专利汇可以提供利用固定化球毛壳孢子提高人参不定根中人参皂苷含量的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了利用固定化球毛壳孢子提高人参不定根中人参皂苷含量的方法,步骤为:(1)配制液体培养基;(2)将人参不定根在液体培养基中培养;(3)配制海藻酸钠 水 溶液;(4)配制球毛壳孢子悬浮液;(5)将海藻酸钠水溶液与孢子悬浮液等体积混合均匀得 混合液 ;将混合液滴入CaCl2水溶液中,有颗粒生成;滤出颗粒,用生理盐水洗净,过滤,得到固定化球毛壳孢子;(6)将固定化球毛壳孢子加入到步骤(2)培养基中,25℃及黑暗条件下继续培养5天, 收获 。本发明的方法具有操作简单,生长周期短,生产成本低等优点。本发明的方法有效促进了人参皂苷的积累,显著提高了人参不定根中人参皂苷含量,便于人参皂苷的工业化大规模生产。,下面是利用固定化球毛壳孢子提高人参不定根中人参皂苷含量的方法专利的具体信息内容。
1.利用固定化球毛壳孢子提高人参不定根中人参皂苷含量的方法,其特征是包括如下步骤:
(1)在3/4MS培养基中加入蔗糖使终浓度为40g/L,加入吲哚丁酸使终浓度为5mg/L,加入6-糠氨基嘌呤使终浓度为0.1mg/L,调节pH=6.5,灭菌,得到液体培养基;
(2)将人参不定根切成0.5~1cm的小段接种于盛放有100mL步骤(1)获得的液体培养基的锥形瓶中,在25℃及黑暗条件下培养30天;
(3)取海藻酸钠,加入蒸馏水中,使海藻酸钠质量浓度为6%,搅拌使之完全溶解,4℃放置24h,121℃下灭菌25min,降温至室温,紫外灭菌30min,得到海藻酸钠水溶液;
(4)取无菌的生理盐水进行球毛壳孢子的收集与稀释,用血球计数板计数,得到104个/mL的孢子悬浮液;
(5)将海藻酸钠水溶液与所述孢子悬浮液等体积混合均匀得混合液;按比例,将1mL混合液滴入10mL质量浓度2%的CaCl2水溶液中,有颗粒生成,4℃放置2h;滤出颗粒,用生理盐水洗净,过滤,得到固定化球毛壳孢子;
(6)将10g步骤(5)获得的固定化球毛壳孢子加入到步骤(2)所述锥形瓶中,25℃及黑暗条件下继续培养5天,收获。
方法
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