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一种覆盆子有效部位的制备方法及其应用

阅读：378发布：2020-05-08

专利汇可以提供一种覆盆子有效部位的制备方法及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种覆盆子有效部位的制备方法及其应用，将覆盆子的醇水混合溶液提取物加入药品或食品中，或者将覆盆子的醇水混合溶液提取物制成颗粒剂后加入药品或食品中，用于防治餐后高血糖和I型糖尿病。本发明的覆盆子有效部位及其制剂的制备方法简单、成本低。制得的有效部位不但可以抑制餐后高血糖，而且对I型糖尿病也表现出很好的效果，具有很高的实用价值。且覆盆子是药食两用植物，安全性高。，下面是一种覆盆子有效部位的制备方法及其应用专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种覆盆子有效部位的应用，其特征在于，将覆盆子的醇水混合溶液提取物加入药品或食品中，或者将覆盆子的醇水混合溶液提取物制成颗粒剂后加入药品或食品中，用于防治餐后高血糖和I型糖尿病。
2.根据权利要求1所述的一种覆盆子有效部位的应用，其特征在于，所述醇水混合溶液为乙醇水溶液或甲醇水溶液。
3.根据权利要求1所述的一种覆盆子有效部位的应用，其特征在于，所述提取物的制备方法为：
(1) 将覆盆子粉碎，得到的覆盆子粉末用醇水混合溶液浸提或超声提取，提取液浓缩干燥得到覆盆子粗提物；
(2) 用含醇质量百分含量≤20%的醇水混合溶液溶解所述覆盆子粗提物，离心或过滤去除不溶物，清液用大孔树脂吸附，以醇水混合溶液进行梯度洗脱，收集含醇体积百分含量为40%～80%的醇水混合溶液洗脱流份相混合，浓缩并干燥，得所述覆盆子提取物，即为覆盆子有效部位。
4.根据权利要求3所述的一种覆盆子有效部位的应用，其特征在于，所述步骤(1)中，所述醇水混合溶液中醇的质量百分含量为40%～80%；提取次数为2～3次；常温浸提，每次浸提时间为24～48小时；每次超声提取时间为30～60 min，超声功率为250～500W。
5.根据权利要求3所述的一种覆盆子有效部位的应用，其特征在于，步骤(2)中用于溶解覆盆子粗提物的醇水混合溶液质量为所述覆盆子粗提物质量的5～10倍；所述大孔树脂为非极性聚苯乙烯多孔性吸附树脂，上样量为1BV，上样流速为1～5BV/h，吸附方式为静态吸附，吸附时间为4小时；每次洗脱体积为3BV，洗脱流速为1～5BV/h。
6.根据权利要求1所述的一种覆盆子有效部位的应用，其特征在于，所述颗粒剂的制备方法为：
步骤一、将所制备的覆盆子有效部位粉碎过筛；
步骤二、将过筛后的粉末与辅料混合，将含十二烷基硫酸钠或吐温80的乙醇水溶液加入混合物中制粒；
步骤三、将制粒后的颗粒在烘箱中干燥，干燥颗粒放入整粒机中过14目筛整粒，得到覆盆子颗粒剂。
7.根据权利要求6所述的一种覆盆子有效部位的应用，其特征在于，过筛筛网选择60目筛网，辅料选择乳糖、蔗糖粉或糊精中的一种或几种的混合。
8.根据权利要求6所述的一种覆盆子有效部位的应用，其特征在于，所述步骤二中，乙醇水溶液中乙醇的体积分数为50%，过筛后的覆盆子有效部位粉末和辅料的质量比为1:1；
十二烷基硫酸钠或吐温80与乙醇水溶液量比为10～20g十二烷基硫酸钠或吐温80/1L乙醇水溶液。
9.根据权利要求6所述的一种覆盆子有效部位的应用，其特征在于，所述步骤三中，干燥温度为50～60℃。
10.一种覆盆子的有效部位，其特征在于，制备方法为：
(1) 将覆盆子粉碎，得到的覆盆子粉末用醇水混合溶液浸提或超声提取，提取液浓缩干燥得到覆盆子粗提物；
(2) 用含醇质量百分含量≤20%的醇水混合溶液溶解所述覆盆子粗提物，离心或过滤去除不溶物，清液用大孔树脂吸附，以醇水混合溶液进行梯度洗脱，收集含醇体积百分含量为40%～80%的醇水混合溶液洗脱流份相混合，浓缩并干燥，得所述覆盆子提取物，即为覆盆子有效部位。

说明书全文

一种覆盆子有效部位的制备方法及其应用

技术领域

[0001] 本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种覆盆子有效部位的制备方法及其应用。

背景技术

[0002] 糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)是由于人体中胰岛素含量绝对或相对不足而引发的内分泌代谢性紊乱的疾病，分为I型和II型糖尿病。目前，糖尿病已成为全球性的重大公共健康问题，截止2017年，全球大约有4.25亿人患有糖尿病，因糖尿病导致的死亡人数约占全球总死亡人数的9%。2017年，我国糖尿病患者人数达到1.14亿，尤其是餐后高血糖的比例较高。餐后高血糖的有效治疗方法之一是通过抑制α-葡萄糖苷酶活性来降低机体餐后和空腹血糖水平。目前临床上常用的治疗餐后高血糖的药物为阿卡波糖，有一定的副作用。I型糖尿病为胰岛素依赖型糖尿病，主要由胰岛功能分泌胰岛素的胰岛β细胞受损，导致体内胰岛素分泌不足或不能分泌。目前I型糖尿病的主要治疗手段是外源性摄入胰岛素，或通过干细胞或基因疗法修复受损的胰岛β细胞，恢复胰岛功能，使之正常分泌胰岛素。

[0003] 覆盆子为蔷薇科悬钩子属植物，华东覆盆子(Rubus chingii Hu)的干燥未成熟果实，夏初由绿变为黄绿时采收因叶裂如掌也称掌叶覆盆子，为《中国药典》收载的常用中药，具有益肾、固精、缩尿和养肝明目之功效，用于肾虚尿频、阳痿早泄、遗精滑精等。主要产于江苏、安徽、浙江、江西、福建、广西等地区。目前国内外学者对覆盆子的化学成分及其药理活性等方面开展了一系列研究，结果表明覆盆子在抗肿瘤、抗氧自由基、抗衰老等方面有明确活性。

[0004] 文献调研发现，现有技术中还没有对覆盆子中抑制餐后高血糖和I型糖尿病有效部位制备方法及用途的报道。

发明内容

[0005] 本发明提供了一种覆盆子有效部位的应用，将覆盆子的醇水混合溶液提取物加入药品或食品中，或者将覆盆子的醇水混合溶液提取物制成颗粒剂后加入药品或食品中，用于防治餐后高血糖和I型糖尿病。

[0006] 进一步地，所述醇水混合溶液为乙醇水溶液或甲醇水溶液。

[0007] 进一步地，所述提取物的制备方法为：(1) 将覆盆子粉碎，得到的覆盆子粉末用醇水混合溶液浸提或超声提取，提取液浓缩干燥得到覆盆子粗提物；
(2) 用含醇质量百分含量≤20%的醇水混合溶液溶解所述覆盆子粗提物，离心或过滤去除不溶物，清液用大孔树脂吸附，以醇水混合溶液进行梯度洗脱，收集含醇体积百分含量为40%～80%的醇水混合溶液洗脱流份相混合，浓缩并干燥，得所述覆盆子提取物，即为覆盆子有效部位。

[0008] 进一步地，所述步骤(1)中，所述醇水混合溶液中醇的质量百分含量为40%～80%；提取次数为2～3次；常温浸提，每次浸提时间为24～48小时；每次超声提取时间为30～60 min，超声功率为250～500W。

[0009] 进一步地，步骤(2)中用于溶解覆盆子粗提物的醇水混合溶液质量为所述覆盆子粗提物质量的5～10倍；所述大孔树脂为非极性聚苯乙烯多孔性吸附树脂，上样量为1BV，上样流速为1～5BV/h，吸附方式为静态吸附，吸附时间为4小时；每次洗脱体积为3BV，洗脱流速为1～5BV/h。

[0010] 进一步地，所述颗粒剂的制备方法为：步骤一、将所制备的覆盆子有效部位粉碎过筛；
步骤二、将过筛后的粉末与辅料混合，将含十二烷基硫酸钠或吐温80的乙醇水溶液加入混合物中制粒；
步骤三、将制粒后的颗粒在烘箱中干燥，干燥颗粒放入整粒机中过14目筛整粒，得到覆盆子颗粒剂。

[0011] 进一步地，过筛筛网选择60目筛网，辅料选择乳糖、蔗糖粉或糊精中的一种或几种的混合。

[0012] 进一步地，所述步骤二中，乙醇水溶液中乙醇的体积分数为50%，过筛后的覆盆子有效部位粉末和辅料的质量比为1:1；十二烷基硫酸钠或吐温80与乙醇水溶液量比为10～20g十二烷基硫酸钠或吐温80/1L乙醇水溶液。

[0013] 进一步地，所述步骤三中，干燥温度为50～60℃。

[0014] 因此，通过上述技术方案可知，本发明的有益效果在于：本发明的覆盆子有效部位及其制剂的制备方法简单、成本低。制得的有效部位不但可以抑制餐后高血糖，而且对I型糖尿病也表现出很好的效果，具有很高的实用价值。且覆盆子是药食两用植物，安全性高。附图说明

[0015] 图1为各喂养组小鼠血糖随时间变化的曲线图；图2为图1各曲线至横坐标的积分面积；
图3(a)～(c)分别为各喂养组小鼠餐后血液葡萄糖、胰岛素浓度和HOMA-β值；
图4为各喂养组小鼠胰腺组织常规HE切片染色显微图；
图5为各喂养组胰岛面积统计图；
图6为耐受能力测试各组小鼠血糖随时间变化曲线图；
图7为图2各曲线至横坐标的积分面积。

具体实施方式

[0016] 下面结合实施例进行详细的说明：取1000g覆盆子粉末，按料液比1:10（g/mL）的比例将粉末和乙醇水溶液相混合，乙醇水溶液中乙醇的质量百分含量为40%；混合物在常温下超声提取60min（超声功率为400w），所得提取液过滤后，滤渣按照上述提取方式重复提取2次，合并3次分别所得的滤液，真空浓缩干燥后得到覆盆子粗提物228 g。

[0017] 用覆盆子粗提物8倍质量的乙醇水溶液(乙醇的质量百分含量为10%)溶解覆盆子粗提物，离心后取上清液，加入内径为5.5cm、填料（XAD-16）高度为25cm的大孔吸附树脂柱，用乙醇-水溶液作为洗脱液，按照乙醇在洗脱液中的体积含量依次为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、95%对上样溶液进行梯度洗脱，每个梯度洗脱体积为3BV，洗脱流速为
4BV/h。收集上述梯度为40%～80%时的洗脱流份相混合，真空浓缩干燥后得到覆盆子有效部位52 g。

[0018] 使用时可将覆盆子有效部位制成颗粒剂，制备方法为：将覆盆子有效部位粉碎后过60目筛，加入等量的乳糖，混合物放入高剪切设备混合2分钟，倒入含十二烷基硫酸钠的乙醇水溶液(乙醇体积分数为50%)进行制粒(含十二烷基硫酸钠的乙醇水溶液的加入量/混合物中覆盆子有效部位的量=3mL/10g)，其中十二烷基硫酸钠/乙醇水溶液为15g/L。将所得湿颗粒倒入托盘铺平，放入60℃烘箱干燥（控制湿度在4%以下），干燥后颗粒放入整粒机中过14目筛整粒，最终得到覆盆子颗粒剂。

[0019] 生物活性测试：（1）抑制和延缓餐后血糖：实验所使用的小鼠C57BL/6购自北京维通利华实验动物技术有限公司（鼠龄为8周）。实验小鼠经过4天适应饲养后，被随机分成4组，每组8只：蔗糖组（Con），蔗糖+阿卡波糖组（acarbose），蔗糖+覆盆子低剂量组（FPZ-L），蔗糖+覆盆子高剂量组（FPZ-H）。小鼠连续灌喂7天，蔗糖组每顿灌喂蔗糖及蔗糖等量的生理盐水，蔗糖+阿卡波糖组每顿灌喂蔗糖及5mg/kg(按小鼠重量)的阿卡波糖，蔗糖+覆盆子低剂量组每顿灌喂蔗糖及30 mg/kg(按小鼠重量)覆盆子有效部位，蔗糖+覆盆子高剂量组每顿灌喂蔗糖及60 mg/kg(按小鼠重量)覆盆子有效部位。经过7天灌喂后，小鼠被过夜（>16小时）饥饿。然后给小鼠灌喂3 g/kg(按小鼠重量)蔗糖，在灌喂后0、30、60、90和120分钟，分别通过鼠尾采血，使用便携式血糖仪测量小鼠血糖，绘制各组小鼠血糖随时间变化曲线图，如图1所示，并计算曲线下的面积（Area under curve，AUC），如图2所示。结果使用平均值±标准误表示。*，P<0.05，FPZ-L与Con组相比，&，P<0.05，FPZ-H与Con组相比，#，P<0.05，Acarbose与Con组相比。结果表明覆盆子有效部位可以抑制和延缓餐后血糖升高。

[0020] （2）STZ诱导I型糖尿病小鼠实验：小鼠（鼠龄为10周）被随机分成4组，每组8只：对照组（Con），链脲霉素（STZ），链脲霉素+覆盆子组（STZ+FPZ）和链脲霉素+二甲双胍组（STZ+MT）。链脲霉素、链脲霉素+覆盆子组和链脲霉素+二甲双胍组小鼠连续5天腹腔注射低剂量链脲霉素（250 mg/kg体重），对照组注射等体积生理盐水。在注射后10天，过夜饥饿小鼠。此后对照组和链脲霉素组小鼠每顿灌喂等体积生理盐水，链脲霉素+覆盆子组小鼠每顿灌喂覆盆子有效部位（30 mg/kg 体重），链脲霉素+二甲双胍组小鼠每顿灌喂二甲双胍（150 mg/kg 体重），连续灌喂2周后，过夜饥饿小鼠（>16小时），测定血液葡萄糖和胰岛素浓度，并计算HOMA-β值，分别如图3(a)～(c)所示。结果表明覆盆子有效部位可以抑制STZ诱导I型糖尿病小鼠血糖升高，促进胰岛素分泌，增加胰岛细胞HOMA-β值。

[0021] （3）对STZ诱导I型糖尿病小鼠胰岛损伤影响实验：小鼠（鼠龄为10周）被随机分成4组，每组8只：对照组（Con），链脲霉素（STZ），链脲霉素+覆盆子组（STZ+FPZ）和链脲霉素+二甲双胍组（STZ+MT）。链脲霉素、链脲霉素+覆盆子组和链脲霉素+二甲双胍组小鼠连续5天，腹腔注射低剂量链脲霉素（250 mg/kg体重），对照组注射等体积生理盐水。在注射后10天，过夜饥饿小鼠。此后对照组和链脲霉素组小鼠每顿灌喂等体积生理盐水，链脲霉素+覆盆子组小鼠每顿灌喂覆盆子有效部位（30 mg/kg 体重），链脲霉素+二甲双胍组小鼠每顿灌喂二甲双胍（150 mg/kg 体重），连续灌喂3周后，处死小鼠，并提取小鼠胰腺组织。4%福尔马林固定小鼠胰腺组织后，并进行常规HE切片染色，如图4所示。显微镜下拍摄组织切片，并统计胰岛面积，如图5所示。至少统计50个胰岛。结果使用平均值±标准误表示。#，P<0.05，STZ与Con组相比；*，P<0.05，STZ+FPZ与STZ组相比；&，P<0.05，STZ+MT与STZ组相比。结果表明覆盆子有效部位可以缓解STZ对胰岛的损伤，抑制I型糖尿病中的胰岛萎缩。

[0022] （4）对STZ诱导I型糖尿病小鼠葡萄糖耐受能力实验：小鼠（鼠龄为10周）被随机分成4组，每组8只：对照组（Con），链脲霉素（STZ），链脲霉素+覆盆子组（STZ+FPZ）和链脲霉素+二甲双胍组（STZ+MT）。链脲霉素、链脲霉素+覆盆子组和链脲霉素+二甲双胍组小鼠连续5天腹腔注射低剂量链脲霉素（250 mg/kg体重），对照组注射等体积生理盐水。在注射后10天，过夜饥饿小鼠。此后对照组和链脲霉素组小鼠灌喂等体积生理盐水，链脲霉素+覆盆子组小鼠每顿灌喂覆盆子有效部位（30 mg/kg 体重），链脲霉素+二甲双胍组小鼠每顿灌喂二甲双胍（150 mg/kg 体重），连续灌喂2周后，过夜饥饿小鼠（>16小时）。此后通过腹腔注射葡萄糖（2 g/kg 体重），在注射后0、15、30、60和120分钟，分别通过鼠尾采血，使用便携式血糖仪测量小鼠血糖，绘制各组小鼠血糖随时间变化曲线图，如图6所示，并计算曲线下的面积（Area under curve，AUC），如图7所示。结果使用平均值±标准误表示。#，P<0.05，STZ与Con组相比；*，P<0.05，STZ+FPZ与STZ组相比；&，P<0.05，STZ+MT与STZ组相比。结果表明覆盆子有效部位可以保护STZ诱导I型糖尿病小鼠葡萄糖耐受能力。

[0023] 以上对本发明所提供的技术方案进行了详细介绍，对于本领域的一般技术人员，依据本发明实施例的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。

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