生脉注射剂以人参、麦冬、五味子为原料制成，具有益气养阴、复脉固脱的功效，用于 气阴两亏，脉虚欲脱的心悸、气虚、四肢厥冷及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克，目前 临床上还用于治疗冠心病心绞痛、脾胃虚弱证、急性病毒性心肌炎、恶性肿瘤、小儿重症肺 炎、病毒性肺炎、病毒性肝炎、视神经萎缩、糖尿病、颈椎病、银屑病、突发性耳聋等疾病 ；是由传统的生脉散改剂而成，它克服了传统制剂起效慢的缺点，许多发明人及药品企业对 其做了大量的研究工作，如：专利申请号为“93110807.1”，名称为“生脉注射液及其制备 工艺”的申请、专利申请号为“96117457.9”，名称为“一种生脉注射液及其制备方法”的 申请；申请人于文勇也曾经向中国专利局申请了名称为：“一种治疗心脑血管疾病的药物组 合物及其制备方法”、专利申请号为02153312.1的发明专利，但是药物制剂必须要在保证产 品质量稳定可控安全的基础之上，才能不断的更新发展，为了更好的控制该制剂的质量，保 证用药的安全性，更好的指导生产，使工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质 地，需要研究控制该注射液质量的方法；目前，在生脉制剂的相关药物制剂中，一般仅以人 参皂苷Re、Rb1为检测指标，但是它根本不能全面反应产品的质量，仅以此用来控制注射液 的质量不是十分合理；如果用别的指标进行控制，由于没有现成的检测方案、检测条件等等 ，所以比较难于实施。

本发明的目的在于：提供一种生脉注射剂的质量控制方法，这种方法向相关的生产、检 测机构提供了检测的指标、检测的手段、技术方法等等；以便更好的控制该制剂的质量，保 证用药的安全性，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认 识产品质地。
本发明是这样构成的：
生脉注射剂的质量控制方法，包括以下全部或部分内容：
(1)生脉注射剂的指纹图谱测试，包括以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱 和以五味子成分特征为主的指纹图谱中的一种或几种；
(2)红参或人参药材、麦冬药材、五味子药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂 苷Re、人参皂苷Rf、麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′、假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、 鲁斯可皂苷元、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子 酯甲、五味子酯乙中全部或部分成分的鉴别测试方法；
(3)人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′ 、假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五 味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、总皂苷、总木脂素、总多糖中全部或部分成分的含量 测试方法。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，该方法包括如下指纹图谱中的一种或两种：
a、采用液相色谱法测试红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱：
(1)供试品溶液的制备：取待测生脉注射制剂适量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀释， 摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备：取适量红参或人参和麦冬药材中的主要活性成分对照品，包 括人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、假叶树 皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元、麦冬皂苷D′中的一种，用水或甲醇或乙醇溶解，定 容至合适浓度，作为参照物溶液；
(3)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料：流动相A为0.01mol/L～ 2mol/L磷酸二氢钠水溶液或0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钾水溶液或0.01mol/L～2mol/L磷酸 氢二钠水溶液或水或0.1％～5％冰醋酸溶液或0.1％～5％甲酸溶液或0.02％～5％磷酸溶液 ；B为10％～100％乙腈溶液或10％～无水甲醇溶液，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min、检 测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；
(4)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的 标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱， 以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准 指纹图谱中，共有峰有3～50个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中红参或人参和麦冬成分特征为主的指 纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测注射剂的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或 全部：
I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00；
II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％；
III.待测注射剂指纹图谱中有30％～80％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应 的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土50％；
b、采用液相色谱法测试以五味子成分特征为主的指纹图谱：
(1)供试品溶液的制备：取待测生脉注射制剂适量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀释， 摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备：取适量五味子药材中的主要活性成分对照品，包括五味子醇 甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中的一 种，用水或甲醇或乙醇溶解，定容至合适浓度，作为参照物溶液；
(3)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为乙腈或甲醇，流 动相B为水或0.01％～3％磷酸溶液或0.1％～5％冰醋酸溶液或0.1％～5％甲酸溶液，梯度洗 脱，流速为0.5～2.0ml/min、检测波长为190-410nm范围内的一个或几个，柱温在20～60℃ 范围内；
(4)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图 谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参 照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中 ，共有峰有3～50个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中五味子成分特征为主的指纹图谱的测 试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测注射剂指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全 部：
I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00；
II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％；
III.待测注射剂指纹图谱中有30％～80％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应 的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土50％。
(共有峰面积的比值是指：以参照物峰面积作为1，计算各共有指纹峰面积与参照物峰 面积的比值)
所述的生脉注射剂的质量控制方法，该方法包括如下指纹图谱中的一种或两种：
a、采用液相色谱法测定以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱：
(1)供试品溶液的制备：精密称取待测生脉注射制剂适量，加水制成每1ml含50mg的溶 液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备：精密称取人参皂苷Rg1适量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液 ，作为参照物溶液；
(3)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为0.05mol/L磷酸 二氢钾溶液，流动相B为乙腈-水80∶20，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，流动相B 的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升至64％，从40分钟至50分钟，流 动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由64％升至80％，从65分钟至75分 钟，流动相B的比例由80％降至25％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃ ；
(4)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的 标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱， 以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准 指纹图谱中，共有峰有3～30个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中红参或人参和麦冬成分特征为主的指 纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测生脉注射剂指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分 或全部：
I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；
II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％；
III.待测注射剂指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应 的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土30％；
b、采用液相色谱法测定以五味子成分特征为主的指纹图谱：
(1)供试品溶液的制备：精密称取待测生脉注射制剂适量，加水制成每1ml含50mg的溶 液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备：精密称取五味子醇甲对照品适量，加水制成每1ml含0.1mg的 溶液，作为参照物溶液；
(3)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为甲醇-水，梯度洗 脱，溶剂比例为从0分钟至6分钟，甲醇的比例为68％，从6分钟至8分钟，甲醇的比例由68％ 上升至76％，从8分钟至10分钟，甲醇的比例为76％，从10分钟至15分钟，甲醇的比例由76 ％降至68％，从15分钟至60分钟，甲醇的比例为68％；流速为1.0ml/min，检测波长为250± 2nm，柱温为30℃；
(4)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图 谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参 照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中 ，共有峰有3～30个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射剂中五味子成分特征为主的指纹图谱的测 试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测生脉注射剂指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分 或全部：
I.计算待测注射剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；
II.待测注射剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％；
III.待测注射剂指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中对应 的各共有峰面积的比值比较，其差值不得大于土30％。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，所述注射剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容：
a、注射剂中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五昧子甲素、五味子乙素、五味子丙 素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种的薄层色谱鉴别方法：
取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷或乙醚或醋酸乙酯或正己烷或10％～无水乙醇或 10％～无水甲醇提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷或醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液 ；另取五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五昧子丙素 、五味子酯甲、五味子酯乙中的一种或几种制备对照溶液；五味子对照药材溶液的制备：取 五味子对照药材适量，加三氯甲烷或乙醚或醋酸乙酯或正己烷或10％～无水乙醇或10％～无 水甲醇提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷或醋酸乙酯溶解，作为对照药材溶液；对照 品溶液的制备：取五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味 子酯甲、五味子酯乙中一种或几种对照品；分别加三氯甲烷或醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶 液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对 照品溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以石 油醚(30～60℃)或石油醚(60～90℃)∶甲酸乙酯或醋酸乙酯∶甲酸或乙酸＝2～40∶0.2 ～15∶0.1～5的上层溶液或苯或甲苯∶醋酸乙酯或甲酸乙酯＝1～30∶0.2～10或正己烷∶苯 或甲苯∶甲酸乙酯或醋酸乙酯∶甲酸或乙酸＝0.2～5∶0.5～10∶1～15∶0.1～5为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外灯365nm或254nm检视或喷以2％～20％变色酸-浓硫酸溶液或2％ ～20％磷钼酸乙醇溶液或茴香醛硫酸溶液，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰或碘熏显色， 供试品色谱中，在与对照药材色谱或者对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；
b、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的液相色谱鉴别：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微 孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或 几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或 八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋 酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5％～80％∶95％～20％为流 动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中 ，应具与对照品色谱中的主峰有保留时间一致的色谱峰；
c、注射剂中麦冬的薄层色谱鉴别方法：
取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷-甲醇混合溶液或正丁醇或三氯甲烷或醋酸乙酯 或二氯甲烷提取，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，加三氯甲烷-甲醇混合溶液或醋酸 乙酯或正丁醇或三氯甲烷或二氯甲烷提取，滤过，蒸干，残渣加三氯甲烷或二氯甲烷溶解， 作为对照药材溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl， 分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯或三氯甲烷或二 氯甲烷∶甲醇或乙醇∶冰醋酸或甲酸或水＝8～300∶0.5～100∶0.01～30或醋酸乙酯或甲酸 乙酯∶吡啶∶水＝0.2～10∶0.1～5∶0.2～10为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯 365nm或254nm下检视或喷以1％～50％硫酸或香草醛试剂或1％～25％香荚兰醛试剂或茴香醛 试剂，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上 ，应显相同颜色的荧光斑点；
d、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的薄层色谱鉴别方法：
取待测生脉注射制剂适量，用水溶解后用正丁醇或乙醚或醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲 烷萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂 苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品，分别加甲醇或乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对 照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于 同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷∶ 甲醇或乙醇∶水＝3～50∶1～15∶0.1～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％～50％硫酸 乙醇试剂，在80℃～160℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，应显相同颜色的斑点；
e、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的液相色谱鉴别：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微 孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或 几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或 八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋 酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝1％～99％∶99％～1％为流动 相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围 内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
f、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的薄层色谱鉴别 方法：
取待测生脉注射制剂适量，加硫酸或盐酸水解后调节pH至中性，蒸干，残渣用三氯甲烷 或二氯甲烷或醋酸乙酯或甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷 元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品，分别加三氯甲烷或二氯甲烷或醋酸乙酯或甲醇或乙 醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸 取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以 正己烷或环己烷或甲醇或乙醇∶醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或甲酸乙酯∶水＝0.2～15∶ 0.2～40∶0.1～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％～50％硫酸乙醇试剂，在80℃～ 160℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的 斑点；
g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的液相色谱鉴别 ：
取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后加硫酸或盐酸水解，取出，放至 室温，调pH至中性后用三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液挥干，残渣用 甲醇或乙醇溶解后用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷 元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱 用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙 腈∶水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5 ％～95％∶95％～5％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器 检测，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
h、注射剂中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一 种或几种的薄层色谱鉴别方法：
取待测生脉注射制剂适量，用正丁醇或乙醇或甲醇或醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提 取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、 人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照溶液；红参或人参对照药材溶液的制备 ：取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷或二氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷或二氯甲烷 液，残渣加水饱和正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇 或乙醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参 皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种对照品，分别加甲醇或乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为 对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点 于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷或二氯甲烷或正己烷或 环己烷∶醋酸乙酯或甲酸乙酯∶甲醇或乙醇或丙酮∶水＝5～40∶10～100∶5～50∶0.2～30 在10℃以下放置的下层溶液或正丁醇∶醋酸乙酯或甲酸乙酯∶水＝1～10∶0.2～2∶1～15的 上层为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％～50％硫酸乙醇试剂，在80℃～160℃烘至斑点 显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照 品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；
i、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微 孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种 或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶 或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰 醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸溶液＝5％～40％∶95％～60％为流 动相，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸 发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一 致的色谱峰。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，所述注射剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容：
a、注射剂中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙 素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种的薄层色谱鉴别方法：
取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解， 作为供试品溶液；另取五味子对照药材、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙 素、五味子丙素、五味子酯甲、五昧子酯乙中一种或几种，制备对照溶液；五味子对照药材 溶液的制备：取五味子对照药材适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷 溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备：取五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、 五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙中一种或几种对照品，分别加三氯甲烷 制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取 上述溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(30～60℃)∶甲酸乙酯∶甲 酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱 中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
b、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的液相色谱鉴别：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤 液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种对照品的甲醇溶 液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇∶水＝65％∶ 35％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间 一致的色谱峰；
c、注射剂中麦冬的薄层色谱鉴别方法：
取待测生脉注射制剂适量，加三氯甲烷-甲醇7∶3混合溶液提取，滤过，滤液挥干，残 渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，同法制成对照药材溶液；采用中 国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板 上，以甲苯∶甲醇∶冰醋酸＝80∶5∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检 视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰 ；
d、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的薄层色谱鉴别方法：
取待测生脉注射制剂适量，用水溶解后用正丁醇萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇溶解， 作为供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品，分别加 甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验， 吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝15∶5∶1为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
e、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的液相色谱鉴别：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤 液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品的甲醇溶 液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为 流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的 色谱峰；
f、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的薄层色谱鉴别 方法：
取待测生脉注射制剂适量，加3％硫酸水解4小时，取出，放至室温，调节pH至中性，滤 过，滤液挥干，残渣用三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、 鲁斯可皂苷元中一种或几种对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶 液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯∶水＝1∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸 乙醇试剂，90℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同 颜色的斑点；
g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的液相色谱鉴别 ：
取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后用3％硫酸回流4小时，取出，放 至室温，调pH至中性，用三氯甲烷提取，提取液挥干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过， 取续滤液作为供试品溶液；按以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种对 照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈 -水90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留 时间一致的色谱峰；
h、注射剂中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一 种或几种的薄层色谱鉴别方法：
取待测生脉注射制剂适量，用正丁醇提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人 参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备 对照药材溶液；红参或人参对照药材溶液的制备：取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷 回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干 ，残渣用甲醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1、人参皂苷 Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种对照品，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液， 作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点 于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶醋酸乙酯∶甲醇∶水＝15∶40∶22∶10在10℃以下放置 的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清 晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱 相应的位置上，显相同颜色的斑点；
i、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤 液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种对照品的甲醇 溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相 ，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈 的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟， 乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱 中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，所述注射剂含量的测试方法应包括以下全部或部分 内容：
a、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微 孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种 或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶 或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋 酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸溶液＝5％～40％∶95％～60％为流动 相，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发 光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；以外标法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制 剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项：
每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于0.8mg；
每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.4mg；
每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于0.5mg；
(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于1.7mg；
b、注射剂中总皂苷的含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加蒸馏水或甲醇或乙醇适量使溶解并定至刻度， 摇匀，精密量取适量，置量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加1％～50％香草醛-冰醋酸 溶液0.1ml～10ml，高氯酸0.1ml～15ml，摇匀，30℃～80℃水浴上加热3～50分钟，取出 ，立即以冰水浴或流水冷却，精密加冰醋酸至刻度，摇匀，作为供试品溶液，以人参皂苷 Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf或麦冬皂苷B或麦冬皂苷D或麦冬皂苷D′为对 照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在 547±10nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相 当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷 Re或人参皂苷Rf或麦冬皂苷B或麦冬皂苷D或麦冬皂苷D′计，不得少于10mg；
c、注射剂中总多糖含量测定：
单糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水溶解后用氢氧化钠试液调节 pH至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧 烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定， 至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即 得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，由此计算单糖的含量；
总糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解后加稀硫酸25ml，加热 回流1～4小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液( 0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10 分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液 2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液( 0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；
以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；
待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计 ，不得少于50mg；
d、注射剂中总木脂素含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用醋 酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷提取，和并提取液，挥干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试 品溶液；以五味子醇甲或五味子醇乙的甲醇或乙醇溶液为对照品溶液。以随行溶剂为空白， 采用中国药典附录公开的分光光度法，在254±10nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准 曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总木脂素 以五味子醇甲或五味子醇乙计，不得少于1.5mg；
e、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微 孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或 几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或 八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰醋 酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5％～80％∶95％～20％为流 动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个，柱温在20～60℃范围内；以外标一点法 或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为 以下一项或几项：
(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.2mg；
(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.025mg；
(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.075mg；
(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.3mg；
f、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微 孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中的一种 或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶 或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或0.05％～5％冰 醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝1％～99％∶99％～1％为流 动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范 围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单 位量，含量限度应为以下一项或几项。
(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.05mg；
(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.05mg；
(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.01mg；
(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.11mg；
g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后加硫酸或盐酸水解，取出，放至 室温，调pH至中性后用三氯甲烷或正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液挥干，残渣用甲醇或乙醇 溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可 皂苷元中一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基 硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈∶水或 0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.05％～5％甲酸水溶液＝5％～95％ ∶95％～5％为流动相，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱 温在20～60℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每 日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项：
(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.01mg；
(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.01mg；
(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.01mg；
(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于 0.03mg。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，所述注射剂含量的测试方法应包括以下全部或部分 内容：
a、注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤 液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种对照品的甲醇 溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相 ，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈 的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟， 乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温为30℃；以外标一点 法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或 几项：
(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg；
(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg
(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg；
(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于 3.4mg；
b、注射剂中总皂苷的含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至 25ml量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸2.0ml， 摇匀，60℃水浴上加热15分钟，取出，立即以冰水浴冷却2分钟，用冰醋酸定至刻度，摇匀 ，作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白， 采用中国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计 算，待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1 计，不得少于20mg；
c、注射剂中总多糖含量测定：
单糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加氢氧化钠试液至中 性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇 ，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终 点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每 1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，由此计算单糖的含量；
总糖取待测生脉注射制剂适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加稀硫酸25ml，加热 回流4小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液( 0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10 分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液 2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液( 0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；
以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；
待测生脉注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计 ，不得少于100mg；
d、注射剂中总木脂素含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用醋 酸乙酯提取，和并提取液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇甲为 对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法， 在254nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以相当于每日用 成品量为单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇甲计，不得少于3mg；
e、注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种的含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤 液作为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素中一种或几种对照品的甲醇溶 液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水65％∶35 ％为流动相，检测波长为250nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以 相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项：
(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.4mg；
(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.05mg；
(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.10mg；
(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.55mg ；
f、注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种的含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤 液作为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′中一种或几种对照品的甲醇溶 液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90％∶10 ％为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉注射制剂以 相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项：
(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.1mg；
(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.1mg；
(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.02mg；
(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.22mg；
g、注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几种的含量测定：
取待测生脉注射制剂适量，置圆底烧瓶中，加水溶解，用3％硫酸回流4小时，取出，放 至室温，调pH至中性，用三氯甲烷提取，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜 滤过，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元中一种或几 种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 乙腈-水90∶10为流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测生脉 注射制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项：
(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于 0.06mg。
所述的生脉注射剂的质量控制方法，所述注射剂中的皂苷类、多糖类、木脂素类的全部 或部分可测成分的总含量占制剂中扣除辅料量和水分量的总固体量的25％以上。
(总固体量是指：内容物的重量减去辅料量和水分量后的重量)
与现有技术相比，本发明能更加完善的控制以红参或人参、麦冬和五味子制成的中药注 射剂产品的质量。本中药制剂的成分比较复杂，如果只用其中一、两种成分来说明其内在质 量，具有一定的片面性，更无法判断其药效的指标成分。因此本申请人制定了以红参或人参 和麦冬成分特征为主的指纹图谱和以五味子成分特征为主的指纹图谱来全面控制注射剂的质 量。但是由于生脉注射剂中的各药材之间所含的化学成分复杂，对指纹图谱的制定造成干扰 ，导致各部分指纹图谱特征不稳定，所以必须控制流动相等色谱条件，才能得到良好的指纹 图谱。也就是说，生脉制剂的指纹图谱不是将红参或人参、麦冬和五味子药材或制剂的指纹 图谱简单叠加就能得到的，由于处方中三种药材所含成分相互之间的干扰影响，导致生脉制 剂中红参或人参和麦冬部分、五味子部分的指纹图谱特征峰发生改变，而只有采用本发明的 条件，才能得到理想的指纹图谱。
通过实验证明，本发明质量控制方法对以红参或人参、麦冬和五味子制成的中药注射剂 产品的质量控制更为有效，方法精密度、稳定性均较高。
实验例1  以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱的制备
a、实验仪器、试剂及样品：
对照品：人参皂苷Rg1：中国药品生物制品检定所
b、色谱条件与系统适应性实验：
1.色谱柱的选择：
研究过程中，选用了常规的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱，分别试用了 Zorbax、Inertsil ODS-3、Diamonsil ODS(均为C18，4.6mm×200mm，5μm)三种牌号的色谱 柱，结果显示三种牌号的色谱柱均可达到较好的分离效果，其中Diamonsil ODS色谱柱分离 效果最好，柱效最高，可以达到5400(以参照物人参皂苷Rg1计算)。故最终选用Diamonsil ODS色谱柱(4.6mm×200mm，5μm)为实验研究柱。
2.流动相的选择：
研究过程中分别考察了(1)甲醇-水(20∶80)，(2)乙腈-水(10∶90)，(3)乙 腈-水(梯度洗脱)(4)A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水(80∶20)(梯度洗脱体积配 比为从0分钟至5分钟，流动相B的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升 至64％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由 64％升至80％，从65分钟至75分钟，流动相B的比例由80％降至25％)四种流动相系统。结 果显示流动相(1)条件下，峰形较差，1小时内出峰较少，仍有不少组分滞留在后出峰；流 动相(2)流动相条件下，峰形较差，分离不好；(3)条件下，峰拖尾严重，出峰不完全； 流动相(4)条件下，峰形较好，出峰完全且分布均匀，故而最终被选用。
3.检测波长的确定：
研究中在A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水(80∶20)(梯度洗脱)流动相条件下， 分别考察了在不同波段典型波长203、210、230、254下的色谱峰情况，结果显示，在203nm 下色谱峰较多，峰形较好，故最终选用203nm作为检测波长。
4.仪器、色谱柱及积分参数：
4.1仪器参数：选用了液相色谱分析领域主流配置和性能良好的Agilent 1100系列高效 液相色谱仪，Chemstation色谱工作站。色谱柱为Diamonsil ODS(4.6mm×200mm，5μm)；柱 温40℃，流速1.0ml/min。
4.2积分参数：Slope Sensitivity：1，peak width：0.05，最小峰面积为参照物(S)峰 峰面积的5％，最小峰高为S峰峰高的5％。如此设定可以避免一些很小面积的色谱峰(单峰面 积占总峰面积小于0.5％)的计算，同时保证与参照物的相关性。
5.供试品溶液的制备：
精密称取本品适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，即得。
6.参照物溶液的制备：
人参皂苷Rg1为红参或人参主要活性成分之一，其积分面积在指纹图谱中所占比例较大 且较稳定，同时兼顾中间体和药材的研究，因此选定人参皂苷Rg1作为参照物。
7.指纹图谱及技术参数：
根据10批样品制定标准指纹图谱，将供试品指纹图谱与标准指纹图谱比较，相似度均在 0.90～1.00之间。
实验例2  以五昧子成分特征为主的指纹图谱的制备
a、实验仪器、试剂及样品：
对照品：五味子醇甲：中国药品生物制品检定所。
b、色谱条件与系统适应性实验：
1.色谱柱的选择：
研究过程中，选用了常规的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱，分别试用了 Zorbax、Inertsil ODS-3、Diamonsil ODS(均为C18，250mm×4.6mm，5μm)三种牌号的色谱 柱，结果显示三种牌号的色谱柱均可达到较好的分离效果，其中Diamonsil ODS色谱柱分离 效果最好，柱效最高，可以达到5400(以参照物五昧子醇甲计算)。故最终选用Diamonsil ODS色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)为实验研究柱。
2.流动相的选择：
研究过程中分别考察了(1)甲醇-水(20∶80)，(2)乙腈-水(10∶80)，(3)乙 腈-水(梯度洗脱)(4)甲醇-水(梯度洗脱体积配比为从0分钟至6分钟，甲醇的比例为68 ％，从6分钟至8分钟，甲醇的比例由68％上升至76％，从8分钟至10分钟，甲醇的比例为76 ％，从10分钟至15分钟，甲醇的比例由76％降至68％，从15分钟至60分钟，甲醇的比例为 68％)四种流动相系统。结果显示流动相(1)条件下，峰形较差，1小时内出峰较少，仍有 不少组分滞留在后出峰；流动相(2)流动相条件下，峰形较差，分离不好；(3)条件下， 峰拖尾严重，出峰不完全；流动相(4)条件下，峰形较好，出峰完全且分布均匀，故而最 终被选用。
3.检测波长的确定：
研究中在甲醇—水(梯度洗脱)流动相条件下，分别考察了在不同波段典型波长203、 210、230、250、300nm下的色谱峰情况，结果显示，在250nm下色谱峰较多，峰形较好，故 最终选用250nm作为检测波长。
4.仪器、色谱柱及积分参数：
4.1仪器参数：选用了液相色谱分析领域主流配置和性能良好的Agilent 1100系列高效 液相色谱仪，Chemstation色谱工作站。色谱柱为Diamonsil ODS(4.6mm×200mm，5μm)；柱 温30℃，流速1.0ml/min。
4.2积分参数：Slope Sensitivity：1，peak width：0.05，最小峰面积为参照物(S)峰 峰面积的5％，最小峰高为S峰峰高的5％。如此设定可以避免一些很小面积的色谱峰(单峰面 积占总峰面积小于0.5％)的计算，同时保证与参照物的相关性。
5.供试品溶液的制备：
精密称取本品适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，即得。
6.参照物溶液的制备：
五味子醇甲为五味子中主要活性成分之一，其积分面积在指纹图谱中所占比例较大且较 稳定，同时兼顾中间体和药材的研究，因此选定五味子醇甲作为参照物。
7.指纹图谱及技术参数：
根据10批样品制定标准指纹图谱，将供试品指纹图谱与标准指纹图谱比较，相似度均在 0.90～1.00之间。
实验例3  生脉注射剂中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、 五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙的薄层色谱鉴别方法：
为了突出五味子的特征，选择了五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味 子乙素、五味子丙素、五昧子酯甲、五味子酯乙作为其特征斑点，但是由于药材中存在较多 与五味子醇甲、五味子醇乙、五昧子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子 酯乙结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下 薄层板和展开条件对五味子五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙 素、五味子酯甲、五味子酯乙进行了展开：   条件   问题   正己烷-甲苯-甲醇-水(5∶5∶10∶4)硅胶H薄层板   对照品展开至前沿   环己烷-苯-乙醇-甲酸(5∶5∶5∶3)硅胶H薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲醇(10∶10∶3)   硅胶G薄层板   对照品展开至前沿   以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯-甲醇(15∶5∶1)   硅胶GF254薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   甲苯-甲醇(10-5)硅胶H薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   苯-甲醇(15-5)硅胶G薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)   的上层溶液硅胶GF254薄层板   分离清晰，Rf值适中阴性无干扰
经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸( 15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，在此条件下，五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五 味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性 无干扰。
实验例4  生脉注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的液相色谱鉴别方法：
为了突出五味子的特征，除了薄层鉴别方法以外，选择了五味子醇甲、五味子甲素、五 味子乙素作为其特征成分，但是由于药材中存在较多与五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙 素结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下色 谱柱和流动相对五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素进行了分离：   条件   问题   甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钠(80∶20)十八烷基硅烷键合硅胶   出峰时间过快
  乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钠(40∶60)十八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   甲醇-0.05mol/L磷酸氢二钠(70∶30)八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   乙腈-0.05mol/L磷酸氢二钠(70∶30)十八烷基硅烷键合硅胶   峰形不太对称   乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾(70∶30)十八烷基硅烷键合硅胶   峰形不太对称   甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾(50∶50)八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   甲醇-水(65∶35)十八烷基硅烷键合硅胶   保留时间适中，峰行尖锐，   对称，阴性无干扰
经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，甲醇-水(65∶35)为流动相， 在此条件下，五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素保留时间适中，峰行尖锐，对称，阴性 无干扰。
实验例5  生脉注射剂中麦冬的薄层色谱鉴别方法：
为了突出麦冬的特征，选择了麦冬对照药材作为其特征斑点，但是由于药材中存在较多 结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下薄层 板和展开条件对麦冬进行了展开：   条件   问题   苯-甲醇-醋酸乙酯(50∶10∶3)硅胶GF254薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   甲苯-甲醇-醋酸甲酯(50∶10∶3)硅胶H薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   氯仿-正己烷-甲酸(50∶20∶5)硅胶G薄层板   对照品展开至前沿   二氯甲烷-环己烷(5∶2)硅胶G薄层板   对照品展开至前沿   醋酸乙酯-吡啶-丙酮(5∶3∶5)硅胶H薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   苯-甲酸乙酯-甲酸(60∶10∶2)硅胶G薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   甲苯-甲醇-冰醋酸(80∶5∶0.1)硅胶GF254薄层板   分离清晰，Rf值适中阴性无干扰
经过筛选，确定了以硅胶GF254薄层板为固定相，以甲苯-甲醇-冰醋酸(80∶5∶0.1)为 展开剂，在此条件下，主斑点的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例6  生脉注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的薄层色谱鉴别方法：
为了突出麦冬皂苷的特征，选择了麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′作为其特征斑 点，但是由于药材中存在较多与麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′结构相近、极性相似 的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下薄层板和展开条件对麦冬 进行了展开：   条件   问题   醋酸乙酯-甲醇-甲酸(10∶10∶0.5)硅胶G薄层板   对照品展开至前沿   三氯甲烷-乙醇-冰醋酸(10∶10∶0.5)硅胶H薄层板   对照品展开至前沿   醋酸乙酯-甲醇-丙酮(10∶3∶0.2)硅胶G薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   二氯甲烷-甲醇-正己烷(15∶10∶2)硅胶GF254薄层板   对照品展开至前沿   醋酸乙酯-甲醇-丁酮(20∶3∶1)硅胶GF254薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   醋酸乙酯-甲醇-环己烷(20∶8∶1)硅胶G薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   以醋酸乙酯-甲醇-水(15∶5∶1)硅胶G薄层板   分离清晰，Rf值适中阴性无干扰
经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以醋酸乙酯-甲醇-水(15∶5∶1)为展开 剂，在此条件下，麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′斑点的Rf值适中，和其它斑点分离 清晰，阴性无干扰。
实验例7  生脉注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的液相色谱鉴别方法：
为了突出麦冬皂苷的特征，除了薄层鉴别方法以外，选择了麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦 冬皂苷D′作为其特征成分，但是由于药材中存在较多与麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷 D′结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下 色谱柱和流动相对麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′进行了分离：   条件   问题   甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钠(99∶1)十八烷基硅烷键合硅胶   出峰时间过快   乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠(95∶5)十八烷基硅烷键合硅胶   出峰时间过快   甲醇-0.02mol/L磷酸氢二钠(95∶5)八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾(95∶5)十八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   乙腈-0.02mol/L磷酸氢二钠(95∶5)八烷基硅烷键合硅胶   峰有分叉，   乙腈-四氢呋喃-1％冰醋酸(80∶10∶10)十八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   乙腈-水(90∶10)十八烷基硅烷键合硅胶   保留时间适中，峰行尖锐   ，对称，阴性无干扰
经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，乙腈-水(90∶10)为流动相， 在此条件下，麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′保留时间适中，峰行尖锐，对称，阴性 无干扰。
实验例8  生脉注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的薄层色谱鉴别方法 ：
为了突出麦冬皂苷元的特征，选择了假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元作为其 特征斑点，但是由于药材中存在较多与假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元结构相近 、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下薄层板和展开 条件对麦冬进行了展开：   条件   问题   甲醇-氯仿-冰醋酸(5∶3∶2)硅胶G薄层板   对照品展开至前沿   正己烷-醋酸乙酯-冰醋酸(5∶3∶1)硅胶H薄层板   对照品展开至前沿   正己烷-甲酸乙酯(3∶2)硅胶GF254薄层板   阴性有干扰   甲醇-醋酸乙酯-甲酸(2∶1∶1)硅胶G薄层板   阴性有干扰   甲醇-醋酸乙酯-丙酮(1∶1∶1)硅胶H薄层板   阴性有干扰   甲醇-甲酸乙酯(2∶1.5)硅胶H薄层板   阴性有干扰   正己烷-醋酸乙酯-水(1∶1∶1)硅胶G薄层板   分离清晰，Rf值适中阴性无干扰
经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以正己烷-醋酸乙酯-水(1∶1∶1)为展 开剂，在此条件下，假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的Rf值适中，和其它斑点分 离清晰，阴性无干扰。
实验例9  生脉注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的液相色谱鉴别方法
为了突出麦冬皂苷元的特征，除了薄层鉴别方法以外，选择了假叶树皂苷元、薯蓣皂苷 元、鲁斯可皂苷元作为其特征成分，但是由于药材中存在较多与假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元 、鲁斯可皂苷元结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们 筛选了以下色谱柱和流动相对假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元进行了分离：   条件   问题   甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钠(99∶1)十八烷基硅烷键合硅胶   出峰时间过快   乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠(95∶5)十八烷基硅烷键合硅胶   出峰时间过快   甲醇-0.05mol/L磷酸氢二钠(95∶5)八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   甲醇-0.05mol/L磷酸氢二钠(95∶5)十八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   乙腈-四氢呋喃-1％冰醋酸水溶液(90∶5∶5)八烷基硅烷键合硅胶   峰有分叉   乙腈-四氢呋喃0.5％磷酸酸水溶液(90∶5∶5)十八烷基硅烷键合   硅胶   阴性有干扰   乙腈-水(90∶10)十八烷基硅烷键合硅胶   保留时间适中，峰行尖   锐，对称，阴性无干扰
经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，乙腈-水(90∶10)为流动相， 在此条件下，麦假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元保留时间适中，峰行尖锐，对称 ，阴性无干扰。
实验例10  生脉注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf的薄层 色谱鉴别方法
为了突出红参或人参的特征，选择了人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂 苷Rf作为其特征斑点，但是由于药材中存在较多与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷 Re、人参皂苷Rf结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们 筛选了以下薄层板和展开条件对麦冬进行了展开：   条件   问题   氯仿-正己烷-水(20∶60∶10)10℃以下放置的下层溶液   硅胶G薄层板   对照品展开至前沿   二氯甲烷-甲酸乙酯-环己烷(10∶1∶5)硅胶H薄层板   对照品展开至前沿   氯仿-丁酮-甲醇(15∶40∶22)硅胶G薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   氯仿-醋酸乙酯-水(10∶40∶15)10℃以下放置的下层溶液   硅胶G薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   正丁醇-甲酸乙酯-水(5∶1∶5)上层溶液硅胶G薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   异丙醇-甲酸乙酯-水(2∶1.5∶0.5)上层溶液硅胶H薄层板   对照品未分开，阴性有干扰   氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置   的下层溶液硅胶G薄层板   分离清晰，Rf值适中阴性无干   扰
经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22 ∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，在此条件下，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参 皂苷Re、人参皂苷Rf的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例11  生脉注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的液相色谱鉴别方法
为了突出红参或人参的特征，除了薄层鉴别方法以外，选择了人参皂苷Rg1、人参皂苷 Rb1、人参皂苷Re作为其特征成分，但是由于药材中存在较多与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、 人参皂苷Re结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选 了以下色谱柱和流动相对人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re进行了分离：   条件   问题   甲醇-四氢呋喃-水(85∶5∶10)十八烷基硅烷键合硅胶   出峰时间过快   乙腈-四氢呋喃水(90∶5∶5)十八烷基硅烷键合硅胶   出峰时间过快
  甲醇-0.005mol/L磷酸二氢钠(80∶20)八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   甲醇-0.02mol/L磷酸氢二钠(80∶20)十八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   乙腈-0.005mol/L磷酸二氢钠((90∶10)八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾((85∶15)十八烷基硅烷键合硅胶   阴性有干扰   乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的   比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从   55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的   比例由29％升至40％十八烷基硅烷键合硅胶   保留时间适中，峰行   尖锐，对称，阴性无   干扰
经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，乙腈-水为流动相，梯度洗脱， 溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％ 上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由 29％升至40％，在此条件下，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re保留时间适中，峰行 尖锐，对称，阴性无干扰。
实验例12  生脉注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量测定方法
1.仪器与试药(1)仪器：Agilent1100高效液相色谱仪，chemstationsys工作站。 TU-1800SPC紫外分光光度计。
(2)试药：人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re：中国药品生物制品检定所；
2.检测波长的选择：精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re，分置10ml量瓶 中，加甲醇稀释制成每1ml含0.5mg的溶液，在200-400nm波长范围扫描。人参皂苷Rg1、人参 皂苷Rb1、人参皂苷Re均在203nm处有最大吸收，因此选择203nm作为含量测定的检测波长。
3.色谱条件：Dikma ODS(4.6mm×250mm，5um)；流动相：乙腈-水为流动相，梯度洗 脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由 19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比 例由29％升至40％；检测波长为203nm；流速：1.0ml/min。
4.对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re适量，精密称定，加 甲醇制成1ml含人参皂苷Rg1 0.30mg，人参皂苷Rb1 0.30mg，人参皂苷Re 0.2mg的混合溶 液。
5.供试品溶液的制备：取装量差异项下本品5瓶，取内容物，混匀，从中取约0.5g，精 密称定，置5ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
在此条件下，阴性样品不干扰样品中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re的测定， 且分离度好。
6.人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re的线性关系  精密称取人参皂苷 Rg110.24mg、人参皂苷Rb110.09mg、人参皂苷Re7.54mg，共置10ml量瓶中，加流动相定至刻 度，摇匀，作为对照品溶液(每1ml中含人参皂苷Rg1 1.024mg，人参皂苷Rb1 1.009mg，含 人参皂苷Re0.754mg)，精密量取2.5ml，置10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作为对照 品稀释溶液。(每1ml中含人参皂苷Rg1 0.256mg，含人参皂苷Rb1 0.25225mg，含人参皂苷 Re0.1885mg)精密吸取对照品溶液3μl、6μl、10μl；对照品稀释溶液2μl、5μl、10μ l；注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的量为横坐标做图，绘 制标准曲线。
          人参皂苷Rg1线性关系   编号   人参皂苷Rg1(μg)   峰面积   1   0.512   150.63   2   1.280   475.54   3   2.560   890.23   4   3.072   1058.85   5   6.144   2107.02   6   10.24   3538.96
回归方程：Y＝345.01X+1.20；
决定系数：γ＝0.9996；
人参皂苷Rg1在0.512～10.240μg范围内线性关系良好。
        人参皂苷Rb1线性关系   编号   人参皂苷Rb1(μg)   峰面积   1   0.5045   142.08   2   1.2613   353.07   3   2.5225   715.48   4   3.0270   860.21   5   6.0540   1709.14   6   10.090   2855.26
回归方程：Y＝282.95X-0.44；
决定系数：γ＝0.9999；
人参皂苷Rb1在0.5045～10.090μg范围内线性关系良好。
    人参皂苷Re线性关系   编号  人参皂苷Re(μg)   峰面积   1   0.3770   184.37   2   0.9425   466.91   3   1.8850   928.26   4   2.2620   1104.76   5   4.5240   2216.15   6   7.5400   3698.24
回归方程：Y＝490.12X+1.11；
决定系数：γ＝0.9999；
人参皂苷Re在0.3770～7.5400μg范围内线性关系良好。
7.对照品精密度和稳定性试验精密吸取标准曲线项下人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg1和人 参皂苷Re对照品稀释溶液(每1ml中含人参皂苷Rg1 0.256mg，参皂苷Rb1 0.25225mg，含人 参皂苷Re0.1885mg)10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，在0、6、12、24、48小时进样测 定。
                           对照品溶液精密度试验  测试时间(h)   0   6   12   24   48   平均  RSD(％)  人参皂苷Rg1   884.26   893.71   899.04   892.35   895.89   893.05   0.62  人参皂苷Rb1   726.23   722.57   724.92   725.86   722.78   724.47   0.24  人参皂苷Re   921.63   922.44   925.36   917.03   930.58   923.41   0.54
结果表明，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re对照品溶液精密度和稳定性良好。
8供试品溶液稳定性试验取  重量差异项下本品5瓶，取内容物，混匀，从中取约 0.5g，精密称定，置5ml量瓶中，加流动相使溶解并定至刻度，摇匀，精密吸取10μl，注入 液相色谱仪，分别在0、6、12、24、48小时进样测定。
                           供试品溶液稳定性试验结果  测试时间(h)   0   6   12   24   48   均值  RSD(％)  人参皂苷Rg1  (mg/瓶)   1.06   1.02   1.04   1.03   1.05   1.04  1.52
 人参皂苷Rb1  (mg/瓶)   0.99   1.00   0.97   1.01   0.98   0.99   1.60  人参皂苷Re  (mg/瓶)   0.52   0.54   0.53   0.53   0.54   0.53   1.57
结果表明，供试品溶液稳定性良好。
9.重复性试验  取本品装量差异项下粉针5瓶，取内容物，研细，从中取约0.5g(共5份 )，精密称定，分置5ml量瓶中，加流动相使溶解并定至刻度，摇匀，精密吸取10μl，注入 液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
                         重复性试验   试验编号   1   2   3   4   5   均值  RSD(％)  人参皂苷Rg1  (mg/瓶)   1.08   1.11   1.07   1.10   1.09   1.09  1.45  人参皂苷Rb1  (mg/瓶)   1.02   1.04   1.01   1.03   1.02   1.02  1.11  人参皂苷Re  (mg/瓶)   0.55   0.54   0.54   0.55   0.53   0.54   1.54
10.加样回收率试验  采用加样回收法，取重量差异项下本品，取丙容物，混匀，从中 取约250mg(共5份)，精密称定，分置5ml量瓶中；精密称取人参皂苷Rg1 11.58mg，人参皂 苷Rb1 10.84mg，人参皂苷Re5.76mg，共置25ml量瓶中，加流动相适量超声处理使溶解，取 出，放至室温，加流动相至刻度，摇匀，精密量取1ml(共5份)，分置上述5ml量瓶中，加 流动相至刻度，摇匀，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
生脉注射剂中人参皂苷Rg1含量：0.1812％；
生脉注射剂中人参皂苷Rb1含量：0.1695％；
生脉注射剂中人参皂苷Re含量：0.0897％；
                               人参皂苷Rg1加样回收率试验   编号   供试品称量(mg)   供试品中纯品量   (mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   246.93   0.4474   0.4632   0.8974   97.15   2   255.12   0.4623   0.4632   0.9173   98.23   3   253.08   0.4586   0.4632   0.9055   96.49
 4   249.47   0.4520   0.4632   0.9097   98.81  5   261.25   0.4734   0.4632   0.9270   97.94
人参皂苷Rg1平均回收率＝97.72％；RSD＝0.93％
                   人参皂苷Rb1加样回收率试验   编号   供试品称量(mg)   供试品中纯品量   (mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   246.93   0.4185   0.4336   0.8446   98.25   2   255.12   0.4324   0.4336   0.8630   99.31   3   253.08   0.4290   0.4336   0.8541   98.04   4   249.47   0.4229   0.4336   0.8503   98.57   5   261.25   0.4428   0.4336   0.8601   96.23
人参皂苷Rb1平均回收率＝98.08％；RSD＝1.16％
                        人参皂苷Re加样回收率试验   编号   供试品称量(mg)   供试品中纯品量   (mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   246.93   0.2215   0.2304   0.4455   97.21   2   255.12   0.2288   0.2304   0.4500   95.98   3   253.08   0.2270   0.2304   0.4473   95.62   4   249.47   0.2238   0.2304   0.4503   98.33   5   261.25   0.2343   0.2304   0.4590   97.51
人参皂苷Re平均回收率＝96.93％；RSD＝1.15％
11.三批中试样品含量测定
取注射用生脉样品三批，按正文所述方法处理。
                      三批样品含量测定结果   批号   人参皂苷Rg1(mg/瓶)   人参皂苷Rb1(mg/瓶)   人参皂苷Re(mg/瓶)   1   1.12   0.97   0.55   2   1.08   1.03   0.52   3   1.14   1.06   0.58
从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、 人参皂苷Re的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例13  生脉注射剂中人参总皂苷含量测定方法
仪器、试药(1)仪器：普析通TU-1810SPC紫外/可见分光光度仪 SARTORIUS BP211D电子分析天平
(2)试药：香草醛  分析纯  天津市光复精细化工研究所
甲醇  色谱纯  J.T.Baker
冰醋酸  分析纯  上海试剂一厂
高氯酸  分析纯  天津市鑫源化工厂
2检测波长的选择  精密称取人参皂苷Rg1 6.11mg，置100ml量瓶中，加适量甲醇超声 处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取1.2ml，置10ml具塞 试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀 ，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀 ，在700～400nm波长范围内进行扫描，结果表明，人参皂苷Rg1在547nm处有最大吸收，空白 无干扰，因此选择547nm为分光光度法测定生脉注射剂中人参总皂苷的检测波长。
3线性关系的考察  精密称取人参皂苷Rg1对照品6.85mg，置100ml量瓶中，加甲醇适 量超声处理(功率250W，频率33KHZ)使溶解，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，精 密量取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml，分置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加 入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立 即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法( 中国药典2000年版一部附录VA)，在547nm的波长处测定吸收度。以吸收度为纵坐标，人参 皂苷Rg1的量(μg)为横坐标，绘制标准曲线。
回归方程Y＝0.0049X-0.0077；r＝0.999
人参皂苷Rg1在27.4～137.0μg范围线性良好。
人参皂苷Rg1标准曲线测定数据   编号   人参皂苷Rg1(μg)   吸收度   1   27.4   0.121   2   54.8   0.261   3   82.2   0.404   4   109.6   0.534   5   137.0   0.656
4精密度试验  精密量取人参皂苷Rg1对照品溶液(0.0685mg/ml)1.2ml，置10ml具塞 试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀 ，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀 ，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版-部附录VA)，在547nm的波长处 测定吸收度，连续测定5次。
                                    精密度实验   编号   1   2   3   4   5   X平均  RSD％   吸光度   0.429   0.426   0.426   0.425   0.424   0.426  0.44
5稳定性试验
5.1对照品溶液的稳定性试验  精密量取人参皂苷Rg1对照品溶液(0.0727mg/ml) 1.2ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml， 高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加 入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VA) ，在547nm的波长处测定吸收度，分别在0、10、20、40、60分钟时测定。
                                   对照品溶液稳定性实验  时间(min)   0   10   20   40   60   均值  RSD％  吸光度   0.453   0.453   0.450   0.451   0.449   0.451  0.40
5.2供试品溶液的稳定性实验  取本品装量差异项下粉针5瓶，取内容物，研细，从中 取约100mg，精密称定，置10ml量瓶中，加水适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取 0.2ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml， 高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加 入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VA) ，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，分别在0、10、20、40、60分钟时 测定。
                                   供试品溶液稳定性实验   时间(min)   0   10   20  40   60   均值  RSD％   含量(mg/瓶)   22.18   21.74   22.03  21.59   22.55   22.02  1.71
6重复性试验  取本品装量差异项下粉针5瓶，取内容物，研细，从中取约100mg(共 5份)，分置10ml量瓶中，加水适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取0.2ml，分置10ml具 塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇 匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇 匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VA)，在547nm的波长 处测定吸收度，以外标一点法进行计算，即得。
                          重复性实验   编号   1   2   3   4   5   X平均  RSD％   含量(mg/瓶)   22.05   21.77   21.62   22.49   22.38   22.06  1.70
7回收率试验  采用加样回收法，取本品装量差异项下粉针5瓶，取内容物，研细，从 中取约50mg(共5份)，精密称定，分置10ml量瓶中；另取人参皂苷Rg1对照品约1.8mg(共 5份)，精密称定，分置上述10ml量瓶中，加水适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取 0.2ml，置10ml具塞试管中，按正文测定法项下进行操作，以随行溶剂为空白，依法测定吸 收度，从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂苷Rg1的含量，以外标一点法进行计算，即得 。
生脉注射剂中总皂苷的含量：3.666％
                     人参总皂苷加样回收率实验   编号   供试品称量   (mg)   供试品中总皂苷量   (mg)  人参皂苷Rg1加入量  (mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   50.24   1.842   1.77   3.581   98.25   2   47.81   1.753   1.92   3.628   97.66   3   55.23   2.025   2.13   4.140   99.32   4   50.94   1.867   2.04   3.876   98.47   5   51.67   1.894   1.86   3.697   96.93
平均回收率＝99.53％    RSD＝1.88％
8三批中试样品含量测定
取本品样品三批，按正文所述方法处理。
   三批样品含量测定结果   批号   人参总皂苷(mg/瓶)   1   22.17   2   22.39   3   21.94
从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射剂中人参总皂苷的含量精密度、稳 定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例14  生脉注射剂中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量测定方法
1.仪器与试药
(1)仪器：Agilent1100高效液相色谱仪，chemstationsys工作站；TU-1800SPC紫外分 光光度计；AE240电子天平。
(2)试药：五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素：中国药品生物制品检定所；
2.检测波长的选择  精密称取五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品适量，分别 加甲醇稀释至刻度，摇匀，得每1ml分别含五味子醇甲0.10mg，五味子甲素0.10mg，五味 子乙素0.10mg的溶液，分别在200-400nm波长范围扫描。结果表明：五味子醇甲、五味子甲 素、五味子乙素均在250nm处有最大吸收，因此选择250nm作为含量测定的检测波长。
3.色谱条件：Dikma ODS(4.6×250mm，5um)；流动相：甲醇-水(65∶35)为流动相 ；检测波长为250nm；流速：1.0ml/min。
4.系统适用性试验
4.1对照品溶液的制备  精密称取五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品适量， 加甲醇制成每1ml含五味子醇甲0.02mg，五味子甲素0.003mg，五味子乙素0.005mg的对照品 混合溶液，即得。
4.2供试品溶液的制备  取生脉注射液作为供试品溶液。
4.3阴性供试品溶液的制备  称取不含五味子的阴性样品，照供试品溶液的制备方法制 备，作为阴性供试品溶液。
分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪， 测定，记录色谱图。由图可知，供试品中五味子醇甲、五味子乙素、五味子甲素峰分离良好 ，与相近峰分离清晰，完全，阴性供试品中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素峰无干扰 。
5.线性关系考察  精密称取五味子醇甲对照品10.27mg，五味子甲素对照品10.03mg，五 味子乙素对照品9.86mg，分置50ml量瓶中，分别加甲醇适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密 量取五味子醇甲对照品溶液2ml，五味子甲素对照品溶液0.3ml，五味子乙素对照品溶液 0.6ml，共置10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，精密吸取2μl、4μl、6μl、8μl、10 μl，注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，进样量(μg)为横坐标做图，绘制标准曲线。
五味子醇甲线性关系考察   编号  五味子醇甲(μg)   峰面积   1   0.08216   121.45
 2   0.16432   238.71  3   0.24648   362.58  4   0.32864   487.62  5   0.41080   601.91
回归方程：Y＝1472.5X-0.495；
决定系数：γ＝0.9998；
五味子醇甲在0.08216～0.4108μg范围内线性关系良好。
    五味子甲素线性关系考察   编号  五味子甲素(μg)   峰面积   1   0.012036   121.36   2   0.024072   245.71   3   0.036108   371.96   4   0.048144   494.18   5   0.060180   610.42
回归方程：Y＝10191X+0.749；
决定系数：γ＝0.9999；
五味子甲素在0.012036～0.060180μg范围内线性关系良好。
    五味子乙素线性关系考察   编号  五味子乙素(μg)   峰面积   1   0.023664   184.61   2   0.047328   381.09   3   0.070992   561.82   4   0.094656   745.96   5   0.118320   940.83
回归方程：Y＝7993.2X-0.331；
决定系数：γ＝0.9999；
五味子乙素在0.023664～0.11832μg范围内线性关系良好。
6.精密度试验  精密吸取对照品混合溶液(每1ml分别含五味子醇甲20.54μg，五味子 甲素3.009μg，五味子乙素5.916μg)10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，连续测定5次 ，考察对照品溶液的精密度。
                             对照品精密度试验   试验次数   1   2   3   4   5   均值  RSD(％)   五昧子醇甲   305.17   311.24   309.33   315.27   314.62   311.13  1.33   五味子甲素   315.47   320.09   322.18   318.45   312.22   317.68  1.23   五味子乙素   474.90   466.33   470.15   477.36   480.42   474.83  1.19
结果表明，对照品溶液精密度良好。
7.稳定性试验精密吸取生脉注射液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、6、12、24、 48小时进样，以外标一点法进行计算，即得。
                            对照品溶液稳定性试验   时间(h)   0   6   12   24   48   均值  RSD(％)   五味子醇甲(mg/支)   0.2514   0.2547   0.2533   0.2529   0.2568   0.2538  0.80   五味子甲素(mg/支)   0.0338   0.0331   0.0336   0.0341   0.0339   0.0337  1.13   五味子乙素(mg/支)   0.0658   0.0642   0.0666   0.0675   0.0651   0.0658  1.95
结果表明，对照品溶液稳定性良好。
8.重复性试验  精密吸取生脉注射液10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算 ，即得。
                            重复性试验   编号   1   2   3   4   5   均值  RSD(％)   五味子醇甲(mg/支)   0.2528   0.2503   0.2519   0.2542   0.2581   0.2535  1.17   五味子甲素(mg/支)   0.0342   0.0335   0.0351   0.0346   0.0347   0.0344  1.76   五味子乙素(mg/支)   0.0662   0.0657   0.0682   0.0673   0.0665   0.0668  1.47
结果表明，重复性良好。
9.加样回收率试验  采用加样回收法，精密量取生脉注射液5ml，分置10ml量瓶中；精 密量取对照品混合溶液(每1ml分别含五味子醇甲0.1044mg，五味子甲素0.01446mg，五味子 乙素0.02552mg)1ml(共5份)，分置上述10ml量瓶中，加甲醇约6ml，振摇，加甲醇至刻度 ，摇匀，滤过，精密吸取续滤液10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
生脉注射液中五味子醇甲含量：0.2535mg/支；
生脉注射液中五味子甲素含量：0.0344mg/支；
生脉注射液中五味子乙素含量：0.0668mg/支。
            五味子醇甲加样回收率试验
  编号   供试品中纯品量(mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   0.12675   0.1044   0.2293   98.25   2   0.12675   0.1044   0.2301   99.03   3   0.12675   0.1044   0.2306   99.47   4   0.12675   0.1044   0.2282   97.19   5   0.12675   0.1044   0.2307   99.56
五味子醇甲平均回收率＝98.70％；RSD＝1.00％。
                        五味子甲素加样回收率试验   编号   供试品中纯品量(mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   0.0172   0.01446   0.03115   96.48   2   0.0172   0.01446   0.03125   97.15   3   0.0172   0.01446   0.03152   99.01   4   0.0172   0.01446   0.03128   97.34   5   0.0172   0.01446   0.03141   98.25
五味子甲素平均回收率＝97.65％；RSD＝1.01％。
                        五味子乙素加样回收率试验   编号   供试品中纯品量(mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   0.0334   0.02552   0.05779   95.59   2   0.0334   0.02552   0.05802   96.18   3   0.0334   0.02552   0.05783   95.74   4   0.0334   0.02552   0.05849   98.32   5   0.0334   0.02552   0.05822   97.26
五味子乙素平均回收率＝96.62％；RSD＝1.19％。
10.三批中试样品含量测定
取本品样品三批，按正文所述方法处理。
            三批样品含量测定结果   批号   1   2   3   五味子醇甲(mg/支)   0.2541   0.2551   0.2536   五味子甲素(mg/支)   0.0351   0.0344   0.0352   五味子乙素(mg/支)   0.0664   0.0672   0.0668
从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射液中五味子醇甲、五味子甲素、五 味子乙素的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例15  生脉注射剂中总木脂素的含量测定
1仪器与试药
(1)主要仪器：
紫外分光光度计  TU-1810SPC  北京普析通用仪器有限责任公司
电子分析天平    BP211D      SARTORIUS
超声波清洗机    KQ250DB     昆山市超声仪器有限公司
(2)试药： 
五味子醇甲    中国药品生物制品检定所
乙醇          分析纯            阿托兹精细化工有限公司
2检测波长的选择  取五味子醇甲对照品，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，作为对 照品溶液。量取生脉注射液4ml，置50ml量瓶中，加甲醇溶液适量超声处理(功率250W，频 率33KHz)使溶解，取出，放至室温，用甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供 试品溶液。吸取五味子醇甲对照品溶液，供试品溶液，按正文总木脂素测定项下拟定的方法 ，在200～400nm波长范围内进行扫描，结果表明，对照品溶液与供试品溶液均在250nm有最 大吸收，溶剂无干扰，因此选择250nm作为分光光度法测定生脉注射液中总木脂素含量的检 测波长。
3对照品溶液的制备  取五味子醇甲对照品15mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶液适量超 声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，加甲醇溶液至刻度，摇匀，即 得(每1ml中含五味子醇甲0.3mg)。
4标准曲线的制备  精密量取对照品溶液(C＝0.2908mg/ml)0.1ml，0.2ml，0.4ml， 0.6ml，0.8ml、1.0ml，分置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以随行溶剂为空白，照分 光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在250nm波长处测定吸收度，以浓度(μ g/ml)为横坐标，吸收度为纵坐标做图，绘制标准曲线。
      总木脂素标准曲线测定结果   编号   五味子醇甲浓度(μg/ml)   吸收度   1   2.908   0.118   2   5.816   0.245   3   11.632   0.491
 4   17.448   0.732  5   23.264   0.971  6   29.080   1.217
回归方程：Y＝0.0418x+0.0003；
相关系数：γ＝0.9999；
结果表明：五味子醇甲在2.908～29.080μg/ml范围内线性良好。
经计算，五味子醇甲的标准曲线过原点，因此选用外标一点法测定生脉注射剂中总木脂 素的含量。
5精密度试验  精密吸取五味子醇甲对照品溶液(浓度：0.2908mg/ml)0.6ml，置 10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版 一部附录VB)，在250nm波长处测定吸收度，重复测定5次。
                              精密度试验   编号   1   2   3   4   5   均值  RSD(％)   吸收度   0.732   0.733   0.731   0.734   0.732   0.732  0.16
结果表明，对照品溶液精密度良好。
6稳定性试验
6.1对照品溶液稳定性试验  精密吸取五味子醇甲对照品溶液(浓度：0.2908mg/ml) 0.6ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药 典2000年版一部附录VB)，在250nm波长处测定吸收度，分别在0、2、4、8、12小时重复测 定一次。
                              对照品溶液稳定性试验  时间(h)   0   2   4   8   12   均值  RSD(％)  吸收度   0.732   0.733   0.731   0.734   0.732   0.732  0.16
结果表明，对照品溶液稳定性良好。
6.2供试品溶液稳定性试验  精密量取生脉注射液4ml，置50ml量瓶中，加甲醇溶液适 量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，用甲醇溶液稀释至刻度， 摇匀，滤过，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在 250nm波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，分别在0、2、4、8、12小时重复测定一 次。
                              供试品溶液稳定性试验
  时间(h)   0   2   4   8   12   均值  RSD(％)   含量(mg/支)   2.03   2.05   2.02   2.04   2.03   2.03  0.56
结果表明，供试品溶液在30min内稳定性良好。
7重复性试验  精密量取生脉注射液4ml(共5份)，分置50ml量瓶中，加甲醇溶液适 量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，用甲醇溶液稀释至刻度， 摇匀，滤过，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在 250nm波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，即得。
                                重复性试验   编号   1   2   3   4   5   均值  RSD(％)   含量(mg/支)   2.06   2.01   2.04   2.06   2.05   2.04  1.01
结果表明，重复性良好。
8加样回收率试验  采用加样回收法，精密量取生脉注射液2ml(共5份)，精密称定 ，分置50ml量瓶中，精密量取对照品溶液(C＝0.2722mg/ml)1.5ml，分置上述50ml量瓶中， 加甲醇溶液适量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，用甲醇溶液 稀释至刻度，摇匀，滤过，在250nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，即得。
生脉注射液中总木脂素的含量为：2.04mg/支。
                                加样回收率试验   编号   供试品中总木脂素含量(mg)   五味子醇甲加入量(mg)   测量值(mg)  回收率(％  )   1   0.408   0.4083   0.8060   97.47   2   0.408   0.4083   0.8087   98.13   3   0.408   0.4083   0.8024   96.60   4   0.408   0.4083   0.8125   99.08   5   0.408   0.4083   0.8092   98.26
平均回收率＝97.91％，RSD＝0.95％。
9样品的含量测定  取本品三批样品，按照正文供试品溶液的制备和测定法项下的操 作，测定样品含量。
总木脂素的含量测定   批号   总木脂素含量(mg/支)   1   2.09
 2   2.07  3   2.01
从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射剂中总木脂素的含量精密度、稳定 性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例16  生脉注射剂中总多糖的含量测定方法
单糖  取装量差异项下本品5瓶，取内容物，混匀，从中取约500mg，精密称定，置碘量 瓶中，加蒸馏水60ml使溶解，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇 匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml， 立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色 消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无 水葡萄糖(C6H12O6)，由此折算出每瓶单糖的含量。
总糖  取装量差异项下本品5瓶，取内容物，混匀，从中取约500mg，精密称定，置碘量 瓶中，加蒸馏水20ml使溶解，加稀硫酸25ml，加热回流4小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴 ，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液 4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠 滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白 试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖(C6H12O6)，以此计 算出样品每瓶中总糖的含量。
标准曲线  精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品50.24mg、101.87mg、 149.58mg、201.36mg、252.81mg、300.79mg，分置碘量瓶中，加蒸馏水60ml使溶解，加氢氧 化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边 加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液 滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校 正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖(C6H12O6)。以样品消耗滴 定液体积(ml)为横坐标，以无水葡萄糖的量(mg)为纵坐标做图，绘制标准曲线。
               无水葡萄糖标准曲线   编号   样品滴定液消耗体积(ml)   无水葡萄糖(mg)   1   5.65   50.24   2   11.25   101.87   3   16.85   149.58
 4   22.65   201.36  5   28.25   252.81  6   33.74   300.79
回归方程：Y＝8.9093x+0.3139；
相关系数：γ＝0.9999；
结果表明：无水葡萄糖在50.24～300.79μg范围内线性良好。
经计算，无水葡萄糖的标准曲线过原点，因此选用外标一点法测定生脉注射剂中总多糖 的含量。
重复性实验  取装量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约500mg(5份)，按正文 测定法项下操作，测定，即得。
                               重复性实验   编号   称量(mg)   总糖(mg/瓶)   单糖(mg/瓶)   总多糖(mg/瓶)  1   470.54   172.65   85.64   87.01  2   502.03   177.84   89.21   88.63  3   512.39   171.29   86.37   84.92  4   502.47   176.01   88.59   87.42  5   508.61   174.39   86.87   87.52  均值   -   174.44   87.34   87.10  RSD(％)   -   1.49   1.73   1.56
回收率实验  采用加样回收法，取装量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约 250mg(6份)，分置碘量瓶中；取在105℃干燥至恒重的无水葡萄糖约35mg，精密称定，分 置上述碘量瓶中，加蒸馏水60ml使溶解，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液( 0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10 分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液 2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L )相当于9.008mg的无水葡萄糖(C6H12O6)。
生脉注射剂单糖含量：87.34mg/瓶。
                         无水葡萄糖加样回收率试验   编号   供试品称量   (mg)   供试品中单糖量   (mg)   无水葡萄糖加入量   (mg)   测量值(mg)   回收率(％)
 1   244.86   35.54   34.92   70.12   99.03  2   250.17   36.31   37.26   72.91   98.23  3   239.64   34.79   35.84   70.33   99.16  4   255.73   37.12   36.11   71.94   96.43  5   260.92   37.87   35.58   72.93   98.54  6   251.53   36.51   34.79   70.82   98.62
平均回收率＝98.34％；RSD＝1.01％。
样品的含量测定  取本品中试样品三批，按正文供试品溶液的制备和测定法项下操作。
   总多糖含量测定结果   批号   总多糖含量(mg/瓶)   1   84.93   2   90.22   3   87.65
从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射剂中总多糖的含量精密度、稳定性 和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例17  生脉注射剂中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的含量测定方法
1.仪器与试药
(1)仪器：SHIMADZU 2010Aht高效液相色谱仪；TU-1810SPC紫外分光光度计； SARTORIUS BP211D电子分析天平。
(2)试药：麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′
2.检测波长的选择  精密称取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品适量，分别 加甲醇制成每1ml各含0.1mg的溶液，分别在200-400nm波长范围扫描。结果表明：麦冬皂苷 B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′均在203nm处有最大吸收，因此选择203nm作为含量测定的检测 波长。
3.色谱条件：Dikma ODS(4.6×250mm，5um)；流动相：乙腈-水(90∶10)为流动相 ；检测波长为203nm；流速：1.0ml/min。
4.系统适用性试验
4.1对照品溶液的制备  精密称取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品适量， 加甲醇制成每1ml含麦冬皂苷B 0.007mg，麦冬皂苷D 0.007mg，麦冬皂苷D′0.002mg的对照 品混合溶液，即得。
4.2供试品溶液的制备  取生脉注射液作为供试品溶液。
4.3阴性供试品溶液的制备  称取不含麦冬的阴性样品，照供试品溶液的制备方法制备 ，作为阴性供试品溶液。
分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测 定，记录色谱图。由图可知，供试品中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′峰分离良好， 与相近峰分离清晰，完全，阴性供试品中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′峰无干扰。
5.线性关系考察  精密称取麦冬皂苷B对照品10.14mg，麦冬皂苷D对照品10.06mg，麦冬 皂苷D′对照品6.59mg，分置50ml量瓶中，分别加甲醇适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密 量取麦冬皂苷B对照品溶液0.7ml，麦冬皂苷D对照品溶液0.7ml，麦冬皂苷D′对照品溶液 0.4ml，共置10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，精密吸取2μl、4μl、6μl、8μl、10 μl，注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，进样量(μg)为横坐标做图，绘制标准曲线。
    麦冬皂苷B线性关系考察   编号   麦冬皂苷B(μg)   峰面积   1   0.028392   21894   2   0.056784   43805   3   0.085176   66601   4   0.113568   88329   5   0.141960   109588
回归方程：Y＝774556.21X+69.80；
决定系数：γ＝0.9999；
麦冬皂苷B在0.028392～0.14196μg范围内线性关系良好。
        麦冬皂苷D线性关系考察   编号   麦冬皂苷D(μg)   峰面积   1   0.028168   18411   2   0.056336   36824   3   0.084504   55119   4   0.112672   73802   5   0.140840   92108
回归方程：Y＝654544.16X-58.80；
决定系数：γ＝0.9999；
麦冬皂苷D在0.028168～0.14084μg范围内线性关系良好。
    麦冬皂苷D′线性关系考察   编号   麦冬皂苷D′(μg)   峰面积   1   0.010544   18859   2   0.021088   37804   3   0.031632   56821   4   0.042176   75621   5   0.052720   94338
回归方程：Y＝1790354.70X+56.10；
决定系数：γ＝0.9999；
麦冬皂苷D′在0.010544～0.052720μg范围内线性关系良好。
6.精密度试验  精密吸取对照品混合溶液(每1ml分别含麦冬皂苷B8.112μg，麦冬皂苷 D8.048μg，麦冬皂苷D′2.636μg)10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，连续测定5次， 考察对照品溶液的精密度。
                        对照品精密度试验  试验次数  1  2  3  4  5  均值  RSD(％)  麦冬皂苷B  63356  64187  62195  63314  62868  63184  1.16  麦冬皂苷D  51196  52137  53268  52571  53094  52453  1.59  麦冬皂苷D′  47615  45508  46309  47703  46925  46672  1.71
结果表明，对照品溶液精密度良好。
7.稳定性试验  精密吸取生脉注射液10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算 ，即得，分别在0、6、12、24、48小时进样测定。
                            对照品溶液稳定性试验   时间(h)   0   6   12   24   48   均值  RSD(％)   麦冬皂苷B(mg/支)   0.0814   0.0822   0.0813   0.0807   0.0842   0.0820  1.66   麦冬皂苷D(mg/支)   0.0818   0.0805   0.0834   0.0816   0.0822   0.0819  1.28   麦冬皂苷D′   (mg/支)   0.0203   0.0205   0.0206   0.0201   0.0208   0.0205  1.32
结果表明，对照品溶液稳定性良好。
8.重复性试验  精密吸取生脉注射液10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算 ，即得。
                                重复性试验   编号   1   2   3   4   5   均值  RSD(％)   麦冬皂苷B(mg/支)   0.0827   0.0834   0.0818   0.0825   0.0836   0.0828  0.88   麦冬皂苷D(mg/支)   0.0821   0.0831   0.0827   0.0826   0.0818   0.0825  0.62   麦冬皂苷D′   (mg/支)   0.0211   0.0207   0.0205   0.0214   0.0208   0.0209  1.69
结果表明，重复性良好。
9.加样回收率试验采用加样回收法，精密量取生脉注射液5ml，分置10ml量瓶中；精 密量取对照品混合溶液(每1ml分别含麦冬皂苷B0.03728mg，麦冬皂苷D0.03564mg，麦冬皂 苷D′0.00928mg)1ml(共5份)，分置上述10ml量瓶中，加甲醇适量超声处理(功率250W， 频率33KHz)10分钟，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液10μ 1，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得。
生脉注射液中麦冬皂苷B含量：0.0828mg/支；
生脉注射液中麦冬皂苷D含量：0.0825mg/支；
生脉注射液中麦冬皂苷D′含量：0.0209mg/支。
                                麦冬皂苷B加样回收率试验   编号   供试品中纯品量(mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   0.0414   0.03728   0.07798   98.12   2   0.0414   0.03728   0.07832   99.04   3   0.0414   0.03728   0.07777   97.56   4   0.0414   0.03728   0.07809   98.41   5   0.0414   0.03728   0.07840   99.25
麦冬皂苷B平均回收率＝98.48％；RSD＝0.70％。
                                麦冬皂苷D加样回收率试验   编号   供试品中纯品量(mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   0.04125   0.03564   0.07608   97.72   2   0.04125   0.03564   0.07623   98.15   3   0.04125   0.03564   0.07673   99.56   4   0.04125   0.03564   0.07631   98.37
 5   0.04125   0.03564   0.07654   99.03
麦冬皂苷D平均回收率＝98.57％；RSD＝0.74％。
                            麦冬皂苷D′加样回收率试验   编号   供试品中纯品量(mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   0.01045   0.00928   0.01965   99.15   2   0.01045   0.00928   0.01966   99.26   3   0.01045   0.00928   0.01934   95.84   4   0.01045   0.00928   0.01945   97.03   5   0.01045   0.00928   0.01964   99.08
麦冬皂苷D′平均回收率＝98.07％；RSD＝1.58％。
10.三批中试样品测定
取本品样品三批，按正文所述方法处理。
            三批样品含量测定结果   批号   1   2   3   麦冬皂苷B(mg/支)   0.0834   0.0819   0.0839   麦冬皂苷D(mg/支)   0.0821   0.0816   0.0824   麦冬皂苷D′(mg/支)   0.0232   0.0235   0.0243
从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射液中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬 皂苷D′的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠。
实验例18  生脉注射剂中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的含量测定方法
1.仪器与试药
(1)仪器：SHIMADZU 2010Aht高效液相色谱仪；TU-1810SPC紫外分光光度计； SARTORIUS BP211D电子分析天平。
(2)试药：假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元
2.检测波长的选择  精密称取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品适量， 分别加甲醇制成每1ml各含0.1mg的溶液，分别在200-400nm波长范围扫描。结果表明：假叶 树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元均在203nm处有最大吸收，因此选择203nm作为含量测 定的检测波长。
3.色谱条件：Dikma ODS(4.6×250mm，5um)；流动相：乙腈-水(90∶10)为流动相 ；检测波长为203nm；流速：1.0ml/min。
4.系统适用性试验
4.1对照品溶液的制备  精密称取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品适 量，加甲醇制成每1ml含假叶树皂苷元0.002mg，薯蓣皂苷元0.002mg，鲁斯可皂苷元 0.002mg的对照品混合溶液，即得。
4.2供试品溶液的制备  精密量取生脉注射液10ml，置圆底烧瓶中，加3％硫酸10ml回 流4小时，取出，放至室温，用3％氢氧化钠溶液调pH至中性，用三氯甲烷提取3次，每次 15ml，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇适量使溶解并定量转移至10ml量瓶中，加甲醇定至刻 度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液即得。
4.3阴性供试品溶液的制备  称取不含麦冬的阴性样品，照供试品溶液的制备方法制备 ，作为阴性供试品溶液。
分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测 定，记录色谱图。由图可知，供试品中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元峰分离良 好，与相近峰分离清晰，完全，阴性供试品中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元峰 无干扰。
5.线性关系考察  精密称取假叶树皂苷元对照品6.71mg，薯蓣皂苷元对照品6.94mg，鲁 斯可皂苷元对照品6.63mg，共置50ml量瓶中，加甲醇适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量 取0.4ml，置10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，精密吸取2μl、4μl、6μl、8μl、10 μl，注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，进样量(μg)为横坐标做图，绘制标准曲线。
    假叶树皂苷元线性关系考察   编号  假叶树皂苷元(μg)   峰面积   1   0.010736   15729   2   0.021472   31526   3   0.032208   47338   4   0.042944   62952   5   0.053680   78903
回归方程：Y＝1469578.99X-42.60；
决定系数：γ＝0.9999；
假叶树皂苷元在0.010736～0.053680μg范围内线性关系良好。
    薯蓣皂苷元线性关系考察   编号   薯蓣皂苷元(μg)   峰面积
 1   0.011104  16593  2   0.022208  33041  3   0.033312  49825  4   0.044416  66407  5   0.055520  82831
回归方程：Y＝1493533.86X-13.20；
决定系数：γ＝0.9999；
薯蓣皂苷元在0.011104～0.055520μg范围内线性关系良好。
    鲁斯可皂苷元线性关系考察   编号  鲁斯可皂苷元(μg)   峰面积   1   0.010608   20521   2   0.021216   41137   3   0.031824   61459   4   0.042432   82003   5   0.053040   102711
回归方程：Y＝1934822.78X-7.60；
决定系数：γ＝0.9999；
鲁斯可皂苷元在0.010608～0.053040μg范围内线性关系良好。
6.精密度试验精密吸取对照品混合溶液(每1ml分别含假叶树皂苷元2.684μg，薯蓣 皂苷元2.776μg，鲁斯可皂苷元2.652μg)10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，连续测 定5次，考察对照品溶液的精密度。
                            对照品精密度试验   试验次数  1  2  3  4  5  均值  RSD(％)   假叶树皂苷元  39429  40107  41135  40863  40526  40412  1.66   薯蓣皂苷元  41137  40928  42056  40764  41963  41370  1.45   鲁斯可皂苷元  50847  51093  50625  51147  52036  51150  1.05
结果表明，对照品溶液精密度良好。
7.稳定性试验  精密量取生脉注射液10ml，置圆底烧瓶中，加3％硫酸10ml回流4小时， 取出，放至室温，用3％氢氧化钠溶液调pH至中性，用三氯甲烷提取3次，每次15ml，和并提 取液，蒸干，残渣用甲醇适量使溶解并定量转移至10ml量瓶中，加甲醇定至刻度，摇匀，滤 过，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算，即得，分别在0、6、12、 24、48小时进样测定。
                                对照品溶液稳定性试验   时间(h)   0   6   12   24   48   均值  RSD(％)   假叶树皂苷元   (mg/支)   0.0214   0.0205   0.0211   0.0208   0.0206   0.0209  1.77   薯蓣皂苷元(mg/支)   0.0203   0.0199   0.0205   0.0207   0.0201   0.0203  1.56   鲁斯可皂苷元   (mg/支)   0.0214   0.0217   0.0223   0.0221   0.0219   0.0219  1.60
结果表明，对照品溶液稳定性良好。
8.重复性试验  精密量取生脉注射液10ml(共5份)，精密称定，分置圆底烧瓶中，加 3％硫酸10ml回流4小时，取出，放至室温，用3％氢氧化钠溶液调pH至中性，用三氯甲烷提 取3次，每次15ml，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇适量使溶解并定量转移至10ml量瓶中， 加甲醇定至刻度，摇匀，滤过，精密吸取10μl，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，以外标 一点法进行计算，即得。
                                重复性试验   编号   1   2   3   4   5   均值  RSD(％)   假叶树皂苷元   (mg/支)   0.0223   0.0221   0.0226   0.0218   0.0225   0.0223  1.44   薯蓣皂苷元(mg/支)   0.0214   0.0209   0.0211   0.0207   0.0204   0.0209  1.82   鲁斯可皂苷元   (mg/支)   0.0226   0.0227   0.0229   0.0224   0.0225   0.0226  0.85
结果表明，重复性良好。
9.加样回收率试验  采用加样回收法，精密量取生脉注射液5ml(共5份)，分置圆底烧 瓶中；精密量取对照品混合溶液(每1ml分别含假叶树皂苷元0.00904mg，薯蓣皂苷元 0.00948mg，鲁斯可皂苷元0.00848mg)1ml(共5份)，分置上述圆底烧瓶中，分别加3％硫 酸10ml回流4小时，取出，放至室温，用3％氢氧化钠溶液调pH至中性，用三氯甲烷提取3次 ，每次15ml，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇适量使溶解并定量转移至10ml量瓶中，加甲醇 定至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液10μl，注入液相色谱仪，以外标一点法进行计算 ，即得。
生脉注射液中假叶树皂苷元含量：0.0223mg/支；
生脉注射液中薯蓣皂苷元含量：0.0209mg/支；
生脉注射液中鲁斯可皂苷元含量：0.0226mg/支。
                        假叶树皂苷元加样回收率试验   编号   供试品中纯品量(mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   0.01115   0.00904   0.01994   97.25   2   0.01115   0.00904   0.02007   98.63   3   0.01115   0.00904   0.02011   99.06   4   0.01115   0.00904   0.01987   96.42   5   0.01115   0.00904   0.01993   97.15
假叶树皂苷元平均回收率＝97.70％；RSD＝1.13％。
                        薯蓣皂苷元加样回收率试验   编号   供试品中纯品量(mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   0.01045   0.00948   0.01975   98.12   2   0.01045   0.00948   0.01974   98.03   3   0.01045   0.00948   0.01986   99.27   4   0.01045   0.00948   0.01961   96.64   5   0.01045   0.00948   0.01984   99.05
薯蓣皂苷元平均回收率＝98.22％；RSD＝1.06％。
                        鲁斯可皂苷元加样回收率试验   编号   供试品中纯品量(mg)   纯品加入量(mg)   测量值(mg)   回收率(％)   1   0.0113   0.00848   0.01970   99.05   2   0.0113   0.00848   0.01962   98.16   3   0.0113   0.00848   0.01964   98.34   4   0.0113   0.00848   0.01953   97.06   5   0.0113   0.00848   0.01948   96.47
鲁斯可皂苷元平均回收率＝97.82％；RSD＝1.06％。
10.三批中试样品测定
取本品样品三批，按正文所述方法处理。
                         三批样品含量测定结果
  批号   1   2   3   假叶树皂苷元(mg/支)   0.0221   0.0246   0.0239   薯蓣皂苷元(mg/支)   0.0226   0.0218   0.0242   鲁斯可皂苷元(mg/支)   0.0236   0.0229   0.0241
从以上试验可知，采用本发明所述方法测定生脉注射液中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、 鲁斯可皂苷元的含量精密度、稳定性和重复性良好，回收率高，方法简便，数据准确、可靠 。
具体实施方式：
实施例1：采用液相色谱法测定以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱：
(1)供试品溶液的制备：精密称取待测冻干粉针适量，加水制成每1ml含50mg的溶液， 用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备：精密称取人参皂苷Rg1适量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液 ，作为参照物溶液；
(3)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为0.05mol/L磷酸 二氢钾溶液，流动相B为乙腈-水80∶20，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，流动相B 的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升至64％，从40分钟至50分钟，流 动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由64％升至80％，从65分钟至75分 钟，流动相B的比例由80％降至25％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃ ；
(4)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的 标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱， 以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准 指纹图谱中，共有峰有11个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测冻干粉针中红参或人参和麦冬成分特征为主的 指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测冻干粉针指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或 全部：
I.计算待测冻干粉针的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；
II.待测冻干粉针指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；
III.供试品指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各共有峰面 积的比值比较，其差值不大于±30％。
实施例2：采用液相色谱法测定以五味子成分特征为主的指纹图谱：
(1)供试品溶液的制备：精密称取待测冻干粉针适量，加水制成每1ml含50mg的溶液， 用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备：精密称取五味子醇甲对照品适量，加水制成每1ml含0.1mg的 溶液，作为参照物溶液；
(3)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为甲醇-水，梯度洗 脱，溶剂比例为从0分钟至6分钟，甲醇的比例为68％，从6分钟至8分钟，甲醇的比例由68％ 上升至76％，从8分钟至10分钟，甲醇的比例为76％，从10分钟至15分钟，甲醇的比例由76 ％降至68％，从15分钟至60分钟，甲醇的比例为68％；流速为1.0ml/min，检测波长为250± 2nm，柱温为30℃；
(4)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图 谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参 照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中 ，共有峰有17个
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测冻干粉针五味子成分特征为主的指纹图谱的测 试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测冻干粉针指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或 全部：
I.计算待测冻干粉针的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；
II.待测冻干粉针指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；
III.待测冻干粉针指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各 共有峰面积的比值比较，其差值不大于±30％。
实施例3：采用液相色谱法测定以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱：
(1)供试品溶液的制备：精密称取待测冻干粉针适量，加甲醇制成每1ml含50mg的溶液 ，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备：精密称取人参皂苷Rb1适量，加乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液 ，作为参照物溶液；
(3)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为0.05mol/L磷酸 二氢钠溶液，流动相B为乙腈-水85∶15，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至4分钟，流动相B 的比例为22％，从4分钟至40分钟，流动相B的比例由22％升至60％，从40分钟至50分钟，流 动相B的比例为60％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由60％升至77％，从65分钟至75分 钟，流动相B的比例由77％降至22％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃ ；
(4)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的 标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱， 以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准 指纹图谱中，共有峰有13个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测冻干粉针中红参或人参和麦冬成分特征为主的 指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测冻干粉针指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或 全部：
I.计算待测冻干粉针的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；
II.待测冻干粉针指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；
III.待测冻干粉针指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各 共有峰面积的比值比较，其差值不大于±30％。
实施例4：采用液相色谱法测定以五味子成分特征为主的指纹图谱：
(1)供试品溶液的制备：精密称取待测冻干粉针适量，加甲醇制成每1ml含50mg的溶液 ，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备：精密称取五味子醇乙对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg 的溶液，作为参照物溶液；
(3)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为乙腈-0.1％磷酸 ，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，乙腈的比例为60％，从5分钟至10分钟，乙腈的 比例由60％上升至70％，从10分钟至12分钟，乙腈的比例为70％，从12分钟至20分钟，乙腈 的比例由70％降至62％，从12分钟至60分钟，乙腈的比例为62％；流速为1.0ml/min，检测 波长为250±2nm，柱温为30℃；
(4)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图 谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参 照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中 ，共有峰有20个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测冻干粉针中五味子成分特征为主的指纹图谱的 测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测冻干粉针指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或 全部：
I.计算待测冻干粉针的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；
II.待测冻干粉针指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；
III.待测冻干粉针指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各 共有峰面积的比值比较，其差值不大于±30％。
实施例5：采用液相色谱法测定以红参或人参和麦冬成分特征为主的指纹图谱：
(1)供试品溶液的制备：取注射液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备：精密称取人参皂苷Rf适量，加乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液 ，作为参照物溶液；
(3)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为1％冰醋酸水溶 液，流动相B为甲醇-水95∶5，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至10分钟，流动相B的比例为 30％，从10分钟至35分钟，流动相B的比例由30％升至85％，从35分钟至55分钟，流动相B的 比例为85％，从55分钟至70分钟，流动相B的比例由85％降至30％；流速为1.0ml/min，检测 波长为203±2nm，柱温为40℃；
(4)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以红参或人参和麦冬成分特征为主的 标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱， 以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准 指纹图谱中，共有峰有15个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射液中红参或人参和麦冬成分特征为主的指 纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测注射液指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全 部：
I.计算待测注射液的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；
II.待测注射液指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；
III.待测注射液指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各共 有峰面积的比值比较，其差值不大于±30％。
实施例6：采用液相色谱法测定以五味子成分特征为主的指纹图谱：
(1)供试品溶液的制备：取注射液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备：精密称取五味子甲素对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.1mg 的溶液，作为参照物溶液；
(3)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为乙腈-1％冰醋酸 水溶液，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，乙腈的比例为60％，从5分钟至10分钟， 乙腈的比例由60％上升至70％，从10分钟至15分钟，乙腈的比例为70％，从15分至60分钟， 乙腈的比例由70％降至54％；流速为1.0ml/min，检测波长为250±2nm，柱温为30℃；
(4)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以五味子成分特征为主的标准指纹图 谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参 照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中 ，共有峰有14个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测注射液中五味子成分特征为主的指纹图谱的测 试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测注射液指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全 部：
I.计算待测注射液的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；
II.待测注射液指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的5％；
III.待测注射液指纹图谱中有40％～60％的共有峰面积的比值与标准指纹图谱中各共 有峰面积的比值比较，其差值不大于30％。
实施例7：冻干粉针中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、 五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙的薄层色谱鉴别方法：
取待测冻干粉针适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为 供试品溶液；五味子对照药材溶液的制备：取五味子对照药材适量，加三氯甲烷提取，滤过 ，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备：取五味子醇甲 、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙对照品， 分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色 谱法试验，吸取上述溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(30～60℃) ∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检 视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例8：冻干粉针中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的液相色谱鉴别：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作 为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液 相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水65％∶35％为流动相，检测 波长为250nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例9：冻干粉针中麦冬的薄层色谱鉴别方法：
取待测冻干粉针适量，加三氯甲烷-甲醇7∶3混合溶液提取，滤过，滤液挥干，残渣加 三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，同法制成对照药材溶液；采用中国药 典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上， 以甲苯∶甲醇∶冰醋酸＝80∶5∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视， 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。
实施例10：冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的薄层色谱鉴别方法：
取待测冻干粉针适量，用水溶解后用正丁醇萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇溶解，作为 供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品，分别加甲醇制成每1ml含 1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各 5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝15∶5∶1为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例11：冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的液相色谱鉴别：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作 为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的甲醇溶液为对照，采用液 相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为流动相，检测波长 为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例12：冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的薄层色谱鉴别方法 ：
取待测冻干粉针适量，加3％硫酸水解4小时，取出，放至室温，调节pH至中性，滤过， 滤液挥干，残渣用三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯 可皂苷元对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典 附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己 烷∶醋酸乙酯∶水＝1∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，90℃烘 至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例13：冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的液相色谱鉴别：
取待测冻干粉针适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后用3％硫酸回流4小时，取出，放至室 温，调pH至中性，用三氯甲烷提取，提取液挥干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续 滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的甲醇溶液为对 照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为流动相 ，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰 。
实施例14：冻干粉针中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂 苷Rf的薄层色谱鉴别方法：
取待测冻干粉针适量，用正丁醇提取，滤过，滤液作为供试品溶液；红参或人参对照药 材溶液的制备：取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣 加水饱和正丁醇提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药材 溶液；对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf对照品 ，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱 法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶醋酸乙酯∶甲 醇∶水＝15∶40∶22∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10 ％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色 谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例15：冻干粉针中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的液相色谱鉴别：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作 为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用 液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂 比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升 至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％ 升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中，具与对照品色 谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例16：冻干粉针中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、 五味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙的薄层色谱鉴别方法：
取待测冻干粉针适量，加醋酸乙酯提取，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为 供试品溶液；五味子对照药材溶液的制备：取五味子对照药材适量，加醋酸乙酯提取，滤过 ，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备：取五味子醇甲 、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五昧子酯乙对照品， 分别加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色 谱法试验，吸取上述溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(60～90℃) ∶醋酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检 视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例17：冻干粉针中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的液相色谱鉴别：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为 供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相 色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水60％∶40％为流动相，检测波长 为250nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例18：冻干粉针中麦冬的薄层色谱鉴别方法：
取待测冻干粉针适量，加醋酸乙酯提取，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为 供试品溶液；另取麦冬对照药材，同法制成对照药材溶液；采用中国药典附录公开的薄层色 谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯∶甲醇∶甲酸 ＝85∶5∶0.3为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对 照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。
实施例19：冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的薄层色谱鉴别方法：
取待测冻干粉针适量，用水溶解后用醋酸乙酯萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇溶解，作 为供试品溶液；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品，分别加甲醇制成每1ml含 1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各 5μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝25∶4∶1为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例20：冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的液相色谱鉴别：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为 供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的甲醇溶液为对照，采用液相 色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-1％冰醋酸90∶10为流动相，检测波 长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例21：冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的薄层色谱鉴别方法：
取待测冻干粉针适量，加15％盐酸水解4小时，取出，放至室温，调节pH至中性，滤过 ，滤液挥干，残渣用二氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁 斯可皂苷元对照品，分别加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药 典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以环 己烷∶甲酸乙酯∶水＝1∶1∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂， 90℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点 。
实施例22：冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的液相色谱鉴别：
取待测冻干粉针适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后用15％盐酸回流4小时，取出，放至 室温，调pH至中性，用二氯甲烷提取，提取液挥干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取 续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的乙醇溶液为 对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水96∶4为流动相， 检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例23：冻干粉针中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂 苷Rf的薄层色谱鉴别方法：
取待测冻干粉针适量，用醋酸乙酯提取，滤过，滤液作为供试品溶液；红参或人参对照 药材溶液的制备：取红参或人参对照药材适量，加二氯甲烷回流提取，弃去二氯甲烷液，残 渣加水饱和正丁醇提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药 材溶液；对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf对照 品，分别加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色 谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯∶丙 酮∶水＝20∶30∶15∶15在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10 ％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色 谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例24：冻干粉针中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的液相色谱鉴别：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作 为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用 液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.5％冰醋酸水溶液为流动相， 梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至30分钟，乙腈的比例为20％，从30分钟至50分钟，乙腈的 比例由20％上升至25％，从50分钟至70分钟，乙腈的比例为25％，从70分钟至100分钟，乙 腈的比例由25％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中 ，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例25：注射液中五味子、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五 味子丙素、五味子酯甲、五味子酯乙的薄层色谱鉴别方法：
取待测注射液适量，加乙醚提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品 溶液；五味子对照药材溶液的制备：取五味子对照药材适量，加醋酸乙酯提取，滤过，滤液 挥干，残渣加醋酸乙酯溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备：取五味子醇甲、五味 子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲、五昧子酯乙对照品，分别加 三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试 验，吸取上述溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(60～90℃)∶甲酸 乙酯∶乙酸＝15∶5∶3的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供 试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例26：注射液中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的液相色谱鉴别：
取待测注射液适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供 试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色 谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.5％冰醋酸水溶液57％∶43％为流动 相，检测波长为250nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱 峰。
实施例27：注射液中麦冬的薄层色谱鉴别方法：
取待测注射液适量，加二氯甲烷提取，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供 试品溶液；另取麦冬对照药材，同法制成对照药材溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱 法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷∶乙醇∶甲 酸＝70∶10∶2为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254nm下检视，供试品色谱中，在与 对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。
实施例28：注射液中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的薄层色谱鉴别方法：
取待测注射液适量，用二氯甲烷萃取，萃取液挥干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液 ；另取麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品，分别加乙醇制成每1ml含1mg的溶液， 作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点 于同一硅胶GF254薄层板上，以二氯甲烷∶乙醇∶水＝20∶8∶2为展开剂，展开，取出，晾干 ，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应 的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例29：注射液中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的液相色谱鉴别：
取待测注射液适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供 试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的乙醇醇溶液为对照，采用液相 色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1％磷酸水溶液87∶13为流动相， 检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例30：注射液中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的薄层色谱鉴别方法：
取待测注射液适量，加5％硫酸水解3小时，取出，放至室温，调节pH至中性，滤过，滤 液挥干，残渣用醋酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可 皂苷元对照品，分别加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附 录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲醇 ∶二氯甲烷∶水＝2∶1∶0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，90℃烘 至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例31：注射液中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的液相色谱鉴别：
取待测注射液适量，置圆底烧瓶中，用5％硫酸水解3小时，取出，放至室温，调pH至中 性，用醋酸乙酯提取，提取液挥干，残渣用乙醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试 品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的乙醇溶液为对照，采用液相 色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.2％冰醋酸水溶液95∶5为流动相 ，检测波长为203nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰 。
实施例32：注射液中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷 Rf的薄层色谱鉴别方法：
取待测注射液适量，用醋酸乙酯提取，滤过，滤液作为供试品溶液；红参或人参对照药 材溶液的制备：取红参或人参对照药材适量，加二氯甲烷回流提取，弃去二氯甲烷液，残渣 加醋酸乙酯提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药材溶液 ；对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf对照品，分 别加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试 验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正丁醇∶甲酸乙酯∶水＝20 ∶30∶15在的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至 斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例33：注射液中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的液相色谱鉴别：
取待测注射液适量，置量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为 供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用液 相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相，梯度 洗脱，溶剂比例为从0分钟至20分钟，乙腈的比例为15％，从20分钟至45分钟，乙腈的比例 由15％上升至22％，从45分钟至60分钟，乙腈的比例为22％，从60分钟至80分钟，乙腈的比 例由22％升至35％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中，具与 对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例34：冻干粉针中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量测定：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作 为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用 液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂 比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升 至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％ 升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温为30℃；以外标一点法进行计算，待测 冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg；
(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg；
(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg；
(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于 3.4mg。
实施例35：冻干粉针中总皂苷的含量测定：
取待测冻干粉针适量，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml量 瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸2.0ml，摇匀， 60℃水浴上加热15分钟，取出，立即以冰水浴冷却2分钟，用冰醋酸定至刻度，摇匀，作为 供试品溶液；以人参皂苷Rg1为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中 国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待 测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1计，不得少 于20mg。
实施例36：冻干粉针中总多糖含量测定：
单糖取待测冻干粉针适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加氢氧化钠试液至中性， 精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密 塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时 ，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的 碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，由此计算单糖的含量；
总糖  取待测冻干粉针适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加稀硫酸25ml，加热回流 4小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L) 25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀 硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴 定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于 9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；
以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；
待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计，不 得少于100mg。
实施例37：冻干粉针中总木脂素含量测定：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用醋酸乙 酯提取，和并提取液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇甲为对照 品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在 254nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量 为单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇甲计，不得少于3mg。
实施例38：冻干粉针中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量测定：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作 为供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液 相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水65％∶35％为流动相，检测 波长为250nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为 单位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.4mg；
(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.05mg；
(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.10mg；
(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.55mg 。
实施例39：冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的含量测定：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作 为供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的甲醇溶液为对照，采用液 相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90％∶10％为流动相，检测 波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为 单位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.1mg；
(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.1mg；
(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.02mg；
(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.22mg。
实施例40：冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的含量测定：
取待测冻干粉针适量，置圆底烧瓶中，加水溶解，用3％硫酸回流4小时，取出，放至室 温，调pH至中性，用三氯甲烷提取，和并提取液，蒸干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过 ，取续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的甲醇溶 液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水90∶10为 流动相，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测冻干粉 针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于 0.06mg。
实施例41：冻干粉针中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量测定：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作 为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用 液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.5％冰醋酸水溶液为流动相， 梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至30分钟，乙腈的比例为20％，从30分钟至50分钟，乙腈的 比例由20％上升至25％，从50分钟至70分钟，乙腈的比例为25％，从70分钟至100分钟，乙 腈的比例由25％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；以外标一点法 进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg；
(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg；
(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg
(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于 3.4mg。
实施例42：冻干粉针中总皂苷的含量测定：
取待测冻干粉针适量，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml 量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸2.0ml，摇匀 ，60℃水浴上加热30分钟，取出，立即以冰水浴冷却2分钟，用冰醋酸定至刻度，摇匀，作 为供试品溶液；以人参皂苷Rb1为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用 中国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算， 待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rb1计，不得 少于20mg。
实施例43：冻干粉针中总多糖含量测定：
单糖取待测冻干粉针适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加氢氧化钠试液至中性， 精密加入碘液(0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密 塞，暗处放置10分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时 ，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的 碘液(0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖，由此计算单糖的含量；
总糖取待测冻干粉针适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加稀硫酸25ml，加热回流 2小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L) 25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀 硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴 定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于 9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；
以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；
待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计，不 得少于100mg。
实施例44：冻干粉针中总木脂素含量测定：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用三氯甲 烷提取，和并提取液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇乙为对照 品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在 254nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量 为单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇乙计，不得少于3mg。
实施例45：冻干粉针中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量测定：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为 供试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的甲醇溶液为对照，采用液相 色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水60％∶40％为流动相，检测波长 为250nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单位 量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.4mg；
(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.05mg；
(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.10mg；
(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.55mg 。
实施例46：冻干粉针中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的含量测定：
取待测冻干粉针适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为 供试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的甲醇溶液为对照，采用液相 色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-1％冰醋酸90∶10为流动相，检测波 长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测冻干粉针以相当于每日用成品量为单 位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.1mg；
(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.1mg；
(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.02mg；
(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.22mg。
实施例47：冻干粉针中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的含量测定：
取待测冻干粉针适量，置圆底烧瓶中，加水溶解后用15％盐酸回流4小时，取出，放至 室温，调pH至中性，用二氯甲烷提取，提取液挥干，残渣用甲醇溶解，用微孔滤膜滤过，取 续滤液作为供试品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的乙醇溶液为 对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水96∶4为流动相， 检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测冻干粉针以相当 于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于 0.06mg。
实施例48：注射液中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量测定：
取待测注射液适量，置量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为 供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品的甲醇溶液为对照，采用液 相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相，梯度 洗脱，溶剂比例为从0分钟至20分钟，乙腈的比例为15％，从20分钟至45分钟，乙腈的比例 由15％上升至22％，从45分钟至60分钟，乙腈的比例为22％，从60分钟至80分钟，乙腈的比 例由22％升至35％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；以外标一点法进行计 算，待测注射液以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg；
(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg；
(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg；
(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于 3.4mg。
实施例49：注射液中总皂苷的含量测定：
取待测注射液适量，置10ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml量 瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加10％香草醛-冰醋酸溶液0.3ml，高氯酸3.0ml，摇匀， 60℃水浴上加热15分钟，取出，立即以冰水浴冷却，用冰醋酸定至刻度，摇匀，作为供试品 溶液；以人参皂苷Re为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附 录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测注射液 以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Re计，不得少于20mg。
实施例50：注射液中总多糖含量测定：
单糖  取待测注射液适量，置碘量瓶中，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液( 0.1mol/L)25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10 分钟，加稀硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液 2ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液( 0.1mol/L)相当于9.008mg的无水葡萄糖)，由此计算单糖的含量；
总糖取待测注射液适量，置碘量瓶中，加蒸馏水使溶解，加稀硫酸25ml，加热回流3 小时，放冷，加酚酞指示液1～2滴，加氢氧化钠试液至中性，精密加入碘液(0.1mol/L) 25ml，摇匀，逐滴加入氢氧化钠试液4ml，边加边剧烈振摇，密塞，暗处放置10分钟，加稀 硫酸4ml，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴 定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的碘液(0.1mol/L)相当于 9.008mg的无水葡萄糖，以此计算总糖的含量；
以总糖的含量减去单糖的含量即得总多糖的含量；
待测注射液以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总多糖以无水葡萄糖计，不得 少于100mg。
实施例51：注射液中总木脂素含量测定：
取待测注射液适量，置量瓶中，加水定至刻度，加盐酸沉淀皂苷类成分后，用二氯甲烷 提取，和并提取液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，作为供试品溶液；以五味子醇甲为对照品 ，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在 254nm的波长处测定吸收度，以外标一点法进行计算，待测注射液以相当于每日用成品量为 单位量，每单位量含总木脂素以五味子醇甲计，不得少于3mg。
实施例52：注射液中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量测定：
取待测注射液适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供 试品溶液；以五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色 谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.5％冰醋酸水溶液57％∶43％为流动 相，检测波长为250nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测注射液以相当于每日用成 品量为单位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含五味子醇甲的限度不得少于0.4mg
(2)每单位量含五味子甲素的限度不得少于0.05mg；
(3)每单位量含五味子乙素的限度不得少于0.10mg；
(4)每单位量含五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的总和的限度不得少于0.55mg 。
实施例53：注射液中麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的含量测定：
取待测注射液适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供 试品溶液；以麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′对照品的乙醇醇溶液为对照，采用液相 色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.1％磷酸水溶液87：13为流动相， 检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测注射液以相当于每日用成品量 为单位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含麦冬皂苷B的限度不得少于0.1mg；
(2)每单位量含麦冬皂苷D的限度不得少于0.1mg；
(3)每单位量含麦冬皂苷D′的限度不得少于0.02mg；
(4)每单位量含麦冬皂苷B、麦冬皂苷D、麦冬皂苷D′的总和的限度不得少于0.22mg。
实施例54：注射液中假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的含量测定：
取待测注射液适量，置圆底烧瓶中，用5％硫酸水解3小时，取出，放至室温，调pH至中 性，用醋酸乙酯提取，提取液挥干，残渣用乙醇溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试 品溶液；以假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元对照品的乙醇溶液为对照，采用液相 色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.2％冰醋酸水溶液95∶5为流动相 ，检测波长为203nm，柱温30℃；以外标一点法进行计算，待测注射液以相当于每日用成品 量为单位量，含量限度应为以下几项：
(1)每单位量含假叶树皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(2)每单位量含薯蓣皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(3)每单位量含鲁斯可皂苷元的限度不得少于0.02mg；
(4)每单位量含假叶树皂苷元、薯蓣皂苷元、鲁斯可皂苷元的总和的限度不得少于 0.06mg。