可控给药非聚合组合物
阅读：402发布：2020-08-09
专利汇可以提供可控给药非聚合组合物专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供了一种新型的液体组合物，适合于原位形成储库系统以用可控的方式传输 生物 活性物质。本发明的组合物包括：(a)一疏 水 非聚合载体材料；(b)一能与水混溶的生物可相容 有机 溶剂 ，其能溶解疏水非聚合材料；(c)由一两亲性分子和一在中性pH的水中具有净电荷的生物活性物质所形成的离子复合物。本发明还提供一种制造和使用该组合物的方法。，下面是可控给药非聚合组合物专利的具体信息内容。
1.一种生物活性物质的缓释液体组合物，包括：
(a)一疏水非聚合载体材料；
(b)一能与水混溶的药学上可接受的溶剂；和
(c)由一个在中性pH的水中具有净电荷的生物活性物质与一两亲性分子所形成的离子复合物。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中疏水非聚合液体载体材料包含一个或多个非聚合的酯或混合酯。
3.根据权利要求1所述的组合物，其中疏水非聚合载体材料是一高粘度液体，其在环境条件或生理条件下不结晶，并且37℃下粘度为至少5000cP。
4.根据权利要求2所述的组合物，其中疏水非聚合液体载体材料是由对具有低于20个羟基的多元醇用羧酸酯化而形成的。
5.根据权利要求4所述的组合物，其中多元醇选自如下组：2-24个碳原子的单官能的和多官能的醇、糖醇、单糖、二糖、寡糖和聚醚醇。
6.根据权利要求4所述的组合物，其中多元醇选自如下组：十二烷醇、己二醇、丙三醇、甘露醇、山梨醇、葡萄糖、果糖、蔗糖、肌糖、聚甘油、聚乙二醇等。
7.根据权利要求4所述的组合物，其中羧酸包括具有超过2个碳原子的有机酸，例如脂肪酸。
8.根据权利要求7所述的组合物，其中羧酸可以是饱和的、不饱和的、芳香族的(芳基和芳烷基)和线性的或支链结构。
9.根据权利要求7所述的组合物，其中羧酸选自如下组：乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、硫辛酸、己酸、庚酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、肉豆蔻酸、苯甲酸、乙醇酸、乳酸、ε-羟基己酸、辛酸、癸酸、正十二烷酸、十四烷酸、十六烷酸、十八烷酸、花生酸、廿二烷酸和/或其他脂肪酸。
10.根据权利要求1所述的组合物，其中疏水非聚合载体材料是乙酸异丁酸蔗糖酯(SAIB)。
11.根据权利要求1所述的组合物，其中药学上可接受的溶剂在25℃下按重量算至少
1％能在水中混溶。
12.根据权利要求11所述的组合物，其中药学上可接受的溶剂选自如下组：丙酮、苯甲醇、丁烯二醇、己内酰胺、己内酯、二甲基亚砜(DMSO)、乙醇、乙酸乙酯、乳酸乙酯、甘油、甘油缩甲醛、糖原质(四甘醇)、N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、聚乙二醇、甲氧基聚乙二醇、烷氧基聚乙二醇、碳酸丙烯酯、2-吡咯烷酮、三醋精、柠檬酸三乙酯和上述的组合。
13.根据权利要求1所述的组合物，其中生物活性物质是小分子、大分子、肽、蛋白质或酶。
14.根据权利要求1所述的组合物，其中生物活性物质的分子量除以生物活性物质的可电离基团的数目之后的值高于100道尔顿。
15.根据权利要求1所述的组合物，其中生物活性物质选自如下组：4-羟基苯乙胺、甲基苯丙胺、阿米替林、瑞波西汀、安非他酮、米氮平、文拉法辛、度洛西汀、氟西汀、帕罗西汀、依地普仑、西酞普兰、舍曲林、溴隐亭、培高利特、普拉克索、罗匹尼罗、卡麦角林、阿朴吗啡、麦角乙脲、阿霉素、多西环素、地尔硫卓(diltiazam)、环苯扎林、杆菌肽、诺斯卡品、红霉素、多粘菌素、万古霉素、去甲替林、奎尼丁、麦角胺、苯托品、维拉帕米、氟桂利嗪、丙咪嗪、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、阿莫西林、阿米卡星、阿贝卡星、班贝霉素、丁苷菌素、地贝卡星、双氢链霉素、健霉素、异帕米星、小诺米星(micronimicin)、奈替米星、巴龙霉素(paromycin)、核糖霉素(ribostamycin)、雷帕霉素、西索米星、链霉素和妥布霉素、链霉素和妥布霉素、乙胺嘧啶、纳曲酮、利多卡因、丙胺卡因、甲哌卡因、布比卡因、丁卡因、罗哌卡因与利培酮。
16.根据权利要求1所述的组合物，其中生物活性物质选自如下组：催产素、加压素、促肾上腺皮质激素(ACTH)、表皮生长因子(EGF)、血小板源生长因子(PDGF)、催乳激素、促黄体激素(luteinising hormone)、黄体生成素释放激素(LHRH)、LHRH激动剂、LHRH拮抗剂、生长激素(包括人类、猪和牛)、生长激素释放因子、胰岛素、红细胞生成素(包括带有红血球生成活性的所有蛋白质)、生长激素抑制素、胰高血糖素、白介素、α干扰素、β干扰素、γ干扰素、胃泌激素、四肽胃泌素、五肽促胃酸激素、尿抑胃激素、肠促胰液素、降血钙素、脑啡肽、内啡肽、血管紧缩素、促甲状腺素释放激素(TRH)、肿瘤坏死因子(TNF)、甲状旁腺素(PTH)、神经生长因子(NGF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞刺激因子(M-CSF)、肝素酶、血管内皮生长因子(VEG-F)、骨形成蛋白(BMP)、人心钠素(hANP)、胰高血糖素样肽(GLP-I)、艾塞那肽、酪酪肽(PYY)、肾素、缓激肽、杆菌肽、多黏菌素、黏菌素、短杆菌酪肽，短杆菌肽、环孢菌素(包括其合成类似物及其药学活性片段)、酶类、细胞因子、抗体、疫苗、抗生素、抗体、糖蛋白、卵泡刺激素、京都啡肽(kyotorphin)、促吞噬激素(taftsin)、胸腺生成素、胸腺肽、胸腺刺激素(thymostimulin)、胸腺体液因子、血清胸腺因子、集落刺激因子、胃动素、蛙皮素、强啡肽(dinorphin)、神经降压肽、雨蛙肽、尿激酶、激肽释放酶、肽物质类似物和拮抗剂、血管紧张肽II、血液凝血因子VII和IX、溶菌酶，短杆菌肽(gramicidines)、黑素细胞刺激素、甲状腺激素释放激素、促甲状腺激素、肠促胰酶素、胆囊收缩素、人胎盘催乳素、人绒毛膜促性腺激素、蛋白质合成促进因子、抑胃肽、血管活性肠肽、血小板源生长因子、及上述的合成类似物和改性物和药学活性片段。
17.根据权利要求1所述的组合物，其中两亲性分子的亲水部分是离子型的。
18.根据权利要求1所述的组合物，其中两亲性分子选自如下组：硫酸盐、磺酸盐、或者磺基琥珀酸盐以及上述的离子形式和离解产物。
19.根据权利要求1所述的组合物，其中两亲性分子选自如下组：具有3-16个碳原子的琥珀酸二烷基酯衍生物、琥珀酸二辛酯、苯磺酸、樟脑磺酸、(+)-(1S)-莰酮-10-磺酸、十二烷基硫酸、萘-2-磺酸、萘-1，5-二磺酸、对甲苯磺酸、硫酸胆固醇、庚烷磺酸、或上述的盐或离子(离解)形式。
20.根据权利要求1所述的组合物，其中组合物还包括一添加剂。
21.根据权利要求20所述的组合物，其中添加剂选自如下组：聚乳酸、聚乙醇酸交酯、聚己内酯、聚酸酐、聚原酸酯、聚二恶烷酮(polydioxanones)、聚缩醛、聚维酮(polyketals)、聚碳酸酯、聚磷酸酯(polyphosphoesters)、聚氧杂酯(polyoxaesters)、聚原碳酸酯(polyorthocarbonates)、聚磷腈、琥珀酸酯(succinates)、聚苹果酸、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚氧化纤维素(polyhydroxycellulose)、甲壳素、壳聚糖、透明质酸和上述的共聚物、三元共聚物和混合物。
22.根据权利要求20所述的组合物，其中添加剂选自如下组：半胱氨酸或者蛋
氨酸、d-α生育酚醋酸酯、消旋α维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基羟基苯甲醚(butylated hydroxyanidole)，叔丁基羟基茴香醚(butylatedhydroxyanisole)，丁基羟基醌(butylatedhydroxyquinone)，羟基茴香二丁酯(butylhydroxyanisol)，羟基香豆素(hydroxycomarin)，丁基羟基甲苯，脑磷脂(cephalm)，没食子酸乙酯，没食子酸丙酯，没食子酸辛酯，没食子酸月桂酯，羟苯丙酯(propylhydroxybenzoate)，三羟基丁酰苯(trihydroxybutyrophenone)，二甲基苯酚，二叔丁基苯酚(ditertbutylphenol)，维生素E和卵磷脂。
23.一种生物活性物质的缓释组合物，包括：
(a)乙酸异丁酸蔗糖酯；
(b)一能与水混溶的药学上可接受的溶剂；和
(c)由一个在中性pH的水中具有净电荷的生物活性物质与一两亲性分子所形成的离子复合物。
24.根据权利要求23所述的组合物，其中药学上可接受的溶剂选自如下组：苯甲醇、二甲基亚砜(DMSO)、乙醇、乳酸乙酯、甘油、甘油缩甲醛、糖原质(四甘醇)、N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、聚乙二醇、甲氧基聚乙二醇、烷氧基聚乙二醇、三醋精、柠檬酸三乙酯或者上述的组合。
25.根据权利要求23所述的组合物，其中生物活性物质选自如下的组：阿霉素、普拉克索、奥曲肽、亮丙瑞林或胰高血糖素样肽-1(GLP-1)。
26.根据权利要求23所述的组合物，其中两亲性分子选自如下组：琥珀酸二辛酯或者十二烷基硫酸。
27.根据权利要求23所述的组合物，其中乙酸异丁酸蔗糖酯与溶剂的比率为50∶50至95∶5。
28.根据权利要求23所述的组合物，其中乙酸异丁酸蔗糖酯与溶剂的比率为70∶30至90∶10。
可控给药非聚合组合物
技术领域
背景技术
[0002] 已经公开了疏水性非聚合材料、特别是高粘非聚合液体材料用作生物可降解系统，用于生物活性化合物的可控释放给药(Smith and Tipton，Pharmaceutical Research，13(9)，S300，1996)。疏水性非聚合材料通常基本上不溶于水。疏水非聚合材料可以是一高粘液体，其粘度在37℃下至少为5000cP，且在环境条件或者生理条件下不结晶。当这些材料与少量的增塑溶剂混合时，混合物与单独的非聚合物液体材料相比具有低得多的粘度。
这一低粘度溶液可以很容易与一生物活性化合物进行配制，而获得低粘度液体制剂，该低粘度液体制剂可以容易的对个体给药以原位形成高粘度的长效药剂。
这一低粘度溶液可以很容易与一生物活性化合物进行配制，而获得低粘度液体制剂，该低粘度液体制剂可以容易的对个体给药以原位形成高粘度的长效药剂。
[0003] 美国专利5747058、5968542、6051558和6992065公开了包含疏水非聚合液体载体材料的原位形成储库系统的代表性例子。这些专利中描述的组合物包含例如为乙酸异丁酸蔗糖酯(SAIB)的疏水性高粘度非聚合液体材料、水溶性或能与水混溶的有机溶剂、以及一生物活性物质。这样的组合物可以容易的制备以及以低粘度溶液的形式给目标给药。一旦进入身体，溶剂分散或扩散进入周围组织，这导致非聚合材料的析出或凝结，以形成封装有生物活性物质的高粘度凝胶、半固体或固体储库。接着通过储库的溶解、扩散和/或降解释放生物活性物质。
[0004] 非聚合载体材料通常通过酯或酯类键的水解进行降解。酯的裂解促进了酶或其他生物活性物质内的亲和基团，例如胺基。这一容易的降解有利于医药用途，但是对于制备稳定制剂而言，制剂的降解敏感性也是一个主要问题。每当生物活性物质与非聚合液体载体材料一起时，可以通过生物活性物质和非聚合载体材料之间的相互作用发生相同的降解。这样的相互作用对组合物的物理和化学性质造成不利影响，导致非聚合材料的不期望的降解和生物活性物质中的杂质的产生。载体材料与生物活性物质在制剂中的不稳定性导致了不能制备具有合理贮存期的合适组合物，以及妨碍了制剂通过给药形成稳定的储库以获得期望的释放性质。
[0005] 此外，由于非聚合载体材料的疏水性质，许多生物活性试剂，特别是疏水性肽与带电荷的和极性的蛋白质，可能与非聚合载体材料不相容，导致不稳定的液体制剂。当非聚合载体材料与未复合生物活性物质或其简单盐，例如醋酸酯或氯化盐，一起时，通常观察到相分离。配制、储存和原位储库形成过程中的相分离导致不均匀的制剂或储库，从而导致不可控的释放特性。此外，初始突释是这种类型的液体制剂的典型特性，这在现有技术美国专利5,747,058和5,968,542中得到了证实。不可控突释是不期望的，特别是对于具有窄治疗指数的生物活性物质。
[0006] 因此，有必要开发一种可控释放组合物，其能防止或最小化不期望的非聚合载体材料与生物活性物质之间的相互作用。还有必要开发一种可控释放组合物，其能作为一个非聚合载体材料和生物活性物质的单相均匀组合物而被配制和储存。还有必要开发这样的单相均匀组合物，其能提供具有低突释效应的储库。
发明内容
[0007] 本发明提供了一种新型的液体组合物，适合于原位形成储库系统以用可控的方式传输生物活性物质。本发明的组合物包括：(a)一疏水非聚合载体材料；(b)一能与水混溶的生物可相容有机溶剂，溶解疏水非聚合材料并显著降低组合物的粘度以方便制备和给药；(c)由一两亲性分子和一在中性pH的水中具有净电荷的生物活性物质形成的一离子复合物。其中，非聚合材料基本上不溶于水，并且可以是一种高粘液体，其37℃下的粘度至少5.000cP，并且在环境温度或生理条件下不结晶。本发明的组合物可以还包括一种添加剂，以获得期望的释放性质。本发明还提供一种制造和使用该组合物的方法。
[0008] 相应的，生物活性物质优选与两亲性分子一起以形成一离子复合物，该离子复合物基本上不溶于水或生物液体。接着生物活性物质的离子复合物分散到疏水非聚合载体材料在能与水混溶的例如为N-甲基-2-吡咯烷酮(MMP)的溶剂的溶液中，以形成一均匀溶液或均一悬浮液。通常的，当一未复合的生物活性物质或其简单盐，例如醋酸盐或盐酸盐，与在有机溶剂中的疏水非聚合材料一起时，会发生相分离。然而，出乎意料的，发现使用本发明的生物活性物质与两亲性分子的离子复合物能防止相分离或使相分离最小化，以保持制剂的物理稳定性。此外，未复合的生物活性物质或其例如为醋酸盐或盐酸盐的简单盐在配制过程和接下来的存储过程中易于化学降解。通过本发明的生物活性物质与两亲性分子的复合能防止或最小化所述化学降解。组合物的增强的化学和物理稳定性将使得可以开发出一具有期望释放性质的和合理保质期的稳定产品。
[0009] 当本发明的非聚合液体组合物与水环境接触时，例如与患者的身体中的生物液体接触时，水溶性或能与水混溶的溶剂分散或扩散到周围的水或生物液体中。同时，疏水非聚合液体载体材料沉淀或凝结而形成一高粘凝胶或固体储库，其中圈闭或封装有生物活性物质。由于溶剂的快速扩散，通常在储库的形成过程中观察到生物活性物质的高初期突释。然而，出乎意料的发现本发明的生物活性物质与合适的两亲性分子的复合物显著的降低了突释，并且相对于包含未复合的生物活性物质或其例如为醋酸盐的简单盐的制剂，改善了生物活性物质的整体释放曲线。一旦储库形成，通过非聚合载体材料的溶解、扩散和/或降解从非聚合基体中释放生物活性物质。
[0010] 根据本发明，组合物可选的包括改进组合物的添加剂，以获得生物活性物质的期望释放曲线。添加剂包括但不限于突释效应降低材料、释放速率延迟剂、释放速率加速剂、增溶剂等。添加剂可以是聚合或非聚合材料，包括生物可降解的或非生物可降解的聚合物、碳水化合物或碳水化合物衍生物、有机或无机化合物。
[0011] 本发明的组合物可以是能使用注射器或类似装置容易注射的粘性或非粘性液体、或凝胶。组合物可以通过皮下注射、肌内注射、腹腔内注射或者皮内注射给药，以在原位形成储库。组合物还可以口服或局部给药或经粘膜给药。当对目标的身体给药时，生物活性物质的可控释放能控制一段期望的时间，这取决于系统的构成。通过适当的选择非聚合载体材料和其他赋形剂，生物活性物质的可控释放的时间可以被控制在从数周到一年的时间段内。
[0012] 本发明的其他目标或特征在通过下文的详细描述再结合附图将变得清楚。可以理解的是，附图仅被设计用于阐述的目的，而非作本发明的限制性定义，用作所附权利要求书的参考。应该进一步被理解的是附图并不一定是按比例画的，除非指出，他们仅用来概念性的描述这方面的结构和步骤。
附图说明
[0013] 附图中：
[0014] 图1所示是制剂在室温下1小时(a)和24小时(b)拍的照片。
[0015] 图2所示是奥曲肽从包含(a)OCT-Ac；(b)OCT-SDS；(c)OCT-DSS的SAIB/NMP制剂中的体外释放。
[0016] 图3所示是亮丙瑞林从包含(a)LA-Ac；(b)LA-SDS；(c)LA-DSS；(d)LA-OL的SAIB/NMP制剂中的体外释放。
[0017] 图4所示是普拉克索从包含(a)PPL-HCl和(b)PPL-SDS的SAIB/NMP制剂中的体外释放。
具体实施方式
[0018] 本发明提供了一种非聚合液体组合物，适合于原位形成药性持久的储库系统以用持续的且可控的方式传输生物活性物质。本发明的优选的非聚合液体组合物是至少一疏水非聚合载体材料、一生物活性物质、一两亲性分子以及一水溶性或可与水混溶的生物可相容溶剂的组合。优选的，生物活性物质与两亲性分子一起以形成一离子复合物，该离子复合物基本上不溶于水。可选的，可以包括添加剂以改进组合物，从而获得期望的释放特性。组合物可以是粘性的或非粘性的液体形式。组合物是均匀溶液或均质悬浮液。本发明的所有组分在配制过程和合适条件下储存过程中是生物可相容的和稳定的。
[0019] 本发明的组合物优选是能通过注射器或任何其它类似装置注射的。组合物可以通过皮下注射、肌内注射、腹腔内注射或者皮内对目标的身体注射给药，以在原位形成储库。组合物还可以口服或局部给药或经粘膜给药。当对一目标的身体给药时，通过接触水环境或体液，溶剂分散或扩散到周围液体中，疏水非聚合载体材料析出或凝结，以形成一粘性凝胶、半固体或固体储库。储库可以是多孔的或非孔的。包含的生物活性物质基本上被圈闭在储库内，并在一段时间内逐渐释放。优选的，本发明的组合物的24小时内的初始释放小于20％、更优选的小于10％、最优选的小于5％。通过适当的选择非聚合载体材料和组合物的其他组分，生物活性物质的可控释放的时间可以被控制在从数周到一年的时间段内。
[0020] 本文中所使用的，术语“一”、“一种”等的用意是被解释为“一个或多个”以及“至少一个”，除非有明确指示。
[0021] 载体材料是任何生物可降解的、生物可相容的以及基本上不溶于水和生物液体的疏水非聚合材料。疏水非聚合载体材料优选是一高粘液体，其粘度在37℃下至少为5000cP，且在环境条件或者生理条件下不结晶。术语“疏水”指的是分子不易于溶解或混合于水或被水弄湿的物理性质。特别的在本文中所使用的，其指材料在水中的溶解度按重量算在25℃时小于1％。术语“非聚合”指的是在酯的酸部分具有基本上不重复单元的酯或混合酯。现有技术美国专利5,747,058和5,968,542中描述了疏水非聚合液体载体材料的一些非限制性例子，这些专利的全部内容通过引用全部并入本文。
[0022] 特别的，疏水非聚合载体材料可以是一个或多个非聚合酯或混合酯。代表性的酯由被羧酸酯化的具有少于20个羟基基团的多元醇形成。合适的多元醇包括2-24个碳原子的单官能的和多官能的醇、糖醇、单糖、二糖、寡糖和聚醚醇。更特别的，多元醇可以是十二烷醇、己二醇、丙三醇、甘露醇、山梨醇、葡萄糖、果糖、蔗糖、肌糖、聚甘油、聚乙二醇等。
[0023] 用于形成疏水非聚合载体材料的羧酸包括具有超过两个碳原子的有机酸，例如脂肪酸。这些羧酸可以是饱和的、不饱和的、芳香族的(芳基和芳烷基)和线性的或支链结构。这些羧酸还可以具有一个或多个羟基基团或其他基团，例如环、硝基等。更特别的，这些羧酸包括乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、硫辛酸、己酸、庚酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、肉豆蔻酸、苯甲酸、乙醇酸、乳酸、D-羟基己酸、辛酸、癸酸、正十二烷酸、十四烷酸、十六烷酸(hexadecanoic acid)、十八烷酸(octadecanoic acid)、花生酸(eicosanoic acid)、廿二烷酸和其他脂肪酸。
[0024] 疏水的非聚合载体材料优选为生物可降解的，且不产生任何非生物可相容性的或有毒的降解产物。当疏水非聚合载体材料与可与水混溶的溶剂混合时，能够获得具有低粘度的溶液。低粘度溶液可以容易的与生物活性物质一起用于制备本发明的组合物。低粘度使得组合物能容易的施加到目标的身体。组合物的特性可以根据参数而变化，参数例如为非聚合材料在溶剂中的可混溶性、制剂中非聚合材料的浓度、生物活性物质的浓度和/或是否有添加剂。可以调整组合物的这些参数以获得期望特性。
[0025] 在一优选的实施方式中，乙酸异丁酸蔗糖酯(SAIB)用作疏水的非聚合载体材料。SAIB是用两醋酸和六异丁酸基团对蔗糖酯化的混合酯。该酯是完全非结晶的，并且其粘度在30℃下超过100000cP。酯的粘度可以通过轻微升高温度或添加溶剂而显著降低。在一实施方式中，SAIB被加热，并与生物活性物质混合以制备一悬浮液。可选择的，SAIB可以混有大量的不同生物可相容的溶剂，以获得低粘度溶液，该溶液可以很容易的与生物活性物质一起进行配制。
[0026] 在本发明的组合物中可供选用的合适溶剂为生物可相容的且水溶性的或能与水混溶分散的。本文中所使用的，术语“溶解”和“混溶”是等同的，可以交换使用，指的是溶剂在水中的25℃的溶解度按重量计至少1％，优选为至少3％，更优选的至少7％。当与疏水非聚合载体材料一起时，溶剂能显著降低混合物的粘度以形成一较低粘度液体载体材料。这样的较低粘度液体组合物可以进一步的与生物活性物质一起配制，以用于可控释放给药。合适溶剂的非限制性例子包括丙酮、苯甲醇、丁烯二醇、己内酰胺、己内酯、二甲基亚砜(DMSO)、乙醇、乙酸乙酯、乳酸乙酯、甘油、甘油缩甲醛、糖原质(四甘醇)、N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、聚乙二醇、甲氧基聚乙二醇、烷氧基聚乙二醇、碳酸丙烯酯、2-吡咯烷酮、三醋精、柠檬酸三乙酯和上述的组合。
[0027] 本文中所使用的，术语“生物活性物质”指的是包括具有诊断和/或治疗特性的任何材料，包括但不限于小分子、大分子、肽、蛋白质或酶。治疗特性的非限制性例子为抗代谢、抗真菌、抗炎、抗高血压、抗精神病、镇痛、抗糖尿病、催眠、镇静、麻醉、抗癌、抗感染、抗菌、抗病毒、激素、营养、兴奋、和拮抗特性。
[0028] 更具体的说，本发明的合适的生物活性物质包括可离子化的、在中性pH的水中具有净电荷并能与一两亲性分子形成一离子复合物的任何化合物。优选的所述的化合物包括一电子供体碱基，例如碱性氮原子，例如胺、亚胺或环氮。本发明的生物活性物质包括，但不限于，阿霉素、4-羟基苯乙胺、甲基苯丙胺、阿米替林、瑞波西汀、安非他酮、米氮平、文拉法辛、度洛西汀、氟西汀、帕罗西汀、依地普仑、西酞普兰、舍曲林、溴隐亭、培高利特、普拉克索、罗匹尼罗、卡麦角林、阿朴吗啡、麦角乙脲、多西环素、地尔硫卓(diltiazam)、环苯扎林、杆菌肽、诺斯卡品、红霉素、多粘菌素、万古霉素、去甲替林、奎尼丁、麦角胺、苯托品、维拉帕米、氟桂利嗪、丙咪嗪、卡那霉素、新霉素、阿莫西林、阿米卡星、阿贝卡星、班贝霉素、丁苷菌素、地贝卡星、双氢链霉素、健霉素、异帕米星、小诺米星(micronimicin)、奈替米星、巴龙霉素(paromycin)、核糖霉素(ribostamycin)、雷帕霉素、西索米星、链霉素和妥布霉素、链霉素和妥布霉素、乙胺嘧啶、纳曲酮、利多卡因、丙胺卡因、甲哌卡因、布比卡因、丁卡因、罗哌卡因、氟哌啶醇(haloperidone)与利培酮。
[0029] 本发明的生物活性物质还包括催产素、加压素、促肾上腺皮质激素(ACTH)、表皮生长因子(EGF)、血小板源生长因子(PDGF)、催乳激素、促黄体激素(luteinising hormone)、黄体生成素释放激素(LHRH)、LHRH激动剂、LHRH拮抗剂、生长激素(包括人类、猪和牛)、生长激素释放因子、胰岛素、红细胞生成素(包括带有红血球生成活性的所有蛋白质)、生长激素抑制素、胰高血糖素、白介素、α干扰素、β干扰素、γ干扰素、胃泌激素、四肽胃泌素、五肽促胃酸激素、尿抑胃激素、肠促胰液素、降血钙素、脑啡肽、内啡肽、血管紧缩素、促甲状腺素释放激素(TRH)、肿瘤坏死因子(TNF)、甲状旁腺素(PTH)、神经生长因子(NGF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞刺激因子(M-CSF)、肝素酶、血管内皮生长因子(VEG-F)、骨形成蛋白(BMP)、人心钠素(hANP)、胰高血糖素样肽(GLP-I)、艾塞那肽、酪酪肽(PYY)、肾素、缓激肽、杆菌肽、多黏菌素、黏菌素、短杆菌酪肽，短杆菌肽、环孢菌素(其中包括合成类似物及其药学活性片段)、酶类、细胞因子、抗体、疫苗、抗生素、抗体、糖蛋白、卵泡刺激素、京都啡肽(kyotorphin)、促吞噬激素(taftsin)、胸腺生成素、胸腺肽、胸腺刺激素(thymostimulin)、胸腺体液因子、血清胸腺因子、集落刺激因子、胃动素、蛙皮素、强啡肽(dinorphin)、神经降压肽、雨蛙肽、尿激酶、激肽释放酶、肽物质类似物和拮抗剂、血管紧张肽II、血液凝血因子VII和IX、溶菌酶，短杆菌肽(gramicidines)、黑素细胞刺激素、甲状腺激素释放激素、促甲状腺激素、肠促胰酶素、胆囊收缩素、人胎盘催乳素、人绒毛膜促性腺激素、蛋白质合成促进因子、抑胃肽、血管活性肠肽、血小板源生长因子、及上述的合成类似物和改性物和药学活性片段。
[0030] 根据本发明，生物活性物质与一两亲性分子通过离子相互作用复合。与两亲性分子的联合稳定了本发明的组合物中的生物活性物质。复合物与其他制剂组分一起生成的给药系统，具有实际上足够的稳定性以提供一物理上一致的可控给药系统。更特定的，两亲性分子用于防止或最小化生物活性物质的化学降解，以保持本发明的组合物的物理化学稳定性，并降低生物活性物质从组合物所形成的储库中的初始突释。这样的系统可以用于一致性治疗各种疾病患者。
[0031] 本发明的合适的两亲性分子是具有疏水部分和亲水部分的任何材料。两亲性分子的亲水部分是离子的，且优选为阴离子。两亲性分子可以是一有机硫酸、有机磺酸、有机磷酸或者有机羧酸。特别的，优选为有机硫酸和有机磺酸。两亲性分子还可以是分子的不同盐或离子(离解)形式。两亲性分子的疏水部分可以是任何疏水基团例如烷基、芳基或芳烷基。疏水部分可以是饱和的、不饱和的、芳香族的(芳基和芳烷基)和线性的或支链结构。疏水部分优选是至少4个碳原子的烷基或取代烷基。两亲性分子与生物活性物质一起以形成一离子复合物，该离子复合物在环境条件下基本上不溶于水。术语“基本上不溶”指的是在环境条件下复合物按重量计的溶解度为小于5％，优选为小于1％。
[0032] 本发明的一些特别的两亲性分子的例子包括但不限于单C12-18-烷基硫酸钠盐、具有3-16个碳原子的琥珀酸二烷基酯衍生物、琥珀酸二辛酯、苯磺酸、萘-1，5-二磺酸、樟脑磺酸、(+)-(1S)-莰酮-10-磺酸、十二烷基硫酸、对甲苯磺酸、萘-2-磺酸、硫酸胆固醇、庚烷磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、油酸、棕榈酸、亚甲基双羟萘酸、苯甲酸、硬脂酸、十一烯酸和磷脂。这些例子还包括分子的不同盐或离子(离解)形式。
[0033] 根据本发明，组合物可选的包括改进组合物的添加剂，以获得生物活性物质的期望释放曲线。可以包括添加剂以调节释放速度和稳定生物活性物质。合适的添加剂可以是任一聚合的或非聚合材料，包括生物可降解的或非生物可降解的聚合物、碳水化合物或碳水化合物衍生物、有机或无机化合物。
[0034] 美国专利5,747,058描述了一些合适的添加剂，该专利的全部内容通过引用被并入本文。优选的，合适的添加剂是生物可相容的和/或生物可降解的聚合物。这样的聚合物包括但不限于聚乳酸、聚乙醇酸交酯、聚己内酯、聚酸酐、聚胺、聚氨酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚二恶烷酮(polydioxanones)、聚缩醛、聚维酮(polyketals)、聚碳酸酯、聚磷酸酯(polyphosphoesters)、聚氧杂酯(polyoxaesters)、聚原碳酸酯(polyorthocarbonates)、聚磷腈、琥珀酸酯(succinates)、聚苹果酸、聚氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚氧化纤维素(polyhydroxycellulose)、甲壳素、壳聚糖、透明质酸和上述的共聚物、三元共聚物和混合物。
[0035] 根据本发明，组合物可选的包括还原剂、抗氧化剂和自由基清除剂以稳定组合物。例子有，但不限于，半胱氨酸或者蛋氨酸、d-α生育酚醋酸酯、消旋α维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯、丁基羟基苯甲醚(butylatedhydroxyanidole)，叔丁基羟基茴香醚(butylated hydroxyanisole)，丁基羟基醌(butylatedhydroxyquinone)，羟基茴香二丁酯(butylhydroxyanisol)，羟基香豆素(hydroxycomarin)，丁基羟基甲苯，脑磷脂(cephalm)，没食子酸乙酯，没食子酸丙酯，没食子酸辛酯，没食子酸月桂酯，羟苯丙酯(propylhydroxybenzoate)，三羟基丁酰苯(trihydroxybutyrophenone)，二甲基苯酚，二叔丁基苯酚(ditertbutylphenol)，维生素E和卵磷脂。
[0036] 相应的，本发明的组合物可以容易的制备。在一实施方式中，生物活性物质和两亲性分子的复合物可以以任何合适的方式制备。例如，可以添加溶液形式的或不是溶液形式的适量的两亲性分子至生物活性物质的一合适溶液中，例如，水溶液中，以从溶液中沉淀形成复合物。然后使用合适的方式回收沉淀物，例如使用离心分离或过滤。在另一实施方式中，生物活性物质和两亲性分子都溶解在水中，然后将两种溶液混合。通过接触，生物活性物质和两亲性分子之间发生络合，并形成沉淀物。在另一实施方式中，生物活性物质和两亲性分子都溶解在一有机溶剂中，然后通过移除副产物和蒸发溶剂回收复合物。
[0037] 复合物中生物活性物质与两亲性分子的比率优选为以摩尔计大约0.1∶1至大约10∶1。更优选的，比率的化学计量基于生物活性物质和两亲性分子的带电官能团的数目。为了获得最佳的络合和接下来的制剂，生物活性物质的分子量除以生物活性物质的电离(带电的)基团数的值优选为高于100道尔顿。获得的生物活性物质与两亲性分子的复合物优选为基本上不溶于水。这样的复合物可以与疏水非聚合载体材料、溶剂和其他可选的添加剂一起形成一均一制剂。惊奇的发现两亲性分子和生物活性物质的联用防止或最小化了生物活性物质的降解，保持了本发明的组合物的物理化学稳定性，并降低了生物活性物质从组合物的初始突释。因此，本发明的组合物适用于在合适条件下在合理的保存期限内存储。
[0038] 本文中所使用的，术语“可电离基团”指的是能通过增加或移除一个或多个电子获得净电荷的一原子或一原子基团。
[0039] 根据本发明，组合物优选是一均一溶液或均质悬浮液。保持组合物的一致性或均匀性是可重现给药和获得一致的储库系统以对生物活性物质的可控释放输送的关键。特别的，组合物的一致性或均匀性可以至少通过在给药前重构或立即混合获得。优选的，组合物的一致性或均匀性能够在制备、储存和给药过程中一直保持。
[0040] 根据本发明，组合物包含相对于组合物的总重的大约99.5％至大约5％的疏水非聚合材料，优选的在95％至25％之间。组合物还包括大约0％至大约50％的生物可相容溶剂，大约0.1％至大约40的生物活性物质和足量的两亲性分子以稳定制剂和生物活性物质。组合物还包括大约1％至大约25％的一种或多种添加剂。
[0041] 在一实施方式中，生物活性物质先与一两亲性分子形成一基本不溶于水的复合物。该复合物随后与本发明的其余组分一起形成一完全输送系统用于包装和存储。优选的，组合物以即用型配制被包装在注射器中。可选择的，复合物可以在对目标的身体给药之前，先立即与本发明的其余组分混合。
[0042] 在一优选的实施方式中，乙酸异丁酸蔗糖酯(SAIB)用作疏水的非聚合载体材料，选用NMP作为溶剂。生物活性物质选自由肽和蛋白质构成的组，例如奥曲肽、亮丙瑞林、或胰高血糖素样肽-1(GLP-1)。生物活性物质优选为与一两亲性分子一起，优选为与硫代琥珀酸二辛酯或硫酸十二酯一起，以形成一基本不溶于水的复合物。获得的复合物可以与SAIB/NMP溶液一起形成可控释放制剂。
[0043] 在另一实施方式中，本发明的组合物的释放速度在体外检测。在一4ml的玻璃瓶中，将每个制剂大约0.1ml注入3ml释放缓冲液(PBS7.4，包含0.1％叠氮化钠)中。将瓶子在37℃下培养，在不同时间点取样。在每个时间点，移除2ml的释放介质，替换为2ml的新释放介质。通过HPLC使用一YMC-Pack ODS-120A柱或等同物分析收集样品的生物活性物质的浓度和完整性。每个制剂使用三份样品。
[0045] 本文中所使用的，术语“给药”指的是对一目标通过合适的途径分配、分发或涂敷一组合物(即，药物制剂)以便输送该组合物至目标的期望位置。通常可以通过皮下、肌内、腹腔内或皮内以及通过口腔、直肠、阴道或者鼻对目标施加组合物，以基于已知参数提供期望剂量的生物活性物质，用于使用生物活性物质治疗各种疾病。
[0046] 本文中所使用的术语“可控给药或可控释放给药”包括，例如，在给药后，体内生物活性物质的持续输送一段时间，优选的至少几天到几周或几月。生物活性物质的可控给药或可控释放给药可以被证明，例如通过药剂一段时间的持续治疗效果(例如，对于亮丙瑞林，肽的可控给药可以通过一段时间的持续的睾酮抑制来证明)。可选择的，药剂的可控给药可以通过检测一段时间内药剂在体内的存在来证明。
[0048] 实施例：
[0049] 下列实施例阐述了本发明的特征和范围。下列实施例不应被认为是任何限制，而应被理解为仅意图解释如何根据本发明制备可用的药物输送系统的教导。
[0050] 实施例1.包含醋酸奥曲肽的制剂的制备和体外释放
[0051] 通过混合2g的NMP和8g的SAIB，然后轻轻混合，制备重量百分比浓度为80％的乙酸异丁酸蔗糖酯(SAIB)在N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)中的溶液。获得一清澈的低粘度溶液。然后将60mg的醋酸奥曲肽溶解在100μl的NMP中，然后与900μl的SAIB在NMP中的溶液(80％)混合搅匀以获得一包含大约6％的醋酸奥曲肽的制剂。
[0052] 在一玻璃瓶中，将大约0.1ml的奥曲肽制剂注入3ml释放缓冲液(PBS7.4，包含0.1％叠氮化钠)中。将瓶子在37℃下培养，在不同时间点取样。在每个时间点，移除2ml的释放介质，加入2ml的新释放介质。通过HPLC使用一YMC-Pack ODS-120A柱分析释放样品的肽浓度和完整性。
[0053] 观察：当100μl的醋酸奥曲肽在NMP中的溶液与900μl的SAIB在NMP中的溶液(80％)混合时，令人惊奇的获得一具有相当多的聚集体的不透明悬浮液。由于SAIB和醋酸奥曲肽在NMP中都相当可溶，当两种在相同溶剂(NMP)中的溶液混合后，期望获得一清澈溶液。这表明奥曲肽或醋酸奥曲肽与SAIB不是很相容。当悬浮液在室温中放置时，在几个小时内就可以观察到相分离现象，在房间温度下放置一夜后获得两个区别明显的相。因此，这样的制剂不适用于稳定的单相的奥曲肽在SAIB/NMP中的溶液制剂的制备。
[0054] 对存储在室温下各种时间段的制剂进行HPLC分析，出乎意料的发现在色谱图上有几个特别不同的峰。那些峰在开始时并没有从制剂中观察到，表明产生了杂质或者奥曲肽的降解产物。这些峰的强度随着时间的增加而增加，同时奥曲肽的峰随着时间下降。这一结果表明制剂中生物活性物质和其他赋形剂的化学稳定性妨碍了单相稳定产品的成功开发。因此，这一类型的制剂必须进行改进以适用于各种生物活性物质的可控释放给药。
[0055] 实施例2.奥曲肽和十二烷基硫酸盐的复合物的制备(OCT-SDS)
[0056] 215.2mg的十二烷基硫酸钠(SDS，MW 288.38，98.5％)被溶解在20ml水中(10.76mg/ml，36.75mM)。251.7mg(0.212mmol)的醋酸奥曲肽(MW1019.2+120(醋酸)，85.8％)被溶解在水中(10ml)。奥曲肽溶液与11.56ml的SDS溶液混合以按化学计量比形成复合物。通过离心分离沉淀，然后在真空下干燥。
[0057] 实施例3.亮丙瑞林和十二烷基硫酸盐的复合物的制备(LA-SDS)
[0058] 215.2mg的十二烷基硫酸钠(SDS，MW 288.38，98.5％)被溶解在20ml水中(10.76mg/ml，36.75mM)。201.4mg(0.142mmol)的醋酸亮丙瑞林(MW1209.4，85.1％)被溶解在10ml水中(14mM)。亮丙瑞林溶液与7.619ml的SDS溶液混合以按化学计量比形成复合物。通过离心分离沉淀，然后在真空下干燥。
[0059] 实施例4.奥曲肽和多库酯的复合物的制备(OCT-DSS)
[0060] 1，4-二(2-乙基己基)硫代丁二酸钠或多库酯钠(DSS，C2OH37NaO7S，MW：444.56，506.6mg，1.139mmol)被溶解在异丙醇(20ml)中(56.97mM)，201.4mg(0.17mmol)的醋酸奥曲肽(MW 1019.2，85.8％)被溶解在10ml水中(17mM)。将5.968ml的DSS溶液与奥曲肽溶液混合，并搅拌大约一小时。通过离心分离复合物，用水清洗获得的沉淀，然后在真空下干燥。
[0061] 实施例5.亮丙瑞林和多库酯的复合物的制备(LA-DSS)
[0062] 1，4-二(2-乙基己基)硫代丁二酸钠(DSS，C2OH37NaO7S，MW：444.56，506.6mg，1.139mmol)被溶解在异丙醇(20ml)中(56.97mM)，250mg(0.176mmol)的醋酸亮丙瑞林(MW
1209.4，85.1％)被溶解在水中(10ml)。将6.178ml的DSS溶液与亮丙瑞林溶液混合，并搅拌大约一小时。通过离心分离复合物，用水清洗获得的沉淀，然后在真空下干燥。
1209.4，85.1％)被溶解在水中(10ml)。将6.178ml的DSS溶液与亮丙瑞林溶液混合，并搅拌大约一小时。通过离心分离复合物，用水清洗获得的沉淀，然后在真空下干燥。
[0063] 实施例6.亮丙瑞林油酸酯的制备(LA-OL)
[0064] 77.4mg的醋酸亮丙瑞林(MW 1209.4，84.2％)被溶解在1ml去离子水中(0.0539mmol)。添加31.38mg的油酸(#A0241935，MW 282.46，97％)以获得LA∶OL的摩尔比率为1∶2。通过混合溶液形成一白色沉淀。通过离心分离复合物，用水清洗获得的沉淀，然后在真空下干燥。
[0065] 实施例7.包含奥曲肽的制剂的制备和体外表征
[0066] 将奥曲肽醋酸酯(OCT-Ac)、奥曲肽十二烷基硫酸盐(OCT-SDS)和奥曲肽多库酯(OCT-DSS)复合物粉末溶解在NMP中。接着将包含奥曲肽的不同盐形式的溶液与SAIB在NMP中的溶液(90％w/w)完全混合。如表1所示，所有制剂中奥曲肽的含量大约6％，SAIB浓度为大约70％。
[0067] 表1包含奥曲肽的制剂
[0068]制剂 肽(mg) SAIB(mg) NMP(mg) 肽含量(％)
OCT-Ac/SAIB/NMP 65.9 653.5 281.8 6％
OCT-SDS/SAIB/NMP 88.5 629.5 280.1 6％
OCT-DSS/SAIB/NMP 104.0 619.1 278.9 6％
OCT-Ac/SAIB/NMP 65.9 653.5 281.8 6％
OCT-SDS/SAIB/NMP 88.5 629.5 280.1 6％
OCT-DSS/SAIB/NMP 104.0 619.1 278.9 6％
[0069] 当OCT-Ac与SAIB/NMP溶液一起时，立即发生相分离。观察到相当多的固体沉淀，如实施例1所观察的那样获得一不均一的制剂。不均一制剂将阻塞针头，不适用于注射。当奥曲肽和十二烷基硫酸钠的结合物(OCT-SDS)与SAIB/NMP溶液一起时，获得一均质悬浮液，适用于注射。这一制剂可以在给药前立即制备，或者通过调节制剂参数而适用于存储一段时间。当奥曲肽和多库酯钠的结合物与SAIB/NMP溶液一起时，获得一透明的均匀溶液，且不发生相分离。这一制剂可以被包装并在室温下长时间存储。
[0070] 此外，发现奥曲肽在包含OCT-Ac的制剂中不稳定，这在上述实施例1中得到了证实。如表2所示，当组分混合时，立即产生了奥曲肽的不纯物。两个小时后，大约4％的奥曲肽降解或反应。5天后超过半数的奥曲肽降解，表明系统不适用于肽的可控给药。然而，出乎意料的发现，从包含OCT-SDS和OCT-DSS的制剂中检测到很少或没有奥曲肽的降解，即使是室温下几天后(表2)。
[0071] 表2：室温下奥曲肽在制剂中一段时间的稳定性
[0072]时间(天) OCT-Ac/SAIB/NMP OCT-SDS/SAIB/NMP OCT-DSS/SAIB/NMP
0.08 96.1 99.4 100
1 90.8 99.3 99.5
2 71.9 100 100
5 48.7 100 99.8
7 41.4 100 98.9
0.08 96.1 99.4 100
1 90.8 99.3 99.5
2 71.9 100 100
5 48.7 100 99.8
7 41.4 100 98.9
[0073] 实施例8.包含奥曲肽的制剂的制备和体外表征
[0074] 将奥曲肽醋酸酯(OCT-Ac)和奥曲肽十二烷基硫酸盐(OCT-SDS)的复合物粉末溶解在NMP中。接着将包含奥曲肽的不同盐形式的溶液与SAIB在NMP中的溶液(90％w/w)完全混合。如表3所示，所有制剂中最终奥曲肽的含量大约6％，SAIB浓度为大约80％。
[0075] 表3包含奥曲肽的制剂
[0076]制剂 肽(mg) SAIB(mg) NMP(mg) 肽含量(％)
OCT-Ac/SAIB/NMP 62.9 745.6 187.3 6％
OCT-SDS/SAIB/NMP 61.4 467.3 130.8 6％
OCT-Ac/SAIB/NMP 62.9 745.6 187.3 6％
OCT-SDS/SAIB/NMP 61.4 467.3 130.8 6％
[0077] 尽管使用了更高浓度的SAIB(80％vs.实施例7中的70％)，当OCT-Ac与SAIB/NMP溶液一起时，相分离发生得甚至比实施例7中观察到的更快。在制剂的底部形成相当多的聚集体(图1(a))。这一不均一制剂显然不适用于注射以原位形成一个一致的储库系统用于可控释放。当OCT-SDS与SAIB/NMP溶液一起时，获得一均质乳状悬浮液，适用于注射。甚至24小时后，悬浮液中观察不到明显的相分离(图(b))，可以容易的使用注射器通过注射给药。
[0078] 实施例9.不同制剂的奥曲肽的体外释放
[0079] 通过将醋酸奥曲肽(OCT-Ac)、奥曲肽十二烷基硫酸盐(OCT-SDS)和奥曲肽多库酯(OCT-DSS)复合物粉末与SAIB在NMP中的溶液(90％w/w)混合制备制剂。如表4所示的每个制剂中奥曲肽的含量大约6％。
[0080] 表4包含奥曲肽的制剂
[0081]制剂 肽(mg) SAIB/NMP(mg) 肽含量(％)
OCT-Ac/SAIB/NMP 66.0 934.0 6％
OCT-SDS/SAIB/NMP 88.6 911.4 6％
OCT-DS S/SAIB/NMP 104.1 895.9 6％
OCT-Ac/SAIB/NMP 66.0 934.0 6％
OCT-SDS/SAIB/NMP 88.6 911.4 6％
OCT-DS S/SAIB/NMP 104.1 895.9 6％
[0082] 使用一小份悬浮液进行体外释放。在一4ml的玻璃瓶中，将包含奥曲肽的每个制剂大约0.1ml注入3ml释放缓冲液(PBS7.4，包含0.1％叠氮化钠)中。将瓶子在37℃下培养，在不同时间点取样。在每个时间点，移除2ml的释放介质，替换为2ml的新释放介质。通过HPLC使用一YMC-PackODS-120A柱分析收集样品的肽浓度和完整性。每个制剂使用三份样品。
[0083] 如图2所示，包含OCT-Ac的制剂的OCT的释放显示出高的初始突释。超过60％的奥曲肽在24小时内被释放，超过90％的奥曲肽在两周后被释放。然而，令人惊奇的，从包含OCT-SDS和OCT-DSS的制剂中的OCT的释放并不显示出许多初始突释。包含OCT-SDS和OCT-DSS的制剂中在24小时内都有小于10％的奥曲肽释放，接着是一段时间内的渐进释放。
[0084] 实施例10.不同制剂的亮丙瑞林的体外释放
[0085] 通过将醋酸亮丙瑞林(LA-Ac)、亮丙瑞林十二烷基硫酸盐(LA-SDS)、亮丙瑞林多库酯(LA-DSS)和亮丙瑞林油酸盐(LA-OL)的复合物粉末与SAIB在NMP中的溶液(90％w/w)混合制备制剂。如表5所示的每个制剂中亮丙瑞林的含量大约6％。
[0086] 表5包含亮丙瑞林的制剂
[0087]制剂 肽(mg) SAIB/NMP(mg) 肽含量(％)
LA-Ac/SAIB/NMP 67.1 932.9 6％
LA-SDS/SAIB/NMP 93.9 906.1 6％
LA-DS S/SAIB/NMP 112.4 887.6 6％
LA-OL/SAIB/NMP 69.8 765.5 6％
LA-Ac/SAIB/NMP 67.1 932.9 6％
LA-SDS/SAIB/NMP 93.9 906.1 6％
LA-DS S/SAIB/NMP 112.4 887.6 6％
LA-OL/SAIB/NMP 69.8 765.5 6％
[0088] 使用一小份悬浮液进行体外释放。在一4ml的玻璃瓶中，将每个亮丙瑞林制剂大约0.1ml注入3ml释放缓冲液(PBS7.4，包含0.1％叠氮化钠)中。将瓶子在37℃下培养，在不同时间点取样。在每个时间点，移除2ml的释放介质，替换为2ml的新释放介质。通过HPLC使用一YMC-Pack ODS120A柱分析收集样品的肽浓度和完整性。每个制剂使用三份样品。
[0089] 如图3所示，包含LA-Ac和LA-OL的制剂的亮丙瑞林的释放显示出高的初始突释。超过80％的亮丙瑞林在24小时内被释放，几乎所有的亮丙瑞林在两周后被释放。亮丙瑞林与油酸盐的络合获得了一不溶于水的复合物，但是其并不降低亮丙瑞林的初始突释和总释放。然而，令人惊奇的，从包含LA-SDS和LA-DSS的制剂中的亮丙瑞林的初始突释被显著减少。包含LA-SDS和LA-DSS的制剂中在24小时内都有小于10％的亮丙瑞林释放，接着是一段时间内的渐进零级释放。
[0090] 实施例11.阿霉素多库酯(DOX-DSS)和阿霉素十二烷基硫酸盐(DOX-SDS)的制备[0091] 1，4-二(2-乙基己基)硫代丁二酸钠(DSS，C2OH37NaO7S，MW：444.56，235.3mg，0.53mmol)被溶 解在异 丙醇(2ml)中，200mg(0.53mmol) 的盐酸 阿霉 素(DOXHCl，C27H29NO11·HCl，MW 579.98，＞98.0％)被溶解在水中(20ml)。将DSS溶液与盐酸阿霉素溶液混合，并搅拌大约一小时。通过3500RPM的离心分离分离复合物，然后在真空下冷冻干燥获得的沉淀。
[0092] 实施例12.不同制剂的阿霉素的体外释放
[0093] 使用盐酸阿霉素(DOX-HCl)和阿霉素多库酯(DOX-DSS)复合物粉末制备制剂。通过将DOX-HCl和DOX-DSS与SAIB在NMP中的溶液混合制备制剂，如表6所示获得的DOX浓度为6％。
[0094] 表6包含阿霉素的制剂
[0095]
[0096] 使用一小份悬浮液进行DOX从不同制剂中的体外释放研究。在一4ml的玻璃瓶中，将每个DOX制剂大约0.1ml注入3ml释放缓冲液(PBS7.4，包含0.1％叠氮化钠)中。将瓶子在37℃下培养，在不同时间点取样。在每个时间点，移除2ml的释放介质，替换为2ml的新释放介质。通过HPLC使用一YMC-Pack ODS120A柱分析收集样品的肽浓度和完整性。每个制剂使用三份样品。
[0097] 如图7所示，包含DOX-HCl的制剂的DOX的释放显示出高的初始突释。24小时内超过70％的DOX被释放。然而，令人惊奇的，从包含DOX-DSS的制剂中的DOX的释放并不显示出许多初始突释。24小时内少于8％的DOX从包含DOX-DSS的制剂中被释放。结果表明DOX和DSS的复合物显著降低了DOX的初始突释几乎10倍。复合物能在一段持续的时间内输送DOX。
[0098] 表7包含阿霉素的制剂
[0099]
[0100] 实施例13.普拉克索(PPL)和SDS的复合物的制备(PPL-SIS)
[0101] 80.7mg的普拉克索(PPL，MW 302.27)被溶解在2ml去离子水中(0.267mmol)。以PPL∶SDS为1∶2的比率(0.534mmol)添加2.662ml的SDS溶液(MW288.38，57.83mg/ml)并搅匀溶液。形成一白色沉淀。用NaOH将pH从4调节至7。将溶液冷冻，并放置在了冷冻干燥器中一夜。获得一白色粉末。
[0102] 实施例14.普拉克索从SAIB制剂中的体外释放
[0103] 通过将PPL与90％SAIB在NMP中的溶液混合制备包含大约6％PPL的不同盐形式的制剂。粗略的注射100g进入含有3mlPBS缓冲液和0.1％NaN3的玻璃瓶中。形成凝胶样小球，将玻璃瓶在37℃下放置在振动器上。通过在特定时间移除2ml的释放介质并替换为2ml的新鲜缓冲液来测试PPL的释放。通过反相HPLC测量释放介质的浓度。
[0104] 表6包含阿霉素的制剂
[0105]
[0106] 如图4所示，包含PPL-HCl的制剂的普拉克索的释放显示出高的初始突释。超过60％的普拉克索在24小时内被释放，超过90％的奥曲肽在一周后被释放。然而，令人惊奇的，从包含PPLL-SDS的制剂中的普拉克索的初始突释被显著减少。包含PPL-SDS的制剂中在24小时内有小于5％的亮丙瑞林释放，接着是一段时间内的渐进接近零级释放。
[0107] 实施例15.庆大霉素多库酯的制备(GEN-DSS)
[0108] 79.7mg的硫酸庆大霉素(Mw477.6g/mol和5个电离(带电)基团)硫酸盐(硫酸庆大霉素，MW694-723，88.2％)被溶解在2ml的去离子水中(0.125mmol)。加入4.877ml的DSS溶液(MW 444.55，57.11mg/mL)以获得DSS∶GEN的利率为5∶1。通过添加DSS溶液立即形成白色沉淀。将溶液冷冻，并放置在了冷冻干燥器中一夜。
[0109] 实施例16.包含GEN-DSS的制剂的制备
[0110] 制备90％SAIB在NMP的溶液中的包含大约6％和2％的GEN-DSS的制剂。粗略的注射100g进入含有3mlPBS缓冲液和0.1％NaN3的玻璃瓶中。室温下形成凝胶状小球。然而，玻璃瓶在37℃后，小球开始分解并在几个小时内散开。
[0111] 实施例17.溶菌酶多库酯的制备(LYZ-DSS)
[0112] 50.5mg的溶菌酶(MW 18,000)被溶解在1ml去离子水中(0.0028mmol)。添加148.2ul的DSS溶液(MW444.55，58.86mg/ml)以获得DSS∶LYZ的比率为7∶1。通过添加DSS溶液立即形成一白色沉淀。将溶液冷冻，并放置在了冷冻干燥器中一夜。
[0113] 实施例18.包含溶菌酶多库酯的制剂的制备(LYZ-DSS)
[0114] 制备90％SAIB在NMP的溶液中的包含大约6％的LYZ和LYZ-DSS(85.2％LYZ)的制剂。粗略的注射100g进入含有3mlPBS缓冲液和0.1％NaN3的玻璃瓶中。在室温下形成凝胶状小球，放置37℃下的在振动器上，一天后包含LYZ的小球与具有一个白色不透明中心周围透明层的小球相分离。包含LYZ-DSS的小球保留在一个相中，为一致的白色小球。获得了一个改进的溶菌酶和两亲性分子DSS的复合物的储库系统。
[0115] 实施例19.纳曲酮多库酯的制备(NT-DSS)
[0116] 1，4-二(2-乙基己基)硫代丁二酸钠(DSS，C2OH37NaO7S，MW：444.56，235.3mg，■0.53mmol)被溶解在异丙醇(2ml)中，200mg(0.53mmol)的盐酸纳曲酮(NT，C20H23NO4 HCl，MW 377.86，＞99.0％)被溶解在水中(20ml)。将DSS溶液与盐酸纳曲酮溶液混合，并搅拌大约一小时。通过3500RPM的离心分离分离复合物，然后在真空下冷冻干燥获得的沉淀。
[0117] 本发明不受上述实施例所限制，上述实施例仅用作举例，但可以在所附的专利权利要求保护范围之内进行各种修改。
[0118] 因此，由于本发明已经显示和描述并指出了应用于本发明的优选实施方式的根本新特性，可以理解为本领域技术人员在不偏离本发明的精神的情况下可以对阐述的装置以及他们的操作在形式上和细节上进行的各种省略、取代和改变。例如，已经清楚的表明那些元素和/或方法步骤的所有组合，以基本相同的方式，实现基本相同的功能，获得相同的结果，都在本发明的范围之内。而且，应该认识到本发明任一公开的构成或实施方式中所显示的和/或描述的结构和/或元件和/或方法步骤可以包含任何其他常规设计选择中所公开的或描述的或建议的构成或具体实施方式。因此，目的是仅由本发明所附的权利要求的范围进行限定。
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