| 序号 | 专利名 | 申请号 | 申请日 | 公开（公告）号 | 公开（公告）日 | 发明人 |
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| 181 | 普陀水仙多倍体植株的培育方法 | CN201910650013.6 | 2019-07-18 | CN110235780B | 2022-07-29 | 苗增良 |
| 本发明提供普陀水仙多倍体植株的培育方法，属于生物技术领域，该多倍体植株通过同基因的三倍体祖代的鳞茎片中的基因组倍增获得，基因组倍增步骤为：将鳞茎片进行应激预培养，再将磁场作用于鳞茎片，在磁场下用诱变剂接触鳞茎片，产生多倍体鳞茎片，将多倍体鳞茎片培育生根并培养成多倍体植株；培养所得多倍体植株的生长速度至少相同于同基因的三倍体祖代。本发明提供的培育方法能打破细胞耐受性引起的多倍体诱导抑制作用，缓解诱变剂对染色体的凝缩作用以降低非整倍体细胞生成率，降低嵌合体生成几率以提高嵌合体分离及纯化速率，提升内源生长素生成量和积累量，增加多倍体植株中脯氨酸及可溶性蛋白质积累量以提升生存能力，且不出现晚熟性状。 | ||||||
| 182 | 一种诱导大蒜多倍体或突变体的方法 | CN202110518694.8 | 2021-05-12 | CN113170728B | 2022-07-19 | 刘头明; 何巧芸; 王延周; 李富 |
| 本发明公开了一种诱导大蒜多倍体或突变体的方法，包括如下步骤：首先，沿着大蒜鳞茎腹部的一侧切除大蒜鳞茎至根部以上3‑8mm处，然后剔除鳞茎内侧的鳞芽，直至露出根基底部的生长点；然后将蒜瓣用诱变剂进行诱导；再将诱导后的蒜瓣直接种植在大田里，即得到大蒜多倍体或突变体；或将诱导后的蒜瓣制备成无菌苗，利用无菌苗生长点长出来的叶片和根部制取多倍体愈伤组织，即得到大蒜多倍体。本发明的方法，鳞茎切口带有鳞茎组织，自身带营养组织，在诱导突变体时可直接种在地里，存活率高；还可以将秋水仙素浸泡过的大蒜鳞茎切口制备无菌苗，利用无菌苗生长点长出来的叶片和根部可制取多倍体愈伤组织，不需要种在大田即可得到大蒜多倍体。 | ||||||
| 183 | 牛大力多倍体的诱导方法 | CN202010613078.6 | 2020-06-30 | CN111758552B | 2022-02-18 | 韦荣昌; 黄小华; 郑虚; 刘国敏; 覃维治 |
| 本发明公开了一种牛大力多倍体的诱导方法，其方法为牛大力花朵授粉后采用氨磺灵处理，待果实成熟，收获果实、播种育苗及染色体鉴定即可。本发明提供的多倍体诱导方法具有见效快、成本低、操作简单、方便实施、诱导效率高、不产生嵌合体等特点。 | ||||||
| 184 | 一种人工诱导多倍体泥鳅的方法 | CN202111371545.X | 2021-11-18 | CN113973779A | 2022-01-28 | 曹小娟; 张运邦; 高坚 |
| 本发明公开了一种人工诱导多倍体泥鳅的方法。通过CRISPR/Cas9技术构建cdk1基因敲除纯合子二倍体泥鳅(即cdk1‑/‑泥鳅)，然后利用cdk1‑/‑雄性泥鳅分别与天然二倍体(2N)和四倍体(4N)雌性泥鳅(即cdk1‑/‑×2N WT♀；cdk1‑/‑×4N WT♀)进行人工繁殖。通过后裔倍性鉴定表明cdk1‑/‑×2N WT♀后裔中有5.3％的三倍体鱼，cdk1‑/‑×4N WT♀后裔中有14.7％的四倍体鱼。通过对cdk1‑/‑进行精巢染色体标本制备和观察，我们发现有22.2％的精母细胞属于未减数配子(50个二价体；天然二倍体为25个二价体)。鱼类人工多倍体研制长期以来是水产界追踪研究的热点和难点，本发明为泥鳅的生产应用提供了坚实的理论和技术支持。 | ||||||
| 185 | 一种西瓜多倍体诱导及鉴定方法 | CN202110828318.9 | 2021-07-22 | CN113632728A | 2021-11-12 | 江海坤; 高优洋; 严从生; 马绍鋆; 张其安; 方凌; 俞飞飞; 王明霞 |
| 本发明涉及一种西瓜多倍体诱导及鉴定方法，包括以下步骤：(1)、多倍体诱导；(2)、形态学鉴定；(3)、流式细胞术鉴定。其利用诱变剂秋水仙素处理西瓜子叶，以期获得西瓜较高的多倍体诱导率，为西瓜种质资源的创制提供技术支持；同时对西瓜倍性鉴定的方法进行改良，为下一步大规模高效鉴定提供了基础和依据。 | ||||||
| 186 | 一种明叶藓多倍体的培育方法 | CN202110811086.6 | 2021-07-19 | CN113475394A | 2021-10-08 | 刘莉; 李青; 温从发; 黄钧超 |
| 本发明涉及一种明叶藓多倍体的培育方法，属于多倍体诱导技术领域。本发明所述方法包括下述步骤：使用秋水仙素溶液对明叶藓原丝体进行浸泡处理，得到诱变后的明叶藓原丝体；将诱变后的明叶藓原丝体连续继代3次，得到继代后的原丝体；对继代后的原丝体分化出的配子体进行倍性鉴定，鉴定得到基因组加倍的突变体；对基因组加倍的突变体进行5次继代，筛选出基因组加倍且稳定遗传的突变体；观察基因组加倍且稳定遗传的突变体的表型，筛选具有全新表型的明叶藓突变体作为明叶藓新品系。本发明操作简单，能够降低嵌合体发生率，所得到的多倍体遗传稳定。 | ||||||
| 187 | 一种培育多倍体杨树的方法及其应用 | CN202011019157.0 | 2020-09-23 | CN112056212B | 2021-08-31 | 王君; 钟宇航; 李代丽 |
| 本发明涉及一种培育多倍体杨树的方法及其应用，所述方法包括将杨树枝条插于培养基质中，在15～25℃、50～80％相对湿度下培养3～10天，在所述杨树枝条上切口形成愈伤组织；使用多倍体诱变剂处理所述愈伤组织至诱变充分，解除处理后继续培养。本发明发现，杨树扦插枝条上切口在适宜的温湿条件下培养可以形成愈伤组织，进一步施加多倍体诱变剂处理即可实现多倍体杨树的培育，诱导率达到42.9％左右。本发明解决了以往杨树体细胞染色体加倍过程或依赖胚胎学观察或依赖组织培养等技术的问题，具有易操作、成本低廉、诱导效率高、保存率高等优点，而且可保证诱导获得的多倍体当年成苗，是杨树体细胞染色体加倍的理想途径。 | ||||||
| 188 | 一种诱导大蒜多倍体或突变体的方法 | CN202110518694.8 | 2021-05-12 | CN113170728A | 2021-07-27 | 刘头明; 何巧芸; 王延周; 李富 |
| 本发明公开了一种诱导大蒜多倍体或突变体的方法，包括如下步骤：首先，沿着大蒜鳞茎腹部的一侧切除大蒜鳞茎至根部以上3‑8mm处，然后剔除鳞茎内侧的鳞芽，直至露出根基底部的生长点；然后将蒜瓣用诱变剂进行诱导；再将诱导后的蒜瓣直接种植在大田里，即得到大蒜多倍体或突变体；或将诱导后的蒜瓣制备成无菌苗，利用无菌苗生长点长出来的叶片和根部制取多倍体愈伤组织，即得到大蒜多倍体。本发明的方法，鳞茎切口带有鳞茎组织，自身带营养组织，在诱导突变体时可直接种在地里，存活率高；还可以将秋水仙素浸泡过的大蒜鳞茎切口制备无菌苗，利用无菌苗生长点长出来的叶片和根部可制取多倍体愈伤组织，不需要种在大田即可得到大蒜多倍体。 | ||||||
| 189 | 一种人工合成多倍体小麦的方法 | CN202110269264.7 | 2021-03-12 | CN112753573A | 2021-05-07 | 李俊; 王琴; 刘泽厚; 万洪深; 杨凡; 杨武云; 杨宁 |
| 本发明公开了一种人工合成多倍体小麦的方法，解决了现有技术中获得人工合成多倍体小麦的方法成功率不高的技术问题。该方法利用遗传稳定的父本小麦材料与遗传稳定的母本材料进行有性杂交获得成熟的杂交种子或者杂交种子幼胚；将杂交种子进行发芽培养，或者将杂交种子幼胚进行离体培养，获得植株幼苗；植株幼苗移栽到田间自然生长，幼苗进行染色体加倍处理，染色体加倍处理后的幼苗移栽到低温环境的田间自然生长，后期获得新合成的人工合成多倍体小麦，然后自交1‑2代，获得稳定的新人工合成多倍体小麦。本发明提高了人工合成多倍体小麦的成功效率，加倍成功植株率可以达到95%以上，为创制小麦新材料，拓宽了小麦种质资源的遗传基础。 | ||||||
| 190 | 一种蒙桑多倍体种苗的培养方法 | CN201910614845.2 | 2019-07-09 | CN110199880B | 2021-03-23 | 赵泉胜; 铁英; 王娟; 白婷玉; 杨成林 |
| 本发明提供了一种蒙桑多倍体种苗的培养方法，该方法包括对蒙桑组培苗选取茎段后进行预培养，然后对开始产生愈伤组织的茎段采用秋水仙素诱导得到多倍体，经过增殖培养和生根培养得到蒙桑的多倍体幼苗。该方法能够克服蒙桑组织培养褐化现象严重、多倍体诱导率低、诱导后嵌合体较多的问题。 | ||||||
| 191 | 一种植物多倍体的诱导方法 | CN202011173444.7 | 2020-10-28 | CN112088774A | 2020-12-18 | 张源源; 黄肖; 王祥军; 李维国; 张晓飞; 高新生; 位明明 |
| 本发明提供一种植物多倍体的诱导方法，包括以下步骤：外植体花药的采集、愈伤组织诱导、体细胞胚诱导、多倍体诱导、再生植株诱导、倍性鉴定步骤，利用本发明的培养方法，有效的在橡胶树花药离体培养获得体细胞胚的基础上，科学配置培养基，合理调节培养条件，能快速、高效的获得具有优良性状的橡胶树多倍体。 | ||||||
| 192 | 一种培育多倍体杨树的方法及其应用 | CN202011019157.0 | 2020-09-23 | CN112056212A | 2020-12-11 | 王君; 钟宇航; 李代丽 |
| 本发明涉及一种培育多倍体杨树的方法及其应用，所述方法包括将杨树枝条插于培养基质中，在15～25℃、50～80％相对湿度下培养3～10天，在所述杨树枝条上切口形成愈伤组织；使用多倍体诱变剂处理所述愈伤组织至诱变充分，解除处理后继续培养。本发明发现，杨树扦插枝条上切口在适宜的温湿条件下培养可以形成愈伤组织，进一步施加多倍体诱变剂处理即可实现多倍体杨树的培育，诱导率达到42.9％左右。本发明解决了以往杨树体细胞染色体加倍过程或依赖胚胎学观察或依赖组织培养等技术的问题，具有易操作、成本低廉、诱导效率高、保存率高等优点，而且可保证诱导获得的多倍体当年成苗，是杨树体细胞染色体加倍的理想途径。 | ||||||
| 193 | 一种五倍子树多倍体育种方法 | CN202010720970.4 | 2020-07-24 | CN111713402A | 2020-09-29 | 袁扬; 王胤晨; 赵恬; 姚丹; 张锦华; 张定红 |
| 本发明公开一种五倍子树多倍体育种方法，其主要采用不同浓度的诱导剂对选取的五倍子种子或幼苗子叶或培养基繁殖材料进行多倍体诱导，其操作简单易行，诱导效果显著。且本发明采用了对植物微管有更高的亲和性的诱导剂替代常用的毒性较大并对人体有害的诱导剂秋水仙素，其在较低的浓度下便有较高的微管蛋白解聚能力，对人体和植物材料的毒性较低，安全性高且诱导的效率高。 | ||||||
| 194 | 一种石斛多倍体的苗床及其制备方法 | CN201711086423.X | 2017-11-07 | CN108017421B | 2020-07-31 | 余茂耘 |
| 本发明公开了一种石斛多倍体的苗床及其制备方法，涉及植物苗床技术领域。本发明的苗床，包括以下重量份的组分：水果果皮40～60份、甘蔗叶20～40份、家禽粪便15～30份、河底滤泥10～15份、凹凸棒土‑薰衣草精油复合物12～20份、腐殖质5～10份、磷酸氢二钾5～10份、硫酸镁1～5份、硫酸锌5～10份、花生麸1～5份、七水硫酸亚铁1～2份、硼砂2～4份、过磷酸钙3～6份、防臭剂1～5份；其制备方法包括物料混合、一期发酵、二期发酵。本发明的苗床具有良好的透水性与透气性，使得育苗床不易板结，能够显著提高石斛多倍体的扩繁速度、成活率、有效成分含量，降低病虫害发生率。 | ||||||
| 195 | 普陀水仙多倍体植株的培育方法 | CN201910650013.6 | 2019-07-18 | CN110235780A | 2019-09-17 | 苗增良 |
| 本发明提供普陀水仙多倍体植株的培育方法，属于生物技术领域，该多倍体植株通过同基因的三倍体祖代的鳞茎片中的基因组倍增获得，基因组倍增步骤为：将鳞茎片进行应激预培养，再将磁场作用于鳞茎片，在磁场下用诱变剂接触鳞茎片，产生多倍体鳞茎片，将多倍体鳞茎片培育生根并培养成多倍体植株；培养所得多倍体植株的生长速度至少相同于同基因的三倍体祖代。本发明提供的培育方法能打破细胞耐受性引起的多倍体诱导抑制作用，缓解诱变剂对染色体的凝缩作用以降低非整倍体细胞生成率，降低嵌合体生成几率以提高嵌合体分离及纯化速率，提升内源生长素生成量和积累量，增加多倍体植株中脯氨酸及可溶性蛋白质积累量以提升生存能力，且不出现晚熟性状。 | ||||||
| 196 | 一种蒙桑多倍体种苗的培养方法 | CN201910614845.2 | 2019-07-09 | CN110199880A | 2019-09-06 | 赵泉胜; 铁英; 王娟; 白婷玉; 杨成林 |
| 本发明提供了一种蒙桑多倍体种苗的培养方法，该方法包括对蒙桑组培苗选取茎段后进行预培养，然后对开始产生愈伤组织的茎段采用秋水仙素诱导得到多倍体，经过增殖培养和生根培养得到蒙桑的多倍体幼苗。该方法能够克服蒙桑组织培养褐化现象严重、多倍体诱导率低、诱导后嵌合体较多的问题。 | ||||||
| 197 | 一种培育多倍体多肉植物的方法 | CN201910315567.0 | 2019-04-19 | CN109997689A | 2019-07-12 | 谢宗宜 |
| 本发明属于植物培育技术领域，具体涉及一种培育多倍体多肉植物的方法，具体步骤如下：选取长出不定根的多肉叶片放入液体MS培养基中再放入4℃的冷藏室内，诱导培养36h；取所得叶片根细胞的四倍体细胞，检测其细胞膜共振频率，通电同时用超声波共振照射筛选培养；其后将所得叶片培育至发育长出幼苗时，取植株幼苗叶片检测细胞膜共振频率，用超声波共振照射与木质素培养基培养；培育所得成熟一代植株群体为F1，筛选F1植株，批量培育得第二代植株群体F2，选择纯四倍体F2为目标幼苗。通过本申请的处理方法既可以提高嵌合体筛选率，提高多倍体生根、发育速率，同时达到植株含养量更高，根系更为发达，且具有稳定遗传性的效果。 | ||||||
| 198 | 一种基于负压技术的多倍体育种方法 | CN201910221005.X | 2019-03-22 | CN109924127A | 2019-06-25 | 张林; 王郑昊; 王峰; 孙忠奎; 张安琪; 程甜甜; 仲凤维; 李承秀; 谢学阳; 乔谦 |
| 本发明公开了一种基于负压技术的多倍体育种方法，包括以下步骤：将10月底至11月初收集的种子，经沙藏出芽，并挑选萌芽幼苗；将秋水仙碱、链黑霉素、硝酸钠、磷酸二氢钾、乙二胺四乙酸和氯化锂溶于水，然后加入硅溶胶搅拌混合，制得诱变剂；将上述挑选的萌芽幼苗置于盛有诱变剂的培养皿中，并将培养皿置于负压系统的负压罐内，进行处理；将处理好的幼苗置于固体培养基中进行培养，待长出新叶后进行移栽。本发明提供的方法获得的植株叶片厚，叶色深，成活率高，且操作简单，成本低。 | ||||||
| 199 | 川贝母多倍体脱毒苗的培养方法 | CN201810659877.X | 2018-06-25 | CN109076956A | 2018-12-25 | 谢雨欣 |
| 本发明公开了川贝母多倍体脱毒苗的培养方法，将川贝母无菌鳞茎接种到愈伤组织诱导培养基中培养，然后放入MS诱导培养基中培养至川贝母鳞茎的基部有形状粗大的不定根产生；切取根尖生长点处区域的细胞，将其接入愈伤组织诱导培养基中培养得多倍体脱毒愈伤组织；将病毒检测合格的多倍体愈伤组织接入多倍体鳞茎芽诱导MS培养基中培养得川贝母多倍体鳞茎芽；将多倍体鳞茎芽作为无根苗生根培养得川贝母多倍体脱毒苗；炼苗和移栽。有益效果为：本发明培养方法能够培育出品质优良、生长速度快、有效组分含量高和抗逆性强的川贝母多倍体脱毒苗，成本低、诱导速率和诱导率高、培育周期短，得到质量较高的川贝母多倍体脱毒苗。 | ||||||
| 200 | 一种高效诱导百合多倍体的方法 | CN201810542205.0 | 2018-05-30 | CN108713498A | 2018-10-30 | 符勇耀; 杨利平 |
| 本发明公开了一种高效诱导百合多倍体的方法，包括以下步骤：1）出芽诱导；2）秋水仙素溶液配制；3）多倍体诱导；4）生根培养；5）倍性鉴定。本发明方法简便易行，处理时间短，诱变率较高，只需要对轻质基质中生长的百合新芽进行诱变即可，与现在通用的诱变方法相比，本发明不需要组培和无菌操作，降低了成本，也避免了一般多倍体诱导过程中容易污染、操作条件严格和过程繁琐耗时的问题，便于推广应用，可以作为培育百合新种质的重要方法，具有良好的应用前景。 | ||||||
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