首页 / 专利库 / 燃料种类 / 能源 / 燃料 / 生物燃料 / 燃料乙醇 / 一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺

一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的发酵工艺

阅读:694发布:2020-05-11

专利汇可以提供一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的发酵工艺专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种提高利用玉米秸秆生产 燃料 乙醇 产量的 水 解 发酵 工艺,属于新 能源 技术领域,一种提高利用玉米秸秆生产 燃料乙醇 产量的水解发酵工艺,包括以下步骤:制备预处理秸秆混合物、制备YPD 种子 培养基和发酵培养基、第一次 循环水 解发酵、第二次循环水解发酵、第三次循环水解发酵、第四次循环水解发酵、第五次循环水解发酵、收集 酵母 菌后得到含乙醇的发酵液,完成发酵。本发明将长时间的水解和发酵阶段拆解成多轮循环水解和发酵阶段,使得每轮的循环水解和发酵具有快速高效的水解和发酵效率,能够有效降低副产物对水解酶和发酵 微 生物 酿酒酵母 的抑制作用,从而提高整体工艺的产量和效率,具有极高的市场经济价值,值得推广。,下面是一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的发酵工艺专利的具体信息内容。

1.一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的发酵工艺,其特征在于:具体包括以下步骤:
S1、制备预处理秸秆混合物:采用高温稀酸对玉米秸秆干物进行预处理得到一定量的预处理秸秆混合物,其中预处理秸秆混合物的质量计为A;
S2、制备YPD种子培养基和发酵培养基,备用;
S3、第一次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入1-5%v/v的YPD种子培养基,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和含乙醇的发酵液;
S4、第二次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S3中得到的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S3得到的全部回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到酵母和含乙醇的发酵液;
S5、第三次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S4中得到的70-90%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S4得到的70-90%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S4中剩余的10-30%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S4中剩余的10-30%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
S6、第四次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S5中得到的70-90%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S5得到的70-90%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S5中剩余的10-30%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S5中剩余的10-30%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
S7、第五次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S6中得到的70-90%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S6得到的70-90%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S6中剩余的10-30%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S6中剩余的10-30%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
S8、收集S3-37中得到的含乙醇的发酵液,完成发酵。
2.根据权利要求1所述的一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,其特征在于:所述S1的具体过程为:取玉米秸秆干物和稀硫酸,其中稀硫酸的质量浓度为
0.5-1.5%,将玉米秸秆加入稀硫酸中,120-180℃、0.1-0.35MPa条件下处理10-45min,得到预处理秸秆混合物;
其中,玉米秸秆和稀硫酸的总质量为A,玉米秸秆的质量为A/10-A/4,余量为稀硫酸。
3.根据权利要求1所述的一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,其特征在于:所述复合水解酶包括液体纤维素酶和木聚糖酶,酶活分别为8500-10000U/mL和80000-100000U/mL,投放量分别为160-220mL/kg玉米秸秆干物料和175-250mL/kg玉米秸秆干物。
4.根据权利要求1所述的一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,其特征在于:所述S2中,YPD种子培养基中包括蛋白胨10-20.0g/L、酵母粉5-10.0g/L和葡萄糖10-20.0g/L,在pH5.5-6.8、121℃条件下高压蒸汽灭菌20min,其中葡萄糖单独进行灭菌,灭菌方式为:115℃高压蒸汽灭菌15min。
5.根据权利要求1所述的一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,其特征在于:所述S2中,发酵培养基中包括蛋白胨2.5-7.5g/L、酵母粉1-5.0g/L和葡萄糖2-
10.0g/L,在pH5.5-6.8、121℃条件下高压蒸汽灭菌20min,其中葡萄糖单独进行灭菌,灭菌方式为:115℃高压蒸汽灭菌15min。
6.根据权利要求1所述的一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,其特征在于:所述S3-S7中,水解过程具体为:调节pH为4.8-6.5,温度为40-55℃,转速为80-
150rpm,水解处理12-24h;
离心过程具体为:转速为3000-5000rpm,离心1-10min;
发酵过程具体为:调节pH为5.0-6.5,温度降为28-32℃,转速为100-250rpm,初始OD600为1-5,发酵处理15-45h。
7.根据权利要求1所述的一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,其特征在于:所述S5-S7中,分支水解过程具体为:调节pH为4.8-6.5,温度为40-55℃,转速为80-150rpm,水解处理12-24h;
分支发酵过程具体为:调节pH为5.0-6.5,温度降为28-32℃,转速为100-250rpm,初始OD600为1-5,发酵处理15-45h。
8.根据权利要求1所述的一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,其特征在于:所述S4-S7中复合水解酶的引入量为所述S3中复合水解酶引入量的30-50%,所述S4-S7中发酵培养基的引入量为S1中YPD种子培养基引入量的30-50%。
9.根据权利要求1所述的一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,其特征在于:所述S5-S7中,分支水解过程中引入复合水解酶,复合水解酶的引入量为S1中复合水解酶引入量的15-17%。

说明书全文

一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的发酵工艺

技术领域

[0001] 本发明涉及新能源技术领域,更具体地说,涉及一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺。

背景技术

[0002] 燃料乙醇,一般是指体积浓度达到99.5%以上的无水乙醇。燃料乙醇是燃烧清洁的高辛烷值燃料,是国家大推行的新型可再生能源。目前的二代燃料乙醇多数采用木质纤维素为原料进行发酵,包括玉米秸秆在内。传统的生物炼制工艺一般为分步水解发酵法,首先将原料预处理后,采用纤维素复合酶水解得到可发酵的降解糖,然后采用发酵剂(微生物培养)使单糖并进一步转化为燃料乙醇。
[0003] 传统的分步水解发酵工艺中,水解和发酵效率都较低,且在长时间的发酵过程中,会产生副产物对水解酶和发酵微生物造成抑制作用,影响了整体工艺的产量和效率。本专利旨在通过工艺改良,提高过程效率和乙醇产量,并降低工艺成本,扩大推广应用范围。

发明内容

[0004] 1.要解决的技术问题
[0005] 针对现有技术中存在的问题,本发明的目的在于提供一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,本发明将长时间的水解和发酵阶段拆解成多轮循环水解和发酵阶段,使得每轮的循环水解和发酵具有快速高效的水解和发酵效率,能够有效降低副产物对水解酶和发酵微生物酿酒酵母的抑制作用,从而提高整体工艺的产量和效率,具有极高的市场经济价值,值得推广。
[0006] 2.技术方案
[0007] 为解决上述问题,本发明采用如下的技术方案。
[0008] 一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,具体包括以下步骤:
[0009] S1、制备预处理秸秆混合物:采用高温稀酸对玉米秸秆干物进行预处理得到一定量的预处理秸秆混合物,其中预处理秸秆混合物的质量计为A;
[0010] S2、制备YPD种子培养基和发酵培养基,备用;
[0011] S3、第一次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入1-5%v/v的YPD种子培养基,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和含乙醇的发酵液;
[0012] S4、第二次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S3中得到的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S3得到的全部回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到酵母和含乙醇的发酵液;
[0013] S5、第三次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S4中得到的70-90%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S4得到的70-90%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S4中剩余的10-30%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S4中剩余的10-30%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0014] S6、第四次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S5中得到的70-90%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S5得到的70-90%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S5中剩余的10-30%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S5中剩余的10-30%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0015] S7、第五次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S6中得到的70-90%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S6得到的70-90%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S6中剩余的10-30%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S6中剩余的10-30%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0016] S8、收集S3-37中得到的含乙醇的发酵液,完成发酵。
[0017] 进一步的,所述S1的具体过程为:取玉米秸秆干物和稀硫酸,其中稀硫酸的质量浓度为0.5-1.5%,将玉米秸秆加入稀硫酸中,120-180℃、0.1-0.35MPa条件下处理10-45min,得到预处理秸秆混合物;
[0018] 其中,玉米秸秆和稀硫酸的总质量为A,玉米秸秆的质量为A/10-A/4,余量为稀硫酸。
[0019] 进一步的,所述复合水解酶包括液体纤维素酶和木聚糖酶,酶活分别为8500-10000U/mL和80000-100000U/mL,投放量分别为160-220mL/kg玉米秸秆干物料和175-
250mL/kg玉米秸秆干物。
[0020] 进一步的,所述S2中,YPD种子培养基中包括蛋白胨10-20.0g/L、酵母粉5-10.0g/L和葡萄糖10-20.0g/L,在pH5.5-6.8、121℃条件下高压蒸汽灭菌20min,其中葡萄糖单独进行灭菌,灭菌方式为:115℃高压蒸汽灭菌15min。
[0021] 进一步的,所述S2中,发酵培养基中包括蛋白胨2.5-7.5g/L、酵母粉1-5.0g/L和葡萄糖2-10.0g/L,在pH5.5-6.8、121℃条件下高压蒸汽灭菌20min,其中葡萄糖单独进行灭菌,灭菌方式为:115℃高压蒸汽灭菌15min。
[0022] 进一步的,所述S3-S7中,水解过程具体为:调节pH为4.8-6.8,温度为40-55℃,转速为80-150rpm,水解处理12-24h;
[0023] 离心过程具体为:转速为3000-5000rpm,离心1-10min;
[0024] 发酵过程具体为:调节pH为5.0-6.5,温度降为28-32℃,转速为100-250rpm,初始OD600为1-5,发酵处理15-45h。
[0025] 进一步的,所述S5-S7中,分支水解过程具体为:调节pH为4.8-6.8,温度为40-55℃,转速为80-150rpm,水解处理12-24h;
[0026] 分支发酵过程具体为:调节pH为5.0-6.5,温度降为28-32℃,转速为100-250rpm,初始OD600为1-5,发酵处理15-45h。
[0027] 进一步的,所述S4-S7中复合水解酶的引入量为所述S3中复合水解酶引入量的30-50%,所述S4-S7中发酵培养基的引入量为S1中YPD种子培养基引入量的30-50%。
[0028] 进一步的,所述S5-S7中,分支水解过程中引入复合水解酶,复合水解酶的引入量为S1中复合水解酶引入量的15-17%。
[0029] 3.有益效果
[0030] 相比于现有技术,本发明的优点在于:
[0031] 本发明将长时间的水解和发酵阶段拆解成多轮循环水解和发酵阶段,使得每轮的循环水解和发酵具有快速高效的水解和发酵效率,能够有效降低副产物对水解酶和发酵微生物酿酒酵母的抑制作用,从而提高整体工艺的产量和效率,具有极高的市场经济价值,值得推广。附图说明
[0032] 图1为本发明的水解发酵工艺流程图
[0033] 图2为本发明中实验例的水解发酵工艺流程图;
[0034] 图3为本发明中对比例的水解发酵工艺流程图。

具体实施方式

[0035] 下面将结合本发明实施例中的附图;对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述;显然;所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例;而不是全部的实施例,基于本发明中的实施例;本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例;都属于本发明保护的范围。
[0036] 实施例1
[0037] 请参阅图1,一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,具体包括以下步骤:
[0038] S1、制备预处理秸秆混合物:采用高温稀酸对玉米秸秆干物进行预处理得到一定量的预处理秸秆混合物,其中预处理秸秆混合物的质量计为A;
[0039] 具体过程为:取玉米秸秆干物和稀硫酸,其中稀硫酸的质量浓度为0.5%,将玉米秸秆加入稀硫酸中,180℃、0.35MPa条件下处理10min,得到预处理秸秆混合物;
[0040] 其中,玉米秸秆和稀硫酸的总质量为A,玉米秸秆的质量为A/10,余量为稀硫酸。
[0041] S2、制备YPD种子培养基和发酵培养基,备用。YPD种子培养基中包括蛋白胨15.0g/L、酵母粉7.5g/L和葡萄糖10.0g/L,在pH5.8、121℃条件下高压蒸汽灭菌20min,其中葡萄糖单独进行灭菌,灭菌方式为:115℃高压蒸汽灭菌15min;
[0042] 发酵培养基中包括蛋白胨6.5g/L、酵母粉4.0g/L和葡萄糖8.0g/L,在pH6.0、121℃条件下高压蒸汽灭菌20min,其中葡萄糖单独进行灭菌,灭菌方式为:115℃高压蒸汽灭菌15min。
[0043] S3、第一次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入5%v/v的YPD种子培养基,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和含乙醇的发酵液;
[0044] S4、第二次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S3中得到的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S3得到的全部回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到酵母和含乙醇的发酵液;
[0045] S5、第三次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S4中得到的90%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S4得到的90%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S4中剩余的10%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S4中剩余的10%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0046] S6、第四次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S5中得到的90%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S5得到的90%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S5中剩余的10%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S5中剩余的10%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0047] S7、第五次循环水解发酵:取A/5的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S6中得到的90%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S6得到的90%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S6中剩余的10%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S6中剩余的10%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0048] S3-S7中,水解过程具体为:调节pH为5.3,温度为48℃,转速为100rpm,水解处理20h;离心过程具体为:转速为3000rpm,离心7min;发酵过程具体为:调节pH为6.2,温度降为
29℃,转速为180rpm,初始OD600为2,发酵处理40h。
[0049] S5-S7中,分支水解过程具体为:调节pH为5.3,温度为48℃,转速为100rpm,水解处理20h;离心过程具体为:转速为3000rpm,离心7min;发酵过程具体为:调节pH为6.2,温度降为29℃,转速为180rpm,初始OD600为2,发酵处理40h。
[0050] S4-S7中复合水解酶的引入量为S3中复合水解酶引入量的35%,S4-S7中发酵培养基的引入量为S1中YPD种子培养基引入量的35%。
[0051] S5-S7中,分支水解过程中引入复合水解酶,复合水解酶的引入量为S1中复合水解酶引入量的17%。
[0052] S8、收集S3-37中得到的含乙醇的发酵液,完成发酵。
[0053] 进一步的,所述复合水解酶包括液体纤维素酶和木聚糖酶,酶活分别为10000U/mL和100000U/mL,投放量分别为220mL/kg玉米秸秆干物料和250mL/kg玉米秸秆干物[0054] 实施例2
[0055] 请参阅图2,一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,具体包括以下步骤:
[0056] S1、制备预处理秸秆混合物:采用高温稀酸对玉米秸秆干物进行预处理得到一定量的预处理秸秆混合物,其中预处理秸秆混合物的质量计为1000g;
[0057] 具体过程为:取玉米秸秆干物和稀硫酸,其中稀硫酸的质量浓度为0.1%,将玉米秸秆加入稀硫酸中,120℃、0.1MPa条件下处理45min,得到预处理秸秆混合物;
[0058] 其中,玉米秸秆和稀硫酸的总质量为1000g,玉米秸秆的质量为100g,余量为稀硫酸。
[0059] S2、制备YPD种子培养基和发酵培养基,备用。YPD种子培养基中包括蛋白胨20.0g/L、酵母粉10.0g/L和葡萄糖20.0g/L,在pH5.5、121℃条件下高压蒸汽灭菌20min,其中葡萄糖单独进行灭菌,灭菌方式为:115℃高压蒸汽灭菌15min;
[0060] 发酵培养基中包括蛋白胨7.5g/L、酵母粉5.0g/L和葡萄糖10.0g/L,在pH5.5、121℃条件下高压蒸汽灭菌20min,其中葡萄糖单独进行灭菌,灭菌方式为:115℃高压蒸汽灭菌15min。
[0061] S3、第一次循环水解发酵:取200g的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入1%v/v的YPD种子培养基,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和含乙醇的发酵液;
[0062] S4、第二次循环水解发酵:取200g的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S3中得到的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S3得到的全部回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到酵母和含乙醇的发酵液;
[0063] S5、第三次循环水解发酵:取200g的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S4中得到的70%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S4得到的70%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S4中剩余的30%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S4中剩余的30%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0064] S6、第四次循环水解发酵:取200g的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S5中得到的70%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S5得到的70%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S5中剩余的30%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S5中剩余的30%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0065] S7、第五次循环水解发酵:取200g的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S6中得到的70%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S6得到的70%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S6中剩余的30%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S6中剩余的30%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0066] S3-S7中,水解过程具体为:调节pH为4.8,温度为50℃,转速为120rpm,水解处理24h;离心过程具体为:转速为5000rpm,离心10min;发酵过程具体为:调节pH为5.5,温度降为32℃,转速为150rpm,初始OD600为5,发酵处理30h。
[0067] S5-S7中,分支水解过程具体为:调节pH为4.8,温度为50℃,转速为120rpm,水解处理24h;分支发酵过程具体为:调节pH为5.5,温度降为32℃,转速为150rpm,初始OD600为5,发酵处理30h。
[0068] S4-S7中复合水解酶的引入量为S3中复合水解酶引入量的50%,S4-S7中发酵培养基的引入量为S1中YPD种子培养基引入量的50%。
[0069] S5-S7中,分支水解过程中引入复合水解酶,复合水解酶的引入量为S1中复合水解酶引入量的15%。
[0070] S8、收集S3-37中得到的含乙醇的发酵液,完成发酵。
[0071] 进一步的,所述复合水解酶包括液体纤维素酶和木聚糖酶,酶活分别为8500U/mL和80000U/mL,投放量分别为160mL/kg玉米秸秆干物料和175mL/kg玉米秸秆干物。
[0072] 实施例3
[0073] 一种提高利用玉米秸秆生产燃料乙醇产量的水解发酵工艺,具体包括以下步骤:
[0074] S1、制备预处理秸秆混合物:采用高温稀酸对玉米秸秆干物进行预处理得到一定量的预处理秸秆混合物,其中预处理秸秆混合物的质量计为2000g;
[0075] 具体过程为:取玉米秸秆干物和稀硫酸,其中稀硫酸的质量浓度为0.3%,将玉米秸秆加入稀硫酸中,150℃、0.2MPa条件下处理30min,得到预处理秸秆混合物;
[0076] 其中,玉米秸秆和稀硫酸的总质量为2000g,玉米秸秆的质量为200g,余量为稀硫酸。
[0077] S2、制备YPD种子培养基和发酵培养基,备用。YPD种子培养基中包括蛋白胨20.0g/L、酵母粉10.0g/L和葡萄糖20.0g/L,在pH5.5、121℃条件下高压蒸汽灭菌20min,其中葡萄糖单独进行灭菌,灭菌方式为:115℃高压蒸汽灭菌15min;
[0078] 发酵培养基中包括蛋白胨7.5g/L、酵母粉5.0g/L和葡萄糖10.0g/L,在pH6.0、121℃条件下高压蒸汽灭菌20min,其中葡萄糖单独进行灭菌,灭菌方式为:115℃高压蒸汽灭菌15min。
[0079] S3、第一次循环水解发酵:取400g的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入2.5%v/v的YPD种子培养基,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和含乙醇的发酵液;
[0080] S4、第二次循环水解发酵:取400g的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S3中得到的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S3得到的全部回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到酵母和含乙醇的发酵液;
[0081] S5、第三次循环水解发酵:取400g的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S4中得到的80%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S4得到的80%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S4中剩余的20%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S4中剩余的20%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0082] S6、第四次循环水解发酵:取400g的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S5中得到的80的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S5得到的80%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S5中剩余的20%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S5中剩余的20%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0083] S7、第五次循环水解发酵:取400g的预处理秸秆混合物置入水解罐中,引入复合水解酶和S6中得到的80%的沉淀物进行水解,离心得到上清液和沉淀物,取上清液置于发酵罐中,无菌条件下引入发酵培养基和S6得到的80%回收酵母,进行发酵,发酵结束后离心回收得到回收酵母和乙醇,S6中剩余的20%沉淀物转入分支水解罐中进行分支水解,分支水解结束后转入分支发酵罐中,并加入S6中剩余的20%回收酵母进行发酵,离心得到含乙醇的发酵液;
[0084] S3-S7中,水解过程具体为:调节pH为6.5,温度为55℃,转速为150rpm,水解处理15h;离心过程具体为:转速为4500rpm,离心8min;发酵过程具体为:调节pH为6.0,温度降为
30℃,转速为250rpm,初始OD600为3,发酵处理20h。
[0085] S5-S7中,分支水解过程具体为:调节pH为6.5,温度为55℃,转速为150rpm,水解处理15h;离心过程具体为:转速为4500rpm,离心8min;发酵过程具体为:调节pH为6.0,温度降为30℃,转速为250rpm,初始OD600为3,发酵处理20h。
[0086] S4-S7中复合水解酶的引入量为S3中复合水解酶引入量的40%,S4-S7中发酵培养基的引入量为S1中YPD种子培养基引入量的40%。
[0087] S5-S7中,分支水解过程中引入复合水解酶,复合水解酶的引入量为S1中复合水解酶引入量的16%。
[0088] S8、收集S3-37中得到的含乙醇的发酵液,完成发酵。
[0089] 进一步的,所述复合水解酶包括液体纤维素酶和木聚糖酶,酶活分别为9000U/mL和90000U/mL,投放量分别为200mL/kg玉米秸秆干物料和200mL/kg玉米秸秆干物。
[0090] 对比例
[0091] 请参阅图3,采用传统的分步水解发酵工艺进行发酵,在50℃,pH4.5,搅拌转速150rpm,采用液体纤维素酶和木聚糖酶,酶活分别为8500U/ml和80000U/ml,投放量分别为
280ml/kg葡聚糖和300ml/kg木聚糖,持续时间为7天;之后将上清液转移至发酵罐中,调整ph至5.5,温度下降至32℃,加入发酵菌液酿酒酵母,接种量为5%(v/v),初始OD600为5,开启发酵阶段。持续时间为7天,处理的玉米秸秆水解液混合物质量为1000g。
[0092] 分析实验例2和对比例的发酵结果,实验例中整个工艺过程发酵液中乙醇浓度最高达到了46.4g/L(主循环中的cycle1),主循环的平均乙醇浓度达到了45.3g/L,比对比例中的传统发酵工艺(34.4g/L)分别提高了34.7%和31.7%;酶解时间120h,比原工艺缩短了28.7%;发酵时间150h,比原工艺缩短了10.7%;酶添加量分别为200ml/kg葡聚糖和220ml/kg木聚糖,比原工艺分别降低了28.6%和26.7%;酵母菌的使用量为27ml,比原工艺降低了
40%。乙醇平均得率Q为0.31g/L.h,糖醇转化率YE/S为72.4%,分别比原工艺(53.7%)提高了18.7%。
[0093] 其中:乙醇平均得率Q=Ethanolmax/发酵时间(g/L.h),糖醇转化率YE/S=Ethmax/耗糖量*100%,其中耗糖量指消耗的葡萄糖和木糖总量。
[0094] 因此,本发明将长时间的水解和发酵阶段拆解成多轮循环水解和发酵阶段,使得每轮的循环水解和发酵更快速高效,有效降低副产物的积累量,降低其对水解酶和发酵微生物酿酒酵母的抑制作用,从而提高整体工艺的产量和效率。
[0095] 以上所述;仅为本发明较佳的具体实施方式;但本发明的保护范围并不局限于此;任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内;根据本发明的技术方案及其改进构思加以等同替换或改变;都应涵盖在本发明的保护范围内。
高效检索全球专利

专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。

我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。

申请试用

分析报告

专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。

申请试用

QQ群二维码
意见反馈