蛋白激酶家族的若干成员已经清楚地在各种增殖性疾病的发病中有牵 连，因而代表了这些疾病的重要治疗靶。一些与本发明有关的增殖性疾病 包括癌症、类风湿性关节炎、动脉粥样硬化和视网膜病。已经证明导致这 些疾病发病或者对其发病起作用的激酶的重要实例包括但不限于BRaf、 CRaf、Abl、KDR(VEGF)、EGFR/HER1、HER2、HER3、cMET、FLT-3、 PDGFR-a、PDGFR-b、p38、cKIT和JAK2。
细胞表面生长因子受体活化的主要信号传导途径下游是 Ras-RAF-MEK-ERK-MAP激酶途径(Peyssonnaux，C.等人，Biol.Cell (2001)93：53-62)。当一种或多种参与这种信号传导级联的蛋白质发生突变 时，则引发癌症。细胞增殖和分化变得失控，细胞存活机理被活化，这允 许失控的癌细胞无视保护性的程序性细胞死亡监管。p21-Ras蛋白中的突 变已经显示是这种信号传导途径失控的主要原因，这种信号传导途径失控 引起人类癌症的形成。在大约30％的人类癌症中已经鉴别出p21-Ras突变 (Bolton等人，Ann.Rep.Med.Chem.(1994)29：165-174)。p21-Ras蛋白中的 致癌性突变引起组成型活性信号传导级联，导致RAF-MEK-ERK-MAP激 酶途径下游组分的活化失控(Magnuson等人，Semin.Cancer Biol.(1994)5： 247-253)。有三种RAF激酶参与这种信号传导级联，称为ARAF、BRAF 和CRAF(Peyssonnaux，C.等人，Biol.Cell(2001)93：53-62；Avruch，J.， Recent Prog.Horm.Res.(2001)56：127-155；Kolch，W.，Biochem.J.(2000) 351：289-305)。这些RAF激酶同工型都被Ras活化，从而在突变与失控的 p21-Ras蛋白活性所致的癌症中被活化。除了这种信号传导级联在初始 p21-Ras蛋白水平上的活化以外，还已经在BRAF激酶中发现突变，这导 致p21-Ras级联下游的活化(Davies，H.，等人，Nature(2002)417：949-954)。 BRAF激酶中位置600的优势单一位点突变被显示是特别有攻击性的，它 与大约80％所观察到的人类恶性黑素瘤有联系。这种突变用带负电的氨基 酸谷氨酸代替天然存在的中性氨基酸缬氨酸。这种单一位点突变足以赋予 突变的BRAF激酶以组成型活性，导致信号传导途径失控和人类癌症。因 此，BRAF激酶的小分子抑制剂是治疗人类恶性病的合理手段，无论该信 号传导突变是位于上游p21-Ras蛋白的水平还是位于BRAF激酶的水平。
已被报道的大多数小分子激酶抑制剂已经显示以三种方式之一结合。 大多数所报道的抑制剂与活性位点的ATP结合结构域相互作用，并通过与 ATP竞争占据来发挥它们的效应。其它抑制剂已经显示与称为“构型内 DFG(DFG-in-conformation)”袋的蛋白质的单独的疏水性区域结合，更有 其它抑制剂已经显示既与ATP结构域又与“构型内DFG”袋结合。RAF 激酶抑制剂的具体实例可以参见Lowinger等人，Current Pharmaceutical Design(2002)8：2269-2278；Dumas，J.等人.，Current Opinion in Drug Discovery&Development(2004)7：600-616；Dumas，J.等人，WO 2003068223A1(2003)；Dumas，J.等人，WO 9932455A1(1999)和Wan， P.T.C.等人，Cell(2004)116：855-867。
在生理学上，激酶受到共同的活化/去活化机理的调节，其中激酶蛋白 质的特定活化袢序列结合到同一蛋白质上的特定袋内，所述袋被称为开关 控制袋(进一步的细节参见WO 200380110049)。这类结合发生于活化袢的 特定氨基酸残基被修饰、例如通过磷酸化、氧化或亚硝基化被修饰之时。 活化袢向开关袋的结合导致蛋白质的构型变为它的活性形式(Huse，M.和 Kuriyan，J.Cell(109)275-282)。
发明概述
本发明的化合物可用于治疗哺乳动物癌症，尤其人类癌症，包括但不 限于恶性黑素瘤、结肠直肠癌、卵巢癌、乳头状甲状腺癌、肺癌、肾癌、 胰腺癌、成胶质细胞瘤、脊髓增殖性疾病和间皮瘤。本发明的化合物也可 用于治疗炎性疾病，包括类风湿性关节炎、视网膜病(包括糖尿病性视网膜 神经病和黄斑变性)、心血管疾病和代谢疾病。
优选实施方案的描述
以下描述涉及各种化合物及其部分。
碳环基表示来自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚烷基、环辛 烷基、降冰片烷基、降冰片烯基、二环[2.2.2]辛烷基和二环[2.2.2]辛烯基的 碳环；
卤素表示氟、氯、溴和碘；
芳基表示单环的或稠合二环的环系，以至少一个碳环的环碳原子间共 享离域π电子(芳香性)为特征；优选的芳基环来自苯基、萘基、四氢萘基、 茚基和茚满基；
杂芳基表示单环的或稠合二环的环系，以至少一个碳环或杂环的环碳 或杂原子(包括氮、氧或硫)间共享离域π电子(芳香性)为特征；杂芳基来自 但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、噻唑基、异噁唑基、异噻唑 基、咪唑基、吡唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、 嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、吲哚基、二氢吲哚基、异吲哚基、异 二氢吲哚基、吲唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噻唑 酮基、苯并噁唑基、苯并噁唑酮基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并 咪唑基、苯并咪唑酮基、苯并三唑基、咪唑并吡啶基、吡唑并吡啶基、咪 唑酮并吡啶基、噻唑并吡啶基、噻唑酮并吡啶基、噁唑并吡啶基、噁唑酮 并吡啶基、异噁唑并吡啶基、异噻唑并吡啶基、三唑并吡啶基、咪唑并嘧 啶基、吡唑并嘧啶基、咪唑酮并嘧啶基、噻唑并嘧啶基、噻唑酮并嘧啶基、 噁唑并嘧啶基、噁唑酮并嘧啶基、异噁唑并嘧啶基、异噻唑并嘧啶基、三 唑并嘧啶基、二氢嘌呤酮基、吡咯并嘧啶基、嘌呤基、吡唑并嘧啶基、邻 苯二酰亚氨基、苯并[c]吡咯酮基(phthalimidinyl)、吡嗪基吡啶基、吡啶并 嘧啶基、嘧啶并嘧啶基、噌啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、喹啉基、异喹啉 基、酞嗪基、benzodioxyl(苯并二氧杂环己烯基)、苯并异噻唑啉-1，1，3-三 酮基、二氢喹啉基、四氢喹啉基、二氢异喹啉基、四氢异喹啉基、苯并氮 杂基、苯并二氮杂基、苯并氧杂基或苯并氧杂氮杂基；
杂环基表示含有碳和来自氧、氮或硫的杂原子的单环，其中环碳或杂 原子间没有共享的离域π电子(芳香性)；杂环基环包括但不限于氧杂环丁 基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、吡咯烷基、噁唑啉基、噁唑烷基、噻唑啉 基、噻唑烷基、吡喃基、噻喃基、四氢吡喃基、二噁啉基(dioxalinyl)、哌 啶基、吗啉基、硫吗啉基、硫吗啉基S-氧化物、硫吗啉基S-二氧化物、哌 嗪基、氮杂基、氧杂基、二氮杂基、托烷基和高托烷基(homotropanyl)；
多-芳基表示两个或多个单环的或稠合芳基二环的环系，以至少一个碳 环的环碳原子间共享离域π电子(芳香性)为特征，其中所含有的环任选连 接在一起；
多-杂芳基表示两个或多个单环的或稠合二环的环系，以至少一个碳环 或杂环的环碳或杂原子(包括氮、氧或硫)间共享离域π电子(芳香性)为特 征，其中所含有的环任选连接在一起，其中多-杂芳基系统的至少一个单环 或稠合二环来自如上广泛定义的杂芳基和其它环来自如上广泛定义的芳 基、杂芳基或杂环基；
多-杂环基表示含有碳和杂原子(来自氧、氮或硫)的两个或多个单环的 或稠合二环的环系，其中环碳或杂原子间没有共享离域π电子(芳香性)， 其中所含有的环任选连接在一起，其中多-杂环基系统的至少一个单环或稠 合二环来自上文广泛定义的杂环基和其它环来自上文广泛定义的芳基、杂 芳基或杂环基；
低级烷基表示直链或支链C1-C6烷基；
与基团或部分有关的取代表示这样一种事实：进一步的取代基可以在 基团或部分上任意可接受的位置上与该基团或部分连接。
术语盐涵盖可药用盐，通常用于生成游离酸的碱金属盐和生成游离碱 的加成盐。盐的属性不是关键的，条件是它是可药用的。适宜的可药用酸 加成盐可以由无机酸或由有机酸制备。这类无机酸的实例有盐酸、氢溴酸、 氢碘酸、硝酸、碳酸、硫酸和磷酸。适当的有机酸可以选自脂肪族、环脂 肪族、芳香族、芳基脂肪族和杂环基羧酸和磺酸，其实例有甲酸、乙酸、 丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏 血酸、葡糖醛酸、马来酸、富马酸、丙酮酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯甲酸、 邻氨基苯甲酸、甲磺酸、硬脂酸、水杨酸、对羟基苯甲酸、苯基乙酸、扁 桃酸、双羟萘酸(扑酸)、甲磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、泛酸、 甲苯磺酸、2-羟基乙磺酸、对氨基苯磺酸、环己氨基磺酸、海藻酸、3-羟 基丁酸、半乳糖二酸和半乳糖醛酸。含有游离酸的本发明化合物的适宜的 可药用盐包括金属盐和有机盐。更优选的金属盐包括但不限于适当的碱金 属(Ia族)盐、碱土金属(IIa族)盐和其它生理学上可接受的金属。这类盐可 以从铝、钙、锂、镁、钾、钠和锌制备。优选的有机盐可以从伯胺、仲胺、 叔胺和季铵盐制备，部分地包括氨丁三醇、二乙胺、四-N-甲基铵、N，N’- 二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡 糖胺)和普鲁卡因。
术语前体药物表示在体内恢复为活性形式的活性化合物衍生物。例如， 活性药物的羧酸形式可以酯化生成前体药物，该酯随后在体内被转化恢复 为羧酸形式。综述参见Ettmayer等人，J.Med.Chem，2004，47(10)， 2393-2404和Lorenzi等人，J.Pharm.Exp.Therpeutics，2005，883-8900。
1.本发明的第一方面--化合物、制剂和方法
在本发明的第一方面，化合物是式Ia化合物

其中X-Y按顺序是C＝N或N-CH2；
其中E1选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、吡咯烷基、哌啶基、 苯基、噻吩基、噁唑基、噻唑基、异噁唑基、异噻唑基、吡咯基、吡唑基、 噁二唑基、噻二唑基、呋喃基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基和萘基；
其中A选自苯基、萘基、C3-C8碳环基、茚满基、四氢萘基、茚基、 G1、G2、G3、G4和-CHR4R8；
G1是杂芳基，来自吡咯基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、噻唑基、异噁 唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑 基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、吡啶基和嘧啶基；
G2是稠合的二环杂芳基，来自吲哚基、二氢吲哚基、异吲哚基、异二 氢吲哚基、吲唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噻唑酮 基、苯并噁唑基、苯并噁唑酮基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪 唑基、苯并咪唑酮基、苯并三唑基、咪唑并吡啶基、吡唑并吡啶基、咪唑 酮并吡啶基、噻唑并吡啶基、噻唑酮并吡啶基、噁唑并吡啶基、噁唑酮并 吡啶基、异噁唑并吡啶基、异噻唑并吡啶基、三唑并吡啶基、咪唑并嘧啶 基、吡唑并嘧啶基、咪唑酮并嘧啶基、噻唑并嘧啶基、噻唑酮并嘧啶基、噁 唑并嘧啶基、噁唑酮并嘧啶基、异噁唑并嘧啶基、异噻唑并嘧啶基、三唑 并嘧啶基、二氢嘌呤酮基、吡咯并嘧啶基、嘌呤基、吡唑并嘧啶基、邻苯 二酰亚氨基、苯并[c]吡咯酮基、吡嗪吡啶基、吡啶并嘧啶基、嘧啶并嘧啶 基、噌啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、喹啉基、异喹啉基、酞嗪基、benzodioxyl (苯并二氧杂环己烯基)、苯并异噻唑啉-1，1，3-三酮基、二氢喹啉基、四氢喹 啉基、二氢异喹啉基、四氢异喹啉基、苯并氮杂基、苯并二氮杂基、 苯并氧杂基和苯并氧杂氮杂基；
G3是非稠合的二环杂芳基，来自吡啶基嘧啶基、嘧啶基嘧啶基、噁唑 基嘧啶基、噻唑基嘧啶基、咪唑基嘧啶基、异噁唑基嘧啶基、异噻唑基嘧 啶基、吡唑基嘧啶基、三唑基嘧啶基、噁二唑基嘧啶基、噻二唑基嘧啶基、 吗啉基嘧啶基、二氧代硫吗啉基嘧啶基和硫吗啉基嘧啶基；
G4是杂环基，来自氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、吡咯烷基、 噁唑啉基、噁唑烷基、咪唑酮基、吡喃基、噻喃基、四氢吡喃基、二噁啉 基、哌啶基、吗啉基、硫吗啉基、硫吗啉基S-氧化物、硫吗啉基S-二氧化 物、哌嗪基、氮杂基、氧杂基、二氮杂基、托烷基和高托烷基；
A环可以任选被一个或多个-X1-A1部分取代；
X1选自-(CH2)n-(O)r-(CH2)n-、-(CH2)n-(NR3)r-(CH2)n-、 -(CH2)n-(S)r-(CH2)n-、-(CH2)n-(C＝O)r-(CH2)n-、 -(CH2)n-(C(＝O)-NR3)r-(CH2)n-和-(CH2)n-(SO2-NR3)r-(CH2)n-，其中任意亚 烷基可以是直链或支链的；
X2选自C1-C6烷基、支链C2-C6烷基和其中E1直接与式Ia的NR3 基团连接的直键；
A1选自氢、芳基、G1、G2、G3、G4、C1-C6烷基、支链C3-C8烷 基、R19取代的C3-C8碳环基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6 烷基、卤素、氰基、羟基、-N(R4)2、-R5、-C(O)N(R4)2、C(O)R5、C1-C6 烷氧基和其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷氧基；
当A和A1具有一个或多个可取代的sp2-杂化碳原子时，各sp2杂化 碳原子可以任选被Z1或Z3取代基取代；
当A和A1具有一个或多个可取代的sp3-杂化碳原子时，各sp3杂化 碳原子可以任选被Z2或Z3取代基取代；
当A和A1具有一个或多个可取代的氮原子时，各氮原子可以任选被 Z4取代基取代；
Z1各自独立地和单独地选自氢、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、 C1-C6烷氧基C1-C6烷基、(R4)2NC1-C6烷基、(R4)2NC2-C6烷基 N(R4)-(CH2)n、(R4)2NC2-C6烷基O-(CH2)n、(R3)2N-C(＝O)-、 (R4)2N-C(＝O)-、(R4)2N-CO-C1-C6烷基-、C1-C6烷氧基羰基-、-羧基C1-C6 烷基、C1-C6烷氧基羰基C1-C6烷基、(R3)2NSO2-、-SOR3、(R4)2NSO2-、 -SO2R3、-SOR4、-C(＝O)R6、-C(＝NOH)R6、-C(＝NOR3)R6、 -(CH2)nN(R4)C(O)R8、-(CH2)n-G1、-(CH2)n-G4、苯氧基、 -(CH2)n-O-(CH2)n-G1、-(CH2)n-O-(CH2)n-G4、-(CH2)n-NR3-(CH2)n-芳基、 -(CH2)n-NR3-(CH2)n-G1、-(CH2)n-NR3-(CH2)n-G4、-S(O)2R5、 -N＝S(O)R6R8、-S(O)(＝NR3)R6、-(CH2)nNHC(O)NHS(O)2R8、 -(CH2)nNHS(O)2NHC(O)R8、-C(O)NHS(O)2R8、-S(O)2NHC(O)R8、 -(CH2)nNHC(O)(CH2)nR5、-(CH2)nNHS(O)2(CH2)nR5、 -(CH2)nC(O)NH(CH2)qR5、-(CH2)nC(O)R5、-(CH2)nOC(O)R5、 -(CH2)nS(O)2NH(CH2)qR5、-CH(OH)(CH2)pR5、-CH(OH)CH(OH)R4、 -(CH2)nN(R4)2、-(CH2)nR5、-C(＝NH)R5、-C(＝NH)N(R4)2、-C(＝NOR3)R5、 -C(＝NOR3)N(R4)2和-NHC(＝NH)R8；
在Z1含有烷基或亚烷基部分的情况下，这类部分可以进一步被一个 或多个C1-C6烷基取代；
Z2各自独立地和单独地选自氢、芳基、C1-C6烷基、C3-C8碳环基、 羟基、羟基C1-C6烷基-、氰基、(R3)2N-、(R4)2N-、(R4)2NC1-C6烷基-、 (R4)2NC2-C6烷基N(R4)-(CH2)n-、(R4)2NC2-C6烷基O-(CH2)n-、 (R3)2N-C(＝O)-、(R4)2N-C(＝O)-、(R4)2N-CO-C1-C6烷基-、羧基、羧基 C1-C6烷基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷氧基羰基C1-C6烷基、 (R3)2NSO2-、(R4)2NSO2-、-SO2R5、-SO2R8、-(CH2)nN(R4)C(O)R8、 -C(O)R8、＝O、＝NOH、＝N(OR6)、-(CH2)n-G1、-(CH2)n-G4、 -(CH2)n-O-(CH2)n-G1、-(CH2)n-O-(CH2)n-G4、-(CH2)n-NR3-(CH2)n-芳基、 -(CH2)n-NR3-(CH2)n-G1、-(CH2)n-NR3-(CH2)n-G4、 -(CH2)nNHC(O)NHS(O)2R8、-(CH2)nNHS(O)2NHC(O)R8、 -C(O)NHS(O)2R8、-(CH2)NHC(O)(CH2)nR5、-(CH2)nNHS(O)2R5、 -(CH2)nC(O)NH(CH2)qR5、-(CH2)nC(O)R5、-(CH2)nOC(O)R5和-(CH2)nR5；
在Z2含有烷基或亚烷基部分的情况下，这类部分可以进一步被一个 或多个C1-C6烷基取代；
Z3各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、C3-C8 碳环基、卤素、其中烷基可以是部分或完全氟化的氟代烷基、氰基、羟基、 甲氧基、氧代基、(R3)2N-C(＝O)-、(R4)2N-C(＝O)-、-N(R4)-C(＝O)R8、 (R3)2NSO2-、(R4)2NSO2-、-N(R4)SO2R5、-N(R4)SO2R8、-(CH2)n-N(R3)2、 -(CH2)n-N(R4)2、-O-(CH2)q-N(R4)2、-O-(CH2)q-O-烷基、-N(R3)-(CH2)q-O- 烷基、-N(R3)-(CH2)q-N(R4)2、-O-(CH2)q-R5、-N(R3)-(CH2)q-R5、-C(＝O)R5、 -C(＝O)R8和硝基；
在Z3含有烷基或亚烷基部分的情况下，这类部分可以进一步被一个 或多个C1-C6烷基取代；
Z4各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、羟基C2-C6烷基、C1-C6 烷氧基C2-C6烷基、(R4)2N-C2-C6烷基、(R4)2N-C2-C6烷基N(R4)-C2-C6 烷基、(R4)2N-C2-C6烷基-O-C2-C6烷基、(R4)2N-CO-C1-C6烷基、羧基 C1-C6烷基、C1-C6烷氧基羰基C1-C6烷基、-C2-C6烷基N(R4)C(O)R8、 R8-C(＝NR3)-、-SO2R8、-COR8、-(CH2)n-G1、-(CH2)n-G4、 -(CH2)q-O-(CH2)n-G1、-(CH2)q-O-(CH2)n-G4、-(CH2)q-NR3-(CH2)n-G1、 -(CH2)q-NR3-(CH2)n-G4、-(CH2)qNHC(O)(CH2)nR5、 -(CH2)qC(O)NH(CH2)qR5、-(CH2)qC(O)R5、-(CH2)qOC(O)R5、-(CH2)qR5、 -(CH2)qNR4(CH2)qR5和-(CH2)qO(CH2)qR5；
在Z4含有烷基或亚烷基部分的情况下，这类部分可以进一步被一个 或多个C1-C6烷基取代；
Z6各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、羟 基、C1-C6烷氧基、-OR4、C1-C6烷硫基、(R3)2N-、(R4)2N-、-R5、 -N(R3)COR8、-N(R4)COR8、-N(R3)SO2R6-、-CON(R3)2、-CON(R4)2、 -COR5、-SO2N(R4)2、卤素、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷 基、氰基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷氧基、 -O-(CH2)q-N(R4)2、-N(R3)-(CH2)q-N(R4)2、-O-(CH2)q-O-烷基、 -N(R3)-(CH2)q-O-烷基、-O-(CH2)q-R5、-N(R3)-(CH2)q-R5、 -(NR3)r-(CH2)n-R17、-(O)r-R17、-(S)r-R17和-(CH2)r-R17；
在Z6含有烷基或亚烷基部分的情况下，这类部分可以进一步被一个 或多个C1-C6烷基取代；
其中R3各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、 C3-C8碳环基和Z3-取代的苯基；
R4各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、二 羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、支链羟 基C1-C6烷基、支链C1-C6烷氧基C1-C6烷基、支链二羟基C1-C6烷基、 -(CH2)p-N(R7)2、-(CH2)p-R5、-(CH2)p-C(O)N(R7)2、-(CH2)nC(O)R5、 -(CH2)n-C(O)OR3、C3-C8碳环基、羟基取代的C3-C8碳环基、烷氧基取 代的C3-C8碳环基、二羟基取代的C3-C8碳环基和-(CH2)n-R17；
R5各自独立地和单独地选自

其中符号(##)是R5部分的连接点；
R6各自独立地和单独地选自C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、C3-C8 碳环基、苯基、G1和G4；
R7各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、羟基C2-C6烷基、二 羟基C2-C6烷基、C1-C6烷氧基C2-C6烷基、支链C3-C7烷基、支链羟 基C2-C6烷基、支链C1-C6烷氧基C2-C6烷基、支链二羟基C2-C6烷基、 -(CH2)q-R5、-(CH2)n-C(O)R5、-(CH2)n-C(O)OR3、C3-C8碳环基、羟基取 代的C3-C8碳环基、烷氧基取代的C3-C8碳环基、二羟基取代的C3-C8 碳环基和-(CH2)n-R17；
R8各自独立地和单独地选自C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、其中烷 基是部分或完全氟化的氟代烷基、C3-C8碳环基、Z3-取代的苯基、Z3-取 代的苯基C1-C6烷基、Z3-取代的G1、Z3-取代的G1-C1-C6烷基、Z2-取 代的G4、Z2-取代的G4-C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、N(R3)2、N(R4)2 和R5；
R10各自独立地和单独地选自CO2H、CO2C1-C6烷基、CO-N(R4)2、 OH、C1-C6烷氧基和-N(R4)2；
R16独立地和单独地选自氢、C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、C3-C8 碳环基、卤素、其中烷基可以是部分或完全氟化的氟代烷基、氰基、羟基、 C1-C6烷氧基、其中烷基可以是部分或完全氟化的C1-C6氟代烷氧基、 -N(R3)2、-N(R4)2、C2-C3炔基和硝基；
R17各自来自苯基、萘基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、噁坐基、噻唑 基、异噁唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑 基、四唑基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢 呋喃基、噁唑啉基、噁唑烷基、吡喃基、噻喃基、四氢吡喃基、二噁啉基、 氮杂基、氧杂基、二氮杂基、吡咯烷基和哌啶基；
其中R17可以进一步被一个或多个Z2、Z3或Z4基团取代；
R19是H或C1-C6烷基；
其中两个R3或R4基团独立地和单独地来自C1-C6烷基与支链C3-C6 烷基、羟基烷基和烷氧基烷基，并且连接于同一氮原子，所述基团可以环 化形成C3-C7杂环基环；
以及k是1或2；n是0-6；p是1-4；q是2-6；r是0或1；t是1-3。
1.1：举例说明优选的E1-X2基团的式Ia化合物
在第1节的实施方案中，优选的化合物具有式Ib的结构

1.2：举例说明优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的实施方案中，优选的化合物具有式Ic的结构

1.3：举例说明优选的A1基团的式Ia化合物
在第1.2节的实施方案中，优选的化合物具有式Id的结构

其中A1选自支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳环基、C1-C6烷 基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、Z3-取代的苯基和Z3- 取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.3a：举例说明更优选的X2-E1基团的式Id化合物
在第1.3节的实施方案中，优选的化合物具有式Ie的结构

1.3b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Id化合物
在第1.3节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式If的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.4：举例说明其它优选的A1基团的式Ia化合物
在第1.2节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Ig的结构

其中A1选自支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳环基、C1-C6烷 基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、Z3-取代的苯基和Z3- 取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.4a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ig化合物
在第1.4节的实施方案中，优选的化合物具有式Ih的结构

1.4b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ig化合物
在第1.4节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Ii的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.5：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Ij的结构

其中A1选自支链Z2-取代的C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳环基、 Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、 Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.5a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ij化合物
在第1.5节的实施方案中，优选的化合物具有式Ik的结构

1.5b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ij化合物
在第1.5节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Il的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.6：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Im的结构

其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6 烷基、Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.6a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Im化合物
在第1.6节的实施方案中，优选的化合物具有式In的结构

1.6b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Im化合物
在第1.6节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Io的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.7：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Ip的结构

其中A1选自Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳环基、 Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、 Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.7a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ip化合物
在第1.7节的实施方案中，优选的化合物具有式Iq的结构

1.7b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ip化合物
在第1.7节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Ir的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.8：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Is的结构

其中虚线键是饱和或不饱和的键；
其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、卤素、氟代C1-C6烷基、氰基、C1-C6烷 氧基、氟代C1-C6烷氧基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、 Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.8a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Is化合物
在第1.8节的实施方案中，优选的化合物具有式It的结构

1.8b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Is化合物
在第1.8节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Iu的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.9：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Iv的结构

其中虚线键是饱和或不饱和的键；
其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、卤素、氟代C1-C6烷基、氰基、C1-C6烷 氧基、氟代C1-C6烷氧基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、 Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.9a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Iv化合物
在第1.9节的实施方案中，优选的化合物具有式Iw的结构

1.9b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Iv化合物
在第1.9节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Ix的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.10：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Iy的结构

其中A1选自Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳环基、 Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、 Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.10a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Iy化合物
在第1.10节的实施方案中，优选的化合物具有式Iz的结构

1.10b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Iy化合物
在第1.10节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Iaa的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.11：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Ibb的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.11a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ibb化合物
在第1.11节的实施方案中，优选的化合物具有式Icc的结构

1.11b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ibb化合物
在第1.11节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Idd的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.12：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Iee的结构

其中Q1和Q2单独地和独立地来自N和CH；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.12a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Iee化合物
在第1.12节的实施方案中，优选的化合物具有式Iff的结构

1.12b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Iee化合物
在第1.12节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Igg的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.13：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Ihh的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.13a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ihh化合物
在第1.13节的实施方案中，优选的化合物具有式Iii的结构

1.13b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ihh化合物
在第1.13节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Ijj的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.14：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Ikk的结构

其中Q6是N或C-A1；
其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6 烷基、Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.14a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ikk化合物
在第1.14节的实施方案中，优选的化合物具有式Ill的结构

1.14b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Ikk化合物
在第1.14节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Imm的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.15：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Inn的结构

其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6 烷基、Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.15a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Inn化合物
在第1.15节的实施方案中，优选的化合物具有式Ioo的结构

1.15b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Inn化合物
在第1.15节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Ipp的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.16：举例说明另外优选的A基团的式Ia化合物
在第1.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式Iqq的结构

其中Q3、Q4和Q5选自N-A1和C-A1，并且Q3、Q4或Q5中只有 一个是N-A1；
其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6 烷基、Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
1.16a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Iqq化合物
在第1.16节的实施方案中，优选的化合物具有式Irr的结构

1.16b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式Iqq化合物
在第1.16节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式Iss的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
1.17方法
1.17a蛋白质调控方法
本发明包括调控RAF激酶和RAS-RAF-MEK-ERK-MAP激酶途径中 其它激酶、包括但不限于A-Raf、B-Raf和C-Raf的激酶活性的方法。激 酶可以是野生型激酶、其致癌形式、其异常融合蛋白或者上述任一种的多 型变体(polymorphs)。该方法包括使激酶品种与本发明的化合物、尤其第 1.1-1.16节中给出的那些接触的步骤。激酶品种可以是活化的或未活化的， 这些品种可以受到磷酸化、硫酸化、脂肪酸酰化、糖基化、亚硝基化、胱 氨酸化(即激酶中的邻近半胱氨酸残基彼此反应生成二硫键)或者氧化的调 控。激酶活性可以选自磷酸转移反应的催化、激酶细胞局限化和其它蛋白 质通过激酶构型的调控而募集成信号传导复合物。
1.17b治疗方法
本发明的方法、尤其第1.1-1.16节的那些还包括治疗患有选自如下的 病症的个体：慢性髓性白血病、急性淋巴细胞白血病、胃肠基质肿瘤、嗜 酸性细胞增多综合征、成胶质细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肺癌、 乳癌、肾癌、宫颈癌、原发性实体瘤继发部位的转移、以导致失明的过度 增殖为特征的眼疾病(包括各种视网膜病，包括糖尿病性视网膜病和年龄相 关性黄斑变性)、类风湿性关节炎、黑素瘤、结肠癌、甲状腺癌、由 RAS-RAF-MEK-ERK-MAP激酶途径中的突变所致的疾病、人类炎症、类 风湿性脊椎炎、骨关节炎、哮喘、痛风性关节炎、脓毒病、败血症性休克、 内毒素性休克、革兰氏阴性脓毒病、中毒性休克综合征、成人呼吸窘迫综 合征、中风、再灌注损伤、神经创伤、神经缺血、银屑病、再狭窄、慢性 阻塞性肺疾病、骨吸收性疾病、移植物抗宿主反应、节段性回肠炎(Chron’s disease)、溃疡性结肠炎、炎性肠病、发热(pyresis)和它们的联合。
1.18：药物制剂
本发明的化合物、尤其第1.1-1.16节的那些可以通过将一种或多种该 化合物与可药用载体合并而形成药物组合物的一部分。另外，组合物可以 包括选自佐剂、赋形剂、稀释剂和稳定剂的添加剂。
2.本发明的第二方面--化合物、方法、制剂和加合物
在本发明的第一方面，化合物为式IIa

其中X-Y按顺序是C＝N或N-CH2；
其中Q1和Q2之一是N，且另一个是CR3；
其中E1选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、吡咯烷基、哌啶基、 苯基、噻吩基、噁唑基、噻唑基、异噁唑基、异噻唑基、吡咯基、吡唑基、 噁二唑基、噻二唑基、呋喃基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基和萘基；
其中A选自苯基、萘基、C3-C8碳环基、茚满基、四氢萘基、茚基、 G1、G2、G3、G4和-CHR4R8；
G1是杂芳基，来自吡咯基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、噻唑基、异噁 唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑 基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、吡啶基和嘧啶基；
G2是稠合的二环杂芳基，来自吲哚基、二氢吲哚基、异吲哚基、异二 氢吲哚基、吲唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噻唑酮 基、苯并噁唑基、苯并噁唑酮基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪 唑基、苯并咪唑酮基、苯并三唑基、咪唑并吡啶基、吡唑并吡啶基、咪唑 酮并吡啶基、噻唑并吡啶基、噻唑酮并吡啶基、噁唑并吡啶基、噁唑酮并 吡啶基、异噁唑并吡啶基、异噻唑并吡啶基、三唑并吡啶基、咪唑并嘧啶 基、吡唑并嘧啶基、咪唑酮并嘧啶基、噻唑并嘧啶基、噻唑酮并嘧啶基、噁 唑并嘧啶基、噁唑酮并嘧啶基、异噁唑并嘧啶基、异噻唑并嘧啶基、三唑 并嘧啶基、二氢嘌呤酮基、吡咯并嘧啶基、嘌呤基、吡唑并嘧啶基、邻苯 二酰亚氨基、苯并[c]吡咯酮基、吡嗪吡啶基、吡啶并嘧啶基、嘧啶并嘧啶 基、噌啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、喹啉基、异喹啉基、酞嗪基、benzodioxyl (苯并二氧杂环己烯基)、苯并异噻唑啉-1，1，3-三酮基、二氢喹啉基、四氢喹 啉基、二氢异喹啉基、四氢异喹啉基、苯并氮杂基、苯并二氮杂基、 苯并氧杂基和苯并氧杂氮杂基；
G3是非稠合的二环杂芳基，来自吡啶基嘧啶基、嘧啶基嘧啶基、噁唑 基嘧啶基、噻唑基嘧啶基、咪唑基嘧啶基、异噁唑基嘧啶基、异噻唑基嘧 啶基、吡唑基嘧啶基、三唑基嘧啶基、噁二唑基嘧啶基、噻二唑基嘧啶基、 吗啉基嘧啶基、二氧代硫吗啉基嘧啶基和硫吗啉基嘧啶基；
G4是杂环基，来自氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、吡咯烷基、 噁唑啉基、噁唑烷基、咪唑酮基、吡喃基、噻喃基、四氢吡喃基、二噁啉 基、哌啶基、吗啉基、硫吗啉基、硫吗啉基S-氧化物、硫吗啉基S-二氧化 物、哌嗪基、氮杂基、氧杂基、二氮杂基、托烷基和高托烷基；
A环可以任选被一个或多个-X1-A1基团取代；
X1选自-(CH2)n-(O)r-(CH2)n-、-(CH2)n-(NR3)r-(CH2)n-、 -(CH2)n-(S)r-(CH2)n-、-(CH2)n-(C＝O)r-(CH2)n-、 -(CH2)n-(C(＝O)-NR3)r-(CH2)n-和-(CH2)n-(SO2-NR3)r-(CH2)n-，其中任意亚 烷基可以是直链或支链的；
X2选自C1-C6烷基、支链C2-C6烷基和其中E1直接与式Ia的NR3 基团连接的直键；
A1选自氢、芳基、G1、G2、G3、G4、C1-C6烷基、支链C3-C8烷 基、R19取代的C3-C8碳环基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6 烷基、卤素、氰基、羟基、-N(R4)2、-R5、-C(O)N(R4)2、C(O)R5、C1-C6 烷氧基和其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷氧基；
当A和A1具有一个或多个可取代的sp2-杂化碳原子时，各sp2杂化 碳原子可以任选被Z1或Z3取代基取代；
当A和A1具有一个或多个可取代的sp3-杂化碳原子时，各sp3杂化 碳原子可以任选被Z2或Z3取代基取代；
当A和A1具有一个或多个可取代的氮原子时，各氮原子可以任选被 Z4取代基取代；
Z1各自独立地和单独地选自氢、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、 C1-C6烷氧基C1-C6烷基、(R4)2NC1-C6烷基、(R4)2NC2-C6烷基 N(R4)-(CH2)n、(R4)2NC2-C6烷基O-(CH2)n、(R3)2N-C(＝O)-、 (R4)2N-C(＝O)-、(R4)2N-CO-C1-C6烷基-、C1-C6烷氧基羰基-、-羧基C1-C6 烷基、C1-C6烷氧基羰基C1-C6烷基、(R3)2NSO2-、-SOR3、(R4)2NSO2-、 -SO2R3、-SOR4、-C(＝O)R6、-C(＝NOH)R6、-C(＝NOR3)R6、 -(CH2)nN(R4)C(O)R8、-(CH2)n-G1、-(CH2)n-G4、苯氧基、 -(CH2)n-O-(CH2)n-G1、-(CH2)n-O-(CH2)n-G4、-(CH2)n-NR3-(CH2)n-芳基、 -(CH2)n-NR3-(CH2)n-G1、-(CH2)n-NR3-(CH2)n-G4、-S(O)2R5、 -N＝S(O)R6R8、-S(O)(＝NR3)R6、-(CH2)nNHC(O)NHS(O)2R8、 -(CH2)nNHS(O)2NHC(O)R8、-C(O)NHS(O)2R8、-S(O)2NHC(O)R8、 -(CH2)nNHC(O)(CH2)nR5、-(CH2)nNHS(O)2(CH2)nR5、 -(CH2)nC(O)NH(CH2)qR5、-(CH2)nC(O)R5、-(CH2)nOC(O)R5、 -(CH2)nS(O)2NH(CH2)qR5、-CH(OH)(CH2)pR5、-CH(OH)CH(OH)R4、 -(CH2)nN(R4)2、-(CH2)nR5、-C(＝NH)R5、-C(＝NH)N(R4)2、-C(＝NOR3)R5、 -C(＝NOR3)N(R4)2和-NHC(＝NH)R8；
在Z1含有烷基或亚烷基部分的情况下，这类部分可以进一步被一个 或多个C1-C6烷基取代；
Z2各自独立地和单独地选自氢、芳基、C1-C6烷基、C3-C8碳环基、 羟基、羟基C1-C6烷基-、氰基、(R3)2N-、(R4)2N-、(R4)2NC1-C6烷基-、 (R4)2NC2-C6烷基N(R4)-(CH2)n-、(R4)2NC2-C6烷基O-(CH2)n-、 (R3)2N-C(＝O)-、(R4)2N-C(＝O)-、(R4)2N-CO-C1-C6烷基-、羧基、羧基 C1-C6烷基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷氧基羰基C1-C6烷基、 (R3)2NSO2-、(R4)2NSO2-、-SO2R5、-SO2R8、-(CH2)nN(R4)C(O)R8、 -C(O)R8、＝O、＝NOH、＝N(OR6)、-(CH2)n-G1、-(CH2)n-G4、 -(CH2)n-O-(CH2)n-G1、-(CH2)n-O-(CH2)n-G4、-(CH2)n-NR3-(CH2)n-芳基、 -(CH2)n-NR3-(CH2)n-G1、-(CH2)n-NR3-(CH2)n-G4、 -(CH2)nNHC(O)NHS(O)2R8、-(CH2)nNHS(O)2NHC(O)R8、 -C(O)NHS(O)2R8、-(CH2)NHC(O)(CH2)nR5、-(CH2)nNHS(O)2R5、 -(CH2)nC(O)NH(CH2)qR5、-(CH2)nC(O)R5、-(CH2)nOC(O)R5和-(CH2)nR5；
在Z2含有烷基或亚烷基部分的情况下，这类部分可以进一步被一个 或多个C1-C6烷基取代；
Z3各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、C3-C8 碳环基、卤素、其中烷基可以是部分或完全氟化的氟代烷基、氰基、羟基、 甲氧基、氧代基、(R3)2N-C(＝O)-、(R4)2N-C(＝O)-、-N(R4)-C(＝O)R8、 (R3)2NSO2-、(R4)2NSO2-、-N(R4)SO2R5、-N(R4)SO2R8、-(CH2)n-N(R3)2、 -(CH2)n-N(R4)2、-O-(CH2)q-N(R4)2、-O-(CH2)q-O-烷基、-N(R3)-(CH2)q-O- 烷基、-N(R3)-(CH2)q-N(R4)2、-O-(CH2)q-R5、-N(R3)-(CH2)q-R5、-C(＝O)R5、 -C(＝O)R8和硝基；
在Z3含有烷基或亚烷基部分的情况下，这类部分可以进一步被一个 或多个C1-C6烷基取代；
Z4各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、羟基C2-C6烷基、C1-C6 烷氧基C2-C6烷基、(R4)2N-C2-C6烷基、(R4)2N-C2-C6烷基N(R4)-C2-C6 烷基、(R4)2N-C2-C6烷基-O-C2-C6烷基、(R4)2N-CO-C1-C6烷基、羧基 C1-C6烷基、C1-C6烷氧基羰基C1-C6烷基、-C2-C6烷基N(R4)C(O)R8、 R8-C(＝NR3)-、-SO2R8、-COR8、-(CH2)n-G1、-(CH2)n-G4、 -(CH2)q-O-(CH2)n-G1、-(CH2)q-O-(CH2)n-G4、-(CH2)q-NR3-(CH2)n-G1、 -(CH2)q-NR3-(CH2)n-G4、-(CH2)qNHC(O)(CH2)nR5、 -(CH2)qC(O)NH(CH2)qR5、-(CH2)qC(O)R5、-(CH2)qOC(O)R5、-(CH2)qR5、 -(CH2)qNR4(CH2)qR5和-(CH2)qO(CH2)qR5；
在Z4含有烷基或亚烷基部分的情况下，这类部分可以进一步被一个 或多个C1-C6烷基取代；
Z6各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、羟 基、C1-C6烷氧基、-OR4、C1-C6烷硫基、(R3)2N-、(R4)2N-、-R5、 -N(R3)COR8、-N(R4)COR8、-N(R3)SO2R6-、-CON(R3)2、-CON(R4)2、 -COR5、-SO2N(R4)2、卤素、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷 基、氰基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷氧基、 -O-(CH2)q-N(R4)2、-N(R3)-(CH2)q-N(R4)2、-O-(CH2)q-O-烷基、 -N(R3)-(CH2)q-O-烷基、-O-(CH2)q-R5、-N(R3)-(CH2)q-R5、 -(NR3)r-(CH2)n-R17、-(O)r-R17、-(S)r-R17和-(CH2)r-R17；
在Z6含有烷基或亚烷基部分的情况下，这类部分可以进一步被一个 或多个C1-C6烷基取代；
其中R3各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、 C3-C8碳环基和Z3-取代的苯基；
R4各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、二 羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、支链羟 基C1-C6烷基、支链C1-C6烷氧基C1-C6烷基、支链二羟基C1-C6烷基、 -(CH2)p-N(R7)2、-(CH2)p-R5、-(CH2)p-C(O)N(R7)2、-(CH2)nC(O)R5、 -(CH2)n-C(O)OR3、C3-C8碳环基、羟基取代的C3-C8碳环基、烷氧基取 代的C3-C8碳环基、二羟基取代的C3-C8碳环基和-(CH2)n-R17；
R5各自独立地和单独地选自

其中符号(##)是R5基团的连接点；
R6各自独立地和单独地选自C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、C3-C8 碳环基、苯基、G1和G4；
R7各自独立地和单独地选自H、C1-C6烷基、羟基C2-C6烷基、二 羟基C2-C6烷基、C1-C6烷氧基C2-C6烷基、支链C3-C7烷基、支链羟 基C2-C6烷基、支链C1-C6烷氧基C2-C6烷基、支链二羟基C2-C6烷基、 -(CH2)q-R5、-(CH2)n-C(O)R5、-(CH2)n-C(O)OR3、C3-C8碳环基、羟基取 代的C3-C8碳环基、烷氧基取代的C3-C8碳环基、二羟基取代的C3-C8 碳环基和-(CH2)n-R17；
R8各自独立地和单独地选自C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、其中烷 基是部分或完全氟化的氟代烷基、C3-C8碳环基、Z3-取代的苯基、Z3-取 代的苯基C1-C6烷基、Z3-取代的G1、Z3-取代的G1-C1-C6烷基、Z2-取 代的G4、Z2-取代的G4-C1-C6烷基、OH、C1-C6烷氧基、N(R3)2、N(R4)2 和R5；
R10各自独立地和单独地选自CO2H、CO2C1-C6烷基、CO-N(R4)2、 OH、C1-C6烷氧基和-N(R4)2；
R16独立地和单独地选自氢、C1-C6烷基、支链C3-C7烷基、C3-C8 碳环基、卤素、其中烷基可以是部分或完全氟化的氟代烷基、氰基、羟基、 C1-C6烷氧基、其中烷基可以是部分或完全氟化的C1-C6氟代烷氧基、 -N(R3)2、-N(R4)2、C2-C3炔基和硝基；
R17各自来自苯基、萘基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、噻唑 基、异噁唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑 基、四唑基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、四氢 呋喃基、噁唑啉基、噁唑烷基、吡喃基、噻喃基、四氢吡喃基、二噁啉基、 氮杂基、氧杂基、二氮杂基、吡咯烷基和哌啶基；
其中R17可以进一步被一个或多个Z2、Z3或Z4基团取代；
R19是H或C1-C6烷基；
其中两个R3或R4基团独立地和单独地来自C1-C6烷基和支链C3-C6 烷基、羟基烷基和烷氧基烷基，并且连接于同一氮原子，所述基团可以环 化形成C3-C7杂环基环；
以及k是1或2；n是0-6；p是1-4；q是2-6；r是0或1；t是1-3。
2.1：举例说明优选的E1-X2基团的式IIa化合物
在第2节的实施方案中，优选的化合物具有式IIb的结构

2.2：举例说明优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的实施方案中，优选的化合物具有式IIc的结构

2.3：举例说明优选的A1基团的式IIa化合物
在第2.2节的实施方案中，优选的化合物具有式IId的结构

其中A1选自支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳环基、C1-C6烷 基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、Z3-取代的苯基和Z3- 取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.3a举例说明更优选的X2-E1基团的式IId化合物
在第2.3节的实施方案中，优选的化合物具有式IIe的结构

2.3b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IId化合物
在第2.3节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIf的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.4：举例说明其它优选的A1基团的式IIa化合物
在第2.2节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIg的结构

其中A1选自支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳环基、C1-C6烷 基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、Z3-取代的苯基和Z3- 取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.4a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIg化合物
在第2.4节的实施方案中，优选的化合物具有式IIh的结构

2.4b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIg化合物
在第2.4节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIi的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.5：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIj的结构

其中A1选自支链Z2-取代的C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳环基、 Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、 Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.5a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIj化合物
在第2.5节的实施方案中，优选的化合物具有式IIk的结构

2.5b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIj化合物
在第2.5节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIl的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.6：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIm的结构

其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6 烷基、Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.6a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIm化合物
在第2.6节的实施方案中，优选的化合物具有式IIn的结构

2.6b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIm化合物
在第2.6节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIo的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.7：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIp的结构

其中A1选自Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳环基、 Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、 Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.7a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIp化合物
在第2.7节的实施方案中，优选的化合物具有式IIq的结构

2.7b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIp化合物
在第2.7节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIr的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.8：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIs的结构

其中虚线键是饱和或不饱和的键；
其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、卤素、氟代C1-C6烷基、氰基、C1-C6烷 氧基、氟代C1-C6烷氧基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、 Z3-取代的苯基和Z3-取代的GI；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.8a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIs化合物
在第2.8节的实施方案中，优选的化合物具有式IIt的结构

2.8b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIs化合物
在第2.8节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIu的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.9：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIv的结构

其中虚线键是饱和或不饱和的键；
其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、卤素、氟代C1-C6烷基、氰基、C1-C6烷 氧基、氟代C1-C6烷氧基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、 Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.9a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIv化合物
在第2.9节的实施方案中，优选的化合物具有式IIw的结构

2.9b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIv化合物
在第2.9节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIx的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.10：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIy的结构

其中A1选自Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳环基、 Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6烷基、 Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.10a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIy化合物
在第2.10节的实施方案中，优选的化合物具有式IIz的结构

2.10b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIy化合物
在第2.10节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIaa的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.11：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIbb的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.11a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIbb化合物
在第2.11节的实施方案中，优选的化合物具有式IIcc的结构

2.11b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIbb化合物
在第2.11节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIdd的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.12：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIee的结构

其中Q1和Q2单独地和独立地来自N和CH；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.12a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIee化合物
在第2.12节的实施方案中，优选的化合物具有式IIff的结构

2.12b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIee化合物
在第2.12节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIgg的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.13：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIhh的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.13a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIhh化合物
在第2.13节的实施方案中，优选的化合物具有式IIii的结构

2.13b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIhh化合物
在第2.13节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIjj的结构

其中R16是甲基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.14：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIkk的结构

其中Q6是N或C-A1；
其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6 烷基、Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.14a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIkk化合物
在第2.14节的实施方案中，优选的化合物具有式IIll的结构

2.14b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIkk化合物
在第2.14节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IImm的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.15：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IInn的结构

其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6 烷基、Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.15a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IInn化合物
在第2.15节的实施方案中，优选的化合物具有式IIoo的结构

2.15b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IInn化合物
在第2.15节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIpp的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.16：举例说明另外优选的A基团的式IIa化合物
在第2.1节的不同实施方案中，其它优选的化合物具有式IIqq的结构

其中Q3、Q4和Q5选自N-A1和C-A1，并且Q3、Q4或Q5中只有 一个是N-A1；
其中A1选自氢、Z2-取代的支链C3-C8烷基、R19取代的C3-C8碳 环基、Z2-取代的C1-C6烷基、其中烷基是完全或部分氟化的氟代C1-C6 烷基、Z3-取代的苯基和Z3-取代的G1；
其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH或卤素。
2.16a：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIqq化合物
在第2.16节的实施方案中，优选的化合物具有式IIrr的结构

2.16b：举例说明更优选的X2-E1基团的其它式IIqq化合物
在第2.16节的另一种实施方案中，优选的化合物具有式IIss的结构

其中R16是C1-C6烷基、氰基、-CCH、氟或氯。
2.17：方法
2.17a：蛋白质调控方法
本发明包括调控RAF激酶和RAS-RAF-MEK-ERK-MAP激酶途径中 其它激酶、包括但不限于A-Raf、B-Raf和C-Raf的激酶活性的方法。激 酶可以是野生型激酶、其致癌形式、其异常融合蛋白或者上述任一种的多 型变体(polymorphs)。该方法包括使激酶品种与本发明的化合物、尤其第 2.1-2.16节中给出的那些接触的步骤。激酶品种可以是活化的或未活化的， 这些品种可以受到磷酸化、硫酸化、脂肪酸酰化、糖基化、亚硝基化、胱 氨酸化(即激酶中的邻近半胱氨酸残基彼此反应生成二硫键)或者氧化的调 控。激酶活性可以选自磷酸转移反应的催化、激酶细胞局限化和其它蛋白 质通过激酶构型的调控而募集成信号传导复合物。
2.17b治疗方法
本发明的方法、尤其第2.1-2.16节的那些还包括治疗患有选自如下的 病症的个体：慢性髓性白血病、急性淋巴细胞白血病、胃肠基质肿瘤、嗜 酸性细胞增多综合征、成胶质细胞瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肺癌、 乳癌、肾癌、宫颈癌、原发性实体瘤继发部位的转移、以导致失明的过度 增殖为特征的眼疾病(包括各种视网膜病，包括糖尿病性视网膜病和年龄相 关性黄斑变性)、类风湿性关节炎、黑素瘤、结肠癌、甲状腺癌、由 RAS-RAF-MEK-ERK-MAP激酶途径中的突变所致的疾病、人类炎症、类 风湿性脊椎炎、骨关节炎、哮喘、痛风性关节炎、脓毒病、败血症性休克、 内毒素性休克、革兰氏阴性脓毒病、中毒性休克综合征、成人呼吸窘迫综 合征、中风、再灌注损伤、神经创伤、神经缺血、银屑病、再狭窄、慢性 阻塞性肺疾病、骨吸收性疾病、移植物抗宿主反应、节段性回肠炎(Chron’s disease)、溃疡性结肠炎、炎性肠病、发热和它们的联合。
2.18药物制剂
本发明的化合物、尤其第2.1-2.16节的那些可以通过将一种或多种该 化合物与可药用载体合并而形成药物组合物的一部分。另外，组合物可以 包括选自佐剂、赋形剂、稀释剂和稳定剂的添加剂。
3.本发明的化合物的合成
式Ia和IIa化合物通过以下流程和所附实施例中描述的通用合成方法 来制备。
流程1

其中各变量如上定义的通式Ia化合物可以通过通用流程1制备。因而 在步骤1中，式1的胺与式2的异氰酸酯反应得到式5的脲，即式Ia的实 例。可以理解，异氰酸酯2可以是直接加入反应物中的或者可以原位制备， 例如通过在1存在下进行酰基叠氮化物分解(库尔提斯(Curtius)重排)来原 位制备。将进一步被本领域技术人员所理解的是，某些氨甲酸酯如氨甲酸 三氯乙基酯(3)和氨甲酸异丙烯基酯(4)也发挥异氰酸酯等效物的功能，将可 用于步骤1。
或者，当R3＝H时，式1的胺可以通过与氯甲酸三氯乙基酯(7)或氯甲 酸异丙烯基酯(8)反应首先转化为异氰酸酯等效物9或10。氨甲酸酯9或 10与胺11进一步反应，得到式12的脲，它是式1的子集。
当R3不是H时，单-R3-取代的脲5和12可以转化为双-R3-取代的脲， 如流程1的步骤4和5所示。用烷基卤化物在碱如碳酸钾、NaH、叔丁醇 钾或BEMP的存在下、在适宜溶剂如DMF中使NH-脲5或12进行烷基 化，得到式6化合物，其中新引入的R3是烷基或环烷基。或者，使脲5 或12与乙酸铜(II)和苯基硼酸(参见Chan等人，Tetrahedron Lett.2003，44， 3863-3865；Chan等人，Tetrahedron Lett.1998，39，2933-2936；Chan，D.M. T.Tetrahedron Lett.1996，37，9013-9016)接触，得到类似的式6化合物，其 中新引入的R3是苯基。
生成通式Ia化合物(16)的修改的途径如下文流程2所示。因而在步骤 1中，化合物13(化合物5、6或12的等效物，其中Z6基团之一是甲硫基) 可以被氧化为亚砜(14)或砜(15)。这类转化所优选的试剂包括过苯甲酸、过 硫酸氢钾制剂(oxone)、氧杂氮杂环丙烷或者其它将被本领域技术人员认为 是硫原子的标准氧化剂的氧化剂。在实践中，14与15的混合物通常与单 独的14或15一样有效。在用于步骤2之前不需要对14与15的混合物进 行纯化。在步骤2中，亚砜14/砜15可以转化为Z6-取代的化合物16，其 中，通过使14/15分别与胺Z6-H(例如NH(R4)2)或羟基Z6-H(例如HOR4) 接触，使得新的Z6基团经由氮原子链接或氧原子链接与嘧啶环连接。这 类转化所优选的溶剂包括DMSO、DMF、THF、醇性溶剂或者净HN(R4)2， 温度为0℃至60℃。
流程2

下文实施例进一步描述了各种式1的胺的合成。
流程3

如流程3所示，适宜的氯嘧啶酯17与R4-取代的胺反应(步骤1)，得 到式18化合物。流程3步骤1所优选的条件包括：极性溶剂如DMF、THF、 乙腈、二噁烷、水或其混合物，在任选添加的碱如三乙胺的存在下，温度 在0℃与100℃之间。如步骤2所示，酯18还原得到醇19。步骤2的转化 所优选的试剂包括氢化铝锂在THF中、在-78℃至50℃的温度下。如步骤 3所示，将醇19用氧化剂如二氧化锰氧化，可以制备醛20。
在流程3步骤4中，氨基-醛20可以通过用胺21进行还原性胺化而转 化为二胺22。步骤4可以通过在适宜还原剂的存在下原位生成亚铵鎓离子、 以单罐工艺来完成。步骤4的这种单罐变通方法所优选的条件包括：醛20、 胺21和三乙酰氧基硼氢化钠的联合，在乙酸或三氟乙酸的存在下，温度在 0至100℃之间。本领域技术人员将认识到，步骤4的转化也存在等效的两 罐工艺。例如，胺21与醛20缩合生成分离的希夫(Schiff)碱(亚胺，未显示)， 如果需要的话其可以通过标准方法分离和纯化。然后，将所述亚胺随后用 还原剂如氢化铝锂还原，得到式22的二胺。
在步骤5中，二胺22与光气或光气等效物反应，得到环状脲23。适 宜的光气等效物包括二光气、三光气和羰二咪唑。步骤5所优选的条件是 使二胺22与二光气在叔胺碱如三乙胺或二异丙基乙胺的存在下、在0至 100℃的温度下接触。步骤5所优选的溶剂包括二噁烷或甲苯。
在流程3步骤6中，23的硝基被还原，得到胺24，即通式1胺的实例。 步骤6所优选的方法包括使式23化合物在适宜氢化催化剂如披钯炭的存在 下在适宜溶剂如乙醇、乙酸乙酯或THF中与氢气接触。步骤6所优选的其 它方法包括用粉末状金属试剂如在HCl水溶液存在下的铁粉或在氯化铵存 在下的锌粉进行还原。
在流程3步骤7中，24的氨基部分可以任选被“烷基化”以得到R3- 取代的胺25，它也是通式1胺的实例。本领域技术人员将认识到，步骤7 的转化存在多种标准合成方法，包括用式R3-X试剂(其中X是离去基团， 例如卤素或甲苯磺酸酯基)进行直接烷基化、用含有R3的醛进行还原性胺 化，或者其中胺首先被酰化以得到含有R3的酰胺、随后所述酰胺可以被 还原以得到R3-烷基化的化合物25的两步法。
在步骤8中，25的甲硫基可以被氧化为亚砜26或砜27。该转化所优 选的试剂包括过苯甲酸、过硫酸氢钾制剂、氧杂氮杂环丙烷或者其它将被 本领域技术人员认为是硫原子的标准氧化剂的氧化剂。
按照类似于流程2的方式，亚砜26/砜27可以转化为Z6-取代的化合 物28(步骤9)，其中，通过使26/27分别与胺Z6-H(例如NH(R4)2)或羟基 Z6-H(例如HOR4)接触，使得新的Z6基团经由氮原子链接或氧原子链接 与嘧啶环连接。这类转化所优选的溶剂包括DMF、THF、DMSO、醇性溶 剂或者净HN(R4)2，温度为0℃至200℃，任选在碱如叔丁醇钾、氢化钠、 氢氧化物等的存在下或者在强酸如盐酸的存在下。本领域技术人员将认识 到，在某些情形中，可以利用步骤9的条件直接由式25化合物制备式28 化合物。
流程4

式22化合物的供选合成途径如流程4所示。因而，醇19可以通过亚 硫酰氯或磷酰氯(POCl3)的作用转化为氯化物29。氯化物29与胺21反应 得到二胺22。流程4步骤2的转化所优选的条件包括使氯化物29与胺在 二异丙基乙胺的存在下和任选在碘化钠的存在下接触。步骤2所优选的溶 剂包括0至80℃的乙腈和二噁烷。
本领域技术人员将认识到，流程3和4中胺21的硝基部分代表胺的替 代者，因此硝基胺21在流程3和4中可以用下述胺30代替，其中式30 中的基团“P”代表胺保护基团，例如氨甲酸叔丁基酯(Boc)、氨甲酸苄基 酯(Cbz)、乙酰胺等。将被本领域技术人员理解到的是，当中间体30代替 流程3中的胺21时，式30的保护基团P可以通过适当的去保护条件除去 (例如，就Boc而言通过酸性除去或者就Cbz而言通过氢化)，得到导致生 成中间体25的化合物。将进一步被本领域技术人员理解的是，式30中的 基团R3-N-P-X2也可能代表氨基-X2替代物如氰基，其可以以类似方式通 过在适宜条件下还原来转化为氨基甲基。

不能自商业途径获得的嘧啶17可以容易地由已知的中间体31制得(参 见Seto，等人.Biorg，Med，Chem.Lett.2005，15，1485)(流程5)。因而，用LDA 使31锂化，然后用CO2淬灭，得到酸32。酸32向酯33的转化提供了骨 架以引入本发明的Z6基团。当Z6基团通过Z6氮原子、Z6氧原子或Z6 硫原子与嘧啶环连接时，可以通过使胺Z6-H、醇Z6-H或硫醇Z6-H与化 合物33在净溶剂条件下(Z6-H作为溶剂)或者在适宜溶剂如DMF、DMSO 或醇性溶剂中、在-78℃至200℃的温度下、在适宜碱如三乙胺、碳酸钾或 叔丁醇钾的存在下接触来制备式17化合物。当Z6基团通过Z6碳原子与 嘧啶接触时，优选的方法包括使化合物33与式Z6-M化合物在钯催化剂的 存在下接触，其中M是参与过渡金属催化的交叉偶联反应的基团。适宜的 M基团的实例包括但不限于硼酸和硼酸酯、锌、铜、锡、硅、镁、锂和铝。
流程5

一些通式1的胺也可以如流程6所示制备。因而，R4-取代的胺与5- 溴-2，6-二氯嘧啶(34，可自商业途径获得)反应得到溴代胺35。在步骤2中， 在钯催化剂的存在下用三丁基乙烯基锡处理溴化物35，得到36。在步骤3 中，烯烃基团进行氧化性裂解，得到式37的醛。应用流程3的步骤4-7将 醛37转化为胺38。在流程6的步骤8中，氯化物38可以通过若干方法转 化为Z6-取代的39，所述方法取决于Z6的属性。当Z6基团通过Z6氮原 子与吡啶并嘧啶环连接时，优选的方法包括将38与过量的胺Z6-H在无溶 剂条件下或在溶剂如DMF、DMSO或醇性溶剂中于室温至200℃的温度下 加热。就芳基和杂芳基胺Z6-H而言，其它优选的方法包括将化合物38与 过量的胺Z6-H和酸催化剂(例如TsOH、HCl、HOAc等)在适宜溶剂如 DMF、DMSO或醇性溶剂中加热。就芳基和杂芳基胺Z6-H而言所优选的 其它方法包括在过渡金属催化剂如钯催化剂的存在下、在适宜溶剂如1，4- 二噁烷或DMF中加热38。当Z6基团通过Z6氧或硫原子与吡啶并嘧啶连 接时，优选的方法包括将38与醇或硫醇Z6-H在强碱(例如NaH或叔丁醇 钾)的存在下、在采用Z6-H作为溶剂的无溶剂条件下或者在极性溶剂如 DMF或DMSO中于室温至200℃的温度下加热。当Z6基团通过Z6碳原 子与吡啶并嘧啶连接时，优选的方法包括使38与式Z6-M化合物在钯催化 剂的存在下接触，其中M是参与过渡金属催化的交叉偶联反应的基团。适 宜的M基团的实例包括但不限于硼酸和硼酸酯、锌、三烷基锡、硅、镁、 锂和铝。在Z6是氢的情形中，优选的方法包括使38在适宜的氢化催化剂 如阮内(Raney)或披钯炭的存在下、在适宜溶剂如乙醇、乙酸乙 酯或THF中与氢气接触。
流程6

一些式IIa化合物可以通过流程7中的方法制备。类似于流程1，胺 40或41(其中所有变量如上所述)分别与异氰酸酯(2)或异氰酸酯替代物如 3、4或酰基酰肼经由库尔提斯(Curtius)重排(未显示)进行反应，得到脲42 和43，它们是通式IIa的实例。在其中R3＝H的情形中，式40和41的胺 可以通过与氯甲酸三氯乙基酯(7)或氯甲酸异丙烯基酯(8)反应首先转化为 异氰酸酯等效物44-47。氨甲酸酯44-47与胺11进一步反应，得到式48和 49的脲，它们是式IIa的实例。当R3不是H时，单-R3-取代的脲42、43、 48或49可以通过上文流程1所述的方法转化为双-R3-取代的脲50或51， 如流程7的步骤4和5所示。
流程7

通式40和41的胺可通过下列流程和所附的实验性实施例获得。流程 8详述了通式60胺的制备。类似于流程3，Z6-取代的二氯烟酸乙酯52与 R4-取代的胺反应(流程8步骤1)，得到式53化合物。流程8步骤1所优选 的条件包括：极性溶剂如DMF、THF、乙腈、二噁烷、水或其混合物，在 任选添加的碱如三乙胺的存在下，温度在0℃至100℃之间。如步骤2所示， 酯53还原得到醇54。步骤2的转化所优选的试剂包括氢化铝锂在THF中、 在-78℃至50℃的温度下。如步骤3所示，将醇54用氧化剂如二氧化锰氧 化，可以制备醛55。
流程8

在流程8步骤4中，氨基-醛55可以通过用胺21进行还原性胺化而转 化为二胺56。步骤4可以通过在适宜还原剂的存在下原位生成亚铵鎓离子、 以单罐工艺来完成。步骤4的这种单罐变通方法所优选的条件包括：醛55、 胺21和三乙酰氧基硼氢化钠的联合，在乙酸或三氟乙酸的存在下，温度在 0至100℃之间。或者，步骤4也可以是两罐工艺，其中胺21与醛55首先 缩合生成分离的希夫(Schiff)碱(亚胺，未显示)，如果需要的话其可以通过 标准方法分离和纯化。然后，将所述亚胺随后用还原剂如氢化铝锂还原， 得到式56的二胺。更优选56可以按照上文流程4中所述的工艺由醇54 经由相应的氯化物(未显示)制备。
在步骤5中，二胺56与光气或光气等效物反应，得到环状脲57。适 宜的光气等效物包括二光气、三光气和羰二咪唑。步骤5所优选的条件是 使二胺56与二光气在叔胺碱如三乙胺或二异丙基乙胺的存在下、在0至 100℃的温度下接触。步骤5所优选的溶剂包括二噁烷或甲苯。
在流程8步骤6中，57的硝基被还原，得到胺58。步骤6所优选的其 它方法包括使式57化合物与粉末状金属试剂如在HCl水溶液存在下的铁 粉或在氯化铵存在下的锌粉接触。在步骤7中，58的氨基部分可以任选被 “烷基化”以得到R3-取代的胺59。本领域技术人员将认识到，步骤7的 转化存在多种标准合成方法，包括用式R3-X试剂(其中X是离去基团，例 如卤素或甲苯磺酸酯基)进行直接烷基化、用含有R3的醛进行还原性胺化， 或者其中胺首先被酰化以得到含有R3的酰胺、随后所述酰胺可以被还原 以得到R3-烷基化的化合物59的两步法。
式59化合物可以通过用Z6基团替代59的氯基团而转化为式60化合 物(步骤8)，它是通式40的实例。有若干方法可以完成这一步，这取决于 Z6-H的属性。当Z6基团通过Z6氮原子与吡啶环连接时，优选的方法包 括将式59化合物与过量的胺Z6-H在无溶剂条件下或在溶剂如DMF、 DMSO或醇性溶剂中于室温至200℃的温度下加热。就芳基和杂芳基胺 Z6-H而言，其它优选的方法包括将化合物59与过量的胺Z6-H和酸催化 剂(例如TsOH、HCl、HOAc等)在适宜溶剂如DMF、DMSO或醇性溶剂 中加热。就芳基和杂芳基胺Z6-H而言所优选的其它方法包括在过渡金属 催化剂如钯催化剂的存在下、在适宜溶剂如1，4-二噁烷或DMF中加热化合 物59。当Z6基团通过Z6碳原子与吡啶连接时，优选的方法包括将化合物 59与式Z6-M化合物在钯催化剂的存在下接触，其中M是参与过渡金属 催化的交叉偶联反应的基团。适宜的M基团的实例包括但不限于硼酸和硼 酸酯、锌、三烷基锡、硅、镁、锂和铝。在Z6是氢的情形中，优选的方 法包括使式59化合物在适宜的氢化催化剂如披钯炭的存在下、在适宜溶剂 如乙醇、乙酸乙酯或THF中与氢气接触。
流程9

制备其中吡啶环Z6取代基是氨基甲基的通式40胺所优选的方法在制 备通式66胺的流程9中进行了说明。因而，氯吡啶61(类似于流程8步骤 1由2，4-二氯烟酸乙酯制得)与N，O-二甲基羟胺HCl反应，得到氨基吡啶酯 62(步骤1)。酯62可以如上所述被还原为醇63。在步骤3中，醇63按照 上文流程4中所述的方案转化为二胺64。如上所述用二光气处理64，得到 环状脲65。在流程9步骤5中同时进行硝基的还原和甲氧基胺N-O键的裂 解，得到66，它是通式40胺的实例。步骤5所优选的条件包括在适宜的 氢化催化剂如披钯炭的存在下、在适宜溶剂如甲醇、乙醇、乙酸乙酯或THF 中、于1-100psi的压力和15-80℃的温度下使65与氢气接触。
通式41的胺可以如流程10所示制备。以3-溴-2，6-二氯吡啶(67，可由 Pierrat等人.J.Comb.Chem.2005，7，879-886的工艺获得)为原料，与R4- 取代的胺进行反应得到溴胺68。在步骤2中，在钯催化剂的存在下用三丁 基乙烯基锡处理溴化物68，得到69，然后类似于流程6可以制备胺71， 它是通式41胺的实例。
流程10

其中X-Y是C＝N的式1胺可以如流程11所述制得。因而在步骤1中， 二氯硝基嘧啶72(Z6＝H，Z6＝甲基，Z6＝羧乙基是可自商业途径获得的)的 氯原子之一可以通过用R4-取代的胺在适当溶剂如THF中、在-78℃至室 温的温度下处理而完成选择性置换，得到化合物73。在步骤2中，用Z6 基团替换剩余的氯原子可以通过如上文流程6步骤8中所讨论的方法得以 完成，得到化合物74。硝基还原得到式75二胺(步骤3)。在步骤4中，化 合物75与式76的α-酮基酯缩合，得到式77化合物。在步骤5中，除去 任选的保护基团P，得到化合物78，它是胺1的实例。
流程11

类似于流程11，其中X-Y是C＝N的胺40和41的实例可以如流程12 所示制得。在步骤1中，二氯硝基吡啶79(Z6＝H：参见Recueil des Travaux Chimiques des Pays-Bas，1976，95，127-129)与80(Z6＝H：可自商业途径获 得)分别与R4-取代的胺在适当溶剂如THF中反应，得到化合物81和82。 在步骤2中，用Z6基团替换剩余的氯原子可以通过如上文流程6步骤8 中所讨论的方法得以完成，得到化合物83-84。类似于流程11步骤3-5， 硝基胺83和84可以转化为85和86，它们分别是胺40和41的实例。
流程12

通用方法A：于0℃向原料吡唑胺(1eq)的EtOAc溶液中加入氯甲酸 2，2，2-三氯乙基酯(1.1eq)和饱和NaHCO3(2-3eq)。于室温搅拌3小时后，分 离各层，水层用EtOAc萃取。合并有机萃取液，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)， 在真空中浓缩，得到粗的吡唑胺的TROC氨甲酸酯。向该氨甲酸酯(1eq) 的DMSO溶液中加入二异丙基乙胺(2eq)、适当的胺(2eq)，将混合物在60 ℃下搅拌16h或者直至全部原料氨甲酸酯被消耗。向混合物中加入水，产 物用EtOAc萃取(2×25mL)。合并有机萃取液，用盐水溶液洗涤，干燥 (Na2SO4)，在真空中浓缩，得到粗产物，经柱色谱法纯化，得到目标化合 物。
通用方法B：向胺(通常0.67mmol)的EtOAc(2mL)混悬液中加入1N NaOH水溶液。将反应混合物冷却至0℃，用氯甲酸异丙烯基酯(0.1mL， 0.94mmol)处理30秒。将反应混合物于0℃搅拌15分钟，于室温搅拌1小 时。将反应物倒入THF-EtOAc(1∶1，40mL)中，用H2O(2×10mL)和盐水 (2×10mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩，残余物经柱色谱 法纯化，得到目标氨甲酸(丙-1-烯-2-基)酯。在60℃下向氨甲酸酯(通常 0.26mmol)中加入适当的胺(通常0.26mmol)的THF(2mL)溶液和1-甲基吡 咯烷(催化量)达18小时。将混合物用CH2Cl2(2mL)和己烷(0.5mL)溶液稀 释，搅拌10分钟。过滤所得固体，干燥，将所得固体通过用0.1N HCl溶 液处理和冷冻干燥而转化为胺的盐酸盐。
通用方法C：于室温向搅拌着的胺(2mmol，1.00eq)与吡啶(4mmol， 2.00eq)的CH2Cl2(18ml)溶液中加入Troc-Cl(1.87mmol，1.05eq)。4小时后， 将反应物用3M HCl(1×)、饱和NaHCO3(1×)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤， 蒸发，得到目标氨甲酸2，2，2-三氯乙基酯。该物质直接用于下一反应。
将氨甲酸2，2，2-三氯乙基酯(0.7mmol，1.00eq)、适当的(0.7mmol，1.00eq) 和iPr2NEt(1.54mmol，2.20eq)在DMSO(3ml)中合并，搅拌并于70℃加热。 18小时后反应完全，用盐水(30ml)稀释，用EtOAc萃取(3×)。合并有机 层，用盐水洗涤(2×)，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发，得到粗产物，经快速 柱色谱法纯化。
通用方法D：于室温向搅拌着的羧酸(0.50mmol，1.00eq)与DPPA (0.75mmol，1.50eq)的1，4-二噁烷(5.0ml)溶液中加入Et3N(1.5mmol， 3.00eq)。于室温搅拌30分钟后，加入适当的胺(0.76mmol，1.50eq)，将混 合物于100℃加热。2小时后反应完全，冷却至RT，用盐水稀释，用EtOAc 萃取(2×)。合并有机层，用3M HCl(1×)、饱和NaHCO3(2×)和盐水(1×) 洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发，得到粗产物，经快速柱色谱法纯化， 得到目标脲。
通用方法E：向芳基砜和/或芳基亚砜(0.4mmol)的THF溶液中加入适 当的胺(2mmol，5eq)，将反应物于室温搅拌2小时。将混合物用EtOAc(3mL) 稀释，过滤所得固体，洗涤，干燥，得到所需产物芳基胺。
通用方法F：于室温向搅拌着的异氰酸酯(0.51mmol，1.00eq)与吡啶 (0.0418ml，0.51mmol，1.00eq)的CH2Cl2(5ml)混悬液中加入适当的胺 (0.51mmol，1.00eq)。逐渐生成浓稠的混悬液。3.5小时后，过滤收集固体， 用CH2Cl2充分冲洗，在滤器上干燥，得到所需的脲。
通用方法G：在-78℃和Ar下，向胺(11mmol)的THF(100mL)溶液中 加入LiHMDS(22mmol)。20分钟后，加入氯甲酸丙-1-烯-2-基酯(11mmol)， 将反应物搅拌30分钟。在-78℃下将混合物用2N HCl(15mL)淬灭，温热 至RT。将其用盐水(50mL)和EtOAc(50mL)稀释，分离有机层，用盐水洗 涤，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。经硅胶色谱法或重结晶纯化，得到适 当的氨甲酸丙-1-烯-2-基酯。
于60℃向该氨甲酸酯(通常0.26mmol)中加入适当的胺(通常0.26mmol) 的THF(2mL)溶液和1-甲基吡咯烷(催化量)达18小时。将混合物用CH2Cl2 (2mL)和己烷(0.5mL)溶液稀释，搅拌10分钟。过滤所得固体，干燥，将所 得固体通过用0.1N HCl溶液处理和冷冻干燥而转化为胺的盐酸盐。
实施例A1：将乙酸(10mL，174mmol)加入到实施例C2(10g，54.6mmol) 与4-氟-3-硝基苯胺(8.5g，54.6mmol)在水(350mL)中的混合物中，将混合物 于室温搅拌过夜。过滤收集固体，用MeOH洗涤(2×20mL)，得到5-((4-氟 -3-硝基苯基亚氨基)甲基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(8.0g，46％收率)，为 黄色固体。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ9.39(m，1H)，8.71(s，1H)， 8.33(s，1H)，8.18(m，1H)，7.80(m，1H)，7.61(t，J＝6.9Hz，1H)，3.05(d，J ＝3.6Hz，3H)，2.48(s，3H)；MS(ESI)m/z：322.2(M+H+)。
于0℃向LiAlH4(1.3g，34mmol)的无水THF混悬液历经20分钟逐批 加入上述5-((4-氟-3-硝基苯基亚氨基)甲基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺。 加入完成后，将混合物于0℃搅拌30分钟。加入10％NaOH水溶液(2mL)， 过滤除去所得沉淀。在减压下浓缩滤液，得到5-((4-氟-3-硝基苯基氨基)甲 基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(6.0g，56％收率)，为褐色固体。1H NMR (300MHz，DMSO-d6)：δ7.84(s，1H)，7.28(dd，J＝6.6，8.4Hz，1H)，7.17 (m，1H)，7.03(m，1H)，6.42(t，J＝3.9Hz，1H)，4.00(d，J＝3.9Hz，2H)， 2.82(d，J＝4.8Hz，3H)，2.39(s，3H)；MS(ESI)m/z：324.1(M+H+)。
于0℃向二光气(3.5g，17.7mmol)的二噁烷(350mL)溶液缓慢加入由 5-((4-氟-3-硝基苯基氨基)甲基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(5.2g， 16.1mmol)与Et3N(4.5mL，32.1mmol)在二噁烷(250mL)中组成的溶液。将 所得反应混合物于室温搅拌过夜。在真空中除去溶剂，使残余物在EtOAc 与H2O之间分配。合并有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩，得到粗产物，用冷 的MeOH(5mL)洗涤，得到3-(4-氟-3-硝基苯基)-1-甲基-7-(甲硫基)-3，4-二 氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(5.0g，89％收率)，为褐色固体。1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)：δ8.26(s，1H)，8.20(m，1H)，7.82(m，1H)，7.64(dd，J＝ 6.9，8.4Hz，1H)，4.82(s，2H)，3.29(s，3H)，2.50(s，3H)；MS(ESI)m/z： 350.3(M+H+)。
向3-(4-氟-3-硝基苯基)-1-甲基-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -2(1H)-酮(3.0g，8.6mmol)的MeOH(30mL)溶液中加入10％Pd/C(1.2g， 1.1mmol)。将所得混合物在H2(30psi)下搅拌过夜。将混合物过滤，在真空 中浓缩，经硅胶柱色谱法纯化，得到3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-甲基-7-(甲硫 基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(1.8g，66％收率)，为褐色固体。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ8.21(s，1H)，6.99(dd，J＝6.6，8.4Hz，1H)， 6.70(dd，J＝1.8，6.0Hz，1H)，6.47(m，1H)，5.21(br s，2H)，4.65(s，2H)， 3.26(s，3H)，2.50(s，3H)；MS(ESI)m/z：320.0(M+H+)。
实施例A2：向实施例A1(400mg，1.3mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液一次 性加入3-氯过苯甲酸(mCPBA)(430mg，2.5mmol)。搅拌2小时后，反应混 合物用NaHCO3水溶液和NaHSO3水溶液淬灭。分离有机层，用盐水洗涤， 干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。将粗产物溶于DMSO(2mL)，用氨的二噁烷 溶液(2M，30ml，60mmol)处理。将混合物于室温搅拌过夜。在减压下浓缩 反应物，残余物经硅胶色谱法纯化，得到7-氨基-3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-甲 基-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(276mg，77％收率)，为黄色固体。 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ7.88(s，1H)，6.96(dd，J＝8.4，6.6Hz，1 H)，6.68(dd，J＝6.3，2.1Hz，1H)，6.52(br s，2H)，6.44(m，1H)，5.18(s，2 H)，4.48(s，2H)，3.19(s，3H)；MS(ESI)m/z：289.2.(M+H+)。
实施例A3：通过实施例A2的工艺合并实施例A1(1.0g，3.1mmol)、 mCPBA(1.1g，6.3mmol)和甲基胺，得到3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-甲基-7-(甲 基氨基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(370mg，39％收率)，为黄色固 体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.93(s，1H)，6.99-6.94(m，2H)，6.69 (d，J＝8.4Hz，1H)，6.44(m，1H)，5.18(s，2H)，4.50(s，2H)，3.23(s，3H)， 2.78(d，J＝4.0Hz，3H)；MS(ESI)m/z：(M+H+)303.2
实施例A4：于0℃将POCl3(5.86g，38.6mmol)滴加到实施例C3(3.8g， 19.3mmol)的THF(25mL)溶液中。使所得混合物温热至25℃达4小时。在 减压下除去溶剂，得到粗的5-(氯甲基)-N2-甲氧基-N2，N4-二甲基吡啶-2，4- 二胺HCl(3.5g，84％收率)，未经进一步纯化用于下一步骤。
将上述5-(氯甲基)-N2-甲氧基-N2，N4-二甲基吡啶-2，4-二胺HCl(3.5g， 16.3mmol)与4-氟-3-硝基苯胺(41.5mL，0.3mol)在吡啶(150mL)中的混合物 在50℃下搅拌8小时。在真空中浓缩反应混合物，得到粗产物，用H2O 洗涤，干燥，得到5-((4-氟-3-硝基苯基氨基)甲基)-N2-甲氧基-N2，N4-二甲 基吡啶-2，4-二胺(3.3g，60％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.83(m， 1H)，7.62(s，1H)，7.30(t，J＝9.2Hz，1H)，7.20(m，1H)，6.98(m，1H)，6.81 (s，1H)，5.98(s，1H)，4.14(s，2H)，3.69(s，3H)，3.30(s，3H)，2.89(d，J＝4.8 Hz，3H)；MS(ESI)m/z：336.2(M+H+)
在10℃下，向二光气(1.15mL，9.5mmol)的无水二噁烷(100mL)溶液中 加入5-((4-氟-3-硝基苯基氨基)甲基)-N2-甲氧基-N2，N4-二甲基吡啶-2，4-二 胺(3.0g，9.0mmol)与Et3N(2.5mL，18.0mmol)在二噁烷(200mL)中的混合 物。加入后，将所得混合物在30℃下搅拌10小时。加入H2O以淬灭上述 反应物，混合物用饱和Na2CO3溶液中和至pH 7。在减压下除去二噁烷， 剩余水溶液用EtOAc萃取(3×50mL)。合并有机层，用盐水洗涤，经MgSO4 干燥，浓缩，得到3-(4-氟-3-硝基苯基)-7-(甲氧基(甲基)氨基)-1-甲基-3，4- 二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(2.1g，65％收率)，未经进一步纯化用于下 一步骤。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ8.15(m，1H)，7.97(s，1H)，7.80 (m，1H)，7.62(t，J＝9.3Hz，1H)，6.58(s，1H)，4.80(s，2H)，3.72(s，3H)， 3.27(s，3H)，3.15(s，3H)；MS(ESI)m/z：362.2(M+H+)。
将3-(4-氟-3-硝基苯基)-7-(甲氧基(甲基)氨基)-1-甲基-3，4-二氢吡啶并 [4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(2g，5.5mmol)的甲醇(30mL)溶液与10％Pd/C(1.0g， 0.94mmol)在45℃和氢(45psi)下搅拌24小时。完成后过滤反应混合物，在 真空中浓缩滤液。将残余物用乙醚洗涤，在真空中干燥，得到3-(3-氨基-4- 氟苯基)-1-甲基-7-(甲基氨基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(1.1g， 66％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.70(s，1H)，6.94(t，J＝9.6 Hz，1H)，6.66(d，J＝6.8Hz，1H)，6.40(m，2H)，5.92(s，1H)，5.17(s，2H)， 4.50(s，2H)，3.13(s，3H)，2.73(d，J＝4.0Hz，3H)，MS(ESI)m/z： 302.1(M+H+)。
实施例A5：在N2下，将正丁基锂(1.6M己烷溶液，109mL，0.175mol) 滴加到-78℃的1-溴-4-氟-2-甲基苯(30g，0.16mol)的THF(500mL)溶液中。 完全加入后，将反应混合物在-78℃下搅拌1小时。将浅黄色溶液通过套管 快速转移至另一烧瓶内，其中含有预冷却(-78℃)的草酸二乙酯(27.8g， 0.19mol)的THF(400mL)溶液。在-78℃下搅拌另外30分钟后，加入饱和 NH4Cl溶液(800mL)淬灭反应混合物。水层用EtOAc萃取(3×400mL)，合 并有机层，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩，经由硅胶色谱法纯化，得到2-(4- 氟-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙基酯(22.0g，66％收率)。1H NMR(400MHz， CDCl3)：δ7.73(dd，J＝9.2，5.6Hz，1H)，7.02-6.96(m，2H)，4.40(m，2H)， 2.60(s，3H)，1.29(t，J＝6.8Hz，3H)。MS(ESI)m/z：233.0[M+Na]+
于0℃将HNO3(6.92g，71.4mmol)滴加到2-(4-氟-2-甲基苯基)-2-氧代乙 酸乙基酯(15g，71.4mmol)的浓H2SO4(50mL)混悬液中。完全加入后，将所 得混合物于0℃搅拌30分钟。将混合物倒入冰水中，用EtOAc萃取。将 有机萃取液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到2-(4-氟-2-甲 基-5-硝基苯基)-2-氧代乙酸乙基酯(15g，83％收率)，未经进一步纯化用于下 一步骤。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ8.53(d，J＝7.2Hz，1H)，7.24(d，J＝ 7.2Hz，1H)，4.47(q，J＝7.2Hz，2H)，2.67(s，3H)，1.43(t，J＝7.2Hz，3H)。
将2-(4-氟-2-甲基-5-硝基苯基)-2-氧代乙酸乙基酯(15g，59mmol)与Fe (46g，828mmol)在AcOH(200mL)中的混合物于室温搅拌过夜。过滤除去固 体，在减压下除去溶剂。使残余物在水与EtOAc之间分配。将有机层用盐 水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到2-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-2- 氧代乙酸乙基酯(9.0g，70％收率)，未经进一步纯化用于下一步骤。1H NMR (400MHz，CDCl3)：δ7.16(d，J＝6.9Hz，1H)，6.91(d，J＝8.7Hz，1H)，4.41 (q，J＝7.2Hz，2H)，2.50(s，3H)，1.40(t，J＝7.2Hz，3H)。
将乙酰氯(3.12g，40mmol)加入到0℃的2-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-2- 氧代乙酸乙基酯(9g，40mmol)与Et3N(8.1g，80mmol)的CH2Cl2(80mL)溶液 中。将所得混合物于室温搅拌3小时。在减压下除去溶剂，得到2-(5-乙酰 氨基-4-氟-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙基酯(10.7g，100％收率)，未经进一步 纯化用于下一步骤。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ8.71(d，J＝6.0Hz，1H)， 7.37(brs，1H)，6.95(d，J＝8.7Hz，1H)，4.39(q，J＝7.2Hz，2H)，2.50(s，3 H)，2.10(s，3H)，1.40(t，J＝7.2Hz，3H)。
将2-(5-乙酰氨基-4-氟-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙基酯(5g，19mmol)、 实施例D3(5.7g，38mmol)与AcOH(2mL)在EtOH(100mL)中的混合物装 入钢瓶中，在100℃下加热48小时。在减压下除去溶剂，残余物经柱色谱 法纯化，得到N-(2-氟-4-甲基-5-(8-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代-7，8-二氢蝶啶 -6-基)苯基)乙酰胺(1.5g，23％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.71 (br s，1H)，8.66(s，1H)，8.00(s，1H)，7.87(m，1H)，7.16(d，J＝11.2Hz，1 H)，3.58(s，3H)，2.93(s，3H)，2.18(s，3H)，2.06(s，3H)；MS(ESI)m/z： 357.2[M+H]+。
将N-(2-氟-4-甲基-5-(8-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基) 苯基)乙酰胺(1.5g，4.2mmol)与浓HCl(1mL)的MeOH(20mL)溶液在回流 下加热过夜。在减压下除去溶剂。加入水，混合物碱化至pH＝8。过滤收 集所得沉淀，干燥，得到6-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-8-甲基-2-(甲基氨基) 蝶啶-7(8H)-酮(1.0g，78％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.70(s， 0.3H)，8.62(s，0.7H)，7.96(m，0.7H)，7.85(m，0.3H)，6.88(d，J＝12.4Hz，1 H)，6.78(d，J＝9.2Hz，1H)，4.98(s，2H)，3.56(s，2H)，3.48(s，1H)，2.91(d， J＝4Hz，3H)，2.03(s，3H)。MS(ESI)m/z：315.2[M+H]+。
实施例A6：将三乙酰氧基硼氢化钠(2.70g，12.8mmol)加入到实施例C5 (2.10g，10.6mmol)、4-氟-3-硝基苯胺(1.66g，10.6mmol)与TFA(2.43g， 21.3mmol)的EtOAc(50mL)溶液中。搅拌30分钟后，将反应混合物用水 (50mL)稀释，加入2N NaOH以调节pH至碱性。分离有机相，用盐水洗 涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到黄橙色固体。将固体混悬在MTBE中，过 滤收集，洗涤，在真空中干燥，得到N-乙基-5-((4-氟-3-硝基苯基氨基)甲 基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(2.2g，61％收率)，为浅黄色固体。
向N-乙基-5-((4-氟-3-硝基苯基氨基)甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(2.20g， 6.5mmol)的CH2Cl2(25mL)混悬液中加入Et3N(2.7mL，20mmol)，然后加 入光气(20％甲苯溶液，4.3mL，7.8mmol)。将反应混合物于室温搅拌2h，然 后用水稀释。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到橙黄 色固体，在乙酸乙酯中搅拌，然后过滤，得到1-乙基-3-(4-氟-3-硝基苯 基)-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮，为浅黄色固体。
向1-乙基-3-(4-氟-3-硝基苯基)-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -2(1H)-酮(2.4g，6.5mmol)在乙酸乙酯与甲醇(1∶1，40mL)中的溶液中加入 Pd/C(230mg)，使混合物在帕尔(Parr)振荡器中氢化(55psi)2天。过滤反 应混合物，滤饼用甲醇洗涤。合并滤液，在真空中浓缩。将残余物溶于THF， 过滤固体。浓缩滤液，经硅胶柱色谱法纯化，得到3-(3-氨基-4-氟苯基)-1- 乙基-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.65g，30％收率)。 1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.20(s，1H)，6.97(m，1H)，6.70(dd，J＝ 8.0，2.4Hz，1H)，6.46(m，1H)，5.21(s，2H)，4.64(s，2H)，3.94(q，J＝6.8 Hz，2H)，2.48(s，3H)，1.15(t，J＝6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：334.1 (M+H+)。
实施例A7：利用类似于实施例A2的工艺，将实施例A6(0.65g， 1.9mmol)用mCPBA(70％wt，0.58g，2.3mmol)、再用N-甲基胺(2.0M THF 溶液，3.9mL，7.8mmol)处理，得到3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-乙基-7-(甲基氨 基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(1.79g，94％收率)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6，主要互变异构体)：δ8.00(s，1H)，7.04(m，2H)，6.76(dd，J ＝8.4，2.8Hz，1H)，6.52(m，1H)，5.27(s，2H)，4.57(s，2H)，3.99(q，J＝6.4 Hz，2H)，2.84(d，J＝4.8Hz，3H)，1.22(t，J＝6.4Hz，3H)；MS(ESI)m/z： 317.0(M+H+)。
实施例A8：向实施例A1(700mg，2.2mmol)的THF(10mL)溶液中加入 阮内镍(50％wt水性浆状液，1.0g)，然后将反应混合物在60℃和1atm H2 下搅拌5小时。混合物通过硅藻土过滤，滤饼用THF洗涤。合并滤液，浓 缩，得到3-(3-氨基-4-氟-苯基)-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮 (460mg，76％收率)，为黄色固体。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ8.77(s， 1H)，8.39(s，1H)，6.99(dd，J＝11.4，8.7Hz，1H)，6.72(d，J＝8.1Hz，1H)， 6.49(m，1H)，5.24(br s，2H)，4.73(s，2H)，3.28(s，3H)。MS(ESI)m/z： 274.2(M+H+)。
实施例A9：利用类似于实施例A10的工艺，将实施例C6(7g，33mmol) 和4-氟-3-硝基苯基胺(4.7g，30mmol)转化为3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-异丙基 -7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(2g)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ8.23(s，1H)，6.97(m，1H)，6.69(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，6.44 (m，1H)，5.22(s，2H)，4.94(m，1H)，4.59(s，2H)，2.49(s，3H)，1.45(d，J＝ 6.8Hz，6H)；MS(ESI)m/z：348.1[M+H]+。
实施例A10：于0℃向实施例C1(10g，56mmol)的无水THF(120mL) 溶液缓慢加入亚硫酰氯(10.4mL，140mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌4 小时。在减压下除去溶剂，得到5-(氯甲基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺 (11.5g，＞100％收率)，直接用于下一步。
向5-(氯甲基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(11.5g)与实施例D1(9.6g， 56mmol)的无水CH3CN(160mL)溶液中加入NaI(1.7g，11mmol)和二异丙 基乙胺(14.6g，112mmol)，然后将混合物在60℃下搅拌过夜。除去溶剂后， 残余物经柱色谱法纯化，得到5-((4-氟-2-甲基-5-硝基苯基氨基)甲基)-N-甲 基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(7g，37％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 7.83(s，1H)，7.22(d，J＝12Hz，1H)，7.08(m，1H)，6.98(d，J＝8Hz，1H)， 5.79(s，1H)，4.09(d，J＝8Hz，2H)，2.85(d，J＝4Hz，3H)，2.37(s，3H)， 2.17(s，3H)；MS(ESI)m/z：337.9[M+H]+。
于0℃向二光气(0.85mL，7.2mmol)的无水二噁烷(20mL)溶液中加入 5-((4-氟-2-甲基-5-硝基苯基氨基)甲基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(2.2g， 6.5mmol)与三乙胺(1.32g，13mmol)的无水二噁烷(50ml)溶液。加入后，将所 得混合物在50℃下搅拌过夜。加入水，混合物用饱和Na2CO3溶液中和至 pH 8。在真空中除去二噁烷，水层用EtOAc萃取(3×60mL)。合并有机层， 用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩。将残余物用乙醚洗涤，在真空中干燥， 得到3-(4-氟-2-甲基-5-硝基苯基)-1-甲基-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d] 嘧啶-2(1H)-酮(2g，84％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ8.04(s，1H)，7.97 (d，J＝8Hz，1H)，7.18(d，J＝12Hz，1H)，4.73(d，J＝14.8Hz，1H)，4.42(d， J＝14.8Hz，1H)，3.40(s，3H)，2.52(s，3H)，2.25(s，3H)；MS(ESI)m/z： 364.1[M+H]+。
将3-(4-氟-2-甲基-5-硝基苯基)-1-甲基-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并 [4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(3g，8.26mmol)加入到HCl(1.6g，16.5mmol)的EtOH (50ml)溶液中，然后加入铁粉(4.6g，80mmol)，将所得混合物在50℃下搅拌 6小时。过滤混合物，滤液用饱和Na2CO3溶液中和至pH 8，混合物用EtOAc 萃取(3×150mL)。合并萃取液，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，蒸发，得到 3-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-1-甲基-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -2(1H)-酮(1.9g，67％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.19(s，1H)， 6.89(d，J＝12.4Hz，1H)，6.65(d，J＝8.8Hz，1H)，5.01(s，2H)，4.62(d，J＝ 14.8Hz，1H)，4.44(d，J＝14.8Hz，1H)，3.24(s，3H)，2.48(s，3H)，1.92(s，3 H)；MS(ESI)m/z：334.1[M+H]+。
实施例A11：利用实施例A9步骤2-4的工艺，合并实施例D1(3.68g， 22mmol)和5-(氯甲基)-N-异丙基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(5g，22mmol)，得到 3-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-1-异丙基-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧 啶-2(1H)-酮(1g，历经3步的收率为12％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)： δ8.23(s，1H)，6.90(d，J＝12.0Hz，1H)，6.67(d，J＝8.8Hz，1H)，5.04(s，2 H)，4.97(m，1H)，4.60(d，J＝14.4Hz，1H)，4.40(d，J＝14.4Hz，1H)，2.50 (s，3H)，1.93(s，3H)，1.46(d，J＝6.8Hz，6H)；MS(ESI)m/z：362.1 [M+H]+。
实施例A12：于0℃将3-氨基-5-硝基苄腈(3.59g，22mmol)的CH3CN (10mL)溶液滴加到来自实施例A9的5-(氯甲基)-N-异丙基-2-(甲硫基)嘧啶 -4-胺(5g，22mmol)、碘化钠(0.33g，2.2mmol)与二异丙基乙胺(2mL，12mmol) 在CH3CN(100mL)中的混合物中。将所得反应混合物于室温搅拌过夜。蒸 发溶剂，残余物用水稀释，用EtOAc萃取。合并有机层，用盐水洗涤，干 燥(MgSO4)，浓缩，经硅胶色谱法纯化，得到3-((4-(异丙基氨基)-2-(甲硫基) 嘧啶-5-基)甲基氨基)-5-硝基苄腈(2.2g，28％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ7.87(s，1H)，7.74(s，1H)，7.56(s，1H)，7.32(s，1H)，7.08(m， 1H)，6.63(d，J＝7.6Hz，1H)，4.30(m，1H)，4.15(s，2H)，2.50(s，3H)， 1.17-1.15(d，J＝6.4Hz，6H)；MS(ESI)m/z：359.2[M+H]+。
通过实施例A4步骤3的工艺，合并二光气(5mL，41mmol)、3-((4-(异 丙基氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-基)甲基氨基)-5-硝基苄腈(2.2g，6.15mmol)和 三乙胺(2.5mL)，得到3-(1-异丙基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d] 嘧啶-3(4H)-基)-5-硝基苄腈(1.2g，51％收率)，未经进一步纯化用于下一步 骤。
通过实施例A10步骤4的工艺将3-(1-异丙基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2- 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-5-硝基苄腈(1.2g，3.13mmol)、铁粉(1.75g， 31mmol)和浓HCl(0.5ml，6mmol)在甲醇(100mL)中合并，得到3-氨基-5-(1- 异丙基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苄腈 (280mg，25％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.27(s，1H)，6.89(m， 1H)，6.86(d，J＝2.0Hz，1H)，6.76(t，J＝2.0Hz，1H)，5.73(d，J＝2.8Hz，2 H)，4.98(m，1H)，4.68(s，2H)，2.51(s，3H)，1.48(d，J＝6.8Hz，6H)；MS (ESI)m/z：355.1[M+H]+。
实施例A13：利用实施例A10的工艺，将实施例C4(6.0g，30.2mmol) 和实施例D1(3.9g，23mmol)转化为3-(5-氨基-4-氟-2-甲基-苯基)-1-乙基 -7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(2.5g，历经4步的收率 31％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.28(s，1H)，6.98(d，J＝12.0Hz， 1H)，6.75(d，J＝8.4Hz，1H)，5.11(s，2H)，4.72(d，J＝14.4Hz，1H)，4.53 (d，J＝14.4Hz，1H)，4.03(m，2H)，2.57(s，3H)，2.01(s，3H)，1.22(t，J＝ 6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：348.2[M+H]+。
实施例A14：利用实施例A15步骤2-4的工艺，合并来自实施例A13 的5-(氯甲基)-N-乙基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(2.4g，10.5mmol)和实施例D2 (2.0g，10.5mmol)，得到3-(5-氨基-2-氯-4-氟苯基)-1-乙基-7-(甲硫基)-3，4-二 氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.9g，历经3步的收率26％)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ8.26(s，1H)，7.31(d，J＝10.8Hz，1H)，6.87(d，J＝9.2 Hz，1H)，5.51(s，2H)，4.68(d，J＝14.4Hz，1H)，4.54(d，J＝14.4Hz，1H)， 3.98(m，2H)，2.52(s，3H)，1.18(t，J＝6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：367.9 [M+H]+。
实施例A15：于0℃向实施例C1(2g，11mmol)的无水THF(120mL) 溶液缓慢加入亚硫酰氯(1.74mL，23mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌4 小时。在减压下除去溶剂，得到5-(氯甲基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺 (2.1g)，直接用于下一步骤。
向5-(氯甲基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(2.1g)与实施例D2(2g， 11mmol)的无水CH3CN(50mL)溶液中加入NaI(0.32g，2.2mmol)和二异丙 基乙胺(2.8g，22mmol)。将所得混合物在60℃下搅拌过夜。除去溶剂后， 残余物用EtOAc洗涤(3×100mL)，经柱色谱法纯化，得到5-((2-氯-4-氟-5- 硝基苯基氨基)甲基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(1.2g，30％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.86(s，1H)，7.70(d，J＝12Hz，1H)，7.23(d， J＝8Hz，1H)，7.16(m，1H)，6.33(t，J＝8Hz，1H)，4.17(d，J＝8Hz，2H)， 2.81(d，J＝8Hz，3H)，2.37(s，3H)；MS(ESI)m/z：357.9[M+H]+。
于0℃向二光气(2.1mL，6.8mmol)的无水二噁烷(30mL)溶液中加入 5-((2-氯-4-氟-5-硝基苯基氨基)甲基)-N-甲基-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(2.2g， 6.2mmol)与三乙胺(1.32g，13mmol)的无水二噁烷(30mL)溶液。完全加入后， 将所得混合物在50℃下搅拌过夜。加入水，混合物用饱和Na2CO3溶液碱 化。在真空中浓缩混合物，残余物用EtOAc萃取(3×100mL)。合并有机 层，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。将残留固体用乙醚洗涤， 干燥，得到3-(2-氯-4-氟-5-硝基苯基)-1-甲基-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并 [4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(1.4g，59％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.53(d， J＝8Hz，1H)，8.26(s，1H)，8.08(d，J＝12Hz，1H)，4.82(d，J＝16Hz，1H)， 4.57(d，J＝16Hz，1H)，3.29(s，3H)，2.50(s，3H)；MS(ESI)m/z： 384.1[M+H]+。
向3-(2-氯-4-氟-5-硝基苯基)-1-甲基-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d] 嘧啶-2(1H)-酮(1.4g，3.7mmol)的EtOH(30mL)溶液中加入浓HCl(0.75g， 9mmol)，然后加入活性铁粉(2g，36mmol)。将反应物在50℃下搅拌6小时。 过滤反应物，将滤液用水稀释，用饱和Na2CO3水溶液处理直至pH 8。含 水混合物用EtOAc萃取(3×80mL)。合并萃取液，干燥(Na2SO4)，在真空 中浓缩，得到3-(5-氨基-2-氯-4-氟苯基)-1-甲基-7-(甲硫基)-3，4-二氢嘧啶并 [4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(1.08g，84％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 8.25(s，1H)，7.30(d，J＝11.2Hz，1H)，6.84(d，J＝8.8Hz，1H)，5.50(s，2 H)，4.66(d，J＝14.6Hz，1H)，4.53(d，J＝14.6Hz，1H)，3.27(s，3H)，2.51(s， 3H)；MS(ESI)m/z：354.3[M+H]+。
实施例A16：将亚硫酰氯(3.7mL，51mmol)滴加到0℃的实施例C3(4g， 20.3mmol)的无水THF(20mL)溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌4小时。 在减压下除去溶剂，得到5-(氯甲基)-N2-甲氧基-N2，N4-二甲基吡啶-2，4-二 胺(3.9g，89％收率)，未经进一步纯化用于下一步骤。
利用类似于实施例A4步骤2-4的工艺，合并5-(氯甲基)-N2-甲氧基 -N2，N4-二甲基吡啶-2，4-二胺(3.9g，18mmol)和实施例D1(3.08g， 18.1mmol)，得到3-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-1-甲基-7-(甲基氨基)-3，4-二氢 吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(1.5g，历经3步的收率29％)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ7.72(s，1H)，6.90(d，J＝12.0Hz，1H)，6.65(d，J＝8.4 Hz，1H)，6.41(m，1H)，5.95(s，1H)，5.02(s，2H)，4.52(d，J＝13.6Hz，1H)， 4.33(d，J＝13.6Hz，1H)，3.17(s，3H)，2.77(d，J＝4.8Hz，3H)，1.94(s，3 H)；MS(ESI)m/z：316.2[M+H]+。
实施例A17：将亚硫酰氯(5.86g，23.8mmol)滴加到0℃的实施例C7 (2.9g，11.9mmol)的无水THF(30mL)溶液中。将所得混合物在25℃下搅拌 4小时。在减压下除去溶剂，得到5-(氯甲基)-N4-异丙基-N2-甲氧基-N2-甲 基吡啶-2，4-二胺(2.7g，87％收率)，未经进一步纯化用于下一步骤。
将5-(氯甲基)-N4-异丙基-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺(2.7g， 11.1mmol)与实施例D1(1.9g，11.1mol)在吡啶(60mL)中的混合物在50℃下 搅拌8小时。在减压下除去吡啶，残余物经硅胶色谱法纯化，得到5-((4- 氟-2-甲基-5-硝基苯基氨基)甲基)-N4-异丙基-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4- 二胺(3.0g，71.6％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.84(s，1H)，7.32 (d，J＝12.4Hz，1H)，7.16(d，J＝6.4Hz，1H)，6.22(s，1H)，6.00(t，J＝5.2 Hz，2H)，4.28(d，J＝5.2Hz，2H)，3.82(m，1H)，3.72(s，3H)，3.17(s，3H)， 2.27(s，3H)，1.27(d，J＝6.4Hz，6H)。
利用实施例A4步骤3的工艺，使二光气(1.3g，6.4mmol)、5-((4-氟-2- 甲基-5-硝基苯基氨基)甲基)-N4-异丙基-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺 (2.0g，5.3mmol)和三乙胺(2.2g，21.2mmol)在二噁烷中反应，得到3-(4-氟-2- 甲基-5-硝基苯基)-1-异丙基-7-(甲氧基(甲基)氨基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧 啶-2(1H)-酮(1.5g，70％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.18(d，J＝ 7.2Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.55(d，J＝12.4Hz，1H)，6.68(s，1H)，4.77(d，J ＝13.6Hz，1H)，4.45-4.37(m，2H)，3.71(s，3H)，3.13(s，3H)，2.14(s，3H)， 1.46(t，J＝6.4Hz，6H)。
利用实施例A4步骤4的工艺，使3-(4-氟-2-甲基-5-硝基苯基)-1-异丙 基-7-(甲氧基(甲基)氨基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(1.5g， 3.7mmol)与Pd/C(0.7g)的混合物在45℃下在甲醇(60mL)中氢化(45psi)，得 到3-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-1-异丙基-7-(甲基氨基)-3，4-二氢吡啶并 [4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.83g，65.0％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 7.72(s，1H)，6.87(d，J＝12.4Hz，1)，6.61(d，J＝8.8Hz，1H)，6.35(m，1H)， 6.13(s，1H)，4.98(s，2H)，4.41-4.20(m，3H)，2.76(d，J＝4.8Hz，3H)，1.90 (s，3H)，1.45(t，J＝6.4Hz，6H)；MS(ESI)m/z：344.2.[M+H]+。
实施例A18：将2-氯-4-氟-5-硝基-苯基胺(1.4g，7.4mmol)加入到来自实 施例A16的5-(氯甲基)-N2-甲氧基-N2，N4-二甲基吡啶-2，4-二胺(1.6g， 7.4mmol)的吡啶(30mL)溶液中，将混合物在50℃下搅拌8小时。在减压下 浓缩反应混合物，固体残余物用水充分洗涤，得到5-((2-氯-4-氟-5-硝基苯 基氨基)甲基)-N2-甲氧基-N2，N4-二甲基吡啶-2，4-二胺(1.5g，56％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.01(s，1H)，7.76(d，J＝8.4Hz，1H)，7.71(s， 1H)，7.34(d，J＝8Hz，1H)，6.56(m，1H)，5.98(s，1H)，4.36(d，J＝4Hz，2 H)，3.71(s，3H)，3.31(s，3H)，2.91-2.92(d，J＝4Hz，3H)；MS(ESI)m/z： 369.9[M+H]+。
通过实施例A4步骤3的工艺，合并二光气(0.6ml，4.8mmol)、5-((2- 氯-4-氟-5-硝基苯基氨基)甲基)-N2-甲氧基-N2，N4-二甲基吡啶-2，4-二胺 (1.7g，4.6mmol)和三乙胺(0.93g，9.2mmol)，得到3-(2-氯-4-氟-5-硝基苯 基)-7-(甲氧基(甲基)氨基)-1-甲基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(1.5g， 83％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.59(d，J＝8Hz，1H)，8.15(d， J＝8Hz，1H)，8.04(s，1H)，6.66(s，1H)，4.94(d，J＝14Hz，1H)，4.61(d，J ＝14Hz，1H)，3.84(s，3H)，3.35(s，3H)，3.25(s，3H)；MS(ESI)m/z：396.1 [M+H]+。
将3-(2-氯-4-氟-5-硝基苯基)-7-(甲氧基(甲基)氨基)-1-甲基-3，4-二氢吡 啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(1g，2.5mmol)、Pd/C(0.3g)在MeOH(30mL)中合 并，在50℃下氢化(45psi)4天。过滤除去催化剂，在真空中浓缩滤液。将 残留固体用乙酸乙酯洗涤，在真空中干燥，得到3-(5-氨基-2-氯-4-氟苯基)-1- 甲基-7-(甲基氨基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.6g，71％收率)。 1H-NMR (400MHz，DMSO-d6)：δ7.71(s，1H)，7.26(d，J＝10.8Hz，1H)， 6.78(d，J＝8.8Hz，1H)，6.41(m，1H)，5.94(s，1H)，5.43(s，2H)，4.50(d，J ＝13.6Hz，1H)，4.40(d，J＝13.6Hz，1H)，3.16(s，3H)，2.76(d，J＝5.2Hz， 3H)；MS(ESI)m/z：336.2[M+H]+。
实施例A19：于0℃将亚硫酰氯(3.5mL，0.048mol)滴加到实施例C8(5g， 0.024mol)的无水THF(50mL)溶液中。将所得混合物于室温搅拌4小时， 在真空中浓缩，得到5-(氯甲基)-N4-乙基-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺 (5.4g，98％收率)，未经进一步纯化用于下一步骤。
按照实施例A4步骤2合并5-(氯甲基)-N4-乙基-N2-甲氧基-N2-甲基吡 啶-2，4-二胺(5.4g，0.024mol)和实施例D1(4g，0.024mol)，得到5-((2-氯-4-氟 -5-硝基苯基氨基)甲基)-N4-乙基-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺(6g， 70％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.66(s，1H)，7.25(d，J＝12Hz，1 H)，7.05(d，J＝6.4Hz，1H)，6.04(s，1H)，5.96(m，1H)，4.24(d，J＝8Hz，2 H)，3.67(s，3H)，3.32(q，J＝8Hz，2H)，3.23(s，3H)，2.18(s，3H)，1.16(t，J ＝8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：384.0[M+H]+。
通过实施例A4步骤3的工艺，合并二光气(2.4mL，19mmol)、5-((2- 氯-4-氟-5-硝基苯基氨基)甲基)-N4-乙基-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺 (6g，16mmol)和三乙胺(4.6mL，32mmol)，得到1-乙基-3-(4-氟-2-甲基-5-硝 基-苯基)-7-(甲氧基(甲基)氨基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(4.5g， 70％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.27(d，J＝8Hz，1H)，7.94(s， 1H)，7.58(d，J＝12Hz，1H)，6.58(s，1H)，4.89(d，J＝16Hz，1H)，4.48(d， J＝16Hz，1H)，3.84-3.92(m，2H)，3.73(s，3H)，3.16(s，3H)，2.20(s，1H)， 1.19(t，J＝8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：390.2[M+H]+。
将1-乙基-3-(4-氟-2-甲基-5-硝基苯基)-7-(甲氧基(甲基)氨基)-3，4-二氢 吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(3.2g，8.2mmol)和Pd/C(0.3g)在MeOH(60ml) 中合并，在50℃下氢化(45psi)过夜。过滤反应混合物，在真空中浓缩，经 柱色谱法纯化，得到3-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-1-乙基-7-(甲基氨基)-3，4- 二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(2.1g，78％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ7.71(s，1H)，6.88(d，J＝12.0Hz，1H)，6.64(d，J＝8.4Hz，1 H)，6.38(m，1H)，5.99(s，1H)，5.01(s，2H)，4.51(d，J＝13.6Hz，1H)，4.29 (d，J＝13.6Hz，1H)，3.76(m，2H)，2.75(d，J＝4.8Hz，3H)，1.91(s，3H)， 1.14(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESI)m/z：330.2[M+H]+。
实施例A20：利用实施例A8步骤2-4的工艺，合并来自实施例A19 的5-(氯甲基)-N4-乙基-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺(3.2g，14.7mmol) 和实施例D2(2.6g，14.7mol)的混合物，得到3-(5-氨基-2-氯-4-氟苯基)-1-乙 基-7-(甲基氨基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(2g)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ7.72(s，1H)，7.24(d，J＝10.8Hz，1H)，6.81(d，J＝9.2 Hz，1H)，6.44(bs，1H)，6.02(s，1H)，5.42(s，2H)，4.50(d，J＝13.2Hz，1H)， 4.38(d，J＝13.2Hz，1H)，3.77(m，2H)，2.76(d，J＝4.8Hz，3H)，1.15(t，J＝ 7.2Hz，3H)；MS(ESI)m/z：350.2[M+H]+。
实施例A21：通过实施例A2的工艺，合并实施例A10(0.500g， 1.50mmol)、mCPBA(70％0.444g，1.80mmol)和甲基胺(2M THF溶液， 3.75mL)，得到3-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-1-甲基-7-(甲基氨基)-3，4-二氢嘧 啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.363g，77％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)，δ7.92(s，1H)，7.00(s，1H)，6.90(d，J＝11.2Hz，1H)，6.64(d，J＝ 8.4Hz，1H)，5.03(s，2H)，4.48(d，J＝13.2Hz，1H)，4.30(d，J＝13.2Hz，1H)， 3.22(s，3H)，2.78(s，3H)，1.94(s，3H)；MS(ESI)m/z：317.3[M+H+]。
实施例A22：利用类似于实施例A2的工艺，合并实施例A9(0.85g， 2.447mmol)、mCPBA(0.464g，2.69mmol)和2M甲基胺的THF溶液(6mL)， 经硅胶色谱法纯化，得到3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-异丙基-7-(甲基氨基)-3，4- 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮，为白色固体(0.56g，69％收率)。1H NMR (400MHz，DMSO-d6)：δ7.93(s，1H)，6.96(dd，J＝11.6Hz，8.8Hz，1H)， 6.68(dd，J＝8.0Hz，2.4Hz，1H)，6.44-6.40(m，1H)，5.12(s，2H)，4.99-4.92 (m，1H)，4.44(s，2H)，2.77(d，J＝4.8Hz，3H)，1.45(d，J＝6.8Hz，6H)；MS (ESI)m/z：331.2(M+H+)。
实施例A23：利用类似于实施例A2的工艺，合并实施例A11(0.50g， 1.38mmol)、mCPBA(0.41g，1.66mmol)和甲基胺(2M THF溶液，2.8mL， 5.6mmol)，得到3-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-1-异丙基-7-(甲基氨基)-3，4-二 氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(240mg，50％收率)。MS(ESI)m/z：345.0 (M+H+)。
实施例A24：在N2气氛下，向0℃的6-氯-4-(甲基氨基)烟酸乙酯(4g， 18.7mmol，来自实施例C3)的THF(40mL)溶液中逐批加入LiAlH4(1.4g， 37.4mmol)。搅拌20分钟后，小心加入水、然后加入2N NaOH水溶液淬 灭反应物。过滤混悬液，浓缩滤液，得到(6-氯-4-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲醇 (2.9g，90.6％收率)，未经纯化用于下一步骤。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)： δ7.96(s，1H)，6.63(s，1H)，6.46(s，1H)，5.04(s，1H)，4.39(m，2H)， 2.81-2.68(m，3H)。
将(6-氯-4-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲醇(2.9g，16.7mmol)与MnO2(11.7g， 133.6mmol)在无水DCM(25mL)中的混合物在30℃下搅拌6小时。将反应 混合物冷却至RT，过滤，在真空中浓缩，得到6-氯-4-(甲基氨基)烟碱醛 (nicotinaldehyde)(2.5g，87％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.83 (s，1H)，8.52(br s，1H)，8.40(s，1H)，6.75(s，1H)，2.87(d，J＝5.8Hz，3H)； MS(ESI)m/z：171.0[M+H]+。
向6-氯-4-(甲基氨基)烟碱醛(1.00g，5.88mmol)与实施例D1(1.00g， 5.88mmol)的冰乙酸(7.5mL)溶液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.49g， 11.7mmol)。将混合物于室温搅拌过夜。加入另一份三乙酰氧基硼氢化钠 (1.30g，6.11mmol)，将混合物搅拌另外24小时。将反应物用冰水稀释，用 NaOH碱化(pH～7-8)。过滤收集黄色沉淀，用H2O洗涤，在真空下干燥， 得到粗的2-氯-5-((4-氟-2-甲基-5-硝基苯基氨基)甲基)-N-甲基吡啶-4-胺 (2.04g，107％收率)，未经进一步纯化进行使用。MS(ESI)m/z：325.0 [M+H]+。
向2-氯-5-((4-氟-2-甲基-5-硝基苯基氨基)甲基)-N-甲基吡啶-4-胺(2.04g， 6.28mmol)的二噁烷(30mL)混悬液中加入三乙胺(3.50mL，25mmol)和光气 (20％甲苯溶液，6.90mL，12.6mmol)。将反应混合物于室温搅拌2.5小时。 加入水(30mL)，混合物用EtOAc萃取(2×70mL)。合并有机层，用盐水 (15mL)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。将残余物与EtOAc搅拌15 分钟，过滤收集沉淀，在真空中干燥，得到7-氯-3-(4-氟-2-甲基-5-硝基苯 基)-1-甲基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.785g，36％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.31(s，1H)，8.11(s，1H)，7.61(s，1H)，7.15(s， 1H)，4.94(s，1H)，4.61(s，1H)，3.26(s，3H)，2.22(s，3H)；MS(ESI)m/z： 351.0[M+H+]。
将Zn粉(0.575g，8.80mmol)加入到7-氯-3-(4-氟-2-甲基-5-硝基苯基)-1- 甲基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.309g，0.880mmol)与NH4Cl (0.471g，8.80mmol)的MeOH/THF(1∶1，16mL)混悬液中，将混合物于室温 搅拌1.5小时。将混合物通过硅藻土过滤，用MeOH冲洗，浓缩滤液，用 盐水稀释，用THF萃取(2×)。合并有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)， 浓缩，得到3-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-7-氯-1-甲基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d] 嘧啶-2(1H)-酮(0.260g，92％收率).MS(ESI)m/z：321.0[M+H+]。
实施例A25：合并实施例A24(0.260g，0.811mmol)和N′，N′-二甲基乙 烷-1，2-二胺(9.25mL)，加热至175℃达2天。在减压下除去过量溶剂。将残 余物用饱和NaHCO3水溶液(15mL)和EtOAc(2×35mL)分配。合并有机 层，用盐水(15mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩。将浅黄色残余物溶于少量 EtOAc。加入己烷，将混合物搅拌15分钟。过滤收集沉淀，用己烷洗涤， 在真空下干燥，得到3-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-7-(2-(二甲基氨基)乙基氨 基)-1-甲基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.153g，51％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.68(s，1H)，6.88(d，J＝12.0Hz，1H)，6.62 (d，J＝8.8Hz，1H)，6.25(t，J＝5.4Hz，1H)，6.03(s，1H)，5.00(s，2H)，4.49 (d，J＝13.6Hz，1H)，4.30(d，J＝13.6Hz，1H)，3.29(m，2H)，3.13(s，3H)， 2.38(t，J＝6.4Hz，2H)，2.16(s，6H)，1.91(s，3H)。
实施例A26：通过实施例A4的方法，将5-(氯甲基)-N4-乙基-N2-甲氧 基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺(4.3g，18.7mmol，实施例A19)和4-氟-3-硝基-苯基 胺(3g，19mmol)在吡啶(50mL)中合并，得到N4-乙基-5-((4-氟-3-硝基苯基氨 基)甲基)-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺(5.6g，85％收率)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ7.65(s，1H)，7.63(s，1H)，7.34-7.29(m，1H)，7.23-7.21 (m，1H)，7.02-7.6.98(m，1H)，6.84(s，1H)，6.06(s，1H)，4.18(d，J＝3.2Hz， 2H)，3.71(s，3H)，3.31(s，3H)，3.32(q，J＝7.2Hz，2H)，1.18(t，J＝7.2Hz， 3H)；MS(ESI)m/z：350.1[M+H]+。
通过实施例A4的工艺，合并二光气(2.4mL，20mmol)、N4-乙基-5-((4- 氟-3-硝基苯基氨基)甲基)-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺(5.6g，16mmol) 和三乙胺(4.3g，40mmol)，得到1-乙基-3-(4-氟-3-硝基苯基)-7-(甲氧基(甲基) 氨基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(4.8g，80％收率)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ8.14(m，1H)，7.96(s，1H)，7.79(m，1H)，7.61(m，1H)， 6.57(s，1H)，4.78(s，2H)，3.88(d，J＝7.2Hz，2H)，3.71(s，3H)，3.15(s，3 H)，1.20(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESI)m/z：376.2[M+H]+。
在50℃下，使1-乙基-3-(4-氟-3-硝基苯基)-7-(甲氧基(甲基)氨基)-3，4- 二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(4.6g，12mmol)、Pd/C(0.5g)和氢(45psi)在 MeOH(100mL)中反应过夜，得到3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-乙基-7-(甲基氨 基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(3.2g，84％)。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ7.70(s，1H)，6.94(dd，J＝11.2，8.8Hz，1H)，6.67(dd，J＝8.0， 2.4Hz，1H)，6.42(m，1H)，6.33(m，1H)，5.98(s，1H)，5.14(s，2H)，4.48(s， 2H)，3.74(q，J＝7.2Hz，2H)，2.73(d，J＝5.2Hz，3H)，1.15(t，J＝7.2Hz，3 H)；MS(ESI)m/z：316.2[M+H]+。
实施例A27：向实施例A10(0.500g，1.50mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液 以逐批方式加入mCPBA(0.444g，1.20eq)。搅拌1小时后，加入N′，N′-二甲 基乙烷-1，2-二胺(0.661g，7.5mmol)，将反应混合物搅拌过夜。加入水，将溶 液搅拌1小时。水层用CH2Cl2萃取(2×)，合并有机层，用饱和NaHCO3、 3N NaOH和盐水洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，浓缩，得到3-(5-氨基-4- 氟-2-甲基苯基)-7-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)-1-甲基-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d] 嘧啶-2(1H)-酮(0.358g，64％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δδ7.91(s， 1H)，6.92-6.88(m，2H)，6.64(d，J＝8.8Hz，1H)，5.03(s，2H)，4.48(d，J＝ 14.0Hz，1H)，4.30(d，J＝14.0Hz，1H)，4.33(m，2H)，3.22(s，3H)，2.38(t，J ＝6.8Hz，2H)，2.16(s，6H)，1.94(s，3H)。
实施例A28：利用类似于实施例A17的工艺，合并5-(氯甲基)-N4-异 丙基-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺(3.3g，13.6mmol，实施例A17)和4- 氟-5-硝基苯胺(2.1g，13.6mol)，得到3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-异丙基-7-(甲基 氨基)-3，4二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(2.1g，历经3步的收率47％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.81(s，1H)，7.02(dd，J＝11.2，8.8Hz，1H)， 6.74(dd，J＝8.0，2.4Hz，1H)，6.48-6.43(m，2H)，6.22(s，1H)，5.24(s，2H)， 4.49(s，2H)，4.39(m，1H)，2.82(d，J＝4.8Hz，3H)，1.52(d，J＝6.8Hz，6 H)；MS(ESI)m/z：330.2.[M+H]+。
实施例A29：将4，6-二氯烟酸乙酯(10g，45.7mmol)的叔丁基胺(100mL) 溶液在50℃下搅拌10小时。在减压下除去溶剂，将残余物混悬在H2O中， 用EtOAc萃取(3×100mL)。将有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空 中浓缩，经硅胶色谱法纯化，得到4-(叔丁基氨基)-6-氯烟酸乙酯(7g，60％ 收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.53(s，1H)，8.39(s，1H)，6.80(s， 1H)，4.25(d，J＝7.2Hz，2H)，1.37(s，9H)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H)。
将LiAlH4((2.1g，54.7mmol)逐批加入到0℃的4-(叔丁基氨基)-6-氯烟 酸乙酯(7g，27.3mmol)的THF(100mL)溶液中。20分钟后，加入水(2.1mL)、 然后加入2N NaOH水溶液(2N，2.1ml)淬灭反应物。过滤所得混悬液，浓 缩滤液，得到(4-叔丁基氨基-6-氯-吡啶-3-基)-甲醇(5.0g，86.2％收率)，未经 纯化用于下一步骤。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.73(s，1H)，6.61(s， 1H)，5.87(s，1H)，5.43(t，J＝5.2Hz，1H)，4.38(d，J＝5.2Hz，2H)，1.35(s， 9H)。
将(4-叔丁基氨基-6-氯-吡啶-3-基)-甲醇(5.0g，23.4mmol)与MnO2 (14.3g，163.6mmol)在无水CH2Cl2(100mL)中的混合物于室温搅拌10小时。 过滤反应物，浓缩滤液，得到4-(叔丁基氨基)-6-氯烟碱醛(4.0g，87.0％收率)， 未经进一步纯化用于下一步骤。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.83(s，1 H)，8.90(s，1H)，8.44(s，1H)，6.86(s，1H)，1.40(s，9H)。
将4-(叔丁基氨基)-6-氯烟碱醛(4.0g，18.9mmol)、4-氟-3-硝基苯胺(2.9g， 18.9mmol)与NaBH(OAc)3(7.1g，37.8mmol)在CH3COOH(80mL)中的混合 物加热至80℃达10小时。在减压下浓缩反应物，得到粘性固体，混悬在 冰水中。将混合物用2N NaOH水溶液中和(pH 7)，用EtOAc萃取。将萃 取液用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。残余物经过色谱法纯化， 得到N-叔丁基-2-氯-5-((4-氟-3-硝基苯基氨基)甲基)吡啶-4-胺(4.3g，65％收 率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.87(s，1H)，7.32(m，1H)，7.27(m， 1H)，7.04(m，1H)，6.68(s，1H)，6.52(m，1H)，5.46(s，1H)，4.17(d，J＝4.8 Hz，2H)，1.36(s，9H)。
于0℃将NaH(1.5g，36.6mmol)逐批加入到N-叔丁基-2-氯-5-((4-氟-3- 硝基苯基氨基)甲基)吡啶-4-胺(4.3g，12.2mmol)的无水二噁烷(400mL)溶液 中，将所得混合物于室温搅拌10分钟。于0℃将三光气(3.6g，12.2mmol) 的二噁烷(30mL)溶液加入上述混合物中。加入后，将混合物在100℃下加 热10小时。冷却反应物，用水淬灭，用饱和NaHCO3溶液调节pH至pH ＞7。在减压下除去二噁烷，使残余物在水与EtOAc之间分配(3×50mL)。 合并有机层，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩。经硅胶色谱法 纯化，得到1-叔丁基-7-氯-3-(4-氟-3-硝基苯基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -2(1H)-酮(3.5g，76％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.21(s，1H)， 8.07(m，1H)，7.71(m，1H)，7.57(m，1H)，7.32(s，1H)，4.70(s，2H)，1.57(s， 9H)。
将铁粉(5.2g，93mmol)逐批加入到1-叔丁基-7-氯-3-(4-氟-3-硝基苯 基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(3.5g，9.3mmol)与浓HCl(0.35mL， 4.2mmol)的10/1EtOH/H2O(11mL)溶液中。将所得混合物在40℃下搅拌 30分钟。过滤反应混合物，滤饼用EtOH洗涤。浓缩乙醇滤液，使残余物 在EtOAc与H2O之间分配。水层用EtOAc萃取(3×80mL)。合并有机层， 用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩，经硅胶色谱法纯化，得到3-(3- 氨基-4-氟苯基)-1-叔丁基-7-氯-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(2.0g， 62％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.20(s，1H)，7.26(s，1H)， 6.92(m，1H)，6.62(m，1H)，6.34(m，1H)，5.17(s，2H)，4.50(s，2H)，1.55(s， 9H)。
将3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-叔丁基-7-氯-3，4-二氢-1H-吡啶并[4，3-d]嘧啶 -2-酮(2.0g，5.7mmol)、CuI(200mg，1.05mmol)和甲基胺(200mL)在钢瓶中合 并，加热至180℃达48小时。将反应容器冷却至-78℃，解除密封，温热至 RT。使反应物在EtOAc与H2O之间分配，水层用EtOAc萃取。合并有 机层，用盐水洗涤(2×100mL)，干燥(Na2SO4)，浓缩，经过中性氧化铝柱 色谱法纯化，得到3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-叔丁基-7-(甲基氨基)-3，4-二氢吡 啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(900mg，46％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ7.76(s，1H)，6.91(dd，J＝11.1，8.7Hz，1H)，6.61(dd，J＝8.1， 2.4Hz，1H)，6.35-6.32(m，3H)，5.14(s，2H)，4.29(s，2H)，2.74(d，J＝4.8 Hz，3H)，1.55(s，9H)；MS(ESI)m/z：344.0[M+H]+。
实施例A30：类似于实施例A24，将6-氯-4-(甲基氨基)烟碱醛(来自实 施例A24)、4-氟-3-硝基苯胺和三乙酰氧基硼氢化钠在冰乙酸中合并，得到 粗的2-氯-5-((4-氟-3-硝基苯基氨基)甲基)-N-甲基吡啶-4-胺，通过实施例 A75的工艺使其与二光气反应，得到7-氯-3-(4-氟-3-硝基苯基)-1-甲基-3，4- 二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮。使Zn粉与7-氯-3-(4-氟-3-硝基苯基)-1- 甲基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮与NH4Cl的MeOH/THF(1∶1)混 悬液反应，得到3-(3-氨基-4-氟苯基)-7-氯-1-甲基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧 啶-2(1H)-酮。类似于实施例A25，合并4-甲氧基苄基胺和3-(3-氨基-4-氟苯 基)-7-氯-1-甲基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮，加热至180℃，得到 7-(4-甲氧基苄基氨基)-3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-甲基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧 啶-2(1H)-酮，将其进一步与三氟乙酸反应，得到7-氨基-3-(3-氨基-4-氟苯 基)-1-甲基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮。
实施例A31：采用实施例A5的工艺，通过用N4-甲基嘧啶-2，4，5-三胺 硫酸盐替换实施例D3，可以制得S2-氨基-6-(5-氨基-4-氟-2-甲基苯基)-8- 甲基蝶啶-7(8H)-酮(O′Brien等人，J.Med Chem.(1966)，9，第121-6页)。
实施例A32：利用实施例A4的工艺，合并5-(氯甲基)-N4-乙基-N2-甲 氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺(3.2g，14.7mmol，来自实施例A9)和实施例D2 (2.6g，14.7mol)的混合物，得到5-((2-氯-4-氟-5-硝基苯基氨基)甲基)-N4-乙 基-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺(4.3g，76％收率)，未经进一步纯化用 于下一步骤。
通过实施例A4的工艺，合并二光气(3.1g，15.66mmol)、5-((2-氯-4-氟 -5-硝基苯基氨基)甲基)-N4-乙基-N2-甲氧基-N2-甲基吡啶-2，4-二胺(4.3g， 13.1mmol)和三乙胺(7g，65.2mmol)，得到3-(2-氯-4-氟-5-硝基苯基)-1-乙基 -7-(甲氧基(甲基)氨基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(2.7g，60％收 率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.55(d，J＝7.6Hz，1H)，8.09(d，J＝ 11.2Hz，1H)，8.00(s，1H)，6.63(s，1H)，4.91(d，J＝13.6Hz，1H)，4.55(d， J＝13.6Hz，1H)，3.93(m，2H)，3.77(s，3H)，3.20(s，3H)，1.23(t，J＝7.2 Hz，3H)；MS(ESI)m/z：410.2[M+H]+。
通过实施例A4的工艺，合并3-(2-氯-4-氟-5-硝基苯基)-1-乙基-7-(甲氧 基(甲基)氨基)-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(2.7g，6.6mmol)、Pd/C (1.4g)和氢(30psi)，得到3-(5-氨基-2-氯-4-氟苯基)-1-乙基-7-(甲基氨基)-3，4- 二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(2g，87.0％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ7.72(s，1H)，7.24(d，J＝10.8Hz，1H)，6.81(d，J＝9.2Hz，1 H)，6.44(bs，1H)，6.02(s，1H)，5.42(s，2H)，4.50(d，J＝13.2Hz，1H)，4.38 (d，J＝13.2Hz，1H)，3.77(m，2H)，2.76(d，J＝4.8Hz，3H)，1.15(t，J＝7.2 Hz，3H)；MS(ESI)m/z：350.2[M+H]+。
实施例B1：按照文献工艺合并苯基肼和4，4-二甲基-3-氧代戊腈，得到 3-叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-胺。参见WO 2006/071940。
实施例B2：于0℃向喹啉-6-基胺(5g，35mmol)的浓HCl(12mL)溶液滴 加NaNO2(2.42g，35mmol)的水溶液(4mL)。将所得混合物搅拌1h，然后于 0℃滴加SnCl2.2H2O(15.8g，70mmol)的浓HCl(15mL)溶液进行处理。将反 应混合物于室温搅拌2小时。收集沉淀，用EtOH和Et2O洗涤，得到1-(喹 啉-6-基)肼盐酸盐(4.3g，77％收率)，为黄色粉末，未经进一步纯化用于下一 反应。
将1-(喹啉-6-基)肼盐酸盐(4.0g，20.5mmol)与4，4-二甲基-3-氧代-戊腈 (3.6g，30mol)在EtOH(50mL)与浓HCl(5mL)中的混合物在回流下加热过 夜。除去溶剂后，残余物经柱色谱法纯化，得到3-叔丁基-1-(喹啉-6-基)-1H- 吡唑-5-胺(2.8g，51％收率)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ8.84(d，J＝ 4.2Hz，1H)，8.37(d，J＝7.5Hz，1H)，8.09(s，1H)，8.04(s，2H)，7.52(m，1H)， 5.46(s，1H)，5.40(brs，2H)，1.29(s，9H)。
实施例B3：按照WO 99/32111公开的方法制备3-叔丁基异噁唑-5-胺， 0.250。
实施例B4：通过实施例B11的工艺，合并4，4，4-三氟-3-氧代-丁腈和 苯基肼，得到1-苯基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-胺。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)δ7.59-7.50(m，4H)，7.42(m，1H)，5.78(s，1H)，5.73(br s，2H)。
实施例B5：按照文献工艺合并甲基肼和4，4-二甲基-3-氧代戊腈，得到 3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-胺。参见WO 2006/071940。
实施例B6：将1，1，3，3-四甲氧基丙烷(37g，226mmol)、叔丁基-肼盐酸 盐(28g，226mmol)与浓HCl(60mL，720mmol)在EtOH(300mL)中的混合物 在回流下加热过夜。将混合物倒入水中，所得混合物用乙醚萃取。合并有 机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到1-叔丁基-1H-吡 唑(25g，89％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.73(s，1H)，7.38(s，1 H)，6.17(s，1H)，1.47(s，9H)；MS(ESI)m/z：125.1[M+H]+。
于0℃将HNO3(11.7g，185mmol)滴加到1-叔丁基-1H-吡唑(23g， 185mmol)在浓H2SO4(30mL)中的混合物中。将所得混合物于0℃搅拌30 分钟，倒在碎冰上。含水混合物用EtOAc萃取。合并有机层，用盐水洗涤， 干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到1-叔丁基-4-硝基-1H-吡唑(20g，64％收 率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.85(s，1H)，8.23(s，1H)，1.52(s，9 H)。
实施例B7：向Na2CO3(36g，339mmol)的CH2Cl2(300mL)混悬液中加 入来自实施例B19的1-叔丁基-1H-吡唑(21g，170mmol)和Br2(9mL)，将所 得混合物于室温搅拌过夜。过滤除去固体，滤饼用CH2Cl2洗涤。将滤液用 水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到粗的4-溴-1-叔丁基-1H-吡唑(29g， 85％)，未经进一步纯化进行使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.49(s，1 H)，7.45(s，1H)，1.53(s，9H)；MS(ESI)m/z：203[M+H]+。
在N2下，向-78℃的4-溴-1-叔丁基-1H-吡唑(15g，74.3mmol)的无水 THF(100mL)溶液中加入n-BuLi(2.5M己烷溶液，53mL，132mmol)，将所 得混合物在-78℃下搅拌30分钟。在-78℃下加入过量干冰，使混合物缓慢 温热至RT，搅拌过夜。在真空中浓缩反应物，加入水，加入2N HCl水溶 液调节pH至pH 3。水溶液用EtOAc萃取。将萃取液用盐水洗涤，干燥 (MgSO4)，在真空中浓缩。使残余物重结晶(EtOAc-石油醚)，得到1-叔丁 基-1H-吡唑-4-甲酸(8.0g，67％收率)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ8.10(s， 1H)，8.03(s，1H)，1.64(s，9H)；MS(ESI)m/z：168.9[M+H]+。
实施例B8：在乙醇(10mL)中放置叔丁基肼盐酸盐(1.35g，10.8mmol)和 2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代丁酸乙基酯(2.00g，10.8mmol)。将混合物温 热至回流，搅拌2hr，冷却至RT，搅拌过夜。在减压下蒸发混合物，得到 油，将其溶于乙醚(25mL)，依次用水(25mL)、饱和碳酸氢钠(25mL)和盐水 (25mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，在减压下蒸发，得到油。该油经过色谱法纯 化(Biotage S1-25柱，10-40％乙酸乙酯/Hex-750mL)，得到1-叔丁基-5-甲 基-1H-吡唑-4-甲酸乙基酯(1.48g，65％收率)，为油。MS(ESI)m/z：211.0 (M+H+)。
在乙醇∶水∶二噁烷的混合物(1∶1∶1，21mL)中放置1-叔丁基-5-甲基-1H- 吡唑-4-甲酸乙基酯(1.48g，7.04mmol)和氢氧化锂水合物(886mg， 21.12mmol)。将反应物在40℃下搅拌3小时，然后于室温搅拌过夜。将反 应物用水(25mL)和乙醚(25mL)稀释。弃去乙醚层，水相用1N HCl调成酸 性(pH～4)。酸性相然后用乙酸乙酯萃取(2×25mL)，合并乙酸乙酯层，用 盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，在减压下蒸发，得到1-叔丁基-5-甲基-1H-吡唑 -4-甲酸，为白色固体(1.12g，87％收率)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ 1.56(s，9H)，2.67(s，3H)，7.65(s，1H)，12.13(s，1H)；MS(ESI)m/z：183.0 (M+H+)。
实施例B9：于室温向KCN(1.90g，29.1mmol)的MeOH(35mL)混悬液 滴加3-溴-1，1，1-三氟丙烷-2-酮肟(5.00g，24.3mmol)的MeOH(72mL)溶液。 将反应混合物于室温搅拌3小时。蒸发溶液，然后将残余物溶于EtOAc， 于室温搅拌。过滤固体(KBr)，蒸发滤液，得到粗产物。粗产物经硅胶柱色 谱法纯化(Biotage：25M，10％至60％EtOAc/己烷：550mL)。合并纯的级分， 蒸发，得到3-(三氟甲基)异噁唑-5-胺(1.38g，37％收率)。MS(ESI)m/z：153.0 (M+H+)。
实施例B10：在乙醇(40mL)中放置叔丁基胍盐酸盐(3.71g，27.2mmol)。 将其用21％乙醇钠的乙醇溶液(8.80g，27.2mmol)处理，于室温搅拌15分钟。 向其中加入乙氧基亚甲基丙二酸二乙基酯(5.87g，27.2mmol)，将反应混合 物于室温搅拌过夜。将反应混合物回流1小时，然后冷却至RT。蒸发溶 液，将残余物溶于水(100mL)，用乙酸调节pH至3-4(湿石蕊)。混合物生 成沉淀。过滤收集固体，用水(50mL)洗涤，在真空下干燥，得到2-叔丁基 -4-羟基嘧啶-5-甲酸乙基酯(2.18g，36％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ12.6(brs，1H)，8.44(s，1H)，4.20(q，J＝7.2Hz，2H)，1.25(s， 9H)，1.23(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESI)m/z：225.0(M+H+)。
在冷的(～0℃)POCl3(20mL)中滴加三乙胺(0.55mL)，同时搅拌。向其 中逐批加入2-叔丁基-4-羟基嘧啶-5-甲酸乙基酯(2.18g，9.72mmol)。然后将 混合物温热至40℃，在氩下搅拌1小时。蒸发混合物直至没有POCl3，用 CHCl3(100mL)稀释，小心倒入冰(300mL)中。将溶液于室温搅拌至熔化。 分离有机相，用碳酸氢钠(100mL)、水(100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)。蒸发 溶剂，得到2-叔丁基-4-氯嘧啶-5-甲酸乙基酯(2.0g，85％收率)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ9.12(s，1H)，4.34(q，J＝6.8Hz，2H)，1.33(s，9H)，1.27 (t，J＝6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：243.0(M+H+)。
于室温向搅拌着的4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-2-叔丁基嘧啶-5-甲 酸乙基酯(0.49g，1.24mmol)的1∶1∶1THF/EtOH/H2O(9ml)混悬液中加入 LiOH·H2O(120mg，4.94mmol)，将混合物于室温搅拌过夜。通过LC-MS 检查反应混合物，将反应完成的反应物浓缩至含水残余物，用3M HCl酸 化(pH 3-4)，溶液用EtOAc萃取(3×)。合并有机层，用盐水洗涤(1×)，干 燥(MgSO4)，过滤，浓缩。将粗产物溶于异丙醇，过滤固体(LiCl和NaCl)， 用异丙醇洗涤。浓缩滤液，得到所需产物4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-2- 叔丁基嘧啶-5-甲酸(0.36g，80％收率)。MS(ESI)m/z：365.0(M+H+)。
实施例B11：在80℃下，将三氟乙酸乙酯(14.2g，0.1mol)与无水乙腈(5.0 g，0.12mol)的THF(100mL)溶液滴加到NaH(60％，6.0g，0.15mol)的THF (100mL)混悬液中。将所得混合物加热至回流过夜，然后冷却至RT。在真 空中浓缩反应混合物，残余物用EtOAc和10％HCl水溶液稀释。将有机 层用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到粗的4，4，4-三氟-3- 氧代-丁腈(15g)，未经进一步纯化进行使用。
将甲基肼(5.0g，60mmol)与4，4，4-三氟-3-氧代-丁腈(9.8g，71mmol)的 EtOH(50mL)溶液用浓HCl(5mL)处理，将所得混合物加热至回流过夜。 在真空中除去溶剂，将粗产物溶于EtOAc，用饱和Na2CO3水溶液洗涤直 至洗涤液为pH 8。浓缩有机层，经过pre-HPLC纯化，得到2-甲基-5-三 氟甲基-2H-吡唑-3-基胺(2.07g，21％收率)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)， δ5.57(s，1H)，5.54(br s，2H)，3.55(s，3H)；MS(ESI)m/z：166.1(M+H+)。
实施例B12：于室温向搅拌着的2-(5-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-2-甲 基丙酸乙基酯(DP-2440，0.240g，0.86mmol)的无水THF(8.0mL)溶液中加 入LiAlH4(1.0M THF溶液，2.6mL，2.6mmol)，将所得混合物于室温搅拌1 小时。加入H2O(0.10mL)、3M NaOH(0.10mL)和H2O(0.20mL)小心淬灭 反应物，将混合物于室温搅拌过夜。将混悬液通过硅藻土过滤，用EtOAc (20mL)冲洗。将滤液干燥(MgSO4)，浓缩，得到2-(5-氨基-1-苯基-1H-吡唑 -3-基)-2-甲基丙烷-1-醇(0.208，105％收率)，为黄色的油。MS(ESI)m/z： 232.2(M+H+)。
向上述2-(5-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-2-甲基丙烷-1-醇(0.208g， 0.85mmol)的DMF(2.0mL)溶液中加入咪唑(0.32g，4.7mmol)和TBSCl (0.39g，2.6mmol)。将所得混合物于室温搅拌5小时。在减压下除去溶剂。 将残余物用H2O(10mL)稀释，用EtOAc萃取(2×20mL)。合并有机层， 干燥(MgSO4)，浓缩。粗产物经过色谱法纯化，得到3-(1-(叔丁基二甲基硅 氧基)-2-甲基丙烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-胺(0.125g，42％收率)，为浅黄色 油。MS(ESI)m/z：346.3(M+H+)。
实施例B13：利用类似于实施例B13的工艺，将2-(5-氨基-1-甲基-1H- 吡唑-3-基)-2-甲基丙酸乙基酯(DP-2525)转化为3-(1-(叔丁基二甲基硅氧 基)-2-甲基丙烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-5-胺，42％收率。1H NMR(400MHz， CDCl3)：δ5.59(s，1H)，3.69(s，3H)，3.55(s，2H)，1.26(s，6H)，0.89(s，9H)， 0.00(s，6H)；MS(ESI)m/z：284.2(M+H+)。
实施例C1：于0℃将4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙基酯(42g，181mmol) 的EtOH(400mL)溶液用甲基胺(12.3g，397mmol)的EtOH(100mL)溶液处 理，将混合物搅拌3小时。浓缩混合物，然后在H2O(200mL)与CH2Cl2 (500mL)之间分配。将有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，在真空中浓缩， 得到4-(甲基氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙基酯，为白色固体(36.0g，88％ 收率)。1H NMR(300MHz，CDCl3)：8.59(s，1H)，8.18(br s，1H)，4.31(q，J ＝7.2Hz，2H)，3.05(d，J＝4.8Hz，3H)，2.52(s，3H)，1.34(t，J＝7.2Hz，3 H)；MS(ESI)m/z：228.1(M+H+)。
向4-(甲基氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙基酯(30g，132mmol)的THF (300mL)溶液中加入LiAlH4(7.5g，198mmol)。将反应混合物于室温搅拌1 小时。用10mL水、7mL 10％NaOH水溶液小心淬灭反应物。将混合物搅 拌1h，过滤，浓缩滤液，得到(4-(甲基氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-基)甲醇(22.0g， 90％收率)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：7.79(s，1H)，6.79(m，1H)，5.04 (t，J＝5.4Hz，1H)，4.27(d，J＝5.4Hz，2H)，2.83(d，J＝4.8Hz，3H)，2.40(s， 3H).MS(ESI)m/z：186.1(M+H+)。
实施例C2：将实施例C1(22.0g，119mmol)与MnO2(44g，506mmol)在 CHCl3(300mL)中的混合物于室温搅拌3小时。过滤反应物，浓缩滤液， 得到4-(甲基氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲醛，为苍白色固体(20g，92％收率)。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：9.71(s，1H)，8.60(br s，1H)，8.49(s，1H)， 2.96(d，J＝4.8Hz，3H)，2.48(s，3H)MS(ESI)m/z：184.0(M+H+)。
实施例C3：于0℃向4，6-二氯烟酸乙基酯(5g，22.8mmol)的CH3CN (30mL)溶液滴加甲胺水溶液(65％，5.2g，45.6mmol)。将所得混合物于室温 搅拌8小时。在减压下除去有机溶液，得到粗产物，将其混悬在H2O中， 用EtOAc萃取(3×20mL)。合并萃取液，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓 缩，得到6-氯-4-(甲基氨基)烟酸乙基酯(4g，82％收率)，未经进一步纯化用 于下一步骤。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ8.48(s，1H)，8.04(d，J＝4.5 Hz，1H)，6.71(s，1H)，4.27(q，J＝6.9Hz，2H)，2.85(d，J＝5.1Hz，3H)， 1.29(t，J＝6.9Hz，3H)。
将6-氯-4-(甲基氨基)烟酸乙基酯(8g，37.4mmol)与O，N-二甲基羟基胺 盐酸盐(91g，0.94mol)在二噁烷(10mL)中的混合物加热至180℃达6小时。 将反应混合物冷却至RT，加入饱和Na2CO3水溶液直至pH 7。水溶液用 EtOAc萃取(3×100mL)。合并有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真 空中浓缩，得到6-(甲氧基(甲基)氨基)-4-(甲基氨基)烟酸乙基酯(6.6g，74％ 收率)，未经进一步纯化用于下一步骤。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 8.44(s，1H)，7.82(m，1H)，6.05(s，1H)，4.20(q，J＝7.2Hz，2H)，3.67(s，3 H)，3.17(s，3H)，2.82(d，J＝5.2Hz，3H)，1.25(t，J＝7.2Hz，3H)，MS(ESI) m/z：240.1(M+H+)
在0℃和N2气氛下，向6-(甲氧基(甲基)氨基)-4-(甲基氨基)烟酸乙基酯 (6g，25mmol)的THF(60mL)溶液逐批加入LiAlH4(1.9g，50.2mmol)。20分 钟后，加入水、然后加入2N NaOH水溶液淬灭反应物。过滤所得混悬液， 在真空中浓缩滤液，得到(6-(甲氧基(甲基)氨基)-4-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲 醇(3.8g，77.6％收率)，未经进一步纯化进行使用。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ7.61(s，1H)，6.08(s，1H)，5.86(m，1H)，4.88(t，J＝5.2Hz，1 H)，4.30(d，J＝5.2Hz，2H)，3.64(s，3H)，3.04(s，3H)，2.73(d，J＝4.8Hz，3 H)；MS(ESI)m/z：198.2(M+H+)。
实施例C4：向0℃的4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙基酯(19g，82mmol) 的CH3CN(100mL)溶液中加入乙胺水溶液(70％，8.1g，126mmol)。将所得 混合物于室温搅拌8小时。在减压下除去有机溶液，使残余物在EtOAc与 H2O之间分配。水层用乙酸乙酯萃取(3×30mL)，合并有机层，用盐水洗 涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到4-(乙基氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙基酯 (19.5g，99.1％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.49(s，1H)，8.26(t， J＝4.8Hz，1H)，4.23(q，J＝7.2Hz，2H)，3.48(q，J＝7.2Hz，2H)，2.44(s，3 H)，1.26(t，J＝7.2Hz，3H)，1.13(t，J＝7.2Hz，3H)。
在0℃和N2气氛下，向4-(乙基氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙基酯 (19.5g，81.9mmol)的无水THF(100mL)溶液逐批加入LiAlH4(12.3g， 327.6mmol)。搅拌30分钟后，用水淬灭反应物，然后加入2N NaOH水溶 液。过滤混悬液，浓缩滤液，得到(4-(乙基氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-基)甲醇 (15g，92.0％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.78(s，1H)，6.74(t，J ＝4.8Hz，1H)，5.05(t，J＝5.2Hz，1H)，4.26(d，J＝5.2Hz，2H)，3.36(m，2 H)，2.37(s，3H)，1.10(m，3H)。
实施例C5：将活化MnO2(52g，0.6mol)加入到(4-(乙基氨基)-2-(甲硫基) 嘧啶-5-基)甲醇(15g，0.075mol)的CH2Cl2(300mL)溶液中，将反应混合物于 室温搅拌过夜。过滤反应溶液，浓缩滤液，得到4-(乙基氨基)-2-(甲硫基) 嘧啶-5-甲醛(14g，93％收率)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ9.71(s，1H)， 8.67(br s，1H)，8.49(s，1H)，3.51(m，2H)，2.48(s，3H)，1.17(t，J＝7.2Hz， 3H)。
实施例C6：于0℃将异丙基胺的水溶液(7.6g，0.13mol)滴加到4-氯 -2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙基酯(15g，64.7mmol)的CH3CN(100mL)溶液中。 将所得混合物于室温搅拌8小时。在减压下浓缩反应物，使残余物在水与 EtOAc之间分配。水层用EtOAc萃取(3×50mL)，合并有机层，用盐水洗 涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到4-(异丙基氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙基 酯(16.4g，99％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.51(s，1H)，8.05(d， J＝7.6Hz，1H)，4.31-4.22(m，3H)，2.46(s，3H)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H)， 1.20(d，J＝6.4Hz，6H)。
在0℃和N2气氛下，向4-(异丙基氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙基酯 (16.4g，64.4mmol)的无水THF(100mL)溶液逐批加入LiAlH4(6.1g， 0.16mol)。将反应混合物于室温搅拌另外30分钟，加入水(6mL)、然后加 入2N NaOH水溶液(6mL)淬灭。过滤混悬液，浓缩滤液，得到(4-(异丙基 氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-基)甲醇(13.5g，98％收率)，未经进一步纯化进行使 用。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.79(s，1H)，6.37(d，J＝7.6Hz，1H)， 5.10(t，J＝5.6Hz，1H)，4.28-4.20(m，3H)，2.38(s，3H)，1.13(d，J＝6.4Hz， 6H)。
实施例C7：于0℃向4，6-二氯烟酸乙基酯(5g，23mmol)的CH3CN (100mL)溶液滴加异丙基胺的水溶液(60％，4.5g，46mmol)。将所得混合物于 室温搅拌8小时。在减压下除去有机溶液，使残余物在水与EtOAc之间分 配。水层用EtOAc萃取(3×30mL)。合并有机层，用盐水洗涤，干燥 (MgSO4)，浓缩，得到6-氯-4-(异丙基氨基)烟酸乙基酯(5g，90％收率)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ8.51(s，1H)，7.97(m，1H)，6.82(s，1H)， 4.27(q，J＝7.2Hz，2H)，3.85(m，1H)，1.31(t，J＝7.2Hz，3H)，1.15(d，J＝ 6.3Hz，6H)。
将6-氯-4-(异丙基氨基)烟酸乙基酯(3.0g，12.4mmol)、O，N-二甲基羟基 胺盐酸盐(35.0g，0.35mol)在二噁烷(10mL)中的混合物在180℃下加热6小 时。冷却至RT后，反应混合物用饱和Na2CO3溶液中和至pH 7-8。在减 压下浓缩含水混合物，用EtOAc萃取(3×100mL)。合并有机层，用盐水 洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到4-(异丙基氨基)-6-(甲氧基(甲基)氨基)烟 酸乙基酯(3.2g，97％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.48(s，1H)， 7.82(d，J＝7.2Hz，1H)，6.10(s，1H)，4.22(q，J＝7.2Hz，2H)，3.77(m，4 H)，3.18(s，3H)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H)，1.20(d，J＝6.4Hz，6H)。
于0℃将LiAlH4(0.9g，24.0mmol)逐批加入到4-(异丙基氨基)-6-(甲氧 基(甲基)氨基)烟酸乙基酯(3.2g，12.0mmol)的THF(60mL)溶液中，将所得 反应混合物于室温搅拌30分钟。加入水(1mL)和2N NaOH水溶液(1mL) 淬灭反应物。过滤除去所得沉淀，浓缩滤液，得到(4-(异丙基氨基)-6-(甲氧 基(甲基)氨基)吡啶-3-基)甲醇(2.9g，＞100％收率)，未经进一步纯化进行使 用。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.62(s，1H)，6.16(s，1H)，5.44(d，J ＝7.2Hz，1H)，5.02(bs，1H)，4.33(s，2H)，3.69-3.61(m，4H)，3.06(s，3H)， 1.18(d，J＝6.4Hz，6H)。
实施例C8：利用类似于实施例C7的工艺，合并4，6-二氯烟酸乙基酯 (20g，0.09mol)和乙胺(15.3g，0.22mol)，得到(4-(乙基氨基)-6-(甲氧基(甲基) 氨基)吡啶-3-基)甲醇(16g，87％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 7.60(s，1H)，6.12(s，1H)，5.64(m，1H)，4.92(m，1H)，4.31(d，J＝5.2Hz，2 H)，3.63(s，3H)，3.12(q，J＝7.2Hz，2H)，3.04(s，3H)，1.16(t，J＝7.2Hz，3 H)；MS(ESI)m/z：211.9[M+H]+。
实施例D1：在-10℃下，将浓硝酸(17g，0.18mol)滴加到搅拌着的4-氟 -2-甲基苯胺(20g，0.16mol)的浓H2SO4(300mL)溶液中。将混合物在-10℃下 搅拌10分钟，将反应混合物倒入冰水中。过滤收集所得固体，在EtOAc 与Na2CO3水溶液(pH 8)之间分配。将有机溶液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)， 浓缩，得到4-氟-2-甲基-5-硝基苯胺(20g，74％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ7.27(d，J＝6.8Hz，1H)，7.14(d，J＝12.4Hz，1H)，5.37(s，2 H)，2.10(s，3H)。
实施例D2：在-10℃下，将浓硝酸(8.8g，91mmol)溶液历经30分钟滴 加到搅拌着的2-氯-4-氟-苯基胺(12g，82.3mmol)的浓H2SO4(100mL)溶液 中。将混合物在该温度下搅拌10分钟。然后将反应混合物倒入冷的EtOAc 中，加入冰水。分离有机层，用盐水和饱和NaHCO3溶液洗涤，干燥 (MgSO4)，在真空中浓缩。重结晶(乙醚)得到2-氯-4-氟-5-硝基苯胺(5.0g， 32％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ7.59(d，J＝11.2Hz，1H)，7.48 (d，J＝7.2Hz，1H)，5.84(s，2H)。
实施例D3：在-78℃下，向2，4-二氯-5-硝基嘧啶(8g，41mmol)的EtOH 溶液滴加甲基胺的EtOH溶液(65％，7.8g，0.164mmol)，然后使混合物温热 至RT，搅拌过夜。过滤收集沉淀，使黄色固体重结晶(DMSO)，得到N2，N4- 二甲基-5-硝基嘧啶-2，4-二胺(6.5g，86％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ8.98(s，0.3H)，8.90(s，0.7H)，8.72(m，J＝3.9Hz，0.7H)，8.52 (s，br，0.3H)，8.14(m，0.7H)，7.97(m，0.3H)，2.98(d，J＝4.8Hz，2.1H)， 2.90(d，J＝3.9Hz，0.9H)，2.85(d，J＝3.9Hz，3H)。
向N2，N4-二甲基-5-硝基嘧啶-2，4-二胺(4g，21.8mmol)的EtOH溶液中 加入10％Pd/C(0.5g)和1N HCl水溶液(10mL，10mmol)。使混合物氢化 (30psi)2小时。过滤反应混合物，浓缩滤液，得到N2，N4-二甲基嘧啶-2，4，5- 三胺HCl(4g，97％收率)。1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ9.00(s，1H)，3.45 (s，3H)，3.35(s，3H)。
实施例1：于0℃向实施例B1(10.00g，46.4mmol，1.00eq)与吡啶 (7.58ml，92.9mmol，2.00eq)的CH2Cl2(225ml)溶液中加入氯甲酸异丙烯基 酯(5.33ml，4.8.8mmol，1.05eq)。在0℃下45分钟后，反应完全，用3M HCl (2×)、饱和NaHCO3(1×)和盐水(1×)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发，得 到粗产物(14.9g)，为油，在泵上固化。在温热的(60℃)己烷(70ml)中研制 20-30分钟直至得到粉状沉淀，改进所得粗产物。冷却至RT后，过滤收集 固体，用己烷冲洗。滤饼再次用己烷洗涤，然后在滤器上干燥，得到3-叔 丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基氨甲酸(丙-1-烯-2-基)酯(10.79g，78％收率)，为黄 褐色粉末，直接用于下一反应。MS(ESI)m/z：300.3(M+H+)。
将3-叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基氨甲酸(丙-1-烯-2-基)酯(0.100g， 0.334mmol，1.00eq)、实施例A2(0.0963g，0.334mmol，1.00eq)和1-甲基吡咯 烷(0.00174ml，0.0167mmol，0.05eq)在THF(3.5ml)中合并，在搅拌下于70 ℃加热过夜。反应完全，冷却至RT，浓缩至固体残余物。将其用CH2Cl2 处理，得到混悬液，在冰中充分冷却。过滤收集固体，用冰冷的CH2Cl2 充分冲洗，在滤器上干燥，得到1-(5-(7-氨基-1-甲基-2-氧代-1，2-二氢嘧啶 并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(3-叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲 (0.1336g，76％收率)，为淡黄色固体。将其混悬在MeCN中，用经过验证 的0.1N HCl(2.52ml，1.0eq)处理，冷冻干燥，得到HCl盐(0.1641g)，为淡 黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.14(brs，1H)，8.99(brs，1H)， 8.22-8.20(m，1H)，8.04(s，1H)，7.58-7.51(m，4H)，7.47-7.42(m，1H)， 7.34-7.29(m，1H)，7.04-7.01(m，1H)，6.40(s，1H)，4.66(s，2H)，3.31(s，3H)， 1.27(s，9H)；MS(ESI)m/z：530.2(M+H+)。
实施例2：利用通用方法A，合并实施例B5的TROC氨甲酸酯(0.100g， 0.344mmol，1.00eq)和实施例A2(0.0877g，0.304mmol，1.00eq)，得到1-(5-(7- 氨基-1-甲基-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(3- 叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)脲(44.4mg，31％收率)，为白色固体，转化为 HCl盐(48.0mg)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.24(s，1H)，9.07(brs， 1H)，8.31(dd，1H，J＝2.8和7.2Hz)，8.04(s，1H)，7.34(dd，1H，J＝8.80和 10.8Hz)，7.03(ddd，1H，J＝2.8，4.40和8.80Hz)，6.10(s，1H)，4.67(brs，2H)， 3.64(s，3H)，3.31(s，3H)，1.20(s，9H)；MS(ESI)m/z：468.2(M+H+)。
实施例3：利用通用方法G，合并1-苯基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-胺 (2.51g，11mmol)和实施例A3(0.17g，0.55mmol)，得到1-(2-氟-5-(1-甲基 -7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(1-苯基 -3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)脲，为灰白色固体(0.145g，48％收率)。1H NMR (400MHz，DMSO-d6)：δ9.15(s，1H)，9.11(d，J＝2.0Hz，1H)，8.05(dd，J＝ 7.2Hz，2.8Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.58-7.52(m，5H)，7.21(dd，J＝10.8Hz， 8.8Hz，1H)，6.98-6.94(m，2H)，6.83(s，1H)，4.52(s，2H)，3.19(s，3H)，2.73(d， J＝4.4Hz，3H)；MS(ESI)m/z：556.3(M+H+)。
实施例4：利用通用方法B，合并3-叔丁基苯基氨甲酸丙-1-烯-2-基酯 (0.070g，0.30mmol)和实施例A3(0.0907g，0.30mmol)，得到1-(3-叔丁基苯 基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)脲(0.030g，21％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)，δ9.09(s，1H)，8.59(s，1H)，8.18(dd，J＝7.6，2.4Hz，1H)，7.98(s， 1H)，7.47(s，1H)，7.31-7.21(m，3H)，7.05-6.98(m，3H)，4.60(s，1H)，3.27(s， 3H)，2.81(d，J＝4.4Hz，3H)，1.27(s，9H)；MS(ESI)m/z：478.3(M+H+)。
实施例5：利用通用方法C，合并实施例B2的氨甲酸酯(100mg， 0.23mmol)和实施例A2(65mg，0.23mmol)，得到1-(5-(7-氨基-1-甲基-2-氧 代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(3-叔丁基-1-(喹啉-6- 基)-1H-吡唑-5-基)脲(76mg，58％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 9.02(s，1H)，8.99(m，1H)，8.95(dd，J＝4.2，1.5Hz，1H)，8.48(m，1H)， 8.17-8.10(m，3H)，7.92(dd，J＝9.0.2.4Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.60(dd，J＝ 8.4，4.3Hz，1H)，7.23(dd，J＝11.0，8.6Hz，1H)，6.97(m，1H)，6.55(s，2H)， 6.46(s，1H)，4.54(s，2H)，3.29(s，3H)，1.28(s，9H)；MS(ESI)m/z：581.3 (M+H+)。
实施例6：利用通用方法C，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(0.100g， 0.317mmol)和实施例A3(0.0958g，0.317mmol)，经过反相色谱法纯化 (5-42％MeCN(w/0.1％TFA)/H2O(w/0.1％TFA))，冷冻干燥后得到1-(3- 叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并 [4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(62.7mg，42％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ10.41(s，1H)，8.87(brs，1H)，8.14(dd，J＝2.8和7.2Hz，1H)， 8.03(s，1H)，7.33(dd，J＝8.8和10.8Hz，1H)，7.07(ddd，J＝2.8，4.0，和8.4 Hz，1H)，6.04(s，1H)，4.65(s，2H)，3.31(brs，3H)，2.90(brs，3H)，1.23(s，9H)； MS(ESI)m/z：469.2(M+H+)。
实施例7：利用通用方法B，合并实施例B4的氨甲酸酯(0.15g， 0.48mmol)和实施例A7(0.15g，0.48mmol)，得到1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨 基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(1-苯基-3-(三 氟甲基)-1H-吡唑-5-基)脲(0.17g，62％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)： δ9.20(s，1H)，9.15(brs，1H)，8.09(dd，J＝2.8，和7.6Hz，1H)，7.95(s，1H)， 7.5-7.7(m，5H)，7.26(dd，J＝8.8，和10.8Hz，1H)，6.8-7.059m，2H)，6.87(s， 1H)，4.55(s，3H)，3.94(q，J＝6.8Hz，2H)，2.77(d，J＝4.8Hz，3H)，1.16(t，J ＝6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：570.2(M+H+)。
实施例8：利用通用方法A，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(0.35g， 1.1mmol)和实施例A6(0.37g，1.1mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)- 基)-2-氟苯基)脲(0.17g，31％收率)。MS(ESI)m/z：500.3(M+H+)。
利用类似于实施例A2的工艺，将1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(5-(1-乙 基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲 (0.080g，0.16mmol)用mCPBA(70％wt，0.10g，0.41mmol)、再用N-甲基胺 (2.0M THF溶液，0.68mL，1.4mmol)处理，得到3-(3-氨基-4-氟苯基)-1-乙基 -7-(甲基氨基)-3，4-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2(1H)-酮(0.14g，85％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ10.4(s，1H)，8.80(d，J＝2.4Hz，1H)，8.09 (dd，J＝2.8，和7.6Hz，1H)，7.96(s，1H)，7.29(dd，J＝8.8，和10.8Hz，1H)， 7.06(m，1H)，7.00(m，1H)，6.05(s，1H)，4.57(s，3H)，3.95(q，J＝4.0Hz，2H)， 2.78(d，J＝4.8Hz，3H)，1.23(s，9H)，1.17(t，J＝4.0Hz，3H)；MS(ESI)m/z： 483.3(M+H+)。
实施例9：利用通用方法B，合并5-叔丁基异噁唑-3-胺的氨甲酸酯 (58mg，0.26mmol)和实施例A5(0.080g，0.26mmol)，得到1-(5-叔丁基异噁唑 -3-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(8-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)苯 基)脲(41mg，34％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.74和8.57(s，1 H)，8.10(d，J＝8.4Hz，1H)，8.00(br m，1H)，7.24-7.12(m，2H)，6.44(s，1 H)，3.57和3.50(s，3H)，2.92(br s，3H)，2.28(s，3H)，1.26(s，9H)；MS(ESI) m/z：481.2(M+H+)。
实施例10：利用通用方法A，合并B4的TROC氨甲酸酯(0.21g， 0.52mmol)和实施例A21(0.2g，0.47mmol)，得到1-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基 -7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(1-苯基 -3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)脲(140mg，52％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ9.13(brs，2H)，8.03(d，J＝9Hz，1H)，7.93(s，1H)，7.64-7.51(m， 5H)，7.18(d，J＝12Hz，1H)，7.01(m，1H)，6.85(s，1H)，4.52(d，J＝14Hz， 1H)，4.34(d，J＝14Hz，1H)，3.23(brs，3H)，2.78(d，J＝5Hz，3H)，2.05(s， 3H)；MS(ESI，m/z：570.2，M+H+)。
实施例11：利用通用方法A，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(0.3g， 0.95mmol)和实施例A10(0.3g，0.9mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)脲(220mg，46％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 10.32(brs，1H)，8.74(brs，1H)，8.22(s，1H)，8.04(d，J＝8Hz，1H)，7.24(d，J＝ 12Hz，1H)，6.03(s，1H)，4.70(d，J＝15Hz，1H)，4.52(d，J＝15Hz，1H)，3.27(s， 3H)，2.50(s，3H)，2.06(s，3H)，1.21(s，9H)；MS(ESI)m/z：500.3(M+H+)。
利用类似于实施例A2的工艺，合并1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-4- 甲基-5-(1-甲基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯 基)脲(0.58g，1.2mmol)和甲基胺(1ml，3mmol，3.0M THF溶液)，得到1-(3- 叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二 氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(0.995g，95％收率)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ10.31(brs，1H)，8.73(s，1H)，8.00(d，J＝9Hz，1H)，7.94 (brs，1H)，7.23(d，J＝12Hz，1H)，7.02(m，1H)，6.04(s，1H)，4.55(d，J＝14Hz， 1H)，4.35(d，J＝14Hz，1H)，3.24(brs，3H)，2.79(d，J＝5Hz，3H)，2.08(s， 3H)，1.22(s，9H)；MS(ESI)m/z：483.3(M+H+)。
实施例12：利用通用方法A，合并实施例B5的TROC氨甲酸酯(0.16g， 0.47mmol)和实施例A21(0.15g，0.47mmol)，得到1-(3-叔丁基-1-甲基-1H- 吡唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并 [4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(190mg，81％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ8.86(brs，2H)，8.05(d，J＝9Hz，1H)，7.93(s，1H)，7.19(d，J＝ 12Hz，1H)，7.01(m，1H)，6.06(s，1H)，4.54(d，J＝14Hz，1H)，4.35(d，J＝ 14Hz，1H)，3.59(s，3H)，3.23(brs，3H)，2.78(d，J＝5Hz，3H)，2.05(s，3H)， 1.17(s，9H)；MS(ESI，m/z：496.3，M+H+)。
实施例13：利用通用方法C，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(0.3g， 0.95mmol)和实施例A10(0.3g，0.9mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)脲(0.22g，46％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 10.32(brs，1H)，8.74(brs，1H)，8.22(s，1H)，8.04(d，J＝8Hz，1H)，7.24(d，J ＝12Hz，1H)，6.03(s，1H)，4.70(d，J＝15Hz，1H)，4.52(d，J＝15Hz，1H)，3.27 (s，3H)，2.50(s，3H)，2.06(s，3H)，1.21(s，9H)；MS(ESI)m/z：500.3 (M+H+)。
利用类似于实施例A2的工艺，用mCPBA氧化硫化物，然后与过量 N，N-二甲基乙胺反应，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(5-(7-(2-(二甲基氨 基)乙基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟-4- 甲基苯基)脲，其转化为甲磺酸盐(52％收率)1H NMR(400MHz，DMSO-d6)： δ10.35(brs，1H)，8.57(brs，1H)，8.02(d，J＝9Hz，1H)，8.0(s，1H)，7.3(m， 1H)，7.25(d，J＝12Hz，1H)，6.03(s，1H)，4.60(d，J＝14Hz，1H)，4.40(d，J ＝14Hz，1H)，3.60(m，2H)，3.20(m，2H)，2.80(s，6H)，2.32(s，3H)，2.03(s， 3H)，1.21(s，9H)；MS(ESI)m/z：498.0(M+H+)。
实施例14：利用通用方法G，合并5-叔丁基异噁唑-3-胺的氨甲酸酯 (0.050g，0.223mmol)和实施例A21(0.078g，0.245mmol)，得到1-(5-叔丁基 异噁唑-3-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶 并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(0.042g，39％收率)，为白色固体。1H NMR (400MHz，DMSO-d6)：δ9.82(s，1H)，8.80(s，1H)，8.03(d，J＝7.6Hz，1H)， 7.94(s，1H)，7.23(d，J＝12.0Hz，1H)，7.02(m，1H)，6.46(s，1H)，4.55(d，J＝ 13.6Hz，1H)，4.36(d，J＝13.6Hz，1H)，3.24(s，3H)，2.79(d，J＝4.0Hz，3H)， 2.07(s，3H)，1.26(s，9H)；MS(ESI)m/z：483.3(M+H+)。
实施例15：利用通用方法F，在吡啶(36μL，0.44mmol)的存在下合并异 氰酸(3-(三氟甲基)苯基)酯(41mg，0.22mmol)和实施例A21(70mg， 0.22mmol)，得到1-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧 啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)脲(59mg，53％收率)。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.38(s，1H)，8.65(d，J＝2.0Hz，1H)，8.04 (m，2H)，7.94(brs，1H)，7.48(m，2H)，7.31(m，1H)，7.21(d，J＝12.4Hz，1H)， 7.01(q，J＝4.8Hz，1H)，4.58(d，J＝14.0Hz，1H)，4.35(d，J＝14.0Hz，1H)， 3.24(brs，3H)，2.79(d，J＝4.8Hz，3H)，2.07(s，3H)；MS(ESI)m/z：504.0 (M+H+)。
实施例16：利用通用方法B，合并5-叔丁基异噁唑-3-胺的氨甲酸酯 (50mg，0.22mmol)和实施例A23(77mg，0.22mmol)，得到1-(5-叔丁基异噁唑 -3-基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -3(4H)-基)-4-甲基苯基)脲(0.067g，59％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ9.82(s，1H)，8.80(brs，1H)，8.01(d，J＝7.6Hz，1H)，7.94(brs， 1H)，7.21(d，J＝12.0Hz，1H)，6.99(m，1H)，6.47(s，1H)，4.99(m，1H)，4.52 (d，J＝14.0Hz，1H)，4.28(d，J＝14.0Hz，1H)，2.78(d，J＝4.8Hz，3H)，2.04 (s，3H)，1.46(d，J＝6.4Hz，6H)，1.27(s，9H)；MS(ESI)m/z：511.2(M+H+)。
实施例17：利用通用方法C，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(0.165g， 0.523mmol)和实施例A23(0.120g，0.348mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -3(4H)-基)-4-甲基苯基)脲(0.022g，12％收率)，为白色固体。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ10.32(s，1H)，8.74(s，1H)，7.98(d，J＝8.0Hz，1H)，7.94 (s，1H)，7.22(d，J＝12.0Hz，1H)，7.00(m，1H)，6.05(s，1H)，5.00(m，1H)， 4.52(d，J＝13.6Hz，1H)，4.28(d，J＝13.6Hz，1H)，2.78(d，J＝4.8Hz，3H)， 2.05(s，3H)，1.46(d，J＝6.4Hz，6H)，1.23(s，9H)；MS(ESI)m/z：511.2 (M+H+)。
实施例18：利用通用方法B，合并5-叔丁基异噁唑-3-胺的氨甲酸酯 (50mg，0.22mmol)和实施例A22(74mg，0.22mmol)，得到1-(5-叔丁基异噁唑 -3-基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)脲(0.033g，30％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 9.86(s，1H)，8.86(brs，1H)，8.08(dd，J＝2.8，和7.2Hz，1H)，7.96(brs，1H)， 7.27(dd，J＝8.8，和10.8Hz，1H)，7.00(m，2H)，4.97(m，1H)，4.51(s，2H)， 2.78(d，J＝4.8Hz，1H)，1.47(d，J＝6.4Hz，6H)，1.27(s，9H)；MS(ESI)m/z： 497.2(M+H+)。
实施例19：利用通用方法D，在三乙胺(0.1g，0.97mmol)和DPPA(0.2g， 0.73mmol)的存在下合并实施例B7(0.041g，0.24mmol)和实施例A17 (0.084g，0.24mmol)，得到1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基 -7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-4-甲基苯基) 脲，为白色固体(0.037g，30％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.67 (s，1H)，8.48(d，J＝2.0Hz，1H)，8.04(d，J＝8.0Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.81 (m，1H)，7.38(s，1H)，7.16(d，J＝12.0Hz，1H)，6.98-6.97(m，1H)，5.02-4.95 (m，1H)，4.51(d，J＝13.6Hz，1H)，4.28(d，J＝13.6Hz，1H)，2.78(d，J＝4.4 Hz，3H)，2.02(s，3H)，1.47-1.44(m，15H)；MS(ESI)m/z：510.2(M+H+)。
实施例20：利用通用方法D，在三乙胺(0.12g，1.2mmol)和二苯基磷酰 叠氮化物(0.25g，0.9mmol)的存在下合并实施例B7(0.051g，0.3mmol)和实 施例A22(0.1g，0.3mmol)，得到1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-5-(1-异 丙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲，为 白色固体(0.045g，30％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.72(s，1H)， 8.56(s，1H)，8.11(dd，J＝7.6Hz，2.4Hz，1H)，7.96(s，1H)，7.81(s，1H)，7.39 (s，1H)，7.23(dd，J＝11.2Hz，8.8Hz，1H)，6.99-6.96(m，1H)，6.94-6.89(m， 1H)，5.00-4.93(m，1H)，4.49(s，2H)，2.77(d，J＝4.4Hz，3H)，1.46-1.44(m， 15H)；MS(ESI)m/z：496.3(M+H+)。
实施例21：利用通用方法B，合并实施例B5的氨甲酸酯(50mg， 0.21mmol)和实施例A7(67mg，0.21mmol)得到1-(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑 -5-基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)- 基)-2-氟苯基)脲(0.060g，58％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.95 (s，1H)，8.88(d，J＝2.0Hz，1H)，8.13(dd，J＝3.2，和7.6Hz，1H)，7.96(s，1H)， 7.28(dd，J＝8.8，和11.2Hz，1H)，7.00(m，2H)，6.08(s，1H)，4.56(s，2H)， 3.93(q，J＝4.8Hz，2H)，3.60(s，3H)，2.78(d，J＝4.8Hz，3H)，1.18(s，9H)， 1.15(t，J＝4.8Hz，3H)，1.27(s，9H)；MS(ESI)m/z：496.3(M+H+)。
实施例22：利用通用方法B，合并实施例B4的氨甲酸酯(70mg， 0.22mmol)和实施例A4(68mg，0.22mmol)，得到1-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基 氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(1-苯基-3-(三氟 甲基)-1H-吡唑-5-基)脲(0.066g，53％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)： δ9.20(s，1H)，9.14(brs，1H)，8.08(dd，J＝2.8，和7.2Hz，1H)，7.74(s，1H)， 7.62(m，5H)，7.24(d，J＝8.8，和10.8Hz，1H)，6.97(m，1H)，6.87(s，1H)，6.42 (q，J＝4.8Hz，1H)，5.95(s，1H)，4.57(s，2H)，3.15(s，3H)，2.75(d，J＝4.8Hz， 3H)；MS(ESI)m/z：555.2(M+H+)。
实施例23：利用改变的通用方法C，将实施例B6的TROC氨甲酸酯 (128mg，0.40mmol)和实施例A4(118mg，0.39mmol)在DMF(1mL)中用 iPr2NEt(0.070mL，0.40mmol)处理。将反应混合物加热至100℃达4天。在 真空中浓缩反应物，经过反相硅胶色谱法纯化，得到1-(1-叔丁基-1H-吡唑 -4-基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)脲(54mg，28％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 8.72(s，1H)，8.53(d，J＝2.2Hz，1H)，8.13(dd，J＝7.3，2.5Hz，1H)，7.80(s， 1H)，7.74(s，1H)，7.38(s，1H)，7.22(dd，J＝11.3，8.8Hz，1H)，6.90(ddd，J ＝8.8，4.3，2.8Hz，1H)，6.41(q，J＝4.8Hz，1H)，5.95(s，1H)，4.57(s，2H)， 3.17(s，3H)，2.75(d，J＝5.0Hz，3H)，1.46(s，9H)；MS(ESI)m/z：467.3 (M+H+)。
实施例24：利用通用方法B，合并实施例B5的氨甲酸酯(0.050g， 0.211mmol)和实施例A16(0.066g，0.211mmol)，得到1-(3-叔丁基-1-甲基 -1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡 啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(0.061g，59％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.89(s，1H)，8.80(d，J＝1.2Hz，1H)，8.02(d， J＝8.0Hz，1H)，7.72(s，1H)，7.19(d，J＝12.0Hz，1H)，6.41(m，1H)，6.07(s， 1H)，5.95(s，1H)，4.56(d，J＝13.6Hz，1H)，4.36(d，J＝14.0Hz，1H)，3.59(s， 3H)，3.16(s，3H)，2.75(d，J＝4.8Hz，3H)，2.04(s，3H)，1.18(s，9H)；MS (ESI)m/z：495.2(M+H+)。
实施例25：利用通用方法C，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(0.080g， 0.254mmol)和实施例A16(80mg，0.254mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧 啶-3(4H)-基)苯基)脲。将其用甲磺酸处理，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧 啶-3(4H)-基)苯基)脲甲磺酸盐(58mg，40％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ10.3(s，1H)，8.78(brs，1H)，8.13(brs，1H)，8.03(d，J＝7.6Hz， 1H)，7.77(s，1H)，7.25(d，J＝11.6Hz，1H)，6.26(s，1H)，6.03(s，1H)，4.66(d， J＝14.8Hz，1H)，4.49(d，J＝14.8Hz，1H)，3.25(s，3H)，2.90(d，J＝4.8Hz， 3H)，2.31(s，3H)，2.07(s，3H)，1.23(s，9H)；MS(ESI)m/z：482.2(M+H+)。
实施例26：利用通用方法B，合并5-叔丁基异噁唑-3-胺的氨甲酸酯 (70mg，0.31mmol)和实施例A16(98mg，0.31mmol)，得到1-(5-叔丁基异噁唑 -3-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d] 嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲。将其用甲磺酸处理，得到1-(5-叔丁基异噁唑-3- 基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧 啶-3(4H)-基)苯基)脲甲磺酸盐(38mg，20％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ9.84(s，1H)，8.84(brs，1H)，8.34(brs，1H)，8.07(d，J＝8.0Hz， 1H)，7.77(s，1H)，7.25(d，J＝12.4Hz，1H)，6.45(s，1H)，6.29(s，1H)，4.68(d， J＝15.2Hz，1H)，4.50(d，J＝15.2Hz，1H)，3.26(s，3H)，2.92(d，J＝4.8Hz， 3H)，2.29(s，3H)，2.07(s，3H)，1.27(s，9H)；MS(ESI)m/z：482.2(M+H+)。
实施例27：利用通用方法D，在三乙胺(0.092g，0.91mmol)和二苯基磷 酰叠氮化物(0.16g，0.6mmol)的存在下合并实施例B7(0.051g，0.3mmol)和 实施例A16(0.096g，0.3mmol)，得到1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-4- 甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基) 苯基)脲，为白色固体(37mg.25％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 8.67(s，1H)，8.47(s，1H)，8.03(d，J＝8.0Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.71(s，1H)， 7.38(s，1H)，7.15(d，J＝12.0Hz，1H)，6.43-6.40(m，1H)，5.94(s，1H)，4.55 (d，J＝13.6Hz，1H)，4.37(d，J＝13.6Hz，1H)，3.16(s，3H)，2.75(d，J＝4.8 Hz，3H)，2.03(s，3H)，1.46(s，9H)，1.20(t，J＝6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z： 481.2(M+H+)。
实施例28：利用通用方法C，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(50mg， 0.16mmol)和实施例A18(50mg，0.15mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)脲(33mg，41％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 10.39(s，1H)，8.92(s，1H)，8.21(d，J＝8.0Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.65(d，J ＝10.8Hz，1H)，6.44(q，J＝4.7Hz，1H)，6.60(s，1H)，5.97(s，1H)，4.57(d， J＝13.6Hz，1H)，4.43(d，J＝13.5Hz，1H)，3.17(s，3H)，2.76(d，J＝4.7Hz， 3H)，1.22(s，9H)；MS(ESI)m/z：502.0，504.0(M+H+)。
DP-2711
实施例29：利用通用方法B，合并5-叔丁基异噁唑-3-胺的氨甲酸酯 (60mg，0.27mmol)和实施例A17(92mg，0.27mmol)，得到1-(5-叔丁基异噁唑 -3-基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -3(4H)-基)-4-甲基苯基)脲(0.041g，30％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ9.81(s，1H)，8.78(brs，1H)，7.98(d，J＝7.6Hz，1H)，7.73(s， 1H)，7.18(d，J＝12.0Hz，1H)，6.48(s，1H)，6.39(q，J＝4.8Hz，1H)，6.16(s， 1H)，4.47(q，J＝13.6Hz，1H)，4.32(m，1H)，4.27(d，J＝13.6Hz，1H)，2.75 (d，J＝4.8Hz，3H)，2.01(s，1H)，1.45(m，6H)，1.27(s，9H)；MS(ESI)m/z： 510.2(M+H+)。
实施例20：利用通用方法C，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(0.076g， 0.242mmol)和实施例A17(0.076g，0.22mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -3(4H)-基)-4-甲基苯基)脲(0.025g，22％收率)，为白色固体。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ10.32(s，1H)，8.73(s，1H)，7.95(d，J＝7.2Hz，1H)，7.73 (s，1H)，7.19(d，J＝12.0Hz，1H)，6.40(m，1H)，6.16(s，1H)，6.06(s，1H)， 4.47(d，J＝13.2Hz，1H)，4.33-4.25(m，2H)，2.75(d，J＝4.8Hz，3H)，1.99(s， 3H)，1.45(t，J＝4.8Hz，6H)，1.23(s，9H)；MS(ESI)m/z：510.2(M+H+)。
实施例31：利用通用方法D，在三乙胺(0.092g，0.91mmol)和DPPA (0.25g，0.9mmol)的存在下合并实施例B7(0.051g，0.3mmol)和实施例A17 (0.104g，0.3mmol)，得到1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基 -7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-4-甲基苯基) 脲，为白色固体(42mg.27％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.67(s， 1H)，8.47(s，1H)，8.03(d，J＝7.6Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.73(s，1H)，7.38(s， 1H)，7.13(d，J＝12.0Hz，1H)，6.42-6.39(m，1H)，6.15(s，1H)，4.47(d，J＝ 13.6Hz，1H)，4.34-4.24(m，2H)，2.75(d，J＝4.8Hz，3H)，1.99(s，3H)， 1.46-1.45(m，15H)；MS(ESI)m/z：509.2(M+H+)。
实施例32：利用通用方法F，合并实施例A18(88mg，0.29mmol)和1- 异氰酰基-3-(三氟甲基)苯(63mg，0.34mmol)，经过反相硅胶色谱法纯化，得 到1-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)脲(12mg，13％收率)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)：δ9.46(s，1H)，8.86(s，1H)，8.27(d，J＝8.1Hz，1H)，8.05 (s，1H)，7.73(s，1H)，7.63(d，J＝10.8Hz，1H)，7.54-7.47(m，2H)，7.34(d， J＝6.8Hz，1H)，6.53(m，1H)，5.98(s，1H)，4.61(d，J＝13.8Hz，1H)，4.44 (d，J＝13.8Hz，1H)，3.18(s，3H)，2.77(d，J＝4.7Hz，3H)；MS(ESI)m/z： 523.0，525.0(M+H+)。
实施例33：利用通用方法C，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(0.158g， 0.501mmol)和实施例A22(0.110g，0.334mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)脲(0.056g，34％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ10.36(s，1H)，8.80(d，J＝2.4Hz，1H)，8.06(dd，J＝7.2，2.4Hz， 1H)，7.96(s，1H)，7.29(m，1H)，7.05-6.98(m，2H)，6.06(s，1H)，4.97(m，1H)， 4.51(s，2H)，2.78(d，J＝4.4Hz，3H)，1.47(t，J＝6.4Hz，6H)，1.23(s，9H)； MS(ESI)m/z：497.2(M+H+)。
实施例34：利用通用方法C，合并3-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-5-胺的 TROC氨甲酸酯(0.061g，0.16mmol)和实施例A18(0.054g，0.16mmol)，得到 1-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)-3-(3-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲，为白色固体(24mg， 26％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.16(s，1H)，8.93(s，1H)，8.25 (d，J＝8.0Hz，1H)，7.72(s，1H)，7.60(d，J＝10.8Hz，1H)，7.55-7.48(m，3H)， 7.44-7.40(m，1H)，6.46-6.42(m，1H)，6.34(s，1H)，5.96(s，1H)，4.56(d，J＝ 14.0Hz，1H)，4.43(d，J＝14.0Hz，1H)，3.17(s，3H)，2.89-2.82(m，1H)，2.74 (d，J＝4.8Hz，3H)，1.20(d，J＝6.8Hz，6H)；MS(ESI)m/z：564.0(M+H+)。
实施例35：利用通用方法B，合并实施例B6的氨甲酸酯(0.096g， 0.43mmol)和实施例A25(0.080g，0.215mmol)，得到1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4- 基)-3-(5-(7-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d] 嘧啶-3(4H)-基)-2-氟-4-甲基苯基)脲(0.020g，17％收率)，为白色固体。使其 与MsOH(2.0eq.)反应转化为相应的双甲磺酸盐。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ9.50(s，1H)，8.72(s，1H)，8.55(s，1H)，8.81(d，J＝7.6Hz，1H)， 7.85(s，1H)，7.78(s，1H)，7.41(s，1H)，7.20(d，J＝12.0Hz，1H)，6.33(s，1H)， 4.70(d，J＝14.4Hz，1H)，4.52(d，J＝14.4Hz，1H)，3.72(m，2H)，3.34-3.28 (m，5H)，2.85(s，6H)，2.32(s，6H)，2.05(s，3H)，1.47(s，9H)；MS(ESI)m/z： 538.3(M+H+)。
实施例36：利用通用方法C，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(0.080g， 0.254mmol)和实施例A19(89mg，0.254mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)- 基)-2-氟-4-甲基苯基)脲(0.040g，32％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)： δ10.3(s，1H)，8.72(s，1H)，7.98(d，J＝7.6Hz，1H)，7.72(s，1H)，7.21(d，J＝ 12.0Hz，1H)，6.39(q，J＝4.4Hz，1H)，6.05(s，1H)，6.01(s，1H)，4.58(d，J＝ 13.6Hz，1H)，4.34(d，J＝13.6Hz，1H)，3.77(m，2H)，2.76(d，J＝4.4Hz， 3H)，2.04(s，3H)，1.23(s，9H)，1.16(t，J＝6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：496.3 (M+H+)。
实施例37：利用通用方法C，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(0.080g， 0.254mmol)和实施例A20(89mg，0.254mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -3(4H)-基)-2-氟苯基)脲(0.030g，23％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)： δ10.4(s，1H)，8.91(s，1H)，8.22(d，J＝8.0Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.64(d，J＝ 10.8Hz，1H)，6.41(q，J＝4.8Hz，1H)，6.06(s，1H)，6.03(s，1H)，4.58(d，J＝ 13.2Hz，1H)，4.41(d，J＝13.2Hz，1H)，3.78(m，2H)，2.76(d，J＝4.8Hz， 3H)，1.23(s，9H)，1.16(t，J＝6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：516.0(M+H+)。
实施例38：利用通用方法F，合并1-异氰酰基-3-(三氟甲基)苯(0.170g， 0.911mmol)和实施例A19(0.250g，0.759mmol)，得到1-(5-(1-乙基-7-(甲基 氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟-4-甲基苯 基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)脲，将其转化为甲磺酸盐(0.130g，33.2％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.49(s，1H)，8.76(brs，1H)，8.36(brs，1H)， 8.09(m，2H)，7.78(s，1H)，7.49(m，2H)，7.31(m，1H)，7.21(d，J＝12.5Hz， 1H)，6.38(s，1H)，4.74(d，J＝15Hz，1H)，4.48(d，J＝15Hz，1H)，3.87(m，2H)， 2.92(d，J＝6Hz，3H)，2.32(s，3H)，2.05(s，3H)，1.21(t，J＝6Hz，3H)； MS(ESI)m/z：517.0(M+H+)。
实施例39：利用通用方法B，合并实施例B1的氨甲酸酯(0.500g， 1.670mmol)和实施例A10(0.557g，1.670mmol)，得到1-(3-叔丁基-1-苯基 -1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶 并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(0.64g，66.7％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ9.01(s，1H)，8.89(s，1H)，8.23(s，1H)，8.09(d，J＝8Hz，1H)，7.52 (m，4H)，7.41(m，1H)，7.19(d，J＝12Hz，1H)，6.37(s，1H)，4.70(d，J＝15Hz， 1H)，4.52(d，J＝15Hz，1H)，3.28(s，3H)，2.51(s，3H)，2.06(s，3H)，1.24(s， 9H)；MS(ESI)m/z：575.2(M+H+)。
利用类似于实施例A2的工艺，将硫化物用mCPBA氧化为砜，然后 用甲基胺处理，得到1-(3-叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1- 甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲 (0.163g，66％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.98(s，1H)，8.85(brs， 1H)，8.05(d，J＝8.0Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.52(m，3H)，7.42(m，1H)，7.18(d， J＝12Hz，1H)，7.02(m，1H)，6.38(s，1H)，4.53(d，J＝14Hz，1H)，4.33(d，J＝ 14Hz，1H)，3.25(brs，3H)，2.78(d，J＝5Hz，3H)，2.04(s，3H)，1.25(s，9H)； MS(ESI)m/z：558.3(M+H+)。
实施例40：利用通用方法C，合并实施例B2的TROC氨甲酸酯(0.400g， 0.906mmol)和实施例A10(0.302g，0.906mmol)，得到1-(3-叔丁基-1-(喹啉-6- 基)-1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧 啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(0.49g，86％收率)。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ9.03(s，1H)，8.96(m，2H)，8.48(brd，J＝9Hz，1H)，8.23(s，1H)， 8.18(s，1H)，8.15(m，1H)，8.09(d，J＝8Hz，1H)，7.93(dd，J＝9，2，5Hz，1H)， 7.60(dd，J＝9，5Hz，1H)，7.18(d，J＝12Hz，1H)，6.45(s，1H)，4.70(d， J＝15Hz，1H)，4.52(d，J＝15Hz，1H)，3.28(s，3H)，2.51(s，3H)，2.06(s，3H)， 1.28(s，9H)；MS(ESI)m/z：626.3.3(M+H+)。
利用类似于实施例A2的工艺，将硫化物用mCPBA氧化为砜，然后 用甲基胺处理，得到1-(3-叔丁基-1-(喹啉-6-基)-1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲 基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯 基)脲。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.95(m，2H)，8.48(m，1H)，8.15 (m，1H)，8.04(d，J＝8Hz，1H)，7.92(m，2H)，7.60(dd，J＝8，5Hz，1H)，7.17 (d，J＝12Hz，1H)，7.02(m，1H)，6.46(s，1H)，4.53(d，J＝14Hz，1H)，4.33(d， J＝14Hz，1H)，3.25(brs，3H)，2.78(d，J＝5Hz，3H)，2.04(s，3H)，1.28(s， 9H)；MS (ESI)m/z：609.2(M+H+)。
实施例41：利用通用方法F，合并1-氯-4-异氰酰基-2-(三氟甲基)苯 (0.191g，0.861mmol)和实施例A1(0.250g，0.783mmol)，得到1-(4-氯-3-(三 氟甲基)苯基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧 啶-3(4H)-基)苯基)脲{0.29g，69％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 9.53(s，1H)，8.77(brs，1H)，8.26(s，1H))，8.13(m，2H)，7.61(d，J＝9Hz，1H)， 7.55(dd，J＝9，2.5Hz，1H)，7.30(dd，J＝12，9Hz，1H)，7.04(m，1H)，4.74(s， 2H)，3.28(s，3H)，2.51(s，3H)；MS(ESI)m/z：541.0(M+H+)
利用类似于实施例A2的工艺，将1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(2-氟 -5-(1-甲基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲 用mCPBA氧化为砜，然后用甲基胺处理，得到1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯 基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)脲(0.045g，16％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6：δ 9.55(s，1H)，8.77(s，1H)，8.12(d，J＝2.5Hz，1H))，8.09(dd，J＝8，2.5Hz，1H)， 7.96(brs，1H)，7.59(m，2H)，7.28(dd，J＝12，9Hz，1H)，7.01(m，2H)，5.74(s， 1H)，4.58(s，2H)，3.28(brs，3H)，2.78(d，J＝5Hz，3H)；MS(ESI)m/z：524.0 (M+H+)
实施例42：利用通用方法F，合并1-氯-4-异氰酰基-2-(三氟甲基)苯 (0.159g，0.720mmol)和实施例A9(0.250g，0.720mmol)，得到1-(4-氯-3-(三 氟甲基)苯基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d] 嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(0.37g，90％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 9.53(s，1H)，8.77(brs，1H))，8.26(s，1H))，8.11(d，J＝2.5Hz，1H)，8.09(dd，J ＝9，2.5Hz，1H)，7.61(d，J＝9Hz，1H)，7.56(dd，J＝9，2.5Hz，1H)，7.29(dd， J＝12，9Hz，1H)，7.03(m，1H)，4.97(m，1H)，4.68(s，2H)，2.51(s，3H)，1.47d， J＝6Hz，6H)；MS(ESI)m/z：569.0(M+H+)。
利用类似于实施例A2的工艺，用mCPBA氧化为砜，然后与甲基胺 反应，得到1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基-7-(甲基氨基)-2- 氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(0.265g，74％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6：)δ8.12(s，1H)，8.03(dd，J＝8，2.5Hz，1H)，7.96 (brs，1H)，7.58(brs，1H)，7.25(dd，J＝12，9Hz，1H)，6.97(m，2H)，4.98(m， 1H)，4.52(s，2H)，2.78(brs 3H)，1.47(d，J＝6Hz，6H)；MS(ESI)m/z：552.2 (M+H+)。
实施例43：利用通用方法B，合并3-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-5-胺的氨 甲酸酯(0.244g，0.861mmol)和实施例A1(0.250g，0.783mmol)，得到1-(2-氟 -5-(1-甲基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯 基)-3-(3-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)： δ9.06(brs，1H)，8.92(s，1H)，8.25s，1H)，8.16(dd，J＝8，2.5Hz，1H))，7.51 (m，3H)，7.42(m，2H)，7.27(dd，J＝11，8Hz，1H)，7.00(m，1H)，6.33(s，1H)， 4.72(s，2H)，3.28(s，3H)，2.86(m，1H)，2.52(s，3H)，1.20(d，J＝6Hz，6H)； MS(ESI)m/z：547.0(M+H+)。
利用类似于实施例A2的工艺，将硫化物用mCPBA氧化为砜，用甲 基胺处理，得到1-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并 [4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(3-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲(74％收 率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.05(s，1H)，8.13(dd，J＝8，2.5Hz， 1H)，7.96(brs，1H)，7.52(m，4H)，7.42(m，1H)，7.25(dd，J＝12，9Hz，1H)， 7.00(m，2H)，6.34(s，1H)，4.56(s，2H)，3.25(brs，3H)，2.86(m，1H)，2.78(d， J＝5Hz，3H)，1.20(d，J＝6Hz，6H)；MS(ESI)m/z：530.2(M+H+)。
实施例44：利用通用方法B，合并实施例B6的氨甲酸酯(0.375g， 1.696mmol)和实施例A15(0.400g，1.131mmol)，得到1-(1-叔丁基-1H-吡唑 -4-基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)脲(0.32g，55％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.77 (brs，1H)，8.73(brs，1H))，8.36(d，J＝9Hz，1H))，8.25(s，1H)，7.81(s，1H)， 7.62(d，J＝11Hz，1H)，7.40(s，1H)，4.72(d，J＝14Hz，1H)，4.56(d，J＝14Hz， 1H)，3.31(s，3H)，2.52(s，3H)，1.46(s，9H)；MS(ESI)m/z：519.2(M+H+)。
利用类似于实施例A2的工艺，将硫化物用mCPBA氧化为砜，然后 用甲基胺处理，得到1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基 -7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲 (0.448mmol，73％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.76(s，1H)，8.72 (brs，1H)，8.32(d，J＝8.5Hz，1H)，7.96(brs，1H)，7.82(s，1H)，7.60(d，J＝ 11Hz，1H)，7.41(s，1H)，7.04m，1H)，6.34s，1H)，4.56(d，J＝14Hz，1H)， 4.41(d，J＝14Hz，1H)，3.25(brs，3H)，2.78(d，J＝5Hz，3H)，1.47(m，9H)； MS(ESI)m/z：502.2(M+H+)。
实施例45：利用通用方法F，合并1-异氰酰基-3-(三氟甲基)苯(0.122g， 0.652mmol)和实施例A14(0.2g，0.544mmol)，得到1-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲 硫基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(3-(三氟甲 基)苯基)脲(0.2g，66％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.46(s，1H)， 8.88brs，1H))，8.36(d，J＝9Hz，1H)，8.25(s，1H)，8.09(s，1H)，7.66(d，J＝ 11Hz，1H)，7.50(m，2H)，7.33(m，1H)，4.78(d，J＝14Hz，1H)，4.54(d，J＝ 14Hz，1H)，3.97(m，2H)，2.52(s，3H)，1.66(d，J＝6Hz，3H)；MS(ESI)m/z： 555.0(M+H+)。
利用类似于实施例A2的工艺，将硫化物用mCPBA氧化为砜，然后 用甲基胺处理，得到1-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并 [4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)脲(0.279mmol，88％ 收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.51(s，1H)，8.32(d，J＝8.0Hz， 1H)，8.06(s，1H)，7.96(brs，1H)，7.87(s，1H)，7.64(d，J＝11Hz，1H)，7.50(m， 2H)，7.33(m，1H)，7.02(m，1H)，4.60(d，J＝14Hz，1H)，4.40(d，J＝14Hz， 1H)，3.95(m，2H)，2.78(d，J＝5Hz，3H)，1.15(t，3H)；MS(ESI)m/z：538.3 (M+H+)。
实施例46：利用通用方法D，合并实施例B8(80mg，0.437mmol)、三 乙胺(51mg，0.502mmol)、实施例A17(150mg，0.437mmol)和DPPA(138mg， 0.502mmol)，得到1-(1-叔丁基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-5-(1-异丙基 -7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-4-甲基苯基)脲 (35mg，15％收率)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ1.44(t，6H)，1.52(s，9 H)，1.99(s，3H)，2.29(s，3H)，2.76(m，3H)，4.31(hep，1H)，4.39(d of d，2 H)，6.18(s，1H)，6.60(br.s，1H)，7.14(d，1H)，7.42(s，1H)，7.73(s，1H)， 8.02(d，1H)，8.13(s，1H)，8.52(br.s，1H)；MS(ESI)m/z：523.2(M+H+)。
实施例47：利用通用方法B，合并实施例B9的氨甲酸酯(0.078g， 0.332mmol)和实施例A21(0.070g，0.221mmol)，得到1-(2-氟-4-甲基-5-(1- 甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯 基)-3-(3-(三氟甲基)异噁唑-5-基)脲(0.064g，59％)，为浅黄色固体。1H NMR (400MHz，DMSO-d6)：δ11.00(s，1H)，8.88(d，J＝1.2Hz，1H)，7.94-7.92(m， 2H)，7.26(d，J＝11.6Hz，1H)，7.02(m，1H)，6.48(s，1H)，4.56(d，J＝14.0 Hz，1H)，4.36(d，J＝14.0Hz，1H)，3.24(s，3H)，2.79(d，J＝4.8Hz，3H)，2.08 (s，3H)；MS(ESI)m/z：495.0(M+H+)。
实施例48：利用通用方法B，合并实施例B9(0.066g，0.281mmol)和实 施例A27(0.070g，0.187mmol)，得到1-(5-(7-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)-1- 甲基-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟-4-甲基苯 基)-3-(3-(三氟甲基)异噁唑-5-基)脲(0.039g，38％)，为浅黄色固体。使其与 MsOH(1.0eq.)反应转化为相应的甲磺酸盐。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)： δ8.97(s，1H)，8.00(s，1H)，7.93(d，J＝7.6Hz，1H)，7.29-7.25(m，2H)，6.47 (s，1H)，4.60(d，J＝14.0Hz，1H)，4.40(d，J＝14.0Hz，1H)，3.56(m，2H)， 3.26(s，3H)，3.15(m，2H)，2.74(s，6H)，2.31(s，3H)，2.09(s，3H)；MS(ESI) m/z：552.2(M+H+)。
实施例49：利用通用方法B，合并实施例B5的氨甲酸酯(60mg， 0.25mmol)和实施例A26(80mg，0.25mmol)，得到1-(3-叔丁基-1-甲基-1H- 吡唑-5-基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -3(4H)-基)-2-氟苯基)脲(43mg，34％收率).1H NMR(400MHz，DMSO-d6)： δ8.94(s，1H)，8.86(brs，1H)，8.10(dd，J＝2.4，和7.2Hz，1H)，7.74(s，1H)， 7.26(dd，J＝8.8，和11.2Hz，1H)，6.96(m，1H)，6.41(q，J＝4.8Hz，1H)，6.08 (s，1H)，6.02(s，1H)，4.56(s，2H)，3.78(q，J＝7.2Hz，2H)，3.60(s，3H)，2.75 (q，J＝4.8Hz，2H)，1.18(s，9H)，1.17(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESI)m/z： 495.2(M+H+)。
实施例50：利用通用方法C，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(80mg， 0.25mmol)和实施例A26(80mg，0.25mmol)，得到1-(3-叔丁基异噁唑-5- 基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)- 基)-2-氟苯基)脲(31mg，25％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ10.4 (s，1H)，8.79(brs，1H)，8.06(dd，J＝2.8，和7.2Hz，1H)，7.75(s，1H)，7.27(dd， J＝8.8，和10.8Hz，1H)，7.02(m，1H)，6.40(q，J＝4.4Hz，1H)，6.06(s，1H)， 6.02(s，1H)，4.57(s，2H)，3.78(q，J＝7.2Hz，2H)，2.75(q，J＝4.4Hz，2H)， 1.23(s，9H)，1.18(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESI)m/z：482.2(M+H+)。
实施例51：利用通用方法D，在三乙胺(0.09g，0.9mmol)和DPPA (0.125g，0.45mmol)的存在下合并实施例B7(0.051g，0.3mmol)和实施例A26 (0.096g，0.3mmol)，得到1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨 基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲，为白色固体 (0.028g，19％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.73(s，1H)，8.55(s， 1H)，8.13(dd，J＝7.6Hz，2.8Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.76(s，1H)，7.41(s，1H)， 7.23(dd，J＝11.2Hz，10.8Hz，1H)，6.96-6.92(m，1H)，6.41-6.38(m，1H)， 6.03(s，1H)，4.57(s，2H)，3.82-3.77(m，2H)，2.77(d，J＝4.4Hz，3H)，1.49(s， 9H)，1.19(t，J＝6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：481.2(M+H+)。
实施例52：利用通用方法B，合并实施例B9(0.066g，0.281mmol)和实 施例A25(0.070g，0.187mmol)，得到1-(5-(7-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)-1- 甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟-4-甲基苯 基)-3-(3-(三氟甲基)异噁唑-5-基)脲(0.0304g，29％)，为白色固体。使其与 MsOH(1.0eq.)反应转化为相应的甲磺酸盐。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)： δ11.08(s，1H)，8.99(s，1H)，7.95(d，J＝7.6Hz，1H)，7.83(s，1H)，7.28(d，J ＝12.0Hz，1H)，6.46(s，1H)，6.23(s，1H)，4.67(d，J＝14.4Hz，1H)，4.47(d，J ＝14.4Hz，1H)，3.66(m，2H)，3.28-3.23(m，5H)，2.84(s，6H)，2.33(s，3H)， 2.07(s，3H)；MS(ESI)m/z：551.2(M+H+)。
实施例53：利用通用方法B，合并5-叔丁基-1，3，4-噻二唑-2-基氨甲酸 丙-1-烯-2-基酯(55.9mg，0.232mmol)和实施例A3(70mg，0.232mmol)，直接 经过反相色谱法纯化(MeCN(w/0，1％TFA)/H2O(w/0.1％TFA))，得到 1-(5-叔丁基-1，3，4-噻二唑-2-基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2- 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(37mg，33％收率)，为灰白色固体。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.04(brs，1H)，8.14-8.12(m，1H)，8.03(s， 1H)，7.38-7.33(m，1H)，7.11-7.07(m，1H)，4.66(s，2H)，3.31(brs，3H)，2.90 (brs，3H)，1.37(s，9H)；MS(ESI)m/z：486.0(M+H+)。
实施例54：利用通用方法F，合并1-异氰酰基萘(0.05g，0.3mmol)和实 施例A19(0.1g，0.3mmol)，得到1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢 吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟-4-甲基苯基)-3-(萘-1-基)脲，为白色固体 (0.032g，21％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.19(s，1H)，9.12(s， 1H)，8.19(t，J＝8.0Hz，2H)，8.08(d，J＝7.6Hz，1H)，7.98(d，J＝8.0Hz， 1H)，7.78(s，1H)，7.69-7.58(m，3H)，7.50(t，J＝8.0Hz，1H)，7.27(d，J＝12.0 Hz，1H)，6.47-6.44(m，1H)，6.06(s，1H)，4.66(d，J＝14.0Hz，1H)，4.42(d，J ＝14.0Hz，1H)，3.87-3.78(m，2H)，2.81(d，J＝4.8Hz，3H)，2.10(s，3H)，1.21 (t，J＝6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：499.2(M+H+)。
实施例55：利用通用方法F，合并1-异氰酰基萘(0.05g，0.31mmol)和 实施例A26(0.1g，0.31mmol)，得到1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2- 二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(萘-1-基)脲，为白色固体 (0.061g，40％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6：δ9.24(s，1H)，9.19(s， 1H)，8.26(dd，J＝7.2Hz，2.8Hz，1H)，8.21(d，J＝8.4Hz，1H)，8.08(dd，J＝ 11.6Hz，0.8Hz，1H)，7.99(d，J＝7.6Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.71-7.58(m，4H)， 7.52(t，J＝8.0Hz，1H)，7.05-7.01(m，1H)，6.46(q，J＝4.8Hz，1H)，6.08(s， 1H)，4.64(s，2H)，3.84(q，J＝6.8Hz，2H)，2.81(d，J＝4.8Hz，3H)，1.24(t，J ＝6.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：485.0(M+H+)。
实施例56：利用通用方法F，合并1-异氰酰基萘(0.05g，0.3mmol)和实 施例A32(0.105g，0.3mmol)，得到1-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代 -1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(萘-1-基)脲，为白色固 体(0.059g，38％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.33(brs，2H)，8.41 (d，J＝8.0Hz，1H)，8.20(d，J＝8.0Hz，1H)，8.06(d，J＝6.8Hz，1H)，7.98(d， J＝7.6Hz，1H)，7.78(s，1H)，7.71-7.58(m，4H)，7.51(t，J＝8.0Hz，1H)，6.46 (q，J＝4.8Hz，1H)，6.08(s，1H)，4.65(d，J＝13.6Hz，1H)，4.48(d，J＝13.6 Hz，1H)，3.84-3.80(m，2H)，2.81(d，J＝4.8Hz，3H)，1.21(t，J＝6.8Hz，3H)； MS(ESI)m/z：519.0(M+H+)。
实施例57：利用通用方法D，在DPPA(55μL，0.21mmol)和三乙胺 (30μL，0.21mmol)的存在下合并实施例B10(70mg，0.19mmol)和实施例A3 (58mg，0.19mmol)，得到4-(2-叔丁基-5-(3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2- 氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲基)嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲 酸叔丁基酯(32mg，25％收率)，将其用HCl(4.0M二噁烷溶液)处理，得到 1-(2-叔丁基-4-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧 代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲盐酸盐(24mg，88％收率)。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6，major isomer)：δ9.60(brs，1H)，9.54(brs， 2H)，8.62(s，1H)，8.54(brs，1H)，8.21(dd，J＝2.4，和7.2Hz，1H)，8.18(s，1H)， 7.41(dd，J＝9.2，和10.8Hz，1H)，7.13(m，1H)，4.76(s，2H)，4.07(brm，4H)， 3.46(brs，3H)，3.35(brm，4H)，3.03(brs，3H)，1.45(s，9H)；MS(ESI)m/z： 564.3(M+H+)。
实施例58：利用通用方法F，合并1-异氰酰基-3-(三氟甲基)苯(0.05g， 0.267mmol)和实施例A28(0.088g，0.267mmol)，得到1-(2-氟-5-(1-异丙基 -7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(3-(三 氟甲基)苯基)脲(0.11g，80％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.48(s，1H)， 8.76(s，1H)，8.09(m，2H)，7.82(s，1H)，7.56(m，2H)，7.38(m，1H)，7.29(m， 1H)，7.0(m，1H)，6.42(m，1H)，6.22(s，1H)，4.55(s，2H)，4.37(m，1H)，2.81 (d，J＝5Hz，3H)，1.52(d，J＝6Hz，6H)；MS(ESI)m/z：517.0(M+H+)。
实施例59：利用通用方法F，合并1-氯-4-异氰酰基-2-(三氟甲基)苯 (70mg，0.32mmol)和实施例A4(95mg，0.32mmol)，得到1-(4-氯-3-(三氟甲 基)苯基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -3(4H)-基)苯基)脲(91mg，64％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ 9.58(s，1H)，8.80(s，1H)，8.18(d，J＝2.0Hz，1H)，8.13(dd，J＝2.8，和7.6Hz， 1H)，7.81(s，1H)，7.68(d，J＝8.4Hz，1H)，7.63(dd，J＝2.4，和8.4Hz，1H)， 7.33(dd，J＝8.8，和10.8Hz，1H)，7.06(m，1H)，6.48(q，J＝4.8Hz，1H)，6.03 (s，1H)，4.66(s，2H)，3.25(s，3H)，2.82(d，J＝4.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z： 523.0(M+H+)。
实施例60：向充分冷却至0℃的搅拌着的实施例A26(100mg， 0.317mmol)的CH2Cl2(3.036ml)混悬液迅速加入20％COCl2的PhMe溶液 (0.184ml，0.349mmol)。在0℃下10分钟后，将反应物用三乙胺(0.133ml， 0.951mmol)处理。在0℃下另外10分钟后，加入环己基胺(0.040ml， 0.349mmol)，将反应物于室温搅拌72小时。粗反应混合物直接经过快速柱 色谱法纯化(100％CH2Cl2至30％THF/CH2Cl2)。仍然不纯的产物再次经 过反相色谱法纯化(MeCN(w/0.1％TFA)/H2O(w/0.1％TFA))，得到白色 固体。将所得TFA盐溶于THF，用MP-碳酸树脂转化为游离碱，得到1- 环己基-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶 -3(4H)-基)-2-氟苯基)脲(15mg，12％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ9.23(brs，1H)，8.05(s，1H)，7.02-6.97(m，1H)，6.86(s，1H)， 6，73-6.68(m，2H)，6.49-6.46(m，1H)，4.68(s，2H)，3.89(q，J＝6.8Hz，2H)， 3.57(m，1H)，1.83-1.77(m，2H)，1.64-1.60(m，2H)，1.55-1.47(m，1H)， 1.34-1.17(m，8H)；MS(ESI)m/z：441.2(M+H+)。
实施例61：利用通用方法B，合并5-叔丁基异噁唑-3-胺的氨甲酸酯 (58mg，0.26mmol)和实施例A5(0.080g，0.26mmol)，得到1-(5-叔丁基异噁唑 -3-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(8-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧代-7，8-二氢蝶啶-6-基)苯 基)脲(41mg，34％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.74和8.57(s，1 H)，8.10(d，J＝8.4Hz，1H)，8.00(br m，1H)，7.24-7.12(m，2H)，6.44(s，1 H)，3.57和3.50(s，3H)，2.92(br s，3H)，2.28(s，3H)，1.26(s，9H)；MS(ESI) m/z：481.2(M+H+)。
实施例62：利用通用方法F，在吡啶(51μL，0.63mmol)的存在下合并 1-氯-4-异氰酰基-2-(三氟甲基)苯(70mg，0.32mmol)和实施例A4(95mg， 0.32mmol)，得到1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨 基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(93mg，56％收率)。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.58(s，1H)，8.80(s，1H)，8.18(d，J＝2.0 Hz，1H)，8.13(dd，J＝2.8，和7.6Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.68(d，J＝8.4Hz， 1H)，7.63(dd，J＝2.4，和8.4Hz，1H)，7.33(dd，J＝8.8，和10.8Hz，1H)，7.06 (m，1H)，6.48(q，J＝4.8Hz，1H)，6.03(s，1H)，4.66(s，2H)，3.25(s，3H)，2.82 (d，J＝4.8Hz，3H)；MS(ESI)m/z：523.0(M+H+)。
实施例63：利用通用方法F，使实施例A28(100mg，0.304mmol)、异 氰酸环己基酯(0.078mL，0.611mmol)和吡啶(0.493mL，0.611mmol)反应，得 到1-环己基-3-(2-氟-5-(1-异丙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d] 嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(30mg，22％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)：δ8.27(d，J＝2.8Hz，1H)，8.11(dd，J＝2.8和7.6Hz，1H)，7.79 (s，1H)，7.19(dd，J＝8.8和11.2Hz，1H)，6.86(s，1H)，6.85-6.81(m，1H)， 6.66-6.64(m，1H)，6.38(brs，1H)，4.55(s，2H)，4.39(septet，J＝6.8Hz，1H)， 3.47-3.39(m，1H)，2.85(d，J＝4.4Hz，3H)，1.79-1.75(m，2H)，1.66-1.58(m， 2H)，1.52-1.46(m，1H)，1.46(d，J＝6.8Hz，6H)，1.31-1.07(m，5H)；MS(ESI) m/z：455.3(M+H+)。
实施例64：利用通用方法F，使实施例A4(100mg，0.332mmol)和异氰 酸环己基酯(0.085ml，0.664mmol)反应，得到1-环己基-3-(2-氟-5-(1-甲基 -7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲(18mg， 13％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.22(d，J＝1.6 Hz，1H)，8.08(dd，J＝2.0和6.8Hz，1H)，7.70(s，1H)，7.14(dd，J＝8.8和 11.2Hz，1H)，6.82-6.78(m，2H)，6.60-6.58(m，1H)，6.02(brs，1H)，4.54(s， 2H)，3.38(brm，1H)，3.14(s，3H)，2.76(d，J＝4.4Hz，3H)，1.74-1.67(m，2H)， 1.63-1.56(m，2H)，1.47-1.42(m，1H)，1.27-1.08(m，5H)；MS(ESI)m/z： 427.2(M+H+)。
实施例65：利用通用方法A，合并实施例B3的TROC氨甲酸酯(75mg， 0.238mmol)和实施例A29(80mg，0.233mmol)，得到1-(5-(1-叔丁基-7-(甲基 氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(3-叔丁基 异噁唑-5-基)脲(50mg，41％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ10.35 (s，1H)，8.77(s，1H)，8.00(dd，J＝7.6，2.4Hz，1H)，7.79(s，1H)，7.25(m，1 H)，6.94(m，1H)，6.40(m，1H)，6.35(s，1H)，6.07(s，1H)，4.38(s，2H)， 2.75(d，J＝4.8Hz，1H)，1.57(s，9H)，1.23(s，9H)；MS(ESI)m/z：510.2 (M+H+)。
实施例66：利用通用方法F，使1-异氰酰基-3-(三氟甲基)苯(0.050g， 0.267mmol)与实施例A20(0.093g，0.267mmol)在亚甲基氯中反应，得到 1-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)- 基)-2-氟苯基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)脲(0.022g，15％收率)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ11.85(s，1H)，8.27(s，1H)，8.12(s，1H)，7.86(d，J＝7.5Hz， 1H)，7.60(t，J＝8.5Hz，1H)，7.43(d，J＝8Hz，1H)，7.37(d，J＝11Hz，1H)，6.94 (m，2H)，5.58(s，2H)，4.82(d，J＝14Hz，1H)，4.68(d，J＝14Hz，1H)，4.00(q， J＝6Hz，2H)，3.51(s，3H)，1.24(t，J＝6Hz，3H)；MS(ESI)m/z：537.0 (M+H+)。
实施例67：利用通用方法F，使1-异氰酰基-3-(三氟甲基)苯(0.05g， 0.267mmol)与实施例A20(0.093g，0.266mmol)在甲基叔丁基醚(2ml)中反应 2小时，得到1-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d] 嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)脲(0.025g，17％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.46(s，1H)，8.56(s，1H)，8.26(d，J＝8Hz， 1H)，8.04(s，1H)，7.72(s，1H)，7.61(d，J＝10.5Hz，1H)，7.49(m，2H)，7.32(m， 1H)，6.40(m，1H)，6.02(s，1H)，4.61(d，J＝14Hz，1H)，4.40(d，J＝14Hz，1H)， 3.77(m，2H)，2.75(d，J＝5Hz，3H)，1.15(t，J＝6Hz，3H)；MS(ESI)m/z：537.0 (M+H+)。
实施例68：利用通用方法D，在二噁烷(5ml)中将2，3-二氟苯甲酸 (0.068g，0.430mmol)和实施例A20(0.100g，0.287mmol)于室温搅拌1小时， 然后在80℃下加热另外1小时，得到1-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧 代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(2，3-二氟苯基)脲 (0.015g，10％收率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.26(brs，1H)，8.31 (d，J＝9Hz，1H)，7.96(m，1H)，7.74(s，1H)，7.65(d，J＝11Hz，1H)，7.17-7.0(m， 2H)，6.47(brs，1H)，6.04(s，1H)，4.61(d，J＝13Hz，1H)，4.43(d，J＝13Hz，1H)， 3.81(m，2H)，2.76(d，J＝5Hz，3H)，1.17(t，J＝6Hz，3H)；MS(ESI)m/z：505.0 (M+H+)。
实施例69：利用通用方法A，合并实施例B1和实施例A3，得到1-(3- 叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2- 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲。
实施例70：利用通用方法A和与实施例A2相同的工艺，合并实施例 B5和实施例A3，得到1-(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-甲基 -7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲。
实施例71：利用通用方法A，合并实施例B1和实施例A30，得到 1-(5-(7-氨基-1-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯 基)-3-(3-叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲。
实施例72：利用通用方法A，合并实施例B5和实施例A30，得到1-(5-(7- 氨基-1-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(3- 叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)脲。
实施例73：利用通用方法A，合并实施例B1和实施例A4，得到1-(3- 叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2- 二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲。
实施例74：利用通用方法A，合并实施例B5和实施例A4，得到1-(3- 叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2- 二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲。
实施例75：利用通用方法A，合并实施例B1和实施例A31，得到2- 氨基-6-(5-(3-叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基氨基)-4-氟-2-甲基苯基)-8-甲基蝶 啶-7(8H)-酮。
实施例76：利用通用方法A，合并实施例B5和实施例A31，得到2- 氨基-6-(5-(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-4-氟-2-甲基苯基)-8-甲基蝶 啶-7(8H)-酮。
实施例77：利用通用方法A，合并实施例B1和实施例A5，得到1-(3- 叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(8-甲基-2-(甲基氨基)-7-氧 代-7，8-二氢蝶啶-6-基)苯基)脲。
实施例78：利用通用方法A，合并实施例A30和实施例B1，得到 1-(5-(7-氨基-1-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯 基)-3-(3-叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲。
实施例79：利用通用方法A，合并实施例B1和实施例A4，得到1-(3- 叔丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2- 二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲。
通过流程1-12、通用方法A-G、上述实施例和WO 2006/071940中所 述的方法制备下列实施例。
  实施例   80   1-(3-叔丁基-4-甲基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   81   1-(3-叔丁基-4-甲基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   82   1-(3-叔丁基-4-甲基异噁唑-5-基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   83   1-(3-叔丁基-4-甲基异噁唑-5-基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   84   1-(3-叔丁基-4-甲基异噁唑-5-基)-3-(2，4-二氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   85   1-(3-叔丁基-4-甲基异噁唑-5-基)-3-(2，4-二氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   86   1-(3-叔丁基-4-氟异噁唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   87   1-(3-叔丁基-4-氟异噁唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   88   1-(3-叔丁基-4-氯异噁唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   89   1-(3-叔丁基-4-氯异噁唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   90   1-(3-叔丁基-4-氟异噁唑-5-基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-   二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲   91   1-(3-叔丁基-4-氯异噁唑-5-基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-   二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲   92   1-(1-叔丁基-1H-咪唑-4-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-   氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲
 93   1-(1-叔丁基-1H-咪唑-4-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-   氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  94   1-(1-叔丁基-1H-咪唑-4-基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧   代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  95   1-(1-叔丁基-1H-咪唑-4-基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧   代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  96   1-(1-叔丁基-1H-咪唑-4-基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二   氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲  97   1-(1-叔丁基-1H-咪唑-4-基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二   氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲  98   1-(1-叔丁基-5-甲基-1H-咪唑-4-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基   氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  99   1-(1-叔丁基-5-甲基-1H-咪唑-4-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基   氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  100   1-(1-叔丁基-5-甲基-1H-咪唑-4-基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  101   1-(1-叔丁基-5-甲基-1H-咪唑-4-基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  102   1-(1-叔丁基-2-甲基-1H-咪唑-4-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基   氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  103   1-(1-叔丁基-2-甲基-1H-咪唑-4-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基   氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  104   1-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶   -3(4H)-基)苯基)-3-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)脲  105   1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-   基)-2-氟苯基)-3-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)脲  106   1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-   基)-2-氟苯基)-3-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)脲
  107   1-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]   嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)脲   108   1-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]   嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)脲   109   1-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧   啶-3(4H)-基)苯基)-3-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)脲   110   1-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧   啶-3(4H)-基)苯基)-3-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)脲   111   1-(2-氟-5-(1-(2-羟基乙基)-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并   [4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-4-甲基苯基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)脲   112   1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-   基)-2-氟苯基)-3-(2-氟-5-(三氟甲基)苯基)脲   113   1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-   基)-2-氟苯基)-3-(2-氟-5-(三氟甲基)苯基)脲   114   1-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]   嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(2-氟-5-(三氟甲基)苯基)脲   115   1-(5-叔丁基-1，3，4-噻二唑-2-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   116   1-(4-叔丁基噻吩-2-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代   -1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   117   1-(4-叔丁基-3-甲基噻吩-2-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   118   1-(4-叔丁基-3-氯噻吩-2-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-   氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   119   1-(4-叔丁基-3-氟噻吩-2-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-   氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   120   1-(1-叔丁基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基   氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲
  121   1-(1-叔丁基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   122   1-(5-(7-氨基-1-甲基-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-   氟-4-甲基苯基)-3-(3-叔丁基异噁唑-5-基)脲   123   1-(5-(7-氨基-1-乙基-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-   氟苯基)-3-(3-叔丁基异噁唑-5-基)脲   124   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-   二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   125   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(5-(1-环戊基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二   氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲   126   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-(2-羟基乙基)-7-(甲基氨基)-2-   氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-4-甲基苯基)脲   127   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-(2-羟基乙基)-7-(甲基氨基)-2-   氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   128   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-(2-羟基乙基)-7-(甲基氨基)-2-   氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   129   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-   二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲   130   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢   嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2，4-二氟苯基)脲   131   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-   二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲   132   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢   吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2，4-二氟苯基)脲   133   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(5-(1-环戊基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二   氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲   134   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(5-(1-环戊基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二   氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲
  135   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2，4-二氟-5-(7-(甲基氨基)-2-氧代-1-苯基   -1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   136   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2，4-二氟-5-(7-(甲基氨基)-2-氧代-1-苯基   -1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   137   1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-   基)-2-氟苯基)-3-(3-异丙基异噁唑-5-基)脲   138   1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-   基)-2-氟苯基)-3-(3-异丙基异噁唑-5-基)脲   139   1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-   基)-2-氟-4-甲基苯基)-3-(3-异丙基异噁唑-5-基)脲   140   1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-   基)-2-氟-4-甲基苯基)-3-(3-异丙基异噁唑-5-基)脲   141   1-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶   -3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(3-异丙基异噁唑-5-基)脲   142   1-(4-氯-5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶   -3(4H)-基)-2-氟苯基)-3-(3-异丙基异噁唑-5-基)脲   143   1-(1-叔丁基-2-甲基-1H-吡咯-3-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基   氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   144   1-(1-叔丁基-2-甲基-1H-吡咯-3-基)-3-(4-氯-2-氟-5-(1-甲基-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   145   1-(4-叔丁基呋喃-2-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代   -1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   146   1-(2-叔丁基噁唑-5-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代   -1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲   147   1-环己基-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧   啶-3(4H)-基)-2-氟-4-甲基苯基)脲   148   1-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]   嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-((1R，2R)-2-甲基环己基)脲
 149   1-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-   基)-2-氟苯基)-3-((1S，2S)-2-甲基环己基)脲  150   1-环己基-3-(5-(1-环戊基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]   嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲  151   1-(二环[2.2.1]庚烷-2-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧   代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  152   1-(二环[2.2.1]庚-5-烯-2-基)-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-   氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  153   1-环丙基-3-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡   啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  154   1-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]   嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-异丙基脲  155   1-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]   嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(1-(吡啶-3-基)乙基)脲  156   (R)-1-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并   [4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(1-苯基乙基)脲  157   (S)-1-(2-氟-4-甲基-5-(1-甲基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并   [4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(1-苯基乙基)脲  158   1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-5-(1-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-   基)-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)   脲  159   1-环己基-3-(2-氟-5-(1-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-7-(甲基氨基)-2-氧代   -1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  160   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-7-(甲   基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  161   1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-5-(1-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-   基)-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-4-甲   基苯基)脲
 162   1-环己基-3-(2-氟-5-(1-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-7-(甲基氨基)-2-氧代   -1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-4-甲基苯基)脲  163   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-7-(甲   基氨基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)-4-甲基苯基)脲  164   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(7-(甲基氨基)-2-氧代-1-(四氢呋喃   -3-基)-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  165   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(7-(甲基氨基)-2-氧代-1-(吡咯烷   -3-基)-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  166   1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-5-(7-(甲基氨基)-2-氧代-1-(哌啶   -4-基)-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  167   1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-5-(7-(甲基氨基)-2-氧代-1-(四氢呋   喃-3-基)-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  168   1-(1-叔丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(2-氟-5-(7-(甲基氨基)-2-氧代-1-(四氢   -2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  169   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-(3-羟基环戊基)-7-(甲基氨   基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  170   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(2-氟-5-(1-(3-氟苯基)-7-(甲基氨基)-2-氧   代-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-3(4H)-基)苯基)脲  171   1-(2-氟-5-(1-(3-氟苯基)-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]   嘧啶-3(4H)-基)苯基)-3-(3-异丙基异噁唑-5-基)脲  172   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(5-(7-(1，3-二甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-1-甲   基-2-氧代-1，2-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟苯基)脲  173   1-(3-(7-(1，3-二甲基-1H-吡唑-5-基氨基)-1-甲基-2-氧代-1，2-二氢嘧啶   并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-4-甲基苯基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)脲  174   1-(3-叔丁基异噁唑-5-基)-3-(5-(1-乙基-7-(甲基氨基)-2-氧代-1，2-二氢   嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3(4H)-基)-2-氟-4-甲基苯基)脲
B-Raf(V600E)激酶测定法：
通过跟踪从与丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶系统偶联的反应形成的ADP来 测定B-Raf(V600E)激酶的活性(例如Schindler等人，Science(2000)289， 1938-1942)。在该测定法中，通过分光光度法连续监测NADH的氧化(因而 A340nm处的降低)。反应混合物(100μl)含有在60mM Tris缓冲液中的 B-Raf(V600E)激酶(2.1nM标称浓度)、未磷酸化的全长MEK1(45nM)、 MgCl2(13mM)、丙酮酸激酶(3.5个单位)、乳酸脱氢酶(5.5个单位)、磷酸 烯醇丙酮酸(1mM)和NADH(0.28mM)，所述缓冲液(pH 7.5)含有0.13％辛 基葡糖苷和3.5％DMSO浓度。将供试化合物与反应混合物在30℃下温育 2小时或4小时。通过加入ATP(0.2mM最终浓度)引发反应。在Polarstar Optima平板读数器(BMG)上于30℃连续监测340nm处的吸光度达3小时。 采用1.5小时至2.5小时的时帧(time frame)计算反应速率。通过与对照(即 没有供试化合物)的反应速率进行比较，得到抑制百分比。采用在GraphPad Prism软件包中应用的软件程序，由一系列在一定范围的抑制剂浓度下测 定的抑制百分数值计算IC50值。
用于筛选的B-Raf(V600E)蛋白质序列：
EDRNRMKTLGRRDSSDDWEIPDGQITVGQRIGSGSFGTVYKGKWHGDVAVKMLNVTAPTPQQLQAFKNEV
GVLRKTRHVNILLFMGYSTKPQLAIVTQWCEGSSLYHHLHIIETKFEMIKLIDIARQTAQGMDYLHAKSI
IHRDLKSNNIFLHEDLTVKIGDFGLATEKSRWSGSHQFEQLSGSILWMAPEVIRMQDKNPYSFQSDVYAF
GIVLYELMTGQLPYSNINNRDQIIFMVGRGYLSPDLSKVRSNCPKAMKRLMAECLKKKRDERPLFPQILA
SIELLARSLPKIHR(SEQ.ID NO.1)
用于筛选的MEK1蛋白质序列：
MELKDDDFEKISELGAGNGGVVFKVSHKPSGLVMARKLIHLEIKPAIRNQIIRELQVLHECNSPYIVGFYG
AFYSDGEISICMEHMDGGSLDQVLKKAGRIPEQILGKVSIAVIKGLTYLREKHKIMHRDVKPSNILVNSRG
EIKLCDFGVSGQLIDSMANSFVGTRSYMSPERLQGTHYSVQSDIWSMGLSLVEMAVGRYPIPPPDAKELEL
MFGCQVEGDAAETPPRPRTPGRPLSSYGMDSRPPMAIFELLDYIVNEPPPKLPSGVFSLEFQDFVNKCLIK
NPAERADLKQLMVHAFIKRSDAEEVDFAGWLCSTIGLNQPSTPTHAAGV(SEQ.ID NO.2)
C-Raf激酶测定法：
通过跟踪从与丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶系统偶联的反应形成的ADP来 测定C-Raf激酶的活性(例如Schindler等人，Science(2000)289， 1938-1942)。在该测定法中，通过分光光度法连续监测NADH的氧化(因而 A340nm处的降低)。反应混合物(100μl)含有在60mM Tris缓冲液中的C-Raf 激酶(0.28nM标称浓度，可从阿普斯德特公司(Upstate)获得，目录号 14-352)、未磷酸化的全长MEK1(27nM)、MgCl2(13mM)、丙酮酸激酶(3.5 个单位)、乳酸脱氢酶(5.5个单位)、磷酸烯醇丙酮酸(1mM)和NADH (0.28mM)，所述缓冲液(pH 7.5)含有0.13％辛基葡糖苷和3.5％DMSO浓 度。将供试化合物与反应混合物在30℃下温育2小时或4小时。通过加入 ATP(0.2mM最终浓度)引发反应。在Polarstar Optima平板读数器(BMG) 上于30℃连续监测340nm处的吸光度达3小时。采用1.0小时至2.0小时 的时帧计算反应速率。通过与对照(即没有供试化合物)的反应速率进行比 较，得到抑制百分比。采用在GraphPad Prism软件包中应用的软件程序， 由一系列在一定范围的抑制剂浓度下测定的抑制百分数值计算IC50值。
一般而言，利用上述测定条件，本文公开的化合物1-68在0.2-2μM浓 度下显示出对抗V600E BRaf和CRaf激酶的＞50％的抑制活性。
细胞培养：从美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection，Rockville，MD)得到A-375细胞。简言之，使细胞在达尔伯克改 良伊格尔培养基(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)中于37摄氏度和5％ CO2、95％湿度下生长，所述培养基含有4.5g/L葡萄糖、6mM L-谷氨酰胺 和10％经验证的胎牛血清(英杰(Invitrogen)公司，Carlsbad，CA)。使细胞扩 增直至达到80％汇合，此时将它们进行传代培养或收获以供测定用。
细胞增殖测定法：将供试化合物的系列稀释液分配在96孔黑色透明底 平板(Corning，康宁(Corning)公司，NY)中。然后向每孔在生长培养基中加 入5000个细胞(A375)。将平板在37摄氏度、5％CO2、95％湿度下温育 72小时。在温育期结束时，向每孔加入Cell Titer Blue(普洛麦格(Promega) 公司，麦迪逊，WI)，在37摄氏度、5％CO2、95％湿度下温育另外4.5小 时。然后在BMG Fluostar Optima(BMG，Durham，NC)上读取平板，激发 波长为544nm，发射波长为612nm。利用Prism软件(Graphpad，圣地亚 哥，CA)分析数据以计算IC50值。
一般而言，利用上述测定条件，本文公开的化合物1-68在1-10μM浓 度下显示出对抗A375细胞的＞50％的抑制活性。
本文提到或涉及的所有参考文献引入本公开内容作为参考。
相关申请的交叉参考
本申请要求2006年9月14日提交的临时申请60/844552的权益。该 申请引入本文作为参考。
序列表
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D·L·弗林
P·A·派提罗
M·D·卡夫曼
W·C·派特
<120>可用于治疗增殖性疾病的激酶抑制剂
<130>37507-PCT
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<213>人(Homo sapiens)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<223>B-Raf(V600E)
<400>1
Glu Asp Arg Asn Arg Met Lys Thr Leu Gly Arg Arg Asp Ser Ser Asp
1               5                   10                  15
Asp Trp Glu Ile Pro Asp Gly Gln Ile Thr Val Gly Gln Arg Ile Gly
            20                  25                  30
Ser Gly Ser Phe Gly Thr Val Tyr Lys Gly Lys Trp His Gly Asp Val
        35                  40                  45
Ala Val Lys Met Leu Asn Val Thr Ala Pro Thr Pro Gln Gln Leu Gln
    50                  55                  60
Ala Phe Lys Asn Glu Val Gly Val Leu Arg Lys Thr Arg His Val Asn
65                  70                  75                  80
Ile Leu Leu Phe Met Gly Tyr Ser Thr Lys Pro Gln Leu Ala Ile Val
                85                  90                  95
Thr Gln Trp Cys Glu Gly Ser Ser Leu Tyr His His Leu His Ile Ile
            100                 105                 110
Glu Thr Lys Phe Glu Met Ile Lys Leu Ile Asp Ile Ala Arg Gln Thr
        115                 120                 125
Ala Gln Gly Met Asp Tyr Leu His Ala Lys Ser Ile Ile His Arg Asp
    130                 135                 140
Leu Lys Ser Asn Asn Ile Phe Leu His Glu Asp Leu Thr Val Lys Ile
145                 150                 155                 160
Gly Asp Phe Gly Leu Ala Thr Glu Lys Ser Arg Trp Ser Gly Ser His
                165                 170                 175
Gln Phe Glu Gln Leu Ser Gly Ser Ile Leu Trp Met Ala Pro Glu Val
            180                 185                 190
Ile Arg Met Gln Asp Lys Asn Pro Tyr Ser Phe Gln Ser Asp Val Tyr
        195                 200                 205
Ala Phe Gly Ile Val Leu Tyr Glu Leu Met Thr Gly Gln Leu Pro Tyr
    210                 215                 220
Ser Asn Ile Asn Asn Arg Asp Gln Ile Ile Phe Met Val Gly Arg Gly
225                 230                 235                 240
Tyr Leu Ser Pro Asp Leu Ser Lys Val Arg Ser Asn Cys Pro Lys Ala
                245                 250                 255
Met Lys Arg Leu Met Ala Glu Cys Leu Lys Lys Lys Arg Asp Glu Arg
            260                 265                 270
Pro Leu Phe Pro Gln Ile Leu Ala Ser Ile Glu Leu Leu Ala Arg Ser
        275                 280                 285
Leu Pro Lys Ile His Arg
290
<210>2
<211>333
<212>PRT
<213>人
<220>
<221>MISC_FEATURE
<223>MEK1
<400>2
Met Glu Leu Lys Asp Asp Asp Phe Glu Lys Ile Ser Glu Leu Gly Ala
1               5                   10                  15
Gly Asn Gly Gly Val Val Phe Lys Val Ser His Lys Pro Ser Gly Leu
            20                  25                  30
Val Met Ala Arg Lys Leu Ile His Leu Glu Ile Lys Pro Ala Ile Arg
        35                  40                  45
Asn Gln Ile Ile Arg Glu Leu Gln Val Leu His Glu Cys Asn Ser Pro
    50                  55                  60
Tyr Ile Val Gly Phe Tyr Gly Ala Phe Tyr Ser Asp Gly Glu Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ile Cys Met Glu His Met Asp Gly Gly Ser Leu Asp Gln Val Leu Lys
                85                  90                  95
Lys Ala Gly Arg Ile Pro Glu Gln Ile Leu Gly Lys Val Ser Ile Ala
            100                 105                 110
Val Ile Lys Gly Leu Thr Tyr Leu Arg Glu Lys His Lys Ile Met His
        115                 120                 125
Arg Asp Val Lys Pro Ser Asn Ile Leu Val Asn Ser Arg Gly Glu Ile
    130                 135                 140
Lys Leu Cys Asp Phe Gly Val Ser Gly Gln Leu Ile Asp Ser Met Ala
145                 150                 155                 160
Asn Ser Phe Val Gly Thr Arg Ser Tyr Met Ser Pro Glu Arg Leu Gln
                165                 170                 175
Gly Thr His Tyr Ser Val Gln Ser Asp Ile Trp Ser Met Gly Leu Ser
            180                 185                 190
Leu Val Glu Met Ala Val Gly Arg Tyr Pro Ile Pro Pro Pro Asp Ala
        195                 200                 205
Lys Glu Leu Glu Leu Met Phe Gly Cys Gln Val Glu Gly Asp Ala Ala
    210                 215                 220
Glu Thr Pro Pro Arg Pro Arg Thr Pro Gly Arg Pro Leu Ser Ser Tyr
225                 230                 235                 240
Gly Met Asp Ser Arg Pro Pro Met Ala Ile Phe Glu Leu Leu Asp Tyr
                245                 250                 255
Ile Val Asn Glu Pro Pro Pro Lys Leu Pro Ser Gly Val Phe Ser Leu
            260                 265                 270
Glu Phe Gln Asp Phe Val Asn Lys Cys Leu Ile Lys Asn Pro Ala Glu
        275                 280                 285
Arg Ala Asp Leu Lys Gln Leu Met Val His Ala Phe Ile Lys Arg Ser
    290                 295                 300
Asp Ala Glu Glu Val Asp Phe Ala Gly Trp Leu Cys Ser Thr Ile Gly
305                 310                 315                 320
Leu Asn Gln Pro Ser Thr Pro Thr His Ala Ala Gly Val
                325                 330