一种甘露聚糖酶及生产方法
专利汇可以提供一种甘露聚糖酶及生产方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种适应于 碱 性环境、热 稳定性 好的甘露聚糖酶生产方法，其特征是它包括菌种培养、摇瓶 发酵 、酶液制备步骤，所述菌种即枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis），实验室编号为PARK9639，保藏号：CGMCCNO：6226，所述甘露聚糖酶为碱性酶，不产 纤维 素酶，对结晶 纤维素 、 羧甲基纤维素 均没有活性，在pH5.5～10.0、 温度 40℃～60℃范围内甘露聚糖酶活性稳定；本发明酶活 力 高，标准甘露聚糖酶液≥4500u/ml，单位生产成本低，发酵周期短，工业化程度高，工艺过程简单易控；产品不含纤维素酶活性，适合在造纸行业应用，可降低造纸生产成本和环境污染，同时有助提高纸的产品品质。，下面是一种甘露聚糖酶及生产方法专利的具体信息内容。
1.一种甘露聚糖酶的生产方法，其特征是它包括菌种培养、摇瓶发酵、酶液制备步骤，所述菌种即枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），实验室编号为PARK9639，保藏号：CGMCC NO：6226，其生物学特性为：革兰氏染色阳性菌，产芽孢，菌体呈杆状，单个细胞 0.7～
0.8×2～3微米，周生鞭毛，能运动，以二分裂方式增殖；芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米椭圆位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大，在本发明所述培养基上菌落呈圆形，污白色、着色均匀，边缘整齐，无光泽，黏稠。
2.根据权利要求1所述的一种甘露聚糖酶的生产方法，其特征是所述的菌种培养为CGMCC NO：6226菌种在如下配制的斜面上生长良好，斜面培养基配方为：1000mL蒸馏水中，加入牛肉膏3g～8g，酵母膏3g～8g ，蛋白胨8g～12g，葡萄糖3g～5g ，氯化钠3g～
5g，调pH值6.9～7.1，0.1MPa灭菌28分钟～32分钟，制成试管斜面，接种该菌种，34℃～
36℃，培养20小时～24小时后，放入5℃冰箱中备用，或向菌斜面上注入已灭菌液体石蜡后保藏或以脱脂牛奶为载体冷冻干燥真空封口保藏。
3.根据权利要求1所述的一种甘露聚糖酶的生产方法，其特征是所述的摇瓶发酵为CGMCC NO：6226菌种在规定的培养条件下可产生高活力的甘露聚糖酶，这种培养条件是：
以质量计，培养基配方为：魔芋粉3﹪～4﹪、麦麸2﹪～4﹪、氮含量40％的玉米浆0.5﹪～1﹪、酵母膏0.5﹪～1﹪，磷酸氢二铵0.2﹪～0.3﹪、磷酸氢二钾0.02﹪～0.05﹪、蛋白胨0.1﹪～0.2﹪、硫酸镁0.02﹪～0.05﹪、碳酸钠0.20﹪～0.25﹪、水89.15﹪～93.46﹪，其中所述各组分之和为100﹪，灭菌前，调pH值为pH8.0～pH8.5，0.1MPa灭菌30分钟～35分钟，培养条件：32℃～37℃，摇床转速260 r/min ～280r/min，培养34小时～42小时。
4.根据权利要求1所述的一种甘露聚糖酶的生产方法，其特征是所述的酶液制备为由茄瓶斜面制得细胞液体种子到种子罐，再到产酶发酵罐，二级发酵，制备标准化酶液。
5.根据权利要求4所述的一种甘露聚糖酶的生产方法，其特征是种子培养基配方为：
以质量计，麦麸5﹪～6﹪、玉米粉1﹪～2﹪、氮含量40﹪的玉米浆1﹪～2﹪、氯化钠
0.4﹪～0.6﹪、碳酸钠1﹪～2﹪、硫酸铵0.3﹪～0.5﹪、水86.9﹪～91.3﹪，其中所述各组分之和为100﹪，灭菌前，调pH值为6.5～7.0，0.1MPa灭菌30分钟～35分钟；种子罐装料总体积不超过70﹪，培养条件为：温度33℃～38℃，搅拌转速180 r/min～220 r/min，通气量以v/v 计：0小时～4小时，1：0.25 ～0.27 ，4小时～6小时，1:0.33 ～0.36 ，6小时以后，1:0.50 ～0.55，罐压0.06 MPa～0.07MPa，培养周期为7小时～9小时。
6.根据权利要求4所述的一种甘露聚糖酶的生产方法，其特征是产酶发酵罐的培养基配方为：以质量计，魔芋粉3﹪～4﹪、麦麸2﹪～4﹪、氮含量40％的玉米浆0.5﹪～1﹪、酵母膏0.5﹪～1﹪，磷酸氢二铵0.2﹪～0.3﹪、磷酸氢二钾0.02﹪～0.05﹪、蛋白胨
0.1﹪～0.2﹪、硫酸镁0.02﹪～0.05﹪、碳酸钠0.20﹪～0.25﹪、水89.15﹪～93.46﹪，其中所述各组分之和为100﹪，灭菌前，调pH值为8.0～8.5，0.1MPa灭菌30分钟～35分钟，装料总体积不超过70﹪；培养条件：温度33℃～38℃，搅拌转速180 r/min～220 r/min，通气量以v/v 计：0小时～4小时，1：0.30 ～0.32 ，4小时～6小时，1:0.40～0.42，
6小时以后1:0.50～0.55，罐压0.06 MPa～0.07MPa，发酵周期为34小时～42小时。
7.根据权利要求4所述的一种甘露聚糖酶的生产方法，其特征是在制备标准化酶液中，将产酶发酵罐的发酵醪液经过板框过滤、硅藻土除菌，经防腐处理得到在15℃密封存放三个月条件下，酶活力保持率为95﹪以上的标准甘露聚糖酶液。
8.根据权利要求7所述的一种甘露聚糖酶的生产方法，其特征是发酵醪液经板框过滤后，在发酵滤液中加入十二水合磷酸氢二钠和二水合氯化钙取杂除菌，其用量分别为发酵滤液质量的2.8﹪～3.5﹪和1.0﹪～1.3﹪。
9.一种根据权利要求1所述方法生产的甘露聚糖酶，其特征是所述甘露聚糖酶为碱性酶，不产纤维素酶，对结晶纤维素、羧甲基纤维素均没有活性，在pH5.5～10.0、温度40℃～
60℃范围内甘露聚糖酶活性稳定，最适范围为pH6.0～8.0，温度为45℃～55℃。
一种甘露聚糖酶及生产方法
技术领域
背景技术
发明内容
0.3﹪、磷酸氢二钾0.02﹪～0.05﹪、蛋白胨0.1﹪～0.2﹪、硫酸镁0.02﹪～0.05﹪、碳酸钠0.20﹪～0.25﹪、水89.15﹪～93.46﹪，其中所述各组分之和为100﹪，灭菌前，调pH值为pH8.0～pH8.5，0.1MPa灭菌30分钟～35分钟，培养条件：32℃～37℃，摇床转速260 r/min ～280r/min，培养34小时～42小时。
0.1MPa灭菌30分钟～35分钟；种子罐装料总体积不超过70﹪，培养条件为：温度33℃～
38℃，搅拌转速180 r/min～220 r/min，通气量以v/v 计：0小时～4小时，1：0.25 ～0.27 ，4小时～6小时，1:0.33 ～0.36 ，6小时以后，1:0.50 ～0.55，罐压0.06 MPa～0.07MPa，培养周期为7小时～9小时。
33℃～38℃，搅拌转速180 r/min～220 r/min，通气量以v/v 计：0小时～4小时，1：0.30 ～0.32 ，4小时～6小时，1:0.40～0.42，6小时以后1:0.50～0.55，罐压0.06 MPa～
0.07MPa，发酵周期为34小时～42小时。
具体实施方式
10g，葡萄糖5g，氯化钠5g，用氢氧化钠调调pH值7.0，0.1MPa灭菌30分钟，制成试管斜面，接种该菌种，35℃，培养22小时后，放入5℃冰箱中备用。
0.1MPa灭菌30分钟～35分钟；种子罐装料总体积不超过70﹪，培养条件为：温度33℃～
38℃，搅拌转速180 r/min～220 r/min，通气量以v/v 计：0小时～4小时，1：0.25 ～0.27 ，4小时～6小时，1:0.33 ～0.36 ，6小时以后，1:0.50 ～0.55，罐压0.06 MPa～0.07MPa，培养周期为7小时～9小时。
33℃～38℃，搅拌转速180 r/min～220 r/min，通气量以v/v 计：0小时～4小时，1：0.30 ～0.32 ，4小时～6小时，1:0.40～0.42，6小时以后1:0.50～0.55，罐压0.06 MPa～
0.07MPa，发酵周期为34小时～42小时。
1: 0.55，罐压0.06 MPa，发酵周期为40小时。
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