玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法及低毒微生物发酵饲料
阅读：206发布：2020-05-15
专利汇可以提供玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法及低毒微生物发酵饲料专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法及低毒 微 生物 发酵 饲料 ，属于饲料制备技术领域，本发明通过液相-固相发酵结合的方式，用霉菌毒素降解酶以及发酵剂处理饲料底物，在发酵过程中将饲料底物中的霉菌毒素降解掉，降低饲料底物以及制成的饲料的毒性，并且不需要使用 吸附 剂，避免了吸附剂吸附造成的营养物质损失。通过上述方法处理饲料底物后，底物中的霉菌毒毒素降解率高达50％-90％，可以显著的降低饲料中的毒性。，下面是玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法及低毒微生物发酵饲料专利的具体信息内容。
1.玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法，其特征在于，在液体培养基中培养霉菌毒素降解菌剂获得富含霉菌毒素降解菌和酶的发酵菌液，于玉米和小麦及其加工产品中接种所述发酵菌液，并同时加入饲料发酵剂，控制温度条件为20-40℃条件下固态发酵
24-72h，所述霉菌毒素降解菌剂包括呕吐毒素降解菌；优选地，所述霉菌毒素降解菌还包括T-2毒素降解菌、黄曲霉毒素降解菌、玉米赤霉烯酮降解菌、伏马毒素降解菌、赭曲霉毒素降解菌中的任意一种或至少两种；
优选地，玉米和小麦及其加工产品主要包括麸皮、可选地还包括玉米、小麦、次粉、面粉、玉米皮、玉米浆、玉米胚芽粕、玉米粉糖渣、酒糟、酒精糟和酒精糟可溶物中的至少一种或多种。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述霉菌毒素降解菌剂的接种量为所述饲料的底物质量的1-5‰。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵饲料发酵剂的添加量为所述饲料的底物质量的1-5‰。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述液体培养基中，干物质量为8-15wt％，优选地，蛋白质含量为10-20wt％。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，固态发酵在30-70wt％水分条件下进行。
6.一种低毒微生物发酵饲料，其特征在于，由权利要求1-5任一项所述的方法处理玉米和小麦及其加工产品，加工制备得到微生物发酵饲料。
7.根据权利要求6所述的低毒微生物发酵饲料，其特征在于，所述微生物发酵饲料中，水分含量为10-45wt％，粗蛋白含量≥10wt％，酸溶蛋白含量≥8wt％，粗灰份含量≤
10wt％。
玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法及低毒微生
技术领域
[0001] 本发明涉及饲料制备领域，具体而言，涉及玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法及低毒微生物发酵饲料。
背景技术
[0003] 黄曲霉毒素是主要由黄曲霉(aspergillus flavus)寄生曲霉(a.parasiticus)产生的次生代谢产物，它们存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、玉米和小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大的一类霉菌毒素。黄曲霉毒素可引起肝细胞变性、坏死、出血；影响DNA、RNA的合成与复制；抑制细胞分裂、蛋白质、脂肪的合成与线粒体的代谢；破坏溶酶体的结构和功能；还具有致癌、致突变和致畸形性等。
[0004] 玉米赤霉烯酮(Zearalenone)又称F-2毒素，它首先从有赤霉病的玉米中分离得到。玉米赤霉烯酮其产毒菌主要是镰刀菌属(Fusarium)的菌侏，如禾谷镰刀菌(F.graminearum)和三线镰刀菌(F.tricinctum)、黄色镰孢(Fusarium culmorum)、木贼镰孢(Fusarium equiseti)、半裸镰孢(Fusarium sernitectum)、茄病镰孢(Fusarium solani)等菌种。玉米赤霉烯酮是玉米赤霉菌的代谢产物，玉米赤霉烯酮具有雌激素样作用，能造成动物急慢性中毒，引起动物繁殖机能异常甚至死亡。
[0005] 呕吐毒素(vomitoxin)，又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)，化学名为3α,7α,15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮，属单端孢霉烯族化合物，它通常是由生长在谷类物品(如玉米和小麦、玉米、大麦和秣草)的霉菌镰红菌素生成的。具有很高的细胞毒素及免疫抑制性质，因此，对人类及动物的健康构成了威胁，特别是对免疫功能具有明显的影响。根据DON的剂量和暴露时间不同可引起免疫抑制或免疫刺激。当人和动物摄入了被DON污染的食物后，会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状，严重时损害造血系统造成死亡。
[0006] T-2毒素，是由多种真菌，主要是三线镰刀菌产生的单端孢霉烯族化合物(trichothecenes，TS)之一。T-2毒素能刺激皮肤和粘膜，引起口腔与肠道粘膜溃疡与坏死，导致呕吐和腹泻；毒素进入血液中能产生细胞毒作用，损伤血管内皮细胞，破坏血管壁的完整性，使血管扩张、充血、通透性增高，引起全身各器官出血。
[0007] 赭曲霉毒素是由曲霉属的7种曲霉和青霉属的6种青霉菌产生的一组重要的、污染食品的真菌毒素，其中，尤以赭曲霉毒素A的毒性最大、分布最广、产毒量最高。赭曲霉毒素主要侵害动物肝脏与肾脏。急性中毒反应为精神沉郁，食欲减退，体重下降，肛温升高。消化功能紊乱，肠炎可视黏膜出血，甚至腹泻，脱水多尿，伴随蛋白尿和糖尿。妊娠母畜子宫黏膜出血，往往发生流产。
[0008] 玉米和小麦伏马毒素可以引起人畜急性中毒和慢性毒性，并具有种属特异性和器官特异性，不同的动物产生的疾病不同，相应的耐受限量也有很大差别。
[0009] 目前，主要通过向饲料中添加霉菌毒素吸附剂清除霉菌毒素。但效果不好,问题不少。如：霉菌毒素吸附剂只对极性的黄曲霉毒素有效，对弱极性和非极性的霉菌毒素(玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、T-2毒素、赭曲霉毒素等)无效或效果很有限；吸附的霉菌毒素不能被降解，随粪便排出动物体外后，对土壤形成二次污染；同时吸附剂还会吸附饲料中的氨基酸、维生素、微量元素以及小肽等并随粪便排出动物体外，从而大大降低饲料的营养价值，因此急需一种能降低饲料中霉菌毒素含量的方法。
发明内容
[0010] 本发明的目的在于提供一种玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法，有效的控制玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的含量，在制成饲料后，不需使用吸附剂，避免吸附剂降低玉米和小麦中的营养价值。
[0011] 本发明的再一目的在于提供一种微生物发酵饲料，其由上述方法处理玉米和小麦及其加工产品后，然后加工成微生物发酵饲料。
[0012] 本发明的实施例是这样实现的：
[0013] 在液体培养基中培养霉菌毒素降解菌获得富含霉菌毒素降解菌和酶的发酵菌液，于玉米和小麦及其加工产物中接种所述发酵菌液，并同时加入饲料发酵剂，控制温度条件为20-40℃条件下固态发酵24-72h，所述霉菌毒素降解菌包括呕吐毒素降解菌。
[0014] 优选地，当经检测发现，玉米和小麦及其加工产品中还含有其他的霉菌毒素时，例如：黄曲霉毒素、伏马毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、赭曲霉毒素等。所述霉菌毒素降解菌还可以包括玉米赤霉烯酮降解菌、T-2毒素降解菌、黄曲霉毒素降解菌、伏马毒素降解菌、赭曲霉毒素降解菌中的任意一种或至少两种。
[0015] 优选地，上述的玉米和小麦及其加工产品主要包括麸皮、可选地还包括玉米、玉小麦、次粉、面粉、玉米皮、玉米浆、玉米胚芽粕、玉米粉、糖渣、酒糟和可溶性玉米酒糟中的至少一种或多种。同时根据需要，底物中还可以加入水、豆粕等。
[0016] 一种微生物发酵饲料，由上述的方法处理得到玉米和小麦及其加工产品，加工制备得到微生物发酵饲料。
[0017] 本发明实施例的有益效果是：
[0018] 本发明通过液相-固相发酵结合的方式，先通过液相发酵获得富含霉菌毒素降解菌和酶的发酵菌液；然后,将霉菌毒素降解发酵菌液和饲料发酵剂同时与底物混匀后，调整物料水份到35-45％，转入发酵池进行兼性厌氧发酵2--3天，要求温度25℃--35℃，进行固相发酵，对玉米和小麦及其加工产品中的霉菌毒素进行发酵，最终获得低毒的微生物发酵饲料，不需要使用吸附剂，避免了吸附剂吸附造成的营养物质损失。通过上述方法处理饲料底物后，底物中的霉菌毒素降解率高达50％-90％，可以显著的降低饲料中的毒性。附图说明
[0019] 为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0020] 图1为本发明实验例提供的降解方法的流程图。
具体实施方式
[0021] 为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂、原料或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0022] 下面对本发明实施例的玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法以及制备的微生物发酵饲料进行具体说明。
[0023] 现有技术中通常将霉菌毒素分解酶添加到饲料中，让霉菌毒素分解酶在进入动物消化道后对霉菌毒素进行分解，但是这种方式存在以下弊端：
[0024] 一、霉菌毒素分解酶需要在有大量水份的环境下才能体现出酶的活性，通常在饲料进入动物体的消化道内，霉菌毒素分解酶才开始处理毒素；这样处理的时间很短只会有短短几个小时，对于毒素的处理效果会大打折扣，同时还会增加动物肝脏的代谢负担，对动物造成很大的危害。
[0025] 二、蛋白质结构的霉菌毒素分解酶会被动物本身的胃蛋白酶破坏，在胃的酸性条件下，蛋白质结构的霉菌毒素分解酶也会被破坏，同时胃的酸性条件也是不适合酶发挥作用的pH范围。
[0026] 三、在制备饲料的过程中，蒸汽温度高达75-90℃，添加进饲料中的霉菌毒素分解酶在制备过程中有接近30-70％失活，进一步降低该方式最终分解霉菌毒素的效果。
[0027] 作为本发明的一个方面，本发明提供一种玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法：首先，在液体培养基中培养霉菌毒素降解菌获得富含霉菌毒素降解菌和酶的发酵菌液，于玉米和小麦及其加工产品中接种所述发酵菌液，并同时加入饲料发酵剂，控制温度条件为25-35℃条件下固态发酵48-72h，所述霉菌毒素降解菌剂包括呕吐毒素降解菌或玉米赤霉烯酮降解菌。
[0028] 其中的底物为玉米和小麦及其加工产品，玉米和小麦及其加工产品中常见的霉菌毒素为呕吐毒素、伏马毒素以及玉米赤霉烯酮等，因此对应的霉菌毒素降解菌包括呕吐毒素、伏马毒素以及玉米赤霉烯酮降解菌，需要说明的是，根据玉米和小麦及其加工产品受到霉菌毒素感染的种类，可以选用对应的霉菌毒素降解菌进行液相发酵获取发酵菌液。
[0029] 通常对于玉米和小麦及其加工产物中，较常选用麦麸和玉米浆，同时根据需要，还加入少量的水或豆粕等原料一同进行发酵。当然其他种类的玉米和小麦及其加工产物也是可选的。
[0030] 其中，根据饲料中底物类型，以及该底物中较为多见的霉菌毒素类型，选择合适的霉菌毒素降解菌剂进行培养，获取相应的霉菌毒素降解发酵菌液。例如：饲料底物中常见的霉菌毒素有玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、伏马毒素等。
[0031] 因此优选地，霉菌毒素降解菌剂还包括、、呕吐毒素降解菌、伏马毒素降解菌、玉米赤霉烯酮降解菌。
[0032] 玉米和小麦实际生产中发现，如果用霉菌毒素降解酶直接添加在饲料中，效率会非常低。因为在饲料的加工过程中，由于要进行高温蒸汽制粒过程，蛋白质结构的霉菌毒素降解酶在高温蒸汽制粒过程中失活，起不到对霉菌毒素的降解效果。
[0033] 另外，现有技术中通常在饲料中添加吸附剂以降低饲料中霉菌毒素的量，但这种方式，存在吸附剂会将饲料底物中的营养物质吸走的弊端，对饲料当中几种维生素的吸附达到30％-70％，对矿物质的吸附达到60％以上，会导致饲料的营养价值降低。在后续饲喂动物的过程中，吸附剂在动物消化道内和水接触后毒素又释放出来。
[0034] 采用吸附方式。有两个问题。第一：不能精确掌握毒素的含量和分布的情况。第二：不能让吸附剂准确有效的接触到毒素；减少对维生素、矿物质的吸附，增加对毒素的有效吸附。这两个问题不能解决吸附就不能发挥正面作用，还吸附跑了饲料中很多宝贵的维生素和矿物质。
[0035] 而且用吸附剂还是一个针对性不强的办法，吸附剂添加多了，它会吸附太多营养物质，添加少了霉菌毒素吸附不彻底。但是用酶去分解毒素就好的多，因为酶的针对性很强，它只会针对特定的霉菌毒素去分解。解决了对霉菌毒素的特意针对性问题，效率比吸附方式增加了十几倍。
[0036] 本申请的发明人经过研究发现，同时添加霉菌毒素降解菌剂和饲料发酵剂对底物进行发酵，是一取两得。即降解了霉菌毒素，同时又制得了微生物发酵饲料。降低了30-50％的生产成本。其中，固态发酵过程中，根据发酵物的含水量，可以补充适量的无菌水，提高发酵效率。
[0037] 其中，霉菌毒素降解菌剂可以由市场购买获得，饲料发酵剂也可以由市场购买获得，发酵过程中的参数控制对于降解去除霉菌毒素至关重要。
[0038] 具体地，首先通过在发酵罐中进行液相发酵后得到富含霉菌毒素降解酶和菌的发酵菌液，优选控制液体培养基中的干物质量8-15wt％，其中，优选控制液体培养基中的蛋白质含量为10-20wt％，保证培养过程中的营养物质充分。
[0039] 本发明中，以玉米和小麦及其加工产品为饲料底物，需要说明的是，在本发明的一些实施方式中，根据实际需要，还可以添加其他的辅料，如粕类原料等等增加氮源。
[0041] 需注意的是，温度条件对于霉菌毒素的降解是重要的，温度条件为25-35℃条件下发酵，对于霉菌毒素的降解效果以及饲料底物的发酵都是较为有利的，当温度超过35℃，温度会使霉菌毒素降解酶的活性大幅下降，霉菌毒素的降解效率会显著下降，当温度低于25℃时，发酵剂的发酵效率低，耗时长，不利于霉菌毒素降解酶在短时间内快速的将霉菌毒素降解完。
[0042] 发酵时间优选控制为24-72h，时间过长，发酵所消耗的饲料底物营养增多，会降低经济效益，时间过短，霉菌毒素的降解不够完全。
[0043] 在本发明的一些实施方式中，水分条件控制在40-50％是更为适宜的，在该水分条件下，发酵剂的发酵效果最佳。
[0044] 具体地，在将饲料发酵剂和霉菌毒素降解发酵菌液与饲料底物混合后，控制加水的量，即可控制水分含量。
[0045] 作为优选的实施方式，在添加饲料发酵剂时，可以先将发酵剂进行活化，且优选与25-40℃的温水混合，在该温度条件下，饲料发酵剂中的菌种繁殖速率较快，然后再与霉菌毒素降解菌液同时跟饲料底物进行混合。
[0046] 至于发酵时间，24-72h是更适合的。而发酵过程的温度控制，发酵于25-35℃的环境下进行。
[0047] 对于饲料发酵剂和霉菌毒素降解菌剂的添加量，在本发明的一些实施方式中，分别为所述饲料底物质量的1-5‰。
[0048] 发酵底物中，干物质量(DM)优选控制在30-70wt％，通过控制加入的水量，可以较为精确的控制干物质量。
[0049] 本发明的另一方面在于提供一种由上述方法制备得到的微生物发酵饲料，相比于现有技术中的微生物发酵饲料，其中的霉菌毒素含量极少，且保持了饲料底物中充足的营养成分，并且，霉菌毒素降解酶始终存在于饲料中，防止饲料再次被霉菌毒素污染。
[0050] 在上述制得的微生物发酵饲料中，水分含量为10-45wt％，粗蛋白含量≥10wt％，酸溶蛋白含量≥8wt％，粗纤维含量≤8wt％粗灰份含量≤10wt％。上述制得的微生物饲料已可以直接使用和销售。
[0051] 进一步地，为了适应不同的饲喂对象、方便运输、贮存等目的，还可以进一步对上述的微生物发酵饲料进行烘干，优选烘干至水分含量≤25wt％。
[0052] 微生物发酵饲料中还可以添加微量元素、如Fe、Mg、Zn等，还可以添加各类维生素、烟酸、生物素、烟酰胺等各类添加剂。
[0053] 以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
[0054] 以下实施例和对比例中所用霉菌毒素降解菌剂以及饲料发酵剂、吸附剂等均购买自市售产品。
[0055] 实施例1
[0056] 一种微生物饲料的制备方法，参阅图1。经检测玉米中含有的主要毒素为呕吐毒素和玉米赤霉烯酮，分别为8600ppb和750ppb。超标严重，脱毒后才能饲用。。
[0057] 首先通过液相发酵制备霉菌毒素降解发酵菌液：
[0058] 将2公斤霉菌毒素降解菌剂置于1000公斤液态培养基中进行培养，其中霉菌毒素降解菌剂包括呕吐毒素和玉米赤霉烯酮降解菌。培养条件为25℃，时间为24-48h，获得发酵菌液，发酵菌液中含有呕吐毒素降解酶和玉米赤霉烯酮降解酶。
[0059] 其中，液态培养基中含有糖、蛋白胨等营养物质以及水，蛋白胨含量为15wt％。
[0060] 称取玉米700Kg，接种上述获取的发酵菌液(其中含有呕吐毒素降解酶和玉米赤霉烯酮降解酶)，接种量为玉米重量的5％，加入发酵剂1.4Kg，混合均匀后，调整物料水份到35-45％，转入发酵池进行兼性厌氧发酵2--3天，要求温度25℃--35℃，中间要求记录温度变化，每48小时取样检测一次，检测数据记入生产记录表，检测项目：温度、活菌数、PH值、颜色变化、味道观察等。
[0061] 发酵时间到位，检测所有指标是否符合要求标准，完全符合设计标准后，由皮带输送机输送到低温转筒干燥器进行低温烘干，要求温度不超过65℃，停留时间不超过45分钟，烘干物料由螺运机输送至反复式振动筛，过筛后的合格物料送入复式搅拌机进行营养平衡，剩余物料送入粉碎机粉碎后与合格物料一起送入复式搅拌机进行营养平衡，生产出外销成品A和自用成品B。成品A和成品B只有水份不同，成品A水分在13％以内，成品B根据需要水分控制25％左右。
[0062] 实施例2
[0063] 一种微生物饲料的制备方法，首先对饲料底物进行处理，将原料中的霉菌毒素降解掉。
[0064] 首先通过液相发酵制备霉菌毒素降解酶：
[0065] 将黄曲霉毒素降解菌置于发酵罐中的液态培养基中进行培养，其中霉菌毒素降解菌包括玉米赤霉烯酮降解菌、呕吐毒素降解菌。培养条件为20℃，时间为1d(天)，获得发酵菌液，发酵菌液中含有呕吐毒素素降解酶以及玉米赤霉烯酮降解酶。
[0066] 其中，液态培养基中含有糖、蛋白胨等营养物质以及水，蛋白胨含量为15wt％。
[0067] 称取麸皮700Kg，经检测其中含有的主要为呕吐毒素，接种上述获取的发酵菌液(其中含有呕吐毒素降解酶)，接种量为麸皮重量的0.5％，加入发酵剂0.35Kg，混合均匀后，置于发酵池中发酵，控制发酵温度为20℃，发酵72h，发酵完成后收集处理后的饲料底物。
[0068] 将处理后的饲料底物加工成微生物发酵饲料，饲料中添加有微量元素添加剂等营养物质。
[0069] 实施例3
[0070] 一种微生物饲料的制备方法，首先对饲料底物进行处理，将原料中的霉菌毒素降解掉。
[0071] 首先通过液相发酵制备霉菌毒素降解酶：
[0072] 将霉菌毒素降解菌置于发酵罐中的液态培养基中进行培养，其中霉菌毒素降解菌包括黄曲霉毒素降解菌、伏马毒素降解菌、呕吐毒素降解菌、玉米赤霉烯酮降解菌、T-2毒素降解菌、赭曲霉毒素降解菌。培养条件为30℃，时间为1.5d(天)，获得发酵菌液，发酵菌液中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶。
[0073] 其中，液态培养基中含有糖、蛋白胨等营养物质以及水，蛋白胨含量为15wt％。
[0074] 称取大麦糖渣700Kg，经检测其中含有的主要为呕吐毒素、伏马毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素以及赭曲霉毒素。接种上述获取的发酵菌液(其中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶)，接种量为大麦糖渣重量的1％，加入发酵剂1.4Kg，混合均匀后，置于发酵池中发酵，控制发酵温度为30℃，发酵36h，发酵完成后收集处理后的饲料底物。
[0075] 将处理后的饲料底物加工成微生物发酵饲料，饲料中添加有微量元素添加剂等营养物质。
[0076] 实施例4
[0077] 一种微生物饲料的制备方法，首先对饲料底物进行处理，将原料中的霉菌毒素降解掉。
[0078] 首先通过液相发酵制备霉菌毒素降解酶：
[0079] 将霉菌毒素降解菌置于发酵罐中的液态培养基中进行培养，其中霉菌毒素降解菌包括黄曲霉毒素降解菌、伏马毒素降解菌、呕吐毒素降解菌、玉米赤霉烯酮降解菌、T-2毒素降解菌、赭曲霉毒素降解菌。培养条件为35℃，时间为2d(天)，获得发酵菌液，发酵菌液中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶。
[0080] 其中，液态培养基中含有糖、蛋白胨等营养物质以及水，蛋白胨含量为15wt％。
[0081] 称取高粱以及干酒精糟(DDGS)的混合物700Kg，经检测其中主要含有呕吐毒素、伏马毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、赭曲霉毒素。接种上述获取的发酵菌液(其中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶)，接种量为底物重量的1.2％，加入发酵剂1Kg，混合均匀后，置于发酵池中发酵，控制发酵温度为40℃，发酵24h，发酵完成后收集处理后的饲料底物。
[0082] 将处理后的饲料底物加工成微生物发酵饲料，饲料中添加有微量元素添加剂等营养物质。
[0083] 实施例5
[0084] 一种微生物饲料的制备方法，首先对饲料底物进行处理，将原料中的霉菌毒素降解掉。
[0085] 首先通过液相发酵制备霉菌毒素降解酶：
[0086] 将霉菌毒素降解菌置于发酵罐中的液态培养基中进行培养，其中霉菌毒素降解菌包括黄曲霉毒素降解菌、伏马毒素降解菌、呕吐毒素降解菌、玉米赤霉烯酮降解菌、T-2毒素降解菌、赭曲霉毒素降解菌。培养条件为40℃，时间为2.5d(天)，获得发酵菌液，发酵菌液中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶。
[0087] 其中，液态培养基中含有糖、蛋白胨等营养物质以及水，蛋白胨含量为15wt％。
[0088] 称取玉米和小麦和大麦的混合物700Kg，经检测其中主要含有呕吐毒素、伏马毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、赭曲霉毒素。接种上述获取的发酵菌液(其中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶)，接种量为底物重量的1.5％，加入发酵剂0.5Kg，混合均匀后，置于发酵池中发酵，控制发酵温度为38℃，发酵30h，发酵完成后收集处理后的饲料底物。
[0089] 将处理后的饲料底物加工成微生物发酵饲料，饲料中添加有微量元素添加剂等营养物质。
[0090] 实施例6
[0091] 一种微生物饲料的制备方法，首先对饲料底物进行处理，将原料中的霉菌毒素降解掉。
[0092] 首先通过液相发酵制备霉菌毒素降解酶：
[0093] 将霉菌毒素降解菌置于发酵罐中的液态培养基中进行培养，其中霉菌毒素降解菌包括黄曲霉毒素降解菌、伏马毒素降解菌、呕吐毒素降解菌、玉米赤霉烯酮降解菌、T-2毒素降解菌、赭曲霉毒素降解菌。培养条件为28℃，时间为3d(天)，获得发酵菌液，发酵菌液中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶。
[0094] 其中，液态培养基中含有糖、蛋白胨等营养物质以及水，蛋白胨含量为15wt％。
[0095] 称取麸皮700Kg，经检测其中主要含有呕吐毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、伏马毒素、T-2毒素、赭曲霉毒素。接种上述获取的发酵菌液(其中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶)，接种量为麸皮重量的1.8％，加入发酵剂0.9Kg，混合均匀后，置于发酵池中发酵，控制发酵温度为25℃，发酵48h，发酵完成后收集处理后的饲料底物。
[0096] 将处理后的饲料底物加工成微生物发酵饲料，饲料中添加有微量元素添加剂等营养物质。
[0097] 实施例7
[0098] 一种微生物饲料的制备方法，首先对饲料底物进行处理，将原料中的霉菌毒素降解掉。
[0099] 首先通过液相发酵制备霉菌毒素降解酶：
[0100] 将霉菌毒素降解菌置于发酵罐中的液态培养基中进行培养，其中霉菌毒素降解菌包括黄曲霉毒素降解菌、伏马毒素降解菌、呕吐毒素降解菌、玉米赤霉烯酮降解菌、T-2毒素降解菌、赭曲霉毒素降解菌。培养条件为32℃，时间为3d(天)，获得发酵菌液，发酵菌液中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶。
[0101] 其中，液态培养基中含有糖、蛋白胨等营养物质以及水，蛋白胨含量为15wt％。
[0102] 称取麸皮700Kg，经检测其中主要含有呕吐毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、伏马毒素、赭曲霉毒素。接种上述获取的发酵菌液(其中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶)，接种量为麸皮重量的1.98％，加入发酵剂1.2Kg，混合均匀后，置于发酵池中发酵，控制发酵温度为25℃，发酵48h，发酵完成后收集处理后的饲料底物。
[0103] 将处理后的饲料底物加工成微生物发酵饲料，饲料中添加有微量元素添加剂等营养物质。
[0104] 实施例8
[0105] 一种微生物饲料的制备方法，首先对饲料底物进行处理，将原料中的霉菌毒素降解掉。
[0106] 首先通过液相发酵制备霉菌毒素降解酶：
[0107] 将霉菌毒素降解菌置于发酵罐中的液态培养基中进行培养，其中霉菌毒素降解菌包括黄曲霉毒素降解菌、伏马毒素降解菌、呕吐毒素降解菌、玉米赤霉烯酮降解菌、T-2毒素降解菌、赭曲霉毒素降解菌。培养条件为30℃，时间为2d(天)，获得发酵菌液，发酵菌液中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶。
[0108] 其中，液态培养基中含有糖、蛋白胨等营养物质以及水，蛋白胨含量为15wt％。
[0109] 称取麸皮700Kg，经检测其中主要含有呕吐毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、伏马毒素、赭曲霉毒素。接种上述获取的发酵菌液(其中含有黄曲霉毒素降解酶、伏马毒素降解酶、呕吐毒素降解酶、玉米赤霉烯酮降解酶、T-2毒素降解酶、赭曲霉毒素降解酶)，接种量为麸皮重量的0.53％，加入发酵剂1.35Kg，混合均匀后，置于发酵池中发酵，控制发酵温度为25℃，发酵48h，发酵完成后收集处理后的饲料底物。
[0110] 将处理后的饲料底物加工成微生物发酵饲料，饲料中添加有微量元素添加剂等营养物质。
[0111] 实施例9
[0112] 一种微生物饲料的制备方法，首先对饲料底物进行处理，将原料中的霉菌毒素降解掉。
[0113] 首先通过液相发酵制备霉菌毒素降解酶：
[0114] 将霉菌毒素降解菌置于发酵罐中的液态培养基中进行培养，其中霉菌毒素降解菌包括玉米赤霉烯酮降解菌、T-2毒素降解菌。培养条件为25℃，时间为3d(天)，获得发酵菌液，发酵菌液中含有T-2毒素降解酶以及玉米赤霉烯酮降解酶。
[0115] 其中，液态培养基中含有糖、蛋白胨等营养物质以及水，蛋白胨含量为15wt％。
[0116] 称取玉米和小麦700Kg，经检测其中含有的主要为T-2毒素，接种上述获取的发酵菌液(其中含有T-2毒素降解酶)，接种量为玉米和小麦重量的2％，加入发酵剂0.7Kg，混合均匀后，置于发酵池中发酵，控制发酵温度为25℃，发酵48h，发酵完成后收集处理后的饲料底物。
[0117] 将处理后的饲料底物加工成微生物发酵饲料，饲料中添加有微量元素添加剂等营养物质。
[0118] 试验例：
[0119] 将实施例1-9获得的微生物发酵饲料进行霉菌毒素含量检测，检测方法依照最新版国家标准所示方法进行。试验测试结果如表1和表2所示：
[0120] 表1实施例1-9中原料内霉菌毒素检测结果
[0121]
[0122] 表2实施例1-9得到的微生物发酵饲料内霉菌毒素检测结果
[0123]
[0124] 其中，我国对玉米和小麦中霉菌毒素的最大允许量分别为：黄曲霉毒素20μg/kg、伏马毒素500μg/kg、赭曲霉毒素20μg/kg、T-2毒素80μg/kg、呕吐毒素500μg/kg、玉米赤霉烯酮100μg/kg。可以看出，经过本发明提供的降解方法，显著的降低了玉米和小麦原料中的霉菌毒素。
[0125] 按以下方式测算霉菌毒素的降解率：
[0126] 降解率＝饲料中霉菌毒素总含量/原料中霉菌毒素总含量*100％
[0127] 经测算，使用本发明的制备方法可以将原料中的霉菌毒素降低75％-90％，效果显著，同时发酵菌液一直存在于获得的微生物发酵饲料中，可以长期保存，饲料不会受到霉菌毒素的二次污染，饲料经消化后也不会对环境造成二次污染。
[0128] 以上测试中，霉菌毒素总含量包含主要的呕吐毒素、伏马毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素以及赭曲霉毒素的总含量。
[0129] 对比例1
[0130] 采用同实施例1所述的方法培养霉菌毒素降解菌，并接种于与实施例1同批次购买的原料中，区别在于在接种发酵菌液48h后，再加入发酵剂，原料重量、加入发酵剂的量以及发酵菌种的接种量均与实施例1相同，最终获取微生物发酵饲料。
[0131] 对比例2
[0132] 采用同实施例1所述的方法培养霉菌毒素降解菌，并接种于与实施例1同批次购买的原料中，区别在于加入发酵剂48h后，再接种发酵菌液，然后保持48h，原料重量、加入发酵剂的量以及发酵菌种的接种量均与实施例1相同，最终获取微生物发酵饲料。
[0133] 对比例3
[0134] 选取与实施例1同批次购买的原料，直接加入发酵剂，原料重量、发酵剂的加入量与实施例1相同，最终获取微生物发酵饲料。
[0135] 分别测定对比例1-3获得的微生物发酵饲料中的霉菌毒素含量，测量结果见表3。
[0136] 表3对比例1-3中饲料中霉菌毒素检测结果
[0137]
[0138] 对比例4
[0139] 采用同实施例3所述的方法培养霉菌毒素降解菌，并接种于与实施例3同批次购买的原料中，区别在于在接种发酵菌液48h后，再加入发酵剂，原料重量、加入发酵剂的量以及发酵菌种的接种量均与实施例3相同，最终获取微生物发酵饲料。
[0140] 对比例5
[0141] 采用同实施例3所述的方法培养霉菌毒素降解菌，并接种于与实施例3同批次购买的原料中，区别在于加入发酵剂48h后，再接种发酵菌液，然后保持48h，原料重量、加入发酵剂的量以及发酵菌种的接种量均与实施例3相同，最终获取微生物发酵饲料。
[0142] 对比例6
[0143] 选取与实施例3同批次购买的原料，直接加入发酵剂，原料重量、发酵剂的加入量与实施例3相同，最终获取微生物发酵饲料。
[0144] 分别测定对比例4-6获得的微生物发酵饲料中的霉菌毒素含量，测量结果见表4。
[0145] 表4对比例4-6中饲料中霉菌毒素检测结果
[0146]
[0147] 由表3和表4可以看出，发酵菌液和发酵剂同时对饲料底物进行作用时，其效果比分步骤(不论是先加发酵菌液还是先加发酵剂)都会更好，说明发酵菌液和发酵剂同时作用，起到了协同增效的效果。
[0148] 以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
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