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适于兽医和医疗应用的组合物

阅读:451发布:2023-12-31

专利汇可以提供适于兽医和医疗应用的组合物专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及 治疗 胃肠功能紊乱及其相关病症,包括肠应激综合征;炎性肠病,大肠炎,克罗恩病和/或促进包括人类的动物体重增加的组合物,所述组合物包括通式(1)的黄连素或其衍 生物 (其中R1,R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9,R10,R11,R12和X如 权利要求 1所定义)和/或选自诸如二 醛 多糖的多聚二醛,例如 氧 化 纤维 素(oxycellulose)或氧化 淀粉 (oxystarch)或多聚(丙烯醛/ 丙烯酸 )。,下面是适于兽医和医疗应用的组合物专利的具体信息内容。

1.用干治疗胃肠(GI)功能紊乱或相关病症和/或促进动物体重增 加的包括通式(1)化合物和多聚二的组合物,其中通式(1)包括:
通式(1)
其中R1,R2,R7,R8,R9和R10可以相同或不同且选自H,CH3, OH,OCH3,C2H5,OC2H5OCH2Ph,OCH2PhNO2,F或Cl;
R3,R4,R5,R6可以相同或不同且选自H,CH3,OCH3,C2H5, OC2H5OCH2Ph,OCH2PhNO2,F或Cl,或
R5和R6相同或不同且选自H,CH3,OCH3,C2H5,OC2H5OCH2Ph, OCH2PhNO2,F或Cl,且R3和R4共同为=O,或
R4和R6相同或不同且选自H,CH3,OCH3,C2H5,OC2H5OCH2Ph, OCH2PhNO2,F或Cl,且R3和R5共同形成双键或为=O,或
R3和R4相同或不同且选自H,CH3,OCH3,C2H5,OC2H5OCH2Ph, OCH2PhNO2,F或Cl,且R5和R6共同为=O;
R11和R12共同形成=CH2,或R11和R12可以相同或不同且独立地 选自H,CH3,CH2CH3和CH2CH2CH3;且
X选自Cl,Br,SO4,I和R13COO,其中R13是CH3或多元酸。
2.如权利要求1所述的组合物,其中R5和R6相同或不同且选自 H,CH3,OCH3,C2H5,OC2H5 OCH2Ph,OCH2PhNO2,F或Cl,且 R3和R4共同为=O。
3.如权利要求1所述的组合物,其中R4和R6相同或不同且选自 H,CH3,OCH3,C2H5,OC2H5 OCH2Ph,OCH2PhNO2,F或Cl,且 R3和R5共同形成双键或为=O。
4.如权利要求1所述的组合物,其中R3和R4相同或不同且选自 H,CH3,OCH3,C2H5,OC2H5OCH2Ph,OCH2PhNO2,F或Cl,且 R5和R6共同为=O。
5.如权利要求1-4中任一权利要求所述的组合物,其中所述GI 功能紊乱或相关病症包括肠应激综合征(IBS);炎性肠病(IBD),大肠 炎,克罗恩病和腹部疾病
6.如权利要求1-4中任一权利要求所述的组合物,其中所述动物 包括人类和其它灵长类动物,包括家禽类,包括绵羊,鹿和 猪的有动物,包括甲壳类动物和软体动物的鱼类,爬行动物,啮齿 动物,犬科动物和猫科动物。
7.如权利要求1-4中任一权利要求所述的组合物,其中R1,R2, R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9和R10为H,R11和R12共同形成=CH2且X-为Cl,所以通式(1)为氯化黄连素。
8.如权利要求1-4中任一权利要求所述的组合物,其中所述多聚 二醛是聚-(2-丙烯醛,2-丙烯酸)。
9.如权利要求1-4中任一权利要求所述的组合物,其中所述多聚 二醛是二醛多糖。
10.如权利要求9所述的组合物,其中所述二醛多糖包括通式(2) 的化合物,
通式(2)
其中,每种单体Rp和Rr独立地选自:
和 和
且每种单体Rq独立地选自:
和 和 和
其中每个R14可以相同或不同且独立地选自CH2OH,COOH, CH2OCH2COOH和CH2OR15,
其中R15选自CH2C6H4COOH,C6H4COOH和CH2(CH2)yCOOH, 其中y=1-20;
其中p1-pn可以相同或不同且各自独立地选自0-n;q1-qn可以相 同或不同且各自独立地选自1-m;r1-rn可以相同或不同且各自独立地 选自0-n;n为大干零的整数,m为大干1的整数;且其中

11.如权利要求10所述的组合物,其中每种Rp和Rr为(A)且Rq 为(D),所以所述多聚二醛为纤维素。
12.如权利要求11所述的组合物,其中R14为CH2OH或 CH2OCH2COOH。
13.如权利要求10所述的组合物,其中每种Rp和Rr为(B)且Rq 为(E),所以所述多聚二醛为氧化淀粉或糊精。
14.如权利要求10所述的组合物,其中每种Rp和Rr为(C)且Rq 为(F)和/或(G),所以所述多聚二醛为氧化葡聚糖。
15.如权利要求11,13或14所述的组合物,其中

16.如权利要求15所述的组合物,其中

17.如权利要求10所述的组合物,其中所述通式(2)的化合物的分 子量为1,000-1,000,000。
18.如权利要求17所述的组合物,其中所述通式(2)的化合物的分 子量为10,000-750,000。
19.如权利要求10所述的组合物,其中所述通式(2)的化合物是 不溶性的且其颗粒尺寸为5μ-100μ。
20.如权利要求19所述的组合物,其中所述通式(2)的化合物的颗 粒尺寸为5μ-30μ。
21.如权利要求10所述的组合物,其中所述通式(1)的化合物与通 式(2)的化合物的重量比为1∶1-1∶100。
22.如权利要求21所述的组合物,其中所述通式(1)的化合物与通 式(2)的化合物的重量比为1∶10-1∶40。
23.如权利要求11所述的组合物,其中通式(1)为氯化黄连素且所 述氧化纤维素含有30%-100%的氧化单体。
24.如权利要求23所述的组合物,其中所述氧化纤维素含有 40%-60%的氧化单体。
25.如权利要求1所述的组合物,其用干促进人类和其它灵长类 动物,鸟类,有蹄动物,鱼类,爬行动物,啮齿动物,犬科动物和猫 科动物的体重增加。
26.包括通式(1)和多聚二醛的化合物、以及一或多种其它活性成 分的药物组合物,所述其它活性成分选自维生素、抗生素、防腐剂表面活性剂、止泻剂、抗便秘剂、包括消化酶的酶、益生菌、草药、 疫苗、溃疡治疗剂、生长因子、赤霉素和葡聚糖。
27.包括通式(1)的化合物和通式(2)的化合物、以及一或多种其它 活性成分的药物组合物,所述其它活性成分选自其它聚二醛,维生素, 抗生素,防腐剂,表面活性剂,止泻剂,抗便秘剂,包括消化酶的酶, 益生菌,草药,疫苗,溃疡治疗剂,生长因子,赤霉素和葡聚糖。
28.如权利要求26所述的药物组合物,其中所述组合物还含有一 或多种药物可接受的赋型剂,所述赋型剂选自结合剂,润滑剂,填充 剂,崩解剂,湿润剂,悬浮剂,增稠剂,缓冲剂以及等渗调节剂。
29.如权利要求27所述的药物组合物,其中所述组合物还含有一 或多种药物可接受的赋型剂,所述赋型剂选自结合剂,润滑剂,填充 剂,崩解剂,湿润剂,悬浮剂,增稠剂,缓冲剂以及等渗调节剂。
30.包括一定量通式(1)的化合物和一定量多聚二醛的试剂盒,所 述试剂盒用干治疗胃肠(GI)功能紊乱或相关病症包括肠应激综合征 (IBS);包括大肠炎、克罗恩病和腹部疾病的炎性肠病(IBD);并用干 促进包括人类的动物的体重增加。
31.如权利要求30所述的试剂盒,其中所述通式(1)的化合物的量 与多聚二醛的量的重量比为1∶1-1∶100。
32.如权利要求31所述的试剂盒,其中所述通式(1)的化合物的量 与多聚二醛的量的重量比为1∶10-1∶40。
33.治疗胃肠紊乱的方法,包括对患有胃肠紊乱的动物进行有效 量的通式(1)的化合物以及有效量的多聚二醛给药
34.如权利要求33所述的方法,其中所述胃肠功能紊乱包括肠应 激综合征(IBS);炎性肠病(IBD),大肠炎,克罗恩病和腹部疾病。
35.如权利要求33所述的方法,其中通式(1)的化合物为氯化黄连 素。
36.如权利要求33所述的方法,其中所述多聚二醛是聚-(2-丙烯 醛,2-丙烯酸)。
37.如权利要求34所述的方法,其中所述多聚二醛是二醛多糖。
38.如权利要求37所述的方法,其中所述二醛多糖包括通式(2) 的化合物。
39.如权利要求38所述的方法,其中所述通式(2)的化合物为氧化 纤维素。
40.如权利要求39所述的方法,其中:

41.如权利要求27所述的方法,其中将通式(1)的化合物和所述多 聚二醛顺序给药。
42.如权利要求33所述的方法,其中将通式(1)的化合物和所述多 聚二醛同时给药。
43.如权利要求42所述的方法,其中采用含有通式(1)的化合物和 所述多聚二醛的组合物的形式进行通式(1)的化合物和所述多聚二醛 的给药。
44.在包括人类的动物中促进体重增加的方法,包括向包括人类 的动物进行有效量的通式(1)的化合物以及多聚二醛的联合给药。
45.如权利要求44所述的方法,其中所述通式(1)的化合物是氯化 黄连素。
46.如权利要求44所述的方法,其中所述多聚二醛是聚-(2-丙烯 醛,2-丙烯酸)。
47.如权利要求44所述的方法,其中所述多聚二醛是二醛多糖。
48.如权利要求47所述的方法,其中所述二醛多糖包括通式(2) 的化合物。
49.如权利要求48所述的方法,其中所述通式(2)的化合物为氧化 纤维素。
50.如权利要求49所述的方法,其中:

51.如权利要求44所述的方法,其中将通式(1)的化合物和所述多 聚二醛顺序给药。
52.如权利要求44所述的方法,其中将通式(1)的化合物和所述多 聚二醛同时给药。
53.如权利要求52所述的方法,其中采用含有通式(1)的化合物和 所述多聚二醛的组合物的形式进行通式(1)的化合物和所述多聚二醛 的给药。
54.通式(1)的化合物和多聚二醛在用干治疗胃肠(GI)功能紊乱或 相关病症,或促进包括人类的动物体重增加的组合物制备中的用途。
55.如权利要求54所述的通式(1)的化合物和多聚二醛的用途,其 中所述GI功能紊乱或相关病症包括肠应激综合征(IBS);炎性肠病 (IBD),大肠炎,克罗恩病和腹部疾病。
56.如权利要求54所述的通式(1)的化合物和多聚二醛的用途,其 中所述通式(1)的化合物是氯化黄连素。
57.如权利要求54所述的通式(1)的化合物和多聚二醛的用途,其 中所述多聚二醛是聚-(2-丙烯醛,2-丙烯酸)。
58.如权利要求54所述的通式(1)的化合物和多聚二醛的用途,其 中所述多聚二醛是二醛多糖。
59.如权利要求58所述的通式(1)的化合物和多聚二醛的用途,其 中所述二醛多糖包括通式(2)的化合物。
60.如权利要求59所述的通式(1)的化合物和多聚二醛的用途,其 中所述通式(2)的化合物为氧化纤维素。
61.如权利要求60所述的通式(1)的化合物和多聚二醛的用途,其 中:

62.如权利要求44所述的方法,其中将所述通式(1)的化合物和所 述通式(2)的化合物用作饲料添加剂。
63.含有0.1-50ppm通式(1)的化合物和1-400ppm多聚二醛的改进 的食物。
64.如权利要求63所述的改进的食物,其中所述食物含有 2-10ppm通式(1)的化合物和10-200ppm通式(2)的化合物。
65.如权利要求63所述的改进的食物,其中通式(1)为氯化黄连素 且其中所述多聚二醛为氧化纤维素。
66.治疗肠应激综合征,炎性肠病,大肠炎,克罗恩病和腹部疾 病的方法,包括向需要给药的动物进行有效量的通式(1)的化合物给 药。
67.治疗肠应激综合征,炎性肠病,大肠炎,克罗恩病和腹部疾 病的方法,包括向需要给药的动物进行有效量的通式(2)的化合物给 药。
68.促进动物体重增加的方法,包括进行有效量的通式(1)的化合 物给药。
69.促进动物体重增加的方法,包括进行有效量的通式(2)的化合 物给药。
70.通式(1)的化合物在制备用干治疗胃肠(GI)功能紊乱或相关病 症,或适干促进动物(包括人类)体重增加的组合物中的用途。
71.通式(2)的化合物在制备用干治疗胃肠(GI)功能紊乱或相关病 症,或适干促进动物(包括人类)体重增加的组合物中的用途。
72.如权利要求70或71所述的化合物用途,其中所述GI功能紊 乱或相关病症包括肠应激综合征(IBS);炎性肠病(IBD),包括大肠炎, 克罗恩病和腹部疾病。
73.含有基本上如说明书所述并参照实施例5,6或10所述的氯 化黄连素和40%氧化纤维素的组合物。
74.基本上如说明书所述并特别参照实施例4,7,8或10所述的 治疗方法。

说明书全文

发明背景

胃肠(“GI”)功能紊乱是由于病原体侵入,广谱抗生素治疗后,饮 食不当,紧张的生活方式以及其它致病因素引起的。这是常见的疾病, 其病征诸如在20%美国成年人中表现出来的肠应激综合征(IBS)。在加 拿大,IBS是仅次于感冒的导致在学校和工厂缺勤的主要原因。迄今 为止,还没有治疗IBS和炎性肠病(IBD)的良药。令人满意的具有治疗 目的的组合物应满足下列条件:

●无毒性,可安全使用。

●不会抑制内脏中的益生菌或对其产生副作用

●优选地具有较低的口服生物利用率(无系统作用)。

●不会产生细菌抗药性。

●抗炎症

●止泻,抑制分泌。

●抗蠕动(anti-motility)。

●增强免疫。

●中和毒素。

本发明图提供满足以上一个或多个条件的用于GI功能紊乱的 组合物和治疗。

在人体中,具有300-400m2面积的胃肠(GI)道是将机体与外界联接 的第二大表面。每天都要消化1-2kg食物,GI免疫系统总是受到可吸 收的毒物和病原体以及多种有害抗原的威胁。胃肠道消化食物并吸收 有利于机体的营养,同时去除对健康具有潜在危险的成分。机体的大 部分免疫系统都位于胃肠道壁以及也称为肠相关淋巴组织(GALT)系 统的肠系膜淋巴结上。胃肠道分泌物富含诸如乳蛋白和溶菌酶的抗 菌因子以及其它因子,如重要的生长和粘膜治疗因子,例如表皮生长 因子(EGF)。消化道粘膜通常仅覆有单一的粘液保护层,并含有微生物 菌群,其在GALT系统的调控中发挥着重要的作用。

粘液在很大程度上是作为所述自身保护性微生物菌群的基质。肠 中含有约1kg益生菌。这些益生菌的作用是维持胃肠道的健康生态环 境,合成维生素、激素和其它重要的因子,并协助将复杂的蛋白和纤 维分解成较小的分子,供粘膜细胞吸收[1]。

既可作为致病因素又可作为症状,肠道中的病原菌在胃肠功能紊 乱中占有重要的一面。其它的紊乱可事实上导致胃肠道丧失益生菌并 使得病原菌得以生长,从而最终导致肠中的生态环境发生改变进而加 剧胃肠功能紊乱。

对于胃肠功能紊乱的治疗而言,恢复健康的生态环境至关重要。 本发明涉及对包括IBS和IBD(包括大肠炎,克罗恩病和腹部疾病)的 胃肠功能紊乱及其相关病征的治疗。期望该治疗能改善肠道健康并缓 解诸如便秘,肠胃气胀和腹泻的症状。其可在胃肠道中作为胃肠清洁 剂,增强免疫系统,抑制并去除病原菌,并且协助重建健康的生态系 统。由此得到的健康消化系统可维持机体的健康状态并在包括人类的 动物体内产生健康的体重增加。

黄连素是从多种小蘖植物包括Berberis aristata和短萼黄连(Coptis chinensis)中衍生得到的异喹啉四价生物[2]。从中药植物,Acangelisia gusanlung的提取物中分离到的黄连素的结构类似物[3],其在东方传统 医药中已有超过2000年的时间被用于治疗肠胃炎和分泌性腹泻[4],并 对腹泻动物模型的预防和治疗也相当有效[5-7]。黄连素具有抗菌[4],抗 蠕动[8]和抗分泌的性质[9-11]。因而,有几种解释黄连素治疗有效性的机 制。在中国,可采用100mg-300mg t.i.d剂量在成年人(6mg~18mg/kg/ 日)中将黄连素用作止泻药[12]。最终,黄连素穿透肠组织的表观渗透系 数(Papp)为10-7cm/秒数量级[13],是较难吸收化合物的典型数值,并由 体内的较低的生物利用度反映出来。这种较低的口服生物利用度导致 的较低的系统吸收可为黄连素的口服给药提供较安全的便利条件。

某些饱和的低级二也具有对硫酸盐还原细菌的抗菌活性[14]。此 外也教导了含有类似的饱和低级二醛的含醇的杀孢子组合物[15]。而且 公知溶性的二醛淀粉可作为止龋剂掺入口香糖组合物中[16],可以至 少约0.1%重量比将水不溶性的二醛多糖用于培养基中抑制细菌生长[17] 。已将合成的多聚二醛,如聚-(2-丙烯醇,2-丙烯酸)用于胃肠道疾 病的治疗。然而,由于这些化合物的抗菌活性相当微弱,需要采用非 常高的剂量,如500~2500mg/kg体重/日进行治疗[18]。

经过寻找和筛选之后可知,包括以下通式(1)的化合物(特别是氯化 黄连素),和以下通式(2)的化合物(特别是纤维素)的组合物,各自 都适于胃肠功能紊乱及其相关病征的治疗,并且适于在包括人类的动 物体内促进体重增加的方法。本发明最重要的发现之一就是通过结合 使用通式(1)的化合物与通式(2)的化合物得到了协同作用(参见以下实 施例4与实施例8)。该协同作用使得使用较低剂量的所述化合物成为 可能,从而获得较高的安全性和经济价值。

发明内容

在一方面,本发明涉及用于治疗胃肠功能紊乱及其相关病症,包 括肠应激综合征(IBS);炎性肠病(IBD),大肠炎,克罗恩病和腹部疾 病;和/或促进动物体重增加的包括通式(1)化合物和/或多聚二醛的组 合物,其中通式(1)包括:
通式(1)
其中R1,R2,R7,R8,R9和R10可以相同或不同且选自H,CH3, OH,OCH3,C2H5,OC2H5OCH2Ph,OCH2PhNO2,F或Cl;
R3,R4,R5,R6可以相同或不同且选自H,CH3,OCH3,C2H5, OC2H5OCH2Ph,OCH2PhNO2,F或Cl,或
R5和R6相同或不同且选自H,CH3,OCH3,C2H5,OC2H5 OCH2Ph, OCH2PhNO2,F或Cl,且R3和R4共同为=O,或
R4和R6相同或不同且选自H,CH3,OCH3,C2H5,OC2H5OCH2Ph, OCH2PhNO2,F或Cl,且R3和R5共同形成双键或共同为=O,或
R3和R4相同或不同且选自H,CH3,OCH3,C2H5,OC2H5 OCH2Ph, OCH2PhNO2,F或Cl,且R5和R6共同为=O;
R11和R12共同形成=CH2,或R11和R12可以相同或不同且独立地 选自H,CH3,CH2CH3和CH2CH2CH3;且
X选自Cl,Br,SO4,I和R13COO,其中R13是CH3或多元酸。
优选地,R1,R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9和R10为氢,R11 和R12共同形成=CH2且X-为Cl,所以通式(1)为氯化黄连素。
可从广泛的适合化合物中选择所述多聚二醛。例如聚-(2-丙烯醛, 2-丙烯酸)可与通式(1)的化合物组合形成本发明的组合物。优选地,所 述多聚二醛是二醛多糖。特别优选的二醛多糖具有通式(2)的结构式:
通式(2)
其中,每种单体Rp和Rr独立地选自:
和 和
且每种单体Rq独立地选自:
和 和 和

其中每个R14可以相同或不同且独立地选自CH2OH,COOH, CH2OCH2COOH和CH2OR15,其中R15选自CH2C6H4COOH,C6H4COOH和CH2(CH2)yCOOH,其中y=1-20;
其中p1-pn可以相同或不同且各自独立地选自0-n;q1-qn可以相 同或不同且各自独立地选自1-m,优选为2-m;r1-rn可以相同或不同 且各自独立地选自0-n;n为大于零的整数,m为大于1的整数;且其 中
q 1 + - - - + q n p 1 + - - - + p n + q 1 + - - - + q n + r 1 + - - - + r n 100 % 30 % .
在一个优选实施方案中,每种Rp和Rr为(A)且Rq为(D),所以所 述多聚二醛为氧化纤维素。在该种情况下,R14优选为CH2OH或 CH2OCH2COOH。
在另一优选实施方案中,每种Rp和Rr为(B)且Rq为(E),所以所 述多聚二醛为氧化淀粉或糊精。
在另一优选实施方案中,每种Rp和Rr为(C)且Rq为(F)或(G),所 以所述多聚二醛为氧化葡聚糖。
在每种情况下,优选为:
q 1 + - - - + q n p 1 + - - - + p n + q 1 + - - - + q n + r 1 + - - - + r n × 100 % 40 % .
且特别优选为:
40 % q 1 + - - - + q n p 1 + - - - + p n + q 1 + - - - + q n + r 1 + - - - + r n × 100 % 60 % .
即,所述氧化纤维素,淀粉,糊精或葡聚糖有40%-60%被氧化。
通式(2)的化合物的分子量为1,000-1,000,000。更优选地,其分子 量为10,000-750,000。当所述通式(2)的化合物是水不溶性时,其颗粒 尺寸优选为为5μ-100μ,更优选为从5μ至30μ。例如,微晶体氧化纤 维素的直径为约20μ。
通常,通式(2)的氧化率从30%~100%,优选为从40%~100%,更 优选为从40%~60%。已知口服给药所述通式(2)是无毒性的。特别地, 所述氧化纤维素在胃肠道中相当稳定。其较高的分子量防止了其被胃 肠道所吸收。其聚二醛官能团可与毒素相互作用并将其中和。通式(2) 的化合物具有抗便秘效果。该化合物还可促进溃疡愈合。该化合物也 不会对胃肠道中益生菌的生长具有副作用。
可将所述组合物进行给药的动物包括:包括人的灵长类动物,包 括家禽类,包括绵羊,鹿和猪的有动物,包括甲壳类 动物和软体动物所鱼类,爬行动物,啮齿动物,犬科动物和猫科动物。
在另一实施方案中,本发明包括使用通式(1)的化合物和通式(2) 的化合物制备药物,所述药物用于治疗胃肠功能紊乱及其相关病征包 括肠应激综合征(IBS);炎性肠病(IBD),包括大肠炎,克罗恩病和腹 部疾病;且用于在包括人类动物中促进体重增加。
在另一实施方案中,本发明包括治疗包括肠应激综合征(IBS);炎 性肠病(IBD),大肠炎,克罗恩病和腹部疾病的胃肠功能紊乱的方法, 该方法包括向患有胃肠紊乱的动物,包括人进行有效量的通式(1)的化 合物和/或多聚二醛给药。优选地,所述治疗方法包括进行有效量的通 式(1)的化合物和多聚二醛联合给药。在本发明的不同实施方案中,所 述治疗可包括将通式(1)的化合物和所述多聚二醛顺序给药或同时给 药。在一个优选实施方案中,将所述通式(1)的化合物与所述多聚二醛 合并形成组合物,随后进行给药。优选地,所述多聚二醛是通式(2)的 化合物,更优选为氧化纤维素,特别是氧化水平从40%~60%的氧化纤 维素。
含有通式(1)和多聚二醛的组合物的所需剂量通常低于分别使用 单独组分的50%。例如,对成年人而言,黄连素的剂量为6mg~18mg/kg/ 日。40%氧化纤维素的用量为250mg~750mmg/kg/日。然而,当把黄连 素和40%氧化纤维素组合使用时,所需要的剂量为0.5mg~6mg/kg/日 的黄连素加上5mg~200mg/kg/日的40%氧化纤维素。优选地,在人类 中,使用的剂量为0.5mg~3mg/kg/日的黄连素加上5mg~80mg/kg/日的 40%氧化纤维素。
此外,可在动物体内包括人类进行通式(1)的化合物和多聚二醛的 联合给药,从而促进体重增加。在本文中所述化合物可用作食物添加 剂进行给药。相对应地,本发明包括含有0.1-50ppm通式(1)的化合物 和1-400ppm多聚二醛的改进的食物。优选地,所述食物含有2-10ppm 通式(1)的化合物和10-200ppm通式(2)的化合物;更优选地,通式(1) 为氯化黄连素且通式(2)为氧化纤维素。
很容易想象可以分别提供通式(1)的化合物和所述多聚二醛,而不 是将其作为组合物提供。本发明还包括用于治疗胃肠(GI)功能紊乱或 相关病症,包括肠应激综合征(IBS);炎性肠病(IBD)(包括大肠炎),克 罗恩病和腹部疾病,以及促进包括人类的动物体重增加的,含有一定 量通式(1)化合物和一定量多聚二醛的试剂盒。优选的通式(1)的化合物 的量与多聚二醛的量的重量比为1∶1-1∶100,更优选为1∶10-1∶40。
已知在低于500μg/ml的浓度下,黄连素选择性地抑制诸如金黄色 葡萄球菌,B型链球菌,霍乱弧菌(Vibrio cholera),产气荚膜梭菌 (Clostridium perfringens),白色念珠菌(Candida albicans)的病原菌,但 却不抑制诸如植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的有益菌(益生 菌)(参见表1)。
       表1  黄连素、氧化纤维素和红霉素的抗菌活性  微生物  最低抑制浓度(μg/ml)  黄连素 氧化纤维素 红霉素  金黄色葡萄球菌ATCC 29213  125 >1,000 <0.625  B型链球菌MCR127  62.5 >1,000 <0.625  大肠杆菌HS  >500 >1,000 >10  霍乱弧菌6239  125 >1,000 >10  白色念珠菌ATCC 14053  62.5 >1,000 >10  产气荚膜梭菌ATCC 1124  125 >1,000 1.25  植物乳杆菌  500 >1,000 <0.625
用5μg/ml浓度的黄连素处理诸如大肠杆菌的病原菌后,其鞭毛会 脱落且不能附着于肠壁上,这一浓度远远低于最低抑制浓度(MIC)。然 而,这一浓度并不会影响诸如乳酸菌的益生菌。由于其选择性地去除 消化道中的病原菌而并不影响胃肠道中益生菌的寄居,所以黄连素的 所述特性使其具备了作为胃肠道清洁剂的重要方面,而且还不会对所 述细菌产生过量的药物压力,避免导致抗药性。
现有的广谱抗生素会不加区分地抑制消化道中的病原菌和益生 菌。抗生素治疗通常会引起胃肠功能紊乱。动植物在其整个进化过程 中都与微生物共生,有时相互受益,但通常是对立的关系。黄连素一 种古老且普遍使用的具有先天防御机制的成分;其已被发展成对天然 菌群进行控制同时对病原体进行抗击。它们在所述微生物表面上并没 有特异的靶分子受体。这一特征避免了在大多数抗生素中诱导细菌产 生抗药性的问题。还发现黄连素可诱导白介素-12(IL-12)(促抗感染) (pro-antiinfectious)的产生却抑制白介素-8(促炎症)的产生。这种增强宿 主免疫系统的抗炎症的性质对IBD和IBS的治疗相当有效。
除了对通式(1)化合物的使用,还发现通式(2)化合物不仅具有抗菌 活性,还能中和毒素,并可作为抗氧化剂使用。
从而,导致本发明的研究还公开了对肠应激综合征,炎性肠病, 大肠炎,克罗恩病和腹部疾病的治疗,所述治疗包括向需要治疗的包 括人所动物给药有效量的通式(1)化合物或通式(2)化合物。
本发明还提供了促进包括人类的动物体重增加的方法,所述方法 包括给药有效量的通式(1)和/或通式(2)化合物。
在下文中,可将包括通式(1)化合物和通式(2)化合物,和/或其药 物可接受衍生物的胃肠道清洁组合物称为GILAX清洁剂。用于治疗的 GILAX清洁剂需要量会随需要治疗的疾病性质和所述包括人类患者 的动物的年龄情况不同而发生变化,最终将由当值的兽医或医生来决 定。
一般而言,GILAX清洁剂中含有的通式(1)化合物与通式(2)化合 物的重量比为1∶1~100,优选的重量比为1∶10~40。例如,对人而言, GILAX清洁剂(例如,重量比为1∶10的氯化黄连素和氧化纤维素)的口 服剂量为275~1650mg/天。实际采用的剂量由胃肠功能紊乱的具体情 况而定。对成年人而言,对IBS或抗生素治疗后胃肠功能紊乱推荐用 量为每日一次,每次550mg,对IBD而言为每日两次,每次275mg, 对急性腹泻或其它较为严重的疾病而言为每日四次,每次550mg。
对动物饲养,如家禽饲养业而言,可将GILAX清洁剂用作饲料添 加剂从而促进生长。所述组合物优选为1~20ppm黄连素加上 10~400ppm氧化纤维素;更优选为5ppm黄连素加上50ppm氧化纤维 素。
在养猪业中,GILAX清洁剂可用于预防小猪腹泻。所使用的组合 物中包括0.5mg~6mg通式(1)(黄连素)/kg/天和50mg~200mg通式(2)(氧 化纤维素)/kg/天。
优选地,可将通式(1)化合物和通式(2)化合物与一或多种其它组分 合并形成GILAX清洁剂组合物,这些组分如维生素,抗生素,防腐剂表面活性剂,止泻剂,抗便秘剂,酶(特别是消化酶),益生菌,草药, 疫苗和溃疡治疗剂(如赤霉素和葡聚糖)。
如本发明所述,包括所述GILAX清洁剂或其药物可接受的衍生物 的药物制剂可包含一或多种药物可接受的载体,以及,任选的其它治 疗和/或预防组分。所述载体必须在与所述制剂中的其它成分的相容方 面是可接受的,并且不会对其接受者具有伤害。
药物制剂可以是任意适于对胃肠道进行给药的方式,包括适于口 服给药和直肠给药的方式。当有可能在治疗中使用时,可将所述 GILAX清洁剂作为化学原料进行给药,其优选以药物制剂来提供活性 成分。在适合的时候,可将所述制剂以分散的剂量单位形式呈现,并 可根据制药领域的任意公知方法进行制备。优选地,所述方法包括将 所述活性化合物与液体载体或磨碎的固体载体或二者共同混合的步 骤,然后,如果必要的话,将所述产物成形为所需要的剂型。
适于口服给药的药物制剂可以分散的剂量单位形式呈现,例如分 别含有预定量所述活性成分的胶囊,药包或片剂;可作为粉末或颗粒 呈现;作为溶液,悬液或乳剂呈现。所述活性成分可以药丸,舐剂或 膏剂形式呈现。适于口服给药的片剂和胶囊可包含常规的赋型剂,例 如结合剂,填充剂,润滑剂,崩解剂或湿润剂。可使用本领域公知的 方法对药片进行包被。口服液体制剂可以是例如水性或油性的悬液, 溶液,乳剂,糖浆或酏剂,或可以在使用前用水或其它适合载体还原 的干制品。这样的液体制剂可包含常规的添加剂,例如悬浮剂,乳化 剂,非水溶性载体(其可包括食用油)或防腐剂。
对诸如胃溃疡的胃肠溃疡给药而言,可采用本领域中对胃肠道给 药的任意方法和制剂对GILAX清洁剂化合物或其药物可接受的衍生 物进行给药。
当需要时,可采用适于将所述活性成分持续释放的剂型。
GILAX清洁剂化合物可与其它治疗药剂共同使用,例如如抗生素 的抗感染剂或如赤霉素,葡聚糖,生长因子(EGF)的溃疡治疗剂,和/ 或如植物乳杆菌的益生菌。
可方便地将上述组合形式以药物制剂的方式进行使用,因此,这 些包括如上所述通式(1)和通式(2)化合物以及药物可接受载体的制剂 构成了本发明的另一方面。
当将所述GILAX清洁剂化合物与对胃肠功能紊乱及其相关病症 治疗的第二活性治疗剂一同使用时,每种化合物的剂量可与其单独使 用时的剂量相同或不同。本领域所属技术人员应很容易理解适合的剂 量。
可采用本领域任意的公知的类似结构化合物的制备方法制备所述 GILAX清洁剂化合物及其药物可接受的衍生物。
实施例
以下将参照实施例对本发明进行说明。所述实施例仅起到说明目 的作用,而不应被认为是对本发明范围的限制。
实施例1  通式(1)化合物,氯化黄连素的制备
乙醇(10L×2)回流berberines vulgaris的根和树皮(1.5kg,磨碎)。 将所述乙醇提取物过滤并减压蒸发得到棕色的油。将该残渣溶解于温 的0.1M HCl溶液中(10L×2),过滤,将所述滤液真空蒸发至约1L,然 后在室温搅拌过夜。收集所述黄色沉淀并用冷水洗涤,然后再次溶解 于沸水中(10L×2),冷却至室温,经过过滤,水洗和空气干燥后得到了 黄色晶体粉末的氯化黄连素(44.5g)。采用NMR分析所述晶体得到如 下结果:
1H-nmr(CD3OD)×(ppm)
3.16(t,2H),4.02(s,3H),4.15(s,3H),4.88(t,2H),6.12(s,2H), 7.03(s,1H),7.74(s,1H),7.95(d,AB,1H),8.15(d,AB,1H),8.89(s, 1H),9.83(s,1H)。
实施例2  通式(2)化合物,40%氧化纤维素的制备
在低于30℃的条件下,用2小时向pH<0.5的高碘酸(140.7g, 0.6175摩尔)的搅拌水溶液(1.08L)中加入部分微晶纤维素(颗粒大小直 径约为20)(250g,1.54摩尔)。将所述全部混合物在30~32℃搅拌4 小时,然后在室温搅拌16小时。向所得反应混合物中加入5%氢氧化 钠溶液(约480ml),从而将pH调至5~6。将所述悬液过滤;用水洗涤 所述固体(2L×4)直到所述滤液在KI-淀粉试纸上不显示出氧化剂的存 在为止。然后用丙(0.5L)洗涤所述固体,空气干燥,从而得到白色粉 末的40%氧化纤维素(215g,87%)。
实施例3  通式(2)化合物,40%氧化水溶性纤维素的制备
用两小时,向浴中的羧甲基纤维素(分子量250,000,DS=0.7) (1g,6.17毫摩尔)的搅拌水溶液(25ml)中逐滴加入高碘酸钠(532.5mg, 2.48毫摩尔)的水溶液。将所述反应混合物在5~10℃搅拌16小时,然 后在透析管(透过分子量界限为约10,000)中在水中透析48小时。然后 将所述溶液冷冻干燥,从而得到白色粉末的40%氧化水溶性纤维素 (813mg,81.4%)。
实施例4  鸡的预实验
对雄性的1日龄仔鸡(白来航(white Leghorn)新罕布什尔(New Hampshire))饲喂Barastoc鸡食13天,所述鸡食中含有杆菌肽锌和 D.O.T.(3,5-二硝基-邻-tuluamide)和抗氧化剂乙氧喹(ethoxyquin)及 B.H.T.。在第14天,将这些鸡仔随机分成6组,每组5只,每组鸡仔 的平均体重为121.4g-124.2g(在全部所述组中的方差为2.3%)。对所 述鸡仔饲喂相同的基本生长饲料,所述饲料中不含有任何抗生素但却 含有D.O.T.,以及下述的不同饲料添加剂:
A组:饲料添加剂为50ppm氯化黄连素。
B组:饲料添加剂为10ppm氯化黄连素。
C组:饲料添加剂为200ppm 40%氧化纤维素。
D组:饲料添加剂为100ppm 40%氧化纤维素。
E组:饲料添加剂为5ppm氯化黄连素+50ppm40%氧化纤维素。
对照组:无饲料添加剂。
对所述鸡仔继续饲喂23天。观察其摄食量,体重增加,冠色(冠 色为红色说明该鸡仔处于健康状态)和死亡率。在所述实验中未出现死 亡事故。在所述组中的摄食量未出现显著性差异。以显著水平p=0.05 进行双尾统计分析。所得结果如表2所示。
表2  通式(1)化合物(氯化黄连素)与通式(2)化合物(40%氧化纤维素) 的组合物对鸡生长的协同效应 试验组                 红冠(红冠数/总鸡仔数) 与所述对照在 第36天的生长 率比较 14天 17天 21天 24天 26天   32天 36天 A 0/5 1/5 1/5 3/5 3/5   4/5 4/5 106.36% (p=0.05) B 0/5 0/5 2/5 2/5 3/5   4/5 5/5 101.79% C 0/5 1/5 1/5 1/5 4/5   4/5 5/5 101.74% D 0/5 0/5 0/5 0/5 1/5   2/5 3/5 99.82% E 0/5 1/5 1/5 1/5 2/5   5/5 5/5 108.11% (p=0.05) 对照 0/5 0/5 0/5 0/5 0/5   1/5 1/5 100.00%
在所述鸡的肉中没有检测到黄连素和氧化纤维素的存在。
实施例4说明了本发明的协同效应。从所述结果可清楚地得知, 与20ppm黄连素或10ppm黄连素或200ppm氧化纤维素或100ppm氧 化纤维素的单独作用相比较,5ppm黄连素+50ppm氧化纤维素的组合 物给出了最佳的生长促进效果。该协同效应使得较低剂量的所述化合 物的使用成为可能,从而获得较高的安全性和经济效益。
实施例5  GILAX清洁剂的制备
a)为了治疗IBS或抗生素应用后胃肠功能紊乱或腹泻,将 50mg氯化黄连素与500mg 40%氧化纤维素包装入胶囊对 成人进行口服给药。
b)为了治疗IBD,将25mg氯化黄连素与250mg40%氧化纤 维素包装入胶囊对成人进行口服给药。
实施例6  用于治疗IBS和IBD的GILAX清洁剂和益生菌的组合
可将实施例5中的GILAX清洁剂与益生菌的制剂顺序或同时使 用。空气隔离的益生菌胶囊或药片中,每颗胶囊或片剂含有0.5~1×1010 CFU。其组合物如下所示:
两岐双岐杆菌(Bifidobacterium bifidum)     30%
长双岐杆菌(Bifidobacterium longum)        20%
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)       10%
保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)  10%
唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)      10%
嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)     20%
实施例7  通式(2)化合物,40%氧化纤维素—作为促进鸡生长的饲料 添加剂
如实施例4所述进行鸡实验,但在每一实验组与对照组中有6只 鸡。而且,所述饲料添加剂为1000ppm的40%氧化纤维素。所述实验 组中6只鸡的生长率为3.86%(p=0.05),高于所述对照组中的6只鸡。
实施例8  通式(1)化合物与通式(2)化合物在小鼠模型中治疗IBD的 协同效应
使用大肠炎的hFUT1小鼠模型。这为炎性肠病(IBD)的致病机理 提供了启示。在无菌环境中,这些小鼠并不会发病。在人类中引起IBD 的免疫功能障碍包括异常的T细胞反应性以及对胃肠道细菌耐受性的 丧失。对小鼠进行通式(1)和通式(2)组合物的口服给药,观察其对消化 道菌群的改变以及对大肠炎严重程度的降低。所述阳性结果说明通式 (1)和通式(2)组合物对人类的IBD具有治疗性作用。
如下,进行总共5种情况的分组,每组10只小鼠。
1)对照组(未进行处理)。
2)采用13.5mg/kg/天的通式(1)化合物(氯化黄连素)进行处理 (o.s.)。
3)采用114mg/kg/天的通式(2)化合物(40%氧化纤维素)进行处 理(o.s.)。
4)采用通式(1)化合物(氯化黄连素)(6.7mg/kg/天)和通式(2)化 合物(40%氧化纤维素)(57mg/kg/天)的组合物进行处理(o.s.)。
5)采用通式(1)化合物(氯化黄连素)(13.5mg/kg/天)和通式(2)化 合物(40%氧化纤维素)(114mg/kg/天)的组合物进行处理 (o.s.)。
所得结果如表3所示。
表3  通式(1)化合物(氯化黄连素)和通式(2)化合物(40%氧化纤维素) 的组合物对小鼠IBD的协同效应     组编号     处理56天后的存活率     1     3/10     2     5/10     3     5/10     4     9/10     5     9/10
实施例9  通式(1)化合物(氯化黄连素)与通式(2)化合物(40%氧化纤 维素)对Balb-C小鼠的剂量耐受实验
将30只雄性和30只雌性Balb-C小鼠分成10组。如下所述,3 组中每组分别有10只雄鼠和10只雌鼠。
1)对照组(没有化合物)。
2)以250mg/kg/天连续口服给药(强饲)氯化黄连素14天。
3)以1330mg/kg/天连续口服给药(强饲)40%氧化纤维素14天。
实验中的所有小鼠都存活了下来,这些小鼠都健康且所述组间无 显著差异。
对来自所述实验小鼠的组织(肝,肾,,肠)切片进行组织学观 察未发现异常。
实施例10  断奶后GILAX作为饲料添加剂对猪健康的评估
大多数猪场都采用某些断奶共混合物、限定年龄分组分隔以及在 场地面积之间的常规的猪流动措施,以进行传统的连续流动系统进行 运转。这些因素可以导致断奶后的腹泻事件。本实施例的目的在于观 察GILAX清洁剂是否能对断奶提供有效的健康保护。
采用随机分组设计对断奶的每种处理进行性别匹配的单独分栏。 每栏有15只猪仔(21日龄),采用了3栏。
1)阳性对照。所述猪仔以50mg/kg/天接受饲料中的阿莫西林 21天。
2)阴性对照。所述猪仔不接受药物性的饲料和水21天。
3)GILAX清洁剂处理。所述猪仔接受饲料GILAX清洁剂 (5mg/kg/天氯化黄连素+50mg/kg/天40%氧化纤维素)21天。
对所述研究过程中出现的任意生病猪仔进行可注射性阿莫西林给 药(2g/天,每天2次)。在该研究中,第1组(阿莫西林)和第3组(GILAX) 全部健康,不需要可注射性的阿莫西林。第2组(阴性对照)中有2只 猪仔患病,并注射了抗生素。
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