本发明是关于治疗慢性气管炎药物的制备方法。

药物的主要原料黄柏果（又称黄菠萝果）系采自黄柏树（又称黄菠萝树）之果实。众所周知，黄柏树内皮为常用中药“黄柏”，果实尚未入药，而作为药用，治疗慢性气管炎的药物的制备方法国内外更未见报导。

慢性气管炎，目前尚无特效疗法，药物治疗措施大都停留在对症治疗的水平上。对症治疗药物包括抗感染、平喘、镇咳、祛痰四个方面，很多药物的作用均有局限性或付作用。如“日待因”是临床常用的镇咳药，但它们只适用于干咳，对于痰多的慢性气管炎不宜常用;比利时生产的“巯乙磺酸钠”是局部应用的速效、强效粘痰稀释剂，但可因局部刺激而产生咳嗽、气管痉挛;“舒喘灵”虽是平喘疗效好的新药，但易产生抗药性和手震颤等付作用;日本新药“利维多霉素”抗菌素的有效率约为70%左右，但为注射剂，不便于长期使用。

本发明人在采集中草药时，发现黄柏果，经自身试服有效无毒后，试用于治疗慢性气管炎病人取得显著疗效。经植化分析，黄柏果由挥发由、脂肪油、黄酮、生物碱、香精内酯、多糖、果胶、蛋白质等成份组成。黄柏果蒸馏提取的挥发油部份中，其活性成份主要为香味烯和香叶醇，经动物试验和临床试验，具有明显镇咳、祛痰功效;蒸馏后的残留物用水或有机溶剂提取的提取物，其活性成份为黄酮，主要有效单体为芸香和槲皮素，经动物试验和临床试验具有明显镇咳、祛痰、平喘、消炎抑菌功效。

本发明的目的在于提供一种具有镇咳，祛痰，平喘、消炎的治疗慢性气管炎的含黄柏果有效活性成份的药物的制备方法。

其生产方法是：将采集的黄柏树（又称黄菠萝树）的成熟果实-黄柏果（又称黄菠萝果）用水洗净、捣碎后，经加热蒸馏，提取挥发油，挥发油含量占黄柏果重量的0.7%～0.75%，其主要活性成份为香叶烯和香叶醇，其中香叶烯约占70%左右。经蒸馏后的残留物，用水提取、提取液过滤后，加热浓缩成稠膏，或用甲醇、乙醇、丙酮、乙醚类有机溶剂提取蒸馏后的残留物或水稠膏提取物，回收活性成份黄酮，黄酮约占黄柏果重量的2.5%～3%，其主要有效单体为芸香甙和槲皮素。

采用水提取物稠膏、有机溶剂提取物和/或挥发油，经加入医药上可接受的添加剂、填充剂及赋形剂，制成一定形状的片剂、胶丸、乳剂或糖浆。

本发明的明显效果和突出优点，将通过以下具体实施例及临床实验，进一步给以详细说明。

实施例1

配方：黄柏果    1000克

水    适量

方法：将黄柏果1000克用水洗净捣碎，装入带冷凝器的的蒸馏釜中，进行水蒸汽蒸馏，蒸到油层不增加为止，收集馏出液，用分液漏斗分去水层，得到淡黄色挥发油7.0-7.5克，d2020＝0.8392、n20D＝1.4726，其主要活性成份为香叶烯和香叶醇。

将所得的挥发油用无水硫酸钠脱水后，进行常压分馏，得到如下馏份：

馏份Ⅰ：常压沸点171℃得率70%-75%;

馏份Ⅱ：常压沸点229℃～230℃得率2%-3%。

馏份Ⅰ成份鉴定-香叶烯的证明：

Ⅰ.红外光谱：此成份的红外吸光谱ν液膜max（μ）。指出在3.36、3.46、3.55、6.25、

6.88、7.25、10.04、11.15微米等部位呈现吸收峰，含甲基、亚甲基、末端双键，共轭双键，三取代双键。

Ⅱ.核磁共振谱δPPmmax1.56、1.64、2.12、2.17、4.70、5.30

6.25（TMS.CCl4.60MC）

PPm

max    位置    峰形    氢数    J

1.56    9    S    3

1.64    8    S    3

2.12    4    S    2

2.17    5    S    2

4.70    6.1.10    m    5ABX系统-X部分

5.30    JAX＝18

6.25    2    q    1    JBX＝10

Ⅲ.质谱（m/e）41、69、93、67、77、53、136（M）香叶烯分子量计算值136.24。上述红外、核磁及质谱数据与文献记载相同。

二.馏份Ⅱ成份鉴定-香叶醇的证明

Ⅰ红外吸收光谱 ν液膜max（μ）3.10、3.5、6.25、6.9、7.22、

10.09、11.15、11.35微米等部位呈现吸收峰，指示含甲基，非共轭双键、亚甲基、三取代双键等。上述红外光谱与文献记载数据符合。

Ⅱ.核磁共振谱δPPmmax1.55、1.65、5.05、5.35（TMG.CCl4，60MC）

Ⅲ.质谱（m/e）：41、69、29、27、28、154（M）香叶醇分子量计算值为154.24。

以上光谱数据与文献中香叶醇的核醇的核磁及质谱数据符合，依次证明成份乙为香叶醇，结构式为：

实施例2

配方：实施例1蒸馏后的残留物

水    适量

方法：将实施例1蒸馏后的残留物，按常法加水煎煮三次，煎煮液合并过滤，加热浓缩、干燥、粉碎得到土黄色提取物25-30克，主要活性成份为粗黄酮粉末，其有效单体为芸香甙和槲皮素。

结晶Ⅰ芸香甙和结晶Ⅱ槲皮素的分离和鉴别：

将粗黄酮粉未1.5克，加适量蒸馏水加热溶解，放冷。用乙醚提取3次，合并提取液，加无水硫酸钠干燥。回收乙醚后蒸干，得黄色残渣。加50%乙醇适量加热溶解，放置析出黄色结晶，用50%乙醇再重结晶得黄色针晶（结晶Ⅱ）50毫克，收率3.3%。

水层减压蒸干，加适量甲醇溶解，再加适量聚酰胺粉拌匀，蒸去甲醇。此样品经聚酰胺柱层析，60%乙醇洗脱，收集黄色部分，浓缩至 小体积，放置析出淡黄色结晶。

用蒸馏水重结晶得淡黄色针晶（结晶Ⅰ）280毫克，收率13.5%。

结晶Ⅰ的鉴定：

结晶Ⅰ为淡黄色针晶，熔点177-179℃。三氯化铁、盐酸-镁粉及α-萘酚反应均为阳性。锆-柠檬酸反应阴性。知其为黄酮，并示黄酮母核3位无游离羟基。紫外光下呈暗线色，氨熏后不变。紫外光谱λMe OHmaxnm：263;360;加三氯化铝为274，415;加醋酸钠为：263，374;加硼酸-醋酸钠为260，373。表明黄酮母核5位和7位均有羟基并有邻位二羟基存在。

红外光谱νKBrmaxcm-1：3400（OH），1650（C＝O）1600，1500，1450（C6H5-）与标准芸香甙红外图谱完全一致。

结晶Ⅰ用10%硫酸水解得甙元为黄色针晶，熔点300℃以上。其纸层析、薄层层析及红外光谱与槲皮素完全一致。糖的部分用三种展开剂纸层析检查，其比移值与标准葡萄糖和鼠李糖完全一致。证明结晶Ⅰ为芸香甙。

结晶Ⅱ的鉴定：

结晶Ⅱ为黄色针晶，熔点300℃以上。三氯化铁和盐酸-镁粉反应阳性。α-萘酚反应阴性。锆-柠檬酸反应阳性。知其为黄酮甙元，并示黄酮母核3位有游离羟基。质谱m/e302（M），236，273，257，245，229，167，153，142，137，128，121。紫外λMe OHmaxnm：255，371;加三氯化铝为268，434;加醋酸钠为267，389;加硼酸-醋酸钠为259.5，382。 表明结晶Ⅱ黄酮母核5位和7位均有羟基，并示有邻位二羟基存在。

红外光谱νKBrmaxcm-13300（-OH），1660（C＝O），1610，1510，1460（C6H5）。结晶Ⅱ的纸层析、薄层层析及红外光谱与芸香甙水解得甙元槲皮素完全一致，证明结结Ⅱ为槲皮素。

实施例3

配方：实施例1蒸馏后的残留物

50%    乙醇    适量

方法：将实施例1蒸馏后的残留物加入3-10倍体积的50%乙醇，在加热回流下提取三次，提取液合并，过滤，滤液加热浓缩，干燥、粉碎，得到提取物黄酮25-30克，其主要活性成份为黄酮，其有效单体为芸香甙和槲皮素。结构证明如实施例2所示。

实施例4

配方：黄柏果    200克

淀粉    20克

药用硬脂酸镁    0.2克

制成    100片

方法：

黄柏果200克洗净捣碎，装入蒸馏器中密闭，常压蒸馏至油层不增加为止，收集馏出液，在分液漏斗中分去水层，得到挥发油：1.4-1.5克备用。蒸馏后的残留物用常法加水煎煮三次，煎煮液合并，加热浓缩至稠膏，加入淀粉20克搅拌均匀成软材、制粒、干燥，喷入上述挥发油，加入0.2克药用硬脂酸镁混合均匀、压片、包糖衣制成100粒片剂。

实施例5

配方：黄柏果    500克

淀粉    50克

药用硬脂酸镁    1克

制成    250克

方法：

黄柏果500克洗净捣碎，装入蒸馏器中，进行水蒸汽蒸馏，直至油层不增加为止，收集馏出液，在分液漏斗中分去水层，得到淡黄色挥发油3.70-3.75克备用。蒸馏后的残留物用常法加水煎煮三次，煎煮液合并，加热浓缩至稠膏，加入5-10倍于稠膏的50%乙醇提取三次，提取液合并、。加热浓缩，蒸去溶剂，得到提取物经粉碎得到提取物干粉，12.5-15克再加入淀粉50克，喷入上述挥发油，并加入药用硬脂酸镁1克，搅拌混合均匀，压片、包糖衣制成250粒片剂。该方法重复几次。

实施例6

配方：实施例5所述挥发油2.5克或5.0克

药用液体石蜡5.5克或3.0克

赋形剂甘油明胶及公用色素    适量

各制成    100粒胶丸

方法：将适量药用液体石蜡与甘油明胶及少量食用色素分别加入2.5克或5.0克挥发油中石制成100粒无缝胶丸。

实施例7

配方：实施例5所述挥发油1毫升

药用乳化剂吐温-80    0.5毫升

蒸馏水    适量

方法：

取1毫升蒸馏水加吐温-80    0.5毫升，研匀成浓溶液，然后将挥发油1毫升逐滴加入，边加边研，油加完后形成初乳，再逐步加水，边加边搅拌制成乳液1000毫升。

实施例8

配方：黄柏果    500克

蔗糖    500克

药用苯甲酸钠    3克

水    适量

制得糖浆剂    1000毫升

方法：取黄柏果500克洗净，装入蒸馏器中，进行水蒸汽蒸馏，直至油层不增加为止，收集馏出液，在分液漏斗中分去水层，得到淡黄色挥发油3.70-3.75克备用。蒸馏后残留物用常法加水煎煮三次，煎煮液过滤后合并，加热浓缩至600毫升，趋热加入500克蔗糖，搅拌溶解，加热至沸，趁热过滤，放冷至室温加入上述挥发油及冷开水，稀释至1000毫升，搅拌均匀制成糖浆。

实施例9

配方：实施例2或例3所述的提取物12.5克-15克

淀粉    50克

药用硬脂酸镁    0.5克

蒸馏水    适量

制成    250粒片剂

方法：将12.5克-15克提取物加入50克淀粉及适量蒸馏水制粒、干燥后、加入0.5克药用硬脂酸0.5克，混合均匀、压片、包糖衣，制成250粒片剂。

实施例10

配方：黄柏果    500克

蔗糖    1000克

协合剂薄荷适量

方法：提取挥发油的方法如实施例8所示，蒸馏后的残留物用5倍的水或50%乙醇提取三次，提取液合并、加热浓缩、干燥、粉碎成粉，加入1000克蔗糖及适当的协合剂薄荷适量混合均匀，再喷入挥发油3.5-3.75克再次混合均匀，压制成200-1000片。

药理实验

黄菠萝果粗提物药理实验证明，镇咳强度为对照组150%以上，祛痰效果在200%，说明有较好的镇咳、祛痰作用。其毒性方面，在亚急性毒性实验中，大剂量组相当于人用量的50倍，均未发现由药物毒性引起的病变，故可认为是毒性低的镇咳祛痰药物。

黄菠萝果挥发油药理实验证明，总油及香叶烯均有明显的祛痰作用，其作用强度随剂量增大而增强。总油及香叶烯均有镇咳作用，其作用强度不如可待因（60毫克/公斤）。小鼠急性毒性：总油LD50为8.36±0.82毫升/公斤（d＝0.95），香叶烯LD50＞6毫升/公斤。家犬亚急性毒性实验表明，按临床用药量的50倍时未见毒性改变，而大剂量按0.3毫升/公斤剂量（相当于临床用量的100倍）服药22天时，动物出现肝细胞空泡变性及部分小灶性坏死。大鼠亚急性毒性实验表明，按1.6毫升/公斤剂量服药21天时，对动物体重增长有一定影响。病理检查结果未见由药物所致的明显改变。

临床试验

对黄菠萝果提取物糖衣片、黄菠萝果挥发油胶丸两种剂型进行了临床验证。黄菠萝果提取物糖衣片观察治疗慢性气管炎病人307例，10天为一疗程，连服30天（其中有56例服20天），有效率94.79%，显控率73.29%。其中单纯型219例，有效率94.06%，显控率73.29%，喘息 型88例，有效率96.59%，显控率78.41%。

黄菠萝果挥发油胶丸观察治疗慢性气管炎病人348例，连服30天，有效率97.41%，显控率75%。其中单纯型310例，有效率97.74%，显控率75.81%，喘息型38例，有效率94.74%，显控率68.42%。

以上两种剂型病人服药后多在三日内起效，咳嗽逐渐减轻，痰由粘变稀薄而易咯出，痰量逐渐减少，有些病人咳黄色痰，多数逐渐转白，呼吸通畅，气喘好转乃至消失。有少数病人治疗前后经肺活量测定，绝大多数有不同程度的增加。有少数病人服药前白细胞数增高，治疗后多数病人转为正常。少数病人治疗前后进行了痰细胞学、痰细菌学检查，治疗后经痰细胞学检查证明，柱状上皮细胞有明显减少，痰细菌学检查证明致病菌有明显下降。

病理实验

用生后六周大白鼠复制成慢性气管炎模型之后，用黄菠萝果提取物进行治疗，实验结果证明：黄菠萝果提取物具有较好的镇咳用作。有减轻嗜中性白细胞和浆细胞浸润的作用。对腺体肥大、增生和腺粘液化等均无明显的作用。

以上述同样模型，用黄菠萝果挥发油进行治疗，实验结果证明：黄菠萝果挥发油具有较好的镇咳作用。具有明显的减少慢性气管炎时支气管粘膜上皮杯状细胞数目的作用。具有减轻嗜中性白细胞浸润的趋势。对气管腺体增生、肥大及粘液化无明显影响，对支气管淋巴组织增生无改善作用。说明黄菠萝挥发油具有较好的镇咳，祛痰作用和一定的消炎作用。此点与临床观察相一致。

黄菠萝果具有起效快，疗效好、作用全面、付作用小、毒性低、服用安全、药源广、采制容易、成本低、不损害树木为其特点，便于推广使用。