-，条件是当R1是吗啉代羰基并且Y1是

时，R3是异丁基或2-乙基丁基；和R1是吗啉代羰基、硫代吗啉代羰基、六氢-1H-吖庚因-1-基羰基、八氢吖辛因-1-基羰基、哌啶子基羰基、低级烷酰基、二丙基甲酰基、四氢异喹啉基羰基或杂环基(优选的是吡啶基)，

[053] R2是低级烷基，R3是低级烷基，所述烷基可以被芳基(优选苯基)和环(低级)烷基(优选环己基)取代，

[054] R4是低级烷基，X是低级亚烷基，Y1是单键或

(其中R5是低级烷基)，Y2是-NH-或-O-，条件是：1)当R1是吗啉代羰基并且Y1是

时，2)当R1是吗啉代羰基或硫代吗啉代羰基，Y1是单键，Y2是-O-时，或3)当R1是低级烷酰基并且Y2是-O-时，

[055] R3是异丁基、2-乙基丁基或取代的低级烷基，所述取代基选自芳基(优选苯基)和环(低级)烷基(优选环己基)；更优选的化合物(I)是下述化合物：R1是硫代吗啉代羰基，R2是低级烷基，R3是低级烷基，R4是低级烷基，X是低级亚烷基，Y1是

(其中R5是低级烷基)，Y2是-NH-；R1是吗啉代羰基、R2是低级烷基，R3是异丁基或2-乙基丁基，R4是低级烷基，X是低级亚烷基，Y1是

(其中R5是低级烷基)，Y2是-NH-；R1是吗啉代羰基，R2是低级烷基，R3是低级烷基，R4是低级烷基，X是低级亚烷基，Y1是单键，Y2是-NH-；最优选的化合物(I)是下述化合物：R1是吗啉代羰基，R2是低级烷基，R3是异丁基，R4是低级烷基，X是低级亚烷基，Y1是

(其中R5是低级烷基)，Y2是-NH-。

[056] 目标化合物(I)的适宜的药学上可接受的盐是常用的无毒盐，包括有机酸加成盐(例如甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐等)、无机加成盐(例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磺酸盐等)、与氨基酸形成的盐(例如，天冬氨酸盐、谷氨酸盐等)等。

[057] 目标化合物(I)的制备方法详细说明如下。

[058] 方法1

[059] 步骤1

[060] 化合物(IV)或其盐可以按下述方法制备：将化合物(II)或其羰基的反应衍生物或其盐与化合物(III)或其氨基的反应衍生物或其盐反应。

[061] 化合物(IV)的适宜的盐可以参照化合物(I)的盐的实例。

[062] 适宜的化合物(II)的羰基的反应衍生物可以包括酰卤、酸酐、活化的酰胺、活化的酯等。适宜的反应衍生物的实例可以是酰氯，酰基叠氮化物；与下述的酸形成的混酸酐，所述酸包括：如取代磷酸(例如二烷基磷酸、苯基磷酸、二苯基磷酸、二苄基磷酸、卤代的磷酸等)、二烷基亚磷酸、亚硫酸、硫代亚硫酸、硫酸、磺酸(例如甲磺酸等)、脂肪族羧酸(例如乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、新戊酸、戊酸、异戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸等)或芳羧(例如苯甲酸等)；对称酸酐；与咪唑、4-取代咪唑、二甲基吡唑、三唑或四唑形成的活性酰胺；或活化的酯(例如氰基甲酯、甲氧基甲酯、二甲亚氨基甲基[(CH3)2+N＝CH-]酯、乙酯、炔丙酯、对硝基苯酯、2，4-二硝基苯酯、三氯苯酯、五氯苯酯、甲磺酰基苯酯、苯基偶氮苯基酯、苯基硫酯、对硝基苯硫酯、对甲苯硫酯、羰甲基硫酯、吡喃酯、吡啶酯、哌啶酯、8-喹啉基硫酯等)，或与N-羟基化合物(例如N，N-二甲基羟胺、1-羟基-2-(1H)-吡啶酮、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基临苯二甲酰亚胺、1-羟基-1H-苯并三唑等)形成的酯等。根据所使用的化合物(II)的种类，可以从中任意选择上述的反应衍生物。

[063] 化合物(II)的适宜的盐及其反应衍生物可以是与碱形成的盐如碱金属盐(例如钠盐、钾盐等)、碱土金属盐(例如钙盐、镁盐等)、铵盐、有机碱盐(例如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己胺盐、N，N′-二苄基乙二胺盐等)等，以及如化合物(I)所例举的酸加成盐。

[064] 适宜的化合物(III)的氨基反应衍生物可以包括化合物(III)与羰基化合物(如醛或酮)反应形成的席夫碱型亚胺或烯胺型互变异构体；化合物(III)与甲硅烷基化合物(如二(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、单(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、二(三甲基甲硅烷基)脲等)反应生成的甲硅烷基衍生物；化合物(III)与三氯化磷或光气反应生成的衍生物等。

[065] 化合物(III)的适宜的盐及其反应衍生物可以参见化合物(I)中所例举的例子。

[066] 反应通常在常用的溶剂中进行，所述溶剂包括：例如，水、醇(例如甲醇、乙醇)、丙酮、二噁烷、乙腈、氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶或其它任何对反应无不良影响的有机溶剂。这些常用溶剂也可以与水混合使用。

[067] 在该反应中，当化合物(II)以游离酸或其盐的形式使用时，反应最好在常用缩合剂存在下进行，所述缩合剂包括：如N，N′-二环己基碳化二亚胺；N-环己基-N′-吗啉代乙基碳化二亚胺；N-环己基-N′(4-二乙氨基环己基)碳化二亚胺；N，N′-二乙基碳化二亚胺，N，N′-二异丙基碳化二亚胺；N-乙基-N′-(3-二甲氮基丙基)碳化二亚胺；N，N′-羰基二-(2-甲基咪唑)；五亚甲基乙烯酮-N-环己亚胺；二苯基乙烯酮-N-环己亚胺；乙氧基乙炔；1-烷氧基-1-氯乙烯；亚磷酸三烷酯，多磷酸乙酯；多磷酸异丙酯；三氯氧磷(磷酰氯)；三氯化磷；磷酰叠氮二苯酯；亚硫酰氯；草酰氯；卤代甲酸低级烷酯(例如氯甲酸乙酯，氯甲酸异丙酯等)三苯基膦；2-乙基-7-羟基苯并异噁唑/盐；2-乙基-5-(间磺基苯基)异唑氢氧化物分子内/盐；1-(对氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑；所谓的Vilsmeier试剂(该试剂由N，N-二甲基甲酰胺与亚硫酰氯、光气、氯甲酸三氯甲酯、三氯氧磷、草酰氯等反应制得)；等等。

[068] 反应也可以在无机碱或有机碱存在下进行，所述碱例如碳酸氢碱金属盐、三(低级)烷胺、吡啶、N-(低级)烷基吗啉、N，N-二(低级)烷基苄胺等。

[069] 反应温度要求不严，反应通常在冷却至温热条件下进行。

[070] 步骤2

[071] 化合物(V)或其盐可以通过消去化合物(IV)或其盐的N-保护基的反应来制备。化合物(V)的适宜的盐可以参见化合物(I)中所例举的例子。

[072] 该反应按常用的方法进行，例如水解、还原等。

[073] 水解最好在碱或酸(包括路易斯酸)存在下进行。

[074] 适宜的碱可以包括无机碱和有机碱如碱金属(例如钠、钾等)碱土金属(例如镁、钙等)的氢氧化物或碳酸盐或碳酸氢盐，肼，三烷基胺(例如三甲胺、三乙胺等)，甲基吡啶，1，5-二氮杂二环[4.3.0]-壬-5-烯，1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷，1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯等。

[075] 适宜的酸可以包括有机酸(例如甲酸、乙酸、丙酸、三氯乙酸、三氟乙酸等)、无机酸(例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氯化氢、溴化氢、氟化氢等)和酸加成盐化合物(例如盐酸吡啶等)。

[076] 使用三卤代乙酸(例如三氯乙酸、三氟乙酸等)或其类似物的消去反应最好在阳离子捕集剂(例如苯甲醚、苯酚等)存在下进行。

[077] 该反应通常在溶剂中进行，所述溶剂包括例如水、醇(例如甲醇、乙醇等)、二氯甲烷、氯仿、四氯甲烷、四氢呋喃、上述溶剂的混合物或对反应无不良影响的任何其它溶剂。液态碱或酸也可用作溶剂。反应温度要求不严，通常反应在冷却至加热条件下进行。

[078] 适用于消去反应的还原方法可以包括化学还原和催化还原。

[079] 用于化学还原的适宜还原剂是金属(例如锡、锌、铁等)或金属化合物(例如氯化铬、乙酸铬等)与有机酸或无机酸(例如甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、对甲苯磺酸、盐酸、氢溴酸等)的混合物。

[080] 用于催化还原的适宜的催化剂是常用的催化剂如铂催化剂(例如铂板、海绵铂、铂黑、胶态铂、氧化铂、铂丝等)、钯催化剂(例如海绵钯、钯黑、氧化钯、钯/碳、胶态钯、钯/硫酸钡、钯/碳酸钡等)、镍催化剂(例如还原镍、氧化镍、阮内镍等)、钴催化剂(例如还原钴、阮内钴等)、铁催化剂(例如还原铁、阮内铁等)、铜催化剂(例如还原酮、阮内酮、乌尔曼铜等)等。

[081] 还原反应通常在对反应无不良影响的常用溶剂中进行，所述溶剂包括：例如水、甲醇、乙醇、丙醇、N，N-二甲基甲酰胺或它们的混合物。

[082] 此外，如果化学还原所使用的上述的酸是液态的，那么它们也可用作溶剂。此外，用于催化还原的适宜溶剂可以是上述溶剂，也可以是其它溶剂如乙醚、二噁烷、四氢呋喃等或它们的混合物。

[083] 该还原反应的反应温度要求不严，反应通常在冷却至加热条件下进行。

[084] 步骤3

[085] 目标化合物(I)或其盐可以按下述方法制备：将化合物(V)或其氨基的反应衍生物或其盐与化合物(VI)或其羧基的反应衍生物或其盐反应，必要时，消去N-保护基。

[086] 化合物(VI)的适宜的盐可以参见化合物(II)中所例举的与碱形成的盐。

[087] 进行该反应的方法与步骤1基本相同，因而该反应的反应方式和反应条件(例如，缩合剂、溶剂、反应温度等)可参见步骤1。

[088] 如果化合物(V)的咪唑基被保护，可以进一步消去化合物(V)与化合物(VI)的反应产物的N-保护基来制备目标化合物(I)。

[089] 消去反应可以采用与步骤2基本相同的方法进行，因而本反应的反应方式和反应条件(例如碱、酸、还原剂、催化剂、溶剂、反应温度等)参见步骤2。

[090] 在起始化合物(VI)中，其中有些是新化合物，可以按下列反应式所示的方法制备。

[VII]           [VIII]         [IX]或其盐          或其盐         或其盐

[091] 方法B

[092]                                  或其盐

[093] 方法C

[X]             [VIII]         [XI]或其盐          或其盐         或其盐

[094] 方法D

[XI]                           [XII]

[095]                            或其盐

[096] 方法E

[XIII]          [XII]          [IXa]或其羧基反应    或其氨基反应衍生物或其盐    衍生物或其盐其中R8是保护的羧基，

[097] R9是N-保护基，和

[098] R1、R4、R5、X、Y1和Y2各自的定义同上文。

[099] 适宜的“保护的羧基”可以是由常用的保护基保护的羧基，所述保护的羧基包括：例如低级烷氧基羰基(例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、异丙氧基羰基、丁氧基羰基、仲丁氧基羰基、异丁氧基羰基、特丁氧基羰基、戊氧基羰基、新戊氧基羰基、己氧基羰基等)、取代或未取代的芳(低级)烷氧基羰基如一或二或三苯基(低级)烷氧基羰基，所述芳基可以被硝基取代(例如苄氧基羰基、4-硝基苄氧基羰基、二苯甲氧基羰基、三苯甲氧基羰基等)等。

[100] 制备起始化合物的上述方法详细说明如下。

[101] 方法A

[102] 化合物(IX)可以按下述方法制备：将化合物(VII)或其盐与化合物(VIII)或其盐反应生成脲基。

[103] 化合物(VII)和(VIII)的适宜的盐可以参见化合物(I)所例举的盐。

[104] 该反应在能导入羰基的试剂存在下进行，所述试剂包括例如光气、卤代甲酸酯化合物(例如氯甲酸乙酯、氯甲酸三氯甲酯等)、N，N′-羰基二咪唑、羰基金属化合物(例如羰基钴、羰基镁等)、一氧化碳和催化剂(例如氯化钯等)的混合物等。

[105] 该反应通常在下述溶剂中进行，例如，二噁烷、四氢呋喃、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或对该反应无不良影响的任何其它有机溶剂。

[106] 反应温度要求不严，反应通常在冷却至加热条件下进行。

[107] 方法B

[108] 通过消去化合物(IX)的羧基保护基可以制备化合物(VI)或其盐。

[109] 化合物(VI)的适宜的盐可以参见化合物

[110] (II)所例举的与碱形成的盐。

[111] 该反应可以采用与方法1步骤2基本相同的方法进行，因而，该反应的反应方式和反应条件(例如碱、酸、还原剂、催化剂、溶剂、反应温度等)参见方法1步骤2。

[112] 方法C

[113] 化合物(XI)可以按下述方法制备：将化合物(VIII)或其盐与化合物(X)或其盐反应生成脲基。

[114] 该反应可以采用与方法A基本相同的方法进行，因而该反应的反应方式和反应条件(例如羰基导入剂、溶剂、反应温度等)参见方法A。方法D

[115] 通过化合物(IX)或其盐的N-保护基的消去反应可以制备化合物(XII)或其盐。

[116] 化合物(XII)的适宜的盐可以参见化合物(I)所例举的盐。

[117] 该反应可以采用与方法1步骤2基本相同的方法进行，因而，该反应的反应方式和反应条件(例如碱、酸、还原剂、催化剂、溶剂、反应温度等)参见方法1步骤2。

[118] 方法E

[119] 化合物(IXa)可以按下述方法制备：将化合物(XII)或其氨基反应衍生物或其盐与化合物(XIII)或其羰基反应衍生物或其盐反应。

[120] 化合物(XII)的适宜的盐可以参见化合物(I)所例举的盐。

[121] 化合物(XIII)的适宜的盐可以参见化合物(II)所例举的与碱形成的盐。

[122] 该反应可以采用与方法1步骤1基本相同的方法进行，因而，该反应的反应方式和反应条件(例如反应的衍生物、缩合剂、溶剂、反应温度等)参见方法1步骤1。

[123] 上述方法制得的化合物可以用常用的方法进行分离和提纯，例如，用研磨、重结晶、柱层析、再沉淀等方法进行。

[124] 应该意识到，由于不对称碳原子的存在，化合物(I)和其它化合物可以包括一种或多种立体异构体，所有的这些异构体及其混合物均包括在本发明范围之内。

[125] 目标化合物(I)及其药学上可接受的盐对肾素具有很强的抑制活性，并可用作降压药和治疗剂，治疗心力衰竭、肾病(例如肾衰竭、糖尿性肾病、肾小球性肾炎、肾盂肾炎、肾综合症、Bart-ter′s综合症、肾素分泌性肾瘤、肾水肿、血尿酸过多症、痛风等)、青光眼等。主要用作口服给药。

[126] 为了达到治疗目的，本发明的化合物(I)及其药学上可接受的盐可以以药用制剂的形式使用，所述控制含一种作为活性成分的所述化合物与药学上可接受的载体，例如适用于口服、非肠道或外用(局部)给药的有机或无机固体、半固体或液体赋形剂。药用制剂可以是胶襄剂、片剂、糖衣丸剂、栓剂、颗粒剂、溶液、洗剂、混悬剂、乳剂、软膏、凝胶剂等。必要时，这些制剂中可以包括辅助物质、稳定剂、湿润剂或乳化剂、缓冲剂和其它常用添加剂。

[127] 尽管化合物(I)的剂量随病人的年龄和症状而变化，但一般用约0.1mg、1mg、10mg、50mg、100mg、250mg、500mg和1000mg化合物(I)的单剂量可以有效地治疗高血压和心力衰竭。通常，每天的给药量可以在约0.1mg—1，000mg/个体之间。

[128] 为了说明目标化合物(I)的作用，一些有代表性的化合物(I)的药理试验数据表示如下：试验化合物

[129] (1)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[130] (2)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-哌啶子基羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[131] (3)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-(N-六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[132] (4)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐

[133] (5)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐

[134] (6)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[135] (7)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-(2-吗啉代羰基-乙基)氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[136] (8)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-[2-(N-二丙基氨基甲酰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[137] (9)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-[2-[N-(1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基羰基)-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[138] (10)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-2-吡啶基)乙基-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷二盐酸盐

[139] (11)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组[氨酰基]氨基-1，4-二环己基-3-羟基丁烷盐酸盐

[140] (12)(2S，3S)-2[Nα-[(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯基丙酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐

[141] (13)(2S，3S)-2-[Nα-[(2S)--2-[N-[2-(N-甲基-N-硫代吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯基丙酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐试验方法

[142] 采集预先禁服任何药物的男性志愿受试者的血浆备用。用乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)作为抗凝剂。在pH＝6.0的条件下，血浆中内源性肾素和血管紧张素原经孵育(37℃)后，按照血管紧张素I(AngI)的生成速度来测量血浆中肾素的活性。孵化混合物含250μl血浆、5μl(苯甲基)磺酰氟、30μl缓冲溶液(磷酸钠、磷酸钾，pH＝6.0)和15μl适宜浓度的试验化合物溶液、所述溶液是以50％乙醇/水为溶剂用放射免疫测定法(RIA)测量孵育90分钟后形成的AngI，所述测定法采用商标名为RENIN·RIABEAD(由Dainabot有限公司制造)的成套器材进行。样品一式两份同时孵化，每管均进行RIA测量。比较含和不含试验化合物的样品所产生的AngI的量，计算血浆肾素活性的抑制百分率。用Probit方法测定抑制50％血浆肾素活性的试验化合物浓度(IC50)。

[143] 试验结果

[144]     试验化合物    IC50(M)    (1)    2.9×10-10    (2)    1.0×10U-9    (3)    1.2×10-9    (4)    4.7×10-10    (5)    7.9×10-11    (6)    3.0×10-10    (7)    1.7×10-9    (8)    3.8×10-10    (9)    3.9×10-9    (10)    9.6×10-9    (11)    7.2×10-10    (12)    3.1×10-9    (13)    3.9×10-9

[145] 给出下列制备和实施例的目的是说明制备目标化合物(I)的优选方法，但所述化合物的制备方法并不局限于下列制备和实施例。

[146] 在下列制备和实施例中，Kieselgel 60F 254(商标名，由Merck & Co.制备)(厚度：0.25mm)用作TLC板。

[147] 制备1

[148] 向L-苯丙氨酸苄酯盐酸盐(9.46g)的无水甲苯(150ml)溶液中加入氯甲酸三氯甲酯(3.94ml)。在130℃下搅拌5小时后，真空浓缩该溶液。剩余物溶解在无水四氢呋喃(100ml)中，然后在室温下加入N-特丁氧基羰基-N，N′-二甲基乙二胺(5.55g)的无水四氢呋喃(10ml)溶液。混合物在相同温度下搅拌2小时。溶剂蒸发后，将剩余物溶解在乙酸乙酯(500ml)中，得到的溶液依次用5％盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，用无水硫酸镁于燥，然后减压浓缩。剩余物用硅胶柱层析(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1，V/V)纯化，得到油状的N-[N-[2-[N-特丁氧基羰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯(11.5g)。

[149] Rf：0.37(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1，V/V)

[150] 制备2

[151] 在冰浴冷却下，将N-[N-[2-(N-特丁氧基羰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯(11g)溶于4M氯化氢的乙酸乙酯(200ml)溶液中。在相同温度下搅拌30分钟后，真空浓缩所述溶液，得到油状的N-[N-[2-(N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯盐酸盐(10g)。

[152] Rf：0.36(10％甲醇氯仿溶液)

[153] 制备3

[154] 在室温下，向N-[N-[2-(N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯盐酸盐(1.62g)和三乙胺(1.12ml)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入N-硫代吗啉代甲酰氯(0.66g)的溶液。在相同温度下搅拌2小时后，真空浓缩所述溶液。将剩余物溶解在乙酸乙酸(50ml)中，得到的溶液依次用5％盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，然后减压浓缩。剩余物用硅胶柱层析(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1，V/V)纯化，得到油状的N-[N-[2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯(1.51g)。

[155] Rf：0.27(乙酸乙酯)

[156] 制备4

[157] 按照类似于制备3的方法制备了下述化合物。

[158] (1)N-[N-{2-[N-(六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯

[159] Rf：0.43(乙酸乙酯)

[160] (2)N-[N-[2-(N-哌啶子基羰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯

[161] Rf：0.43(乙酸乙酯)18

[162] (3)N-[N-[2-N-异丁酰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯

[163] Rf：0.47(乙酸乙酯)

[164] (4)N-[N-{2-[N-(八氢吖辛因-1-基羰基)-N-甲基氨基]乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯

[165] Rf：0.39(乙酸乙酯)

[166] (5)N-[N-[2-(N-二丙基氨基甲酰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯

[167] Rf：0.31(乙酸乙酯)

[168] (6)N-[N-[2-[N-(1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基羰基)-N-甲基氨基]-乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯

[169] Rf：0.31(乙酸乙酯)

[170] 制备5

[171] 在室温下，向N-[N-[2-[N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯(1.50g)的甲醇(30ml)溶液中加入1N氢氧化钠水溶液(6ml)。在相同温度下搅拌3小时后，真空浓缩所述的溶液。将剩余物溶解在乙酸乙酯(50ml)中，得到的溶液依次用5％盐酸和盐水洗涤，然后用无水硫酸镁干燥，减压浓缩，得到油状的N-[N-[2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯(1.14g)。

[172] Rf：0.31(氯仿∶甲醇∶乙酸＝16∶1∶1，V/V)

[173] 制备6

[174] 在室温下，3个大气压的氢气中，用10％钯-碳(146mg)氢化N-[N-{2-[N-六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯(1.46g)的甲醇(20ml)溶液1小时。将溶液过滤，然后真空浓缩，得到油状的N-[N-{2-(N-六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯(1.28g)。

[175] Rf：0.35(氯仿∶甲醇∶乙酸＝16∶1∶1，V/V)

[176] 制备7

[177] 按照类似于制备6的方法制备了下述化合物。

[178] (1)N-[N-[2-(N-哌啶子基羰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸

[179] Rf：0.36(氯仿∶甲醇∶乙酸＝16∶1∶1，V/V)

[180] (2)N-[N-[2-N-异丁酰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸Rf：0.28(氯仿∶甲醇∶乙酸＝16∶1∶1，V/V)

[181] (3)N-[N-{2-[N-(八氢吖辛因-1-基羰基)-N-甲基氨基]乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸

[182] Rf：0.25(氯仿∶甲醇＝5∶1，V/V)

[183] (4)N-[N-[2-[N-二丙基氨基甲酰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸

[184] Rf：0.29(氯仿∶甲醇＝5∶1，V/V)

[185] (5)N-[N-[2-[N-(1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基羰基)-N-甲基氨基]乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸

[186] Rf：0.27(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[187] (6)N-[N-(2-吡啶基)乙基-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸

[188] Rf：0.53(氯仿∶甲醇∶乙酸＝8∶2∶1，V/V)

[189] 制备8

[190] 在-78℃下，向N-特丁氧基羰基-L-环己基丙氨醛(1.36g)的无水四氢呋喃(20ml)溶液中滴加异丁基溴化镁溶液，所述溶液由异丁基溴(5.32g)和镁(1.04g)在无水四氢呋喃(25ml)中制备。滴加完毕后，让反应混合物在2.5小时内升温至室温，然后将其倒入饱和氯化铵水溶液(50ml)中。得到的浆液用乙酸乙酯(20ml×2)提取，合并乙酸乙酯提取液，水洗，用硫酸镁干燥，蒸发，残留物于硅胶(100g)柱上层析，用10％乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱，得到(2S，3S)-2-特丁氧基羰基氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷(396mg)油状物。

[191] Rf：0.42(苯∶乙酸乙酯＝4∶1，V/V)

[192] 制备9

[193] 按照类似于制备8的方法制备了下述化合物。

[194] (1)(2S，3S)-2-特丁氧基羰基氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷

[195] Rf：0.46(乙酸乙酸∶苯＝1∶4，V，V)

[196] (2)(2S，3S)-2-特丁氧基羰基氨基-1-环己基-3-羟基-5，5-二甲基己烷

[197] Rf：0.46(苯∶乙酸乙酯＝4∶1，V/V)

[198] (3)(2S，3S)-2-特丁氧基羰基氨基-1，4-二环己基-3-羟基丁烷

[199] Rf：0.46(苯∶乙酸乙酯＝4∶1，V/V)

[200] (4)(2S，3S)-2-特丁氧基羰基氨基-1-环己基-5，5-二苯基-3-羟基戊烷

[201] Rf：0.52(正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1，V/V)20

[202] 制备10

[203] 在0℃下，将(2S，3S)-2-特丁氧基羰基氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷(120mg)的三氟乙酸(3ml)溶液搅拌30分钟。

[204] 蒸发掉溶剂后，将剩余物溶解于乙酸乙酯(10ml)中。溶液用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥，真空蒸发得到(2S，3S)-2-氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷(82mg)油状物。

[205] Rf：0.30(氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯＝16∶1∶1，V/V)

[206] 制备11

[207] 按照类似于制备10的方法制备了下述化合物：

[208] (1)(2S，3S)-2-氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷

[209] Rf：0.30(氯仿∶甲醇∶乙酸＝16∶1∶1，V/V)

[210] (2)(2S，3S)-2-氨基-1-环己基-3-羟基-5，5-二甲基己烷

[211] Rf：0.13(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[212] (3)(2S，3S)-2-氨基-1，4-二环己基-3-羟基丁烷

[213] Rf：0.33(氯仿∶甲醇∶乙酸＝16∶1∶1，V/V)

[214] (4)(2S，3S)-2-氨基-3-羟基-1，5，5-三环己基戊烷

[215] Rf：0.15(苯∶乙酸乙酯∶乙酸＝20∶20∶1，V/V)

[216] (5)(2S，3S)-2-氨基-1-环己基-5，5-二苯基-3-羟基戊烷

[217] Rf：0.05(苯∶乙酸乙酯∶乙酸＝20∶20∶1，V/V)

[218] 制备12

[219] 在0℃下，向Nα-特丁氧基羰基-Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酸(195mg)和(2S，3S)-2-氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷(82mg)的无水二氯甲烷(10ml)溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺(72mg)。混合物在0℃下搅拌3小时。溶剂蒸发后，将剩余物溶解在乙酸乙酯(20ml)中，然后溶液用10％柠檬酸溶液、饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤，用硫酸镁干燥，然后减压浓缩。剩余物用硅胶柱层析(乙酯∶正己烷＝2∶3，V/V，作为洗脱液)纯化，得到(2S，3S)-2-(Nα-特丁氧基羰基-Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷(166mg)非晶形粉末。

[220] Rf：0.29(乙酸乙酯∶正己烷＝3∶2，V/V)

[221] 制备13

[222] 按照类似于制备10的方法制备了下述化合物。

[223] (1)(2S，3S)-2-(Nα-特丁氧基羰基-Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷

[224] Rf：0.36(乙酸乙酯∶正己烷＝3∶2，V/V)

[225] (2)(2S，3S)-2-(Nα-特丁氧基羰基-Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-3-羟基-5，5-二甲基己烷

[226] Rf：0.33(乙酸乙酯∶正己烷＝3∶2，V/V)

[227] (3)(2S，3S)-2-(Nα-特丁氧基羰基-Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1，4-二环己基-3-羟基丁烷

[228] Rf：0.35(乙酸乙酯∶正己烷＝3∶2，V/V)

[229] (4)(2S，3S)-2-(Nα-特丁氧基羰基-Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-3-羟基-1，5，5-三环己基戊烷

[230] Rf：0.64(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1，V/V)

[231] (5)(2S，3S)-2-(Nα-特丁氧基羰基-Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-5，5-二苯基-3-羟基戊烷

[232] Rf：0.5(正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1，V/V)

[233] 制备14

[234] 在0℃下，将(2S，3S)-2-(Nα-特丁氧基羰基-Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷(160mg)三氟乙酸(5ml)溶液搅拌2小时。将混合物真空浓缩后，剩余物溶解在乙酸乙酯(20ml)中，得到的溶液用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥，真空浓缩，得到(2S，3S)-2-(Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷(134mg)非晶形粉末。

[235] Rf：0.44(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[236] 制备15

[237] 22

[238] 按照类似于制备14的方法制备了下述化合物。

[239] (1)(2S，3S)-2-(Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷

[240] Rf：0.48(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[241] (2)(2S，3S)-2-(Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-3-羟基-5，5-二甲基己烷

[242] Rf：0.55(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[243] (3)(2S，3S)-2-(Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1，4-二环己基-3-羟基丁烷

[244] Rf：0.44(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[245] (4)(2S，3S)-2-(Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-3-羟基-1，5，5-三环己基戊烷

[246] Rf：0.71(氯仿∶甲醇＝9∶1，V/V)

[247] (5)(2S，3S)-2-(Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-5，5-二苯基-3-羟基戊烷

[248] Rf：0.68(氯仿∶甲醇＝9∶1，V/V)

[249] 制备16

[250] 在0℃下，将N-特丁氧基羰基-N，N′-二甲基乙二胺(200mg)加入硫代吗啉代甲酰氯(228mg)和三乙胺(123mg)的二氯甲烷(10ml)溶液中。将混合物在室温下搅拌30分钟，真空蒸发溶剂。将剩余物溶于乙酸乙酯中，得到的溶液依次用0.6N盐水、水、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥，减压浓缩，得到N-特丁氧基羰基-N′-硫代吗啉代羰基-N，N′-二甲基乙二胺(376mg)油状物。

[251] Rf：0.43(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[252] 制备17

[253] 在冰浴冷却下，将N-特丁氧基羰基-N′-硫代吗啉代羰基-N，N′-二甲基乙二胺(4.92g)溶于4N氯化氢的乙酸乙酯(60ml)溶液中，在室温下搅拌30分钟后，真空浓缩得到的溶液，得到N-硫代吗啉代羰基-N，N′二甲基乙二胺盐酸盐(3.93g)油状物。

[254] Rf：0.25(氯仿∶甲醇∶乙酸＝8∶1∶1，V/V)

[255] 制备18

[256] 将二碳酸二特丁脂(3.57g)的二氯甲烷(20ml)溶液滴加到2-(2-氨基乙基)吡啶(2g)的二氯甲烷(40ml)溶液中。混合物在室温下搅拌2小时，然后真空蒸发掉溶剂。将剩余物溶于乙酸乙酯(60ml)中，然后依次用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥，然后减压浓缩。剩余固体用正己烷洗涤，得2-[2-(N-特丁氧基羟基氨基)乙基]吡啶(3.29g)黄色结晶。

[257] Rf：0.52(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[258] 制备19

[259] 在0℃下，将2-[2-(N-特丁氧基羰基氨基)乙基]-吡啶(1.8g)的N，N-二甲基甲酰胺(7ml)溶液滴加到氢化钠(0.39g)的N，N-二甲基甲酰胺(7ml)混悬液中。混合物在0℃下搅拌1小时。在室温下搅拌2小时，然后将混合物倒入冰水中，加入氯化钠使之饱和，用乙酸乙酯提取3次。合并有机层，依次用饱和硫代硫酸钠、饱和碳酸氢钠和饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，减压浓缩。剩余物用化硅胶层析(乙酸乙酯∶正己烷＝3∶1，V/V，作为洗脱液)纯化，得到2-[2-(N-特丁氧基羰基-N-甲氨基)乙基]吡啶(1.47g)油状物。

[260] 制备20

[261] 在0℃下，向N-硫代吗啉代羟基-N，N′-二甲基乙二胺(3.93g)和三乙胺(1.57g)的乙酸乙酯(200ml)溶液中加入(1S)-1-苄氧基羰基-2-苯基乙基异氰酸酯(3.63g)的溶液，后者由L-苯丙氨酸苄酯与三氯甲基氯甲酸酯反应制得。室温下搅拌30分钟后，溶液依次用5％盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。剩余物用硅胶柱层析(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1至1∶0，V/V)纯化，得到N-[N-[2-(N-硫代吗啉代羟基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯(4.52g)油状物。

[262] Rf：0.27(乙酸乙酯)

[263] 制备21

[264] 在0℃下，将4N氯化氢的乙酸乙酯(5ml)溶液加入2-[2-(N-特丁氧基羰基-N-甲基氨基)乙基]吡啶中。溶液在0℃下搅拌1小时，然后减压浓缩。将剩余物溶在二氯甲烷(10ml)中。在0℃下，加入三乙胺(304mg)和(1S)-1-苄氧基羰基-2-苯基乙基异氰酸酯(281mg)(由L-苯丙氨酸苄酯与三氯甲基氯甲酸酯反应制得)。溶液在相同温度下搅拌1小时，然后真空蒸发溶剂。将剩余物溶解在乙酸乙酯中，得到的溶液依次用10％柠檬酸水溶液、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，减压浓缩。得到N-[N-(2-吡啶基)乙基-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸苄酯(400mg)油状物。

[265] Rf：0.50(氯仿∶甲醇＝20∶1，V/V)

[266] 制备22

[267] 在0℃下，向(2S)-2-[N-[2-(N-特丁氧基羰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯基丙酸苄酸(5.40g)的乙酸乙酯(50ml)溶液中加入4N氯化氢的乙酸乙酯(50ml)溶液。得到的溶液在0℃下搅拌1小时，然后真空蒸发掉溶剂，得到(2S)-2-[N-[2-(N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯基丙酸苄酯盐酸盐(4.70g)固体。

[268] Rf：0.23(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[269] 制备23

[270] 在0℃下，向(2S)-2-[N-(2-(N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯基丙酸苄酯盐酸盐(300mg)和三乙胺(153mg)的二氯甲烷(5ml)溶液中加入硫代吗啉代甲酰氯(129mg)。得到的溶液在室温下搅拌2小时，真空蒸发掉溶剂。将剩余物溶于乙酸乙酯中，然后依次用0.5N盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥，然后减压浓缩。剩余物用硅胶柱层析(乙酸乙酯∶正己烷＝3∶1，V/V，作为洗脱液)纯化，得到(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-硫代吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯基丙酸苄酯(287mg)油状物。

[271] Rf：0.46(乙酸乙酯)

[272] 制备24

[273] 按照类似于制备23的方法制备了下述化合物。

[274] (2S)-2-[N-[2-{N-六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基}乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酸苄酯

[275] Rf：0.42(乙酸乙酯)

[276] 制备25

[277] 向(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-硫代吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯基丙酸苄酯(0.95g)和甲酸按(2g)的溶液中加入10％钯-碳(0.5g)，然后该溶液在室温下搅拌1小时。滤掉催化剂后，真空蒸发掉溶剂。将剩余物溶于乙酸乙酯中，水洗，用硫酸镁干燥，减压浓缩得到(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-硫代吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯基丙酸(548mg)油状物。

[278] Rf：0.56(氯仿∶甲醇∶乙酸＝16∶1∶1，V/V)

[279] 制备26

[280] 在室温下，在3个大气压的氢气中，用10％钯-碳(0.2g)氢化(2S)-2-[N-[2-{N-(六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基}乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯基丙酸苄酯(1.43g)的甲醇(20ml)1小时。过滤溶液，然后真空浓缩，得到(2S)-2-[N-[2-{N-(六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基}-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯基(丙酸(1.09g)油状物。

[281] Rf：0.44(氯仿∶甲醇∶乙酸＝16∶1∶1，V/V)

[282] 制备27

[283] 在37℃下，在3个大气压的氢气中，用氧化铂(0.2g)氢化(2S，3S)-2-特丁氧基羰基氨基-1-环己基-5，5-二苯基-3-羟基戊烷(0.74g)的乙酸(50ml)溶液2小时。然后过滤，真空浓缩，得到(2S，3S)-2-特丁氧基羰基氨基-3-羟基-1，5，5-三环己基戊烷(753mg)油状物。

[284] Rf：0.72(正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1，V/V)

[285] 实施例1

[286] 在0℃下，向N-[N-[2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸(292mg)和(2S，3S)-2-(Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷(346mg)的二氯甲烷(7ml)溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(150mg)。在相同温度下搅拌5小时后，真空浓缩所述溶液。将剩余物溶于乙酸乙酯(20ml)中，得到的溶液依次用5％盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和盐水，用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。将剩余物溶于N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中，然后在室温下加入盐酸吡啶(751mg)。混合物在相同温度下搅拌2小时。溶剂蒸发后，将剩余物溶于乙酸乙酯(20ml)中。溶液依次用盐水、1M碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，然后减压浓缩。剩余物用硅胶薄层层析(10％甲醇-氯仿)纯化，得到(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷(300mg)非晶型粉末。

[287] Rf：0.38(10％甲醇-氯仿)

[288] FAB-MS：769(M＋H)

[289] 实施例2

[290] 按类似于实施例1的方法制备了下述化合物。

[291] (1)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷

[292] Rf：(0.30(10％甲醇—氯仿)

[293] FAB—MS：765(M＋H)+

[294] (2)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-哌啶子基羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷

[295] Bf：0.40(10％甲醇—氯仿)

[296] FAB—MS：751(M＋H)+

[297] (3)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(异丁酰基-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷。

[298] Rf：0.37(10％甲醇—氯仿)

[299] FAB—MS：710(M＋H)+

[300] (4)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-[N-代中吗啉羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷

[301] Rf：0.33(10％甲醇—氯仿)

[302] FAB—MS：739(M＋H)+

[303] (5)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-[N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷

[304] Rf：0.36(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[305] FAB—MS：755(M＋H)+

[306] (6)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷

[307] Rf：0.53(10％甲醇—氯仿)

[308] FAB—MS：751(M＋H)+

[309] (7)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(八氢吖辛因-1-基羰基)-N-甲基氨基]乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷

[310] Rf：0.54(10％甲醇—氯仿)

[311] FAB—MS：765(M＋H)+

[312] (8)(2S，3S)-2—[Nα-[N-[N-{2-[N-(异丁酰基-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷。

[313] Rf：0.64(10％甲醇—氯仿)

[314] FAB—MS：696(M＋H)+

[315] (9)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-[N-(硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷。

[316] Rf：0.40(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[317] FAB—MS：783(M＋H)+

[318] (10)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-[N-(吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷。

[319] Rf：0.34(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[320] FAB—MS：767(M＋H)+

[321] (11)(2s，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(异丁酰基-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷

[322] Rf：0.36(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[323] FAB—MS：724(M＋H)+

[324] (12)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷

[325] Rf：0.42(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[326] FAB—MS：779(M＋H)+

[327] (13)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(八氢吖辛因-1-基羰基)-N-甲基氨基]乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷

[328] Rf：0.43(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[329] FAB—MS：793(M＋H)+

[330] (14)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-[(N-硫代吗啉代羟基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5，5-甲基己烷。

[331] Rf：0.41(氨仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[332] FAB—MS：769(M＋H)+

[333] (15)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-(2-吗啉代羰基乙基)氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羰基-5-乙基庚烷

[334] Rf：0.37(氯仿∶甲醇∶乙酸＝8∶1∶1，V/V)

[335] FAB—MS：738(M＋H)+

[336] (16)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-吗啉代羰基乙基)氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷

[337] Rf：0.33(氯仿∶甲醇∶乙酸＝8∶1∶1，V/V)

[338] FAB—MS：710(M＋H)+

[339] (17)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(八氢吖辛因-1-基羰基)-N-甲基氨基]乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷

[340] Rf：0.47(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[341] FAB—MS：779(M＋H)+

[342] (18)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-[2-(N-二丙基氨基甲酰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷

[343] Rf：0.44(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[344] (19)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-[2-[N-(1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基羰基)-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷

[345] Rf：0.43(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[346] (20)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-(2-吡啶基)乙基-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷

[347] Rf：0.35(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[348] (21)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1，4-二环己基-3-羟基丁烷

[349] Rf：0.38(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[350] (22)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-3-羟基-1，5，5-三环己基戊烷

[351] Rf：0.5(氯仿∶甲醇＝9∶1，V/V)

[352] (23)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-5，5-二苯基-3-羟基戊烷

[353] Rf：0.4(氯仿∶甲醇＝9∶1，V/V)实施例3

[354] 在0℃2下，向(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷(300mg)的乙醇(3ml)溶液中加入4M氯化氢乙酸乙酯(0.100ml)溶液。在相同温度下搅拌10分钟后，真空浓缩，得到(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐(310mg)，非晶形粉末。

[355] Bf：0.38(10％甲醇—氯仿)

[356] 实施例4

[357] 按照类似于实施例3的方法制备了下述化合物。

[358] (1)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-(N-六氢-1H-吖庚因-1-基羰基]-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[359] Bf：0.40(10％甲醇—氯仿)

[360] (2)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-[N-哌啶子基羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[361] Bf：0.30(10％甲醇—氯仿)

[362] (3)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-(N-(异丁酰基-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[363] Bf：0.37(10％甲醇—氯仿)

[364] (4)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐

[365] Bf：0.33(10％甲醇—氯仿)

[366] (5)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐

[367] Bf：0.36(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[368] (6)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-(N-(六氢-1H-吖庚因-1-基羰基]-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐

[369] Bf：0.53(10％甲醇—氯仿)

[370] (7)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(八氢吖辛因-1-基羰基]-N-甲基氨基]乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐

[371] Bf：0.54(10％甲醇—氯仿)

[372] (8)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(异丁酰基-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐

[373] Bf：0.64(10％甲醇—氯仿)

[374] (9)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[375] Bf：0.40氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[376] (10)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[377] Bf：0.34(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[378] (11)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(异丁酰基-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[379] Rf：0.36(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[380] (12)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基)乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[381] Rf：0.42(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[382] (13)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(八氢吖辛因-1-基羰基)-N-甲基氨基]乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[383] Rf：0.43(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[384] (14)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5，5-甲基己烷盐酸盐

[385] Rf：0.41(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[386] (15)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-(2-吗啉代羰基乙基)氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[387] Rf：0.37(氯仿∶甲醇∶乙酸＝8∶1∶1，V/V)

[388] (16)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[-N-甲基-N-{2-吗啉代羰基乙基)氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐

[389] Rf：0.33(氯仿∶甲醇∶乙酸＝8∶1∶1，V/V)

[390] (17)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-{2-[N-(八氢吖辛因-1-基羰基)-N-甲基氨基]乙基}-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[391] Rf：0.47(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[392] (18)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-[2-(N-二丙基氨基甲酰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[393] Rf：0.44(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[394] (19)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-[2-[N-(1，2，3，4-四氢-2-异喹啉基羰基)-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷盐酸盐

[395] Rf：0.43(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[396] (20)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-(2-吡啶基)乙基-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-6-甲基庚烷二盐酸盐

[397] Rf：0.35(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)32

[398] (21)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1，4-二环己基-3-羟基丁烷盐酸盐

[399] Rf：0.38(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[400] (22)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-硫代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-3-羟基-1，5，5-三环己基戊烷盐酸盐

[401] Rf：0.5(氯仿∶甲醇＝9∶1，V/V)

[402] (23)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-碱代吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-5，5-二苯基-3-羟基戊烷盐酸盐

[403] Rf：0.4(氯仿∶甲醇＝9∶1，V/V)

[404] (24)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷硫酸盐

[405] Rf：0.33(10％甲醇-氯仿)

[406] (25)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷的甲磺酸盐

[407] Rf：0.33(10％甲醇-氯仿)

[408] (26)(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷苯磺酸盐

[409] Rf：0.33(10％甲醇-氯仿)

[410] 实施例5

[411] 在0℃下，向(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酸(216mg)的二氯甲烷(3ml)溶液中加入草酰氯(0.053ml)。在相同温度下搅拌30分钟后，0℃下，将所述溶液加入(2S，3S)-2-(Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷(250mg)和N-甲基吗啉(122mg)的二氯甲烷溶液中。在相同温度下搅拌30分钟后，真空浓缩该溶液。将剩余物溶解在乙酸乙酯中，得到的溶液依次用5％盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。将剩余物溶解在N，N-二甲基甲酰胺(5m1)中。在室温下，向该溶液中加入盐酸吡啶，混合物在相同温度下搅拌5小时。溶剂蒸发后，将剩余物溶解在乙酸乙酯中。得到的溶液依次用饱和氯化钠溶液、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，用水硫酸镁干燥，减压浓缩。剩余物用硅胶薄板层析(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)纯化，得到(2S，3S)-2-[Nα-[(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷(57.9mg)非晶型粉末。

[412] Rf：0.28(甲醇∶氯仿＝1∶10，V/V)

[413] 实施例6    

[414] 按照类似于实施例5的方法制备了下述化合物。

[415] (1)(2S，3S)-2-[Nα-[(2S)-2-[N-[2(N-甲基-N-吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷

[416] Rf：0.40(10％甲醇-氯仿)

[417] (2)(2S，3S)-2-[Nα[(2S)-2-[N-[2-(N-异丁酰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷

[418] Rf：0.32(甲醇∶氯仿＝1∶10，V/V)

[419] (3)(2S，3S)-2-[Nα-[(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-硫代吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷

[420] Rf：0.31(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[421] (4)(2S，3S)-[Nα-[(2S)-2-[N-[2-{N-(六氢-1H-1庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基}乙基}-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷

[422] Rf：0.34(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[423] 实施例7

[424] 在0℃下，向(2S，3S)-2-[Nα-[(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷(52.9mg)的乙醇(1ml)溶液中加入4N氯化氢的乙醇(17.2μl)溶液。在相同温度下搅拌5分钟后，将溶液减压浓缩，得到(2S，3S)-2-[Nα-[(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐(55.4mg)非晶形粉末。

[425] Rf：0.28(甲醇∶氯仿＝1∶10，V/V)

[426] 实施例8

[427] 按照类似于实施例7的方法制备了下述化合物。

[428] (1)(2S，3S)-2-[Nα-[(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐

[429] Rf：0.40(10％甲醇-氯仿)

[430] (2)(2S，3S)-2-[Nα-[(2S)-2-[N-[2-(N-异丁酰基-N-甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[431] Rf：0.32(甲醇∶氯仿＝1∶10，V/V)

[432] (3)(2S，3S)-2-[Nα-[(2S)-2-[N-[2-(N-甲基-N-硫代吗啉代羰基氨基)乙基]-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[433] Rf：0.31(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[434] (4)(2S，3S)-[Nα-[(2S)-2-[N-[2-{N-(六氢-1H-吖庚因-1-基羰基)-N-甲基氨基}乙基}-N-甲基氨基羰基]氧基-3-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-乙基庚烷盐酸盐

[435] Rf：0.34(氯仿∶甲醇＝10∶1，V/V)

[436] 实施例9

[437] 在0℃下，向N-[N-[2-(N-吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基-N-甲基氨基羰基]-L-苯丙氨酸(166mg)和(2S，3S)，-2-(Nα-甲基-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷(200mg)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(89mg)。得到的混合物在相同温度下搅拌5小时。溶剂蒸发后，将剩余物溶解在乙酸乙酯(20ml)中，得到的溶液依次用5％盐酸、1M碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，减压浓缩。将剩余物溶于N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中，然后在室温下，将盐酸吡啶(446mg)加入其中。在相同温度下将混合物搅拌2小时。溶剂挥发后，将剩余物溶于乙酸乙酯(20ml)中，得到的溶液用1M碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，减压浓缩。剩余价物用硅胶薄层层析(氯仿∶甲醇＝9∶1，V/V)纯化，得到(2S，3S)-2-[Nα-[N-[-N-甲基-N-{2--(N-吗啉代羰基)-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷(210mg)非晶型粉末。

[438] Rf：0.33(10％甲醇-氯仿)

[439] FAB-MS：739(M＋H)+

[440] 实施例10

[441] 在0℃下，向(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷(210mg)的乙醇(10ml)溶液中加入4M氯化氢的乙酸乙酯(71μl)溶液。在相同温度下搅拌5分钟后，将该溶液减压浓缩，得到(2S，3S)-2-[Nα-[N-[N-甲基-N-{2-(N-吗啉代羰基-N-甲基氨基)乙基}氨基羰基]-L-苯丙氨酰基]-Nα-甲基-L-组氨酰基]氨基-1-环己基-3-羟基-5-甲基己烷盐酸盐(216mg)非晶形粉末。

[442] Rf：0.33(10％甲醇-氯仿)

[443]                                勘误表

[444] 文件名称 页行   补正前    补正后说明书 1 5 6 8 9 10 17 28 31 33 34 46 47 48 19 20 2 23 13 4 9 11 18 19 22 2 8 17 4 6 13 11 12 190301893—6个1—2个氧丁氧基无机硫代亚硫酸乙酯羰甲基/盐！唑；内/盐控制乙酯第8行后漏一句酸按甲醇(20ml)甲基氨基}-用水(2S，3S)-1庚因(2S，3S)-03001893—6元1—2个氧和1—3氮特丁氧基无机酸硫代硫酸乙烯酯羧甲基鎓盐噁内噁盐制剂乙酸乙酯补在第9行酸铵甲醇(20ml)溶液甲基氨基)乙基]-用无水(2S，3S)-2-吖庚因(2S，3S)-2-