本发明涉及被定义为“F-0368”的一种新颖的物质。更具体地说，本发明涉及可用作农用杀菌剂的这类“F-0368”物质;它的制备方法;含有该物质的农用化学组合物;作物病害和蔬菜病害的预防剂;农用杀菌剂;农用物料;采用该杀菌剂预防农业中疾病的方法;采用该杀菌剂的作物培育方法;和可产生F-0368物质的微生物。

作为对于稻瘟病的预防剂来说，通常已知的有iso-protiolane、2-苯并[C]呋喃酮、IBP、羧苯磺唑（probenazole），EDDP等;作为对于细菌性白叶枯病的预防剂来说，已知的有吩嗪氧化物、羧苯磺唑（probenazole）、有机镍化合物等。

因为当低剂量时，上述的常用的化学物质不能显示出足够的活性，至今已进行了采用相对较高剂量的这种化学物质的实验，发现很可能会对环境如空气、水、土壤等引起污染，且这种化学物质有一些对人体和动物是有害的。

因此，本发明的目的是提供一种低剂量下可显示足够活性的新的物质，该物质对于各种植物病害，尤其如稻瘟病和细菌性白叶枯病具有良好的预防效应。此外，本发明的目的还在于提供制备这种新物质的方法，含有该新物质的农用化学组合物、采用这种物质作为作物病害和蔬菜病害预防剂、采用这种物质的农用杀菌剂，含有这种物质的农用物料，采用这种杀菌剂来预防农业上的疾病的方法，采用这种杀菌剂来栽培作物的方法和提供可产生这种新的物质的微生物。

为了寻找有用的农用化学物质，本发明者通过从不同的土壤中分离出各种微生物，再分离出由微生物产生的物质，并鉴别所获得的物质而进行活性的研究。结果，他们发现，被定义为“F-0368”的放线菌株属于如从日本东京练马区的蔬菜田里分离出来的北里孢菌（Kitasatosporia）属，它能在培养基中积聚一种物质，它对于稻瘟病和细菌性白叶枯病具有良好预防效应。根据该发现，本发明者分离了由微生物所产生的物质，采用已知的多种物质比较了其理化性质，结果，他们证实了该物质是新的，迄今尚未被鉴定过，因此，完成了本发明。

本发明的新物质“F-0368”具有如下所描述的理化性质。

1）结构式：

2）熔点：165℃～168℃（采用自动熔点测量装置“METLER-FPI”进行测定）;

在133℃～134℃的温度范围内升华（采用热分析装置“SH    IMADZU    TG-30”测量）。

3）对于溶剂的溶解性：在甲醇、乙醇和丙酮中易溶，在乙酸乙酯和水中溶解;在氯仿、苯和己烷中不溶解。

4）紫外线吸收光谱;

最大的吸收是在225nm处λMeOHmax（E1%1cm）＝225nm（1070）5）碱性、酸性和中性的区分：酸性物质：6）显色反应：

阳性：高锰酸钾阴性：碘化物（iode），（水合）茚三酮、三氯化铁和2，4-二硝基苯肼。

7）元素分析：C    H    O测定值（%）    50.63    4.25    45.10[理论值（%）]    50.70    4.22    45.078）红外线吸收光谱采用KBr方法测定红外线光谱：3000，2740，2640，2520，1730，1670，1450，1430，1380，1360，1210，1150，1110，1020，890，880，760，710（cm）9）核磁共振光谱（60MHz）：δ（ppm）测定系在重甲醇d6-DMSO中进行：2.05（3H，t），4.85（2H，q），11.33（1H，S）从上述的理化性质来看，本发明的“F-0368”物质是一种酸性物质是明显的，因此，它可以被改变为盐的形式。这种盐的实例如下：碱金属盐，如钠盐、钾盐、锂盐等;碱土金属盐，如钙盐、镁盐等;铵盐;有机盐，如三乙基铵盐等;和铁、铜、钴等的复盐。

本发明的物质“F-0368”可以从属于能够产生物质“F-0368”的北里孢菌（Kitasatosporia）属的菌株中制得。

一个实例中，本发明者从日本东京练马区的蔬菜田的土壤中分离出了具有下列真菌性能的属于北里孢菌（Kitasatosporia）属的放线菌纲，且他们将该菌株或微生物命名为北里孢菌（Kitasatosporia）SP.F-0368。该菌株于1988年1月28日保藏于日本“Ferme-tation    Research    Institute”（发酵研究院），并得到保藏号“FERM·P-9845”，又于1989年1月26日转移到国际保藏中心，保藏号为“FERM    BP-2259”。

很自然地，上述的北里孢菌（Kitasatosporia）SP·F-0368菌株的天然或人工的突变菌株属于北里孢菌（Kitasatosporia）属。因此，对于本发明来说，所有能够产生本发明的物质“F-0368”的微生物均可使用，并无例外，因此，它们均被包括于本发明所使用的菌株中。

产生本发明的物质“F-0368”的菌株“F-0368”的真菌学性质如下。

（Ⅰ）形态特征本发明中所采用的放线菌“F-0368”菌株具有分支菌丝，它延伸于空气中的气生菌丝是片段的，且其末端形成一条5～20个孢子数的长链。在淀粉-琼脂培养基、酵母-麦芽-琼脂培养基和酵母-淀粉-琼脂培养基中，菌株非常令人满意地生长并形成孢子。它的基质菌丝的颜色从黄褐色变为褐色，它的气生菌丝的颜色从白色变为灰色。用电子显微镜观察发现，从主轴方向来看，已分支的孢子的末端呈直一屈曲的形式，仅在极少的情况下，呈钩状。孢子具有光滑的表面或不规则的多皱的表面。它呈大小为3μm～4μm×1.7μm-2.0μm的圆形或椭圆的形状。未观察到孢子囊、菌核和菌丝束。

（Ⅱ）培养特性采用不同的培养基来考察菌株“F-0368”的性能。根据E·B·Sharring等人（“International    Journal    of    Systematic    Bacteriology”Vol.16，313～340页，1966）所报道的方法进行实验，此外采用已知的培养基和实验方法。通过采用“Color    Harmony    Manual”（颜色调和手册）第4版，Container公司的方法，在用氙灯作为标准光光源的情况下，所测得的颜色作为标准颜色图，如果发现相同的颜色，则首先可定出菌属的名称，然后，可用圆括号表示出颜色图的编号。在下面除非特别注明外，在培养基中菌种的生长均在琼脂平板培养中，在28℃下培养三周。实验的详细结果列于下面表1中。

表1

（Ⅲ）生理特性1）生长的温度范围（在麦芽糖-Bennet-琼脂培养基中，灭菌前pH为7.3，并采用温度梯度设备，在第二周末的生长情况）合适的温度：19.2℃～36.2℃可生长的温度：14.0℃～42.3℃2）明胶的液化作用（在葡萄糖-蛋白胨-明胶培养基中穿刺培养）20℃：阴性27℃：假阳性3）牛奶的凝固和胨化（Difco，脱脂牛奶培养基，依次在28℃和37℃）28℃胨化：阳性;凝固：阴性37℃胨化：阳性;凝固：阴性4）黑素的形成酪氨酸-琼脂培养基：阴性形成黑素的培养基：阴性蛋白胨-酵母-铁-琼脂培养基：阴性胰化胨-酵母-液体培养基：阴性5）在腺嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤和酪氨酸中的溶解作用：腺嘌呤，黄嘌呤和酪氨酸的溶解作用：阴性。

次黄嘌呤：阳性6）耐盐性（在麦芽糖-Bennet-琼脂培养基+NaCl中，28℃）当培养基（NaCl）浓度2%时观察到生长（3%时无生长）7）利用碳源的能力（在Difco培养基中，采用碳的琼脂培养基，28℃，第二周末）阳性：D-葡萄糖，L-阿拉伯糖，D-木糖，鼠李糖，水扬苷阴性：蔗糖，D-果糖，蜜三糖，i-肌醇，D-甘露糖醇（Ⅳ）化学性质从完整细胞的水解产物中测得有LL-二氨基庚二酸和内消旋-二氨基庚二酸。

从琼脂板上的气生菌丝中，测得大量的LL-二氨基庚二酸，而内消旋二氨基庚二酸只测得少量。

作为糖的组分来说，所测得的有半乳糖和甘露糖。主要的甲基萘醌是MK-9（H6·H8）。脂肪酸组成是支链型的。胞壁酸中氨基的酰基形式是乙酰基。

如前所描述的，本发明的微生物F-0368的菌株已被鉴定是属于北里孢菌（Kitasatosporia）属的，因为它具有真实的分支菌丝;被分段以形成孢子长链，而且延伸到空气中的气生菌丝在完整的细胞中的氨基酸组合物含有LL-二氨基庚二酸和内消旋二氨基庚二酸，大量的LL-二氨基庚二酸通过分析气生菌丝中的二氨基庚二酸而检测;甲萘醌类组分主要是组成MK-9（H6·H8），因此，该微生物菌株被鉴定是北里孢菌（Kitasatosporia）SP·F-0368。

本发明的物质F-0368可以通过培养属于北里孢菌（Kitasatosporia）属的产生F-0368的微生物，如将Kita    satosporia    SP·F-0368在含有通常可被微生物所利用的营养物质的培养基中培养，分离和抽提培养液中的物质F-0368而得到。可用于本发明的营养物质的实例是：（1）作为碳源的为葡萄糖、甘油、蔗糖、糊精、淀粉等;（ⅱ）作为氮源的为大豆粉、小麦胚芽、蛋白胨、肉抽提物，酵母膏、玉米浆、铵盐等。除这些物质外，根据需要还可以使用碳酸钙、氯化钾、硫酸镁、磷酸盐和其它无机盐。

就培养微生物的方法来说，液体培养方法是合适的。培养条件，如温度、时间和其它要进行如此的选择，即：使其适宜于所使用的微生物的生长，这样，物质F-0368的产量就可能变为最大。例如，培养在需氧条件下进行，培养温度为25℃～35℃，较佳为28℃。当培养在通气和搅拌下进行92～144小时的时间周期后，物质F-0368的产量达到其最大值。

为了分离和纯化在培养液中所产生和积聚的物质F-0368，可对通常所使用的各种方法进行合适的选择并使用。例如，利用培养物和杂质之间的溶解性不同的方法;利用化合物的官能团不同的方法，如阴离子交换树脂法，和利用对于硅胶，DIAION    HP-20（日本，Mitsubishi    Kasei公司的产品的商标）的吸附亲和力的不同的方法等等，它们可以单独地，或结合地，或重复地使用。

培养物质的活性部分的确证可以借助硅胶薄层层析法（TLC）进行。

分离和纯化物质F-0368的方法的一个实例如下：就是说，尽管物质F-0368也存在于菌丝体中，但它主要存在于培养过滤液中;因此，首先将助滤剂加至发酵培养液中通过过滤或离心分离将菌丝体除去，然后用盐酸将所获得的培养液调节至酸性（pH值为2），通过装有吸附树脂（DIAION    HP-20）的层析柱除去一些有色物质，由此，洗提出活性物质。

然后，收集该活性部分并通过采用乙酸乙酯，利用其在酸性下可以溶解于有机溶剂中的性能萃取该活性部分。然后，减压浓缩抽提液，由此而获得物质F-0368的粗抽提物。

随后，采用吸附层析法，如硅胶柱层析法使该粗抽提物经历纯化过程，收集活性部分，然后将其浓缩和干燥，结果得到呈游离酸形式的物质F-0368的晶体。

进一步地，可以通过常用的方法将分离得的呈游离酸形式的晶体修饰成为各种盐的形式。

就其它的方法来看，下面的合成方法也可以产生本发明的物质F-0368。

在溶剂，如盐酸、硫酸、甲苯磺酸，甲磺酸等的存在下，将由下列通式所表示的3-甲基-4-低级烷氧基羰基-2（5H）-呋喃酮[用S·W·Pelletier等人“Tetrahedron，31，（15）1659”所描述的合成方法制备）溶解于诸如水或水和醇，如甲醇，乙醇等的混合物中，然后将它们在室温～100℃的温度下经历1～24小时的一个时间周期以进行反应，由此可以获得作为最终产物的物质F-0368。

通式：

其中：R代表具有1～6个碳原子的直链或支链的低级烷基在低剂量下，本发明的物质F-0368具有足够的预防活性，并且对于稻瘟病和细菌性白叶枯病具有极好的预防效应。

这就是说，预防稻瘟病的实验的结果，本发明的物质F-0368不仅通过被喷洒在叶子的表面上，显示了这种预防效应，而且，尤其，在土壤处理和喷洒于水表面的实验中也显示了很好的预防效应。通过将该物质喷洒于水表面，它显示出对于细菌性白叶枯病（它是稻类植物的细菌病）具有极好的预防效应。

本发明的物质F-0368的这种高活性不仅可以通过将其喷洒于作物叶子的表面上来体现，而且可以通过土壤处理和将其喷洒于水表面来体现，这表明该物质具有卓越的预防效应。

此外，本发明的物质F-0368所显示的对于稻瘟病（它是由于真菌而引起的稻类作物病）和对于细菌性白叶枯病（它是由于细菌引起的稻类作物病）的极好的预防效应是一种独特的现象。

偶然地，当浓度为500μg/ml时，物质F-0368在体外对于细菌、酵母菌和丝状真菌不显示其抗微生物的活性。

此外，物质F-0368对于鼠具有低的急性毒性，可以看出它对于人类和动物的伤害很小，因此，它是一种极好的农用灭菌剂。

本发明的农用灭菌剂中含有作为活性组分的物质F-0368和/或它的盐，可以列出下列的实例：（1）其中采用F-0368物质的灭菌剂;（2）用水稀释物质F-0368，和固体粉末，或其它合适的载体，根据需要，可加入辅料，如扩展剂等而获得的灭菌剂;（3）通过农用化学物质的生产所通常采纳的方法，其中将物质与各种液体或固体载体相混合，如果需要的话，再加入辅助剂，如调湿剂，扩展剂，分散剂，乳化剂，粘结剂等而制得的各种灭菌剂配方，如此制得的物质呈水分散性的粉末，液体，水溶性粉末，溶胶，乳浊液，粉末，颗粒，油等形式。根据使用目的，合适地使用这些不同的产品是所需要的。

在制备这些配方时，所用的载体可以是固体或液体。这些合适的固体载体可以列举出：小麦麸皮;大豆粉，纤维质粉末，植物抽提后的残余物，树皮和其它植物载体;和粘土，滑石，高岭土，膨润土，中国陶土，碳酸钙，硅藻土，二氧化硅;合成硅酸钙，和其它无机物质。合适的液体载体可以列举出：水;脂族烃，如轻石油，煤油，矿物油等;芳族烃，如苯，甲苯，二甲苯，甲基萘等;氯代烃，如氯仿，二氯乙烷等;醇，如甲醇，乙醇，异丙醇，正丁醇等;酮，如丙酮，甲乙酮，环己酮等;含氮有机溶剂，如乙醇胺，二甲基甲酰胺等，和其它种种。

从改善配方的性能或增加生物效应的观点来看，将不同的辅助剂加入本发明的农用的灭菌剂中是合理的。实例是：各种阴离子或离子化的表面活性剂;高分子量的化合物，如藻酸钠，羧甲基纤维素，甲基纤维素，聚乙烯醇，阿拉伯树胶，明胶，酪蛋白等;纸浆亚硫酸盐废液，“DORILESS”（由日本Sankyo    Co.Ltd制造和销售的产品的商标）等。

本发明的农用灭菌剂中可能含有各种其他的活性组分，它们不会削弱物质F-0368的预防效应。这些活性组分是，例如：杀真菌剂，杀虫剂，除草剂，杀螨剂，植物生长调节剂，杀线虫剂，杀菌剂，防护剂，诱引剂等。

本发明还提供了其中含有物质F-0368和/或它的盐的农用物料。这些农用物料可以通过将物质F-0368和/或它的盐与肥料，培养稻类作物种子系的土壤，园艺中使用的培养土，营养液培养的肥料等相混合或拌和而获得。

为了用本发明的物质F-0368来灭除农业中的致病真菌，可以将物质F-0368掺入至上述的农用灭菌剂和农用物料中，由此可杀死农业上的致病真菌。

为了采用物质F-0368防止农业病害，可通过在作物的茎和叶上喷洒以使用物质F-0368，或通过土壤灌溉而使植物的根部吸收该物质来进行处理是足够的。

在物质F-0368被施用于灭除或防止农业病害的情况下，当该物质是被喷洒于叶子表面时，所使用的物质的浓度通常为10ppm～5，000ppm，或较佳地为100ppm～2，000ppm。

在本发明的物质F-0368被施用于育苗箱和水表面的情况下，颗粒状的该物质的浓度应在0.1%～50%，或较佳地是0.2%～20%的范围内。

上述颗粒的施用量通常是每一个育苗箱（大小为30×60×3cm，其中约含有51土）30～100g的范围内，和每10公亩水稻田用3～5Kg。

从上面的解释中可以明显地看到，且从下列的较佳实例中变得更明显，本发明的物质F-0368在低剂量时防止疾病的效应是极好的：尤其，它对于稻瘟病和稻类作物的细菌性白叶枯病具有卓越的防止作用，而对于人和动物则很少毒性。因此，从工业的观点来看，农用的灭菌剂，农用物料，杀灭农业上的致病真菌和细菌的方法，和防止农业病的方法是很有意义的。另外，物质F-0368可以用属于北里孢菌（Kitasatosporia）属的产生F-0368物质的微生物而有效地产生。

下面，应该注意到本发明不受这些实例和实验的例子的限制，但是，它包括了从前面已经描述了的发现很容易推断的所有可能的实施例。

在附图中：图1表示本发明的物质F-0368的紫外线吸收光谱图图2表示物质F-0368的红外吸收光谱。

实施例1（制备物质F-0368的实例）1.北里孢菌（Kitasatosporia）SP·F-0368微生物的培养菌株：

种子培养基中采用下列组成：1.5%糊精，3%淀粉，1%大豆粉，0.3%肉抽提物，0.3%多元蛋白胨，0.3%酵母膏，0.3%碳酸钙，和0.1%氯化钠（灭菌以前培养基的pH值为7.0）。

将各自均为70ml的上述种子培养基分别放入多个锥形瓶中，每个瓶子的容积均是500ml。然后，将北里孢菌（Kitasatosporia）SP·F-0368微生物菌株接入每一个这种锥形瓶中，然后在28℃下摇瓶培养72小时。

然后，将1l这种种子培养物转移至其中含有1001生产培养基的罐中。该生产培养基含有：1.5%精精，3%淀粉，1%大豆粉，0.3%内抽提物，0.3%多元蛋白胨，0.3%酵母膏，0.3%碳酸钙，0.1%氯化钠，和0.2%消沫剂CA-123（灭菌前培养基的pH为6.5）。

培养是在通气和搅拌下，于28℃进行96小时。培养中的通气量是1001/分。搅拌转速是200rpm。

2.物质F-0368的分离和收集培养完成后，用盐酸将培养液（其pH值为8.4）的pH调节至2.5，然后，将作为过滤辅助物的“硅藻土”（Celite）（美国Johns-Manville    Products    Corp的硅藻土和有关产品的商标）以4%的比例加入到培养液中，用于过滤。接着用50ml乙酸乙酯将约501经过滤的培养液（pH值为2.5）抽提二次，此后，减压下浓缩乙酸乙酯层，由此可获得约180g其中含有物质F-0368的干固体物质。将该固体物质进一步溶解于少量乙酸乙酯中，并将其通过预先用乙酸乙酯充入的硅胶柱，从而用乙酸乙酯展开该固体物质，收集活性部分，并用氢氧化钠将它的pH值调节至8.0后，用11蒸馏水抽提。以这种方法，将经抽提的活性部分完全转移至蒸馏水中（pH值为8.0）。然后，用盐酸将蒸馏水的pH值调节至2.0，将干的固体物质置于pH值调节至2.0的层析柱（DIAION    HP-20）中，用该酸性水溶液（pH值为2.0）展开该物质。然后，收集活性部分（约1.51）并用1.51乙酸乙酯将其抽提二次，然后在减压下浓缩乙酸乙酯层，由此获得约18g物质F-0368的白色的平面形晶体。

实例2将5ml    3N盐酸水溶液加入150mg（0.96mM）的3-甲基-4-甲氧基羰基-2（5H）呋喃酮中，在80℃-85℃的温度下搅拌3小时。然后用乙酸乙酯抽提反应产物，在减压下分馏溶剂。结果获得油状的物质。然后将乙酸乙酯-正己烷加入这样所获得的油状物质中，并将其结晶，由此可获得110mg物质F-0368，产率为80.9%。

下面，将列举本发明的农用灭菌剂的配方的实例。但是，应该看到对于物质F-0368的添加剂的种类和它们的混合比例不受这些实例的限制，并可在很广的范围内变化。

实例3粉末将3份（重量）物质F-0368，2份（重量）滑石和55份（重量）粘土在混合机中均匀地混合，然后，将混合后的物料磨碎而获得粉末。

实例4水分散性粉末将20份（重量）物质F-0368，5份（重量）调湿剂（烷基苯磺酸型），2份（重量）白炭和73份（重量）粘土在混合机中均匀地混合，然后，将经混合的物料磨碎而获得水分散性的粉末。

实例5颗粒将20份（重量）物质F-0368，5份（重量）“TOXANON”（由日本Sanyo    Kasei    K.K.制造并注册的表面活性剂商标）和90份膨润土采用湿型挤压法制成颗粒，然后，干燥并筛分颗粒而获得所需要的颗粒大小。

下面，将列举出实验实例以测试本发明的农用灭菌剂的有效性和急性毒性。

实验1预防稻瘟病试验（喷洒在叶子上的试验）用喷洒枪将上面实例3中所制备的含有物质F-0368的水分散性粉末以15ml/每缽的定额喷洒到栽培于直径为9cm的植物缽中的稻类作物上（CV.“Nihonbare”，在2-2.5叶子阶段）。喷洒一天后，将稻瘟病（即Pyricularia    oryzae）的致病真菌的孢子悬浮液通过喷洒而接种到该稻类作物上，然后将其置放于温度为24℃-26℃，相对湿度为90%或更高的恒湿箱中。4天后，清点病变的叶子的斑点数目以检查灭菌剂的预防效应。结果列于下面表2中。但应注意预防效应的值是用下列方程式计算的。

从上面的表2中可以明显地看出，通过喷洒于叶子上，物质F-0368对于稻瘟病呈现出优良的预防效应。

实验2预防稻瘟病的试验（通过施用于育苗箱中的试验）将50g如上面的实例4中所制备的其中含有1%物质F-0368的颗粒均匀地分散于在尺寸为长30cm，宽60cm，高3cm的育苗箱中生长的稻类作物上（CV.“Nihonbare”，在2.5叶子阶段）。颗粒分散后24小时，将幼种系连同土壤（1×1×3cm）一起取出，移植至1/15000公亩的Wagner体中，土壤粘附到种子的根部。移植40天后，将Pyricularia    oryzae（即稻瘟病的致病真菌）的孢子悬浮液通过喷洒而接种于该幼种系上进行接种，然后，将其置于温度为24℃-26℃，相对湿度为90%或以上的恒湿箱内，保持该状态。7天后，清点病变斑点数以检查该颗粒状灭菌剂的防病效应。以与上面的实验1相同的方法来计算预防效应的值。

实验结果列于下面的表3中。

表3

从表3中可以很明显地看到，通过施用于育苗箱中，物质F-0368比通常的稻瘟病灭菌剂呈现出更好的预防效应。

实验3稻瘟病预防效应的试验（施用于水表面上的试验）将其中分别含有1%，2.5%和5%的根据实例3所制备的物质F-0368的三种颗粒各自从上层水表面均匀地撒播于在1/10000公亩的Wagner缽（充入的水深为3cm）中生长的稻类作物上。

自撒播颗粒7天后，将稻瘟病的致病真菌（Pyricularia    oryzae）的孢子悬浮液喷洒于该稻类作物上进行接种，将其置于温度维持在24℃-26℃，相对湿度为90%的恒湿箱中。置于箱内7天后，清点该稻类作物的上面两片叶子的病变叶斑的数目以检查该颗粒状灭菌剂的预防效应。然后，也用与上面的实验1相同的方法来计算预防效应的值。实验结果列于下面的表4中。

从上面的表4中可以明显地看到，通过施用于水表面，本发明的物质F-0368对于稻瘟病比通常的灭菌剂具有更好的预防效应。

实验4稻类白叶枯病的预防效应试验（施用于水表面的试验）将其中分别含有2.5%和5%根据上面的实例3所制得的物质F-0368的两种颗粒各自从上层水表面均匀地撒播于在1/1000公亩的Wagner钵（充入的水的深度为3cm）中生长的稻类作物上（CV.“Nihonbare”，在生长出第五叶子的阶段）。

从撒播颗粒起7天后，将稻类白叶枯病的致病菌，稻白叶枯病黄单孢菌（Xathomonas    oytzae）的悬浮液通过针刺法接种到叶子上，将这样接种的稻类作物置于暖房中，在暖房里20天后，测量病变损伤部分的长度以检查颗粒状灭菌剂的预防效应。结果列于下面的表5中。然后，用下面的方程式来计算预防效应的值。

从上面的表5中可以明显地看到，通过施用于水表面，本发明的物质F-0368对于稻类作物的白叶枯病具有极好的预防效应。

实验5急性毒性采用JCL/ICR种的雄性小鼠（年龄：5星期;重量：28±1g），LD50的值（通过向腹膜腔给药始二周后的死亡率而测定）显示出化学物质的量约为200mg/kg。