一种氨基化多壁碳纳米管电化学传感器及其在检测槲皮素的
应用
技术领域
[0001] 本
发明涉及电化学传感器领域，具体涉及
一种氨基化多壁碳纳米管电化学传感器及其在检测槲皮素的应用。
背景技术
[0002] 槲皮素，又名槲皮黄素、栎精，是一种多羟基黄
酮类化合物。广泛存在于
植物的花、叶、果实中，具有多种
生物学活性。槲皮素不仅具有祛痰、止咳、平喘、抗过敏、抗
炎症、抗
氧化的作用，还具有降低血压、降低血脂、抗
肿瘤、抗血小板
凝固、扩张
冠状动脉，抑制黄曲霉素产生等作用，有较高的药用价值和较好的药理作用。
[0003] 电化学传感器是基于电化学反应原理来检测标的物的一类传感器，它以
电极作为传感器转换元件，修饰在电极上的材料作为敏感元件，敏感元件与被测物质的离子或分子
接触发生化学反应或变化，转换元件将这种反应或变化直接或间接的转化为电
信号，建立标的物的浓度、成分等化学量与输出
电信号的关系，从而实现标的物的定量检测的装置。碳纳米管具有良好的导电功能、电
磁性能以及
吸附性能，能够提高
原子表面活性，有利于发
生物质的交换，可以作为电极修饰材料用于制备电化学传感器。但是，现有的一些电化学传感器，在制备过程中，虽然使用了碳纳米管材料，但是仍然会存在一定的灵敏度低，
检测限过高的问题。
发明内容
[0004] 针对上述问题，本发明的一个目的是提供一种氨基化
多壁碳纳米管电化学传感器，该电化学传感器的制备包括以下步骤：
[0005] (1)玻碳电极的处理：
[0006] 将直径为3mm的玻碳电极先用粒径为0.05μm的γ-氧化
铝打磨，再用重蒸
水超声清洗，室温下晾干，得到玻碳电极前处理物；
[0007] (2)氨基化多壁碳纳米管的修饰：
[0008] 取氨基化多壁碳纳米管分散液滴涂于所述玻碳电极前处理物表面，置于红外灯下照射至干燥，得到氨基化多壁碳纳米管修饰电极前处理物；
[0009] (3)氨基化多壁碳纳米管修饰电极的构建：
[0010] 将所述氨基化多壁碳纳米管修饰电极前处理物置于PBS缓冲溶液中，使用微分脉冲
伏安法扫描使其稳定，随后在PBS缓冲溶液中进行恒电位富集，即得到氨基化多壁碳纳米管修饰电极；
[0011] 其中，微分脉冲伏安法扫描时的电位区间为-0.1～0.7V，两次扫描之间间隔1min；
[0012] 恒电位富集电位区间为-0.2V～0.4V，富集时间0～30min。
[0013] (4)电化学传感器的设置：
[0014] 以
工作电极为氨基化多壁碳纳米管修饰电极，
对电极为中空
钛棒，参比电极为饱和甘汞电极，即得到电化学传感器。
[0015] 优选地，所述氨基化多壁碳纳米管分散液的
溶剂为N,N-二甲基甲酰胺；所述氨基化多壁碳纳米管分散液的浓度为1mg/mL；所述氨基化多壁碳纳米管分散液用量为5μL。
[0016] 优选地，所述恒电位富集电位为0V。
[0017] 优选地，所述恒电位富集时间21min。
[0018] 优选地，所述步骤(3)中PBS缓冲溶液的浓度为0.2mol/L。
[0019] 本发明的另一个目的是提供一种氨基化多壁碳纳米管电化学传感器在检测槲皮素的应用，所述的对槲皮素进行检测，具体是：
[0020] 将所述电化学传感器置于装载有
电解液的
电解池中，使用微分脉冲伏安法检测待测物中槲皮素的浓度；
[0021] 其中，所述电解液为PBS缓冲溶液；所述电解池的容积为25mL，每次检测时装载电解液体积为20mL，采用
电磁搅拌器进行搅拌；
[0022] 在对槲皮素进行检测之前，先通入高纯氮气，以除尽所述电解液中的溶解氧。
[0023] 优选地，所述电解池中PBS缓冲溶液浓度为0.2mol/L。
[0024] 优选地，所述电解池中的液体PH＝4。
[0025] 本发明的有益效果为：
[0026] 1.目前市场上用来制备电化学传感器使用的碳纳米管大多是
单壁碳纳米管，单壁碳纳米管制作工艺复杂，价格昂贵，而本发明使用的多壁碳纳米管不仅价格较便宜，而且具有较好的吸附性能和较大的
比表面积，该多壁碳纳米管表面有含氧基团和表面空穴，而氨基化多壁碳纳米管相比较一般的多壁碳纳米管具有更好的相容性和分散性，因此，将氨基化多壁碳纳米管应用于电化学反应电极上，能够有更多的反应位点，继而有效增强电极在电化学测试中的电催化性能，使检测得到的结果更加地灵敏。
[0027] 2.本发明利用氨基化和多壁碳纳米管的双放大效应，可高灵敏度地用于检测痕量槲皮素。所述的用于检测痕量槲皮素的电化学传感器克服了已有技术在检测槲皮素时存在方法过于繁琐，步骤复杂等诸多缺点，更好地提高了检测的灵敏度，对于槲皮素的检测易于自动化。
附图说明
[0028] 利用附图对本发明作进一步说明，但附图中的
实施例不构成对本发明的任何限制，对于本领域的普通技术人员，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据以下附图获得其它的附图。
[0029] 图1表示使用不同电极的微分脉冲伏安曲线；
[0030] 图2是本发明实施例1的电化学传感器标准吸收曲线；
[0031] 图3是本发明实施例1的电化学传感器的选择性图。
具体实施方式
[0032] 结合以下实施例对本发明作进一步描述。
[0033] 实施例1
[0034] 一种氨基化多壁碳纳米管电化学传感器的制备，包括以下步骤：
[0035] (1)玻碳电极的处理：
[0036] 将直径为3mm的玻碳电极先用粒径为0.05μm的γ-氧化铝打磨，再用重蒸水超声清洗，室温下晾干，得到玻碳电极前处理物；
[0037] (2)氨基化多壁碳纳米管的修饰：
[0038] 取氨基化多壁碳纳米管分散液滴涂于所述玻碳电极前处理物表面，置于红外灯下照射至干燥，得到氨基化多壁碳纳米管修饰电极前处理物；
[0039] (3)氨基化多壁碳纳米管修饰电极的构建：
[0040] 将所述氨基化多壁碳纳米管修饰电极前处理物置于PBS缓冲溶液中，使用微分脉冲伏安法扫描使其稳定，随后在PBS缓冲溶液中进行恒电位富集，即得到氨基化多壁碳纳米管修饰电极；
[0041] 其中，微分脉冲伏安法扫描时的电位区间为-0.1～0.7V，两次扫描之间间隔1min；
[0042] 恒电位富集电位区间为-0.2V～0.4V，富集时间0～30min。
[0043] (4)电化学传感器的设置：
[0044] 以工作电极为氨基化多壁碳纳米管修饰电极，对电极为中空钛棒，参比电极为饱和甘汞电极，即得到电化学传感器。
[0045] 其中，步骤(2)中氨基化多壁碳纳米管分散液的溶剂为N,N-二甲基甲酰胺；氨基化多壁碳纳米管分散液用量为8μL；步骤(3)中PBS缓冲溶液浓度为0.2mol/L。
[0046] 实施例2
[0047] 一种氨基化多壁碳纳米管电化学传感器的制备，包括以下步骤：
[0048] (1)玻碳电极的处理：
[0049] 将直径为3mm的玻碳电极先用粒径为0.05μm的γ-氧化铝打磨，再用重蒸水超声清洗，室温下晾干，得到玻碳电极前处理物；
[0050] (2)氨基化多壁碳纳米管的修饰：
[0051] 取浓度为1mg/mL的氨基化多壁碳纳米管分散液滴涂于所述玻碳电极前处理物表面，置于红外灯下照射至干燥，得到氨基化多壁碳纳米管修饰电极前处理物；
[0052] (3)氨基化多壁碳纳米管修饰电极的构建：
[0053] 将所述氨基化多壁碳纳米管修饰电极前处理物置于PBS缓冲溶液中，使用微分脉冲伏安法扫描使其稳定，随后在PBS缓冲溶液中进行恒电位富集，即得到氨基化多壁碳纳米管修饰电极；
[0054] 其中，微分脉冲伏安法扫描时的电位区间为-0.1～0.7V，两次扫描之间间隔1min；
[0055] 恒电位富集电位区间为0V，富集时间21min。
[0056] (4)电化学传感器的设置：
[0057] 以工作电极为氨基化多壁碳纳米管修饰电极，对电极为中空钛棒，参比电极为饱和甘汞电极，即得到电化学传感器。
[0058] 其中，氨基化多壁碳纳米管分散液的溶剂为N,N-二甲基甲酰胺；氨基化多壁碳纳米管分散液用量为8μL；步骤(3)中PBS缓冲溶液浓度为0.2mol/L。
[0059] 实施例3
[0060] 电化学传感器在检测槲皮素的应用，具体为：
[0061] 将所述电化学传感器置于装载有电解液的电解池中，使用微分脉冲伏安法检测待测物中槲皮素的浓度；
[0062] 其中，电解液为浓度为0.2mol/L的PBS缓冲溶液；所述电解池的容积为25mL，每次检测时装载电解液体积为20mL，采用电磁搅拌器进行搅拌；电解池中的液体PH＝4；
[0063] 在对槲皮素进行检测之前，先通入高纯氮气，以除尽所述电解液中的溶解氧。
[0064] 实施例4
[0065] 检测槲皮素的线性方程的建立：
[0066] 基于本发明实施例1制备的电化学传感器对槲皮素的灵敏度反应程度(如图2所示)，建立对槲皮素电化学检测的线性方程。
[0067] 由图2可知，槲皮素在浓度范围为1～200×10-9mol/L时，电化学信号响应与槲皮素的浓度呈良好的线性关系，峰
电流与槲皮素浓度呈现良好的线性关系。
[0068] 其线性方程为I(μA)＝0.23+0.091C；
[0069] 其中，相关系数R＝0.992，检出限为0.25nmol/L；
[0070] I表示峰电流，单位为μA；C表示槲皮素的检出浓度，单位为nmol/L。
[0071] 实施例5
[0072] 在检测槲皮素时干扰物的影响：
[0073] 设置槲皮素浓度为100nmol/L，并以槲皮素浓度为基准，分别加入500倍浓度的
盐酸、100倍浓度的
葡萄糖、100倍浓度的
抗坏血酸、100倍浓度的Mg2+(镁离子)、100倍浓度的Ca2+(
钙离子)、100倍浓度的Al3+(铝离子)等干扰物，使用本发明实施例1制备的电化学传感器以及实施例3的方法进行检测槲皮素，观察这些干扰物对检测结果的影响，结果如图3所示。其中，图3中：横坐标表示不同的干扰物，即盐酸，葡萄糖，抗坏血酸，Mg2+，Ca2+，Al3+；纵坐标I0表示无干扰物时槲皮素的峰电流，I表示在有干扰物存在下槲皮素的峰电流。
[0074] 由图3可知，500倍浓度的盐酸、100倍浓度的葡萄糖、100倍浓度的抗坏血酸、100倍浓度的Mg2+(镁离子)、100倍浓度的Ca2+(钙离子)、100倍浓度的Al3+(铝离子)对槲皮素的峰电流与无干扰物时槲皮素的峰电流比值(I/I0)在100％附近，进而证明了使用本发明实施例1制备的电化学传感器与实施例2的方法检测，即使有上述这些干扰物存在，也几乎不会对本发明检测槲皮素的灵敏度造成影响。
[0075] 对比例1
[0076] 制备方法如实施例1，区别是不使用氨基化多壁碳纳米管修饰电极(即省略步骤(2))，即直接以玻碳电极前处理物为工作电极制备电化学传感器。
[0077] 对比例2
[0078] 制备方法如实施例1，区别是将步骤(2)中氨基化多壁碳纳米管替换为多壁碳纳米管修饰电极，以制备得到的多壁碳纳米管修饰电极为工作电极制备电化学传感器。
[0079] 为了更加清晰的说明本发明的内容，针对本发明实施例1、对比例1和对比例2所制备的电化学传感器进行下述实验：
[0080] 1.不同电化学传感器对槲皮素的灵敏度检测：
[0081] 设置槲皮素
乙醇溶液的浓度为1.0×10-6mol/L时，将本发明实施例1、对比例1和对比例2所制备的电化学传感器使用本发明实施例3的检测方法对槲皮素进行检测，检测结果如图1所示，图1中：1-对比例1；2-对比例2；3-实施例1。
[0082] 由图1可知，在槲皮素浓度为1.0×10-6mol/L时，对比例1中显示的峰电流为6.65μA，对比例2显示的峰电流为16.76μA，实施例1显示的峰电流为31.43μA。
[0083] 其中，图1中实施例1显示的槲皮素的峰电流是对比例1的5倍，表明本发明实施例1制备的电化学传感器对电极反应具有良好的电催化性能，槲皮素在本发明实施例1制备的电化学传感器上能产生灵敏的电化学响应，非常适合用于槲皮素地灵敏检测。
[0084] 2.实际样品的检测：
[0085] 将玉米样品经过加标处理后(即采用标准加入法加入对槲皮素)，取其提取液，使用本发明实施例1制备的电化学传感器和实施例3的方法进行电化学测定，每组数据平行五次取平均值，测定结果见表1。
[0086] 表1玉米样品加标检测结果
[0087] 加标浓度(nmol/L) 回收率(％) 相对标准偏差RSD(％)2 93.7～98.5 2.15
20 96.5～103.6 4.03
100 97.4～105.1 5.26
[0088] 由表1可知，上述检测结果显示回收率为93.7％～105.1％，相对标准偏差为2.15-5.26％，证明本发明所制备的氨基化多壁碳纳米管电化学传感器用于检测槲皮素的方法是可行的。
[0089] 最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细地说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行
修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
