专利汇可以提供高纯度尿卵泡刺激素的纯化方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且一种高纯度尿卵泡刺 激素 的纯化方法,它是将偶氮红色染料偶联到Sepharose 4B上用作亲和分离纯化尿卵泡刺激素的介质,在分离纯化尿卵泡刺激素时,采用包括染料亲和层析和QAE离子交换层析等工艺步骤从绝经尿促性腺素中纯化得到高纯度尿卵泡刺激素产品。采用本 发明 纯化方法生产的产品 生物 效价不低于200IU/mg,FSH/LH>100,色白易溶,各项指标都符合或超过《英国药典》98版相应指标,可直接用于注射针剂的生产之用。,下面是高纯度尿卵泡刺激素的纯化方法专利的具体信息内容。
1. 一种高纯度尿卵泡刺激素的纯化方法,其特征是工艺步骤如下:
A、首先将红色偶氮类染料配成浓度为0.5~3.5%(W/V)的溶液,然 后加入10~50%(W/V)滤干的Sepharose 4B凝胶,升温后先后加入助染 剂、固定剂以及催化剂,进行偶联反应,偶联后的凝胶反复用纯水洗净, 装于亲和层析的层析柱;
B、将人绝经促性腺素粗品经过磺基水杨酸处理后,上硼砂缓冲平衡 过的红色染料亲和层析柱,然后进行洗涤操作和洗脱操作;
C、获得的具有FSH生物活性的组份上用磷酸盐缓冲液平衡的离子交 换层析柱,离子交换层析柱依次经过洗涤和洗脱操作后,获得纯度比较高 的FSH组分;
D、从离子交换层析柱上洗脱下来的FSH组分经过通常的超滤、膜过 滤以及冷冻、干燥得FSH产品,将该产品在无菌条件下分装,同时进行热 原、内毒素、HIV、HCV、HBV病毒的检测。
2. 根据权利要求1所述的高纯度尿卵泡刺激素的纯化方法,其特征是 染料亲和层析介质的合成过程中所用的助染剂为NaCl,固定剂为Na2CO3, 催化剂为DABCO。
3. 根据权利要求1所述的高纯度尿卵泡刺激素的纯化方法,其特征B 操作中的洗涤溶液是pH10的50mM甘氨酸-NaOH缓冲液和pH9的50mM 甘氨酸-NaOH,0.2MKCl缓冲液,洗脱溶液是pH9的50mM甘氨酸-NaOH、 0.2~3M KCl缓冲液;其特征C操作中的洗涤溶液是pH7.3的10-50mM PB 缓冲液,洗脱液是pH7.3的20-100mM NaCl、10-50mM PB缓冲液。
本发明涉及到一种高纯度尿卵泡刺激素的纯化方法,特别是一种从人 绝经促性腺素(HMG)粗品中纯化获得卵泡刺激素(FSH)产品的纯化方 法。
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