技术领域
[0001] 本
发明属于产品微量元素检测技术领域，尤其涉及一种动物养殖产品中硒含量的测定方法。
背景技术
[0002] 硒是维持人体正常生理功能和
生物代谢所必需的微量元素之一，我国研究硒是从克山病和大骨节病防治开始的。近年，随着医学的发展，一些有价值的实验研究陆续地证明，硒与人类许多
疾病有关，由于硒在维持人体健康的重要作用逐渐被发现，已越来越受到临床的广泛重视。硒可构成具有突出特征功能的硒蛋白，其主要存在于人类骨骼肌中，在肌肉细胞的生物
氧化过程中发挥
电子传递作用。硒浓度的平衡对许多器官、组织的生理功能起着重要的保护和促进作用，具体体现在以下几个方面：
[0003] 1、具有抗氧化、抗衰老的作用。人体内的氧化损伤，会引起人的生病、衰老。而硒可以激活人体自身的抗氧化系统，控制沉降的氧化损伤，
预防疾病的发生。硒是人体重要的含硒酶的必需组成部分，其在人体约1/3参与谷胱甘肽过氧化物酶的合成，其余以硒蛋白形式存在。谷胱甘肽过氧化物酶作为含硒酶存在于
哺乳动物的红细胞及组织中，催化还
原型谷胱甘肽还原人体内有害的过氧化物，从而可协助淸除自由基，保护
生物膜免受过氧化物引起的氧化损伤，故目前认为硒最重要的生物学功能是抗氧化性。硒的抗氧化作用，是维生素E的五百倍以上。
[0004] 2、保护和修复细胞。硒在体内的
细胞质中的抗氧化物，具有代谢活性，可以保护细胞的
接触结构，减少氧化损伤。通过保护和修复细胞，进而可以保护人体心脏、肝、肾、
肺、眼等重要器官。
[0005] 3、提高红细胞携氧能
力。硒可以保护红细胞，防止红细胞中血红蛋白被氧化，使携氧能力增强，能给
机体的每一细胞带来足够的氧气，使每一个细胞都能维持正常的功能。
[0006] 4、增强人体免疫力。硒是人和动物的抗
氧化酶，在体内起到平衡的氧化还原作用，可以提高免疫力。硒能增强免疫系统，并能够认识到身体的病变，还可以提高机体的免疫功能，从根本上提高抗病能力。
[0007] 5、解毒、排毒。人类有很多疾病都是由生活环境污染造成的，而硒可以有效防止有害元素的侵入，有“天然解毒剂”的美称。硒作为带负电荷的非
金属离子，在人体内可以结合带正电荷的有害金属离子，彻底消除有毒的金属离子，达到解毒和排毒的效果。
[0008] 6、癌性
肿瘤的预防。微量元素硒既能抑制多种潜在的致癌物质，还能成为癌细胞的杀伤剂，可降低化疗的
副作用，减轻晚期癌症患者的
疼痛。
[0009] 生活中硒的主要来源：大蒜、猪肉、动物肝脏器官、眼球、蚕豆、螃蟹、鲤鱼、大黄鱼、对虾、墨斗鱼、带鱼、牡蛎、猪肝、猪肾、鸭蛋、人参、鸡蛋黄、补硒生物制剂禾存富硒麦芽粉等。考虑硒作为微量元素的重要性，动物养殖产品(例如鸡蛋、鸡肉等)中硒含量的高低是产品品质高低的重要指标，而另一方面，动物养殖产品中硒含量的高低也能反映出
饲料微量元素添加剂在动物饲喂中的饲喂效果，因此，如何高效、低成本、快速、准确地检测动物养殖产品中硒含量的高低，成为本领域人员面临的技术问题。
发明内容
[0010] 本发明所要解决的技术问题是如何高效、低成本、快速、准确地检测动物养殖产品中硒含量的高低，克服以上背景技术中提到的不足和
缺陷，提供一种操作简单、效率更高、准确率更高的动物养殖产品中硒含量的测定方法。
[0011] 为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为一种动物养殖产品中硒含量的测定方法，包括以下步骤：
[0012] (1)称取
质量为m的待测样品进行前处理得到样品溶液；
[0013] (2)将前处理后的样品溶液通过加酸加热进行消解处理，得到含四价硒的消解液；
[0014] (3)将消解液在酸介质中进行还原，得到含硒化氢中间品；
[0015] (4)将含硒化氢中间品通过载气送入
原子荧光光度计；
[0016] (5)采用原子荧光光度计分别测量一空白样品和待测样品转化后的含硒化氢中间品，分别得到待测样品和含硒化氢中间品的荧光强度值；
[0017] (6)根据的荧光强度值以及预先测定的硒标准溶液荧光强度-浓度标准曲线，标定得出空白样品中硒的浓度C0和待测样品中硒的浓度C；
[0018] (7)根据以下测定公式最终测定得出待测样品中的硒含量；
[0019]
[0020] 其中：W：为待测样品中硒的含量，单位mg/kg；
[0021] C为待测样品中硒的浓度，单位：ng/mL；
[0022] C0为空白样品中硒的浓度，单位：ng/mL；
[0023] m为待测样品称取的质量，单位g；
[0024] V0为样品溶液的定容总体积，单位mL。(测定结果用平形测定后的算术平均值表示，计算结果
精度至少表示到0.01mg/kg)
[0025] 本发明上述技术方案的测定原理为：试样经酸加热消解后，在酸介质中，将养殖产品(特别优选鸡蛋)中六价硒还原成四价硒，用遮蔽剂(特别优选
铁氰化
钾)遮蔽测定时的杂质干扰，四价硒在酸介质中还原成硒化氢，由载气带入原子化器中进行原子化，在硒空心
阴极灯照射下，基态硒原子被激发到高能态，在去活化回到基态时，发出特征
波长的荧光，其荧光强度与硒
能量成正比，与硒标准溶液荧光强度-浓度标准曲线比较定量得出待测样品中的硒含量。
[0026] 上述的测定方法，优选的，待测样品为禽类的全蛋样品、蛋白样品或蛋黄样品；
[0027] 全蛋样品主要通过以下步骤制备得到：将同批次的至少一个禽蛋打入杯具中，用搅拌器将蛋白、蛋黄搅拌均匀，再通过吸管润洗后，取质量m的样品置于容器中得到全蛋样品；
[0028] 蛋白样品主要通过以下步骤制备得到：轻轻敲开一禽蛋顶部，拨开一小洞，倒置，让蛋白流入杯具或用蛋白
过滤器收集蛋白液，用搅拌器将蛋白搅拌均匀，再通过吸管润洗后，取质量m的样品置于容器中得到蛋白样品；
[0029] 蛋黄样品主要通过以下步骤制备得到：轻轻敲开一禽蛋顶部，拨开一小洞，倒置，让蛋白流入杯具或用蛋白过滤器收集蛋白液，将剩余的蛋黄收集在另一杯具中，用搅拌器将蛋黄搅拌均匀，再通过吸管润洗后，取质量m的样品置于容器中得到蛋黄样品。
[0030] 上述的测定方法，优选的，前处理包括：向待测样品加入混合酸进行冷消化，冷消化时间不少于10小时，所述混合酸由优级纯
硝酸与优级纯高氯酸按照(3-5)∶1体积比混配而成。
[0031] 上述的测定方法，优选的，步骤(2)中消解处理具体包括：将前处理后的样品溶液放入消解炉上进行加热升温，至没有气泡产生时，提高
温度至200℃-250℃，消解至溶液透亮冒白烟，移开，室温冷却，然后加入
盐酸，煮沸后冷却至室温。更优选的：消解处理过程中若发现样品溶液只有2-3mL还没有冒烟时，补加混合酸消解至白烟产生。
[0032] 上述的测定方法，优选的，步骤(3)中消解液在酸介质中进行还原时，采用酸介质为体积比(1.5-2.5):1(更优选2:1)的盐酸与
水配出的盐
酸溶液。我们将酸介质从浓盐酸改良为体积比(1.5-2.5):1的盐酸与水配出的盐酸溶液，其主要考虑浓盐酸性很强，挥发性强，加热进行消解处理时气味很大，在实际操作中发现降低酸浓度也能达到同等效果。同时，降低酸浓度后，使定容后的样品溶液中酸浓度与载流液中酸浓度一致，减少测量误差。因为我们在实际测试中发现，载流液、标液和样品中酸浓度差距越大，测量误差越大。
[0033] 上述的测定方法，优选的，步骤(3)中消解液在酸介质中进行还原时，还加入了遮蔽剂。采用的遮蔽剂为铁氰化钾(优选浓度为150-250g/L)。铁氰化钾作为掩蔽剂掩蔽其它元素的干扰。该铁氰化钾的选用特别考虑了待测样品中鸡蛋的主要成分及可能引入的杂质元素，而采用铁氰化钾作为掩蔽剂能够更好地防止或遮蔽其它元素的干扰。酸度调节剂优选为盐酸，酸介质通过调节酸度，能够使待测样品与后续荧光检测时的载液酸度保持一致，从而确保检测的精度和准确度。
[0034] 上述的测定方法，优选地：硒标准溶液荧光强度-浓度标准曲线的测定具体包括以下步骤：
[0035] 先制备不同浓度的硒标准储备工作液并进行定容；
[0036] 将原子荧光光度计预热，待仪器稳定后，连续用硒浓度为0的标准工作溶液进样；待读数稳定后进行硒标准溶液荧光强度-浓度标准曲线的测定，在测量不同浓度的系列硒标准工作溶液前用载流液对进样器进行清洗，采用的系列硒标准工作溶液的浓度至少设置六个阶梯，相邻两阶梯的硒浓度值至少相差10ng/mL，且系列硒标准工作溶液中还添加有与待测样品溶液中相同浓度的盐酸和铁氰化钾；根据测得的荧光强度及对应的系列硒标准工作溶液的浓度值，求出回归方程各参数并绘制出硒标准溶液荧光强度-浓度标准曲线。
[0037] 上述的测定方法，优选的：所述原子荧光光度计使用的还原剂为
硼氢化钠(特别优选5g/L)；5g/L的硼氢化钠的配置方法为：称取5.0g硼氢化钠溶于氢氧化钠溶液(5g/L)中，然后定容至1L。所用载流液中酸浓度与所述步骤(4)中含硒化氢中间品的酸浓度一致。
[0038] 上述的测定方法，更优选的：原子荧光光度计的工作参数包括：
光电倍增管负高压：340V；硒空心阴极灯
电流：40mA；原子化温度：800℃，炉高：8mm、载气流速：400mL/min；屏蔽气流速：800mL/min；测量方式：标准曲线法；读数方式：峰面积；延迟时间：1S；读数时间：15S、加液时间8S、进样体积：2mL。
[0039] 与
现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明通过设计合理科学的提取工艺，将动物养殖产品(优选鸡蛋中的蛋白或蛋黄或蛋白与蛋黄的混合物)提取出来，通过原子荧光光度法测定硒含量，具有准确度高、精
密度好、回收率高的优点，同时本发明测定方法采用的
试剂和设备均系可从市场上购买到的低成本试剂和设备，检测成本低，方便实施。
附图说明
[0040] 为了更清楚地说明本发明
实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0041] 图1是本发明具体实施方式中测得标准溶液浓度与荧光强度对应的标准曲线及方程。
具体实施方式
[0042] 为了便于理解本发明，下文将结合
说明书附图和较佳的实施例对本发明做更全面、细致地描述，但本发明的保护范围并不限于以下具体实施例。
[0043] 除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本发明的保护范围。
[0044] 除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。本发明实施例采用的水均为去离子水，试剂的纯度级别均为优级纯。无特殊说明，采用的盐酸、硝酸、高氯酸均为未经稀释的浓盐酸、浓硝酸、浓高氯酸。
[0045] 实施例1：
[0046] 一种本发明的鸡蛋中硒含量的测定的方法，本实施例的鸡蛋可以是蛋白、蛋黄或全蛋，以下仅以蛋黄为例进行说明，蛋白和全蛋混合物的实施除了称样操作稍有区别，其他步骤与蛋黄的操作基本一直，蛋黄的硒测定具体包括以下步骤：
[0047] 1.原料称样及试剂准备：
[0048] 1.1蛋黄中硒称样：准备一个干净的纸杯，轻轻敲开鸡蛋顶部，拨开一个小洞，倒置，让蛋白缓缓流入纸杯，把蛋黄收集在另一纸杯中(或用专业蛋白过滤器收集蛋黄)，依次打入同批次鸡蛋样品1-2个，用电动搅拌器搅拌均匀，再用一次性吸管润洗2次，取6-10g样品(本实施例中m为10.0980g和10.0842g鸡蛋黄两个样品)，分别置于150mL三
角瓶中；如果是测定全蛋或蛋白则替换为以下操作即可：
[0049] 1.2全蛋中硒称样：准备一个干净的纸杯，打入同批次鸡蛋样品1-2个，用电动搅拌器把蛋白、蛋黄搅拌均匀，再用一次性吸管润洗2次，取6-10g左右样品，置于150mL三角瓶中；
[0050] 1.3蛋白中硒称样：准备一个干净的纸杯，轻轻敲开鸡蛋顶部，拨开一个小洞，倒置，让蛋白缓缓流入纸杯(或用专业蛋白过滤器收集蛋白液)，依次打入同批次鸡蛋样品1-2个，用电动搅拌器搅拌均匀，再用一次性吸管润洗2次，取6-10g左右样品，置于150mL三角瓶中。
[0051] 1.4溶液配制：
[0052] 1.4.1硝酸：优级纯；
[0053] 1.4.2高氯酸：优级纯；
[0054] 1.4.3盐酸：优级纯；
[0055] 1.4.4氢氧化钠：优级纯；
[0056] 1.4.5混合酸：硝酸与高氯酸按照4∶1体积比配出的混合酸溶液；
[0057] 1.4.6酸介质(2+1盐酸)：盐酸为按照体积比为2:1的浓盐酸与水配出的盐酸溶液；
[0058] 1.4.7铁氰化钾溶液(200g/L)：称取20.0g铁氰化钾溶于100mL水中，配成浓度为200g/L的铁氰化钾溶液；
[0059] 1.4.8硼氢化钠溶液(5g/L)：称取5.0g硼氢化钠溶于氢氧化钠溶液(5g/L)中，然后定容至1L。
[0060] 2.样品前处理：
[0061] 在上述准备好待测样品的三角瓶中加入30mL上述配置好的混合酸，轻轻摇动摇匀，放置过夜，冷消化时间为24小时，得到各待测样品溶液。
[0062] 3.消解处理：
[0063] 将待测样品溶液放置在
石墨消解炉上缓缓升温至没有气泡产生，然后将温度提高至约240℃，高温消解至溶液透亮冒白烟(注意不要煮干，以免影响检测结果，若发现溶液只有2-3mL时还没有冒烟时，补加10mL混合酸消解至溶液透亮冒白烟)，移开，室温下冷却，然后加入5mL配置好的2+1盐酸，然后煮沸2-3分钟，冷却至室温，得到含四价硒的消解液。
[0064] 4.酸性还原：
[0065] 将上述步骤3得到的含四价硒的消解液转入100mL容量瓶中，并加入2mL配置好的硼氢化钠溶液和10mL的2+1盐酸，再用水稀释至刻度、摇匀，得到含硒化氢中间品，上机备用。
[0066] 5.上机测量：
[0067] 设定好原子荧光光度计的最佳条件，预热15-30分钟待仪器稳定后开始测量；连续用标准系列的硒浓度为0的标准工作溶液进样，待读数稳定后进入样品测量，分别测量空白样品和待测样品(待测样品即为本实施例中的两个含硒化氢中间品)，在测量不同的样品前应用载流液对进样器应清洗；测出各样品的荧光强度值，根据荧光强度值以及预先测定的硒标准溶液荧光强度-浓度标准曲线进行比照，得出空白样品中硒的浓度C0和待测样品中硒的浓度C；根据比照，本实施例中测得的空白样品中硒的浓度C0为1.849ng/mL，两个待测样品中硒的浓度C分别为：32.034ng/mL、31.794ng/mL。
[0068] 6.获得结果：
[0069] 根据公式 计算出本实施例蛋黄中的硒含量：
[0070] 式中：W：为待测样品中硒的含量，单位mg/kg；
[0071] C为待测样品中硒的浓度，单位：ng/mL；
[0072] C0为空白样品中硒的浓度，单位：ng/mL；
[0073] m为待测样品称取的质量，单位g；
[0074] V0为样品溶液的定容总体积，单位mL。
[0075] 待测样品1：(32.034-1.849)*100/(10.0980*1000)＝0.299mg/kg；
[0076] 待测样品2：(31.794-1.849)*100/(10.0842*1000)＝0.297mg/kg；
[0077] 实施例2：
[0078] 一种本发明的鸡蛋中硒含量的测定的方法，本实施例的鸡蛋可以是蛋白、蛋黄或全蛋，以下仅以蛋黄为例进行说明，蛋白和全蛋混合物的实施除了称样操作稍有区别，其他步骤与蛋黄的操作基本一直，蛋黄的硒测定具体包括以下步骤：
[0079] 1.原料称样及试剂准备：
[0080] 1.1蛋黄中硒称样：准备一个干净的纸杯，轻轻敲开鸡蛋顶部，拨开一个小洞，倒置，让蛋白缓缓流入纸杯，把蛋黄收集在另一纸杯中(或用专业蛋白过滤器收集蛋黄)，依次打入同批次鸡蛋样品1-2个，用电动搅拌器搅拌均匀，再用一次性吸管润洗2次，取6-10g样品(本实施例中m为10.0980g和10.0842g鸡蛋黄两个样品)，分别置于150mL三角瓶中；另准备两份加标样品(分别称取m＝11.0233g、10.6742g鸡蛋黄样品，分别加入硒标准溶液1.0μg(1000ng)，置于150mL三角瓶中)；
[0081] 如果是测定全蛋或蛋白则替换为以下操作即可：
[0082] 1.2全蛋中硒称样：准备一个干净的纸杯，打入同批次鸡蛋样品1-2个，用电动搅拌器把蛋白、蛋黄搅拌均匀，再用一次性吸管润洗2次，取6-10g左右样品，置于150mL三角瓶中；
[0083] 1.3蛋白中硒称样：准备一个干净的纸杯，轻轻敲开鸡蛋顶部，拨开一个小洞，倒置，让蛋白缓缓流入纸杯(或用专业蛋白过滤器收集蛋白液)，依次打入同批次鸡蛋样品1-2个，用电动搅拌器搅拌均匀，再用一次性吸管润洗2次，取6-10g左右样品，置于150mL三角瓶中。
[0084] 1.4溶液配制：
[0085] 1.4.1硝酸：优级纯；
[0086] 1.4.2高氯酸：优级纯；
[0087] 1.4.3盐酸：优级纯；
[0088] 1.4.4氢氧化钠：优级纯；
[0089] 1.4.5混合酸：硝酸与高氯酸按照4∶1体积比配出的混合酸溶液；
[0090] 1.4.6酸介质(2+1盐酸)：盐酸为按照体积比为2:1的浓盐酸与水配出的盐酸溶液；
[0091] 1.4.7铁氰化钾溶液(200g/L)：称取20.0g铁氰化钾溶于100mL水中，配成浓度为200g/L的铁氰化钾溶液；
[0092] 1.4.8硼氢化钠溶液(5g/L)：称取5.0g硼氢化钠溶于氢氧化钠溶液(5g/L)中，然后定容至1L。
[0093] 2.样品前处理：
[0094] 在上述准备好待测样品的三角瓶中加入30mL上述配置好的混合酸，轻轻摇动摇匀，放置过夜，冷消化时间为24小时，得到各待测样品溶液。
[0095] 3.消解处理：
[0096] 将待测样品溶液放置在石墨消解炉上缓缓升温至没有气泡产生，然后将温度提高至约240℃，高温消解至溶液透亮冒白烟(注意不要煮干，以免影响检测结果，若发现溶液只有2-3mL时还没有冒烟时，补加10mL混合酸消解至溶液透亮冒白烟)，移开，室温下冷却，然后加入5mL配置好的2+1盐酸，然后煮沸2-3分钟，冷却至室温，得到含四价硒的消解液。
[0097] 4.酸性还原：
[0098] 将上述步骤3得到的含四价硒的消解液转入100mL容量瓶中，并加入2mL配置好的铁氰化钾溶液和10mL的2+1盐酸，再用水稀释至刻度、摇匀，得到含硒化氢中间品，上机备用。
[0099] 5.上机测量：
[0100] 设定好原子荧光光度计的最佳条件，预热15-30分钟待仪器稳定后开始测量；连续用标准系列的硒浓度为0的标准工作溶液进样，待读数稳定后进入样品测量，分别测量空白样品和待测样品(待测样品即为本实施例中的两个含硒化氢中间品)，在测量不同的样品前应用载流液对进样器应清洗；测出各样品的荧光强度值，根据荧光强度值以及预先测定的硒标准溶液荧光强度-浓度标准曲线进行比照，得出空白样品中硒的浓度C0和待测样品中硒的浓度C；根据比照，本实施例中测得的空白样品中硒的浓度C0为1.849ng/mL，两个待测样品中硒的浓度C分别为：32.034ng/mL、31.794ng/mL；两个加标样品中硒的浓度值为：41.810ng/mL、41.924ng/mL。
[0101] 6.获得结果：
[0102] 根据公式 计算出本实施例蛋黄中的硒含量：
[0103] 式中：W：为待测样品中硒的含量，单位mg/kg；
[0104] C为待测样品中硒的浓度，单位：ng/mL；
[0105] C0为空白样品中硒的浓度，单位：ng/mL；
[0106] m为待测样品称取的质量，单位g；
[0107] V0为样品溶液的定容总体积，单位mL。
[0108] 待测样品1：(32.034-1.849)*100/(10.0980*1000)＝0.299mg/kg；
[0109] 待测样品2：(31.794-1.849)*100/(10.0842*1000)＝0.297mg/kg；
[0110] 加标样品1对应的浓度值为：41.810ng/mL，称样量为11.0233g；空白为1.849ng/kg；
[0111] 加标样品2对应的浓度值为：41.924ng/mL，称样量为10.0842g；空白为1.849ng/kg；
[0112] 加标样品1的加标回收量为：(41.810-1.849)*100-0.299*1000*10.0980＝976.8ng；
[0113] 加标样品2的加标回收量为：(41.924-1.849)*100-0.297*1000*10.0842＝1002.5ng；
[0114] 加标回收率：(976.8+1002.5)/(2*1000)*100％＝98.96％。
[0115] 上述各实施例中用到的原子荧光光度计的工作参数包括：
[0116] 光电倍增管负高压：340V；硒空心阴极灯电流：40mA；原子化温度：800℃，炉高：8mm、载气流速：400mL/min；屏蔽气流速：800mL/min；测量方式：标准曲线法；读数方式：峰面积；延迟时间：1S；读数时间：15S、加液时间8S、进样体积：2mL。
[0117] 原子荧光光度计使用的还原剂为硼氢化钠；载流液中酸浓度与含硒化氢中间品的酸浓度一致。
[0118] 上述各实施例中硒标准溶液荧光强度-浓度标准曲线绘制的具体操作包括：
[0119] (1)硒标准溶液：100μg/mL；
[0120] (2)硒标准储备工作溶液：准确移取1mL上述标准溶液于100mL容量瓶中，并加入2mL铁氰化钾(200g/L)，10mL2+1盐酸，再用水稀释至刻度，摇匀；
[0121] (3)分别准确量取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL硒标准储备工作溶液(1μg/mL)于100mL容量瓶中，加入2mL铁氰化钾(200g/L)，10mL2+1盐酸，再用水稀释至刻度、摇匀；对应的硒标准系列工作溶液的浓度分别为：0、10ng/mL、20ng/mL、30ng/mL、40ng/mL、50ng/mL、60ng/mL；
[0122] (4)上机：设定好仪器最佳条件，预热15-30分钟，待仪器稳定后开始测量。连续用标准系列的零瓶进样，待读数稳定后进行标准系列测量，绘制标准曲线，依次检测得出硒标准系列工作溶液的吸光度值分别为：0、682.46、1350.55、2016.85、2748.24、3478.57、4154.33(参见下表1)。
[0123] 表1：标准曲线的标准浓度与荧光强度对照表
[0124]C(ng/mL) 10 20 30 40 50 60
荧光强度A 682.46 1350.55 2016.85 2748.24 3478.57 4154.33
[0125] 上述测得的标准曲线以及标准曲线方程如图1所示，其中：
[0126] A＝69.4746*C-22.6683；R＝0.9999。
