技术领域
[0001] 本
发明涉及蔬菜栽培技术领域，尤其涉及一种加快韭菜新品种培育进程的方法。
背景技术
[0002] 韭菜原产中国，栽培历史悠久，是集蔬菜、香辛料、保健于一体的中国特菜之一，也是我国城乡居民喜食的主要蔬菜之一，但是韭菜生育期长加上常异花
授粉特性，田间种植优良种质群体
构建时间长，纯度偏低，极易发生性状分离，韭菜由优良单株到株系、到品系筛选繁育过程，不仅时间长，而且纯度很难保证，这不仅制约韭菜新品种选育进展，也制约了新品种快速繁育推广。
[0003] 韭菜常规育种从
收获杂交组合
种子、到种植杂种F1、种植F2分离群体、种植优选单株、优良株系、到品比试验、区域试验，顺利的需要12～15年时间，严重制约了韭菜种质创新育种进程。采用组织培养技术能保存韭菜雄性不育系，但是先进的快繁技术与韭菜育种实践是脱节的，没有发挥应有的作用。现有韭菜常规育种技术由于育种周期长和优良种群规模群体构建时间长，不仅造成韭菜育种效率低成本高，而且为加快育种进行生产中应用的韭菜新品种多数是混系品种，纯系品种很少。这不仅降低了育种
质量，也制约了韭菜新品种优良种质潜
力的充分发挥，因此亟需一种加快韭菜新品种培育进程的方法。
发明内容
[0004] 为了解决上述问题，本发明的目的是提出一种加快韭菜新品种培育进程的方法，通过组织培养、套袋自交、缩短韭菜生育期的办法使得韭菜育种时能快速筛选出纯合植株，缩短了韭菜的生育期，大大缩短了韭菜的育种年限，加快了韭菜育种的进程，提高了韭菜常规育种的效率。
[0005] 本发明为了解决上述问题所采取的技术方案为：一种加快韭菜新品种培育进程的方法，包括以下步骤：
[0006] 步骤一、选取若干F3‘-F5‘代优良性状的单株花序，每个单株花序含有2个以上的花序盘，将每个单株花序分为两份，并一一对应编号为An、Bn，n为自然数，其中An花序进行花序盘组织培养，Bn花序套袋自交观察后代性状是否分离；
[0007] 步骤二、将An花序的花苞用质量分数为75%的酒精浸泡30s后，再用质量分数为0.1%的升汞消毒3-5min，然后切取消毒后花苞的花序盘作为外植体，接种至培养基上进行组织培养，经过若干次继代培养后，形成10-20瓶的组培快繁群体An；
[0008] 步骤三、将Bn花序套袋进行自交，得到Bn自交种子，将Bn种子通过缩短生育期的种植方法种植，并观察其Bn植株间是否出现性状分离，如果Bn自交后代性状不发生分离，对应An组培群体继续进行组培快繁培养，扩大组培快繁群体的规模；如果Bn自交后代性状发生分离，将编号对应的An花序盘的组培快繁群体剔除，同时重复步骤一继续筛选分离后代优良单株；
[0009] 步骤四、依据步骤三中筛选得到的性状能稳定遗传的优良植株Bn，对应步骤二组培快繁群体An，继续组培快繁扩大规模，快速构建优良植株群体；
[0010] 步骤五、将步骤四中大规模组织培养的优良植株群体移栽到育苗棚室内进行分苗、练苗和壮苗；
[0011] 步骤六、待植株长到15cm以上后定植到育种田内进行生长管理，成熟后收获种子即可完成韭菜新品种培育进程；
[0012] 所述的缩短生育期的种植方法包括以下步骤：
[0013] 步骤1）、
播种育苗 每年的11月中旬选取颗粒饱满、没有破损的种子备用，再将选好的种子播种在育苗基质中，之后浇透
水，覆膜保持育苗基质水分，出苗后揭去膜，喷雾补充水分；
[0014] 步骤2）、育苗期管理
[0015] ①两促两练
温度管理 11月中旬至12月底促苗生长期室温控制在15-30℃；1月至2月中旬大温差练苗生长期白天
温度控制在10-25℃，夜晚温度控制在0-5℃；2月中旬至3月底促苗生长期温度控制在15-30℃；4月初至4月中旬第二次大温差练苗时期白天温度控制在15-28℃，夜晚温度控制在5-10℃，并揭开拱棚上
覆盖的膜，增大通
风；
[0016] ②水分管理 促苗生长期每3-7天微喷浇水一次，大温差练苗生长期每5-10天微喷浇水一次，每次浇水浇透，每次浇水浇透，但是不能有积水，防止淹苗，浇水后，定时
通风2-3次，
预防灰霉病；
[0017] ③
施肥管理 12月到4月结合浇水追施
复合肥，并进行
病虫害防治；
[0018] 步骤3）、定植 4月下旬晴天定植，定植前先施肥整地做畦，再开沟定植；
[0019] 步骤4）、大田生产 定植后，进行中耕、松土、施肥、除草、防虫、保墒，促进秧苗缓苗，5月下旬至6月中旬施肥，8月中旬开花，开花期7-10天浇水一次，十月上旬种子成熟，采收晾晒即可得到韭菜种子，完成一个生育期；
[0020] 所述育苗基质按照质量比由5-6份草炭土、3-4份珍珠岩和1份腐熟干鸡粪组成，育苗时先将上述质量的草炭土、珍珠岩和腐熟干鸡粪混匀后，加入其混合物质量60%的水拌匀后得湿润混合物，取90%重量的湿润混合物放入穴盘中，然后进行播种，播种深度为1-2cm，若采用50孔穴盘每穴播种5～6粒，若采用72孔穴盘每穴播种4～5粒，播种后再将10%重量的湿润混合物覆盖在表面，并用微喷管微喷浇透水，之后扣上中小拱棚，覆膜保湿；
[0021] 所述的拱棚覆盖育苗设施为日光
温室内加中小拱棚的双膜覆盖的设施，播种后，先在穴盘上覆盖一层
地膜，在日光温室和中小拱棚上各覆盖一层
薄膜，覆盖的薄膜为市售的无滴膜，拱棚内在播种前先用市售的烟熏剂熏蒸消毒12h；
[0022] 定植时，基肥每667 m2施氮磷
钾复合肥45-50kg，腐熟干鸡粪1000～1500kg，其中，氮磷钾复合肥的氮：磷：钾=15:15:15，深耕细耙搂平后做畦，畦埂宽40-50cm，畦面宽350-360cm，开沟行距30-35cm，沟深7-10cm，按株距5-7cm深种浅埋单株定植，再覆土3-4cm，定植后4-5天内微喷浇水1-2次，浇水至浇透不积水；
[0023] 所述的组织培养的接种培养基：MS+6-BA1mg/L+NAA0.2mg/L；继代培养基为：MS+6-BA0.6mg/L+ZT0.3 mg/L +NAA0.15mg/L；壮苗和生根培养基为：1/2MS + NAA0.3mg/L+IBA0.15mg/L；
[0024] 所述继代培养的温度为23-28℃，光照强度为1800-2000lux，继代培养增殖系数：1：2.5～4，继代培养的周期为22-27d；
[0025] 所述壮苗培养的温度为15-25℃，光照强度2500-3000lux；
[0026] 所述步骤五中分苗、练苗时，继代培养得到的秧苗经生根壮苗后，放入育苗基质中，并遮光50%-70%，一周后逐步增大通风量和光照，直至秧苗在自然环境下能正常生长，1月后每2周在叶面喷氮磷钾肥1次，每次5-6g/m2，且其质量比为氮：磷：钾=25:12:12；
[0027] 所述步骤六中的育种田四周设置40-60目尼龙隔离网全封闭隔离，网室高度1.3-1.5m，隔离网内放置蜂、蝇等授粉昆虫；
[0028] 所述步骤六中的植株在育种田上生长期间除草用的
除草剂为每667 m2用质量分数为33%的二甲戊灵
乳油80-100ml，加水40-50kg均匀喷洒地面，封闭后注意保护药膜。
[0029] 本发明的有益效果：
[0030] 1、本发明通过将缩短韭菜育种生育期的种植方法和花序盘的组织培养以及自交鉴定性状分离结合起来，一半进行花序盘组织培养，另一半套袋自交，利用组织培养快繁构建优良植株群体，同时利用自交鉴定后代性状分离的植株，将后代性状分离植株对应的组织培养群体剔除。把自交筛选优良稳定单株，与组织培养快速构建纯系群体相结合，使优良纯合品系能够在1-2年完成快速构建规模群体，与常规育种田间单株、株系、品系繁育群体构建需要5-6年比较，组织培养规模群体构建速度大大加快，可以迅速增大筛选的效率，而且自交时采取的是缩短韭菜育种生育期的种植方法，大大缩短了育种的年限，使韭菜常规育种周期由目前的12-15年，缩短到6-8年，取得了提高韭菜育种效率、加快韭菜新品种培育进程的有益效果，而且组织群体中品系纯度高，避免了田间常异花
植物的传粉杂化，取得了提高群体纯度的有益效果；
[0031] 2、本发明采用花序盘组织培养，继代培养基中加入
激素ZT后，韭菜组培继代繁育增殖系数提高0.5-1，继代繁育周期缩短3-5天，从原来的27-30天，缩短为22-27天，继代培养增殖系数从原来的1：2.5-3提高到1：3-4，大大提高了继代快繁的效率；生根培养基中添加了激素IBA后，使得生根壮苗培养的秧苗生根率100%，单株生根3-5条，根壮苗健，下地成活率100%，增强了
幼苗的质量，取得了快速构建优良单株群体的有益效果；
[0032] 3、本发明通过改变韭菜的种植时间，将种植时间从原有的三到四月份变为十一月份，育苗过程中还结合双膜覆盖法，采用的无滴膜透光性好，保水性强，在其表面不易形成水滴，增大了光照强度，长日照增大了花芽分化的速率，同时运用两促两练的练苗方式，采用大温差进行练苗，再结合覆膜的拱棚，练苗期间，能起到很好的保温作用，利用秋冬季节的昼夜温差大的特点，白天保温，夜晚适当通风降温，既能很好的控制拱棚内的温度，又能增大拱棚内二
氧化
碳的含量，促进韭菜的光合作用，生长速度加快，促进韭菜的花芽分化和提早抽薹开花，而常规的种植方法，需要两年的时间，当年的抽薹率为2%，且品质不好，因此本发明可以达到韭菜由种子到种子的生育期在一年内完成的目的，实现了1年内单株抽薹2个以上，取得了缩短韭菜生育期，提高抽薹率和单株抽薹数，开花结实率高，
加速韭菜育种世代进程的有益效果。
附图说明
[0033] 图1为不同练苗方法对韭菜抽薹率和抽薹数的影响的表格；
[0034] 图2为不同育种时间对韭菜抽薹率、花序规格和抽薹数的影响的表格；
[0035] 图3 不同育种方法对韭菜生育期、从单株扩繁到667 m2规模和育种周期时间的影响的表格；
具体实施方式
[0037] 结合以下具体
实施例，对本发明作进一步的详细说明，本发明的保护范围不局限于以下实施例。实施本发明的过程、条件、
试剂、实验方法等，除以下专
门提及的内容之外，均为本领域的普遍知识和公知常识，本发明没有特别限制内容。
[0038] 实施例1 一种加快韭菜新品种培育进程的方法，其特征在于：包括以下步骤：
[0039] 步骤一、选取若干F3‘-F5‘代优良性状的单株花序，每个单株花序含有2个以上的花序盘，将每个单株花序均分为An、Bn两份，n为自然数，并一一对应编号，其中An份花序进行花序盘组织培养，Bn花序套袋自交观察后代性状是否分离；
[0040] 步骤二、将An花序的花苞消毒后切取花苞的花序盘作为外植体，接种至培养基上进行组织培养，经过若干次继代培养后，形成组培快繁群体An，经过若干次继代培养后根据培养出的再生苗的性状筛选出性状不分离的优良单株；
[0041] 步骤三、将Bn花序套袋进行自交，得到Bn自交种子，将Bn种子通过缩短生育期的种植方法种植，并观察其Bn植株间是否出现性状分离，如果Bn自交后代性状不发生分离，对应An组培群体继续进行组培快繁培养，扩大组培快繁群体的规模；如果Bn自交后代性状发生分离，将编号对应的An花序盘的组培快繁群体剔除，同时重复步骤一继续筛选分离后代优良单株；
[0042] 步骤四、依据步骤三中筛选得到的性状能稳定遗传的优良植株Bn，对应步骤二组培快繁群体An，继续组培快繁扩大规模，快速构建优良植株群体；
[0043] 步骤五、将步骤四中大规模组织培养的优良植株群体移栽到育苗棚室内进行分苗、练苗和壮苗；
[0044] 步骤六、待植株长到15cm以上后定植到育种田内进行生长管理，成熟后收获种子即可完成韭菜新品种培育进程。
[0045] 所述的缩短生育期的种植方法包括以下步骤：
[0046] 步骤1）、播种育苗 每年的11月上、中旬选取颗粒饱满、没有破损的种子备用，在拱棚覆盖的育苗设施内将选好的种子播种在育苗基质中，之后浇透水，覆膜保持育苗基质水分，出苗后揭去膜，喷雾补充水分；
[0047] 步骤2）、育苗期管理
[0048] ①两促两练温度管理 11月中旬至12月底促苗生长期室温控制在15-30℃；1月至2月中旬大温差练苗生长期白天温度控制在10-25℃，夜晚温度控制在0-5℃；2月中旬至3月底促苗生长期温度控制在15-30℃；4月初至4月中旬大温差练苗生长期白天温度控制在15-28℃，夜晚温度控制在5-10℃并-揭开拱棚上覆盖的膜，增大通风；
[0049] ②水分管理 促苗生长期每3-7天微喷浇水一次，大温差练苗生长期每5-10天微喷浇水一次，每次浇水浇透，每次浇水浇透，但是不能有积水，防止淹苗，浇水后，定时通风2-3次，预防灰霉病；
[0050] ③施肥管理 12月到4月结合浇水追施复合肥，并进行病虫害防治；
[0051] 步骤3）、定植 4月下旬晴天定植，定植前先施肥整地做畦，再开沟定植；
[0052] 步骤4）、大田生产 定植后，进行中耕、松土、施肥、除草、防虫、保墒，促进秧苗缓苗，5月下旬至6月中旬施肥，8月中旬开花，开花期7-10天浇水一次，十月上旬种子成熟，采收晾晒即可得到韭菜种子，完成一个生育期。
[0053] 所述育苗基质按照质量比由5-6份草炭土、3-4份珍珠岩和1份腐熟干鸡粪组成，育苗时先将上述质量的草炭土、珍珠岩和腐熟干鸡粪混匀后，加入其混合物质量60%的水拌匀后得湿润混合物，取90%重量的湿润混合物放入穴盘中，然后进行播种，播种深度为1-2cm，若采用50孔穴盘每穴播种5～6粒，若采用72孔穴盘每穴播种4～5粒，播种后再将10%重量的湿润混合物覆盖在表面，并用微喷管微喷浇透水，之后扣上中小拱棚，覆膜保湿。
[0054] 所述的覆膜育苗设施为日光温室内加中小拱棚的双膜覆盖，但是实际操作过程中并不局限于这一种实施方式，也可采取单膜覆盖日光温室加保温覆盖，或是阳畦拱棚加保温覆盖等设施，只要能保证大温差练苗的温度控制即可，只是双膜覆盖的设置方式，温度控制更方便，根据秋冬季节昼夜大温差，即可实现温度控制，更贴近韭菜练苗的生长环境，播种后浇透水，穴盘上覆盖地膜保持基质水分，拱棚上覆的膜为市售的无滴膜，增大了光照强度和花芽分化的速率，拱棚在播种前先用市售的大棚烟熏剂棚灰一次净熏蒸12h消毒。
[0055] 定植时，基肥每667 m2施氮磷钾复合肥45-50kg，腐熟干鸡粪1000～1500kg，其中，氮磷钾复合肥的氮：磷：钾=15:15:15，深耕细耙搂平后做畦，畦埂宽40-50cm，畦面宽350-360cm，开沟行距30-35cm，沟深7-10cm，按株距5-7cm深种浅埋单株定植，再覆土3-4cm，定植后4-5天内微喷浇水1-2次，浇水至浇透不积水。
[0056] 所述的组织培养的接种培养基为：MS+6-BA1mg/L+NAA0.2mg/L ；继代培养基为：MS+6-BA0.6mg/L+ZT0.3 mg/L +NAA0.15mg/L；壮苗和生根培养基为：1/2MS + NAA0.3mg/L+IBA0.15mg/L。
[0057] 所述继代培养的温度为23-28℃，光照强度为1800-2000lux，继代培养增殖系数：1：2.5～4，继代培养的周期为22-27d；所述壮苗培养的温度为15-25℃，光照强度2600-
3000lux。
[0058] 所述步骤五中分苗练苗时，继代组培养得到的秧苗经生根壮苗后，放入育苗基质中，并遮光50%-70%，一周后逐步增大通风量和光照，直至秧苗在自然环境下能正常生长，1月后每2周在叶面喷氮磷钾肥1次，每次5-6g/m2，且其质量比为氮：磷：钾=25:12:12。
[0059] 所述步骤六中的育种田四周设置40-60目尼龙隔离网全封闭隔离，网室高度1.3-1.5m，隔离网内放置蜂、蝇等授粉昆虫，进行空间隔离和种子繁育，防止外界的干扰，有利于筛选形状不分离的单株。
[0060] 所述步骤六中的植株在育种田上生长期间除草用的除草剂为每667 m2用质量分数为33%的二甲戊灵乳油80-100ml，加水40-50kg均匀喷洒地面，注意保护药膜。
[0061] 所述大田生长期间除虫可用质量分数为75%的灭蝇胺3000倍液、质量分数为1.8%的阿维菌素2500倍液和质量分数为48%的噻虫胺5000倍液的一种或几种任意比例的混合物喷雾防治。
[0062] 为了探究练苗方法对韭菜抽薹率和抽薹数的影响，按照温室高温育苗种植得到的韭菜苗作为样品1，此时，不进行练苗，温度设置为23-30℃，其他种植条件均与实施例1相同；
[0063] 按照常规一次大温差练苗种植得到的韭菜苗作为样品2，此时，练苗温度练苗温度为白天温度控制在10-25℃，夜晚温度控制在0-5℃，其他种植条件均与实施例1相同；
[0064] 按照实施例1的两促两练的种植方法得到的韭菜苗作为样品3，此时，进行两促两练的大温差练苗；
[0065] 由图1可知，样品3与样品1和样品2相比，平均单株抽薹率最高，且80%的样品单株的抽薹数也是最多的，这说明采用两促两练的练苗方式，能够促进韭菜生长，增大抽薹数，为最适练苗方法。
[0066] 为了探究播种日期对韭菜抽薹率和抽薹数的影响，按照常年韭菜育苗的时间3月中下旬进行育苗得到的韭菜苗作为样品1，练苗为一次练苗，其他种植条件均与实施例1相同；
[0067] 按照12月中旬的育种时间进行育苗得到的韭菜苗作为样品2，此时，育种时间为12月中旬，采取两促两练的练苗方法，其他种植条件均与实施例1相同；
[0068] 按照11月上、中旬的育种时间进行育苗得到的韭菜苗作为样品3，此时，育种时间为11月中旬，采取两促两练的练苗方法，其他种植条件均与实施例1相同；
[0069] 由图2可知，样品2比样品1的平均单数抽薹率有一定增加，花序规格也增大了，但是80%的样品的单株抽薹数没有变化，样品3比样品2的平均单数抽薹率大大增加，花序规格最大，且80%的样品的单株抽薹数增加了，这说明11月上、中旬采用两促两练的方法进行种植，韭菜的平均单株抽薹率最高，花序规格最大，80%的样品的单株抽薹数最多，为最适种植条件。
[0070] 为了探究常规育种方法和本发明采用的育种方法对韭菜新品种生育期、从单株扩繁到667 m2规模的时间和育种周期的影响，按照常规韭菜育苗的方法进行育种得到的产品作为对照组，此时，育种日期为2月中旬，练苗为一次练苗，先进行自交直至筛选出纯和性状不分离的植株，然后进行花序盘的组织培养，得到新品种，其他种植条件均与实施例1相同；
[0071] 按照实施例1的方法进行育种得到的产品作为实验组，此时，育种日期为11月中旬，练苗为两促两练的大温差练苗，一半花序盘进行组织培养，另一半进行自交筛选纯和形状不分离的植株，然后将不合格的植株对应的组培苗剔除，反复进行，直至筛选出性状不分离的新品种；
[0072] 由图3可知采用本发明所述的育种方法，能够把韭菜的生育期缩短1年，将优良单株扩繁到667 m2规模群体的时间缩短了2-3年，韭菜育种周期由传统的12-15年缩短到6-8年，加快了韭菜新品种的培育速度。
