技术领域
[0001] 本
发明涉及瓜蒌种植技术领域,具体是涉及一种瓜蒌叶面肥的制备方法。技术背景
[0002] 瓜蒌,又名野葫芦,学名栝蒌,多年生攀缘型草本
植物,喜生于灌从、山崖石峰之中。瓜蒌含有
钙、镁、锌、
铜、
蛋白质、维生素等对人体有益成分,具有降压、降血糖、降血脂等综合作用,其果实、
果皮、果仁、根茎均为上好的中药材,故在其自然分布区内,广为栽培。
[0003] 紫苏提取物中含有丰富的
氨基酸和维生素,同时富含抗菌成分,不仅能增加植物的营养成分,也能杀灭
真菌、霉菌、细菌等有害菌,保护植物不受有害菌的侵害;皂荚提取物含有丰富的皂素成分,具有杀虫、灭虫的作用,可防治
蚜虫、红蜘蛛等,使植物不受
害虫侵害。
[0004] 甲壳素广泛存在于虾、蟹等甲壳动物的甲壳中及蘑菇等菌类的细胞壁和乌贼等软体动物的器官中,是2-乙酰胺-2-脱
氧-D-
葡萄糖通过β-1,4苷链联结而成的直链多糖,是近年来崛起的一种新型天然高分子材料。甲壳素脱去乙酰基后称为壳聚糖,这是甲壳素最重要和应用最广泛的衍
生物,其无毒无味、耐热、耐
腐蚀、可
生物降解,独具的生理特性引起人们的极大关注。甲壳素在农业上的主要作用是增殖
土壤有益菌群,抑制有害菌,诱导植物开启自身免疫反应,提高
农作物和蔬菜抗病性,减少或不用
农药,促进植物生长,提高农作物产量。
[0005] 叶面肥是指通过作物
叶片为作物提供营养物质的
肥料的统称,它可以补充根部
施肥的不足,具有迅速补充营养、充分发挥肥效、经济合算以及减轻对土壤的污染的特点。在瓜蒌栽培过程中,叶面肥起到十分重要的作用。常用的瓜蒌叶面肥通过补充瓜蒌所需的
营养元素,来提高瓜蒌座果率,然而瓜蒌开花结果期间易受病虫害影响,也会严重影响瓜蒌的座果率。所以,制备既能杀菌防虫,又能促进瓜蒌生长的瓜蒌叶面肥,亟待进行。
[0006] 目前,将紫苏、皂荚这种杀虫杀菌的植物资源用于瓜蒌叶面肥中还未见报道。而瓜蒌叶面肥的授权
专利也未见报道。中国专利
申请CN106748236A公开了一种瓜蒌叶面肥,通过多元元素复配,以提供瓜蒌生长所需营养。然而,这种瓜蒌叶面肥可以起到一定的杀菌消毒的作用,但是,对于果实的品质以及结果率,却效果甚微。
发明内容
[0007] 本发明的目的在于提供一种瓜蒌叶面肥的制备方法,制得的叶面肥既能杀菌防虫又能为植物提供营养成分。
[0008] 本发明针对背景技术中提到的问题,采取的技术方案为:一种瓜蒌叶面肥的制备方法,包括紫苏提取物制备、皂荚提取物制备、小分子壳聚糖制备、瓜蒌叶面肥制备,具体步骤为:
[0009] 紫苏提取物制备:将紫苏植株清洗干净,烘干,切断至2-3cm,捣碎机
粉碎后,再用
超微粉碎设备粉碎,粉碎的粒径≦12μm,以破坏紫苏细胞的细胞壁,得紫苏超微粉;按重量份计,取100份紫苏超微粉,加入2-甲基丙氨酸、
柠檬酸钙、400-600份40-85%
乙醇溶液,混合均匀,
微波处理,超声提取,静置1-4h,过滤,收集上层清液,浓缩,干燥,即得紫苏提取物,备用;紫苏中含有紫苏叶花色苷、紫苏
醛、柠檬烯、紫苏黄
酮等多种天然抗菌物质,有的易溶于
水,有的易溶于
有机溶剂,因此使用40-85%乙醇溶液提取;植物细胞的细胞壁直径一般在10-100μm之间,超微粉碎的粒径控制在12μm以内,极大地破坏了紫苏细胞的细胞壁,从而促进抗菌物质释放;2-甲基丙氨酸与柠檬酸钙的存在,可以渗透紫苏细胞壁,通过氢键、范德华引
力、静电引力等化学亲和力破坏细胞壁和细胞膜结构,从而改变细胞壁和细胞膜的通透性,促进细胞内蛋白质、抗菌物质的释放;微波能破坏细胞结构,并且加快细胞内分子的运动,而
超声波具有机械效应、
空化效应和热效应,能加快细胞内物质的释放、扩散和溶解,采用微波和
超声波联合辅助提取,可提高抗菌物质的纯度和提取率;所以,超微粉碎、2-甲基丙氨酸、柠檬酸钙、微波与超声波联合使用,相互起到协同增益效应,极大的破坏紫苏细胞的细胞壁,同时使抗菌物质及营养物质释放并扩散溶解在40-85%乙醇提取剂中,提高提取物的纯度和提取率;
[0010] 皂荚提取物制备:以重量份计,将100份皂荚作为原料,清洗干净,烘干,捣碎机粗粉碎,过60-100目筛,如果粉碎过细,细粉容易结
块,粘在一起,不易和酶制剂混合均匀,如果太粗,则酶解时间长,皂素成分释放也不充分,然后加入水400-600份,再加入N,N-二甲基甘氨酸5-15份,壬基酚聚氧乙烯醚2-10份,蛋白酶1.5-3份,在35-40℃下酶解4-6h,然后静置1-4h,弃去酶解液,向沉淀物中加入95%乙醇溶液,搅拌浸提1-3h,收集滤液,浓缩,干燥,即得皂荚提取物,备用;N,N-二甲基甘氨酸因其分子小,更易渗透到皂荚细胞壁外侧的聚糖结构之间,并通过其分子结构中的弱极性基-H与细胞壁外侧分子结构形成氢键、范德华引力、静电引力等化学亲和力,从而改变细胞壁和细胞膜的通透性,促进细胞内物质释放;壬基酚聚氧乙烯醚具有亲水基团和憎水基团,溶于水后,因分子间氢键形成聚集体,同时憎水基朝内,亲水基朝外,从而把细胞壁中疏水性的蛋白质等“溶解”在自己的憎水部分中,因而具有
破碎细胞壁的能力;单独使用壬基酚聚氧乙烯醚,其破碎细胞壁的能力很弱,但它与N,N-二甲基甘氨酸协同作用时,却可以大大提高破碎细胞壁的能力,从而促进皂荚及其籽细胞内的抗菌成分释放;加入蛋白酶可以使易溶于水的甾体皂苷、三萜皂苷等酶解为不溶于水的
苷元形式,从而提取率;N,N-二甲基甘氨酸、壬基酚聚氧乙烯醚与蛋白酶产生协同增效作用,使得皂苷类物质的提取速率大大升高。所制得的皂荚提取物中含有大量皂素类物质,具有杀虫、灭虫的作用,叶面施用,可大大降低植物的病虫害发生率;
[0011] 小分子壳聚糖的制备:按重量份计,将50-150份甲壳质溶解在700-900份0.5-2%(体积比)的
醋酸水溶液中,然后加入50-150份10-20%(体积比)的过氧化氢水溶液,升温至40-70℃,降解1-5小时,烘干,得小分子壳聚糖,备用,通过凝胶液相色谱检测可知,采用上述步骤制备的壳聚糖的平均分子量为5000-6000道尔顿,而平均分子量在6000左右的小分子壳聚糖作为叶面肥,非常有利于瓜蒌叶面的有效吸收,能迅速增加瓜蒌叶面的糖浓度,促进瓜蒌根系生长,并能增强瓜蒌的生理生化机质,诱导瓜蒌产生多种抗病物质,对真菌、细菌有极强的抑制、
钝化和
预防作用,从而有效地防治病虫害,提高瓜蒌的
质量和产量;
[0012] 瓜蒌叶面肥制备:按重量份计,将紫苏提取物10-15份、皂荚提取物10-15份、小分子壳聚糖10-15份、4%尿素水溶液30-60份、
磷酸二氢
钾0.5-2份、
硫酸铁0.1-0.5份、
硼酸0.05-0.15份、
柠檬酸钾0.5-1.5份、钼酸铵0.5-1.5份、七水硫酸锌0.05-0.1份、锰酸钾0.2-
0.3份、烷基
萘磺酸盐0.5-1.5份、
表面活性剂1-3份、
高岭土2-5份、食醋1-2份、聚乙二醇
0.5-1.5份、一起加入水中,然后升温至70-80℃,搅拌1-3小时,混合均匀,得瓜蒌叶面肥;通过合理复配尿素、磷酸二氢钾、钼酸铵、硼酸等为瓜蒌的开花结果提供了充足的大量和微量营养元素,保证了瓜蒌的座果率;通过叶面向瓜蒌提供包括壳聚糖、紫苏提取物、皂荚提取物、氮磷等营养物质,从而补充根部施肥的不足,迅速补充营养、充分发挥肥效、施用量很小、能减轻对土壤的污染。
[0013] 作为优选,紫苏提取物制备中,按重量份计,加入2-甲基丙氨酸2-10份,柠檬酸钙5-15份,乙醇溶液的浓度为40-85%,微波处理时间为20-50s,超声提取
温度为50-90℃、超声时间1-4h。
[0014] 作为优选,皂荚提取物制备中,按重量份计,蛋白酶为1.5-3份,N,N-二甲基甘氨酸5-15份,壬基酚聚氧乙烯醚2-10份,酶解温度为35-40℃,时间4-6h。
[0015] 作为优选,瓜蒌叶面肥制备步骤中,所用表面活性剂为十二烷基苯磺酸钠或烷基酚聚氧乙烯醚;叶面肥中的表面活性剂,能够降低肥料和叶面的表面
张力,从而增加它们之间的附着面积,提高肥料的吸收和利用率,减少肥料的使用量,降低农产品生产成本。
[0016] 进一步优选,一种瓜蒌叶面肥,按重量份计,包含以下组分:4%尿素水溶液50份、磷酸二氢钾1份、小分子壳聚糖13份、紫苏提取物13份、皂荚提取物13份、硫酸铁0.3份、硼酸0.1份、柠檬酸钾1份、钼酸铵1份、七水硫酸锌0.1份、锰酸钾0.25份、烷基萘磺酸盐1份、表面活性剂2份,高岭土3份,食醋1.5份、聚乙二醇1.0份,水适量。
[0017] 与
现有技术相比,本发明的有益效果为:本发明制备方法使用紫苏、皂荚植物作为原料,充分利用天然植物并减少环境污染,同时,还提高了紫苏、皂荚的经济附加值及工业生产的产值;本发明通过紫苏超微粉碎后,采用2-甲基丙氨酸、柠檬酸钙协同微波、超声波技术破坏紫苏细胞壁,促进抗菌成分及营养成分释放扩散和溶解,然后使用乙醇水溶液浸提的方式,避免目前常用
有机溶剂提取法中使用大量有机溶剂而带来的高成本、危险性、以及环境污染问题;本发明采用N,N-二甲基甘氨酸、壬基酚聚氧乙烯醚协同作用,渗透、破碎皂荚及其籽的细胞壁,
加速抗菌物质的溶解释放,同时协同采用蛋白酶酶解技术,即提高皂素类物质的释放,同时有利于将皂苷分解为统一的不易溶于水的苷元,大大提高提取率;本发明操作简单,成本低,工艺流程短,适合大范围推广。
具体实施方式
[0018] 下面通过
实施例对本发明方案作进一步详细说明:
[0019] 实施例1:
[0020] 一种瓜蒌叶面肥,按重量份计,包含以下组分:4%尿素水溶液50份、磷酸二氢钾1份、小分子壳聚糖13份、紫苏提取物13份、皂荚提取物13份、硫酸铁0.3份、硼酸0.1份、柠檬酸钾1份、钼酸铵1份、七水硫酸锌0.1份、锰酸钾0.25份、烷基萘磺酸盐1份、表面活性剂2份,高岭土3份,食醋1.5份、聚乙二醇1.0份,水适量。
[0021] 一种瓜蒌叶面肥的制备方法,具体包括以下步骤:
[0022] 1)紫苏提取物制备:将紫苏植株清洗干净,使用烘箱烘干紫苏,烘箱温度为95℃,时间为8小时,称取500g烘干的紫苏,切断至2-3cm,使用捣碎机粉碎,再使用超微粉碎设备粉碎,超微粉碎的温度为37℃,粉碎的粒径控制在12μm,再使用烘箱进行烘干,烘箱温度为100℃,时间为6小时,得紫苏超微粉;按重量份计,取100份紫苏超微粉,加入7份2-甲基丙氨酸、10份柠檬酸钙、500份70%乙醇溶液,搅拌混合均匀,60W微波处理40s,然后在80℃条件下,150w超声波提取2h,冷却至常温,静置2h,过滤,收集上层清液,浓缩,干燥,即得紫苏提取物,备用;
[0023] 2)皂荚提取物制备:将皂荚作为原料,清洗干净,烘箱90℃烘干,称取100份烘干的皂荚,使用捣碎机粉碎,过60-100目筛,得皂荚粗粉;然后加入水500份,再加入N,N-二甲基甘氨酸10份,壬基酚聚氧乙烯醚5份、蛋白酶2份,在38℃下酶5h,然后静置2h,弃去酶解液,向沉淀物中加入95%乙醇,搅拌浸提2h,收集滤液,浓缩,干燥,即得皂荚提取物,备用;
[0024] 3)小分子壳聚糖的制备:按重量份数计,将100份甲壳质溶解在800份1%(体积比)的醋酸水溶液中,然后加入100份15%(体积比)的过氧化氢水溶液,升温至60℃,降解3小时,烘干,得小分子壳聚糖,备用;
[0025] 用液相色谱法检测制得的壳聚糖的平均分子量,检测条件如下:
[0026] 流动相和固定相为色谱级四氢呋喃和正己烷;CGX 500
硅胶柱,粒度为10μm,孔径为 采用一台L-7100等度
泵,其连有一台L-7400UV检测器,均为日立公司生产,检测
波长为260nm,7100型进样
阀,定量管为20μL,在进样阀和泵之间的连接管的长度为120mm,体积为12μL;
数据采集通过D-7000HPLC系统
接口和
软件;流速为1.0mL/min,样品质量浓度为0.5g/L,用L-7300柱炉把
温度控制在25℃.测得制备的壳聚糖的平均分子量为5000-6000道尔顿;
[0027] 4)瓜蒌叶面肥制备:按重量份计,将紫苏提取物13份、皂荚提取物13份、小分子壳聚糖13份、4%尿素水溶液50份、磷酸二氢钾1份、硫酸铁0.3份、硼酸0.1份、柠檬酸钾1份、钼酸铵1份、七水硫酸锌0.1份、锰酸钾0.25份、烷基萘磺酸盐1份、烷基酚聚氧乙烯醚2份、高岭土3份、食醋1.5份、聚乙二醇1.0份、一起加入水中,然后升温至75℃,搅拌2小时,混合均匀,得瓜蒌叶面肥。
[0028] 实施例2:
[0029] 一种瓜蒌叶面肥,按重量份计,包含以下组分:4%尿素水溶液30份、磷酸二氢钾0.5份、小分子壳聚糖10份、紫苏提取物10份、皂荚提取物10份、硫酸铁0.1份、硼酸0.05份、柠檬酸钾0.5份、钼酸铵0.5份、七水硫酸锌0.05份、锰酸钾0.2份、烷基萘磺酸盐0.5份、表面活性剂1份、高岭土2份、食醋1份、聚乙二醇0.5份、水适量。
[0030] 一种瓜蒌叶面肥的制备方法,具体包括以下步骤:
[0031] 1)紫苏提取物制备:将紫苏植株清洗干净,使用烘箱烘干紫苏,烘箱温度为95℃,时间为5小时,称取500g烘干的紫苏,切断至2-3cm,使用捣碎机粉碎,再使用超微粉碎设备粉碎,超微粉碎的温度为37℃,粉碎的粒径控制在12μm,再使用烘箱进行烘干,烘箱温度为100℃,时间为6小时,得紫苏超微粉;按重量份计,取100份紫苏超微粉,加入2份2-甲基丙氨酸、5份柠檬酸钙、400份40%乙醇溶液,搅拌混合均匀,20W微波处理20s,然后在50℃条件下,100w超声波提取1h,冷却至常温,静置1h,过滤,收集上层清液,浓缩,干燥,即得紫苏提取物,备用;
[0032] 2)皂荚提取物制备:将皂荚作为原料,清洗干净,烘箱90℃烘干,称取100份烘干的皂荚,使用捣碎机粉碎,过60-100目筛,得皂荚粗粉;然后加入水400份,再加入N,N-二甲基甘氨酸5份,壬基酚聚氧乙烯醚2份、蛋白酶1.5份,在35℃下酶解4h,然后静置1h,弃去酶解液,向沉淀物中加入95%乙醇,搅拌浸提1h,收集滤液,浓缩,干燥,即得皂荚提取物,备用;
[0033] 3)小分子壳聚糖的制备:按重量份数计,将50份甲壳质溶解在700份0.5-2%(体积比)的醋酸水溶液中,然后加入50份10%(体积比)的过氧化氢水溶液,升温至40℃,降解1小时,烘干,得小分子壳聚糖,备用;
[0034] 用液相色谱法检测制得的壳聚糖的平均分子量,检测条件如下:
[0035] 流动相和固定相为色谱级四氢呋喃和正己烷;CGX 500硅胶柱,粒度为10μm,孔径为 采用一台L-7100等度泵,其连有一台L-7400UV检测器,均为日立公司生产,检测波长为260nm,7100型进样阀,定量管为20μL,在进样阀和泵之间的连接管的长度为120mm,体积为12μL;数据采集通过D-7000HPLC系统接口和软件;流速为1.0mL/min,样品质量浓度为0.5g/L,用L-7300柱炉把温度控制在25℃.测得制备的壳聚糖的平均分子量为5000-6000道尔顿;
[0036] 4)瓜蒌叶面肥制备:按重量份计,将紫苏提取物10份、皂荚提取物10份、小分子壳聚糖10份、4%尿素水溶液30份、磷酸二氢钾0.5份、硫酸铁0.1份、硼酸0.05份、柠檬酸钾0.5份、钼酸铵0.5份、七水硫酸锌0.05份、锰酸钾0.2份、烷基萘磺酸盐0.5份、十二烷基苯磺酸钠1份、高岭土2份、食醋1份、聚乙二醇0.5份,一起加入水中,然后升温至75℃,搅拌2小时,混合均匀,得瓜蒌叶面肥。
[0037] 实施例3:
[0038] 一种瓜蒌叶面肥,按重量份计,包含以下组分:4%尿素水溶液60份、磷酸二氢钾2份、小分子壳聚糖15份、紫苏提取物15份、皂荚提取物15份、硫酸铁0.5份、硼酸0.15份、柠檬酸钾1.5份、钼酸铵1.5份、七水硫酸锌0.1份、锰酸钾0.3份、烷基萘磺酸盐1.5份、表面活性剂3份、高岭土5份、食醋2份、聚乙二醇1.5份、水适量。
[0039] 一种瓜蒌叶面肥的制备方法,具体包括以下步骤:
[0040] 1)紫苏提取物制备:将紫苏植株清洗干净,使用烘箱烘干紫苏,烘箱温度为95℃,时间为8小时,称取500g烘干的紫苏,切断至2-3cm,使用捣碎机粉碎,再使用超微粉碎设备粉碎,超微粉碎的温度为37℃,粉碎的粒径控制在12μm,再使用烘箱进行烘干,烘箱温度为100℃,时间为6小时,得紫苏超微粉;按重量份计,取100份紫苏超微粉,加入10份2-甲基丙氨酸、15份柠檬酸钙、600份85%乙醇溶液,搅拌混合均匀,80W微波处理50s,然后在90℃条件下,250w超声波提取4h,冷却至常温,静置4h,过滤,收集上层清液,浓缩,干燥,即得紫苏提取物,备用;
[0041] 2)皂荚提取物制备:将皂荚作为原料,清洗干净,烘箱90℃烘干,称取100份烘干的皂荚,使用捣碎机粉碎,过60-100目筛,得皂荚粗粉;然后加入水600份,再加入N,N-二甲基甘氨酸15份,壬基酚聚氧乙烯醚10份、蛋白酶3份。在40℃下酶解6h,然后静置3h,弃去酶解液,向沉淀物中加入95%乙醇,搅拌浸提3h,收集滤液,浓缩,干燥,即得皂荚提取物,备用;
[0042] 3)小分子壳聚糖的制备:按重量份数计,将150份甲壳质溶解在900份2%(体积比)的醋酸水溶液中,然后加入150份20%(体积比)的过氧化氢水溶液,升温至70℃,降解5小时,烘干,得小分子壳聚糖,备用;
[0043] 用液相色谱法检测制得的壳聚糖的平均分子量,检测条件如下:
[0044] 流动相和固定相为色谱级四氢呋喃和正己烷;CGX 500硅胶柱,粒度为10μm,孔径为 采用一台L-7100等度泵,其连有一台L-7400UV检测器,均为日立公司生产,检测波长为260nm,7100型进样阀,定量管为20μL,在进样阀和泵之间的连接管的长度为120mm,体积为12μL;数据采集通过D-7000HPLC系统接口和软件;流速为1.0mL/min,样品质量浓度为0.5g/L,用L-7300柱炉把温度控制在25℃.测得制备的壳聚糖的平均分子量为5000-6000道尔顿;
[0045] 4)瓜蒌叶面肥制备:按重量份计,将紫苏提取物15份、皂荚提取物15份、小分子壳聚糖15份、4%尿素水溶液60份、磷酸二氢钾2份、硫酸铁0.5份、硼酸0.15份、柠檬酸钾1.5份、钼酸铵1.5份、七水硫酸锌0.1份、锰酸钾0.3份、烷基萘磺酸盐1.5份、十二烷基苯磺酸钠3份、高岭土5份、食醋2份、聚乙二醇1.5份一起加入水中,然后升温至80℃,搅拌3小时,混合均匀,得瓜蒌叶面肥。
[0046] 实施例4:本发明瓜蒌叶面肥的效果验证
[0047] 1.试验作物:安国瓜蒌实验土壤情况:土壤
基础养分见表1。
[0048] 表1试验土壤基础养分
[0049]
[0050] 试验设5个处理,面积均为667m2。其中,处理1使用实施例1制备的试验肥料;处理2,不加紫苏提取物,其余与实施例1相同;处理3,不加皂荚提取物,其余与实施例1相同;处理4,不加小分子壳聚糖,其余与实施例1相同;处理5,常规施肥。
[0051] 分别使用上述5种处理对5个试验
地块的瓜蒌植株进行同样的施肥试验,对瓜蒌单瓜重,瓜蒌鲜果产量2个方面进行了比较,其中测定方法为:
[0052] 瓜蒌单瓜重:多点取样,避开边行,采用对
角线取样方法,选取有代表性样点5个,每个样点取10个瓜蒌,分别测定,计算平均值。
[0053] 瓜蒌鲜果产量测定方法:试验地块单独
收获,单独计产,折算出公顷产量。
[0054] 2.试验结果与分析
[0055] 不同叶面肥对试验地块的瓜蒌单瓜重影响见表2。
[0056] 表2不同叶面肥对试验地块的瓜蒌单瓜重的影响
[0057]
[0058] 从上述结果可知,处理1、处理2、处理3、处理4与处理5相比,瓜蒌单瓜重分别增加50克、16克、11克、25克,增加率分别为32.5%、10.4%、7.1%、21.4%。
[0059] 不同叶面肥对试验地块的瓜蒌鲜果产量影响见表3。
[0060] 表3不同叶面肥对试验地块的瓜蒌鲜果产量的影响
[0061]组别 产量(kg) 增产(kg) 增产率(%)
处理1 2387 866 56.9
处理2 1819 298 19.6
处理3 1751 230 15.1
处理4 1907 386 25.4
处理5 1521 —— ——
[0062] 注:表中数据均为每667m2的产量。
[0063] 从上述结果可知,处理1、处理2、处理3、处理4与处理5相比,瓜蒌鲜果产量分别增加886千克、298千克、230千克、386千克,增加率分别为56.9%、19.6%、15.1%、25.4%。
[0064] 本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知,在此不进行赘述。
[0065] 以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明,应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例,并不用于限制本发明,凡在本发明的原则范围内所做的任何
修改、补充或类似方式替代等,均应包含在本发明的保护范围之内。