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一种医用脑脊液质控品的制备方法

阅读:626发布:2024-02-24

专利汇可以提供一种医用脑脊液质控品的制备方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种医用 脑脊液 质控品的制备方法,包括以下步骤:(1)自配脑脊液:将 氯化钠 、氯化 钾 、氯化 钙 等与市售0.01mol/L、PH 7.2‑7.4的PBS 磷酸 盐 缓冲液以蒸馏 水 2000ml复溶,充分混匀,然后高压灭菌后得到自配脑脊液;(2)白细胞悬液配制;(3)配制细胞阳性质控品。本发明利用氯化钠、 氯化钾 、 氯化钙 脑等常规 试剂 自配脑脊液,取材方便,制备过程简单,成本较低,而且所制得的脑脊液质控品与人体的脑脊液渗透压、离子浓度以及PH值近似,可应用于临床检验常规工作和教学。,下面是一种医用脑脊液质控品的制备方法专利的具体信息内容。

1.一种医用脑脊液质控品的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)自配脑脊液:按质量份计算,将氯化钠6.0~6.5g、氯化0.2~0.3g、氯化0.2~
0.4g、氯化镁0.3~0.5g、酸氢钠1.5~2.0g、葡萄糖0.2~0.8g、磷酸氢二钠0.2~0.5g以及用市售0.01mol/L、PH 7.2-7.4的PBS磷酸盐缓冲液以蒸馏2000ml复溶,充分混匀,然后用20~75μm筛网过滤,将滤液高压灭菌后得到自配脑脊液,最后通入5%的CO2和95%空气平衡,备用;
(2)配制白细胞悬液:取健康人EDTA-K2抗凝血2~3ml,加入4~6%右旋糖酐1~2ml,混匀,静置30~50分钟,待红细胞下沉后吸取含大量白细胞的上液于另一试管中,向试管内加入1~3%盐酸(溶解红细胞)混匀后离心,弃上液,将试管底部的白细胞用生理盐水洗涤2~
3次,制成白细胞悬液;
(3)配制细胞阳性质控品:向步骤(1)所述的自配脑脊液中加入健康人混合血清,然后在56℃的温度下加热30分钟灭活,血清终浓度调整为5~20%,取3~5ml的血清以及步骤(2)提取的白细胞悬液2ml充分混匀后得到脑脊液质控品,然后用DMEM培养基保存细胞形态,置于4℃箱保存。
2.根据权利要求1所述的医用脑脊液质控品的制备方法,其特征在于:向步骤(1)所述的自配脑脊液中加入浓度为20%的人血蛋白2~5ml以及浓度为20%的葡萄糖液2~5ml,充分混匀后得到脑脊液质控品,然后置于4℃冰箱保存。
3.根据权利要求1所述的医用脑脊液质控品的制备方法,其特征在于:所述的DMEM培养基是由低糖DMEM干粉13.4g、碳酸氢钠3.7g、L-谷酰胺0.2g以及超纯水1000ml混匀而成。

说明书全文

一种医用脑脊液质控品的制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种医用脑脊液质控品的制备方法,属于医药技术领域。

背景技术

[0002] 中枢神经系统内无淋巴液,而代之为脑脊液,脑脊液是充满脑室系统、蛛网膜下隙和脊髓中央管内的无色透明液体,其内含多种浓度不等的无机离子、葡萄糖、微量蛋白和少量淋巴细胞,PH为7.4,对中枢神经系统起缓冲、保护、运输代谢产物和调节颅内压等作用。脑脊液总量在成人平均约150ml。
[0003] 临床检验中脑脊液生化检验和常规检验是用于诊疗中枢神经系统、脑膜疾病的重要指标,是指导临床用药的重要依据。脑脊液化学成分的改变不仅能直接影响中枢神经系统的功能,也反映其功能状态和病变情况。脑脊液生物化学检验包括蛋白质、葡萄糖、氯化物、乳酸等,脑脊液常规检验包括潘氏试验、细胞总数、细胞分类等,在临床检验工作中由于没有合适的质控品,往往实验室管理人员难以监测检验质量。市售的质控品多为国外生产,不仅很难购买且价格昂贵,保质期短,不适用于常规使用。因此,根据临床检验需求,有必要研制一种价格便宜、方便实惠的脑脊液质控品,以解决常规检验的质量控制问题。

发明内容

[0004] 针对现有技术存在的上述技术问题,本发明提供一种制作简单易行、成本低、易于保存的医用脑脊液质控品的制备方法,该脑脊液质控品与人体的脑脊液渗透压、离子浓度以及PH值近似,可应用于临床检验常规工作和教学。
[0005] 本发明的技术方案:一种医用脑脊液质控品的制备方法,包括以下步骤:
[0006] (1)自配脑脊液:按质量份计算,将氯化钠6.0~6.5g、氯化0.2~0.3g、氯化0.2~0.4g、氯化镁0.3~0.5g、酸氢钠1.5~2.0g、葡萄糖0.2~0.8g、磷酸氢二钠0.2~
0.5g以及用市售0.01mol/L、PH 7.2-7.4的PBS磷酸盐缓冲液以蒸馏2000ml复溶,充分混匀,然后用20~75μm筛网过滤,将滤液高压灭菌后得到自配脑脊液,最后通入5%的CO2和
95%空气平衡,备用;
[0007] (2)配制白细胞悬液:取健康人EDTA-K2抗凝血2~3ml,加入4~6%右旋糖酐1~2ml,混匀,静置30~50分钟,待红细胞下沉后吸取含大量白细胞的上液于另一试管中,向试管内加入1~3%盐酸(溶解红细胞)混匀后离心,弃上液,将试管底部的白细胞用生理盐水洗涤2~3次,制成白细胞悬液;
[0008] (3)配制细胞阳性质控品:向步骤(1)所述的自配脑脊液中加入健康人混合血清,然后在56℃的温度下加热30分钟灭活,血清终浓度调整为5~20%,取3~5ml的血清以及步骤(2)提取的白细胞悬液2ml充分混匀后得到脑脊液质控品,然后用DMEM培养基保存细胞形态,置于4℃箱保存。
[0009] 进一步,向步骤(1)所述的自配脑脊液中加入浓度为20%的人血蛋白2~5ml以及浓度为20%的葡萄糖液2~5ml,充分混匀后得到脑脊液质控品,然后置于4℃冰箱保存。
[0010] 进一步,所述的DMEM培养基是由低糖DMEM干粉13.4g、碳酸氢钠3.7g、L-谷酰胺0.2g以及超纯水1000ml混匀而成。
[0011] 由于采用上述技术方案,本发明的优点在于:本发明利用氯化钠、氯化钾氯化钙脑等常规试剂自配脑脊液,取材方便,制备过程简单,成本较低,而且所制得的脑脊液质控品与人体的脑脊液渗透压、离子浓度以及PH值近似,可应用于临床检验常规工作和教学。

具体实施方式

[0012] 为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明。
[0013] 实施例1
[0014] 本发明的一种医用脑脊液质控品的制备方法,包括以下步骤:
[0015] (1)自配脑脊液:按质量份计算,将氯化钠6.0g、氯化钾0.2g、氯化钙0.2g、氯化镁0.3g、碳酸氢钠1.5g、葡萄糖0.2g、磷酸氢二钠0.2g以及用市售0.01mol/L、PH 7.2-7.4的PBS磷酸盐缓冲液以蒸馏水2000ml复溶,充分混匀,然后用20μm筛网过滤,将滤液高压灭菌后得到自配脑脊液,最后通入5%的CO2和95%空气平衡,备用;
[0016] (2)配制白细胞悬液:取健康人EDTA-K2抗凝血2ml,加入4%右旋糖酐1ml,混匀,静置30分钟,待红细胞下沉后吸取含大量白细胞的上液于另一试管中,向试管内加入1%盐酸(溶解红细胞)混匀后离心,弃上液,将试管底部的白细胞用生理盐水洗涤2次,制成白细胞悬液;
[0017] (3)配制细胞阳性质控品:向步骤(1)所述的自配脑脊液中加入健康人混合血清,然后在56℃的温度下加热30分钟灭活,血清终浓度调整为5%,取3ml的血清以及步骤(2)提取的白细胞悬液2ml充分混匀后得到脑脊液质控品,然后用DMEM培养基保存细胞形态,置于4℃冰箱保存即可。所述的DMEM培养基是由低糖DMEM干粉13.4g、碳酸氢钠3.7g、L-谷氨酰胺
0.2g以及超纯水1000ml混匀而成。
[0018] 本发明利用氯化钠、氯化钾、氯化钙脑等常规试剂自配脑脊液,取材方便,制备过程简单,成本较低,而且所制得的脑脊液质控品与人体的脑脊液渗透压、离子浓度以及PH值近似,可应用于临床检验常规工作和教学。
[0019] 实施例2
[0020] 本发明的一种医用脑脊液质控品的制备方法,包括以下步骤:
[0021] (1)自配脑脊液:按质量份计算,将氯化钠6.0~6.5g、氯化钾0.2~0.3g、氯化钙0.2~0.4g、氯化镁0.3~0.5g、碳酸氢钠1.5~2.0g、葡萄糖0.2~0.8g、磷酸氢二钠0.2~
0.5g以及用市售0.01mol/L、PH 7.2-7.4的PBS磷酸盐缓冲液以蒸馏水2000ml复溶,充分混匀,然后用20~75μm筛网过滤,将滤液高压灭菌后得到自配脑脊液,最后通入5%的CO2和
95%空气平衡,备用;
[0022] (2)向步骤(1)所述的自配脑脊液中加入浓度为20%的人血蛋白2~5ml以及浓度为20%的葡萄糖液2~5ml,充分混匀后得到脑脊液质控品,然后置于4℃冰箱保存。
[0023] 本发明利用氯化钠、氯化钾、氯化钙脑等常规试剂自配脑脊液,取材方便,制备过程简单,成本较低,而且所制得的脑脊液质控品与人体的脑脊液渗透压、离子浓度以及PH值近似,可应用于临床检验常规工作和教学。
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