抗棘阿米巴属药物及其生产方法 |
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| 申请号 | CN201610388617.4 | 申请日 | 2016-06-02 | 公开(公告)号 | CN106822104A | 公开(公告)日 | 2017-06-13 |
| 申请人 | 宝丽制药股份有限公司; 日本农药株式会社; | 发明人 | 宫田善之; 增田孝明; | ||||
| 摘要 | 本 申请 的一个目的是提供新的抗棘阿米巴属药物。本申请提供了抗棘阿米巴属药物，其包含卢立康唑作为活性成分。 | ||||||
| 权利要求 | 1.抗棘阿米巴属药物，其包含卢立康唑作为活性成分。 |
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| 说明书全文 | 抗棘阿米巴属药物及其生产方法技术领域背景技术[0002] 棘阿米巴属，其为变形虫样原生动物且主要摄取细菌并自由生存，有时引起感染如角膜炎和脑炎。目前，尚无有效对抗由棘阿米巴属引起的感染的药物。严重时，所述感染可引起失明且在罕见病例中可能由于机会感染而导致死亡。乳铁蛋白(Lactoferrin)、乳铁蛋白肽(lactoferricin)等在专利文献中已被报道为抗棘阿米巴属药物，但难以在实际应用中发挥作用(参见，例如，专利文献1)。棘阿米巴属包括若干已知的亚种，如卡氏棘阿米巴(A.castellanii)和多食棘阿米巴(A.polypharga)，所有这些都具有引起感染的可能性。具体地，由隐形眼镜引起的棘阿米巴病在近年来成为很大的问题。此外，也已经怀疑了棘阿米巴属和HIV感染之间的相互作用(参见，例如，非专利文献1)，以及棘阿米巴属和MRSA感染之间的相互作用(参见，例如，非专利文献2和非专利文献3)，迫切需要采取对抗所述相互作用的对策。 [0003] 卢立康唑，已作为抗真菌剂上市，已知其具有例如抗毛滴虫属(Trichomonas)的作用且具有若干晶体习性，导致对抗毛滴虫的作用程度不同(参见，例如，专利文献2-9)。也有文献坚持认为存在关于卢立康唑晶体的另一晶系(参见，例如，专利文献10)。 [0004] 然而，根本不知晓卢立康唑具有抗棘阿米巴属活性，并且也根本不知晓抗棘阿米巴属活性根据晶体习性而变化。此外，也根本不知晓具有以下晶体习性的卢立康唑晶体，所述晶体习性即其中(20-2)平面或(10-2)平面是特异性生长平面。 [0005] 引用文献列表 [0006] [专利文献] [0007] 专利文献1：日本专利公开号2011-246458 [0008] 专利文献2：日本专利公开号2015-91890 [0009] 专利文献3：日本专利公开号2015-63566 [0010] 专利文献4：日本专利公开号2015-51945 [0011] 专利文献5：日本专利公开号2015-27984 [0012] 专利文献6：日本专利公开号2015-27983 [0013] 专利文献7：日本专利公开号2015-27972 [0014] 专利文献8：日本专利公开号2014-172858 [0015] 专利文献9：日本专利公开号2014-74008 [0016] 专利文献10：中国专利号103012385 [0017] [非专利文献] [0018] 非专利文献1：J.Clin.Microbiol.2012,50(3),1128-31 [0019] 非专利文献2：BMJ Case Rep.2009,pii:bcr08.2008.0642 [0020] 非专利文献3：Environ.Microbiol.2006,8(6),1130-3发明内容 [0021] 技术问题 [0022] 本申请在这种情况下做出，其一个目的是提供新的抗棘阿米巴属药物。 [0023] 问题的解决方案 [0024] 本发明的发明人在这种情况下针对新的抗棘阿米巴属药物坚持进行了彻底的研究努力，并发现卢立康唑具有抗棘阿米巴属活性，由此完成了本发明。经过进一步检查，发现晶体习性为其中(20-2)平面和/或(10-2)平面是特异性生长平面的晶体对于所述的作用是尤其出色的，并进一步延伸得到了本发明。换言之，本申请描述如下。 [0025] <1>抗棘阿米巴属药物，其包含卢立康唑作为活性成分。 [0026] <2>根据<1>的抗棘阿米巴属药物，其中卢立康唑作为固体存在于所述药物中。 [0027] <3>根据<1>或<2>的抗棘阿米巴属药物， [0028] 其中所述卢立康唑具有以下的晶体习性，其中 [0029] I(20-2)与I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)的总和的比例为12％或更高，[0030] 条件是在粉末X射线衍射图中以CuKα作为辐射源在2θ＝5-35°范围内检测的衍射峰中，在对应于(001)平面、(100)平面、(10-1)平面、(011)平面、(110)平面、(11-1)平面、(10-2)平面、(11-2)平面、(020)平面、(021)平面、(20-2)平面、(121)平面、(013)平面、(11-3)平面和(221)平面的衍射峰的峰强度分别为I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)。 [0031] <4>根据<1>至<3>任一项的抗棘阿米巴属药物， [0032] 其中所述卢立康唑具有以下的晶体习性，其中 [0033] I(10-2)与I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)的总和的比例为20％或更高，[0034] 条件是在粉末X射线衍射图中以CuKα作为辐射源在2θ＝5-35°范围内检测的衍射峰中，在对应于(001)平面、(100)平面、(10-1)平面、(011)平面、(110)平面、(11-1)平面、(10-2)平面、(11-2)平面、(020)平面、(021)平面、(20-2)平面、(121)平面、(013)平面、(11-3)平面和(221)平面的衍射峰的峰强度分别为I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)。 [0035] <5>卢立康唑晶体，其具有以下的晶体习性，其中 [0036] I(20-2)与I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)的总和的比例为12％或更高，[0037] 条件是在粉末X射线衍射图中以CuKα作为辐射源在2θ＝5-35°范围内检测的衍射峰中，在对应于(001)平面、(100)平面、(10-1)平面、(011)平面、(110)平面、(11-1)平面、(10-2)平面、(11-2)平面、(020)平面、(021)平面、(20-2)平面、(121)平面、(013)平面、(11-3)平面和(221)平面的衍射峰的峰强度分别为I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)。 [0038] <6>卢立康唑晶体，其具有以下的晶体习性，其中 [0039] I(10-2)与I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)的总和的比例为20％或更高，[0040] 条件是在粉末X射线衍射图中以CuKα作为辐射源在2θ＝5-35°范围内检测的衍射峰中，在对应于(001)平面、(100)平面、(10-1)平面、(011)平面、(110)平面、(11-1)平面、(10-2)平面、(11-2)平面、(020)平面、(021)平面、(20-2)平面、(121)平面、(013)平面、(11-3)平面和(221)平面的衍射峰的峰强度分别为I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)。 [0041] <7>卢立康唑晶体，其具有以下的晶体习性，其中 [0042] I(20-2)与I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)的总和的比例以及I(10-2)与I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)的总和的比例分别为12％或更高和20％或更高，[0043] 条件是在粉末X射线衍射图中以CuKα作为辐射源在2θ＝5-35°范围内检测的衍射峰中，在对应于(001)平面、(100)平面、(10-1)平面、(011)平面、(110)平面、(11-1)平面、(10-2)平面、(11-2)平面、(020)平面、(021)平面、(20-2)平面、(121)平面、(013)平面、(11-3)平面和(221)平面的衍射峰的峰强度分别为I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)。 [0044] <8>生产如<5>至<7>任一项所定义的卢立康唑晶体的方法，所述方法包括用可含有极性溶剂的乙腈重结晶卢立康唑。 [0046] <10>生产如<5>至<7>任一项所定义的卢立康唑晶体的方法，所述方法包括用非质子性极性溶剂和质子性极性溶剂的混合溶剂重结晶卢立康唑。 [0047] <11>根据<8>至<10>任一项的生产方法，其中选自正己烷、环己烷和石油醚的溶剂用作不良溶剂。 [0048] 发明的有益效果 [0050] [图1] [0051] 图1是显示针对实施例2的晶体测得的X射线粉末衍射数据的视图。 [0052] [图2] [0053] 图2是显示在2θ＝5-35°范围内的本申请晶体的粉末图的计算值，其使用卢立康唑的单晶X射线衍射数据获得。 [0054] [图3] [0055] 图3说明了实施例2-6中的晶体的显微照片(用照片代替了图)。图3(a)说明了实施例2中的晶体，图3(b)说明了实施例3中的晶体，图3(c)说明了实施例4中的晶体，图3(d)说明了实施例5中的晶体，以及图3(e)说明了实施例6中的晶体。 [0056] 具体实施方案的描述 [0057] (1)活性成分 [0058] 本申请的抗棘阿米巴属药物包含卢立康唑作为活性成分。卢立康唑具有如下所描述的结构，其已经上市并用作抗真菌剂。 [0059] [化学式1] [0060] [0061] 所述卢立康唑可根据例如日本专利公开号60-218387中所述的方法合成。换言之，通式(1)表示的该化合物可如下获得：使得1-氰基甲基咪唑与二硫化碳反应得到化合物(III)，使得到的化合物与具有离去基的通式(II)的化合物反应。反应后，化合物可通过作为通常方法的重结晶方法纯化。 [0062] 在下述式中，R和X表示氢原子或卤素原子。在由通式(1)表示的化合物中，对应于R＝X＝Cl的化合物是卢立康唑。离去基团Y和Y'的优选实例包括甲磺酰氧基、苯磺酰氧基、对甲苯磺酰氧基或卤素原子(参见下面的方案)。 [0063] 用可含有极性溶剂的醇对以所述步骤生产的卢立康唑进行重结晶和纯化，获得具有空间群P21的单斜晶体，晶格参数为以及β＝95.917(9)°。 [0064] [化学式2] [0065] [0066] 在式中，Y和Y'表示离去基，且M表示碱金属原子。 [0067] (2)卢立康唑晶体 [0068] 卢立康唑展示出出色的抗棘阿米巴属活性。本申请的抗棘阿米巴属药物可以不受具体的限制而应用于分类为棘阿米巴属且引起诸如角膜炎的疾病的微生物。本申请的抗棘阿米巴属药物充分抑制微生物的生长。对于棘阿米巴属，卢立康唑展示了抗棘阿米巴属活性，即使其为固体即本身为晶体时也具有此活性，且当为溶液状态时展现了类似的效果。卢立康唑难以在水性载体中溶解，需要溶剂如乙醇、苯甲醇、N-烷基吡咯烷酮或己二酸二异丙酯来将均匀溶解的卢立康唑局部给药至患处。考虑到应用到角膜炎，使用这样的溶剂是不利的，因为有造成角膜损害的危险。因此，在局部给药本发明的抗棘阿米巴属药物的情况下，给药作为固体的抗棘阿米巴属药物是优选的。在其中散装粉末均匀地分散在几乎不引起角膜病症的水性介质中的分散液体制剂，或其中所述散装粉末均匀地分散在软膏基质如凡士林的眼部软膏制剂，作为用于给药针对所述疾病的所述固体的制剂是优选的，即其中卢立康唑以固体(即晶体)形式存在于药物中的制剂(以下也称为固体制剂)。在以所述固体形式局部给药的固体制剂中，优选使用晶体，其中(20-2)平面和/或(10-2)平面是特异性生长平面。 [0069] 晶体的特异性生长平面是属于以下峰的平面，其中在进行粉末X射线衍射法的情况下在测量的衍射角的范围内，所述峰的峰强度显著高于其他衍射峰的峰强度的总和。换言之，晶体的特异性生长平面可作为例如，在晶体的粉末X射线衍射法中的衍射峰的峰强度特别高的峰来检测。 [0070] 其中(20-2)平面是特异性生长平面的晶体在CuKα作为辐射源的粉末X射线衍射图中在2θ＝24.4°附近具有特异性峰。 [0071] 在24.4°附近的2θ值是例如24.4°±0.7°的范围内，优选24.4°±0.5°的范围内。 [0072] 其中(10-2)平面是特异性生长平面的晶体在CuKα作为辐射源的粉末X射线衍射图中在2θ＝18.3°附近具有特异性峰。 [0073] 在18.3°附近的2θ值是例如18.3°±0.7°的范围内，优选18.3°±0.5°的范围内。 [0074] 在其中对应于(20-2)平面的衍射峰的峰强度特别高的情况下，I(20-2)/[I(001)+I(100)+I(10-1)+I(011)+I(110)+I(11-1)+I(10-2)+I(11-2)+I(020)+I(021)+I(20-2)+I(121)+I(013)+I(11-3)+I(221)]×100的值优选是12％或更高，更优选15％或更高，甚至更优选19％或更高，条件是在粉末X射线衍射图中以CuKα作为辐射源在2θ＝5-35°范围内检测的衍射峰中，对应于(001)平面、(100)平面、(10-1)平面、(011)平面、(110)平面、(11-1)平面、(10-2)平面、(11-2)平面、(020)平面、(021)平面、(20-2)平面、(121)平面、(013)平面、(11-3)平面和(221)平面的衍射峰的峰强度分别是I(001)、I(100)、I(10-1)、I(011)、I(110)、I(11-1)、I(10-2)、I(11-2)、I(020)、I(021)、I(20-2)、I(121)、I(013)、I(11-3)和I(221)。考虑到晶体性质的实际维持，假定该值的上限为约50％。 [0075] 在其中对应于(10-2)平面的衍射峰的峰强度特别高的情况下，I(10-2)/[I(001)+I(100)+I(10-1)+I(011)+I(110)+I(11-1)+I(10-2)+I(11-2)+I(020)+I(021)+I(20-2)+I(121)+I(013)+I(11-3)+I(221)]×100的值优选是20％或更高，更优选25％或更高，甚至更优选30％或更高。考虑到晶体性质的实际维持，假定该值的上限为约50％。 [0076] 抑制棘阿米巴属生长的作用随着峰强度比例的增加而增加。尤其优选的实施方案是具有以下两种晶体习性性质的晶体，即其中(20-2)平面和(10-2)平面特异性生长。 [0077] 为了获得具有这种晶体习性的晶体，优选的是使用可含有极性溶剂的乙腈重结晶由上述方法或类似方法获得的卢立康唑单斜晶体。可以根据通常的方法来进行的重结晶(除了溶剂的选择之外)，优选如下进行，例如，将卢立康唑晶体在温热下(通常在40至80℃，优选40至60℃)溶解在溶剂中以完全将晶体溶解在溶剂中，然后搅拌下冷却所得物(通常在5℃至室温)，过滤晶体，并通过在室温至约40℃的低温下通入空气来干燥所述晶体。重结晶也可以通过将晶体完全溶解在溶剂中，接着蒸发溶剂进行。所述极性溶剂的优选实例包括水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、二甲基亚砜、和二甲基甲酰胺，且选自水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺的极性溶剂是更优选的。 [0078] 当在生产方法中乙腈含有极性溶剂时，所添加的极性溶剂的量相对于乙腈的质量为5-95质量％，优选7-75质量％，更优选7-20质量％。 [0079] 用非质子性极性溶剂和质子性极性溶剂的混合溶剂重结晶卢立康唑晶体的方法也可用在生产其中(20-2)平面和/或(10-2)平面是特异性生长平面的晶体的方法中。非质子性极性溶剂的优选实例包括乙酸乙酯、丙酮、二甲基亚砜和二甲基甲酰胺。质子性极性溶剂的优选实例包括水、甲醇、和乙醇。非质子性极性溶剂和质子性极性溶剂之间的混合物比例(质量比)可以考虑晶体的溶解度、溶剂的沸点等来选择，通常为9:1至1:9，优选7:3至3:7，更优选3:2至2:3，并且还更优选为4:3到3:4。可以用类似于使用乙腈重结晶的方式来进行重结晶。 [0080] 为了促进晶体析出，也可以加入非极性溶剂如正己烷，环己烷或石油醚作为不良溶剂。在这样的情况下，所添加的不良溶剂的量相对于其它溶剂的总和通常为约5-60质量％，优选7-50质量％，且更优选为10-40质量％。 [0081] 在本申请使用的晶体的优选平均粒径为10-500微米，更优选为50-400微米，进一步更优选150-300μm。这是因为过小的平均粒径可能不利地导致小的晶体习性而过大的平均粒径可能导致给药障碍。例如，通过如上所述的方法获得满足这样的平均粒径的晶体。 [0082] 可测量和获得卢立康唑的平均粒径并作为数均粒径(number average particle diameter)。可通过分析显微图像来测量和获得数均粒径作为平均粒径。例如，可按以下步骤进行测量。首先，使用倒置显微镜(由NIKON CORPORATION制造的倒置显微镜Diaphot)观察卢立康唑粉末。然后，选择任意的颗粒，并测量颗粒的粒径。在这种情况下，针对100个或更多个颗粒进行测量。此外，卢立康唑的平均粒径可作为用激光衍射型粒度分布测量装置测量和获得的平均粒径获得。 [0083] 通过例如重结晶和/或类似方法获得的卢立康唑晶体可通过通常方法以湿法或干法研磨，目的是调整晶体的平均粒径，在研磨中使用的器械的优选实例包括气流粉碎机、戴诺研磨机(dinomill)、Cobol研磨机、研钵机和球磨机。在用气流粉碎机进行干法研磨的情况中，优选的是用快速磨(speed mill)和/或类似装置预先进行粗磨，然后进行处理。在这种情况中，也可以添加赋形剂如淀粉或纤维素、润滑剂如硬脂酸镁、和/或类似物质，并进行处理。在使用介质研磨机(medium mill)如戴诺研磨机或Cobol研磨机进行湿法研磨的情况下，优选的是使用可含有醇和/或类似物质的水性介质用氧化锆或钛介质进行研磨，然后通过过滤和/或类似操作除去固体研磨介质，然后通过例如，减压蒸馏除去液体介质。在一些情况中，也可以添加表面活性剂来改善卢立康唑对于液体介质的润湿性。此外，优选的是，运用提供有玛瑙研钵和研棒的研钵机。当然，也可以用研钵和研棒通过手动操作进行研磨。球磨机可用于湿法或干法研磨中。 [0084] (3)抗棘阿米巴属药物 [0085] 本申请的抗棘阿米巴属药物可具有这样的实施方案，其中所述药物由卢立康唑组成，或本申请的抗棘阿米巴属药物可具有这样的实施方案，其中所述药物还含有，例如制剂中通常使用的任选成分，除非所述成分妨碍本发明的效果。本申请的抗棘阿米巴属药物的一个优选的实施方案是其中固体卢立康唑存在于药物中的制剂(固体制剂)。固体制剂的实例包括：固体制剂诸如片剂、胶囊和粉剂；半固体制剂诸如软膏和乳膏；和其中固体分散于水性介质中的固体分散液体制剂。可优选描述这样的实例，其中本申请的抗棘阿米巴属药物被制备成：口服给药的药物诸如片剂或胶囊；外用制剂诸如软膏、乳膏或固体分散液体制剂，其含有任选成分诸如赋形剂、崩解剂、粘合剂、调味剂、分散剂、乳化剂，或含水介质；粉剂，其含有任选的成分诸如增容剂；等等。尤其优选的实例包括直接眼内给药粉剂，水性介质分散制剂，或以软膏形式的眼用软膏。 [0086] 在其中本申请的抗棘阿米巴属药物被加工成抗棘阿米巴属组合物诸如药物的情况下，作为活性成分的卢立康唑的含量相对于组合物的总量通常为0.1-50质量％，优选为0.5-15质量％。 [0087] 本申请的抗棘阿米巴属药物可用于对抗由棘阿米巴属引起的感染(例如，角膜炎)的预防和治疗应用。本申请的抗棘阿米巴属药物的剂型可适当选择，这考虑到患者的体重、年龄、性别、症状和/或类似情况，且在成人的情况下，优选的是以通常每日1-100mg的活性成分的量给药制剂。优选的是每日一次或每日两次进行给药。[实施例] [0088] 通过描述实施例更详细地解释本申请，但是本申请不限于所述实施例。 [0089] <实施例1> [0090] 将多食棘阿米巴(A.polyphaga；临床分离物)在ATCC712培养基(下文简称为培养基)中在25℃培养1周，然后通过加入培养基来调节培养基，使得阿米巴的数目为100,000个阿米巴/mL，从而制备预培养液。对照和样品通过加入4.3mL培养基、200μL样本和500μL预培养液来制备。将阿米巴在25℃培养72小时，然后通过Neubauer计数室计算阿米巴的数目。 [0091] 样本中使用的卢立康唑如下所述获得。化合物根据日本专利公开号60-218387中所述的方法合成，加入乙酸乙酯/正己烷混合物(5:1)：并将所得物在60℃加热，并在搅拌下溶解。在5℃在冷却水中搅拌所得物时析出晶体，过滤，并通过在40℃通入空气48小时干燥，获得晶体。 [0092] 使用甲醇作为溶剂准备样本，使得卢立康唑的最终浓度为0、5、10、20或40μg/mL。其中卢立康唑的最终浓度为0μg/mL的样本用作对照。 [0093] 生长抑制率基于[(对照中阿米巴的数目-每个样品中阿米巴的数目)/对照中阿米巴的数目]×100计算。MIC和IC50基于生长抑制率通过一般方法计算。生长抑制率列于表1中。MIC为40μg/mL且IC50为20μg/mL。 [0094] [表1] [0095] 表1 [0096]浓度 抑制率(％) SD 40μg/mL 95.0 8.7 20μg/mL 50.0 22.9 10μg/mL 40.0 0 5μg/mL 20.0 8.7 [0097] <实施例2> [0098] 为了生产固体制剂，按以下条件生产了具有晶体习性的晶体。 [0099] (溶剂)乙腈 [0100] (结晶方法)蒸发方法(卢立康唑在50℃溶解，并冷却至室温。然后，当存在残余晶体时，除去该晶体。溶剂在室温下蒸发1天，导致重结晶，然后进行过滤和风干。)[0101] 获得的晶体的粉末X射线衍射(装置型号名称：XRD-DSCII；制造商名称：Rigaku Corporation；条件：X射线源：CuKα；测量温度：室温；管电压：40kV；管电流：40mA；2θ：5-35°；步距角：0.05°)显示了如下所示的表2中列出的衍射图。另外，粉末X射线衍射的结果示于图 1。其表明所述晶体为本发明的卢立康唑晶体。通过与来自单晶X射线结构分析(装置型号名称：RU-H2R；制造商名称：Rigaku Corporation；条件：X射线源：CuKα；测量温度：26℃；管电压：50kV；管电流：180mA；2θmax：150.0°；结构分析方法：直接法(SHELX86))的数据进行对比来鉴定对应于每个衍射峰的晶体平面。从单晶X射线结构分析获得的各种数据示于下文和图2中。特异性生长晶体平面通过将该数据与粉末X射线衍射数据对比从衍射峰强度的比例指定。结果列在表2中。 [0102] 每个峰强度比例是对应于(001)平面、(100)平面、(10-1)平面、(011)平面、(110)平面、(11-1)平面、(10-2)平面、(11-2)平面、(020)平面、(021)平面、(20-2)平面、(121)平面、(013)平面、(11-3)平面和(221)平面的衍射峰的峰强度的总和的比例。 [0103] 晶系：单斜 [0104] 空间群：P21 [0105] 晶格参数 [0106] [0107] [0108] [0109] β＝95.917(9)° [0110] R因子 [0111] R＝0.046 [0112] Rw＝0.047 [0113] [表2] [0114] 表2 [0115] [0116] *粉末X射线衍射图的计算值由单晶结构分析数据计算 [0117] <实施例3> [0118] 用乙酸乙酯/正己烷混合物(4:3)作为重结晶溶剂在回流下进行溶解2小时，经过滤除去残余物，搅拌下进行冰冷却从而进行重结晶，过滤且进行风干4小时，获得晶体，其为本发明的抗棘阿米巴属药物。以与实施例2类似的方式进行粉末X射线分析。所得的X射线粉末衍射数据如下所述。 [0119] [表3] [0120] 表3 [0121] [0122] *粉末X射线衍射图的计算值由单晶结构分析数据计算 [0123] <实施例4> [0124] 用甲醇/二甲基亚砜混合物(1:1)作为重结晶溶剂在50℃进行溶解。然后，当存在残余晶体时，除去该晶体。在5℃进行冷却从而进行重结晶，过滤且进行风干，获得晶体，其为本发明的抗棘阿米巴属药物。以与实施例2类似的方式进行粉末X射线分析。所得的X射线粉末衍射数据如下所述。 [0125] [表4] [0126] 表4 [0127] [0128] *粉末X射线衍射图的计算值由单晶结构分析数据计算 [0129] <实施例5> [0130] 用乙腈作为重结晶溶剂在50℃进行溶解。然后，当存在残余晶体时，除去该晶体。在室温进行冷却从而进行重结晶，过滤且进行风干，获得晶体，其为本发明的抗棘阿米巴属药物。以与实施例2类似的方式进行粉末X射线分析。所得的X射线粉末衍射数据如下所述。 [0131] [表5] [0132] 表5 [0133] [0134] *粉末X射线衍射图的计算值由单晶结构分析数据计算 [0135] <实施例6> [0136] 用甲醇作为重结晶溶剂在50℃进行溶解，然后冷却到25℃。然后，当存在残余晶体时，除去该晶体。然后，加入正己烷作为不良溶剂，在25℃在搅拌下进行重结晶，过滤且进行风干，获得晶体，其为本发明的抗棘阿米巴属药物。以与实施例2类似的方式进行粉末X射线分析。所得的X射线粉末衍射数据如下所述。 [0137] [表6] [0138] 表6 [0139] [0140] *粉末X射线衍射图的计算值由单晶结构分析数据计算 [0141] <实施例7> [0142] 实施例2-6中的晶体的抗棘阿米巴属活性基于实施例1中的方法检查。换言之，将相对于4.5mL ATCC712培养基阿米巴的数目为50,000个的多食棘阿米巴(A.polyphaga)分散并接种于500μL培养基中，然后在25℃初步培养48小时。向所得物中，加入实施例2-6中的1mg各晶体，制备对照和样品。继续在25℃培养72小时，在培养液中阿米巴的数目通过Neubauer计数室测量。使用了未加入任何物质并在其中培养阿米巴的对照。 [0143] 生长抑制率根据表达式[(对照中阿米巴的数目-每个样品中阿米巴的数目)/对照中阿米巴的数目]×100由计数值计算。该结果列于表7。 [0144] 另外，实施例2-6中的晶体的平均粒径使用倒置显微镜测量。换言之，对实施例中各晶体的三个样品进行取样。使用NIKON CORPORATION制造的倒置显微镜Diaphot(40倍)，每个样品的粒径实际上在10个视野中用载玻片测量进行测量，然后测量其平均粒径。将三个样品的粒径进一步平均，得到平均粒径。结果列于表7。实施例2-6中的晶体的显微照片示于图3。 [0145] [表7] [0146] 表7 [0147] [0148] 基于上述结果，检查(10-2)平面的峰强度比例(％)和生长抑制率(％)之间的关系，以及(20-2)平面的峰强度比例(％)和生长抑制率(％)之间的关系，揭示前者的相关系数为0.89，而后者的相关系数为0.90，显示了更有利的相关。换言之，发现就本发明的抗棘阿米巴属药物中使用的晶体而言，(20-2)平面的峰强度比例优选是12％或更高，更优选15％或更高，甚至更优选19％或更高。另外，发现(10-2)平面的峰强度比例优选是20％或更高，更优选25％或更高，甚至更优选30％或更高。另外，发现同时满足所述的两个条件是优选的。 [0149] <实施例8> [0150] 根据以下配方使用本申请的抗棘阿米巴属药物生产眼用软膏。换言之，在无菌条件下用捏合机捏合制剂成分，得到眼用软膏(单位:质量份数)。 [0151] [表8] [0152] 表8 [0153] [0154] <实施例9> [0155] 根据以下配方使用本申请的抗棘阿米巴属药物生产眼用粉剂。换言之，在无菌条件下用捏合机捏合制剂成分，得到眼用粉剂(单位:质量份数)。 [0156] [表9] [0157] 表9 [0158] [0159] <实施例10> [0160] 根据以下配方使用本申请的抗棘阿米巴属药物生产水性介质分散体形式的药物组合物。换言之，搅拌制剂成分制得均匀的分散体制剂，将其分配、密封，然后在高压釜中灭菌(120℃,15分钟)，得到本申请的水性外用制剂(单位:质量百分比)。 [0161] [表10] [0162] 表10 [0163] [0164] [工业应用] [0165] 本申请可应用于药物。 |
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