[0001] 本
发明涉及式(I)奥扎尼莫德及其盐的制备方法，以及在所述制备方法过程中使用的新型制药工业中间产物。
[0002]
[0003] 奥扎尼莫德是第二代鞘
氨醇-1-
磷酸(S1P)受体调节剂，目前正在开发中，用于
治疗多发性硬化症、溃疡性结肠炎和克罗恩病。奥扎尼莫德是一种光学活性物质，其不对称
碳原子的绝对构型为S型。
背景技术
[0004] 国际
专利申请WO 2009151529公开了与奥扎尼莫德对应的外消旋化合物的生产(式1)。由于奥扎尼莫德活性物质是旋光性化合物，因此应解决外消旋混合物的生产问题。专利申请WO 2009151529没有为此提供解决方案。
[0005]
[0007] 国际专利申请WO 2011060392公开了通过
手性合成生产奥扎尼莫德的方法(式2)：
[0008]
[0009] 在合成过程中，将1-
氧代-2,3-二氢-1H-茚基-4-腈(A)与旋光性(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺反应，然后将生成的席夫
碱(B)的C＝N键用
硼氢化钠还原，得到式(VI)的关键中间体。由于先前引入的手性基团产生的手型诱导，反应过程中形成的新的不对称碳原子主要具有S绝对构型。之后除去(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基，并对得到的伯胺引入即叔丁氧羰基(Boc)作为保护基。用(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基
硅烷将如此制得的(D)酰胺烷基化。
在将羟胺添加至腈基之后，使用适当的
苯甲酸衍
生物生成1,2,4-噁二唑环。在该操作过程中，部分叔丁基二甲基甲硅烷基裂解。然后将仍残留的叔丁基二甲基甲硅烷基和Boc保护基，由此从混合物获得奥扎尼莫德。
[0010] 专利申请WO 2016164180的
说明书中描述了类似的过程，其公开了氘代衍生物的生产。
[0011] 换句话说，在专利申请WO 2011060392和WO 2016164180中所描述的过程中，手性中心是在合成的初始阶段确定的。在硼氢化钠还原过程中发生不对称诱导，因此大量生成了化合物(VI)。
[0012]
[0013] 另一方面，选择性不一定完全，并且可能出现其他非对映异构体的污染物。专利申请公开号WO 2011060392的第263段中的措词如下：所提出的方法得到富含预期的对映异构体最终产物。专利申请公开WO 2011060392或WO 2016164180均未提供给出中间体(VI)的对映体纯度或教导其纯化的实例。在这两种情况下的实施方案中，还原后获得的油状或固体产物无需纯化即可用于之后的合成步骤。在根据文献WO 2011060392和WO 2016164180的合成中，之后的步骤除去亚磺酰基，且使用制得的“富含对映异构体”而不是纯的式(C)胺继续合成。
[0014] 在制药业中活性物质的批准程序中，必须在其所有物理和化学特性方面遵守日益严格的要求。因此，手性活性物质的情况下的对映异构体纯度非常重要。对于本领域技术人员而言显而易见的是，在此之后的合成阶段中，只有使用手性色谱法可以检测单个相产物的对映异构体污染物，并且如果单个中间产物或奥扎尼莫德最终产物的对映异构体纯度不够，只能通过干预其他纯化步骤(例如手性色谱法或基于非对映异构体盐形成的方法)来纯化。手性色谱法仅在少量纯化的情况下是经济的，而通过非对映异构体盐纯化可能需要使用昂贵的拆分剂和/或多个重结晶步骤，这可能会因为更多操作步骤而增加大体过程的长度。
[0015] 本发明的目的是克服已知方法的缺点，并且提出一种式(I)奥扎尼莫德及其盐的制备方法，该方法实施简单，并且在工业
角度上经济，具有较少的合成步骤。
[0016] 通过精心设计一种合成途径来实现该目标，在该合成途径中，将叔丁基亚磺酰基保持在中间体的手性碳原子的氨基上，直至合成的最后一步，从而使Boc保护基的引入和脱除成为非必要，而在硼氢化物还原过程中由于叔丁基亚磺酰基的不完全手性诱导而产生的不需要的立体化学副产物作为非对映异构体污染物，而不是对映异构体，在之后的合成路径步骤中出现，其更容易分析，也更容易通过纯化操作将其除去。
发明内容
[0017] 本发明为式(I)所示奥扎尼莫德及其
酸加成盐的新型制备方法，
[0018]
[0019] 该制备方法的实质为在
有机溶剂中裂解可在酸性介质中移除的一个或多个保护基
[0020] a)从通式(IV)所示的化合物
[0021]
[0022] 其中R表示可在酸性介质中移除的用于
临时保护羟基的保护基，或
[0023] b)从式(V)所示的化合物
[0024]
[0025] 或
[0026] c)从通式(IV)和式(V)所示的化合物的任意比例的混合物，并且如此制得的式(I)奥扎尼莫德任选地被转换成为酸加成盐。优选地，在移除保护基的同时式(I)奥扎尼莫德转
化成盐。最优选奥扎尼莫德转化为式(I/A)
盐酸盐。
[0027]
[0028] 根据本发明的一个优选实施方案中，可在酸性介质中移除的用于临时保护通式(IV)化合物中羟基的保护基为取代的甲醚型基团，优选为甲氧基甲基、苄氧基甲基，对甲氧基苄氧基甲基，或((3,4-二甲氧基苄基)氧基)甲基，四氢吡喃基，或取代的乙醚型基团，优选乙氧基乙基，或1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)乙基，硅基醚型基团，优选三甲基硅基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或三苯基甲硅烷基。
[0029] 根据本发明的另一个优选实施方案，在反应中使用了通式(IV)和式(V)所示的化合物的混合物。
[0030] 醚类溶剂，例如二噁烷、1-4个碳原子的醇，优选2-丙醇、
乙醇或甲醇，最优选2-丙醇，或芳族溶剂，优选
甲苯或二甲苯，更优选甲苯，被用作
有机溶剂。
[0031] 根据本发明的一个优选实施方案，使用酸裂解可在酸性介质中移除的用于临时保护羟基的保护基，优选使用盐酸、溴化氢、碘化氢、
氟化氢(HF)、
硫酸、
硝酸或其盐、四丁基氟化铵(TBAF)、TBAF和乙酸的混合物、HF和THF的含
水混合物，或1M HIO4溶于THF的水溶液。
[0032] 令人惊讶地发现，如果不从式(VI)所示的化合物中移除(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基，则其在进一步的反应步骤中可作为合适的保护基。因此，在整个合成过程中，除了所需的(S，S)非对映异构体以外，不需要的(R)构型1H-茚衍生物以(S，R)非对映异构体形式存在。通常地，可根据非对映异构体不同物理特性通过结晶使其分离。由于具有不同的物理性质(
溶解度、
吸附特性)，它们无需手性色谱法即可被检测和分离。因此，不需要除去(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基，并在其
位置引入叔丁氧基羰基(Boc)保护基。由此，大大缩短了奥扎尼莫德的合成途径。
[0033] 本发明的详细说明
[0034] 本发明为式(I)奥扎尼莫德及其酸加成盐的制备方法，其特征在于，可在酸性介质中移除的一个或多个保护基在有机溶剂中被移除
[0035]
[0036] 从通式(IV)所示的化合物中移除，其中R代表氢或用于临时保护羟基的可在酸性介质中移除的保护基，或
[0037]
[0038] 从式(V)所示的化合物，或其任何比例的混合物中移除，如果需要，以这种方式获得的式(I)奥扎尼莫德任选地被转化为酸加成盐。优选在除去保护基团的同时，式(I)奥扎尼莫德转化成盐。最优选奥扎尼莫德转化为式(IA)所示的盐酸盐。
[0039]
[0040] 根据本发明的一个优选的实施方案，使用取代的甲醚型化合物，优选甲氧基甲基、苄氧基甲基、对甲氧基苄氧基甲基或((3,4-二甲氧基苄基)氧基)甲基，四氢吡喃基，或取代的乙醚型基团，优选乙氧基乙基或1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)乙基，硅基醚型基团，优选三甲基硅基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或三苯基甲硅烷基作为可在酸性介质中移除的用于临时保护通式(IV)所示的化合物中羟基的保护基。根据本发明的优选实施方案之一，该方法使用了通式(IV)和式(V)所示的化合物的混合物。醚类溶剂优选二噁烷、1-4个碳原子的醇，优选2-丙醇、乙醇或甲醇，最优选2-丙醇，或芳族溶剂，优选甲苯或二甲苯，更优选甲苯用作有机溶剂。用于实施该过程的酸是
无机酸，例如盐酸、溴化氢、碘化氢、氟化氢(HF)或其盐：四丁基氟化铵(TBAF)、TBAF和乙酸的混合物、HF和THF的水溶液、1M HIO4溶于THF的水溶液等。(请参阅Peter G.M.Wuts；Theodora W.Greene，Greene’s protective groups in Organic Synthesis，第四版，Wiley Interscience，2007)，优选盐酸。根据本发明的优选实施方案，酸采用其浓的水溶液、有机溶剂和水的混合物或溶解于有机溶剂的形式使用，优选使用二噁烷、2-丙醇、乙醇或甲醇作为溶剂。
[0041] 令人惊奇地发现，如果不从式(VI)所示的化合物中除去(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基，其在进一步的反应步骤中作为合适的保护基起作用。因此，不需要除去(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基并在其位置引入Boc保护基。通过这种方式，大大缩短了奥扎尼莫德的合成途径。
[0042] 在本发明通式(IV)所示的化合物的制备方法中，其中R表示氢或可在酸性介质中移除的用于临时保护羟基的保护基，式(V)所示的化合物或其混合物按此制备，
[0043] a)式(VIII)3-氰基-4-(异丙氧基)苯甲酸
[0044]
[0045] 在有机溶剂中被活化，然后
[0046]
[0047] 与通式(III)所示的化合物反应，其中化合物R代表用于临时保护羟基的可在酸性介质中移除的保护基，优选取代的甲醚型基团，更优选为甲氧基甲基、苄氧基甲基、对甲氧基苄氧基甲基或((3,4-二甲氧基苄基)氧基)甲基，四氢吡喃基，或取代的乙醚型基团，优选乙氧基乙基，或1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)乙基、硅基醚型基团，优选三甲基硅基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或三苯基甲硅烷基，最优选叔丁基二甲基甲硅烷基，然后任选地
[0048] b)将得到的通式(IV)所示的化合物和式(V)所示的化合物彼此分离。
[0049] 通式(IV)所示的化合物和式(V)所示的化合物的量和比例是变化的。这些比例取决于反应的
温度和持续时间。然而由于在随后的步骤中，两种化合物都转化为了式(I)奥扎尼莫德，因此从本发明的观点来看，这些比例没有特别的意义。混合物的两种组分根据所使用的酸经过一个或多个保护基团的裂解，转化为奥扎尼莫德的酸加成盐。
[0050] 根据本发明的一个优选的实施方案，通过在有机溶剂中活化式(VIII)所示3-氰基-4-(异丙氧基)苯甲酸来闭合1,2,4-噁二唑环，然后与通式(III)所示的化合物反应。优选将酰胺、芳族、醚、酯、腈或亚砜类溶剂用作有机溶剂，最优选将二甲基甲酰胺用作酰胺类溶剂，优选将二甲苯或甲苯用作芳族溶剂，最优选甲苯，最优选使用四氢呋喃或二噁烷用作醚类溶剂，乙腈用作腈类溶剂，二甲基亚砜用作亚砜类溶剂，优选甲苯或酯类溶剂，最优选乙酸乙酯。在本发明的方法中，式(VIII)所示的苯甲酸优选在有机碱，优选DIPEA(二异丙基乙胺)、TEA(三乙胺)，的存在下，使用二取代的碳二亚胺，优选二环己基碳二亚胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺，或在羟基苯并三唑的存在下使用羰基二咪唑，或使用氰基
乙醛酸乙酯-2-肟，或使用丙烷膦酸酐(T3P)活化。最优选地，其被丙烷膦酸酐(T3P)活化。
[0051] 在制备1,2,4-噁二唑环的过程中所使用的条件下，根据选择的保护基和使用的条件，保护基R可以部分或完全裂解。因此，在闭环之后，根据条件获得其中保护基R保持不变的产物(通式IV所示的化合物)，或保护基裂解形成式(V)所示的化合物。如果保护基仅部分裂解，则获得上述化合物的混合物。将仍连接在化合物上的保护基以这种方式从产物或从化合物形成的混合物中裂解，所述混合物由通式(IV)所示的化合物和式(V)所示的化合物组成，由此而直接获得了奥扎尼莫德的酸加成盐。因此，如果保护基R在闭环过程中部分裂解，则可以不考虑这一事实而继续将该混合物进行酸
水解，但是也可以将通式(IV)所示的化合物与式(V)所示的化合物分离，并在分离后分开裂解保护基。
[0052] 根据本发明的非常优选的实施方案，不需要分离式(IV)或(V)所示的中间体或其混合物。可以通过在碱的存在下，在与水不混溶的溶剂中使通式(III)所示的化合物与式(VIII)所示的化合物反应，然后当闭环完成时，反应混合物中含有式(IV)或(V)所示的化合物，或其任何比例的混合物和任选的奥扎尼莫德碱，将反应混合物用碱的水溶液洗涤，优选使用
碳酸氢钠或碳酸氢
钾溶液和盐溶液，然后将得到的甲苯溶液与浓盐
酸溶液反应，其结果是保护基裂解，且奥扎尼莫德盐酸盐以晶体形式沉淀。
[0053] 如有必要，如此获得的奥扎尼莫德酸加成盐，例如奥扎尼莫德盐酸盐，被转化为碱，并重结晶。这样做的优点是，与使用粗制的奥扎尼莫德盐酸盐相比，使用盐酸制得的结晶碱或由其制得的盐具有更高的化学纯度。在这种情况下，该方法包括通过优选在有机溶剂中或在有机溶剂和水的混合物中添加无机碱，然后分离奥扎尼莫德碱，来讲粗制的奥扎尼莫德盐酸盐转化为碱。将以此方式获得的碱溶解在有机溶剂中，并用酸，优选为37％的盐酸水溶液进行分离。使用卤代
烃，优选二氯甲烷、芳族溶剂，优选甲苯或腈类溶剂，优选乙腈作为溶剂。碱金属氢氧化物，碳酸盐或碳氢化合物，优选氢氧化钾或氢氧化钠，碳酸盐或碳酸氢盐可用作碱。
[0054] 因此，根据本发明的一个非常优选的实施方案，通式(III)所示的化合物，优选式(III/A)所示的化合物在芳族溶剂中，优选甲苯或二甲苯，最优选甲苯，与式(VIII)所示的化合物反应，
[0055]
[0056] 使得式(VIII)所示的化合物优选被二取代的碳二亚胺活化，优选被二环己基碳二亚胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺在有机碱，更优选在DIPEA(二异丙基乙基胺)、TEA(三乙胺)的存在下被活化，或在羟基苯并三唑的存在下被羰基-二咪唑活化，或被氰基乙醛酸乙酯-2-肟活化，或被丙烷膦酸酐(T3P)活化，最优选被丙烷膦酸酐(T3P)活化，然后在反应完成后，如有必要，将反应混合物用碱和/或饱和盐水溶液洗涤，然后将浓盐酸加入到芳族溶剂，优选甲苯溶液中，分离出奥扎尼莫德盐酸盐沉淀，并任选地纯化。
[0057] 通式(III)所示的化合物，优选式(III/A)所示的化合物和式(VIII)所示的化合物，碱和活化剂在20-30℃，优选20-25℃的温度下混合，然后将反应混合物的温度优选升高至60℃至溶剂的沸点之间，优选升高至65-100℃之间，最优选升高至80-85℃之间并保持在该温度下直到反应完成为止，然后冷却反应混合物，之后如有需要，使用碱的水溶液，优选使用碳酸氢钠或碳酸氢钾溶液，之后如有需要，使用饱和
氯化钠溶液进行洗涤，然后将有机相与浓盐酸溶液(37％)在60℃至溶剂沸点的优选温度之间，优选在65-85℃之间，最优选在70-75℃之间进行反应，之后冷却反应混合物，滤出沉淀的晶体，干燥并任选地转化为碱。在本发明的优选实施方案中，奥扎尼莫德以盐酸盐的形式沉淀，并转化成结晶的奥扎尼莫德碱。
[0058] 如果需要的话，转变成碱和碱的重结晶可显着提高活性物质的纯度。换句话说，将盐酸盐转化为碱是纯化活性物质的非常优选的方法。
[0059] 根据本发明的另一个实施方案，在从乙腈中重结晶后，获得了纯度高且稳定的奥扎尼莫德I型多晶型。
[0060] 在本发明方法中使用的通式(III)所示的化合物，其中式R表示用于临时保护羟基的可在酸性介质中移除的保护基，优选取代的甲醚型基团，更优选甲氧基甲基、苄氧基甲基、对甲氧基苄氧基甲基或((3,4-二甲氧基苄基)氧基)甲基，四氢吡喃基，或取代的乙醚型基团，优选乙氧基乙基或1-(2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)乙基，硅基醚型基团，优选三甲基甲硅烷基，三异丙基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基或三苯基甲硅烷基，最优选叔丁基二甲基甲硅烷基，按此制备，
[0061]
[0062] 通式(II)所示的化合物在碱的存在下在有机溶剂中与盐酸羟胺反应，其中R的含义如前定义，最优选为叔丁基二甲基甲硅烷基。反应中使用了1-4个碳原子的醇，优选乙醇作为有机溶剂。叔胺，优选三乙胺或二异丙基乙胺用作有机碱。
[0063] 本发明方法中使用的式(II)所示的化合物通过以下方法制备得到，将式(VI)所示的化合物在有机溶剂中与碱反应
[0064]
[0065] 然后与式(VII)所示的化合物反应
[0066]
[0067] 其中R如上述定义，并且X代表Cl、Br或I。最优选使用(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷作为化合物(VII)。在式(II)所示的化合物与通式(VII)所示的化合物的反应中，优选使用酰胺类溶剂，更优选二甲基甲酰胺，醚类溶剂优选四氢呋喃、乙腈或上述溶剂的混合物，最优选二甲基甲酰胺。氢化钠、叔丁醇钾、碳酸铯或六甲基二硅氮烷，优选氢化钠用作式(II)和通式(VII)所示的化合物的反应的碱。
[0068] 根据本发明的非常优选的实施方案，通式(III)所示的衍生物也可以由式(VI)所示的化合物制备，从而不分离通式(II)所示的化合物。
[0069]
[0070] 在这种情况下，该方法优选涉及在制备通式(II)所示的化合物时，在反应完成之后，当式(VI)所示的化合物消耗完时，含有DMF和剩余烷基化剂的反应混合物用水和酯型溶剂的混合物，优选水和乙酸乙酯萃取，将
蒸发乙酸乙酯相得到的油不经进一步纯化就溶于醇型溶剂，所述醇型溶剂优选1-4个碳原子的醇，最优选乙醇，然后在碱的存在下与羟胺反应。使用水和
冰的混合物提取水。
[0071] 最优选的方法涉及将(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷用作烷基化剂。在烷基化过程中，将氢化钠用作碱。所得
[0072]
[0073] 式(II/A)所示的化合物溶于乙醇，并在三乙胺存在下与盐酸羟胺反应。
[0074] 因此，根据本发明方法的非常优选的实施方案的通式(IV)所示的化合物的混合物，其中R表示叔丁基二甲基甲氧基苯基基团作为临时保护羟基的可以在酸性介质中除去的保护基，并且式(V)所示的化合物在1至4个碳原子的醇中，优选在2-丙醇中，或在芳族溶剂，优选在甲苯中，与无机酸，优选盐酸进行反应，所获得的奥扎尼莫德任选地被转化为盐，优选为盐酸盐。
[0075] 本方法中所用的通式(IV)所示的化合物，其中R代表叔丁基二甲基甲硅烷基团，或式(V)所示化合物或其混合物，以使产物
[0076] a.)
[0077]
[0078] 式(VI)所示的化合物在有机二甲基甲酰胺中反应，使用以氢化钠作为碱，与[0079]
[0080] 式(VII)所示的化合物反应，其中式R代表用于临时保护羟基的可以在酸性介质中除去的保护基，优选取代的甲醚型基团，最优选为甲氧基甲基、苄氧基甲基、对甲氧基苄氧基甲基或[(3,4-二甲氧基苄基)氧基]甲基、四氢吡喃基、或取代的乙基型基团，优选乙氧基乙基、或1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]乙基、甲硅烷基醚型基团，优选三甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或三苯基甲硅烷基，最优选为叔丁基二甲基甲硅烷基团，且X代表Cl、Br或I。
[0081] b.)所得
[0082]
[0083] 式(II)所示的化合物，其中R代表用于临时保护羟基的可以在酸性介质中除去的保护基，优选取代的甲醚型基团，最优选甲氧基甲基、苄氧基甲基、对甲氧基苄氧基甲基、或[(3,4-二甲氧基苄基)氧基]甲基，四氢吡喃基、或取代的乙基型基团，优选乙氧基乙基、或1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]乙基、甲硅烷基醚型基团，优选三甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或三苯基甲硅烷基、最优选叔丁基二甲基甲硅烷基团，在碱，优选有机碱，最优选三乙胺的存在下，在有机溶剂中，优选在1-4个碳原子的醇中，最优选在乙醇中，与盐酸羟胺反应，然后
[0084] c.)所得
[0085]
[0086] 通式(III)的化合物在有机碱，优选二异丙基乙胺或二取代的碳二亚胺的三乙胺，例如二环己基碳二亚胺，1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺的存在下的有机溶剂中激活，或在羟基苯并三唑或氰基乙醛酸-2-肟的存在下用羰二咪唑激活，或用丙烷膦酸酐(T3P)激活，然后使活化的化合物与式(VIII)所示的3-氰基-4-(异丙氧基)苯甲酸反应。优选使用酰胺、芳族、醚、酯、腈或亚砜类溶剂作为有机溶剂，最优选使用二甲基甲酰胺作为酰胺类溶剂，最优选使用甲苯作为芳族溶剂，最优选使用四氢呋喃或二噁烷作为醚类溶剂，使用乙腈作为腈类溶剂，只用二甲基亚砜作为亚砜类溶剂，因此反应在0-100℃之间进行，优选在50-100℃之间进行，最优选在85-90℃之间进行，从而使得式(VIII)所示的3-氰基-4-(异丙氧基)苯甲酸在室温至100℃之间，优选在50-100℃之间，最优选在85-90℃之间，且最优选在乙酸乙酯或甲苯中与丙烷膦酸酐(T3P)在三乙胺的存在下激活。
[0087] 本发明的目的还涉及一种纯化式(I)所示的奥扎尼莫德盐，优选盐酸盐的方法，在这种方法中，式(I)所示的奥扎尼莫德作为碱从混合物或其酸加成的盐，优选盐酸盐中，并转化为碱，如果需要，将碱重结晶，然后将所得纯化的碱结晶，并且如果需要，转化为酸加成盐，优选通过使用盐酸将其转化为盐酸盐。优选使用卤代烃，优选二氯甲烷、芳族溶剂，最优选甲苯，或腈类溶剂，优选乙腈作为溶剂。
[0088] 通过使用乙腈，以一种特别优选的方式，沉淀出了奥扎尼莫德的新型结晶多晶型物。新型结晶多晶型物奥扎尼莫德碱晶型I的特征
X射线粉末衍射峰的位置如下[°2θ±0.2θ]:5.77；11.56；15.36；19.54；27.00，preferably[°2θ±0.2θ]:5.77；11.56；12.98；13.38；13.90；15.36；16.23；19.54；25.37；27.00，even more preferably[°2θ±0.2θ]:2.86；
5.77；8.66；10.77；10.87；11.14；11.56；12,20；12.98；13.38；13.90；14.59；15.36；16.23；
17.19；17.43；17.73；18.44；18.94；19.54；20.28；20.41；21.10；21.65；21.87；22.10；
22.43；22.79；23.36；23.75；23.95；24.62；25.37；26.16；27.00；27.90；28.86；29.20；
29.85；31.00；31.62；32.85；33.13；34.33.
[0089] 下表总结了特征性X射线粉末衍射峰：
[0090]
[0091]
[0092] 图3示出了根据本发明的I型多晶型物奥扎尼莫德碱的
X射线粉末衍射图。
[0093] 本发明的I型多晶型物奥扎尼莫德碱具有足够的足以长期保存，或作为药物制剂的原料的
稳定性。根据我们的测试，空气湿度不会影响晶体的稳定性，其多晶型性质不会改变，因而在产品被用作活性物质时，其多晶型性质、溶解和吸收条件，生物学疗效预计不会改变。
[0094] 根据本发明的I型多晶型奥扎尼莫德碱可以最优选地通过将奥扎尼莫德悬浮在乙腈中，然后通过加热获得的悬浮液使奥扎尼莫德碱溶解，任何固体污染物任选的被滤出，如果需要的话，使溶液沉降，然后冷却得到的溶液，并且优选通过重复加热将沉淀的晶体重新溶解，然后在再次冷却溶液之后，过滤沉淀的I型奥扎尼莫德多晶型物，并且任选用冷乙腈洗涤。
[0095] 使用Shimadzu LC-MS设备的快速色谱法进行本发明公开的反应的监测和中间产物的测试。将样品溶于水-乙腈比例为80:20的混合物中，并使用中性(在乙酸铵缓冲溶液中)和酸性(在甲酸溶液中)方法进行测试。
[0096] 下式总结了本发明的方法：
[0097]
[0098] 根据本发明的最通常的实现形式，在碱的存在下，将式(VI)所示的化合物转化为式(II)所示的化合物，其中R代表以上给出的基团。之后，使通式(II)所示的化合物与羟胺，优选盐酸羟胺在碱的存在下反应，然后将得到的通式(II)所示的化合物与通式(VIII)所示的化合物反应，在反应条件下形成的通式(IV)和(V)所示的化合物，或其混合物通过保护基裂解，转化成式(IA)所示的奥扎尼莫德盐酸盐。
[0099] 因此，本发明的目的总体上涉及式3中所示的方法及各个步骤，以及以下新颖的中间体：
[0100] -通式(IV)所示的化合物，其中R代表临时保护羟基的可以在酸性介质中除去的保护基，优选的R为取代的甲醚型化合物，例如甲氧基甲基、苄氧基甲基、对甲氧基苄氧基甲基、[(3，4-二甲氧基苄基)氧基]甲基，四氢吡喃基，或为取代的乙基型基团，例如乙氧基乙基和1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]乙基，或甲硅烷基醚型基团，例如三甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷或三苯基甲硅烷基，最优选叔丁基二甲基甲硅烷基团。-通式(II)所示的化合物，其中R代表临时保护羟基的可以在酸性介质中除去的保护基，优选取代的甲醚型基团，更优选甲氧基甲基、苄氧基甲基、对甲氧基苄氧基甲基、[(3，4-二甲氧基苄基)氧基]甲基，四氢吡喃基，或取代的乙基型基团，优选乙氧基乙基、1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]乙基，或甲硅烷基醚型基团，优选三甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或三苯基甲硅烷基，最优选叔丁基二甲基甲硅烷基团。
[0101] -式(V)所示的化合物
[0102]
[0103] -式(IIA)所示的化合物
[0104]
[0105] -通式(III)所示的化合物
[0106]
[0107] (III)，其中R优选地代表取代的甲醚型基团，更优选甲氧基甲基、苄氧基甲基、对甲氧基苄氧基甲基或((3,4-二甲氧基苄基)氧基)甲基，四氢吡喃基，或取代的乙基醚型基团，优选乙氧基乙基、1-(2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)乙基，硅基醚型基团，优选三甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或三苯基甲硅烷基，最优选叔丁基二甲基甲硅烷基。
[0108] -式(IIIA)所示化合物
[0109]
[0110] -式(IV)所示化合物
[0111]
[0112] 其中R优选地代表取代的甲醚型基团,更优选甲氧基甲基、苄氧基甲基、对甲氧基苄氧基甲基或((3,4-二甲氧基苄基)氧基)甲基，四氢吡喃基，或取代的乙基醚型基团、优选乙氧基乙基、1-(2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)乙基，甲硅烷基醚型基团,优选三甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或三苯基甲硅烷基，最优选叔丁基二甲基甲硅烷基。
[0113] -式(IVA)所示的化合物
[0114]
[0115] -式(V)所示的化合物
[0116]
[0117] 以及以任意比例混合的式(IV)和式(V)所示的化合物的混合物。
[0118] 本发明的优点
[0119] 根据本发明的合成途径明显更有效，并且从工业实施的角度来看，其相对于文献中用于生产奥扎尼莫德活性物质的方法更优选。在该方法中不需要用(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基代替叔丁氧羰基，从而使合成途径明显缩短。
[0120] 此外，通过使用根据本发明的方法，该方法的产率明显更高，并且
能量需求下降。
[0121] 本发明的另一个优点是，在随后的合成步骤中在席夫碱(B)还原的过程中形成的不期望的非对映异构体，形成的相应的非对映异构体污染物，其纯化和分析测试相对于根据文献的方法的已知对映异构体混合物，明显简单得多。
[0122] 该方法的另一个优点是，如果使用通式(III)的化合物制备式(I)和(IA)的化合物，优选使用式(III/A)的化合物和式(VIII)的化合物制备，那么令人惊奇的是，通过使用芳族溶剂，优选甲苯或二甲苯，最优选甲苯，可以在同一反应混合物中进行闭环和保护基的去除而无需改变溶剂，一方面降低了成本，另一方面降低了对环境的负担。
[0123] 本发明的另一个优点是根据本发明的碱，优选I型多晶型碱的应用，使得可以提取纯度适合用作药物的产物，而无需任何进一步的纯化步骤。
[0125] 图1和2：本方法使用的中间体和
试剂的分子式
[0126] 图3：I型碱形态的奥扎尼莫德的X射线粉末衍射图
[0127] 图4：I型碱形态的奥扎尼莫德在25℃下的吸水等温线
[0128] 图5：两个DVS循环后I型碱形态的奥扎尼莫德的X射线粉末衍射图(请参见示例6)。
[0129] 因此，下面的实例说明了本发明，但本发明的保护范围并不限于这些
实施例。
[0130] 实例
[0131] 使用的色谱纯化方法：使用Teledyne ISCO CombiFlash Rf色谱柱，在RediSep Rf柱中，使用己烷-乙酸乙酯洗脱液混合物，通过柱色谱法从混合物中提取各个组分，使用梯度：0-140min。己烷：乙酸乙酯为100：0-34：66；140-160min.34：66-0：100。
[0132] 使用四甲基硅烷(TMS)内标，CDCl3或DMSO-d6作为溶剂，使用Varian Gemini 200，Bruker Avance III和Inova 500
光谱仪记录1H NMR光谱。化学位移(δ)的单位为百万分之一(ppm)单位，耦合常数(J)的单位为赫兹(Hz)。
[0133] 采用与生产奥扎尼莫德中间体相似的方法，由非对映异构体污染物制成至少95％的纯标准品。使用Shimadzu LC-MS设备上进行快速色谱法，来监测反应以及测试中间体。将样品溶于水-乙腈比例为80:20的混合物中，并使用中性(在乙酸铵缓冲溶液中)和酸性(在甲酸溶液中)方法进行测试。
[0134] X射线粉末衍射测量如下：
[0135] X射线粉末衍射测定条件
[0136] 设备：PANalyical Empyrean X射线粉末衍射仪
[0137] 测量方向：传播方向
[0139] 类型：Empyrean长精细聚焦，高
分辨率管
[0142] 焦点：线状焦点
[0143] 源侧光学元件
[0144] 发散狭缝：固定狭缝1/2°
[0145] 镜：聚焦椭圆镜
[0146] Soller缝隙：0.04rad
[0148] 衍射侧光学元件
[0149] 扩散抑制剂狭缝：固定模式下的可编程狭缝：1/2°
[0150] Soller缝隙：0.04rad
[0151] 样品表
[0152] 类型：反射透射，带有可旋转的样品架
[0153] 样品转速：1转/秒
[0154] 直接光束捕捉器
[0155] (“光束刀”)：传播方向
[0156] 探测器
[0157] 型号：PIXcel 3D 1×1区域检测器
[0158] 操作模式：扫描线检测器(1D)操作模式
[0159] 主动探测器窗口
[0160] 尺寸：3.3473°
[0161] 样品制备：将样品放在两片聚酯
薄膜之间，不进行
粉碎[0162] 测量条件
[0163] 温度：室温
[0166] 扫描方式：连续(θ/θ)扫描
[0167] 测量范围：2.0000–34.9964°2θ
[0168] 梯距：0.0131°2θ
[0169] 梯长：109.650秒
[0170] 测量周期数：1
[0171] 测量时间：～20分钟
[0172] 动态蒸气吸附(DVS)
[0173]
[0174]
[0175] 实例1
[0176] (S)-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-N-((1S)-4-氰基-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2-甲基丙基-2-亚磺酰胺(IIA)
[0177]
[0178] 在500ml的多颈烧瓶于氩气环境称取氢化钠(4.85g；60％分散在油中；121.2mmol)，室温下加入30ml二甲基甲酰胺，然后冷却至0℃，之后逐滴加入30ml二甲基甲酰胺的(S)-N-((1S)-4-氰基-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2-甲基丙基-2-亚磺酰胺(VI(see WO
2011060392)7.96g；30.3mmol)溶液，逐滴加入。然后逐滴加入(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷((VIIA)，30.0g 97％；33.0ml；121.6mmol)。之后将
混合液升温至室温并搅拌。然后向混合液中加入饱和碳酸氢钠溶液。边搅拌边用水和乙酸乙酯稀释后分层，将有机层用水洗涤(2x150ml)，用
硫酸镁干燥，并
真空旋干。如此获得的油状物将直接用于下一步合成而无需纯化。
[0179] 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.58(1H，d，J＝7.6Hz)，7.54(1H，d，J＝7.6Hz)，7.32(1H，t，J＝7.6Hz)，5.15(1H，t，J＝7.6Hz)，3.58-3.72(2H，m)，3.18-3.26(1H，ddd，J＝12.3，9.3，3.9Hz)，3.08-3.16(1H，m)，3.05(1H，t，J＝8.4Hz)，2.92-3.02(1H，m)，2.47-2.57(1H，m)，
2.25-2.36(1H，m)，1.23(9H，s)，0.85(9H，s)，0.05(6H，s).
[0180] 实例2
[0181] (1S)-1-((2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)((S)-2-甲基丙基-2-亚磺酰基)氨基)-N-羟基-2,3-二氢-1H-茚-4-碳酰亚胺(IIIA)
[0182]
[0183] 在氩气环境下，于23℃在500ml单颈烧瓶中将乙醇(128ml)、三乙胺(12.5ml；9.1g；91.0mmol)和盐酸羟胺(6.32g；91.0mmol)加入到之前步骤中获得的(S)-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-N-((1S)-4-氰基-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(IIA)中，将混合液加热至50℃，然后在此温度下加热搅拌约6小时。将反应液旋干，并向残余物中加入水和二氯甲烷使分层，用200ml水洗涤有机层，之后用饱和氯化钠溶液洗涤并旋干。将旋干残余物用二异丙醚(60ml)洗涤，滤出结晶物质，用冷的二甲苯醚(10ml)洗涤，得到14.7g(产率为82％的(VI)(S)-N-[(1S)-4-氰基-2,3-二氢-1H-茚-1-基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)的白色晶体。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.43(1H，d，J＝7.6Hz)，7.41(1H，d，J＝7.6Hz)，7.27(1H，m)，5.11(1H，t，J＝7.6Hz)，4.82(2H，bs)，3.58-3.72(2H，m)，3.20-3.30(1H，ddd，J＝12.3，9.3，3.9Hz)，3.10-3.20(1H，m)，2.95-3.05(2H，m)，2.38-2.48(1H，m)，
2.14-2.26(1H，m)，1.25(9H，s)，0.86(9H，s)，0.01(6H，s).
[0184] 实例3
[0185] (S)-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-N-((1S)-4-(5-(3-氰基-4-(2-丙基氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(IVA)和((S)-N-((1S)-4-(5-(3-氰基-4-(2-丙基氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)-2，3-二氢-1H-茚-1-基)-N-(2-羟乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(V)的混合物的生产
[0186]
[0187] 将(S)-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-N-((1S)-4-(5-(3-氰基-4-((2-丙氧基)苯基)-1，2，4-噁二唑-3-基)-2，3-二氢-1H-茚-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺((IIIA)；12.25g；27.0mmol)在25℃的氩气环境中，加入到500ml的多颈装置中，同时在搅拌下将其溶于甲苯(220ml)，然后加入3-氰基-4-(2-丙基氧基)苯甲酸((VIII)；8.31g；40.5mmol)和三乙胺(13.65g；18.7ml；135mmol)，逐滴添加T3P(17.16g50％溶液；16.0ml；
27.0mmol)。将以此方式获得的反应混合物在85-90℃下搅拌，然后冷却至室温，然后加入水并分离各相。有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，干燥，然后真空蒸发。以此方式获得的混合物，其包含的形成的(S)-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-N-((1S)-4-(5-(3-氰基-4-(丙烷-2-基氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(IVA)和由其形成的(S)-N-((1S)-4-(5-(3-氰基-4-(丙-2-基氧基)苯基)-
1,2,4-噁二唑-3-基)-2，3-二氢-1H-茚-1-基)-N-(2-羟乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(V)，无需纯化即可用于下一合成步骤。
[0188] 使用说明部分中公开的酸性方法，在Shimadzu LC-MS设备中，IVA化合物的保留时间为RT：6.31min，而V化合物的保留时间为RT：4.24min。
[0189] 根据说明部分中给出的方法，使用柱色谱分离法鉴定混合物的成分，(IVA)化合物的保留时间：56分钟。
[0190] (IVA)(通过色谱法纯化的样品)：1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.44(1H，d，J＝2.1Hz)，8.35(1H，dd，J＝8.9，2.2Hz)，8.11(1H d，J＝7.6Hz)，7.53(1H，d，J＝7.6Hz)，7.39(1H，t，J＝7.6Hz)，7.17(1H，d，J＝8.9Hz)，5.18(1H，t，J＝7.6Hz)，4.80(1H，quint，J＝6.0Hz)，
3.58-3.72(2H，m)，3.20-3.30(1H，ddd，J＝12.3，9.3，3.9Hz)，3.10-3.20(1H，m)，2.95-3.05(2H，m)，2.50-2.60(1H，m)，2.25-2.38(1H，m)，1.48(6H，d，J＝6.0Hz)，1.25(9H，s)，0.86(9H，s)，0.01(6H，s).
[0191] (V)(用色谱法纯化的样品)：按照说明部分给出的方法，V化合物的保留时间：145分钟。
[0192] 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.43(1H，d，J＝1.8Hz)，8.33(1H，dd，J＝8.8，1.9Hz)，8.13(1H d，J＝7.5Hz)，7.58(1H，d，J＝7.1Hz)，7.42(1H，t，J＝7.5Hz)，7.13(1H，d，J＝8.8Hz)，5.11(1H，t，J＝7.6Hz)，4.80(1H，quint，J＝6.0Hz)，3.46-3.50(5H，m)，3.25-3.29(2H，m)，
2.55-2.59(1H，m)，2.35-2.38(1H，m)，1.53(1H，s)；1.48(5H，d，J＝6.0Hz)，1.26(9H，s).[0193] 实例4
[0194] 5-(3-((1S)-1-((2-羟乙基)氨基)-2,3-二氢-1H-茚-4-基)-1,2,4-噁二唑-5-基)-2-(2-丙基氧基)苄腈盐酸盐(奥扎尼莫德盐酸盐，化合物(I)的盐酸盐)
[0195]
[0196] a)方法
[0197] 将根据实例3获得的混合物(11.2g)与2-丙醇(80ml)一起搅拌直至获得均匀的溶液，然后在室温下将逐滴加入2-丙醇氯化氢溶液(20.25ml；6.35mmol/ml；128.6mmol)，在50℃下搅拌混合物，然后冷却，然后在0-5℃下再次搅拌2小时。滤出沉淀的晶体，用2-丙醇洗涤，从而得到6.2g(IIIA(S)-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-N-((1S)-4-(5-(3-氰基-4-(2-丙基氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的产率为52％)奥扎尼莫德盐酸盐。相对于原料1-氧代-2,3-二氢-1H-茚-4-乙腈(A)，在不提取中间产物(B)、(IIA)、(IVA)和(V)的合成粗产率为26.6％。
[0198] 1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.19(2H，bs)，8.53(1H，d，J＝2,3Hz)，8.41(1H，dd，J＝9.9，2.3Hz)，8.16(1H，d，J＝7.2Hz)，7.95(1H，d，J＝7.5Hz)，7,58(2H，m)，5.28(1H，t，J＝
5.0Hz)，4.99(1H，quint，J＝6.0Hz)，4.90(1H，m)，3.71(2H，q，J＝5.0Hz)，3.47(1H，m)，3.35(2H，m)，3.05(1H，m)，3.00(1H，m)，2.32(1H，m)，1.39(6H，d，J＝6.0Hz).
[0199] b)方法
[0200] 将(S)-N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-N-[(1S)-4-(5-(3-氰基-4-(2-丙基氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(IVA；220mg；0.353mmol)与2-丙醇(1.5ml)搅拌直至获得均匀溶液，然后在室温下逐滴加入浓盐酸溶液(37％；0.1ml)，然后将反应混合物在50℃下搅拌并冷却，并在0-5℃下再次搅拌2小时。滤出沉淀的晶体，用2-丙醇洗涤，从而产生120mg(77％)奥扎尼莫德盐酸盐。
[0201] c)方法
[0202] 将(S)-N-((1S)-4-(5-(3-氰基-4-(丙-2-基氧基)苯基)-1,2,4-噁二唑-3-基)-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-N-(2-羟乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(V；114mg；0.224mmol)与2-丙醇(1.0ml)搅拌直至得到均匀溶液，然后于室温加入浓盐酸(37％；0.05ml)，然后在室温下搅拌反应混合物，冷却后再在0-5℃下搅拌2小时。滤出沉淀的晶体，用2-丙醇洗涤，从而得到89mg(90％)的奥扎尼莫德盐酸盐。
[0203] 实例5
[0204] 奥扎尼莫德盐酸盐(一锅法)的生产：
[0205]
[0206] 1.反应：
[0207] 耦合和粗盐酸盐的生产：
[0208] 在25℃的氩气环境下，称取13.75g(30.3mmol)的式(III/A)化合物加入到配备有进气口、冷却器、鼓泡器、滴液漏斗和
温度计的500ml多颈烧瓶中的80ml纯甲苯中，将6.22g(30.3mmol)的式(VIII)所示化合物和21.0ml(15.33g；151.5mmol)的Et3N边搅拌边加入至得到的悬浮液中，并逐滴加入将9.0ml(15.15mmol)的50％T3P。将获得的溶液加热至90℃，然后在该温度下搅拌直至式(III/A)所示的化合物，式(IV/A)所示的化合物的前体和式(V)所示的化合物的前体可以用LC-MS在反应混合物中检测到。
[0209] 将反应混合物冷却至室温。然后分离各相，有机相用2×70ml饱和NaCl溶液洗涤。将甲苯相加热至85℃，并在剧烈搅拌下逐滴加入10.0ml(4当量，121.2mmol)37％的盐酸水溶液。升温至90℃，并且在短时间内晶体开始沉淀。在此温度下继续搅拌，直到式(IV/A)所示的化合物(M+H：623)、式(V)所示的化合物(M+H：509)和O-甲硅烷基奥扎尼莫德衍生物(M+H：519)可以通过LC-MS进行检测到。此后搅拌并将反应混合物冷却至室温，然后冷却至0-5℃继续搅拌1小时。
[0210] 过滤出结晶产物，并用3×10ml冷甲苯洗涤。从而产生8.5克(63.6％)奥扎尼莫德盐酸盐。
[0211] 实例6:
[0212] I型多晶型奥扎尼莫德碱的生产：将3.60g奥扎尼莫德盐酸盐原料悬浮在58ml二氯甲烷和35ml水的混合物中，同时滴加9ml的2M NaHCO3溶液。分离各相，并将有机相蒸发直至干燥。将以此方式获得的1.85g奥扎尼莫德碱原料悬浮在36ml乙腈中。将混合物保持在沸点直至获得均匀溶液。将该溶液与0.2g
活性炭一同煮沸5分钟之后过滤。将从滤液中沉淀出的晶体
块加热回溶剂的沸点，然后将以此方式获得的溶液冷却至室温。然后将其保持在0-5℃之间，将混合物再搅拌1小时。然后过滤混合物，并用2×3ml冷乙腈洗涤晶体。以此方式获得1.51g I型多晶型物结晶产物，其X射线粉末衍射线总结在下表中：
[0213]
[0214] 其特征X射线粉末衍射图对应于图3。
[0215] 实例7
[0216] 根据实施例6的多晶型I型奥扎尼莫德碱的动态
蒸汽吸附(DVS)测量
[0217] 多晶型I型奥扎尼莫德碱具有轻微吸湿性。在95％
相对湿度下，样品
质量增加了0.6％。第一个循环的吸附等温线如图4所示。重复该循环后，吸附等温线没有变化。更重要的是，在两个循环之后，
晶体结构的不变性质由图5所示的x射线功率衍射图得证，该图与图
3所示的初始晶体的衍射图相同。可以看出，多晶型I型奥扎尼莫德碱在25℃下稳定，并且对湿度不敏感。
