1.一种产生具有以下结构的化合物1的方法：
该方法包括：
使罗汉果苷IIIE与能够催化从罗汉果苷IIIE产生化合物1的第一酶接触。
2.如权利要求1所述的方法，其中，使罗汉果苷IIIE与第一酶接触包括使罗汉果苷IIIE与包含编码该第一酶的第一基因的重组宿主细胞接触。
3.如权利要求2所述的方法，其中，所述第一基因与所述重组宿主细胞是异源的。
4.如权利要求2或3所述的方法，其中罗汉果苷IIIE存在于所述重组宿主细胞中和/或由所述重组宿主细胞产生。
5.如权利要求2-4中任一项所述的方法，包括在表达第一酶的条件下在培养基中培养
该重组宿主细胞。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中，所述第一酶是UDP糖基转移酶、环麦芽糊精葡聚糖转移酶(CGTases)、糖基转移酶、葡聚糖蔗糖酶、纤维素酶、β-葡糖苷酶、淀粉酶、转葡糖苷酶、果胶酶和葡聚糖酶中的一种或多种。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中，所述第一酶是CGTase。
8.如权利要求7所述的方法，其中，所述CGTase包含与SEQ ID NO:1、3、78-101、148和
154中任何一者的序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
9.如权利要求7所述的方法，其中，所述CGTase包含SEQ ID NO:1、3、78-101、148和154中任何一者的氨基酸序列。
10.如权利要求7所述的方法，其中，所述CGTase由SEQ ID NO:1、3、78-101或154的氨基酸序列组成。
11.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中，所述第一酶为葡聚糖蔗糖酶。
12.如权利要求11所述的方法，其中所述葡聚糖蔗糖酶包含与SEQ ID NO:2、103、106-
110、156、159-162和896中所示任一序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
13.如权利要求11所述的方法，其中所述葡聚糖蔗糖酶由与SEQ ID NO:104、105、157、
158和895中任何一者具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
14.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述第一酶是转葡糖苷酶。
15.如权利要求14所述的方法，其中所述转葡糖苷酶包含与SEQ ID NO:163-291和723
中任何一者的序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
16.如权利要求14所述的方法，其中所述转葡糖苷酶包含SEQ ID NO:163-291和723中
任何一者的氨基酸序列。
17.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中，所述第一酶是β-葡糖苷酶。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述β-葡糖苷酶包含与SEQ ID NO:102、292、354-
374和678-741中任何一者的序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
19.如权利要求1-18中任一项所述的方法，其中包括将罗汉果苷IIA与能够催化从罗汉
果苷IIA产生罗汉果苷IIIE的第二酶接触。
20.如权利要求19所述的方法，其中将罗汉果苷IIA与第二酶接触包括将罗汉果苷IIA
与重组宿主细胞接触以产生罗汉果苷IIIE，并且其中所述重组宿主细胞包含编码所述第二酶的第二基因。
21.如权利要求20所述的方法，其中罗汉果苷IIA由所述重组宿主细胞产生和/或存在
于所述重组宿主细胞中。
22.如权利要求20或21所述的方法，其中第二酶是UDP糖基转移酶、CGTase、糖基转移
酶、葡聚糖蔗糖酶、纤维素酶、β--葡糖苷酶、淀粉酶、转葡糖苷酶、果胶酶和葡聚糖酶(中的一种或多种。
23.如权利要求22所述的方法，其中第二酶是尿苷二磷酸-葡萄糖基转移酶(UGT)。
24.如权利要求23所述的方法，其中所述UGT是UGT73C3(SEQ ID NO:4)、UGT73C6(SEQ 
ID NO:5)、UGT85C2(SEQ ID NO:6)、UGT73C5(SEQ ID NO:7)、UGT73E1(SEQ ID NO:8)、UGT98(SEQ ID NO:9或407)、UGT1576(SEQ ID NO:15)、UGT SK98(SEQ ID NO:16)、UGT430(SEQ ID NO:17)、UGT1697(SEQ ID NO:NOT：18)、UGT11789(SEQ ID NO:19)，或包含与SEQ ID NO:4-
9、15-19、125、126、128、129、293-307、407、409、411、413、439、441和444中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
25.如权利要求24所述的方法，其中所述UGT由包含与UGT1495(SEQ ID NO:10)、
UGT1817(SEQ ID NO:11)、UGT5914(SEQ ID NO:12)、UGT8468(SEQ ID NO:13)、UGT10391(SEQ ID NO:14)和SEQ ID NO:116-124、127、130、408、410、412、414、440、442、443和445中所示任一序列具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
26.如权利要求1-25中任一项所述的方法，其中包括使罗汉果醇与一种或多种能够催
化从罗汉果醇产生罗汉果苷IIIE的酶接触。
27.如权利要求2-26中任一项所述的方法，其中使罗汉果醇与一种或多种能够催化从
罗汉果醇产生罗汉果苷IIE和/或IIIE的酶接触包括使罗汉果醇与重组宿主细胞接触以产生罗汉果苷IIE和/或IIIE，其中所述重组宿主细胞包含一种或多种基因，其编码一种或多种能够催化从罗汉果醇产生罗汉果苷IIE和/或IIIE的酶。
28.如权利要求27所述的方法，其中所述罗汉果醇由所述重组宿主细胞产生和/或存在
于所述重组宿主细胞中。
29.如权利要求27-28中任一项所述的方法，其中所述一种或多种能够催化从罗汉果醇
产生罗汉果苷IIE和/或IIIE的酶中的至少一种包含与SEQ ID NO:315、316、420、422、424、
426、430、431、446、871、845-949和951-1012中任何一者的序列具有至少70％序列同一性的序列，或者由与SEQ ID NO:315、316、420、422、424、426、430、431、446、871、845-949和951-
1012中任何一者的序列具有至少70％序列同一性的序列编码。
30.如权利要求27-29中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种酶包括UDP糖基转移酶、CGTase、糖基转移酶、葡聚糖蔗糖酶、纤维素酶、β-葡糖苷酶、淀粉酶、转葡糖苷酶、果胶酶和葡聚糖酶中的一种或多种。
31.如权利要求27-30中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种酶中的至少一种是
尿苷二磷酸-葡萄糖基转移酶(UGT)。
32.如权利要求31所述的方法，其中所述UGT是UGT73C3、UGT73C6、85C2、UGT73C5、
UGT73E1、UGT98、UGT1495、UGT1817、UGT5914、UGT8468、UGT10391、UGT1576、UGT SK98、UGT430、UGT1697或UGT11789，或包含与SEQ ID NO：4-9、15-19、125、126、128、129、293-307、
405、406、407、409、411、413、439、441和444中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
33.如权利要求1-32中任一项所述的方法，其包括使罗汉果苷化合物与一种或多种能
够催化从罗汉果苷化合物产生罗汉果苷IIIE以产生罗汉果苷IIIE的酶接触，其中所述罗汉果苷化合物是罗汉果苷IA1、罗汉果苷IE1、罗汉果苷IIA1、罗汉果苷IIE、罗汉果苷IIA、罗汉果苷IIIA1、罗汉果苷IIIA2、罗汉果苷III、罗汉果苷IV、罗汉果苷IVA、罗汉果苷V和赛门苷中的一种或多种。
34.如权利要求33所述的方法，其中使罗汉果苷化合物与一种或多种能够催化从罗汉
果苷化合物产生罗汉果苷IIIE以产生罗汉果苷IIIE的酶接触包括使罗汉果苷化合物与重组宿主细胞接触，其中所述重组宿主细胞包括一种或多种编码一种或多种能够催化从罗汉果苷化合物产生罗汉果IIIE的酶的基因。
35.如权利要求34所述的方法，其中所述罗汉果苷化合物由所述重组宿主细胞产生和/
或存在于所述重组宿主细胞中。
36.权如利要求33-35中任一项所述的方法，其中所述一种或多种能够催化从所述罗汉
果苷化合物产生罗汉果苷IIIE的酶包括UDP糖基转移酶、CGTase、糖基转移酶、葡聚糖蔗糖酶、纤维素酶、β-葡糖苷酶、淀粉酶、转葡糖苷酶、果胶酶和葡聚糖酶中的一种或多种。
37.如权利要求33-36中任一项所述的方法，其中所述罗汉果苷化合物是罗汉果苷IIE。
38.如权利要求33-37中任一项所述的方法，其中所述一种或多种能够催化由所述罗汉
果苷化合物产生罗汉果苷IIIE的酶包含与SEQ ID NO:1、3、78-101、106-109、147、154、163-
303、405、411、354-405、447-723、770、776和782中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
39.如权利要求33-38中任一项所述的方法，其中所述罗汉果苷化合物是罗汉果苷IIA
或罗汉果苷IIE，并且其中与一种或多种酶的接触产生了罗汉果苷IIIA、罗汉果苷IVE和罗汉果苷V中的一种或多种。
40.如权利要求33-37中任一项所述的方法，其中所述一种或多种酶包含SEQ ID NO:
304、405、411、872、874、978、880、882、884、886、886、888、890、892、894和896中任何一者所示的氨基酸。
41.如权利要求33-37中任一项所述的方法，其中所述一种或多种酶由SEQ ID NO:305、
406、412、873、875、877、879、881、883、885、887、889、891、893和895中任何一者所示的序列编码。
42.如权利要求2-41中任一项所述的方法，包括使罗汉果苷IA1与重组宿主细胞接触，
其中所述重组宿主细胞包含编码UGT98或UGT SK98酶的基因。
43.如权利要求42所述的方法，其中所述UGT98或UGT SK98酶包含与SEQ ID NO:9、407、
16或306具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
44.如权利要求42所述的方法，其中所述UGT98由SEQ ID NO:307所示的序列编码。
45.如权利要求42-44中任一项所述的方法，其中所述接触导致在所述细胞中产生罗汉
果苷IIA。
46.如权利要求2-45中任一项所述的方法，其中所述方法包括使11-羟基-24,25环氧葫
芦二烯醇与所述重组宿主细胞接触，其中所述重组宿主细胞包含编码环氧化物水解酶的第三基因。
47.如权利要求46所述的方法，其中所述11-羟基-24,25环氧葫芦二烯醇存在于所述重
组宿主细胞中和/或由所述重组宿主细胞产生。
48.如权利要求2-47中任一项所述的方法，其中所述方法包括使11-羟基-葫芦二烯醇
与所述重组宿主细胞接触，其中所述重组宿主细胞包含编码细胞色素P450或环氧化物水解酶的第四基因。
49.如权利要求48所述的方法，其中所述11-羟基-葫芦二烯醇由所述重组宿主细胞产
生和/或存在于所述重组宿主细胞中。
50.如权利要求1-49中任一项所述的方法，其中所述方法包括使3,24,25-三羟基葫芦
二烯醇与所述重组宿主细胞接触，其中所述重组宿主细胞包含编码细胞色素P450的第五基因。
51.如权利要求50所述的方法，其中所述3,24,25-三羟基葫芦二烯醇存在于所述重组
宿主细胞中和/或由所述重组宿主细胞产生。
52.如权利要求47-51中任一项所述的方法，其中所述接触导致在所述重组宿主细胞中
产生罗汉果醇。
53.如权利要求50-52中任一项所述的方法，其中所述细胞色素P450包含与SEQ ID NO:
20、49、308、315、430、872、874、876、878、880、882、884、886、888、889和892中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列；或所述细胞色素P450由与SEQ ID NO:31-48、316、431、
871、873、875、877、879、881、881、883、885、887、890和891中任何一者具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
54.如权利要求46-53中任一项所述的方法，其中所述环氧化物水解酶包含与SEQ ID 
NO:21-30和309-314中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列，或所述环氧化物水解酶由与SEQ ID NO:114和115中任何一者具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
55.如权利要求2-54中任一项所述的方法，其中所述方法包括使葫芦二烯醇与所述重
组宿主细胞接触，并且其中所述重组宿主细胞包含编码细胞色素P450的基因。
56.如权利要求55所述的方法，其中所述接触导致产生11-羟基葫芦二烯醇。
57.如权利要求55或56所述的方法，其中所述葫芦二烯醇由所述重组宿主细胞产生和/
或存在于所述重组宿主细胞中。
58.如权利要求55-57中任一项所述的方法，其中所述细胞色素P450由与SEQ ID NO:
31-48、316、431、871、873、875、877、879、881、883、885、887、889和892中任何一者具有至少
70％序列同一性的核酸序列编码。
59.权利要求55-57中任一项所述的方法，其中所述细胞色素P450包含与SEQ ID NO:
20、31、49、308、315、430、872、874、876、878、880、882、884、886、888、890和891中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
60.如权利要求2-59中任一项所述的方法，其中所述方法包括使2,3-氧化角鲨烯、二氧化角鲨烯和二环氧角鲨烯中的一种或多种与所述重组宿主细胞接触，其中所述重组宿主细胞包含第七基因，所述第七基因编码具有葫芦二烯醇合酶活性的多肽。
61.如权利要求60所述的方法，其中所述具有葫芦二烯醇合酶活性的多肽是包含与葫
芦二烯醇合酶融合的融合结构域的融合蛋白。
62.如权利要求61所述的方法，其中所述融合蛋白包含与葫芦二烯醇合酶的N-末端区
域、C-末端区域或两者融合的融合结构域。
63.如权利要求62所述的方法，其中所述融合结构域长约3至约1000个氨基酸。
64.如权利要求62所述的方法，其中所述融合结构域长约5至约50个氨基酸。
65.如权利要求62所述的方法，其中所述融合结构域是功能蛋白的主要部分或整个序
列。
66.如权利要求61所述的方法，其中所述具有葫芦二烯醇合酶活性的多肽包含与SEQ 
ID NO:70-73、75-77、319、321、323、325、327-333、417、420、422、424、426、446、902、904或
906具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
67.如权利要求61或62所述的方法，其中具有葫芦二烯醇合酶活性的多肽由与SEQ ID 
NO:74、320、322、324、326、328、418、421、423、425、427、897、899、901、903或905具有至少
70％序列同一性的核酸序列编码。
68.如权利要求60-67中任一项所述的方法，其中所述接触导致生成葫芦二烯醇和/或
24,25-环氧葫芦二烯醇。
69.如权利要求60-68中任一项所述的方法，其中2,3-氧化角鲨烯、二氧化角鲨烯和二
环氧角鲨烯中的一种或多种由所述重组宿主细胞产生和/或存在于所述重组宿主细胞中。
70.如权利要求69所述的方法，其中所述2,3-氧化角鲨烯或二环氧角鲨烯是由包含SEQ ID NO:898或900所示序列的酶产生的。
71.如权利要求69所述的方法，其中2,3-氧化角鲨烯、二氧化角鲨烯和二环氧角鲨烯中的一种或多种的产生涉及由SEQ ID NO:897或899所示核酸序列编码的酶。
72.如权利要求60所述的方法，其中所述具有葫芦二烯醇合酶活性的多肽包含与SEQ 
ID NO:70-73、75-77、319、321、323、325、327、329-333、420、422、424、426、446、902、904和
906中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
73.如权利要求60所述的方法，其中所述具有葫芦二烯醇合酶活性的多肽由基因编码，所述基因包含与SEQ ID NO:74、320、322、324、326、328、418、421、423、425、427、897、899、
901、903和905中任何一者具有70％序列同一性的核酸序列。
74.如权利要求56-73中任一项所述的方法，其中所述11-羟基葫芦二烯醇由所述重组
宿主细胞产生和/或存在于所述重组宿主细胞中。
75.如权利要求74所述的方法，其中该重组宿主细胞包含编码CYP87D18或SgCPR蛋白质
的基因。
76.如权利要求75所述的方法，其中所述CYP87D18或SgCPR蛋白包含与SEQ ID NO:872
或SEQ ID NO:874具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
77.如权利要求75的方法，其中所述CYP87D18或SgCPR蛋白由与SEQ ID NO:871或SEQ 
ID NO:873具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
78.如权利要求2-77中任一项所述的方法，其中所述方法包括使角鲨烯与重组宿主细
胞接触，其中所述重组宿主细胞包含编码角鲨烯环氧酶的第八基因。
79.如权利要求78所述的方法，其中所述接触导致2,3-氧化角鲨烯的产生。
80.如权利要求78或79所述的方法，其中所述角鲨烯由所述重组宿主细胞产生和/或存
在于所述重组宿主细胞中。
81.如权利要求78-80中任一项所述的方法，其中所述角鲨烯环氧酶包含与SEQ ID NO:
50-56、60、61、334和335中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
82.如权利要求78-80中任一项所述的方法，其中所述角鲨烯环氧酶由与SEQ ID NO:
335具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
83.如权利要求2-82中任一项所述的方法，其中所述方法包括使法呢基焦磷酸与所述
重组宿主细胞接触，其中所述重组宿主细胞包含编码角鲨烯合酶的第九基因。
84.如权利要求83所述的方法，其中所述接触导致角鲨烯的产生。
85.如权利要求83或84所述的方法，其中所述法呢基焦磷酸由所述重组宿主细胞产生
和/或存在于所述重组宿主细胞中。
86.如权利要求83-85中任一项所述的方法，其中所述角鲨烯合酶包含与SEQ ID NO:69
和336中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
87.如权利要求83-85中任一项所述的方法，其中所述角鲨烯合酶由包含与SEQ ID NO:
337具有至少70％序列同一性的核酸序列的序列编码。
88.权利要求2-87中任一项的方法，其中所述方法包括使香叶基-PP与重组宿主细胞接
触，其中所述重组宿主细胞包含编码法呢基-PP合酶的第十基因。
89.如权利要求88所述的方法，其中所述接触导致法呢基-PP的产生。
90.如权利要求88或89所述的方法，其中，所述香叶基-PP由所述重组宿主细胞产生和/或存在于所述重组宿主细胞中。
91.如权利要求88-90中任一项的方法，其中所述法呢基-PP合酶包含与SEQ ID NO:338
具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
92.如权利要求88-90中任一项的方法，其中所述法呢基-PP合酶由与SEQ ID NO:339具
有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
93.如权利要求2-92中任一项所述的方法，其中所述第一、第二、第三、第四、第五、第六、第七、第八、第九和第十基因中的一个或多个与异源启动子可操作地连接。
94.如权利要求93所述的方法，其中所述异源启动子是CMV、EF1a、SV40、PGK1、人β-肌动蛋白、CAG、GAL1、GAL10、TEF1、GDS、ADH1、CaMV35S、Ubi、T7、T7lac、Sp6、araBAD、trp、lac、Ptac、pL启动子或其组合。
95.如权利要求93或94所述的方法，其中所述启动子是诱导型、阻遏型或组成型启动
子。
96.如权利要求2-95中任一项所述的方法，其中在重组宿主细胞中丙酮酸、乙酰辅酶A、柠檬酸盐和TCA循环中间体中的一种或多种的产生已被上调。
97.如权利要求2-96中任一项所述的方法，其中在重组宿主细胞中细胞质定位已经被
上调。
98.如权利要求2-97中任一项所述的方法，其中所述第一、第二、第三、第四、第五、第六、第七、第八、第九和第十基因中的一个或多个包含至少一个编码2A自裂肽的序列。
99.如权利要求2-98中任一项的方法，其中所述重组宿主细胞是植物、双壳类、鱼类、真菌、细菌或哺乳动物的细胞。
100.如权利要求99所述的方法，其中所述植物选自罗汉果属(Siraitia)、苦瓜属
(Momordica)、绞股蓝属(Gynostemma)、南瓜属(Cucurbita)、黄瓜属(Cucumis)、拟南芥属(Arabidopsis)、蒿属(Artemisia)、甜菊属(Stevia)、人参属(Panax)、睡茄属(Withania)、大戟属(Euphorbia)、苜蓿属(Medicago)、吊兰属(Chlorophytum)、五加属
(Eleutherococcus)、楤木属(Aralia)、桑属(Morus)、苜蓿属(Medicago)、桦木属(Betula)、黄芪属(Astragalus)、麻疯树属(Jatropha)、山茶属(Camellia)、韧伞属(Hypholoma)、曲霉属(Aspergillus)、茄属(Solanum)、石杉属(Huperzia)、孩儿参属(Pseudostellaria)、黄麻属(Corchorus)、常春藤属(Hedera)、地钱属(Marchantia)和桑属(Morus)。
101.如权利要求99所述的方法，其中，所述真菌选自毛癣菌属(Trichophyton)、桑黄孔菌属(Sanghuangporus)、台芝属(Taiwanofungus)、链疫孢属(Moniliophthora)、盘二孢属(Marssonina)、色二孢属(Diplodia)、微香菇属(Lentinula)、法夫酵母属
(Xanthophyllomyces)、普可尼亚属(Pochonia)、炭疽菌属(Colletotrichum)、间座壳属(Diaporthe)、组织胞浆菌属(Histoplasma)、球孢子菌属(Coccidioides)、组织胞浆菌属(Histoplasma)、桑黄孔菌属(Sanghuangporus)、短梗霉属(Aureobasidium)、普可尼亚属(Pochonia)、青霉属(Penicillium)、孢子丝菌属(Sporothrix)、黑僵菌属(Metarhizium)、曲霉属(Aspergillus)、耶氏酵母属(Yarrowia)、油脂酵母属(Lipomyces)。
102.如权利要求99所述的方法，其中，所述真菌是构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)或圆红冬孢酵母菌(Rhodosporin toruloides)。
103.如权利要求99所述的方法，其中所述重组宿主细胞是酵母细胞。
104.如权利要求103所述的方法，其中所述酵母选自假丝酵母属(Candida)、酵母属
(Sacccharaomyces)、酵母亚门(Saccharomycotina)、外囊菌亚门(Taphrinomycotina)、裂殖酵母纲(Schizosaccharomycetes)、毕赤酵母属(Komagataella)、担子菌门
(Basidiomycota)、伞菌亚门(Agaricomycotina)、银耳纲(Tremellomycetes)、柄锈菌亚门(Pucciniomycotina)、短梗霉属(Aureobasidium)、锥毛壳属(Coniochaeta)、红冬孢酵母属(Rhodosporidium)和微球黑粉菌纲(Microboryomycetes)。
105.如权利要求99所述的方法，其中所述细菌选自弗兰克氏菌属(Frankia)、放线菌门(Actinobacteria)、链霉菌属(Streptomyces)和肠球菌属(Enterococcus)。
106.如权利要求99所述的方法，其中，所述重组宿主细胞是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞或解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)细胞。
107.如权利要求2-106中任一项所述的方法，其中所述第一、第二、第三、第四、第五、第六、第七、第八、第九和第十基因中的一个或多个是用于在细菌、哺乳动物、植物、真菌和/或昆虫细胞中表达密码子优化的基因。
108.如权利要求2-107中任一项所述的方法，其中所述第一、第二、第三、第四、第五、第六、第七、第八、第九和第十基因中的一个或多个包含对所编码的酶的活性增加的功能性突变。
109.如权利要求5-108中任一项所述的方法，其中培养所述重组宿主细胞包括监测所
述培养条件的pH、溶解氧水平、氮水平或其组合。
110.如权利要求1-109中任一项所述的方法，包括分离化合物1。
111.如权利要求110所述的方法，其中分离化合物1包括裂解所述重组宿主细胞和/或
从所述培养基分离化合物1。
112.如权利要求1-111中任一项所述的方法，包括纯化化合物1。
113.如权利要求112所述的方法，其中纯化化合物1包括HPLC、固相萃取或其组合。
114.如权利要求112或113所述的方法，其中所述纯化包括：收获所述重组宿主细胞；保存上清液；以及裂解重组宿主细胞。
115.如权利要求114的方法，其中所述裂解包括使细胞经受剪切力或去污剂洗涤，从而获得裂解物。
116.如权利要求115所述的方法，其中，所述剪切力来自超声法、高压细胞裂解或珠子。
117.如权利要求115或116所述的方法，其中使所述裂解物经历过滤和纯化步骤。
118.如权利要求117所述的方法，其中将所述裂解物通过固相萃取进行过滤和纯化。
119.如权利要求1-118中任一项所述的方法，包括在使罗汉果苷IIIE与第一酶接触之
前，使第一罗汉果苷与一种或多种水解酶接触以产生罗汉果苷IIIE。
120.如权利要求119所述的方法，其中所述水解酶是β-葡聚糖水解酶。
121.如权利要求119所述的方法，其中所述水解酶是EXG1或EXG2。
122.如权利要求119所述的方法，其中所述水解酶包含氨基酸序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO:292、366-368、372、376-398、447-520、524-845、1013、1014和1023中任何一者具有至少70％的序列同一性。
123.权利要求119-122中任一项所述的方法，其中所述第一罗汉果苷选自罗汉果苷IV、罗汉果苷V、罗汉果苷VI及其组合。
124.权利要求119-122中任一项所述的方法，其中所述第一罗汉果苷选自罗汉果苷V、
赛门苷I、罗汉果苷IVE、罗汉果苷VI、罗汉果苷IVA及其组合。
125.权利要求119-124中任一项所述的方法，其中使所述第一罗汉果苷与一种或多种
水解酶接触包括使所述第一罗汉果苷与包含编码所述水解酶的基因的宿主细胞接触。
126.如权利要求125的方法，其中包含编码所述水解酶的基因的宿主细胞是重组宿主
细胞。
127.如权利要求125所述的方法，其中包含编码所述水解酶的基因的宿主细胞不是包
含编码能够催化化合物1产生的第一酶的第一基因的重组宿主细胞。
128.权利要求125-127中任一项所述的方法，其中所述第一罗汉果苷由所述宿主细胞
产生和/或存在于所述宿主细胞中。
129.权利要求125-128中任一项的方法，其中编码所述水解酶的基因与宿主细胞同源。
130.权利要求125-129中任一项所述的方法，其中编码所述水解酶的基因在所述宿主
细胞中以正常水平表达。
131.如权利要求125-130中任一项的方法，其中编码所述水解酶的基因在宿主细胞中
过表达。
132.如权利要求125-131中任一项所述的方法，其中编码所述水解酶的基因与宿主细
胞异源。
133.如权利要求2至132中任一项所述的方法，其中所述重组细胞进一步包含氧化角鲨
烯环化酶例如环阿屯醇合酶或β-香树酯醇合酶，或编码氧化角鲨烯环化酶例如环阿屯醇合酶或β-香树酯醇合酶的核酸序列，并且其中氧化角鲨烯环化酶、环阿屯醇合酶或β-香树酯醇合酶已被修饰以生产葫芦二烯醇或环氧葫芦二烯醇。
134.如权利要求133所述的方法，其中所述氧化角鲨烯环化酶包含SEQ ID NO:341、343和346-347中任何一者所示的序列。
135.如权利要求2-134中任一项所述的方法，其中所述重组细胞包含细胞色素P450还
原酶或编码细胞色素P450还原酶的基因。
136.如权利要求135所述的方法，其中所述细胞色素P450还原酶包含SEQ ID NO:318所
示的序列。
137.一种具有化合物1的结构的化合物：
其中所述化合物通过权利要求1-136中任一项所述的方法制备。
138.一种细胞裂解物，其包含具有以下结构的化合物1：
139.一种重组细胞，其包含：具有以下结构的化合物1：
和编码能够催化从罗汉果苷IIIE产生化合物1的酶的基因。
140.如权利要求139所述的重组细胞，其中所述基因是重组细胞的异源基因。
141.一种重组细胞，其包含第一基因，该第一基因编码能够催化从罗汉果苷IIIE产生
具有以下结构的化合物1的第一酶：
142.如权利要求141所述的细胞，其特征在于，所述第一酶是UDP糖基转移酶、环麦芽糊精葡聚糖转移酶(CGTases)、糖基转移酶、葡聚糖蔗糖酶、纤维素酶、β-葡糖苷酶、淀粉酶、转葡糖苷酶、果胶酶和葡聚糖酶中的一种或多种。
143.如权利要求141所述的细胞，其中所述第一酶是CGTase。
144.如权利要求143的细胞，其中所述CGTase包含与SEQ ID NO:1、3、78-101、148和154中任何一者的序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
145.如权利要求141所述的细胞，其中所述CGTase包含SEQ ID NO:1、3、78-101、148和
154中任何一者的氨基酸序列。
146.如权利要求141所述的细胞，其中所述第一酶是葡聚糖蔗糖酶。
147.如权利要求146所述的细胞，其中，所述葡聚糖蔗糖酶包含与SEQ ID NO:2、103、
106-110、156和896中所示任一序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
148.如权利要求146所述的细胞，其中，所述葡聚糖蔗糖酶由与SEQ ID NO:104、105、
157、158和895中任何一者具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
149.如权利要求141所述的细胞，其中所述第一酶是转葡糖苷酶。
150.如权利要求149所述的细胞，其中，所述转葡糖苷酶包含与SEQ ID NO:163-291和
723中任何一者的序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
151.如权利要求149所述的细胞，其中所述转葡糖苷酶包含SEQ ID NO:3、95-102、163-
291和723中任何一者的氨基酸序列。
152.如权利要求141所述的细胞，其中所述第一酶是β-葡糖苷酶。
153.如权利要求152的细胞，其中所述β-葡糖苷酶包含与SEQ ID NO:102、292、354-376和678-741具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
154.如权利要求141-153中任一项所述的细胞，其包含编码尿苷二磷酸-葡萄糖基转移
酶(UGT)的第二基因。
155.如权利要求154所述的细胞，其中，所述UGT包含与SEQ ID NO:4-9、15-19、125、
126、128、129、293-307、407、409、411、413、439、441或444具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
156.如权利要求154所述的细胞，其中所述UGT由与SEQ ID NO:116-124、127、130、408、
410、412、414、440、442、443和445中任何一者具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
157.如权利要求154所述的细胞，其中，所述UGT由UGT1495(SEQ ID NO:10)、UGT1817
(SEQ ID NO:11)、UGT5914(SEQ ID NO:12)、UGT8468(SEQ ID NO:13)或UGT10391(SEQ ID NO:14)中所示的序列编码。
158.如权利要求141-157中任一项所述的细胞，其包含编码UGT98或UGT SK98的第三基
因。
159.如权利要求158所述的细胞，其中UGT98或UGT SK98包含与SEQ ID NO:9、407、16或
306具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
160.如权利要求158所述的细胞，其中UGT98由SEQ ID NO:307所示的核酸序列编码。
161.如权利要求141-160中任一项所述的细胞，其包含编码环氧化物水解酶的第四基
因。
162.如权利要求161所述的细胞，其中所述环氧化物水解酶包含与SEQ ID NO:21-30和
309-314中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列，或由与SEQ ID NO:114和115中任何一者具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
163.如权利要求141-162中任一项所述的细胞，其包含编码P450的第五序列。
164.如权利要求163所述的细胞，其中所述P450包含与SEQ ID NO:20、49、308、315、
430、872、874、876、878、880、882、884、886、888、890和891中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列；或由与SEQ ID NO:31-48、316、431、871、873、875、877、879、881、883、
885、887、889和892中任何一者具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
165.如权利要求163所述的细胞，其中所述P450由包含SEQ ID NO:31-48、316和318中
任何一者所示序列的基因编码。
166.如权利要求141-165中任一项所述的细胞，其包含编码具有葫芦二烯醇合酶活性
的多肽的第六序列。
167.如权利要求166所述的方法，其中具有葫芦二烯烯合酶活性的多肽是融合蛋白。
168.如权利要求167所述的方法，其中，所述融合蛋白包含与葫芦二烯烯合酶的N-末
端、C-末端或两者融合的融合结构域。
169.如权利要求168所述的方法，其中所述融合结构域长约3至约1000个氨基酸。
170.如权利要求169所述的方法，其中所述融合结构域长约5至约50个氨基酸。
171.如权利要求168或169所述的方法，其中所述融合结构域是功能蛋白的主要部分或
整个序列。
172.如权利要求166所述的细胞，其中所述具有葫芦二烯醇合酶活性的多肽包含与SEQ ID NO:70-73、75-77、319、321、323、325、327-333、417、420、422、424、426、446、902、904、
906、851、854、856、1024、859、862、865、867、915、920、924、928、932、936、940、944、948、952、
956、959、964、967、971、975、979、983、987、991、995、999、1003、1007和1011中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
173.如权利要求166所述的细胞，其中所述具有葫芦二烯醇合酶活性的多肽由与SEQ 
ID NO:74、320、322、324、326、328、418、421、423、425、427、897、899、901、903和905中任何一者具有至少70％序列同一性的核酸序列编码。
174.如权利要求141-173中任一项所述的细胞，其包含编码角鲨烯环氧酶的第七基因。
175.如权利要求174所述的细胞，其中所述角鲨烯环氧酶包含与SEQ ID NO:50-56、60、
61、334和335中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
176.如权利要求174所述的细胞，其中所述角鲨烯环氧酶由与SEQ ID NO:335具有至少
70％序列同一性的核酸序列编码。
177.如权利要求141-176中任一项所述的细胞，其包含编码角鲨烯合酶的第八基因。
178.如权利要求177所述的细胞，其中所述角鲨烯合酶包含与SEQ ID NO:69或336具有
至少70％序列同一性的氨基酸序列。
179.如权利要求177所述的细胞，其中所述角鲨烯合酶由包含SEQ ID NO:337所示核酸
序列的序列编码。
180.如权利要求141-179中任一项所述的细胞，其包含编码法呢基-PP合酶的第九基
因。
181.如权利要求180所述的细胞，其中所述法呢基-PP合酶包含与SEQ ID NO:338具有
至少70％序列同一性的氨基酸序列。
182.如权利要求180所述的细胞，其中所述法呢基-PP合酶由与SEQ ID NO:339具有至
少70％序列同一性的核酸序列编码。
183.如权利要求141-182中任一项所述的细胞，其中所述细胞是哺乳动物、植物、细菌、真菌或昆虫的细胞。
184.如权利要求141-182中任一项所述的细胞，其中所述细胞是酵母细胞，其中所述酵母选自假丝酵母属(Candida)、酵母属(Sacccharaomyces)、酵母亚门(Saccharomycotina)、外囊菌亚门(Taphrinomycotina)、裂殖酵母纲(Schizosaccharomycetes)、毕赤酵母属(Komagataella)、担子菌门(Basidiomycota)、伞菌亚门(Agaricomycotina)、银耳纲
(Tremellomycetes)、柄锈菌亚门(Pucciniomycotina)、短梗霉属(Aureobasidium)、锥毛壳属(Coniochaeta)和微球黑粉菌纲(Microboryomycetes)。
185.如权利要求183所述的细胞，其中，所述植物选自罗汉果属(Siraitia)、苦瓜属
(Momordica)、绞股蓝属(Gynostemma)、南瓜属(Cucurbita)、黄瓜属(Cucumis)、拟南芥属(Arabidopsis)、蒿属(Artemisia)、甜菊属(Stevia)、人参属(Panax)、睡茄属(Withania)、大戟属(Euphorbia)、苜蓿属(Medicago)、吊兰属(Chlorophytum)、五加属
(Eleutherococcus)、楤木属(Aralia)、桑属(Morus)、苜蓿属(Medicago)、桦木属(Betula)、黄芪属(Astragalus)、麻疯树属(Jatropha)、山茶属(Camellia)、韧伞属(Hypholoma)、曲霉属(Aspergillus)、茄属(Solanum)、石杉属(Huperzia)、孩儿参属(Pseudostellaria)、黄麻属(Corchorus)、常春藤属(Hedera)、地钱属(Marchantia)和桑属(Morus)。
186.如权利要求183所述的细胞，其中所述真菌是毛癣菌属(Trichophyton)、桑黄孔菌属(Sanghuangporus)、台芝属(Taiwanofungus)、链疫孢属(Moniliophthora)、盘二孢属(Marssonina)、色二孢属(Diplodia)、微香菇属(Lentinula)、法夫酵母属
(Xanthophyllomyces)、普可尼亚属(Pochonia)、炭疽菌属(Colletotrichum)、间座壳属(Diaporthe)、组织胞浆菌属(Histoplasma)、球孢子菌属(Coccidioides)、组织胞浆菌属(Histoplasma)、桑黄孔菌属(Sanghuangporus)、短梗霉属(Aureobasidium)、普可尼亚属(Pochonia)、青霉属(Penicillium)、孢子丝菌属(Sporothrix)、或黑僵菌属
(Metarhizium)。
187.如权利要求141-186中任一项所述的细胞，其中所述重组细胞包含编码至少一种
能够水解罗汉果苷V的水解酶的基因。
188.如权利要求141-187中任一项所述的细胞，其中化合物1显示出对重组细胞中水解
酶的耐受性，其中所述水解酶显示出将罗汉果苷VI、罗汉果苷V、罗汉果苷IV水解为罗汉果苷IIIE的能力。
189.如权利要求141-188中任一项所述的细胞，其中所述重组细胞进一步包含氧化角
鲨烯环化酶例如环阿屯醇合酶或β-香树酯醇合酶，或编码氧化角鲨烯环化酶例如环阿屯醇合酶或β-香树酯醇合酶的核酸序列，并且其中氧化角鲨烯环化酶、环阿屯醇合酶或β-香树酯醇合酶经修饰以产生葫芦二烯醇或环氧葫芦二烯醇。
190.如权利要求189所述的细胞，其中所述氧化角鲨烯环化酶包含与SEQ ID NO:341、
343和346-347中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
191.如权利要求141-190中任一项所述的细胞，其中所述细胞包含细胞色素P450还原
酶或编码细胞色素P450还原酶的基因。
192.如权利要求191所述的细胞，其中所述细胞色素P450还原酶再生细胞色素P450活
性。
193.如权利要求191所述的细胞，其中所述细胞色素P450还原酶包含与SEQ ID NO:318
具有至少70％序列同一性的序列。
194.如权利要求141-193中任一项所述的细胞，其中所述细胞包含SEQ ID NO:897、
899、909、911、913、418、421、423、425、427、871、873、901、903或905中所示的序列。
195.如权利要求141-193中任一项所述的细胞，其中，所述细胞包含酶，所述酶包含SEQ ID NO:315、316、420、422、424、426、430、431、446、871、845-949或951-1012所示的序列，或由SEQ ID NO:315、316、420、422、424、426、430、431、446、871、845-949或951-1012所示的序列编码。
196.如权利要求141-195中任一项所述的细胞，其包含编码能够水解第一罗汉果苷以
产生罗汉果苷IIIE的水解酶的基因。
197.如权利要求196所述的细胞，其中所述水解酶是β-葡聚糖水解酶。
198.如权利要求196所述的细胞，其中所述水解酶是EXG1或EXG2。
199.如权利要求196所述的细胞，其中所述水解酶包含氨基酸序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO:292、366-368、372、376-398、447-520、524-845、1013、1014和1023中任何一者具有至少70％的序列同一性。
200.如权利要求196-199中任一项所述的细胞，其中所述第一罗汉果苷选自罗汉果苷
IV、罗汉果苷V、罗汉果苷VI及其组合。
201.如权利要求196-200中任一项所述的细胞，其中所述第一罗汉果苷选自罗汉果苷
V、赛门苷I、罗汉果苷IVE、罗汉果苷VI、罗汉果苷IVA及其组合。
202.如权利要求196-201中任一项所述的细胞，其中编码所述水解酶的基因与重组宿
主细胞同源。
203.如权利要求196-202中任一项所述的细胞，其中编码所述水解酶的基因以正常水
平表达。
204.如权利要求196-202中任一项所述的细胞，其中编码所述水解酶的基因是过表达
的。
205.如权利要求196-204中任一项所述的细胞，其中编码所述水解酶的基因与该细胞
是异源的。
206.如权利要求196-205中任一项所述的细胞，其中所述细胞是酵母细胞。
207.如权利要求206所述的细胞，其中所述细胞是酿酒酵母(Saccharomyces 
cerevisiae)或解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)。
208.一种产生具有以下结构的化合物1的方法：
该方法包括：
使第一罗汉果苷与一种或多种水解酶接触以产生罗汉果苷IIIE；和
使罗汉果苷IIIE与能够催化从罗汉果苷IIIE产生化合物1的酶接触。
209.如权利要求208所述的方法，其中所述水解酶是β-葡聚糖水解酶。
210.如权利要求208所述的方法，其中所述水解酶是EXG1。
211.如权利要求210所述的方法，其中所述EXG1包含与SEQ ID NO:1012或1014具有至
少70％序列同一性的氨基酸序列。
212.如权利要求208所述的方法，其中所述水解酶是EXG2。
213.如权利要求210所述的方法，其中所述EXG2包含与SEQ ID NO:1023具有至少70％
序列同一性的氨基酸序列。
214.如权利要求208-213中任一项所述的方法，其中所述第一罗汉果苷选自罗汉果苷
IV、罗汉果苷V、罗汉果苷VI及其组合。
215.如权利要求214所述的方法，其中第一罗汉果苷选自罗汉果苷V、赛门苷I、罗汉果苷IVE、罗汉果苷VI、罗汉果苷IVA及其组合。
216.如权利要求208-215中任一项所述的方法，其中使所述第一罗汉果糖苷与一种或
多种水解酶接触包括使所述第一罗汉果糖苷与重组宿主细胞接触，所述重组宿主细胞包含编码所述水解酶的第一基因和编码能够催化化合物1产生的酶的第二基因。
217.如权利要求208-216中任一项所述的方法，其中所述第一罗汉果苷在重组宿主细
胞中接触所述一种或多种水解酶，所述重组宿主细胞包含编码所述水解酶的第一基因和编码能够催化化合物1产生的酶的第二基因。
218.如权利要求208-217中任一项所述的方法，其中所述第一罗汉果苷由所述重组宿
主细胞产生。
219.如权利要求208-218中任一项所述的方法，其中所述第一基因对于所述重组宿主
细胞是天然的。
220.如权利要求208-219中任一项所述的方法，其中所述第一基因以正常水平表达或
过表达。
221.如权利要求208-218中任一项所述的方法，其中所述第一基因与所述重组宿主细
胞是异源的或异源的。
222.如权利要求208-221中任一项所述的方法，其中所述能够催化化合物1产生的酶是
UDP糖基转移酶、环麦芽糊精葡聚糖转移酶(CGTases)、糖基转移酶、葡聚糖蔗糖酶、纤维素酶、β-葡糖苷酶、淀粉酶、转葡糖苷酶、果胶酶和葡聚糖酶中的一种或多种。
223.一种重组细胞，其包含：
第一基因，其编码能够水解第一罗汉果苷以产生罗汉果苷IIIE的水解酶；和
第二基因，其编码能够催化从罗汉果苷IIIE产生化合物1的酶，其中化合物1具有以下结构：
224.如权利要求223所述的细胞，其中，所述水解酶是β-葡聚糖水解酶。
225.如权利要求223所述的细胞，其中所述水解酶是EXG1或EXG2。
226.如权利要求228所述的细胞，其中所述EXG2蛋白包含与SEQ ID NO:1023具有至少
70％序列同一性的氨基酸序列。
227.如权利要求223-226225中任一项所述的细胞，其中，所述第一罗汉果苷选自罗汉
果苷IV、罗汉果苷V、罗汉果苷VI及其组合。
228.如权利要求223-226227中任一项所述的细胞，其中所述第一罗汉果苷选自罗汉果
苷V、赛门苷I、罗汉果苷IVE、罗汉果苷V、罗汉果苷IVA及其组合。
229.如权利要求223-228中任一项所述的细胞，其中所述第一基因与所述重组宿主细
胞是同源的或异源的。
230.如权利要求223-229中任一项所述的细胞，其中所述第一基因以正常水平表达或
过表达。
231.如权利要求223-230中任一项所述的细胞，其中所述细胞是酵母细胞。
232.如权利要求231所述的细胞，其中所述细胞是酿酒酵母(Saccharomyces 
cerevisiae)或解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)。
233.一种具有葫芦二烯醇合酶活性的融合多肽，其中所述融合多肽包含与葫芦二烯醇
合酶融合的融合结构域。
234.如权利要求233所述的融合多肽，其中所述融合结构域与葫芦二烯醇合酶的N-末
端融合。
235.如权利要求233所述的融合多肽，其中所述融合结构域与葫芦二烯醇合酶的C-末
端融合。
236.如权利要求233-235中任一项所述的融合多肽，其中所述融合结构域长约3至约
1000个氨基酸。
237.如权利要求233-236中任一项所述的融合多肽，其中所述融合结构域长约5至约50
个氨基酸。
238.如权利要求233-236中任一项所述的融合多肽，其中所述融合结构域包含功能蛋
白的主要部分或整个序列。
239.如权利要求233-236中任一项所述的融合多肽，其中所述融合结构域是功能蛋白
的主要部分或整个序列。
240.如权利要求233-239中任一项所述的融合多肽，其中所述融合结构域包含酵母蛋
白的一部分或全部序列。
241.如权利要求233-239中任一项所述的融合多肽，其中所述融合结构域是酵母蛋白
的一部分或全部序列。
242.如权利要求241所述的融合多肽，其中所述融合多肽包含与SEQ ID NO:851、854、
856、1024、859、862、865、867、915、920、924、928、932、936、940、944、948、952、956、959、964、
967、971、975、979、983、987、991、995、999、1003、1007和1011中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
243.如权利要求241所述的融合多肽，其中所述融合多肽包含SEQ ID NO:851、854、
856、1024、859、862、865、867、915、920、924、928、932、936、940、944、948、952、956、959、964、
967、971、975、979、983、987、991、995、999、1003、1007和1011中任何一者所示的氨基酸序列。
244.如权利要求233-235中任一项所述的融合多肽，其中所述融合多肽的融合结构域
包含与SEQ ID NO:866、870、917、921、925、929、933、937、941、945、949、953、957、961、968、
972、976、980、984、988、992、996、1000、1004、1008和1012中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
245.如权利要求233-235中任一项所述的融合多肽，其中所述融合多肽的融合结构域
包含SEQ ID NO:866、870、917、921、925、929、933、937、941、945、949、953、957、961、968、
972、976、980、984、988、992、996、1000、1004、1008和1012中任何一者所示的氨基酸序列。
246.如权利要求233-241、244和245中任一项所述的融合多肽，其中所述葫芦二烯醇合酶包含与SEQ ID NO:70-73、75-77、319、321、323、325、327、329-333、420、422、424、426、
446、902、904和906中任何一者具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。
247.如权利要求233-241、244和245中任一项所述的融合多肽，其中所述葫芦二烯醇合酶包含SEQ ID NO:70-73、75-77、319、321、323、325、327、329-333、420、422、424、426、446、
902、904和906中任何一者所示的氨基酸序列。
248.如权利要求233-241、244和245中任一项所述的融合多肽，其中所述葫芦二烯醇合酶由包含与SEQ ID NO:74、320、322、324、326、328、418、421、423、425、427、897、899、901、
903和905中任何一者具有70％序列同一性的核酸序列的基因编码。
249.如权利要求233-241、244和245中任一项所述的融合多肽，其中所述葫芦二烯醇合酶由包含SEQ ID NO:74、320、322、324、326、328、418、421、423、425、427、897、899、901、903和905中任何一者核酸序列的基因编码。
250.一种重组核酸分子，其包含编码权利要求233-249中任一项的融合多肽的核酸序
列。
251.一种重组细胞，其包含权利要求233-249中任一项的融合多肽或权利要求250的重
组核酸分子。
252.一种方法，其包括使葫芦二烯醇合酶的底物与权利要求233-249中任一项的具有
葫芦二烯醇合酶活性的融合多肽接触。
253.如权利要求252所述的方法，其中所述接触导致产生葫芦二烯醇、24,25-环氧葫芦二烯醇或其组合。
254.如权利要求252或253所述的方法，其中所述葫芦二烯醇合酶的底物包含2,3-氧化
角鲨烯、二氧化角鲨烯和二环氧角鲨烯中的一种或多种。
255.如权利要求252-254中任一项所述的方法，其中所述接触包括使所述底物与重组
宿主细胞接触，所述重组宿主细胞包含编码所述融合多肽的核酸序列。
256.如权利要求255所述的方法，其中所述底物存在于所述重组宿主细胞中和/或由所
述重组宿主细胞产生。