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一种奶牛护 蹄喷雾及其制备方法

阅读：842发布：2021-01-19

专利汇可以提供一种奶牛护蹄喷雾及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种护蹄喷雾，以有效杀灭和抑制奶牛蹄病感染性病原菌且促进蹄部伤口愈合，能够有效防止和治疗多种蹄病、提高奶牛自身免疫力和抗病力的中草药提取液和具有促进药物渗透、有效修复角质层、强粘结性的芦荟提取物为主要原料，添加可改变奶牛蹄部角质层结构并促进中草药、芦荟等有效成分快速渗透至皮肤深层吸收的植物提取物，将超声分散、溶解、高压均质与冷热处理技术有机结合，不仅科学复配高效粘结的改性膳食纤维，而且添加了可保护组分有效成分免受氧化，提高护蹄喷雾理化稳定性的海藻糖、单宁、水溶性壳聚糖、卡拉胶和天然抗氧化剂等，最终制得一种稳定性强、安全高效、无任何抗生素和化学有毒物质的护蹄喷雾。，下面是一种奶牛护蹄喷雾及其制备方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：中草药提取液60-80份，芦荟提取物40-60份，植物提取物20-40份，改性膳食纤维6-12份，海藻糖5-11份，单宁2-5份，水溶性壳聚糖2-5份，卡拉胶1-4份，天然抗氧化剂1-4份，角蛋白酶0.5-1.5份，角质酶0.1-1份；
所述植物提取物是以可改变奶牛蹄部角质层结构、促进护蹄喷雾组分快速渗透至皮肤深层并吸收的天然植物为原料而制备。
2.如权利要求1所述的奶牛护蹄喷雾，其特征在于，主要由以下重量份数的原料制备：
中草药提取液65-75份，芦荟提取物45-55份，植物提取物25-35份，改性膳食纤维8-10份，海藻糖7-9份，单宁3-4份，水溶性壳聚糖3-4份，卡拉胶2-3份，天然抗氧化剂2-3份，角蛋白酶
0.8-1.2份，角质酶0.4—0.6份。
3.如权利要求1所述的奶牛护蹄喷雾，其特征在于，主要由以下重量份数的原料制备：
中草药提取液70份，芦荟提取物50份，植物提取物30份，改性膳食纤维9份，海藻糖8份，单宁
3.5份，水溶性壳聚糖3.5份，卡拉胶2.5份，天然抗氧化剂2.5份，角蛋白酶1.0份，角质酶0.5份。
4.如权利要求1-3任一所述的奶牛护蹄喷雾，其特征在于，所述植物提取物的制备方法，包括如下步骤：将当归、黄皮叶、丁香、丹参、薄荷分别清洗、沥干，按质量比10-12:7-9:
7-9:4-6:1-3均匀混合，加入混合物料质量0.3-0.5倍的pH值为4.5-5.5的乳酸润湿3-8h,于-18--22℃冷冻1-2h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3-5cm，粉碎物粒径0.5-1mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5，于室温下在电场强度25-35kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理20-30min；然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提取15-20min，同时在功率200-300W,频率30-
40KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量0.9-1.1％的混合酶，于45-55℃酶解
30-50min；酶解液过滤、滤液减压浓缩至固形物含量为8-10％即得植物提取物；
所述混合酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、单宁酶、蛋白酶按质量比3-5:3-5:2-4:
1-3:0.3-0.5均匀混合。
5.如权利要求1-3任一所述的奶牛护蹄喷雾，其特征在于，所述中草药提取液的制备方法，包括如下步骤：按重量份数计，称取乳香20-25份，血竭18-20份，黄芪13-16份，没药12-
15份，龙骨12-15份，怀牛膝8-12份，五加皮7-9份，百草霜4-6份，马齿苋4-6份，三七2-4份，白鲜皮1-3份，苦楝皮1-3份；置盛有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、
30KHz清洗10-15min，沥干，将上述中药粉碎至粒径为2mm以下，置容器中均匀混合并添加3-
6倍重量的水，得混合物料，控制温度70-90℃保持2-4h，接着降温至40-50℃，用乳酸调节pH值为3.5-4.5，在功率150-300W条件下进行微波提取10-15min，同时在功率200-300W,频率
30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；然后加入混合物料总重量0.5-1.5％的复合酶进行酶解，用乳酸调节pH值为5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的质量比为1:1-3，控制温度至60-78℃保持3-4h，过滤，得第一滤液；添加滤渣1-3倍重量的水，控制温度85-95℃保持1-3h，然后降温至25-35℃，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤液按照质量比2-4:1-3合并,均匀混合，即得中草药提取液；
所述复合酶为葡聚糖酶、戊聚糖酶、木聚糖酶、酸性蛋白酶、单宁酶按质量比5-7：2-4:
2-4:1-3:1-3均匀混合。
6.如权利要求1-3任一所述的奶牛护蹄喷雾，其特征在于，所述芦荟提取物的制备方法，包括如下步骤：将新鲜的芦荟、柑桔皮、葡萄皮、山楂果渣分别放入装有1.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗5-10min，沥干，切分成相等规格,长、宽为5-
10mm，厚度3-5mm的片或丁，按质量比20-25:3-5:2-4:1-3均匀混合，然后于-21—-25℃冷冻
10-30min；立即进行粉碎，粒径为0.1-1mm；加入粉碎物质量3-5倍的去离子水，混合均匀，用柠檬酸调节pH值为2-3，室温下在电场强度35-45kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-
400Hz条件下进行高压脉冲电场处理，接着常压煮沸30-50min，布袋过滤，滤渣用其质量1-3倍的滤液常压煮沸40-60min,布袋过滤，合并滤液，滤液在75℃下减压浓缩至固形物含量为
6-10％，即得芦荟提取物。
7.如权利要求1-3任一所述的奶牛护蹄喷雾，其特征在于，所述改性膳食纤维的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、小麦纤维、苹果纤维、燕麦纤维按质量比6-8:3-5:2-4:1-3均匀混合，加入其质量3-7倍的水，室温100-300W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-400Hz条件下进行高压脉冲电场处理
10-15min；用乳酸调节pH值为4.5-6.5，加入混合物质量0.4-0.6％的生物酶，于45-55℃酶解25-45min；酶解液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为5-8％即得改性膳食纤维；
所述生物酶为纤维素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、果胶酶按质量比5-7:2-4:1-3:1-2均匀混合。
8.如权利要求1-3任一所述的奶牛护蹄喷雾，其特征在于，所述天然抗氧化剂含有茶多酚、葡萄籽原花青素、迷迭香提取物、甘草提取物、杏叶提取物和Vc中的任意一种或几种。
9.如权利要求1-8任一所述奶牛护蹄喷雾的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：按照配方，首先将中草药提取液、芦荟提取物和植物提取物均匀混合，放入胶体磨中，调节定子和转子之间的间隙，使出口混合物粒径达到100-200μm，然后通过高压均质机于温度55-
75℃，压力100-120MPa条件下循环2-4次，使得均质机出口物料粒径为100-150nm，得到纳米粒子混合液；升温至65-75℃，保温，边搅拌边依次加入卡拉胶、单宁、水溶性壳聚糖、改性膳食纤维、海藻糖，搅拌转速130-150r/min,充分溶解20-30min,停止搅拌，升温，常压煮沸5-
10min，自然降至室温，继续降温至-1.5—-0.5℃，保温1-3h，重复上述常压煮沸和低温保温操作2-4次，室温下边搅拌边依次加入天然抗氧化剂、角质酶和角蛋白酶，搅拌转速100-
120r/min,均匀混合，于功率200-400W,频率35-45KHz条件下进行超声波处理10-30min,同时在电场强度35-45kV/cm，脉冲时间600-800μs,脉冲频率400-600Hz条件下进行高压脉冲电场处理，最后于0.2-0.4μm微孔膜过滤，除去絮凝物，滤液无菌灌装即得奶牛护蹄喷雾。
10.如权利要求9所述奶牛护蹄喷雾的制备方法，其特征在于，所述天然抗氧化剂的质量组成为：葡萄籽原花青素:茶多酚:迷迭香提取物＝4-6:2-4:1-3。

说明书全文

一种奶牛护 蹄喷雾及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及奶牛护体产品，具体涉及一种奶牛护蹄喷雾及其制备方法。

背景技术

[0002] 在奶牛养殖中，蹄病、乳房炎和繁殖障碍性疾病是引起奶牛被迫淘汰的三大疾病，奶牛90％的跛行是由于蹄病引起的，因此，蹄病是奶牛的常发病，其病因主要是日粮中钙、磷不平衡或微量元素缺乏，致角质蹄部疏松，加上圈舍环境恶劣，蹄部经常被粪尿、泥浆浸泡，蹄角质软化而发病。另外，石子、铁屑、草木屑、玻璃碴等硬物，均会刺伤蹄部软组织而引起感染发炎。奶牛患蹄病后，食欲降低，运动量降低，喜趴卧，跛行、疼痛，叩诊蹄部时出现痛感，触诊时有热感。用修蹄刀扩创后，蹄底小孔或洞中即有污黑的臭水流出，能看到趾间有溃疡，覆盖有恶臭的坏死物。重者蹄冠红肿，痛感明显，病牛不能站立，产奶量严重下降，繁殖力降低，最终淘汰。随着我国奶业的迅速发展，从国外引进了大量优质奶牛、冷冻精液和胚胎，但是这些高产奶牛可能不太适应国内的饲养环境和日粮营养，造成蹄病发病率有升高的趋势，给我国奶牛养殖业造成了巨大的经济损失。据统计，在我国部分地区奶牛养殖场蹄病发病率为50％左右，患病后奶牛采食量降低20％，产奶量降低20％，因蹄病淘汰牛头数占总淘汰牛的50％，治疗费用增加30％，因蹄病引起的经济损失占全年利润的10％。因此，防治奶牛蹄病，可以降低奶牛淘汰率，显著提高我国奶牛养殖的经济效益。

[0003] 蹄病是一个非常含糊和笼统的观念，归纳起来它实际上包括很多疾病，常见的有蹄底溃疡、蹄趾间皮肤增殖、趾间皮炎、疣性皮炎等。产生上述蹄病常见的病因主要有感染性病因、代谢性障碍、环境因素和遗传性因素，相应地采取的措施主要是进行护蹄、修蹄和临床的治疗，无论是蹄病的防止还是采用任何方式治疗都会涉及一系列护蹄药品，比如护蹄膏、护蹄液、蹄浴液和护蹄喷雾等，在这些药物中抗生素药物占据很大比例，但是大量使用抗生素产品会对奶牛和人类产生重大影响，致使奶牛及人类体内抗药性增强，极大地损害了奶牛、养殖人员和防疫人员的体质健康，同时会造成养殖环境污染，还可加大食品(牛奶和牛肉)的安全性隐患。

[0004] 护蹄喷雾是适用于提高奶牛群体蹄部健康护理的一种护蹄产品，当奶牛进群体防疫或修蹄和临床治疗后回复阶段，根据蹄病发生或治疗程度，彻底清洗牛蹄部，确保蹄部及趾间隙没有粪便残留，使之干净，将护蹄喷雾配置成一定浓度的药液，然后用低压喷雾器或喷壶将护蹄喷雾喷于蹄背部、趾间隙和蹄底部，以防止蹄病发生和护理蹄部健康，因此，护蹄喷雾是防止和治疗奶牛蹄病不可缺少的护蹄产品。

[0005] 中药标本同治，比西药治标不治本好很多，可根治蹄病，且副作用小，纯天然，容易降解，对环境友好，目前，相关的中药护蹄产品已经广泛应用于奶牛养殖。但是，中药种类多，成分复杂，作为液体中药制剂其稳定性较差，容易产生沉淀，并且基于奶牛的养殖环境、饲喂模式、蹄病的诱发特点及防止和治疗措施，结合药物的治疗效果，护蹄喷雾的抗病性、均一性和渗透性等仍是关注的重点。

[0006] 中国专利CN 104825486 A公开了一种用于治疗牛蹄病的组合药物，包括乙二胺二氢碘化物和硫酸铜，乙二胺二氢碘化物和硫酸铜的质量混合比为1:2～2:3。乙二胺二氢碘化物会与硫酸铜反应，释放出游离的单质碘，游离状态的碘原子具有超强的氧化作用，可以使蛋白质变性和破坏病原体的细胞膜结构，从而达到预防感染和治疗牛蹄病的目的。上述公开专利中的组合物主要作用是利用强氧化作用的碘原子进行病蹄的表面氧化杀菌，只进行了表面的消毒处理，并不能进行根治，且对顽固性真菌作用甚微，渗透作用弱，治疗效果不理想；同时还要与抗生素类药物并用，产生副作用，并且组合物容易发生化学反应，不易流通、贮存和使用。

[0007] 中国专利CN 104258319 A公开了一种治疗牛腐蹄病的中药喷雾剂，由金樱子、鸡血藤、犁头草、艾叶、松香、五倍子、干姜提取后加载体制得。将本发明的产品对病牛进行喷雾给药，一日2次，连用5～7日，即可有效控制牛腐蹄病，使用方便，成本低，无残留，生物安全度高。上述公开专利中药种类少，只能治疗奶牛蹄病中的腐蹄病，不能全面预防和治疗各种蹄病，并且采用传统煎药，有效成分利用率低，损失大，喷雾至病蹄表面粘结性差，容易脱落，渗透作用差，不能治疗表层以下的病灶，同时还添加防腐剂、稳定剂等化学物质作为载体。

[0008] 中国专利CN 103860749 A公开了一种治疗猪蹄病的中药组合物及其中药注射剂的制备方法。治疗猪蹄病的中药组合物，由金银花2～5份、板蓝根2～5份、当归1～4份、玄参2～5份、连翘2～5份、红花1～3份、川芎1～3份和甘草1～3份组成。将药材混合、粉碎，加入纯净水后加热回流提取；将提取液浓缩，加入乙醇进行醇沉；将含有效成分的醇沉上清液浓缩回收乙醇，浓缩液进行吸附脱色处理；调节吸附脱色处理液的pH值，再依次加入吐温80、苯甲醇，混合均匀后过滤；加入注射用水以调整药液有效成分含量，分装、灭菌。中药注射剂可用于治疗各种病因引起的猪蹄部肿胀疼痛、瘀紫、水泡、溃烂、蹄裂、肢蹄变形等。上述中药注射剂中含有稳定剂吐温80、苯甲醇等化学有毒物质，存在安全隐患，污染环境。且吐温
80等表面活性剂容易产生泡沫，均一性差，不易喷雾治疗。

[0009] 中国专利CN 102552339 A公开了一种用于治疗腐蹄病的纳米乳药物，该纳米乳粒径在1～100nm之间，由下列组分的原料组成：松馏油0.1％～10.0％、肉桂醛0.1％～6.0％、香芹酚0.1％～6.0％、樟脑油0.1％～5.0％、丙酸氯倍他索0.01％～0.1％、表面活性剂18.0％～35.0％、助表面活性剂0～7.0％、余量为蒸馏水，上述成分的质量百分比之和为
100％。该纳米乳具有溶解角质、止痒、消炎、收敛、局部消毒防腐及促进吸收等作用，主要用于治疗动物腐蹄病。本发明增加了药物的溶解度，提高了药物稳定性和生物利用度，减少了药物用量，透皮率高于膏剂等普通剂型，且成本低廉，在兽药领域有广阔的市场前景。上述公开的乳药物复配的药物种类较少，功效单一，不能全面治疗奶牛的蹄病，而且含有糖皮质激素类药丙酸氯倍他索和毒性较大的松馏油、樟脑油等，容易从创伤处渗入，产生一定的副作用。且表面活性剂容易产生泡沫，均一性差，不易喷雾治疗。

[0010] 中国专利CN 102100750 A公开了一种中药洗剂及其制备方法，属于中兽药品制备方法技术领域。药物成分由按质量为：青黛0.5-2份；雄黄1-3份；枯矾1-3份；黄连0.5-2份；大黄1-3份；煅硼砂0.5-2份；儿茶0.5-2份；薄荷1-3份构成，将除薄荷外的药物各组分加10倍药材量的冷水浸泡30分钟，煎煮20分钟，加入薄荷再煎10分钟，过滤，药渣再加8倍药材量的水煎煮30分钟，过滤，合并两次滤液，减压浓缩至每1ml药液含原生药2g的浓缩药液，冷却后加等量的陈醋即得。该制备方法生产工艺简单，设备投资少，产品价格低廉，适合于工业化生产。上述公开专利中药采用传统煎药，有效成分利用率低，损失大，喷雾至病蹄表面粘结性差，容易脱落，渗透作用差，不能治疗表层以下的病灶，且含有毒性较大的雄黄，在煎煮过程和光照情况下会产生剧毒物质砒霜，使用和贮存过程存在安全隐患，稳定性差。

[0011] 张泽强等公开了一种治疗奶牛腐蹄病的硫酸锌-薄荷喷雾剂，所述喷雾剂为含10％薄荷重蒸馏液的10％ZnSO4·7H2O水溶液，其中薄荷重蒸馏液每毫升相当于原生药1g【中国兽医杂志2014年(第50卷)第1期.82-83】。同样存在药物种类较少，功效单一，不能全面治疗奶牛的蹄病，并且稳定性、渗透性较差。

[0012] 综上，制备一种稳定的的可全面防止奶牛各种类型蹄病、粘结牢固、渗透性强、安全高效、无任何抗生素和化学有毒物质的护蹄喷雾是广大养殖户的迫切需要，也是本领域技术人员的责任和追求。

发明内容

[0013] 本发明所解决的技术问题是克服现有奶牛护蹄喷雾的缺陷，以有效杀灭和抑制奶牛蹄病感染性病原菌且促进蹄部伤口愈合，能够有效防止和治疗多种蹄病、提高奶牛自身免疫力和抗病力的中草药提取液和具有促进药物渗透、有效修复角质层、强粘结性的芦荟提取物为主要原料；科学复配高效粘结的改性膳食纤维、可改变奶牛蹄部角质层结构并促进中草药等有效成分快速渗透至皮肤深层吸收的植物提取物；同时科学复配了具有抗冷冻、抗高温、抗干燥性能的可确保护蹄喷雾中生物活性成分液相稳定的海藻糖和可保护组分有效成分免受氧化，提高护蹄喷雾理化稳定性的单宁、水溶性壳聚糖、卡拉胶和天然抗氧化剂，并添加了促进护蹄喷雾粘结并渗透的角蛋白酶、角质酶等，最终制得一种稳定性强、可全面治疗奶牛各种类型蹄病、粘结牢固、渗透性强、安全高效、无任何抗生素和化学有毒物质的护蹄喷雾，降低了奶牛养殖成本，提高了养殖经济效益，增加了奶牛深加工食品的安全性，保护了环境。

[0014] 为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

[0015] 一种奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：

[0016] 中草药提取液60-80份，芦荟提取物40-60份，植物提取物20-40份，改性膳食纤维6-12份，海藻糖5-11份，单宁2-5份，水溶性壳聚糖2-5份，卡拉胶1-4份，天然抗氧化剂1-4份，角蛋白酶0.5-1.5份，角质酶0.1-1份；

[0017] 优选地，一种奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：

[0018] 中草药提取液65-75份，芦荟提取物45-55份，植物提取物25-35份，改性膳食纤维8-10份，海藻糖7-9份，单宁3-4份，水溶性壳聚糖3-4份，卡拉胶2-3份，天然抗氧化剂2-3份，角蛋白酶0.8-1.2份，角质酶0.4—0.6份；

[0019] 更优选地，一种奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：

[0020] 中草药提取液70份，芦荟提取物50份，植物提取物30份，改性膳食纤维9份，海藻糖8份，单宁3.5份，水溶性壳聚糖3.5份，卡拉胶2.5份，天然抗氧化剂2.5份，角蛋白酶1.0份，角质酶0.5份；

[0021] 进一步地，所述中草药提取液是以有效杀灭和抑制奶牛蹄病感染性病原菌，并且具有活血止痛、消肿生肌、燥湿止血、杀虫解毒、收湿、敛疮、镇痉、祛热，能够有效防止和治疗多种蹄病、提高奶牛自身免疫力和抗病力的中药为原料制备的；

[0022] 优选地，所述中草药提取液的制备方法，包括如下步骤：按重量份数计，称取乳香20-25份，血竭18-20份，黄芪13-16份，没药12-15份，龙骨12-15份，怀牛膝8-12份，五加皮7-
9份，百草霜4-6份，马齿苋4-6份，三七2-4份，白鲜皮1-3份，苦楝皮1-3份；置盛有0.1-0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗10-15min，沥干，将上述中药粉碎至粒径为2mm以下，置容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水，得混合物料，控制温度70-90℃保持2-4h，接着降温至40-50℃，用乳酸调节pH值为3.5-4.5，在功率150-300W条件下进行微波提取10-15min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；然后加入混合物料总重量0.5-1.5％的复合酶进行酶解，用乳酸调节pH值为5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的质量比为1:1-3，控制温度至60-78℃保持3-4h，过滤，得第一滤液；添加滤渣1-3倍重量的水，控制温度85-95℃保持1-3h，然后降温至25-35℃，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤液按照质量比2-4:1-
3合并,均匀混合，即得中草药提取液；

[0023] 所述复合酶为葡聚糖酶、戊聚糖酶、木聚糖酶、酸性蛋白酶、单宁酶按质量比5-7：2-4:2-4:1-3:1-3均匀混合。

[0024] 进一步地，所述芦荟提取物是以芦荟为主要原料，科学复配果胶含量较高的柚、柠檬、橙、柑桔、葡萄等果皮或山楂、甜菜、苹果等废渣经超声清洗、高压脉冲提取、热水浸提而制得的；

[0025] 优选地，所述芦荟提取物的制备方法，包括如下步骤：将新鲜的芦荟、柑桔皮、葡萄皮、山楂果渣分别放入装有1.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗5-10min，沥干，切分成相等规格,长、宽为5-10mm，厚度3-5mm的片或丁，按质量比20-25:3-5:
2-4:1-3均匀混合，然后于-21—-25℃冷冻10-30min；立即进行粉碎，粒径为0.1-1mm；加入粉碎物质量3-5倍的去离子水，混合均匀，用柠檬酸调节pH值为2-3，室温下在电场强度35-
45kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-400Hz条件下进行高压脉冲电场处理，接着常压煮沸30-50min，布袋过滤，滤渣用其质量1-3倍的滤液常压煮沸40-60min,布袋过滤，合并滤液，滤液在75℃下减压浓缩至固形物含量为6-10％，即得芦荟提取物。

[0026] 进一步地，所述植物提取物是以可改变奶牛蹄部角质层结构、促进护蹄喷雾组分快速渗透至皮肤深层并吸收的天然植物为原料而制备。比如：当归、黄皮叶、丁香、丹参、薄荷等；

[0027] 优选地，所述植物提取物的制备方法，包括如下步骤：将当归、黄皮叶、丁香、丹参、薄荷分别清洗、沥干，按质量比10-12:7-9:7-9:4-6:1-3均匀混合，加入混合物料质量0.3-0.5倍的pH值为4.5-5.5的乳酸润湿3-8h,于-18--22℃冷冻1-2h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3-5cm，粉碎物粒径0.5-1mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-
5.5，于室温下在电场强度25-35kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理20-30min；然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提取15-
20min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量
0.9-1.1％的混合酶，于45-55℃酶解30-50min；酶解液过滤、滤液减压浓缩至固形物含量为
8-10％即得植物提取物；

[0028] 所述混合酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、单宁酶、蛋白酶按质量比3-5:3-5:2-4:1-3:0.3-0.5均匀混合。

[0029] 进一步地，所述改性膳食纤维是将膳食纤维经物理、化学或生物的方法处理而得到的具有强持水性、膨胀性、增稠性、吸附性且不受酸、碱、盐的影响，显著提高了奶牛护蹄喷雾的粘结性和理化稳定性；

[0030] 优选地，所述改性纤维是由菊粉、苹果纤维、燕麦纤维、小麦纤维中的一种或多种经生物酶酶解而得到的；

[0031] 更优选地，所述改性膳食纤维的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、小麦纤维、苹果纤维、燕麦纤维按质量比6-8:3-5:2-4:1-3均匀混合，加入其质量3-7倍的水，室温100-300W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-400Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min；用乳酸调节pH值为4.5-6.5，加入混合物质量0.4-0.6％的生物酶，于45-55℃酶解25-45min；酶解液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为5-8％即得改性膳食纤维；

[0032] 所述生物酶为纤维素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、果胶酶按质量比5-7:2-4:1-3:1-2均匀混合。

[0033] 进一步地，所述天然抗氧化剂含有茶多酚、葡萄籽原花青素、迷迭香提取物、甘草提取物、杏叶提取物和Vc中的任意一种或几种；

[0034] 优选地，所述天然抗氧化剂的质量组成为：葡萄籽原花青素:茶多酚:迷迭香提取物＝4-6:2-4:1-3。

[0035] 本发明另一目的是提供上述奶牛护蹄喷雾的制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先将中草药提取液、芦荟提取物和植物提取物均匀混合，放入胶体磨中，调节定子和转子之间的间隙，使出口混合物粒径达到100-200μm，然后通过高压均质机于温度55-75℃，压力100-120MPa条件下循环2-4次，使得均质机出口物料粒径为100-150nm，得到纳米粒子混合液；升温至65-75℃，保温，边搅拌边依次加入卡拉胶、单宁、水溶性壳聚糖、改性膳食纤维、海藻糖，搅拌转速130-150r/min,充分溶解20-30min,停止搅拌，升温，常压煮沸5-10min，自然降至室温，继续降温至-1.5—-0.5℃，保温1-3h，重复上述常压煮沸和低温保温操作2-4次，室温下边搅拌边依次加入天然抗氧化剂、角质酶和角蛋白酶，搅拌转速100-120r/min,均匀混合，于功率200-400W,频率35-45KHz条件下进行超声波处理10-30min,同时在电场强度35-45kV/cm，脉冲时间600-800μs,脉冲频率400-600Hz条件下进行高压脉冲电场处理，最后于0.2-0.4μm微孔膜过滤，除去絮凝物，滤液无菌灌装即得奶牛护蹄喷雾。

[0036] 本发明奶牛护蹄喷雾的使用方法：

[0037] 1、将牛固定在颈夹；

[0038] 2、用清水冲洗蹄子，包括趾间隙；

[0039] 3、将护蹄喷雾与无菌水按体积比1:1配比，使其浓度为50％；

[0040] 4、用喷雾器将护蹄喷雾喷于蹄背部、趾间隙、蹄底部或其病灶处、创伤处；

[0041] 5、预防性防疫，每周1次，连续喷雾3次；治疗性喷雾，每周2次，康复后连续喷雾3次即可。护蹄喷雾前三次的使用浓度为50％，之后每次的使用浓度为20％。

[0042] 有益效果：

[0043] 本发明以有效杀灭和抑制奶牛蹄病感染性病原菌且促进蹄部伤口愈合，能够有效防止和治疗多种蹄病、提高奶牛自身免疫力和抗病力的中草药提取液和具有促进药物渗透、有效修复角质层、强粘结性的芦荟提取物为主要原料，添加可改变奶牛蹄部角质层结构并促进中草药、芦荟等有效成分快速渗透至皮肤深层吸收的植物提取物，将超声分散、溶解技术与高压均质技术有机结合，进一步将原料有效成分颗粒纳米化，制备成更加稳定、更容易渗透和吸收的纳米粒子混合溶液，不仅科学复配高效粘结的改性膳食纤维，而且添加了可保护组分有效成分免受氧化，提高护蹄喷雾理化稳定性的海藻糖、单宁、水溶性壳聚糖、卡拉胶和天然抗氧化剂，同时添加了促进护蹄喷雾粘结并渗透的角蛋白酶、角质酶，最终制得一种稳定性强、可全面治疗奶牛各种类型蹄病、粘结牢固、渗透性强、安全高效、无任何抗生素和化学有毒物质的护蹄喷雾，其以天然植物为原料，采用低温加工技术，特别是采用冷热处理后，护蹄喷雾透明度、稳定性更强，延长了护蹄喷雾的保质期为42-54个月，比市售(24个月)延长18-30个月，不添加任何化学有毒物质，预防和治疗奶牛蹄病过程不使用任何抗生素，降低了奶牛养殖成本，提高了养殖经济效益，增加了奶牛深加工食品的安全性，保护了环境。实验证明(实施例7-10)：1)本发明护蹄喷雾和市售护蹄喷雾相比外观质量较好，利于喷雾，不会发生堵塞喷嘴、粘结喷雾器内壁等现象，随着时间的延长，护蹄喷雾液相相对不稳定，按照护蹄喷雾的使用及药效标准，本发明护蹄喷雾保质期可达42-54个月，比市售(24个月)延长18-30个月，同时也说明本发明内在质量较好，药效安全、稳定。2)本发明护蹄喷雾可有效防止奶牛各种体病的发生，尤其对腐蹄病、蹄底溃疡、疣性皮炎及其它蹄病具有较好的防疫效果，与市售护蹄喷雾相比，其蹄病发生率降低39.14％。同时也说明本发明护蹄喷雾具有较好的渗透性、粘结性、高效性。3)本发明护蹄喷雾可快速、有效治疗各种奶牛蹄病，对牛蹄病具有抑菌抗感染、解毒收敛、去腐生肌和促进伤口愈合的作用，与市购护蹄喷雾相比渗透性强、药效高、粘结性强。在用药7天时，其治愈率已达65.7-80％、总有效率达88.6-94％；分别比对照组(13.3-16％)高49.7-66.7％和(55-80％)和8.6-39％；在用药14天时，其治愈率已达90-96％、总有效率达96.7-100％；分别比对照组(60-76％)高14-
36％和(70-86％)10.7-30％；达到同样的治疗效率，治疗时间至少缩短7天，特别是对疣性皮炎、腐蹄病和其它类型的蹄病治疗效果最好，同时说明，治疗过程在不使用抗生素类药物辅助治疗时，本发明护蹄喷雾治疗时间短、效率高，不仅降低了奶牛养殖成本、增加了养殖经济效益，而且提高了奶牛深加工产品的食品安全性，同时还保护了养殖环境，杜绝了因使用抗生素、化学及有毒物质产生的安全隐患，为应用护蹄喷雾治疗奶牛蹄病开辟了一条新的绿色捷径。4)本发明护蹄喷雾对奶牛体况评分有明显提高的趋势，可以改善奶牛对营养物质的消化、吸收和代谢，有利于促进和提高体内蛋白、脂肪等架构物质的合成，明显可以改善奶牛的体况。5)试验结果表明：试验组与对照组相比，头日增加产奶量7.38千克，提高
19.23％，t检验差异显著(P＜0.05)，护蹄喷雾可显著提高泌乳奶牛的奶产量。6)奶牛血清中免疫球蛋白IgA、IgM、IgG的含量是判断奶牛体液免疫水平的重要指标。由试验结果可知，奶牛分娩应激导致血清免疫球蛋白IgA、IgM、IgG含量急剧下降，体液免疫功能受到抑制。试验组护蹄喷雾可以增加奶牛分娩前1周、分娩当天和分娩后1周血清IgA、IgM、IgG的含量，增强体液免疫功能。7)与对照组相比，试验组围产期奶牛可以大大缩短奶牛产后第一次发情的时间近15天，提高产后第一情期奶牛的受胎率20.5％，增加产后奶牛群体的发情比例
18.5％，有效提高奶牛的繁殖性能。8)试验组与对照组相比，在预防奶牛产后疾病方面，可显著降低各种疾病的发病率，平均降低10-28.7％，t检验差异显著(P＜0.05)，护蹄喷雾可显著降低奶牛产后乳房炎、子宫内膜炎、酮病、瘤胃变位、顽固性厌食症、产褥热和胎衣不下等疾病的发生率，改善奶牛的健康状况。

[0044] 具体技术原理如下：

[0045] 1.本发明制备的中草药提取液是以有效杀灭和抑制奶牛蹄病感染性病原菌，并且具有活血止痛、消肿生肌、燥湿止血、杀虫解毒、收湿、敛疮、镇痉、祛热，能够有效防止和治疗多种蹄病、提高奶牛自身免疫力和抗病力的中药为原料经超声清洗、超声波辅助微波提取、低温酶解和水提醇提而制备的，提取液有效成分含量高，药材利用率高、提取时间短、提取率高、提取成本低，药效高效安全，可有效预防和防止各种奶牛蹄病，不同于现有技术的是，在达到更好的预防和治疗效果的同时，本发明科学复配各种常用、有效且药性柔和的天然中草药，不含轻粉、雄黄、黄丹等剧毒中药，也没有使用任何化学药品和抗生素，防止其通过伤口进入血液循环，进一步提高了牛奶、牛肉等深加工产品的食品安全性，同时提高了养殖人员的药品使用的安全性和养殖环境的安全性，保护了环境。上述药效是各个中草药组分协同作用的结果，并非单个组分药效的叠加。

[0046] 2.本发明的制备的芦荟提取物以芦荟为主要原料，科学复配柑桔皮、葡萄皮、山楂果渣经超声清洗、高压脉冲提取、热水浸提而制得的，最大限度地保留了其中的芦荟凝胶、果胶、芦荟大黄素、芦荟素A、创伤激素和聚糖肽甘露、芦荟多糖等多种生物活性成分，其粘度远远超过了单一芦荟凝胶和果胶的粘度，大大提高了护蹄喷雾的粘结性，更重要的是芦荟中的多种生物活性成分可以促进伤口愈合和恢复生长而不留伤痕，强力修复角质层，抗病毒感染、杀虫灭菌、防晒抗癌、抗衰老解毒的，具有多种功效，还可促进和携带其他有效成分渗透到蹄部深层，提高本身及中草药的渗透效率，缩短渗透时间，与其他成分协同，比如：改性膳食纤维、植物提取物、壳聚糖等，其药效和使用性能更强，非常适合奶牛护蹄喷雾的药效、安全性及给药方式和方法要求。

[0047] 3.本发明制备的植物提取物以可改变奶牛蹄部角质层结构、促进中草药等有效成分快速渗透至皮肤深层并吸收，以根治病灶的天然植物为原料，科学复配并经清洗、润湿、冷冻粉碎、高压脉冲电场提取、超声波辅助微波提取、生物酶解等低温提取工艺而制备的，比如：当归、黄皮叶、丁香、丹参、薄荷等；其有效成分含量高，采用天然植物提取物为促透剂，完全替代了现有技术的氮酮、二甲基砜、吐温、丙二醇、乙醇等化学促透剂且促透效果更加显著，不仅增强了护蹄喷雾的渗透性，而且提高了护蹄喷雾的药理特性，同时增加了护蹄喷雾的使用安全性，保护了环境。与中草药提取液协同，其药效、安全性和使用性更强。

[0048] 4.本发明制备的改性膳食纤维将膳食纤维经物理、化学或生物的方法处理而得到的具有强持水性、膨胀性、增稠性、吸附性且不受酸、碱、盐的影响，显著提高了奶牛护蹄喷雾的粘结性和理化稳定性；吸附能力强，经改性后，纤维素的比表面积增大，网格结构丰富，吸附力增强，进一步增强了护蹄喷雾的粘结性，强大的包埋作用可防止养殖环境(氧气、温度、光照、水分活度等)因素对产品药效的影响，稳定了护蹄喷雾的药性，延长了护蹄喷雾的保质期和防止及治疗过程中的使用期限、使用药性。与单宁、壳聚糖、卡拉胶协同，效果更佳。

[0049] 5.本发明科学复配了少量的角蛋白酶和角质酶，可对奶牛蹄部角质层适度分解，增加药物有效成分快速渗透至内层，缩短治疗时间和增加治疗效果；同时适度分解的角质层更加容易与中草药有效成分、芦荟凝胶、果胶、壳聚糖、改性膳食纤维粘结，进一步增强了护蹄喷雾的粘结性和使用时的牢固性，不易脱落，特别是在蹄病防疫和不使用护蹄绷带治疗蹄病时更为重要。

[0050] 6.本发明科学复配了海藻糖、天然抗氧化剂，可有效防止角蛋白酶、角质酶、中草药提取液、芦荟提取物、植物提取物等生物活性及有效成分氧化、高温、冷冻而失去活性和效力，增强了护蹄喷雾的稳定性、药效、渗透性和粘结性，最终提高了护蹄喷雾的安全性和使用性，与改性膳食纤维、壳聚糖等协同作用效果更佳。

[0051] 7.本发明制备方法克服了传统及现有护蹄喷雾高温杀菌、工艺时间长、效率低、药效低、能耗高等缺陷，全程采用低温加工技术，有效避免了原料有效成分的损失，将超声溶解、分散、高压均质、高压脉冲电场等技术有机结合，进一步增强了原料有效成分的协同效力和护蹄喷雾的粘结性、渗透性和吸收性，特别是采用冷热处理后，护蹄喷雾透明度、稳定性更强，延长了护蹄喷雾的保质期为42-54个月，比市售(24个月)延长18-30个月，缩短了工艺时间，提高了工作效率，降低了生产成本，提高了产品质量，提高了养殖经济效益，增加了奶牛深加工食品的安全性，保护了环境。

[0052] 需要说明的是本发明护蹄喷雾的药用效果是各组分相互协同、相互作用的结果，并非简单的原料功能的叠加，各原料组分的科学复配和提取产生的效果远远超过各单一组份功能和效果的叠加，具有较好的先进性和实用性。

具体实施方式

[0053] 下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。

[0054] 实施例1原料制备

[0055] 1.中草药提取液的制备：

[0056] 所述中草药提取液的制备方法，包括如下步骤：按重量份数计，称取乳香23份，血竭19份，黄芪15份，没药14份，龙骨14份，怀牛膝10份，五加皮8份，百草霜5份，马齿苋5份，三七3份，白鲜皮2份，苦楝皮2份；置盛有0.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、30KHz清洗12min，沥干，将上述中药粉碎至粒径为2mm以下，置容器中均匀混合并添加5倍重量的水，得混合物料，控制温度80℃保持3h，接着降温至45℃，用乳酸调节pH值为4.0，在功率200W条件下进行微波提取12min，同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；
然后加入混合物料总重量1.0％的复合酶进行酶解，用乳酸调节pH值为6.2，酶解3h，最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和丙醇混合的质量比为1:2，控制温度至70℃保持3.5h，过滤，得第一滤液；添加滤渣2倍重量的水，控制温度90℃保持2h，然后降温至
30℃，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤液按照质量比3:2合并,均匀混合，即得中草药提取液；

[0057] 所述复合酶为葡聚糖酶、戊聚糖酶、木聚糖酶、酸性蛋白酶、单宁酶按质量比6:3:3:2:2均匀混合。

[0058] 2.芦荟提取物的制备：

[0059] 所述芦荟提取物的制备方法，包括如下步骤：将新鲜的芦荟、柑桔皮、葡萄皮、山楂果渣分别放入装有1.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗8min，沥干，切分成相等规格,长、宽为5-10mm，厚度3-5mm的片或丁，按质量比23:4:3:2均匀混合，然后于-23℃冷冻20min；立即进行粉碎，粒径为0.5mm；加入粉碎物质量4倍的去离子水，混合均匀，用柠檬酸调节pH值为2.5，室温下在电场强度40kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理，接着常压煮沸40min，布袋过滤，滤渣用其质量2倍的滤液常压煮沸50min,布袋过滤，合并滤液，滤液在75℃下减压浓缩至固形物含量为8％，即得芦荟提取物。

[0060] 3.植物提取物的制备：

[0061] 所述植物提取物的制备方法，包括如下步骤：将当归、黄皮叶、丁香、丹参、薄荷分别清洗、沥干，按质量比11:8:8:5:2均匀混合，加入混合物料质量0.4倍的pH值为5.0的乳酸润湿5h,于-20℃冷冻1.5h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度4cm，粉碎物粒径0.8mm,接着加入粉碎物质量5倍的水，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理25min；然后于室温在功率200W条件下进行微波辐照提取18min，同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量1.0％的混合酶，于50℃酶解40min；酶解液过滤、滤液减压浓缩至固形物含量为9％即得植物提取物；

[0062] 所述混合酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、单宁酶、蛋白酶按质量比4:4:3:2:0.4均匀混合。

[0063] 4.改性膳食纤维的制备：

[0064] 所述改性膳食纤维的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、小麦纤维、苹果纤维、燕麦纤维按质量比7:4:3:2均匀混合，加入其质量5倍的水，室温200W、35KHz条件超声提取12min,然后在电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理12min；用乳酸调节pH值为5.5，加入混合物质量0.5％的生物酶，于50℃酶解35min；酶解液过滤，滤液减压浓缩至固形物含量为6％即得改性膳食纤维；

[0065] 所述生物酶为纤维素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、果胶酶按质量比6:3:2:1.5均匀混合。

[0066] 以下实施例2-6所使用的中草药提取液、芦荟提取物、植物提取物、改性膳食纤维均为实施例1制备，其它均为市购商品，其中海藻糖、单宁、水溶性壳聚糖、卡拉胶、天然抗氧化剂、角蛋白酶、角质酶均为粉状。

[0067] 实施例2

[0068] 一种奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：中草药提取液70份，芦荟提取物50份，植物提取物30份，改性膳食纤维9份，海藻糖8份，单宁3.5份，水溶性壳聚糖3.5份，卡拉胶2.5份，天然抗氧化剂2.5份，角蛋白酶1.0份，角质酶0.5份；

[0069] 所述天然抗氧化剂的质量组成为：葡萄籽原花青素:茶多酚:迷迭香提取物＝5:3:2；

[0070] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先将中草药提取液、芦荟提取物和植物提取物均匀混合，放入胶体磨中，调节定子和转子之间的间隙，使出口混合物粒径达到150μm，然后通过高压均质机于温度65℃，压力110MPa条件下循环3次，使得均质机出口物料粒径为130nm，得到纳米粒子混合液；升温至70℃，保温，边搅拌边依次加入卡拉胶、单宁、水溶性壳聚糖、改性膳食纤维、海藻糖，搅拌转速140r/min,充分溶解25min,停止搅拌，升温，常压煮沸8min，自然降至室温，继续降温至-1℃，保温2h，重复上述常压煮沸和低温保温操作3次，室温下边搅拌边依次加入天然抗氧化剂、角质酶和角蛋白酶，搅拌转速110r/min,均匀混合，于功率300W,频率40KHz条件下进行超声波处理20min,同时在电场强度40kV/cm，脉冲时间700μs,脉冲频率500Hz条件下进行高压脉冲电场处理，最后于0.3μm微孔膜过滤，除去絮凝物，滤液无菌灌装即得奶牛护蹄喷雾。

[0071] 经上述方法制备的护蹄喷雾保质期为54个月。

[0072] 实施例3

[0073] 一种奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：中草药提取液65份，芦荟提取物45份，植物提取物25份，改性膳食纤维8份，海藻糖7份，单宁3份，水溶性壳聚糖3份，卡拉胶2份，天然抗氧化剂2份，角蛋白酶0.8份，角质酶0.4份；

[0074] 所述天然抗氧化剂的质量组成为：葡萄籽原花青素:茶多酚:迷迭香提取物＝4:2:1；

[0075] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先将中草药提取液、芦荟提取物和植物提取物均匀混合，放入胶体磨中，调节定子和转子之间的间隙，使出口混合物粒径达到100μm，然后通过高压均质机于温度55℃，压力100MPa条件下循环2次，使得均质机出口物料粒径为150nm，得到纳米粒子混合液；升温至65℃，保温，边搅拌边依次加入卡拉胶、单宁、水溶性壳聚糖、改性膳食纤维、海藻糖，搅拌转速130r/min,充分溶解20min,停止搅拌，升温，常压煮沸5min，自然降至室温，继续降温至-1.5℃，保温1h，重复上述常压煮沸和低温保温操作2次，室温下边搅拌边依次加入天然抗氧化剂、角质酶和角蛋白酶，搅拌转速100r/min,均匀混合，于功率200W,频率35KHz条件下进行超声波处理10min,同时在电场强度35kV/cm，脉冲时间600μs,脉冲频率400Hz条件下进行高压脉冲电场处理，最后于0.2μm微孔膜过滤，除去絮凝物，滤液无菌灌装即得奶牛护蹄喷雾。

[0076] 经上述方法制备的护蹄喷雾保质期为52个月。

[0077] 实施例4

[0078] 一种奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：中草药提取液75份，芦荟提取物55份，植物提取物35份，改性膳食纤维10份，海藻糖9份，单宁4份，水溶性壳聚糖4份，卡拉胶3份，天然抗氧化剂3份，角蛋白酶1.2份，角质酶0.6份；

[0079] 所述天然抗氧化剂的质量组成为：葡萄籽原花青素:茶多酚:迷迭香提取物＝6:4:3；

[0080] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先将中草药提取液、芦荟提取物和植物提取物均匀混合，放入胶体磨中，调节定子和转子之间的间隙，使出口混合物粒径达到200μm，然后通过高压均质机于温度75℃，压力120MPa条件下循环4次，使得均质机出口物料粒径为100nm，得到纳米粒子混合液；升温至75℃，保温，边搅拌边依次加入卡拉胶、单宁、水溶性壳聚糖、改性膳食纤维、海藻糖，搅拌转速150r/min,充分溶解30min,停止搅拌，升温，常压煮沸10min，自然降至室温，继续降温至-0.5℃，保温3h，重复上述常压煮沸和低温保温操作4次，室温下边搅拌边依次加入天然抗氧化剂、角质酶和角蛋白酶，搅拌转速120r/min,均匀混合，于功率400W,频率45KHz条件下进行超声波处理30min,同时在电场强度45kV/cm，脉冲时间800μs,脉冲频率600Hz条件下进行高压脉冲电场处理，最后于0.4μm微孔膜过滤，除去絮凝物，滤液无菌灌装即得奶牛护蹄喷雾。

[0081] 经上述方法制备的护蹄喷雾保质期为48个月。

[0082] 实施例5

[0083] 一种奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：

[0084] 中草药提取液60份，芦荟提取物40份，植物提取物20份，改性膳食纤维6份，海藻糖5份，单宁2份，水溶性壳聚糖2份，卡拉胶1份，葡萄籽原花青素1份，角蛋白酶0.5份，角质酶
0.1份；

[0085] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先将中草药提取液、芦荟提取物和植物提取物均匀混合，放入胶体磨中，调节定子和转子之间的间隙，使出口混合物粒径达到100μm，然后通过高压均质机于温度75℃，压力100MPa条件下循环4次，使得均质机出口物料粒径为100nm，得到纳米粒子混合液；升温至75℃，保温，边搅拌边依次加入卡拉胶、单宁、水溶性壳聚糖、改性膳食纤维、海藻糖，搅拌转速130r/min,充分溶解30min,停止搅拌，升温，常压煮沸5min，自然降至室温，继续降温至-0.5℃，保温1h，重复上述常压煮沸和低温保温操作4次，室温下边搅拌边依次加入天然抗氧化剂、角质酶和角蛋白酶，搅拌转速100r/min,均匀混合，于功率400W,频率35KHz条件下进行超声波处理30min,同时在电场强度35kV/cm，脉冲时间800μs,脉冲频率400Hz条件下进行高压脉冲电场处理，最后于0.4μm微孔膜过滤，除去絮凝物，滤液无菌灌装即得奶牛护蹄喷雾。

[0086] 经上述方法制备的护蹄喷雾保质期为45个月。

[0087] 实施例6

[0088] 一种奶牛护蹄喷雾，主要由以下重量份数的原料制备：

[0089] 中草药提取液80份，芦荟提取物60份，植物提取物40份，改性膳食纤维12份，海藻糖11份，单宁5份，水溶性壳聚糖5份，卡拉胶4份，甘草提取物4份，角蛋白酶1.5份，角质酶1份；

[0090] 制备方法，包括如下步骤：按照配方，首先将中草药提取液、芦荟提取物和植物提取物均匀混合，放入胶体磨中，调节定子和转子之间的间隙，使出口混合物粒径达到200μm，然后通过高压均质机于温度55℃，压力120MPa条件下循环2次，使得均质机出口物料粒径为150nm，得到纳米粒子混合液；升温至65℃，保温，边搅拌边依次加入卡拉胶、单宁、水溶性壳聚糖、改性膳食纤维、海藻糖，搅拌转速150r/min,充分溶解20min,停止搅拌，升温，常压煮沸10min，自然降至室温，继续降温至-1.5℃，保温3h，重复上述常压煮沸和低温保温操作2次，室温下边搅拌边依次加入天然抗氧化剂、角质酶和角蛋白酶，搅拌转速120r/min,均匀混合，于功率200W,频率45KHz条件下进行超声波处理10min,同时在电场强度45kV/cm，脉冲时间600μs,脉冲频率600Hz条件下进行高压脉冲电场处理，最后于0.2μm微孔膜过滤，除去絮凝物，滤液无菌灌装即得奶牛护蹄喷雾。

[0091] 经上述方法制备的护蹄喷雾保质期为42个月。

[0092] 实施例7本发明护蹄喷雾储藏稳定性试验

[0093] 护蹄喷雾作为一种主要由中草药提取液制备的液体制剂，参照中药液体制剂的稳定性标准，将澄明度确定为护蹄喷雾的质量稳定性指标，它不仅直接反映了产品的外观质量，亦反映了产品内在质量及稳定性，是护蹄喷雾最重要质控指标。

[0094] 澄明度表征方法：澄清透明90-100分；微浊80-89分；浑浊70-79分；较混浊60-69分；严重浑浊50-59分；沉淀49分以下(沉淀颗粒越大、数量越多，分数越低)。

[0095] 将本发明实施例2制备的护蹄喷雾和市售同类型、同规格、同生产日期的护蹄喷雾于室温、通风、避光条件储藏，观察护蹄喷雾澄明度，每6个月观察记录结果一次，结果见表1：

[0096] 表1：储藏期护蹄喷雾澄明度检测结果

[0097]

[0098] 以上结果表明：本发明护蹄喷雾和市售护蹄喷雾相比外观质量较好，利于喷雾，不会发生堵塞喷嘴、粘结喷雾器内壁等现象，随着时间的延长，护蹄喷雾液相相对不稳定，按照护蹄喷雾的使用及药效标准，本发明护蹄喷雾保质期可达42-54个月，比市售(24个月)延长18-30个月，同时也说明本发明内在质量较好，药效安全、稳定。

[0099] 需要说明的是：本发明实施例3-6制备的护蹄喷雾同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

[0100] 实施例8本发明护蹄喷雾预防奶牛蹄病防疫试验

[0101] 1材料与方法

[0102] 1.1、试验材料

[0103] 1.1.1、本发明实施例2制备的护蹄喷雾和市售护蹄喷雾

[0104] 1.1.2、试验奶牛：试验在北京密云某一奶牛场进行，品种为中国荷斯坦奶牛2胎以上围产期奶牛，共46头，均无蹄病，其中2胎16头，3胎12头，4胎10头，5胎8头。试验牛按胎次、前期产奶量相同或相近的配对原则，分为实验组与对照组，每组23头。

[0105] 1.2、试验日粮组成：试验组和对照组采用同样的饲养管理方法。日粮组成为精料(玉米52.7％、麸皮8％、豆粕7％、棉粕9％、花生粕9％、玉米DDGS 8％、预混料7115A 6％)，粗料为玉米青贮、羊草、豆穰、苜蓿等。

[0106] 1.3、试验方法：试验组和对照组分别喷雾防疫蹄病，试验组使用本发明实施例2制备的护蹄喷雾，对照组使用市售护蹄喷雾，使用方法：1)将牛固定在颈夹；2)用清水冲洗蹄子，包括趾间隙；3)将护蹄喷雾与无菌水按体积比1:1配比，使其浓度为50％；4)用喷雾器将护蹄喷雾喷于蹄背部、趾间隙、蹄底部；5)每周1次，连续喷雾3次为一个预防性防疫周期，每季度一个防疫周期；6)试验期间观察、记录试验组和对照组奶牛各种蹄病发生情况，年底统计蹄病发生率，结果如表2；所有供试奶牛饲喂场内自配的产奶精料4-8kg，根据饲养阶段和产奶量进行调整，玉米青贮定量饲喂20kg/天，粗饲料(羊草、豆穰、苜蓿)自由采食。

[0107] 1.4、试验时间：试验期从2014年4月10日—2015年4月10日结束，历时一年。

[0108] 表2：奶牛蹄病防疫结果

[0109]

[0110]

[0111] 以上结果表明：本发明护蹄喷雾可有效防止奶牛各种体病的发生，尤其对腐蹄病、蹄底溃疡、疣性皮炎及其它蹄病具有较好的防疫效果，与市售护蹄喷雾相比，其蹄病发生率降低39.14％。同时也说明本发明护蹄喷雾具有较好的渗透性、粘结性、高效性。

[0112] 需要说明的是：本发明实施例3-6制备的护蹄喷雾同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

[0113] 实施例9本发明护蹄喷雾在治疗奶牛蹄病时的效果试验

[0114] 为验证本发明护蹄喷雾的临床疗效，于2014年6月-2015年10月在河北省和内蒙古自治区的三个奶牛养殖场，共选择320例奶牛蹄病，其中疣性皮炎100例，趾间增生60例，蹄底溃疡70例，腐蹄病50例，其它类型蹄病40例，按照蹄病类型随机分为两组：试验组和对照组，经养殖场兽医和修蹄工分别使用本发明实施例2制备的护蹄喷雾和市购护蹄喷雾进行治疗，试验组和对照组除用药(护蹄喷雾)不同外，其它饲养和管理方式、日粮、治疗方法、饲喂环境、疗效评定等均相同。

[0115] 病例选择标准：有明显跛行症状，喜趴卧，站立困难或站立时间较短；患肢负重不实或各肢蹄交替负重；触诊患肢蹄温升高，叩诊时疼痛敏感。病牛表现精神沉郁，食欲不振，产奶量下降，有时体温升高，可达40℃以上。如病情加重，个别患病奶牛表现出一些全身症状，重者患部红肿，卧地不起。

[0116] 护蹄喷雾使用方法：1)将牛固定在颈夹；2)用清水冲洗蹄子，包括趾间隙；3)将护蹄喷雾与无菌水按体积比1:1配比，使其浓度为50％；4)用喷雾器将护蹄喷雾喷于蹄背部、趾间隙、蹄底部的创伤处或病灶；5)每周2次，连续喷雾4次为一个治疗周期，康复后连续喷雾3次即可。护蹄喷雾前三次的使用浓度为50％，之后每次的使用浓度为20％。试验组和对照组各进行一个治疗周期。

[0117] 疗效判定标准：于用药后第7天、14天观察病牛症状，根据判定标准确定疗效。患牛跛行消失，疼痛消失，肿胀消退，创面愈合为治愈；疼痛明显减轻，肿胀范围缩小，跛行减轻或不明显为有效；疼痛不消失，肿胀无消退，跛行无消退，有运动障碍的为无效。总有效头数等于痊愈和有效的头数总和。

[0118] 对治疗的结果进行统计和分析，具体如表3、4所示：

[0119] 表3：用药7天治疗结果

[0120]

[0121] 表4：用药14天治疗结果

[0122]

[0123] 以上结果表明：本发明护蹄喷雾可快速、有效治疗各种奶牛蹄病，对牛蹄病具有抑菌抗感染、解毒收敛、去腐生肌和促进伤口愈合的作用，与市购护蹄喷雾相比渗透性强、药效高、粘结性强。在用药7天时，其治愈率已达65.7-80％、总有效率达88.6-94％；分别比对照组(13.3-16％)高49.7-66.7％和(55-80％)和8.6-39％；在用药14天时，其治愈率已达90-96％、总有效率达96.7-100％；分别比对照组(60-76％)高14-36％和(70-86％)10.7-
30％；达到同样的治疗效率，治疗时间至少缩短7天，特别是对疣性皮炎、腐蹄病和其它类型的蹄病治疗效果最好，同时说明，治疗过程在不使用抗生素类药物辅助治疗时，本发明护蹄喷雾治疗时间短、效率高，不仅降低了奶牛养殖成本、增加了养殖经济效益，而且提高了奶牛深加工产品的食品安全性，同时还保护了养殖环境，杜绝了因使用抗生素、化学及有毒物质产生的安全隐患，为应用护蹄喷雾治疗奶牛蹄病开辟了一条新的绿色捷径。

[0124] 需要说明的是：本发明实施例3-6制备的护蹄喷雾同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

[0125] 实施例10本发明护蹄喷雾对奶牛生产性能、繁殖性能和防疾病的影响[0126] 1材料与方法

[0127] 1.1、试验材料

[0128] 1.1.1、本发明产品

[0129] 1.1.2、试验奶牛：实施例9实验组和对照组经治疗蹄病的奶牛。

[0130] 1.2、试验日粮组成：试验组和对照组采用同样的饲养管理方法。日粮组成为精料(玉米52.7％、麸皮8％、豆粕7％、棉粕9％、花生粕9％、玉米DDGS 8％、预混料7115A 6％)，粗料为玉米青贮、羊草、豆穰、苜蓿等。

[0131] 1.3、试验方法：根据奶牛配种记录，试验组除与对照组采取同样的方法饲喂，所有供试奶牛饲喂场内自配的产奶精料4-8kg，根据饲养阶段和产奶量进行调整，玉米青贮定量饲喂20kg/天，粗饲料(羊草、豆穰、苜蓿)自由采食。

[0132] 1.4、生产、代谢、繁殖性能记录：在产后120天期间内测定和记录每头奶牛的产奶量；观察、评价奶牛体况；检测繁殖性能；在产后120天期间内观察记录参试奶牛的发情配种情况，妊娠与否以配种后60天直肠检查为准。

[0133] 1.5、疾病监测与记录：对奶牛发病情况(乳房炎、子宫内膜炎、酮病、瘤胃变位、顽固性厌食症、产褥热和胎衣不下等疾病)检测，分娩当天监测胎衣不下发病情况，定义胎衣在12-24小时内不排出者为胎衣不下。采用酮粉法检测奶牛酮病，采用CMT-Test 试剂检测乳房炎。

[0134] 1.6、统计分析用EXCEL 软件对原始数据进行处理，然后用SAS[11]方法进行方差分析。

[0135] 2.试验结果

[0136] 2.1护蹄喷雾对奶牛体况的影响：

[0137] 表5奶牛5部分体况评分标准

[0138]分值脊椎部肋部臀部两侧尾根两侧髋骨、坐骨关节
1 非常突出根根可见严重下陷隐窝很深非常突出
2 明显突出多数可见明显下陷隐窝明显明显突出
3 稍微突出少数可见稍微下陷隐窝稍显稍微突出
4 平直完全不见平直隐窝不显不显示突出
5 丰满丰满丰满丰满丰满

[0139] 表6奶牛体况外观检查评分结果

[0140]

[0141] 以上结果表明：试验组护蹄喷雾对奶牛体况评分有明显提高的趋势，可以改善奶牛对营养物质的消化、吸收和代谢，有利于促进和提高体内蛋白、脂肪等架构物质的合成，明显可以改善奶牛的体况。

[0142] 2.2护蹄喷雾对奶牛产奶量的影响

[0143] 表6 120天奶牛产奶量

[0144] 头数(头) 产奶天数(天) 总产奶量(kg) 平均产奶量(kg/天.头)
对照组 160 120 736704 38.37±5.16
试验组 160 120 874560 45.75±5.92
处理差异b 7.38

[0145] 以上结果表明：试验组与对照组相比，头日增加产奶量7.38千克，提高19.23％，t检验差异显著(P＜0.05)，护蹄喷雾可显著提高泌乳奶牛的奶产量。

[0146] 2.3护蹄喷雾对奶牛免疫功能的影响

[0147] 表7围产期奶牛血清免疫球蛋白含量检测结果

[0148]

[0149]

[0150] 奶牛血清中免疫球蛋白IgA、IgM、IgG的含量是判断奶牛体液免疫水平的重要指标。由试验结果可知，奶牛分娩应激导致血清免疫球蛋白IgA、IgM、IgG含量急剧下降，体液免疫功能受到抑制。试验组护蹄喷雾可以增加奶牛分娩前1周、分娩当天和分娩后1周血清IgA、IgM、IgG的含量，增强体液免疫功能。

[0151] 2.4护蹄喷雾对围产期奶牛繁殖性能的影响

[0152] 表8围产期奶牛繁殖性能检测结果

[0153]

[0154] 试验结果表明，与对照组相比，试验组围产期奶牛可以大大缩短奶牛产后第一次发情的时间近15天，提高产后第一情期奶牛的受胎率20.5％，增加产后奶牛群体的发情比例18.5％，有效提高奶牛的繁殖性能。

[0155] 2.5护蹄喷雾对围产期奶牛产后疾病发生的影响

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一种奶牛护蹄喷雾及其制备方法

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