技术领域
[0001] 本
发明涉及人工唾液制备技术领域，尤其涉及一种用于口含烟研究的人工唾液及其制备方法与应用。
背景技术
[0002] 在国内，袋装口含烟作为一种新型
烟草制品，受到越来越多的关注，其使用形式特殊，在使用时将口含烟放置在上
牙龈和上嘴唇之间，通过唾液的溶解，使得口含烟中含有的成分释放到
口腔中，被人体吸收。在研究口含烟的口感等
质量时，均需要使用唾液。但是，由于真实唾液的大量收集与保存极为不便，所以在进行上述研究时均采用人工唾液代替真实唾液；现有的人工唾液大多为ISO标准的无机盐型人工唾液。但是，在利用ISO标准的无机盐型人工唾液对口含烟进行研究时，测得的口含烟烟
碱含量高于真实唾液的测量值，结果不准确，进而影响对口含烟的质量评估。
发明内容
[0003] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种用于口含烟研究的人工唾液及其制备方法与应用。本发明提供的人工唾液对口含烟中的烟碱含量测量准确，与真实唾液结果类似；同时，本发明提供的人工唾液稳定定好、具有一定的黏度；且原料成分种类少、成本低。
[0004] 为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
[0005] 本发明提供了一种用于口含烟研究的人工唾液，所述人工唾液由包括以下质量浓度组分的
水溶液制备得到：NaCl 0.392～0.408g/L，KCl 0.392～0.408g/L，CaCl2·2H2O 0.7791～0.8109g/L，NaH2PO4·2H2O 0.7644～0.7956g/L，Na2S·2H2O 0.0049～0.0051g/L，尿素0.98～1.02g/L，羧甲基
纤维素2.94～3.06g/L，所述人工唾液的pH值为7.0。
[0006] 优选地，所述人工唾液由包括以下质量浓度组分的水溶液制备得到：NaCl 0.394～0.406g/L，KCl 0.394～0.406g/L，CaCl2·2H2O 0.7800～0.8100g/L，NaH2PO4·2H2O 0.7650～0.7950g/L，Na2S·2H2O 0.00495～0.00505g/L，尿素0.985～1.015g/L，羧甲基
纤维素2.96～3.04g/L。
[0007] 优选地，所述人工唾液由包括以下质量浓度组分的水溶液制备得到：NaCl 0.398～0.402g/L，KCl 0.398～0.402g/L，CaCl2·2H2O 0.7900～0.8000g/L，NaH2PO4·2H2O 0.7700～0.7900g/L，Na2S·2H2O 0.0050g/L，尿素0.99～1.01g/L，
羧甲基纤维素2.98～
3.02g/L。
[0008] 优选地，所述人工唾液中水溶液所用水为去离子水。
[0009] 优选地，所述NaCl、KCl、CaCl2·2H2O、NaH2PO4·2H2O、Na2S·2H2O、尿素和羧甲基纤维素的纯度均为分析纯。
[0010] 本发明还提供了上述技术方案所述人工唾液的制备方法，包括以下步骤：
[0011] (1)称取NaCl、KCl、CaCl2·2H2O、NaH2PO4·2H2O、Na2S·2H2O、尿素、羧甲基纤维素和水混合，并加入浓
盐酸，得到预人工唾液；
[0012] (2)采用氢
氧化钠调节所述预人工唾液的pH值为7.0，得到人工唾液。
[0013] 本发明还提供了上述技术方案所述人工唾液在研究口含烟领域中的应用。
[0014] 本发明提供了一种用于口含烟研究的人工唾液，所述人工唾液由包括以下质量浓度组分的水溶液制备得到：NaCl 0.392～0.408g/L，KCl 0.392～0.408g/L，CaCl2·2H2O 0.7791～0.8109g/L，NaH2PO4·2H2O 0.7644～0.7956g/L，Na2S·2H2O 0.0049～0.0051g/L，尿素0.98～1.02g/L，羧甲基纤维素2.94～3.06g/L，所述人工唾液的pH值为7.0。本发明提供的人工唾液对口含烟烟碱的检测结果准确，与真实唾液结果最类似，能够用于口含烟的质量评估；同时，该人工唾液
稳定性好，且具有一定的黏度，配方成分种类较少，且均为常见化合物，成本较低。
实施例的数据表明：烟碱在真实唾液中的溶出量与本发明配制的人工唾液无显著性差异；且口含烟烟碱在本发明的人工唾液中的释放规律与真实唾液最为接近。
附图说明
[0015] 图1为不同种类人工唾液中口含烟烟碱释放规律图。
具体实施方式
[0016] 本发明提供了一种用于口含烟研究的人工唾液，所述人工唾液由包括以下质量浓度组分的水溶液制备得到：NaCl 0.392～0.408g/L，KCl 0.392～0.408g/L，CaCl2·2H2O 0.7791～0.8109g/L，NaH2PO4·2H2O 0.7644～0.7956g/L，Na2S·2H2O 0.0049～0.0051g/L，尿素0.98～1.02g/L，羧甲基纤维素2.94～3.06g/L，所述人工唾液的pH值为7.0。
[0017] 本发明提供的人工唾液的原料水溶液中包括质量浓度为0.392～0.408g/L的NaCl，优选为0.394～0.406g/L，进一步优选为0.398～0.402g/L，更优选为0.400g/L。在本发明中，所述NaCl的纯度优选为分析纯。本发明对所述NaCl的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售的分析纯产品即可。
[0018] 本发明提供的人工唾液的原料水溶液中包括质量浓度为0.392～0.408g/L的KCl，优选为0.394～0.406g/L，进一步优选为0.398～0.402g/L，更优选为0.400g/L。在本发明中，所述KCl的纯度优选为分析纯。本发明对所述KCl的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售的分析纯产品即可。
[0019] 本发明提供的人工唾液的原料水溶液中包括质量浓度为0.7791～0.8109g/L的CaCl2·2H2O，优选为0.7800～0.8100g/L，进一步优选为0.7900～0.8000g/L，更优选为0.7960～0.7980g/L。在本发明中，所述CaCl2·2H2O的纯度优选为分析纯，本发明对所述CaCl2·2H2O的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售的分析纯产品即可。
[0020] 本发明提供的人工唾液的原料水溶液中包括质量浓度为0.7644～0.7956g/L的NaH2PO4·2H2O，优选为0.7650～0.7950g/L，进一步优选为0.7700～0.7900g/L，更优选为0.7800g/L。在本发明中，所述NaH2PO4·2H2O的纯度优选为分析纯，本发明对所述NaH2PO4·
2H2O的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售的分析纯产品即可。
[0021] 本发明提供的人工唾液的原料水溶液中包括质量浓度为0.0049～0.0051g/L的Na2S·2H2O，优选为0.00495～0.00505g/L，进一步优选为0.0050g/L。在本发明中，所述Na2S·2H2O的纯度优选为分析纯。本发明对所述Na2S·2H2O的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售的分析纯产品即可。
[0022] 本发明提供的人工唾液的原料水溶液中包括质量浓度为0.98～1.02g/L的尿素，优选为0.985～1.015g/L，进一步优选为0.99～1.01g/L，更优选为1.00g/L。在本发明中，所述尿素的纯度优选为分析纯。本发明对所述尿素的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售的分析纯产品即可。
[0023] 本发明提供的人工唾液的原料水溶液中包括质量浓度为2.94～3.06g/L的羧甲基纤维素，优选为2.96～3.04g/L，进一步优选为2.98～3.02g/L。在本发明中，所述羧甲基纤维素的纯度优选为分析纯。本发明对所述羧甲基纤维素的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的分析纯产品即可。
[0024] 本发明提供的人工唾液的原料水溶液中所用的水优选为去离子水。在本发明中，所述人工唾液的pH值为7.0。
[0025] 本发明提供的人工唾液能够准确测定口含烟中烟碱含量，与真实唾液结果最接近；且该人工唾液性能稳定，且具有一定的黏度；另外，人工唾液配方中原料种类少，且均为常见化合物，成本低廉。
[0026] 本发明还提供了上述技术方案所述人工唾液的制备方法，包括以下步骤：
[0027] (1)称取NaCl、KCl、CaCl2·2H2O、NaH2PO4·2H2O、Na2S·2H2O、尿素、羧甲基纤维素和水混合，并加入浓盐酸，得到预人工唾液；
[0028] (2)采用氢氧化钠调节所述预人工唾液的pH值为7.0，得到人工唾液。
[0029] 本发明称取NaCl、KCl、CaCl2·2H2O、NaH2PO4·2H2O、Na2S·2H2O、尿素、羧甲基纤维素和水混合，并加入浓盐酸，得到预人工唾液。
[0030] 本发明对所述NaCl、KCl、CaCl2·2H2O、NaH2PO4·2H2O、Na2S·2H2O、尿素、羧甲基纤维素和水的加入顺序没有特殊的限定，采用任意加入顺序即可。本发明对上述物质的混合方式没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的混合方式即可，具体的如搅拌。
[0031] 在本发明中，由于所述NaCl、KCl、CaCl2·2H2O、NaH2PO4·2H2O、Na2S·2H2O、尿素、羧甲基纤维素和水混合时，容易出现沉淀，所以需要加入几滴浓盐酸，以消除沉淀。
[0032] 得到预人工唾液后，本发明采用氢氧化钠调节所述预人工唾液的pH值为7.0，得到人工唾液。在本发明中，所述氢氧化钠优选质量浓度为20％的氢氧化钠水溶液。
[0033] 在本发明中，由于NaCl、KCl、CaCl2·2H2O、NaH2PO4·2H2O、Na2S·2H2O、尿素、羧甲基纤维素和水直接混合可能会出现沉淀，所以需要加入几滴浓盐酸来消除沉淀，得到预人工唾液，进行保存，备用；当需要使用人工唾液时优选现用现配，用质量浓度为20％的氢氧化钠调节预人工唾液的pH值为7.0，得到人工唾液。
[0034] 本发明还提供了上述技术方案所述人工唾液在研究口含烟领域中的应用。在本发明中，所述应用的方法优选包括将口含烟溶于所述人工唾液，通过测定所述人工唾中口含烟物质的溶出率，进而达到研究口含烟的目的。
[0035] 本发明的人工唾液对口含烟中的成分能够快速、准确的测定，所以能够用于口含烟成分含量的检测，结果与真实唾液的结果类似。
[0036] 下面结合实施例对本发明提供的用于口含烟研究的人工唾液及其制备方法及其应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
[0037] 实施例1
[0038] 一种用于口含烟研究的人工唾液，所述人工唾液由包括以下质量浓度组分的水溶液制备得到：NaCl 0.4g/L，KCl 0.4g/L，CaCl2·2H2O 0.795g/L，NaH2PO4·2H2O 0.78g/L，Na2S·2H2O 0.005g/L，尿素1g/L，羧甲纤维素3g/L；所述水溶液所用水为去离子水，所述人工唾液的pH值为7.0；命名为含羧甲基纤维素的人工唾液。
[0039] 对比例1
[0040] 配制ISO/TR10271无机盐型人工唾液：NaCl 0.4g/L，KCl 0.4g/L，CaCl2·2H2O 0.795g/L，NaH2PO4·2H2O 0.78g/L，Na2S·2H2O 0.005g/L，Urea 1g/L。
[0041] 对比例2
[0042] 配制含酶人工唾液：NaCl 0.4g/L，KCl 0.4g/L，NaH2PO4·H2O 0.69g/L，Na2S·9H2O 0.005g/L，CaCl2·2H2O 0.795g/L，KSCN 0.3g/L，Urea 1.0g/L，
淀粉酶59mg/L。
[0043] 对比例3
[0044] 收集5名志愿的唾液，储存于4℃
冰箱内。
[0045] 将市售金鹿牌口含烟(红茶口味)0.35g分别置于6mL含羧甲基纤维素的人工唾液、ISO/TR10271无机盐型人工唾液、含酶人工唾液和真实唾液中，37℃，静置30min，测定上述四种唾液中烟碱的溶出量，以及残渣中烟碱的剩余量；根据公式(1)计算出烟碱的溶出率，结果如表1所示。
[0046]
[0047] 表1烟碱在不同类型唾液中的溶出率
[0048]
[0049] 注：大写字母A代表0.01显著水平下的显著性，小写字母a、b代表0.05显著水平下的显著性；A、a和b是通过统计学
软件SAS计算后得到。
[0050] 从表1可以看出：烟碱在真实唾液中的溶出量只与含羧甲基纤维素的人工唾液无显著性差异。因此，相比之下含羧甲基纤维素的人工唾液更能代替真实唾液。虽然无机盐型人工唾液和含酶人工唾液与含羧甲基纤维素的人工唾液没有显著性差异，但二者均与真实唾液有显著性差异，且含酶人工唾液成本较高，且不易保存。因此，羧甲基纤维素的人工唾液更具优势。
[0051] 对比例4
[0052] 在ISO/TR10271无机盐型人工唾液的
基础上，添加不同量的羧甲基纤维素和淀粉酶，并设置不同的pH，配制编号1～9号人工唾液；具体人工唾液的成分含量及pH如表2所示。
[0053] 表2编号1～9人工唾液的成分含量及pH情况
[0054]
[0055] 借助模拟口腔装置，将上述编号为1～9的人工唾液分别注入金鹿牌红茶味口含烟，收集不同时间段的溶出液，研究随着时间的变化，溶出液中烟碱的含量变化，以研究口含烟中烟碱的释放规律；并以真实唾液为参考，结果图1所示。从图1可以看出：口含烟烟碱在不同配方的人工唾液中的释放规律趋势大致相同，但与真实唾液(曲线10)最接近的为本发明所涉及的人工唾液(曲线8)。
[0056] 本发明提供的人工唾液对口含烟烟碱的检测结果准确，与真实唾液结果最类似，能够用于口含烟的质量评估；同时，该人工唾液稳定性好，且具有一定的黏度，配方成分种类较少，且均为常见化合物，成本较低。实施例的数据表明：烟碱在真实唾液中的溶出量与本发明配制的人工唾液无显著性差异；且口含烟烟碱在本发明的人工唾液中的释放规律与真实唾液最为接近。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
