技术领域
[0001] 本
发明属于
生物发酵技术领域,具体涉及一种大豆蛋白液发酵工艺。
背景技术
[0002] 蛋白液是生产
大豆油后得到的一种副产品,含有较高的
氨基酸、粗白、氮、磷、
钾,可以应用到
植物上,做为优质液体冲
施肥具有较高的利用价值。蛋白发酵液具有以下作用:(1)具有改良、修复
土壤的功能:发酵产生的氨基酸、
黄腐酸、
水溶有机质等小分子营养,恢复土著
微生物的活性和繁殖能
力,产生丰富的
有机酸,调理和缓冲土壤酸性、
碱性、盐渍化;
(2)具有促根的功能:发酵产生的多种生化物质、有机养分等,刺激次生根的发育;(3)具有调理植物生长功能:调节植物体内营养平衡,激发植物抗病、抗虫能力。
[0003] 但是现有的蛋白液发酵工艺比较复杂,产量较低,生产出来的蛋白发酵液
质量也不是很理想。
发明内容
[0004] 本发明实施方式的目的在于提供一种大豆蛋白液发酵工艺,其工艺简单,生产方便,生产效率高,生产出来的产品质量好。
[0005] 本发明的实施方式是这样实现的:
[0006] 本发明的实施方式提供了一种大豆蛋
白蛋白液发酵工艺,包括以下步骤:
[0007] S1:将
大麦芽、蛋白胨、琼脂、
柠檬酸钠、
磷酸二氢钾、
硫酸镁、
碳酸氢钠和水加入到配料罐中,加热至
沸腾,然后使用碱液调节PH值至5.8~6.2,得到初始液;
[0008] S2:将初始液转入到
糖化罐中,向糖化罐中加入9×105u~10×105u的糖化酶,加温至55℃~65℃保温3~5小时,得糖化液;
[0009] S3:将糖化液转入
流体加热器内,并加温至95℃~100℃保温0.5小时,然后在5~10秒内降温至35℃~45℃,得到育种培养基;
[0010] S4:将育种培养基分别加入到四个恒化器中,四个恒化器编号分别为第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器,然后将乳酸菌菌种接种到第一恒化器内发酵培养,将双岐杆菌菌种接种到第二恒化器内发酵培养,将枯草芽孢杆菌菌种接种到第三恒化器内发酵培养,将产朊假丝
酵母菌菌种接种到第四恒化器内发酵培养;
[0011] S5:分别对第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器中的活菌含量进行检测,当活菌含量为200~250亿/克时,停止恒化器内菌种的培养,分别得到乳酸菌液、双岐杆菌液、枯草芽孢杆菌液和产朊假丝酵母菌液;
[0012] S6:按质量百分比分别称取蛋白液85~86.5%、乳酸菌液2.5~3%、双岐杆菌液2.5%~3、枯草芽孢杆菌液2.5~3%、产朊假丝酵母菌液2.5~3%、中性蛋白酶0.5~1%、
纤维素酶0.5~1%和育种培养基2.5~3%,混合均匀,并置于发酵反应釜内进行厌
氧发酵,发酵
温度为37~40℃,发酵时间为30~45小时,从而制得蛋白发酵液。
[0013] 可选地,S1步骤中,大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、
硫酸镁、
碳酸氢钠和水的质量比为2~3:1.5~1.8:2~3:0.3~0.4:1~1.5:0.015~0.02:0.5~0.8:180~220。
[0014] 可选地,S1步骤中,使用氢氧化钾调节PH值至6,得到初始液。
[0015] 可选地,S4步骤中,乳酸菌菌种接种数量占育种培养基体积的3%~5%,双岐杆菌菌种接种数量占育种培养基体积的5%~7%,枯草芽孢杆菌菌种接种数量占育种培养基体积的5%~7%,产朊假丝酵母菌菌种接种数量占育种培养基体积的6%~8%。
[0016] 可选地,S4步骤中,第一恒化器和第二恒化器为密封发酵培养,第三恒化器和第四恒化器为好氧发酵培养,第三恒化器和第四恒化器的通氧量为1.7~1.9L/min。
[0017] 可选地,S4步骤中,第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器中的培养温度均为35℃~40℃,培养时间为65~75小时。
[0018] 可选地,S5步骤中,每隔5小时检测一次四个恒化器中的活菌含量。
[0019] 可选地,S6步骤中,各成分的质量百分比为蛋白液86.5%、乳酸菌液2.5%、双岐杆菌液2.5%、枯草芽孢杆菌液2.5%、产朊假丝酵母菌液2.5%、中性蛋白酶0.5%、
纤维素酶0.5%和育种培养基2.5%。
[0020] 可选地,S6步骤中,发酵反应釜内的发酵温度为37℃,发酵时间为30小时。
[0021] 可选地,S6步骤中,发酵反应釜内的发酵温度为40℃,发酵时间为45小时。
[0022] 本发明的有益效果为:
[0023] 本发明实施方式提供的大豆蛋白液发酵工艺,先使用大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水制成初始液,然后先初始液中加入糖化酶制得糖化液,然后将糖化液加
热处理得到育种培养基,再将育种培养基分别加入到四个恒化器中,并且分别向四个恒化器中接种四种菌种进行培养得到四种菌液,最后将蛋白液、四种菌液、中性蛋白酶、纤维素酶和育种培养基混合均匀,并置于发酵反应釜内进行厌氧发酵,从而制得蛋白发酵液。其工艺简单,制备方便,生产效率高,生产出来的产品质量好,生产成本也较低。
具体实施方式
[0024] 为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚,下面对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施方式是本发明一部分实施方式,而不是全部的实施方式。
[0026] 本发明实施例一提供了一种大豆蛋白液发酵工艺,包括以下步骤:
[0027] S1:将大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入到配料罐中,加热至沸腾,然后使用碱液调节PH值至6,得到初始液。
[0028] 需要说明的是,本步骤中,称取的大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水的重量分数分别为大麦芽2份、蛋白胨1.5份、琼脂2份、柠檬酸钠0.3份、磷酸二氢钾1份、硫酸镁0.015份、碳酸氢钠0.5份和水180份。
[0029] 本步骤中,调节PH值使用的碱液为氢氧化钾。
[0030] S2:将初始液转入到糖化罐中,向糖化罐中加入9×105u的糖化酶,加温至55℃保温5小时,得糖化液。
[0031] S3:将糖化液转入流体加热器内,并加温至95℃保温0.5小时,然后在5秒内降温至45℃,得到育种培养基。
[0032] S4:将育种培养基分别加入到四个恒化器中,四个恒化器编号分别为第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器,然后将乳酸菌菌种接种到第一恒化器内发酵培养,将双岐杆菌菌种接种到第二恒化器内发酵培养,将枯草芽孢杆菌菌种接种到第三恒化器内发酵培养,将产朊假丝酵母菌菌种接种到第四恒化器内发酵培养。
[0033] 需要说明的是,本步骤中,乳酸菌菌种接种数量占育种培养基体积的3%,双岐杆菌菌种接种数量占育种培养基体积的5%,枯草芽孢杆菌菌种接种数量占育种培养基体积的5%,产朊假丝酵母菌菌种接种数量占育种培养基体积的6%。
[0034] 本步骤中,第一恒化器和第二恒化器为密封发酵培养,第三恒化器和第四恒化器为好氧发酵培养,第三恒化器和第四恒化器的通氧量为1.7L/min。
[0035] 本步骤中,第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器中的培养温度均为35℃,培养时间为75小时。
[0036] S5:分别对第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器中的活菌含量进行检测,当活菌含量为200亿/克时,停止对恒化器内菌种的培养,分别得到乳酸菌液、双岐杆菌液、枯草芽孢杆菌液和产朊假丝酵母菌液。
[0037] 本步骤中,需要每隔5小时检测一次四个恒化器中的活菌含量,当活菌含量为200亿/克时,停止对恒化器内菌种的培养。
[0038] S6:按质量百分比分别称取酵母液86.5%、乳酸菌液2.5%、双岐杆菌液2.5%、枯草芽孢杆菌液2.5%、产朊假丝酵母菌液2.5%、中性蛋白酶0.5%、纤维素酶0.5%和育种培养基2.5%,混合均匀,并置于发酵反应釜内进行厌氧发酵,发酵温度为37℃,发酵时间为30小时,从而制得蛋白发酵液。
[0039] 需要说明的是,本步骤中,中性蛋白酶采用5万酶活力的中性蛋白酶,纤维素酶采用1万酶活力的纤维素酶。
[0040] 本实施例提供的大豆蛋白液发酵工艺,其工艺简单,制备方便,生产效率高,生产出来的产品质量好,生产成本也较低,适合规模生产。
[0041] 实施例2
[0042] 本发明实施例二提供了一种大豆蛋白液发酵工艺,包括以下步骤:
[0043] S1:将大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入到配料罐中,加热至沸腾,然后使用碱液调节PH值至5.8,得到初始液。
[0044] 需要说明的是,本步骤中,称取的大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水的重量分数分别为大麦芽3份、蛋白胨1.8份、琼脂3份、柠檬酸钠0.4份、磷酸二氢钾1.5份、硫酸镁0.02份、碳酸氢钠0.8份和水220份。
[0045] 本步骤中,调节PH值使用的碱液为氢氧化钾。
[0046] S2:将初始液转入到糖化罐中,向糖化罐中加入10×105u的糖化酶,加温至65℃保温3小时,得糖化液。
[0047] S3:将糖化液转入流体加热器内,并加温至100℃保温0.5小时,然后在10秒内降温至35℃,得到育种培养基。
[0048] S4:将育种培养基分别加入到四个恒化器中,四个恒化器编号分别为第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器,然后将乳酸菌菌种接种到第一恒化器内发酵培养,将双岐杆菌菌种接种到第二恒化器内发酵培养,将枯草芽孢杆菌菌种接种到第三恒化器内发酵培养,将产朊假丝酵母菌菌种接种到第四恒化器内发酵培养。
[0049] 需要说明的是,本步骤中,乳酸菌菌种接种数量占育种培养基体积的5%,双岐杆菌菌种接种数量占育种培养基体积的7%,枯草芽孢杆菌菌种接种数量占育种培养基体积的7%,产朊假丝酵母菌菌种接种数量占育种培养基体积的8%。
[0050] 本步骤中,第一恒化器和第二恒化器为密封发酵培养,第三恒化器和第四恒化器为好氧发酵培养,第三恒化器和第四恒化器的通氧量为1.9L/min。
[0051] 本步骤中,第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器中的培养温度均为40℃,培养时间为65小时。
[0052] S5:分别对第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器中的活菌含量进行检测,当活菌含量为250亿/克时,停止对恒化器内菌种的培养,分别得到乳酸菌液、双岐杆菌液、枯草芽孢杆菌液和产朊假丝酵母菌液。
[0053] 本步骤中,需要每隔5小时检测一次四个恒化器中的活菌含量,当活菌含量为250亿/克时,停止对恒化器内菌种的培养。
[0054] S6:按质量百分比分别称取蛋白液85%、乳酸菌液2.5%、双岐杆菌液2.5%、枯草芽孢杆菌液2.5%、产朊假丝酵母菌液2.5%、中性蛋白酶1%、纤维素酶1%和育种培养基3%,混合均匀,并置于发酵反应釜内进行厌氧发酵,发酵温度为40℃,发酵时间为45小时,从而制得蛋白发酵液。
[0055] 需要说明的是,本步骤中,中性蛋白酶采用5万酶活力的中性蛋白酶,纤维素酶采用1万酶活力的纤维素酶。
[0056] 本实施例提供的大豆蛋白液发酵工艺,其工艺简单,制备方便,生产效率高,生产出来的产品质量好,生产成本也较低,适合规模生产。
[0057] 实施例3
[0058] 本发明实施例三提供了一种大豆蛋白液发酵工艺,包括以下步骤:
[0059] S1:将大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水加入到配料罐中,加热至沸腾,然后使用碱液调节PH值至6.2,得到初始液。
[0060] 需要说明的是,本步骤中,称取的大麦芽、蛋白胨、琼脂、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸氢钠和水的重量分数分别为大麦芽2.5份、蛋白胨1.6份、琼脂2.5份、柠檬酸钠0.35份、磷酸二氢钾1.2份、硫酸镁0.018份、碳酸氢钠0.6份和水200份。
[0061] 本步骤中,调节PH值使用的碱液为氢氧化钾。
[0062] S2:将初始液转入到糖化罐中,向糖化罐中加入9.5×105u的糖化酶,加温至60℃保温4小时,得糖化液。
[0063] S3:将糖化液转入流体加热器内,并加温至98℃保温0.5小时,然后在8秒内降温至40℃,得到育种培养基。
[0064] S4:将育种培养基分别加入到四个恒化器中,四个恒化器编号分别为第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器,然后将乳酸菌菌种接种到第一恒化器内发酵培养,将双岐杆菌菌种接种到第二恒化器内发酵培养,将枯草芽孢杆菌菌种接种到第三恒化器内发酵培养,将产朊假丝酵母菌菌种接种到第四恒化器内发酵培养。
[0065] 需要说明的是,本步骤中,乳酸菌菌种接种数量占育种培养基体积的4%,双岐杆菌菌种接种数量占育种培养基体积的6%,枯草芽孢杆菌菌种接种数量占育种培养基体积的6%,产朊假丝酵母菌菌种接种数量占育种培养基体积的7%。
[0066] 本步骤中,第一恒化器和第二恒化器为密封发酵培养,第三恒化器和第四恒化器为好氧发酵培养,第三恒化器和第四恒化器的通氧量为1.8L/min。
[0067] 本步骤中,第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器中的培养温度均为38℃,培养时间为70小时。
[0068] S5:分别对第一恒化器、第二恒化器、第三恒化器和第四恒化器中的活菌含量进行检测,当活菌含量为230亿/克时,停止对恒化器内菌种的培养,分别得到乳酸菌液、双岐杆菌液、枯草芽孢杆菌液和产朊假丝酵母菌液。
[0069] 本步骤中,需要每隔5小时检测一次四个恒化器中的活菌含量,当活菌含量为230亿/克时,停止对恒化器内菌种的培养。
[0070] S6:按质量百分比分别称取蛋白液85.5%、乳酸菌液3%、双岐杆菌液3%、枯草芽孢杆菌液2.5%、产朊假丝酵母菌液2.5%、中性蛋白酶0.5%、纤维素酶0.5%和育种培养基2.5%,混合均匀,并置于发酵反应釜内进行厌氧发酵,发酵温度为38℃,发酵时间为40小时,从而制得蛋白发酵液。
[0071] 需要说明的是,本步骤中,中性蛋白酶采用5万酶活力的中性蛋白酶,纤维素酶采用1万酶活力的纤维素酶。
[0072] 本实施例提供的大豆蛋白液发酵工艺,其工艺简单,制备方便,生产效率高,生产出来的产品质量好,生产成本也较低,适合规模生产。
[0073] 本发明不局限于上述可选的实施方式,任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品。上述具体实施方式不应理解成对本发明的保护范围的限制,本发明的保护范围应当以
权利要求书中界定的为准,并且
说明书可以用于解释权利要求书。