色谱材料和其制备方法

申请号 CN201580053841.1 申请日 2015-10-16 公开(公告)号 CN107106931A 公开(公告)日 2017-08-29
申请人 戴安公司; 赛默电子制造有限公司; 发明人 刘晓东; R·T·威廉姆斯; 崔晓;
摘要 本 发明 提供一种包含共价结合到衬底的两性离子配体的色谱材料,所述配体优选地具有式II:其中R1、R2、R3独立地选自被配置成用于连接到所述衬底中的衬底 原子 的 氧 原子、被配置成用于连接到相邻配体的 硅 原子的氧原子、羟基、卤素原子、烷氧基、二烷基 氨 基、酰基、烷基或芳基;L1、L2和L3独立地为疏 水 性部分;各含有2到30个 碳 原子,其中L1、L2和L3的组合链长中存在至少10个碳原子;X为O原子、S原子、酰胺基或磺酰胺基;n为0或1;R4、R5独立地选自氢原子或含有1到20个碳原子的 烃 部分;并且Rf为包含磺酸、 羧酸 或 磷酸 官能团的带负电荷部分。
权利要求

1.一种色谱材料,其包含共价结合到衬底的两性离子配体,其中所述配体具有通式I:
其中所述配体通过所述烷基结合到所述衬底,所述离子基团彼此具有相反电荷,并且所述疏性连接基团的组合链长中存在至少10个原子
2.根据权利要求1所述的色谱材料,其中所述配体具有式II:
其中
R1、R2、R3独立地选自
被配置成用于连接到所述衬底中的衬底原子的原子,
被配置成用于连接到相邻配体的硅原子的氧原子,
羟基,
卤素原子,
烷氧基,
二烷基基,
酰基,
烷基,或
芳基;
L1、L2和L3独立地为疏水性部分;各含有2到30个碳原子,其中L1、L2和L3的组合链长中存在至少10个碳原子;
X为O原子、S原子、酰胺基或磺酰胺基;
n为0或1;
R4、R5独立地选自氢原子或含有1到20个碳原子的部分;并且
Rf为选自由以下组成的群组的带负电荷部分:磺酸、羧酸磷酸官能团。
3.根据权利要求2所述的色谱材料,其中所述烷氧基为甲氧基、乙氧基或丙氧基;所述烷基为被取代或未被取代的烷基或被取代或未被取代的杂烷基;所述芳基为被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的杂芳基。
4.根据权利要求2或3所述的色谱材料,其中R1、R2、R3基团中的至少一个为离去基。
5.根据任一前述权利要求所述的色谱材料,其中所述疏水性连接基团的组合链长中存在至少11个碳原子。
6.根据任一前述权利要求所述的色谱材料,其中所述疏水性连接基团各为直链同烷基。
7.根据任一前述权利要求所述的色谱材料,其中所述疏水性连接基团中的至少一个包含在所述链中具有至少8个碳原子的同烷基。
8.根据权利要求7所述的色谱材料,其中所述疏水性连接基团中的至少一个包含在所述链中具有8到12个碳原子的同烷基。
9.根据任一前述权利要求所述的色谱材料,其中所述配体的中央部分处的离子基团为中央离子基团,所述中央离子基团具有带正电荷基团,所述中央部分在所述两个疏水性连接基团之间,并且所述配体的末端部分处的另一个离子基团为末端离子基团,所述末端离子基团具有带负电荷基团。
10.根据权利要求2到9中任一权利要求所述的色谱材料,其中R1、R2、R3基团中的至少一个为烷氧基、二烷基氨基或卤素原子。
11.根据权利要求2到10中任一权利要求所述的色谱材料,其中L1、L2和L3独立地为选自
1 2 3
被取代或未被取代的烷基和被取代或未被取代的芳基的疏水性部分,其中L、L和L的组合链长中存在至少11个碳原子。
12.根据权利要求2到11中任一权利要求所述的色谱材料,其中所述烃部分为具有1到4个碳原子的烷基。
2 3
13.根据权利要求2到12中任一权利要求所述的色谱材料,其中L和L各为同烷基。
14.根据权利要求2到13中任一权利要求所述的色谱材料,其中L2和L3中的至少一个包含在所述链中具有至少8个碳原子的同烷基。
15.根据权利要求2到14中任一权利要求所述的色谱材料,其中L2和L3中的至少一个包含在所述链中具有8到12个碳原子的同烷基。
16.根据任一前述权利要求所述的色谱材料,其中所述衬底为二氧化硅衬底。
17.一种色谱柱,其填充有根据任一前述权利要求所述的材料,用于液相色谱或固相萃取。
18.一种制备色谱材料的方法,其包含:通过共价结合将含有烷基或芳基部分和氨基官能团的硅烷基配体共价连接到衬底表面;随后使所述共价连接的硅烷基配体上所含有的所述氨基官能团与1,3-丙烷磺内酯反应以形成所述色谱材料。
19.一种制备色谱材料的方法,其包含:使含有烷基或芳基部分和氨基官能团的硅烷基配体与1,3-丙烷磺内酯反应以形成硅烷基配体;所形成的硅烷基配体包括反相部分和两性离子部分;随后通过共价结合使所形成的硅烷基配体与衬底表面反应以形成所述色谱材料。
20.一种配体,其具有通式I:
其中所述硅烷基为用于结合到衬底的活化硅烷基,所述离子基团彼此具有相反电荷,并且所述疏水性连接基团的组合链长中存在至少10个碳原子。
21.根据权利要求20所述的配体,其中所述配体具有式II:
其中
R1、R2、R3独立地选自羟基、卤素原子、烷氧基、二烷基氨基、酰基、烷基或芳基;
L1、L2和L3独立地为疏水性部分;各含有2到30个碳原子,其中L1、L2和L3的组合链长中存在至少10个碳原子;
X为O原子、S原子、酰胺基或磺酰胺基;
n为0或1;
R4、R5独立地选自氢原子或含有1到20个碳原子的烃部分;并且
Rf为选自由以下组成的群组的带负电荷部分:磺酸、羧酸和磷酸官能团。

说明书全文

色谱材料和其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及包括液相色谱和固相萃取的色谱样品分离的领域并且具体来说,其涉及在色谱样品分离中用作固定相的材料和材料的合成。本发明尤其涉及用作混合型固定相的材料。本发明进一步涉及含有固定相的色谱柱和其应用。

背景技术

[0002] 液相色谱(LC)(例如HPLC与UHPLC)和固相萃取(SPE)通常地用于分析和制备色谱应用两者。在这些色谱技术中,通过将液体流动相中的样品输送通过柱中的固定相,从而由于每个组分的流动相和固定相之间不同的分配(即组分具有不同的分配系数)使得样品分离到其组分中来实现包含组分混合物(也被称为分析物)的样品的分离。固定相通常以颗粒床的形式填充在柱内,或者以单体材料的形式保持在柱中。
[0003] 无孔颗粒床具有相对较低样品容量。因此,通常使用含有孔隙的网状结构的多孔颗粒来增加固定相的表面积并由此改良分离的容量。多孔颗粒可以是完全多孔的,其中孔隙延伸贯穿颗粒的主体。作为完全多孔颗粒的一个替代方案,近年来已使用所谓的熔融核颗粒,其也被称为表面多孔颗粒。这些颗粒为具有无孔核(也被称为熔融或固体核)的颗粒并且仅在围绕无孔核的外层或区域中是多孔的。颗粒通常用作固定相,作为无孔、完全多孔或表面多孔颗粒中的任一者。
[0004] 针对分析物的固定相的选择性主要通过柱化学性质来调节,其在LC分离中是至关重要的。尽管反相(RP)柱(例如包含C18固定相的柱)最常用于医药应用中,但其通常无法保留高度极性分子(例如抗衡离子)并无法提供有限选择性。取而代之,离子交换(IEX)色谱通常用于分离离子或可电离分子。然而,由于疏性保留率不足,IEX在有机分子分离中的使用受到限制。离子对色谱可以通过使离子分析物在反相上得到分离来帮助缓解前述困难,但其缺陷在于,其通常需要延长的平衡时间、与质谱(MS)不相容的具有高盐分的复杂流动相及专用柱。
[0005] 混合型色谱通过利用提供反相及离子交换保留机制的固定相来提供对前述难题的可行解决方案。混合型方法的优点在于柱选择性可易于通过调整流动相离子强度、pH和/或有机溶剂浓度来调节。因此,混合型柱的选择性不仅与反相柱的选择性互补,且其允许在不同的适当条件下产生对所给柱的多种互补选择性。混合型色谱非常适合于保留离子型、疏水性(例如普生(Naproxen))或亲水性(例如Na+和Cl-离子)分析物,并且不需要离子配对剂,由此显著改良与MS的相容性。在C18柱上存在问题的涉及亲水性可电离化合物的诸多应用容易在混合型柱上得到解决。由于混合型技术优于常规色谱的优点,诸如其高分辨率、可调节的选择性、高样品装载量和其不需要离子配对剂,其使用已正在快速增长。
[0006] 混合型介质可以基于柱化学性质分类成至少四类。第一种类型包括两种不同固定相(RP和IEX)的掺合物(如赛默科技(Thermo Scientific)HYPERSILTMDuet C18/SCX混合型TM离子交换柱)。第二种类型涉及通过结合步骤中的RP和IEX配体的混合物(如ALLTECH 混合型柱)调节的结合二氧化硅。EP 2745903 A1(戴安(Dionex))披露了结合到固体载体的两种或大于两种不同色谱部分的用途,其具有阴离子交换能、阳离子交换能力、反相能力或亲水性相互作用能力。尽管这些前两种类型的介质的合成相对简单,但其在诸多应用中的使用受到不稳定的选择性限制,主要是由于RP和IEX配体结合位点之间的水解稳定性的不同。
[0007] 第三种和第四种类型的混合型介质为更为新近的并且使用含有共价连接到二氧化硅颗粒的RP和IEX官能团的官能性硅烷基配体。同时RP和IEX结合位点之间的恒定比大大改良这些材料中的选择性稳健性,其为第三种和第四种类型之间存在的明显区别。第三种类型的材料使用IEX嵌入型烷基硅烷基配体来调节二氧化硅并且可以被视为IEX调节RP填TM TM充(如来自SIELC Technologies的PRIMESEP 和OBELISC 柱)。其它披露内容包含于US 
2005-0023203 A和US 2006-0169638 A中。相比而言,第四种类型材料使用IEX尖端硅烷配体以官能化二氧化硅衬底,(如US 7,402,243中所揭示且实施于来自赛默飞世尔科技(Thermo Fisher Scientific)的ACCLAIMTM混合型柱)。
[0008] 利用与两性离子端基组合的疏水性链的技术被称为固定化人工膜色谱(IAMC)。WO 89/08130、WO 91/11241及D.E.Cohen和M.R.Leonard《, 脂质研究杂志(Journal of Lipid Research)》,第36卷,1995,第2251-2260页描述了这一应用和相关化学结构。具体地说,疏水性链和两性离子部分旨在模仿生物膜且被设计成用于分离生物分子。
[0009] US 2010/0300971 A披露了在不存在反相组分的情况下,结合到亲水性相互作用液相色谱(HILIC)的固体载体的磷酸型两性离子部分。规定了负电荷与10个原子的固体载体之间的最大距离。
[0010] 在Greco等人,《分离科学杂志(J.Sep.Sci.)》,2013,36,8,1379-1388中描述了一种其中反相柱与两性离子相柱串联耦合的技术,而明显的缺陷在于需要两个分离柱。
[0011] 在L.W.Yu等人,《HPLC中的两性离子固定相(Zwitterionic Stationary Phases in HPLC)》《, 色谱科学杂志(Journal of Chromatographic Science)》,第27卷,1989年4月,第176-185页中披露了两性离子配体,其中相对较短乙基或苯基间隔基用作与衬底的连接基团,限制了其对反相色谱的有效性。
[0012] 在被称为动态涂布的另一种方法中,RP二氧化硅已与例如具有疏水性尾基的两性离子表面活性剂混合。表面活性剂的疏水性尾部和结合到二氧化硅的疏水性基团结合在一起并且形成共混合物。由于两种组分并不彼此共价连接,因此存在从系统损失两性离子表面活性剂的较大可能性,由此改变色谱特征。所述相的论述和两性离子相的一般概述可见于E.P.Nesterenko等人,《分析化学学报(Analytica Chimica Acta)》652(2009)3-21中。
[0013] 已藉由经由静电引力涂布具有亲水性带电荷表面的多孔固体载体制备出混合型分离介质的新近研发类别,所述固体载体含有具有相反电荷的聚合物胶乳颗粒(参见《色谱A杂志(Journal of Chromatography A)》,1218(2011)3407-3412和来自赛默飞世尔科技的TMACCLAIM  Trinity柱)由于胶乳颗粒的粒度(>50nm)大于多孔固体载体的孔隙的尺寸(<
30nm),载体的外表面通过带电荷胶乳颗粒受到官能化,同时孔隙内区域完好且保持其初始官能性和特性。因此,尺寸排阻作用提供孔隙内区域与外表面之间的有效空间分离,以使得所得材料同时提供阳离子交换及阴离子交换特性。另外,当用亲水性相互作用液相色谱(HILIC)和离子交换混合型官能团调节多孔固体载体时,用带电荷胶乳颗粒涂布之后,所得材料提供亲水性相互作用液相色谱(HILIC)、阳离子交换和阴离子交换官能团(X.Liu和C.A.Pohl《, 分离科学杂志》2010,33,779-786)。

发明内容

[0014] 根据本发明的一方面,提供一种共价连接到衬底的两性离子配体,其优选用于色谱材料中,其中所述配体具有通式I:
[0015]
[0016] 其中离子基团彼此具有相反电荷,疏水性连接基团的组合链长中存在至少10个原子,并且配体用于通过硅烷基连接到衬底。
[0017] 根据本发明的另一方面,提供一种包含共价结合到衬底的两性离子配体的色谱材料,其中所述配体经由硅烷基结合到衬底。色谱材料适用作LC或SPE分离中的固定相。
[0018] 在一个优选的实施例中配体具有式II:
[0019]
[0020] 其中
[0021] R1、R2、R3独立地选自羟基、卤素原子、烷氧基、二烷基基、酰基、烷基、杂烷基、芳基、杂芳基或杂环烷基;
[0022] L1、L2和L3独立地为疏水性部分;各含有2到30个碳原子,其中L1、L2和L3的组合链长中存在至少10个碳原子;
[0023] X为O原子、S原子、酰胺基或磺酰胺基;
[0024] n为0或1;
[0025] R4、R5独立地选自氢原子或含有1到20个碳原子的部分;并且
[0026] Rf是带负电荷离子部分,其包含磺酸、羧酸或膦酸官能团。Rf可以是选自由以下组成的群组的带负电荷部分:磺酸、羧酸和膦酸官能团。
[0027] 结合配体材料由此可以由以下通式表示:
[0028]
[0029] 并且例如,伴随由下式表示的二氧化硅衬底:
[0030]
[0031] 在结合配体中,R2基团是被配置成用于连接到衬底中的原子的氧原子。在结合配体中,除了所提及的基团以外,R1和R3也可独立地是被配置成用于连接到衬底中的原子(例如相邻衬底原子)的氧原子或被配置成用于连接到相邻配体的硅原子的氧原子。举例而言,在衬底为二氧化硅衬底的情况下,R1和R3基团中的至少一个可以是被配置成用于连接到二氧化硅衬底中的硅原子(例如相邻硅原子)的氧原子。
[0032] 结合到适合衬底的本发明的配体提供为两性离子/反相混合型色谱材料的组合物。其包含含有疏水性相互作用和两性离子官能团的共价结合有机层。疏水性连接基团提供反相色谱官能团,而带两性离子的基团提供离子相互作用色谱官能团。使用所述材料的优选的色谱分离化学性质为具有离子相互作用能力(例如阴离子相互作用能力)的反相。材料还可提供基于亲水性相互作用(HILIC)的分析物的分离。因此,在实施例中,材料可以提供反相、HILIC和离子相互作用(例如阴离子相互作用)特性。分离模式通常取决于流动相组成。分离模式可以通过选择或调整流动相组成来加以选择或控制。
[0033] 不同于其它混合型材料或固定相,本发明提供一类提供反相(RP)保留部分和总净电荷为零或接近零(大体上为零)的两性离子部分的分离材料。在一些实施例的情况下,取决于色谱分离中的流动相的pH,材料可以表现为RP材料,具有少量阴离子相互作用混合型材料的RP或具有少量阳离子相互作用混合型材料的RP,或表现为HILIC材料。例如当以下条件成立时,情况就是如此:1.)离子基团中的至少一个为二级胺、三级胺、羧酸基或膦酸基,换句话说,pH依赖性基团;和2.)衬底在比如1到12的宽pH范围中为稳定的,以使得总电荷态可实际上通过pH调变。材料具有诸多益处,如对广泛范围的应用的独特选择性、灵活的化学性质,使得取决于特定应用,表面化学性质可因此得到调整。材料具有分离疏水性和离子分析物的能力。此外,材料不需要延长的平衡时间和离子对色谱所需的复杂流动相。总净电荷为零的两性离子部分的使用意指可以将较低盐含量用于流动相中。附图说明
[0034] 图1显示制备本发明材料的途径的第一组实施例。
[0035] 图2显示制备本发明材料的途径的另一组实施例。
[0036] 图3显示制备本发明材料的途径的又一组实施例。
[0037] 图4显示制备本发明材料的途径的又另一组实施例。
[0038] 图5显示制备本发明材料的途径的再一组实施例。
[0039] 图6显示制备本发明材料的途径的再另一组实施例。
[0040] 图7显示制备本发明材料的途径的另一实施例。
[0041] 图8显示制备本发明材料的途径的又一实施例。
[0042] 图9显示相23a的疏水性特性。
[0043] 图10显示相23a的阴离子交换特性。
[0044] 图11显示相23a的HILIC特性。
[0045] 图12显示溶剂组成对相23a的保留特性的影响。

具体实施方式

[0046] 现将更详细地描述本发明的各种优选的特征、实施例和实例。
[0047] 定义:
[0048] 在本文中,术语“两性离子”配体指的是含有正和负电荷并且带有零或大体上为零的净电荷的分子。
[0049] 在本文中,术语“烃”等等(例如烃部分)包括如本文中所定义的烷基和芳基。在本文中,术语疏水性部分等等(例如疏水性连接基团等)包括如本文中所定义的烷基和芳基。
[0050] 在本文中,与疏水性连接基团和其相应特定实施例(例如L1+L2和L3)有关的术语“链长”在第一种情况(例如L1+L2)中意指硅烷基的硅原子与中央带电荷基团(例如带正电荷氮原子)之间的最短链长,且在第二种情况(例如L3)中意指中央带电荷基团(例如带正电荷氮原子)与末端带电荷基团(例如带正电荷基团)之间的最短链长。疏水性连接基团的组合链长意指疏水性连接基团的链长的全部,亦即总和。
[0051] 因此,在直链的情况下,链长简单地编号为,例如:
[0052]
[0053] 链分支未包括在链长数中,呈例如:
[0054]
[0055] 在芳基的情况下,对最短链中的碳原子数目进行计数,使得在苯环中,对位键的链长数计为4并且间位键的链长数计为3,例如:
[0056]
[0057] 任何杂原子不计为链长中的碳原子。
[0058] 除非另外说明,否则在本文中,单独或作为另一取代基的一部分的术语“烷基”意指直链或支链或环烃自由基或其组合,其可以是完全饱和、单或多不饱和并且可包括具有一定数目的所指示的碳原子(即,C1-C10意指一到十个碳)的二价和多价自由基。饱和烃类自由基的实例包括(但不限于)以下基团:如甲基、乙基、正丙基(例如,-CH2-CH2-CH3、-CH2-CH2-CH2-)、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、环己基、(环己基)甲基、环丙基甲基、例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等的同系物和异构体。不饱和烷基是具有一或多个双键或三键的烷基。不饱和烷基的实例包括(但不限于)乙烯基、2-丙烯基、巴豆基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)、乙炔基、1-和3-丙炔基、3-丁炔基以及高级同系物和异构体。除非另外指出,否则术语“烷基”还意指包括以下更详细定义的那些烷基衍生物,例如“杂烷基”。限于烃基的烷基称为“同烷基”。术语“烷基”也可意指“亚烷基”或“烷基二基”以及在其中烷基为二价自由基的那些情况下的次烷基。
[0059] 典型烷基包括(但不限于):甲基;乙基,如乙烷基、乙烯基、乙炔基;丙基,如丙-1-基、丙-2-基、环丙-1-基、丙-1-烯-1-基、丙-1-烯-2-基、丙-2-烯-1-基(烯丙基)、环丙-1-烯-1-基;环丙-2-烯-1-基、丙-1-炔-1-基、丙-2-炔-1-基等;丁基,诸如丁-1-基、丁-2-基、2-甲基-丙-1-基、2-甲基-丙-2-基、环丁-1-基、丁-1-烯-1-基、丁-1-烯-2-基、2-甲基-丙-
1-烯-1--基、丁-2-烯-1-基、丁-2-烯-2-基、丁-1,3-二烯-1-基、丁-1,3-二烯-2-基、环丁-
1-烯-1-基、环丁-1-烯-3-基、环丁-1,3-二烯-1-基、丁-1-炔-1-基、丁-1-炔-3-基、丁-3-炔-1-基等;等等。
[0060] 在本文中,单独或作为另一取代基的一部分的术语“亚烷基”或“烷基二基”意指衍生自烷基的二价自由基,例如(但不限于)-CH2CH2CH2-(丙烯或丙烷-1,3-二基),并且进一步包括以下所述的那些基团,如“伸杂烷基”。通常,烷基(或亚烷基)将具有1到约30个碳原子、优选1到约25个碳原子、更优选1到约20个碳原子、甚至更优选1到约15个碳原子并且最优选1到约10个碳原子。“低碳数烷基”、“低碳数亚烷基”或“低碳数烷基二基”为较短链烷基、亚烷基或烷基二基,一般具有约10个或更少碳原子、约8个或更少碳原子、约6个或更少碳原子或约4个或更少碳原子。
[0061] 在本文中,单独或作为另一取代基的一部分的术语“次烷基”意指衍生自烷基的二价自由基,例如(但不限于)CH3CH2CH2=(亚丙基)。通常,次烷基将具有1到约30个碳原子、优选1到约25个碳原子、更优选1到约20个碳原子、甚至更优选1到约15个碳原子并且最优选1到约10个碳原子。“低碳数烷基”或“低碳数次烷基”为较短链烷基或次烷基,一般具有约10个或更少碳原子、约8个或更少碳原子、约6个或更少碳原子或约4个或更少碳原子。
[0062] 在本文中,术语“烷氧基”、“烷氨基”和“烷硫基”(或硫代烷氧基)用于其常规的含义,并且是指分别经由氧原子、氨基或硫原子连接至分子的其余部分的那些烷基。
[0063] 除非另外说明,否则在本文中,单独或与另一个术语组合的术语“杂烷基”意指稳定直链或支链或环烃自由基或其组合,包含规定数目的碳原子和至少一个选自由以下组成的群组的杂原子:O、N、Si、S和B,且其中可任选地氧化氮和硫原子,并且可任选地季铵化氮杂原子。杂原子O、N、B、S和Si可位于杂烷基的任何内部位置处或在烷基连接至分子的其余部分的位置处。实例包括(但不限于)-CH2-CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NHCH3、-CH2-CH2-N(CH3)-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-CH2、-S(O)-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-CH=CH-O-CH3、-Si(CH3)3、-CH2-CH=N-OCH3和-CH=CH-N(CH3)-CH3。至多两个杂原子可以是连续的,例如-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(CH3)3。类似地,单独或作为另一取代基的一部分的术语“亚杂烷基”意指衍生自杂烷基的二价自由基,例如(但不限于)-CH2-CH2-S-CH2-CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。对于亚杂烷基而言,杂原子也可占据链末端(例如,亚烷氧基、亚烷二氧基、亚烷氨基、亚烷二氨基等)中的任一者或两者。任选地,对于亚烷基和亚杂烷基连接基团而言,连接基团的式子的书写方向并不表示连接基团的定向。举例而言,式-CO2R'-任选地表示-C(O)OR'及-OC(O)R'。
[0064] 除非另外说明,否则在本文中,单独或与其它术语组合的术语“环烷基”和“杂环烷基”分别表示“烷基”和“杂烷基”的环状形式。另外,对于杂环烷基而言,杂原子可以占据杂环连接到分子的其余部分的位置。环烷基的实例包括(但不限于)环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。杂环烷基的实例包括(但不限于):1-(1,2,5,6-四氢吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-吗啉基、3-吗啉基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢噻吩-2-基、四氢噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基等。
[0065] 除非另外说明,否则在本文中,单独或作为另一取代基的一部分的术语“卤基”或“卤素”意指氟、氯、溴或碘原子。另外,如“卤烷基”的术语意指包括单卤烷基和多卤烷基。举例来说,术语“卤(C1-C4)烷基”意指包括(但不限于)三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。
[0066] 除非另外说明,否则在本文中,术语“芳基”意指可以是单环或稠合在一起或共价连接的多个环(优选1到3个环)的多不饱和芳香族取代基。术语“杂芳基”是指含有选自N、O、S、Si和B的一到四个杂原子的芳基(或环),其中任选地氧化氮原子和硫原子,并且任选地季铵化氮原子。杂芳基可以通过杂原子连接到分子的其余部分。芳基和杂芳基的非限制性实例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-联苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-噁唑基、4-噁唑基、2-苯基-4-噁唑基、5-噁唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。以上所指出的芳基和杂芳基环系统中的每一个的取代基选自下文所述的可接受取代基的群组。
[0067] 为简洁起见,当在本文中,术语“芳基”与其它术语组合使用(例如,芳氧基、芳基硫氧基、芳烷基)时,其包括如上所定义的芳基和杂芳基环两者。因此,术语“芳烷基”意指包括芳基连接到烷基的那些基团(例如,苯甲基、苯乙基、吡啶基甲基等),所述烷基包括碳原子(例如,亚甲基)已经被例如氧原子(例如,苯氧基甲基、2-吡啶氧基甲基、3-(1-萘氧基)丙基等)取代的那些烷基。
[0068] 上述术语中的每一个(例如,“烷基”、“杂烷基”、“芳基”和“杂芳基”)意指包括所指示基团的被取代和未被取代的两种形式。以下提供用于各类基团的优选取代基。
[0069] 烷基和杂烷基(包括通常被称为亚烷基、烯基、亚杂烷基、杂烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的那些基团)的取代基一般被称为“烷基取代基”,并且其可以是选自(但不限于)以下的多种基团中的一或多个:被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基、被取代或未被取代的杂环烷基、-OR'、=O、=NR'、=N-OR'、-NR'R”、-SR'、-卤素、-SiR'R”R”'、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-CONR'R”、-OC(O)NR'R”、-NR”C(O)R'、-NR'-C(O)NR”R”'、-NR”C(O)2R'、-NR-C(NR'R”R”')=NR””、-NR-C(NR'R”)=NR”'、-S(O)R'、-S(O)2R'、-OS(O)2R'、-S(O)2NR'R”、-NRSO2R'、-CN和-NO2,数目在零到(2m'+1)范围内,其中m'为所述基团中的碳原子总数。R'、R”、R”'和R””各优选独立地是指氢、被取代或未被取代的杂烷基、被取代或未被取代的芳基(例如被1-3个卤素取代的芳基)、被取代或未被取代的烷基、烷氧基或硫代烷氧基或芳烷基。当本发明化合物包括大于一个R基团时,例如,当存在R、R'、R”、R”'和R””基团中的大于一个时,独立地选择每一个R基团,R'、R”、R”'和R””基团也如此。
当R'与R”连接到同一氮原子时,其可以与所述氮原子组合形成5元、6元或7元环。举例来说,-NR'R”意指包括(但不限于)1-吡咯烷基和4-吗啉基。从以上取代基的论述可知,本领域的技术人员将理解,术语“烷基”意指包括包括结合到除氢基以外基团的碳原子的基团,如卤烷基(例如,-CF3和-CH2CF3)和酰基(例如,-C(O)CH3、-C(O)CF3、-C(O)CH2OCH3等)。
[0070] 类似于针对烷基描述的取代基,针对芳基和杂芳基的取代基一般被称为“芳基取代基”。所述取代基选自例如:在芳环系统上的零到开放价态总数范围内的数目的被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基、被取代或未被取代的杂环烷基、-OR'、=O、=NR'、=N-OR'、-NR'R”、-SR'、-卤素、-SiR'R”R”'、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-CONR'R”、-OC(O)NR'R”、-NR”C(O)R'、-NR'-C(O)NR”R”'、-NR”C(O)2R'、-NR-C(NR'R”R”')=NR””、-NR-C(NR'R”)=NR”'、-S(O)R'、-S(O)2R'、-S(O)2NR'R”、-NRSO2R'、-CN和-NO2、-R'、-N3、-CH(Ph)2、氟(C1-C4)烷氧基和氟(C1-C4)烷基;并且其中R'、R”、R”'和R””优选为独立地选自氢、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的杂烷基、被取代或未被取代的芳基和被取代或未被取代的杂芳基。当本发明化合物包括大于一个R基团时,例如,当存在R、R'、R”、R”'和R””基团中的大于一个时,独立地选择每一个R基团,R'、R”、R”'和R””基团也如此。
[0071] 两性离子配体使得带相反电荷的离子基团能够连接到衬底的表面,亦即非常接近于衬底的表面固定,由此赋予相较于标准单选择性离子交换材料对小型离子的独特相选择性。配体被连接到外表面处或一定体积的固定相中,亦即多孔衬底的空隙中的表面上。
[0072] 配体将硅烷基用于把配体连接到衬底(优选地为二氧化硅衬底)。硅烷基因此优选地为活化硅烷基,亦即具有可与衬底表面反应并且使配体能够连接到衬底表面的基团(离去基)的硅烷基。
[0073] 硅烷基优选地具有下式:
[0074]
[0075] 其中R1、R2、R3独立地选自连接到衬底中的衬底原子的氧原子或连接到相邻配体的硅原子的氧原子、羟基、卤素原子、烷氧基、二烷基氨基、酰基、烷基(任选地杂烷基或杂环烷基)和芳基(任选地杂芳基)。更优选地,R1、R2、R3独立地选自羟基、卤素原子、烷氧基(亦即甲氧基、乙氧基等)、酰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的杂烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基和被取代或未被取代的杂环烷基。
[0076] 基团R1、R2和R3可以是相同的或均为不同的。优选地,R1、R2、R3基团中的至少一个为离去基。更优选地,R1、R2、R3基团中的至少一个为烷氧基(优选地甲氧基、乙氧基或丙氧基,尤其甲氧基)、二烷基氨基或卤素原子。
[0077] 优选地,疏水性连接基团的组合链长中存在至少11个碳原子、或至少12个碳原子、或至少13个碳原子、或至少14个碳原子、或至少15个碳原子。优选地,疏水性连接基团中的碳原子的总和为至少12、或至少13、或至少14或至少15或更大。
[0078] 优选地,L1、L2和L3的组合链长中存在至少11个碳原子、或至少12个碳原子、或至少1 2 3
13个碳原子、或至少14个碳原子、或至少15个碳原子。优选地,L、L 和L中的碳原子的总和≥12、或≥13、或≥14、或≥15。
[0079] 优选地,连接基团L1、L2和L3独立地为选自被取代或未被取代的烷基和被取代或未被取代的芳基的疏水性部分。
[0080] 一般来说,优选地,一个疏水性连接基团长于另一个疏水性连接基团。优选地,L2和L3中的一个长于另一个。最长疏水性连接基团优选地包含烷基、更优选地同烷基(被取代或未被取代的,未被取代的为优选的)、更优选地,尤其在链中具有8个、或9个、或10个、或11个、或12个或更多个碳原子(亦即至少8个、或至少9个、或至少10个、或至少11个、或至少12个碳原子)的直链同烷基。优选的同烷基链长为8到12个碳原子。在疏水性连接基团中的一个,例如L2和L3中的一个包含具有8个、或9个、或10个、或11个、或12个或更多个碳原子(或8到12个碳原子)的前述同烷基中的一个的情况下,另一个优选地包含具有6个碳原子或更少、更优选4个碳原子或更少的链长的同烷基。
[0081] 优选地,疏水性连接基团,例如,L2和L3各为直链同烷基。优选地,疏水性连接基团中的至少一个包含在链中具有至少8个(尤其8到12个)碳原子的同烷基。
[0082] 当存在时,L1优选地为烷基、更优选为同烷基(被取代或未被取代的,未被取代的为优选的)、更优选为尤其具有2个或3个或4个碳原子的直链同烷基。
[0083] 在一种类型的实施例中:优选地,L2为比L3长的疏水性部分。优选地,L2包含比L3多的碳原子。优选地,L2包含至少8个、至少9个、至少10个、或至少11个、或至少12个碳原子。优选地,L3包含至少2个、或至少3个或至少4个碳原子。优选地,L2包含烷基、更优选同烷基(被取代或未被取代的,未被取代的为优选的)、更优选尤其具有8个、或9个、或10个、或11个、或12个或更多个碳原子(最优选地10个、或11个、或12个或更多个碳原子)的直链烷基。优选地,L3包含烷基、更优选同烷基(被取代或未被取代的,未被取代的为优选的)、更优选尤其具有2个、或3个、或4个碳原子的直链同烷基。
[0084] 在另一类型的实施例中:优选地,L3为比L2长的疏水性部分。优选地,L3包含比L2多3
的碳原子。优选地,L包含至少8个、至少9个、至少10个、或至少11个、或至少12个碳原子。优选地,L2包含至少2个、或至少3个、或至少4个碳原子。优选地,L3包含烷基、更优选同烷基(被取代或未被取代的,未被取代的为优选的)、更优选尤其具有8个、或9个、或10个、或11个、或
12个或更多个碳原子的直链同烷基。优选地,L2包含烷基、更优选同烷基(被取代或未被取代的,未被取代的为优选的)、更优选尤其具有2个、或3个、或4个碳原子的直链同烷基。
[0085] 优选地,中央离子基团(定位于连接基团之间)为带正电荷离子部分。中央离子基团为配体的中央部分处的离子基团。中央部分在两个疏水性连接基团之间。中央离子基团优选地包含带正电荷氨基,亦即铵离子基团,其定位于连接基团之间。优选地,当铵基上的R4、R5任一个或这两者独立地为含有1到20个碳原子的烃部分时,所述烃部分为烷基,尤其具有1到4个碳原子的烷基,其中同烷基优选于杂烷基。最优选地,R4、R5为氢或甲基,尤其为甲基。
[0086] 优选地,末端离子基团为带负电荷离子部分。末端离子基团为配体的末端部分处的离子基团。优选地,端基Rf为包含磺酸、羧酸或膦酸官能团(磺酸酯、羧酸酯或膦酸酯)的带负电荷离子部分。带负电荷部分还可以选自由以下组成的群组:磺酸酯、羧酸酯和膦酸酯官能团。
[0087] 中央离子基团和末端离子基团优选通过包含至少2个、更优选至少3个碳原子的疏水性连接基团分隔开。中央离子基团和末端离子基团可以通过包含至少4个碳原子的疏水性连接基团分隔开。在一些实施例中,中央离子基团和末端离子基团可以通过较大链,亦即8个和12个碳原子之间的链分隔开。
[0088] 衬底可以是颗粒或单衬底。衬底材料可以是金属氧化物(术语在此处包括类金属氧化物)或无机-有机混合材料。衬底可以是二氧化硅(SiO2)、二氧化硅/有机混合、氧化(Al2O3)、二氧化(TiO2)或氧化锆(ZrO2)衬底。二氧化硅(其在此处包括二氧化硅/有机混合)衬底为最优选的。衬底可以是合成树脂衬底。
[0089] 结合衬底的材料的式子可以表示为:
[0090]
[0091] 结合二氧化硅衬底的材料的式子可以表示为:
[0092]
[0093] 衬底(优选二氧化硅衬底)可以是完全多孔的、表面多孔的或无孔的;并且可以是颗粒或单块的。
[0094] 本发明衬底期望为用于例如LC或SPE应用中的色谱材料。
[0095] 衬底优选为颗粒的,其中衬底的颗粒通常并且优选为大体上球状的,但在一些实施例中,形状上可以是不规则的。颗粒优选地具有窄粒度分布。
[0096] 在某些实例中,颗粒基本上为“单分散”或基本上“均分散”的,这表明大部分颗粒(例如,颗粒的80%、90%或95%)的粒度在中值粒径(D50)以下或以上大体上(例如,不大于10%)没有变化。在示例性单分散颗粒数中,90%的颗粒的平均粒度在约0.9×D50和约1.1×D50之间。这有利于色谱应用。尽管优选单分散的颗粒,但具有更广粒度分布的颗粒可以用于诸多应用中。
[0097] 颗粒通常为微粒、优选中值粒径为0.1μm或更大、优选中值粒径高达1000μm。更优选地,粒径为1到1000μm、或0.1到500μm或1到500μm,或再更优选地,粒径为0.1到100μm或1到100μm,或甚至更优选地,粒径为0.2到50μm,尤其0.1到10μm或1到10μm,并且最优选地,粒径为1.5到5μm。
[0098] 颗粒可以是多孔(包括部分多孔、完全多孔或表面多孔)或无孔颗粒。颗粒可以适用于制备固体核色谱材料。
[0099] 当多孔颗粒形成时,颗粒的孔隙可以是任何尺寸。平均孔径通常以埃为单位(10-10m,)进行测量。使用BJH(Barrett Joyner-Halenda)方法从吸附数据中计算孔径分布(PSD)并且平均孔径(WBJH)被定义为PSD的最大值。在一个实例中,孔隙的平均尺寸或直径在约1与约 之间,尤其在约50与约 之间。在另一实例中,孔隙的体积平均直
径在约10与约 之间、在约10与约 之间、在约10与约 之间、在约10与约
之间、在约10与约 之间、在约10与约 之间、在约10与约 之间、在
约10与约 之间、在约10与约 之间、在约10与约 之间、在约10与约 之
间、在约10与约 之间、在约20与约 之间、在约20与约 之间、在约20与约
之间、在约20与约 之间、在约20与约 之间、在约20与约 之间、在约
30与约 之间、在约30与约 之间、在约30与约 之间、在约30与约 之
间、在约30与约 之间、在约30与约 之间、在约40与约 之间、在约40与约
之间、在约40与约 之间、在约40与约 之间、在约40与约 之间、在约
40与约 之间、在约50与约 之间、在约50与约 之间、在约50与约 之
间、在约50与约 之间、在约50与约 之间、在约50与约 之间、在约60与约
之间、在约60与约 之间、在约60与约 之间、在约60与约 之间、在
约60与约 之间、在约60与约 之间、在约70与约 之间、在约70与约
之间、在约70与约 之间、在约70与约 之间、在约70与约 之间、在约70与约
之间、在约80与约 之间、在约80与约 之间、在约80与约 之间、在
约80与约 之间、在约80与约 之间、在约100与约 之间、在约100与约
之间、在约100与约 之间、在约100与约 之间、在约200与约 之间或在约200
与约 之间。优选地,平均孔径直径在约30与约 之间,更优选地在约80与约
之间。最优选地,平均孔径直径在约80与约 之间。
[0100] 颗粒衬底材料的(BET)比表面积通常在约0.1与约2,000m2/g之间,最通常在约0.1与约1,000m2/g之间。举例来说,颗粒材料的比表面积在约1与约1,000m2/g之间、在约1与约2 2 2 2
800m /g之间、在约1与约600m /g之间、在约1与约500m /g之间、在约1与约400m /g之间、在约1与约200m2/g之间或在约1与约100m2/g之间。在另一实例中,材料的比表面积在约10与约
1,000m2/g之间、在约10与约800m2/g之间、在约10与约600m2/g之间、在约10与约500m2/g之间、在约10与约400m2/g之间、在约10与约200m2/g之间或在约10与约100m2/g之间。在另一实
2 2
例中,材料的比表面积在约50与约1,000m /g之间、在约50与约800m /g之间、在约50与约
600m2/g之间、在约50与约500m2/g之间、在约50与约400m2/g之间、在约50与约200m2/g之间或在约50与约100m2/g之间。优选地,颗粒材料的比表面积在约1与约500m2/g之间或在约10与约500m2/g之间(尤其在约50与约500m2/g之间)。在另一实例中,比表面积更优选地在约10
2
与约100m/g之间。
[0101] 在另一实例中,比表面积更优选地在约10与约100m2/g之间。对于无孔颗粒而言,中值粒径优选地在0.1与5μm之间。
[0102] 鉴于以上详细描述,可以实现多种优选类型的材料,如下表1中所指示:
[0103] 表1
[0104]
[0105]
[0106] 本发明的反相/两性离子混合型配体和材料可以通过如由本发明的另一个方面所提供的多种有利合成途径来合成。
[0107] 一般合成工序:
[0108] 材料,如根据权利要求中任一权利要求所述的材料可以通过以下一般方法来合成:
[0109] 一般方法1:
[0110] 包含:
[0111] 1.将含有烷基或芳基部分和氨基官能团的硅烷基配体共价连接到衬底表面(通过共价结合);
[0112] 2.随后使共价连接的硅烷基配体上所含有的氨基官能团与1,3-丙烷磺内酯反应以形成色谱材料。
[0113] 一般方法2:
[0114] 包含:
[0115] 1.使含有烷基或芳基部分和氨基官能团的硅烷基配体与1,3-丙烷磺内酯反应以形成所需硅烷基配体,其中所形成的硅烷基配体包括反相(疏水性)部分和两性离子部分;
[0116] 2.随后通过共价结合使所形成的硅烷基配体与衬底表面反应以形成色谱材料。
[0117] 一般方法3:
[0118] 包含:
[0119] 1.将含有烷基或芳基卤的硅烷基配体共价连接到衬底表面;
[0120] 2.随后使共价连接的硅烷基配体与含有氨基官能团和带负电荷部分的化学物质反应以形成色谱材料,所述带负电荷部分选自由磺酸酯、羧酸酯和膦酸酯官能团组成的群组。
[0121] 一般方法4:
[0122] 包含:
[0123] 1.使含有烷基或芳基卤的硅烷基配体与含有氨基官能团和带负电荷部分的化学物质反应以形成两性离子配体,所述带负电荷部分选自由磺酸酯、羧酸酯和膦酸酯官能团组成的群组;
[0124] 2.随后通过共价结合使两性离子配体与衬底表面反应,以形成色谱材料。
[0125] 因此,本发明提供:
[0126] i.一种制备色谱材料的方法,所述方法包含:通过共价结合将含有烷基或芳基部分和氨基官能团的硅烷基配体共价连接到衬底表面;随后使共价连接的硅烷基配体与1,3-丙烷磺内酯反应以形成色谱材料。
[0127] 衬底优选地为二氧化硅,并且硅烷基配体可具有以下通式:
[0128]
[0129] 其中L1和/或L2含有烷基或芳基部分。
[0130] ii.一种制备色谱材料的方法,所述方法包含:使含有烷基或芳基部分和氨基官能团的硅烷基配体与1,3-丙烷磺内酯反应以形成由反相(疏水性)部分和两性离子部分组成的硅烷基配体;随后通过共价结合使具有反相(疏水性)部分和两性离子部分的所得配体与衬底表面反应以形成色谱材料。
[0131] 衬底优选地为二氧化硅,并且第一硅烷基配体可具有以下通式:
[0132]
[0133] 其中L1和/或L2含有烷基或芳基部分,其与3-丙烷磺内酯反应以形成具有以下通式的硅烷基配体:
[0134]
[0135] iii.一种制备色谱材料的方法,所述方法包含:将含有烷基或芳基卤的硅烷基配体共价连接到衬底表面;随后使共价连接的硅烷基配体与含有氨基官能团和带负电荷部分(或可替代地,后者为可以转化为磺酸酯(或羧酸酯或膦酸酯)官能团的官能团,例如可以转化为磺酸酯的硫醇)的化学物质反应以形成色谱材料。带负电荷部分选自由以下组成的群组:磺酸酯、羧酸酯和膦酸酯官能团。
[0136] 衬底优选地为二氧化硅,并且硅烷基配体可具有以下通式:
[0137]
[0138] 其中L1和/或L2含有烷基或芳基部分,并且Z为卤素原子。
[0139] 含有氨基官能团和带负电荷部分的化学物质可具有以下通式:
[0140]
[0141] 其中Rf基团还可以是可以转化为带负电荷部分的基团,例如可以转化为磺酸酯的硫醇基。带负电荷部分选自由以下组成的群组:磺酸酯、羧酸酯和膦酸酯官能团。方法还可+ 4 5以包含烷基化,例如甲基化氨基以形成阳离子型氨基-NRR。
[0142] iv.一种制备色谱材料的方法,所述方法包含:使含有烷基或芳基卤的硅烷基配体与含有氨基官能团和带负电荷部分的化学物质反应以形成两性离子配体;随后通过共价结合使所得两性离子配体与衬底表面反应以形成色谱材料。带负电荷部分选自由以下组成的群组:磺酸酯、羧酸酯和膦酸酯官能团。
[0143] v.一种制备色谱材料的方法,所述方法包含:将含有烷基胺或芳基胺的硅烷基配体共价连接到衬底表面;随后使共价连接的硅烷基配体上所含有的烷基胺或芳基胺与含有卤基和带负电荷部分(或可替代地,后者为可以转化为磺酸酯(或羧酸酯或膦酸酯)官能团的官能团,例如可以转化为磺酸酯的硫醇)的化学物质反应以形成色谱材料。带负电荷部分选自由以下组成的群组:磺酸酯、羧酸酯和膦酸酯官能团。
[0144] vi.一种制备色谱材料的方法,所述方法包含:使含有烷基或芳基胺的硅烷基配体与含有卤官能团和磺酸酯(或羧酸酯或膦酸酯)官能团的化学物质反应以形成两性离子配体;随后通过共价结合使所得两性离子配体与衬底表面反应以形成色谱材料。
[0145] vii.一种制备色谱材料的方法,所述方法包含:将含有硫醇或羟基的硅烷基配体共价连接到衬底表面;随后使共价连接的硅烷基配体上所含有的硫醇或羟基与含有氨基官能团和带负电荷部分,任选地亦具有乙烯基或烯丙基的化学物质反应以形成色谱材料。带负电荷部分选自由以下组成的群组:磺酸酯、羧酸酯和膦酸酯官能团。
[0146] 在上述方法中,可能存在额外步骤,如烷基化,例如甲基化氨基以形成阳离子型氨+ 4 5基-NRR;并且将硫醇基转化为磺酸酯基。
[0147] 本发明材料可用于纳米-LC、分析-LC或制备级LC或SPE中。在各种实施例中,材料作为填充床或单块安置于柱中。举例来说,塑料或金属柱填充有所述材料。
[0148] 材料可以提供多种高性能分离介质。在一些实施例中,取决于色谱分离中的流动相的pH,材料可以表现为RP材料,具有少量阴离子相互作用混合型材料的RP或具有少量阳离子相互作用混合型材料的RP。材料具有诸多益处,如对广泛范围的应用的独特选择性、灵活的化学性质,使得取决于特定应用,表面化学性质可因此得到调整。材料具有以良好效率分离疏水性和离子分析物的能力。
[0149] 实例
[0150] 为了能够进一步理解本发明,而不会限制其范围,现将参考附图描述本发明的各种示例性和/或优选实施例。
[0151] 实例1
[0152] 参考图1:
[0153] 2的合成:
[0154] 在N2氛围下在250mL圆底烧瓶中向22.3g(0.1mol,1.0当量)1-溴-十一烯1(例如奥德里奇(Aldrich))的搅拌溶液中小心地添加150mL含2M二甲胺的甲醇(0.3mol,3摩尔当量,例如东京化成工业(Tokyo Chemical Industry;TCI))。在室温下搅拌所得反应混合物36h。使用气相色谱监测反应。当通过GC发现起始物质1被完全消耗时,真空去除所有挥发物。通过库格尔罗尔蒸馏(Kugelrohr Distillation)(140℃/0.11托)获得化合物2。产量:17.2g,
90%。
[0155] 3的合成:
[0156] 在环境温度下在1L圆底烧瓶中向22.3g(0.1mol,1.0当量)1-溴-十一烯1(例如奥德里奇)、31g(0.3mol,3.0当量)(MeO)2MeSiH(例如盖勒斯特(Gelest))于30mL甲苯中的搅拌溶液中小心地添加0.5g Pt(0)催化剂(0.15wt%)(例如盖勒斯特)。间或在添加催化剂后观察到放热反应。使烧瓶配备有冷凝器,并且将反应混合物加热到50℃持续8h。使用气相色谱监测反应。当通过GC发现转化率高于60%时,真空去除所有挥发物。通过库格尔罗尔蒸馏(120℃/0.05托)获得化合物3。
[0157] 4的合成:
[0158] 在N2氛围下在500mL圆底烧瓶中向33.9g(0.1mol,1.0当量)3的搅拌溶液中小心地添加150mL含2M二甲胺的甲醇(0.3mol,3摩尔当量,例如TCI)。在室温下搅拌所得反应混合物36h。使用气相色谱监测反应。当通过GC发现起始物质3被完全消耗时,真空去除所有挥发物。通过库格尔罗尔蒸馏(160℃/0.11托)获得化合物4。产量:27g,90%。
[0159] 5的合成:
[0160] 在N2氛围下在1L烧瓶中向19.7g(0.1mol,1.0当量)2于500ml乙腈中的搅拌溶液中小心地添加12.2g(0.1mol,1.0当量)1,3-丙磺酸内酯(例如奥德里奇)。将反应混合物加热到50℃持续48h。随后在真空下去除溶剂。用乙腈洗涤并且在真空下干燥,产生28.7g(0.085mol,85%)呈无色粉末状的产物(5)。
[0161] 6的合成:
[0162] 方法1(从5开始):在环境温度下在1L圆底烧瓶中向32g 5(0.1mol,1.0当量)、31g(MeO)2MeSiH(例如盖勒斯特)于30mL甲苯中的搅拌溶液中小心地添加0.5g Pt(0)催化剂(0.1wt%)(例如盖勒斯特)。间或在添加催化剂后观察到放热反应。使烧瓶配备有冷凝器,并且将反应混合物加热到50℃持续8h。使用气相色谱监测反应。当通过GC发现转化率高于60%时,真空去除所有挥发物。过滤并用乙腈洗涤,产生36.1g(0.085mol)呈无色粉末状的硅烷基配体6。
[0163] 方法2(从4开始):在N2氛围下在1L烧瓶中向30.3g(0.1mol,1.0当量)4于500ml乙腈中的搅拌溶液中小心地添加12.2g(0.1mol,1.0当量)1,3-丙磺酸内酯(例如奥德里奇)。将反应混合物加热到50℃持续48h。随后在真空下去除溶剂。用乙腈洗涤并且在真空下干燥,产生28.7g(0.068mol,80%)呈无色粉末状的产物6。
[0164] 相23b的制备:
[0165] 将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加24g硅烷基配体6(0.054mol)的甲苯(50mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙充分洗涤,得到相23b。
[0166] 相21的制备:
[0167] 将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加18.3g硅烷基配体3(0.054mol)的甲苯(50mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相21。
[0168] 相22的制备:
[0169] 方法1(从21开始):将20g合成的二氧化硅21转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加2M二甲胺之THF(36mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,在室温下在N2氛围下搅拌反应混合物隔夜。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相22。
[0170] 方法2(从4开始):将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加16.3g(0.054mol)4的甲苯(50mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相22。
[0171] 相23a的制备
[0172] 将20g合成的二氧化硅22转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加5.9g(0.048mol)1,3-丙磺酸内酯(例如奥德里奇)之乙腈(100mL)溶液。将反应混合物加热到50℃持续48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相23a。
[0173] 实例2
[0174] 参考图2:
[0175] 8的合成:
[0176] 在N2氛围下在500mL圆底烧瓶中向21.3g(0.06mol,1.0当量)11-溴十一烷基三甲氧基硅烷7的搅拌溶液中小心地添加90mL含2M二甲胺的甲醇(0.18mol,3摩尔当量,例如TCI)。在室温下搅拌所得反应混合物36h。使用气相色谱监测反应。当通过GC发现硅烷起始物质被完全消耗时,真空去除所有挥发物。通过库格尔罗尔蒸馏(160℃/0.11托)获得化合物8。产量:17.2g,90%。
[0177] 9的合成:
[0178] 在N2氛围下在1L烧瓶中向31.9g(0.1mol,1.0当量)8于500ml乙腈中的搅拌溶液中小心地添加12.2g(0.1mol,1.0当量)1,3-丙磺酸内酯(例如奥德里奇)。将反应混合物加热到50℃持续48h。随后在真空下去除溶剂。用乙腈洗涤并且在真空下干燥,产生37.5g(0.085mol,85%)呈无色粉末状的产物。
[0179] 相24a的制备:
[0180] 将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加23.8g(0.054mol)硅烷基配体9的甲苯(50mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相24a。
[0181] 相45的制备:
[0182] 将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加17.23g(0.054mol)硅烷基配体8的甲苯(50mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相45。
[0183] 相24b的制备:
[0184] 将20g合成的二氧化硅45转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加5.9g(0.048mol)1,3-丙磺酸内酯(例如奥德里奇)之乙腈(100mL)溶液。将反应混合物加热到50℃持续48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相24b。
[0185] 实例3
[0186] 参考图3:
[0187] 11的合成:
[0188] 在环境温度下在250mL圆底烧瓶中向11.4g(0.16mol)丁-3-烯-1-胺(例如奥德里奇)、45.1g(0.47mol)(MeO)Me2SiH(例如盖勒斯特)于20mL甲苯中的搅拌溶液中小心地添加0.05g Pt(0)催化剂(0.1wt%)(例如盖勒斯特)。间或在添加催化剂后观察到放热反应。使烧瓶配备有冷凝器,并且将反应混合物加热到50℃持续8h。使用气相色谱监测反应。当通过GC发现转化率高于60%时,真空去除所有挥发物。通过库格尔罗尔蒸馏(100℃/0.11托)获得化合物11。
[0189] 12的合成:
[0190] 在N2氛围下在500mL圆底烧瓶中向9.66g(0.06mol,1.0当量)11的搅拌溶液中小心地添加56.5g(0.18mol,3摩尔当量,例如TCI)11-溴十一烷-1-磺酸酯。在室温下搅拌所得反应混合物36h。使用气相色谱监测反应。当通过GC发现硅烷起始物质被完全消耗时,真空去除所有挥发物。通过库格尔罗尔蒸馏(160℃/0.11托)获得化合物12。
[0191] 相25的制备:
[0192] 将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加8.7g(0.054mol)硅烷基配体11的甲苯(50mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相25。
[0193] 相26a的制备:
[0194] 将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加21.3g(0.054mol)12的甲苯(60mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相26a。
[0195] 相26b的制备:
[0196] 将20g合成的二氧化硅25转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加45.2g(0.144mol)11-溴十一烷-1-磺酸酯之THF(75mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,在室温下在N2氛围下搅拌反应混合物隔夜。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相26b。
[0197] 相27a的制备:
[0198] 将20g合成的二氧化硅26a转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加14.2g(0.1mol)CH3I之MeOH(75mL)溶液(“MeI”)。小心地分散以上浆液之后,在室温下在N2氛围下搅拌反应混合物隔夜。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分地洗涤,得到相27a。
[0199] 相27b的制备
[0200] 将20g合成的二氧化硅26b转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加14.2g(0.1mol)CH3I之MeOH(75mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,在室温下在N2氛围下搅拌反应混合物隔夜。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相27b。
[0201] 实例4
[0202] 参考图4:
[0203] 相28的制备:
[0204] 将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加19.2g(0.054mol)硅烷基配体7的甲苯(50mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分地洗涤,得到相28。
[0205] 相29的制备;
[0206] 将20g合成的二氧化硅28转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加4.3g(0.054mmol)3-氨基丙酸(例如奥德里奇)之乙腈(100mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物加热到50℃持续48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相29。
[0207] 相30的制备:
[0208] 将20g合成的二氧化硅29转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加7.1g(0.05mol)CH3I之MeOH(75mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,在室温下在N2氛围下搅拌反应混合物隔夜。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相30。
[0209] 相31的制备:
[0210] 将20g合成的二氧化硅30转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加7.1g(0.05mol)CH3I之MeOH(75mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,在室温下在N2氛围下搅拌反应混合物隔夜。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分地洗涤,得到相31。
[0211] 相32的制备:
[0212] 将20g合成的二氧化硅28转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加15.8g(0.054mmol)4-氨基苯-磺酸铵(例如奥德里奇)之乙腈(100mL)溶液。将反应混合物加热到50℃持续48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相32。
[0213] 相33的制备:
[0214] 将20g合成的二氧化硅32转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加7.1g(0.05mol)CH3I之MeOH(75mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,在室温下在N2氛围下搅拌反应混合物隔夜。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相33。
[0215] 相34的制备:
[0216] 将20g合成的二氧化硅33转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加7.1g(0.05mol)CH3I之MeOH(75mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,在室温下在N2氛围下搅拌反应混合物隔夜。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分地洗涤,得到相34。
[0217] 相35的制备:
[0218] 将20g合成的二氧化硅28转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加8.5g碳酸钠(0.081mol)、7.4g(0.054mol)3-氨基丙基膦酸(例如奥德里奇)于乙腈和水(100mL,1:1v/v)中的混合物。将反应混合物加热到100℃持续48h。冷却后,过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分地洗涤,得到相35。
[0219] 相36的制备:
[0220] 将20g合成的二氧化硅35转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加7.1g(0.05mol)CH3I之MeOH(75mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,在室温下在N2氛围下搅拌反应混合物隔夜。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相36。
[0221] 相37的制备:
[0222] 将20g合成的二氧化硅36转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加7.1g(0.05mol)CH3I之MeOH(75mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,在室温下在N2氛围下搅拌反应混合物隔夜。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相37。
[0223] 实例5
[0224] 参考图5:
[0225] 相38的制备:
[0226] 将20g合成的二氧化硅45转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加9.8g(0.054mol)5-溴戊酸(例如奥德里奇)之乙腈(100mL)溶液。将反应混合物加热到50℃持续48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相38。
[0227] 相39的制备:
[0228] 将20g合成的二氧化硅45转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加9.32g(0.054mol)4-氯丁烷-1-磺酸(例如奥德里奇)之乙腈(100mL)溶液。将反应混合物加热到50℃持续48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相39。
[0229] 实例6
[0230] 参考图6:
[0231] 相40的制备:
[0232] 将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加9.2g 3-(二甲氧基(甲基)硅烷基)-N,N-二甲基丙-1-胺13(0.054mol)的甲苯(50mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相40。
[0233] 相41的制备:
[0234] 将20g合成的二氧化硅40转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加14.72g(0.054mol)8-氯辛烷-1-磺酸(例如奥德里奇)之乙腈(100mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物加热到50℃持续48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相41。
[0235] 相42的制备:
[0236] 将20g合成的二氧化硅40转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加12.7g(0.054mol)9-溴壬酸(例如奥德里奇)之乙腈(100mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物加热到50℃持续48h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相42。
[0237] 实例7
[0238] 参考图7:
[0239] 相46的制备:
[0240] 将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加10.58g(0.054mol,盖勒斯特)3-(三甲氧基硅烷基)-丙烷-1-硫醇15的甲苯(50mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌72h。过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分洗涤,得到相46。
[0241] 相47的制备:
[0242] 将5g合成的二氧化硅46、化合物5(3.83g,0.012mol)和AIBN(1g,0.006mmol)转移到100mL圆底烧瓶中,随后添加30ml甲醇-H2O的混合物(1:2v/v)。在氮气氛围下在65℃下加热所得混合物12h。冷却后,过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮充分地洗涤,得到相47。
[0243] 实例8
[0244] 参考图8:
[0245] 相48的制备:
[0246] 将20g干燥多孔的球状二氧化硅颗粒(粒度5μm;孔径 表面积300m2/g,硅烷醇:0.048mol)转移到250mL圆底烧瓶中,随后添加6.59g三甲氧基硅烷16(0.054mol,盖勒斯特)的无水甲苯(50mL)溶液。小心地分散以上浆液之后,将反应混合物置于稳定回流下并搅拌72h。快速过滤官能化二氧化硅颗粒并用甲苯和丙酮洗涤,得到相48。
[0247] 相49的制备:
[0248] 在环境温度下在1L圆底烧瓶中向20g官能化二氧化硅相48、13.52g(0.048mol)化合物5于90mL无水甲苯中的搅拌溶液中小心地添加0.1g Pt(0)催化剂(0.1wt%)(例如盖勒斯特)。间或在添加催化剂后观察到放热反应。烧瓶配备有冷凝器,并且在氮气氛围下在50℃下加热反应混合物8h。真空去除所有挥发物之后,用大量甲苯、丙酮和甲醇洗涤二氧化硅,产生官能化二氧化硅相49。
[0249] 色谱应用
[0250] 这一部分描述色谱评估结果。使用传统高压浆液技术将如所描述的各种结合相填充到3mm(内径)×50、100或150mm(长度)不锈柱中并进行以下测试。
[0251] 实例9-疏水性测试
[0252] 疏水性为表征反相材料或具有反相分离特征的混合型材料的重要参数。图9显示使用亲水性空隙标记物(胞嘧啶)和中性疏水性探针(萘)的相23a的疏水性特性。
[0253] 测试条件是:柱,填充相23a,粒度5μm,柱尺寸3×100mm;流动相:乙腈/100mM乙酸铵,pH5(40:60v/v);流动速率,0.425mL/min;注入体积,2μL;温度,30℃;检测UV波长,254nm;和测试探针(各0.1mg/mL于流动相中),胞嘧啶和萘。
[0254] 测试探针与萘的保留清楚地分离,其表明填充相23a具有良好的反相分离能力。
[0255] 实例10-离子相互作用特性
[0256] 使用阴离子(NO3-)和阳离子(Na+)在具有受控离子强度和pH的流动相中表征离子相互作用特性。
[0257] 测试条件是:柱,填充相23a,粒度5μm,柱尺寸3×50mm;流动相:乙腈/100mM乙酸铵,pH5/去离子水(80:10:10v/v/v);流动速率,0.425mL/min;注入体积,1μL;温度,30℃;检测,气溶胶类检测器;和测试探针(1mg/mL于流动相中):NaNO3。
[0258] 如图10中所示,由于在表面上存在两性离子和氨基官能团,相23a展现良好阴离子相互作用特性。
[0259] 实例11-HILIC特性
[0260] 亲水性相互作用液相色谱(HILIC)常作为反相液相色谱的补充工具以用于亲水性分析物的分离。任何极性色谱表面可以用于HILIC分离。HILIC色谱的典型流动相包括具有少量水性部分的乙腈。在HILIC中,流动相在与缺水的流动相相对的极性固定相的表面上形成富水层,产生液体/液体萃取系统。将分析物分布在这两个层之间。然而,HILIC为一种比简单分离更为复杂的过程并且包括中性极性物质之间的氢键相互作用以及高有机溶剂条件下用于保留的静电相互作用。这将HILIC区分为不同于离子交换色谱的机制。极性较大的分析物将具有比极性较小的分析物更强的与固定水层的相互作用。
[0261] 在此处的评估中,甘露醇用于表征相23a的HILIC特性。测试条件是:柱,填充相23a,粒度5μm,柱尺寸3×50mm;流动相:用于反相操作的乙腈/100mM乙酸铵,pH 5/去离子水(50:10:40v/v/v)和用于HILIC操作的乙腈/100mM乙酸铵,pH 5(90:10v/v);流动速率,
0.425mL/min;注入体积,1μL;温度,30℃;检测,气溶胶类检测器;和测试探针(1mg/mL于去离子水中):甘露醇。
[0262] 由于甘露醇为既不受流动相离子强度影响,也不受pH影响的高亲水性中性分子(参见下文),因此在高乙腈含量下的保留仅视为来自亲水性相互作用而不是静电相互作用。图11清楚地说明相23a可以用于HILIC以通过氢键相互作用保留亲水性分析物,因为甘露醇在90%乙腈(富溶剂)下的保留率(保留系数大于10)显著高于在50%乙腈下的保留率(保留系数接近零)。
[0263] 实例12-溶剂影响
[0264] 为了评估作为反相/两性离子混合型相的色谱特性,在不同乙腈含量下并且在恒定乙酸铵浓度下评定萘(疏水性探针)、甘露醇(亲水性探针)、钠离子(阳离子相互作用探针)和氯离子(阴离子相互作用探针)。
[0265] 测试条件是:柱,填充相23a,粒度5μm,柱尺寸3×50mm;流动相:乙腈/100mM乙酸铵,pH 5/去离子水(m:10:n v/v/v,其中m:n=90:0、80:10、70:20、60:30、50:40、40:50、30:60、20:70和10:80比);流动速率,0.425mL/min;注入体积,1μL;温度,30℃;检测,气溶胶类检测器;和测试探针:萘(0.1mg/mL)、氯化钠(1mg/mL)和甘露醇(1mg/mL)。
[0266] 图12表明相23a展现出疏水性特性,因为萘的保留率随流动相含水量而持续增加。同时,甘露醇的保留率向反方向发展,其中低于70%乙腈含量下的保留率最小,并且随高于
70%的乙腈含量而增加。相较于甘露醇,氯离子在各种溶剂含量下均显示显著较高保留率。
随着乙腈增加,氯离子的保留率连续降低,从10%乙腈下的41下降到80%乙腈下的20。乙腈的进一步增加使得氯离子保留率在80%乙腈下快速增加到值33。与氯离子相比,钠离子在
10%和80%乙腈范围内几乎未展现保留率。高于80%乙腈,其保留率随溶剂含量而从零保留率增加到5.4(在90%乙腈下)。结果由此表明相23a具有反相、HILIC和阴离子相互作用特性,与其柱化学性质一致。
[0267] 如本文所使用(包括在权利要求书中),除非上下文另外指示,否则本文中的术语的单数形式应被解释为包括复数形式,且反之亦然。举例来说,除非上下文另外指示,否则如“一个(a)”或“一个(an)”的单数引用意指“一或多个”。
[0268] 在整个本说明书的描述和权利要求书中,词语“包含”、“包括”、“具有”及“含有”以及所述词的变化(例如“包含(comprising)”和“包含(comprises)”等)意指“包括但不限于”,并且并不意图(并且并不)排除其它成分。
[0269] 应了解,可以对本发明的上述实施例作出变化,同时这些变化仍属于本发明的范围内。除非另外说明,否则本说明书中所披露的每一特征都可被用于相同、等效或类似目的的替代特征替换。因此,除非另外说明,否则所披露的每一特征仅是一系列通用等效或类似特征的一个实例。
[0270] 本文中所提供的任何和所有实例或示例性语言(“举例来说(for instance)”、“如(such as)”、“例如(for example)”、“例如(e.g.)”和类似语言)的使用仅意图更好地说明本发明,并且并不指示对本发明的范围的限制,除非另外主张。本说明书中的任何语言都不应理解为指示实践本发明所必需的任何非所主张的要素。
[0271] 除非另外说明或上下文另外需要,否则本说明书中描述的任何步骤可按任何次序进行或同时进行。
[0272] 本说明书中所披露的全部特征可以任何组合形式组合,但所述特征和/或步骤中的至少一些会互斥的组合除外。确切地说,本发明的优选特征适用于本发明的所有方面并且可以任何组合来使用。同样,可单独地使用(不以组合形式)以非必需组合形式描述的特征。
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