具有降血糖功能的益生菌组合物及其制备方法与应用 |
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申请号 | CN201610072510.9 | 申请日 | 2016-02-02 | 公开(公告)号 | CN105707896A | 公开(公告)日 | 2016-06-29 |
申请人 | 武汉万德瑞生物技术有限公司; | 发明人 | 王业富; 刘秋晨; 董艳山; 石毅; 颜雪辉; | ||||
摘要 | 本 发明 公开了一种具有降血糖功能的 益生菌 组合物及其制备方法与应用。本发明制备该组合物的主要原料为:乳杆菌、双歧杆菌、芹菜提取物。双歧杆菌、乳杆菌等益生菌在通过其胞外蛋白酶、肽酶的 水 解 作用将食物蛋白中具有降压活性的肽 片段 释放出来,从而起到降血糖的作用。中药对于有益菌而言,是绝佳的 益生元 ,本发明将益生菌与中药完美结合,找出了具有明显降血糖效果的益生菌组合物。本发明的方法操作简单,益生菌组合物降血糖效果显著,适合产业化生产,具有市场应用价值。 | ||||||
权利要求 | 1.一种具有降血糖功能的益生菌组合物,其特征在于:按质量百分比计,它包含如下组分:益生菌干粉60~70%,黄连提取物粉10~15%、黄芪提取物粉10~15%、金银花提取物粉5~10%。 |
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说明书全文 | 具有降血糖功能的益生菌组合物及其制备方法与应用【技术领域】 [0002] 正常情况下,人体能够通过激素调节和神经调节这两大调节系统确保血糖的来源与去路保持平衡,使血糖维持在一定水平。但是在遗传因素(如糖尿病家族史)与环境因素(如不合理的膳食、肥胖等)的共同作用下,两大调节功能发生紊乱,就会出现血糖水平的升高。长期的高血糖会使全身各个组织器官发生病变,导致急慢性并发症的发生。如胰腺功能衰竭、失水、电解质紊乱、营养缺乏、抵抗力下降、肾功能受损、神经病变、眼底病变等。控制高血糖势在必行。人类的健康生活,与外环境(如空气、水源)和内环境(如血液、组织液)的稳定密切相关。血糖过高正是破坏了人体的内环境,引起一系列生化病理改变,影响了各个脏器的功能。 [0003] 基于大量的研究表明,当益生菌到达肠道后,引发机体兴奋的交感神经功能受到了抑制,而起“刹车”作用的副交感神经活跃起来,肠神经兴奋时分泌的使血糖值上升的高血糖素减少,抑制了血糖值异常上升。益生菌作为一般细菌最喜欢的物质,葡萄糖也会优先被粘膜上的益生菌利用。益生菌减少了葡萄糖的吸收。有大量的益生菌存在时,作用会非常明显。其次,当摄入大量益生菌时,益生菌会和肠内有害细菌激战,需要身体供给益生菌大量葡萄糖,这主要靠血液来运输,从而加速葡萄糖的代谢。第三,I型糖尿病是由于自身免疫机能发生异常而导致胰岛细胞被破坏引起的,而益生菌也具有调节免疫的功能。 [0004] 金银花、黄芪、黄连这些中药的主要有效成分直接针对糖尿病根源,有效抑制糖毒素产生,修复受损胰岛细胞,促使胰岛细胞正常释放胰岛素,迅速降低血糖;这些药物成分中的各种活性因子等活性成分可阻止高血糖对血管神经的破坏,修复受损血管神经,预防和治疗各种糖尿病并发症,通过保卫胰岛,降低血糖,提高免疫来控制高血糖。具有毒副作用小、材料容易获得且可长期服用等优势。 [0005] 传统上中药的使用,绝大多数以方剂的形式通过口服吸收而发挥作用,中药中的有效成分在进入肠道之后不可避免地与肠道菌群发生关联,某些成分经相应细菌的作用发生生物转化后被吸收,因此,体内环境中肠道菌群是完成中药有效成分生物转化的重要因素之一。有益菌和中药是两类国际公认的益生物质,两者在基本理论观点上极为相似、一脉相通;在作用机理上显示极大的统一性;在具体使用过程中也能完美互补,共同发挥优势。因而中药对于有益菌而言,是绝佳的益生元。本发明将益生菌与中药完美结合,找出了具有明显降血糖效果的益生菌组合物配方。 【发明内容】 [0006] 本发明的目的在于提供一种具有降血糖功能的益生菌组合物,该组合物能够有效降低血糖,改善血糖含量。 [0007] 本发明的另一目的在于提供上述具有降血糖功能的益生菌组合物的制备方法。 [0008] 本发明的再一目的在于提供上述具有降血糖功能的益生菌组合物的应用。 [0009] 本发明的目的通过下述技术方案实现: [0010] 一种具有降血糖功能的益生菌组合物,其特征在于:按质量百分比计,它包含如下组分:益生菌干粉60~70%,黄连提取物粉10~15%、黄芪提取物粉10~15%、金银花提取物粉5~10%。 [0011] 作为优选方案,按质量百分比计,它包含如下组分:益生菌干粉60%,黄连提取物粉15%、黄芪提取物粉15%、金银花提取物粉10%。 [0012] 进一步地,所述益生菌干粉由乳杆菌、双歧杆菌按质量比1:1组成。 [0013] 一种制备上述具有降血糖功能的益生菌组合物的方法,它包括如下步骤: [0014] 1)选料:选取含有双歧杆菌、乳杆菌的益生菌干粉,黄连提取物粉、黄芪提取物粉、金银花提取物粉; [0015] 2)过筛:将选好的益生菌干粉、黄连提取物粉、黄芪提取物粉、金银花提取物粉分别过80~100目筛; [0016] 3)配料:将过筛后的益生菌干粉、黄连提取物粉、黄芪提取物粉、金银花提取物粉,按质量百分比为益生菌干粉60~70%,黄连提取物粉10~15%、黄芪提取物粉10~15%、金银花提取物粉5~10%称量备用; [0017] 4)混合:将步骤3)中配好的原料于三维混合机中混合至色泽均匀一致,无色差,即得到具有降血糖功能的益生菌组合物。 [0018] 进一步地,所述益生菌干粉的制备步骤如下: [0019] a)分别将乳杆菌、双歧杆菌经培养基活化后,接种于发酵培养基中,振荡培养,使菌体浓度达到对数生长期0.5~1.0×109cfu/ml;所述的双歧杆菌为青春双歧杆菌,婴儿双歧杆菌,两歧双歧杆菌,长双歧杆菌中的至少两种等比例混合菌,优选青春双歧杆菌,婴儿双歧杆菌两种等比例混合菌。 [0020] b)将步骤a)中各菌种发酵液混合后离心,弃上清,菌体沉淀洗涤,离心,灭菌,得菌泥; [0022] d)将干粉保护剂和菌泥混合,进行成膜反应,然后将混合物预冻,再冷冻干燥,制成具有包埋层的活性益生菌干粉。 [0023] 一种上述的具有降血糖功能的益生菌组合物在制备降血糖食品/保健品中的应用。 [0024] 进一步地,所述食品为粉剂、片剂、胶囊剂、颗粒、冲剂、果冻、饮料、乳制品、酸奶或小点心烘烤品中任一种;所述保健品为粉剂、片剂、胶囊剂、液体剂、悬浮液、乳剂、口服液、果冻或冲剂中任一种。 [0026] 金银花提取物粉为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾提取物。“金银花”一名出自《本草纲目》,由于忍冬花初开为白色,后转为黄色,因此得名金银花。金银花系常用名贵中药材之一。具有清热解毒、通经活络、广谱抗菌及抗病毒等功效,70%以上的感冒、消炎中成药中都含有金银花。具有“中药抗生素”、“绿色抗菌素”之称。金银花的作用除药用外,其美容、减肥和保健养生的作用更为神奇,对身体所起到的巨大保护和修复作用是十分显著的。李时珍在他的《本草纲目》中如是说:久服轻身,长年益寿。金银花性甘寒,善于清热解毒、降火气、祛湿气,特别适合在夏天减肥服用。 [0027] 黄芪提取物粉为豆科植物蒙古黄芪的根提取物。多年生草本,高50-100厘米。主根肥厚,木质,常分枝,灰白色。茎直立,上部多分枝,有细棱,被白色柔毛。多年生草本,高50-100厘米。产于内蒙古、山西、甘肃、黑龙江等地。黄芪的药用迄今已有2000多年的历史,具有增强免疫力,增强能量,抗疲劳,抗突变,保肝,抑制破骨细胞的作用。黄芪多糖具有降血脂,即降低胆固醇和甘油三酯、升高高密度脂蛋白的作用;能够预防和治疗心脑血管疾病,如动脉粥样硬化、冠状动脉病变、周围血管病变以及高脂血症等。另有研究表明,12.5%的黄芪对双歧杆菌有明显的促进生长作用。 [0028] 黄连提取物粉为毛茛科植物黄连的根提取物。多年生草本。根茎黄色,常分枝,密生多数须根。主产中国重庆、四川、湖北、贵州、陕西等地。黄连是40种大宗中药材之一,而且也是30种名贵中药材之一。功能主治:清热燥湿,泻火解毒。用于湿热痞满,呕吐吞酸,泻痢,黄疸,高热神昏,心火亢盛,心烦不寐,血热吐衄,目赤,牙痛,消渴,痈肿疔疮;外治湿疹,湿疮,耳道流脓。酒黄连善清上焦火热。用于目赤,口疮。姜黄连清胃和胃止呕。用于寒热互结,湿热中阻,痞满呕吐。萸黄连舒肝和胃止呕。用于肝胃不和,呕吐吞酸。 [0029] 本发明中使用的黄连提取物粉、黄芪提取物粉、金银花提取物粉为中药原料经水提后的产物,其均已在市场上广泛应用,各种提取物的制备是已有的技术,得到的产品只是在物质浓度上有所差别,其各种产品均可在本发明中实施应用。 [0030] 上述具有降血糖功能的益生菌组合物在制备降血糖食品/保健品中的应用,该组合物可以加一种或多种药学上可接受的载体制成片剂、胶囊、颗粒、口服液等剂型。 [0031] 本发明的有益效果在于:本发明的益生菌组合物以益生菌干粉、黄连提取物粉、黄芪提取物粉、金银花提取物粉为原料直接投料,按重量科学配比而成。制备工艺简单,避免了提取时造成的药物损失和由于原药材质量差异造成的不同产品质量差异较大的缺点,使产品纯度更高,杂质少,安全性更高,且不同批次间质量差异小,质量更均匀稳定。通过传统中药与益生菌合理配伍用药,经药学实验证明,药效优于单独使用任何一种原料,各有效成分呈协同作用,具有降血糖等功效。【具体实施方式】 [0032] 下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。 [0033] 实施例1 [0034] (1)选料 [0035] 制备益生菌干粉: [0036] 1)分别将双歧杆菌、植物乳杆菌经培养基活化后,接种于发酵培养基中,振荡培9 养,使菌体浓度达到对数生长期0.5~1.0×10cfu/ml; [0037] 双歧杆菌种子液的制备:取出菌种保藏管,用双歧杆菌固体培养基划平板进行复苏,37度厌氧培养72小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升双歧杆菌培养基中,在培养箱中37度厌氧培养48小时。种子采用5%的接种量,接种至10L大三角瓶中(装液量为9.5L),37度厌氧培养20-28小时,检测其菌液浓度,菌含量超过10亿/毫升,即可作为双歧杆菌液体菌种接种。其中所述的双歧杆菌培养基:蛋白胨5.0g/L,酵母提取物5g/L,牛肉膏5.0g/L,胰蛋白胨10.0g/L,葡萄糖10.0g/L,醋酸钠5.0g/L,柠檬酸二铵2.0g/L,吐温-801.0ml/L,硫酸镁0.1g/L,硫酸锌0.25g/L,磷酸氢二钾2g/L,固体培养基中加入琼脂2%。培养基灭菌的条件为:0.10-0.15MPa,121℃灭菌30分钟。 [0038] 乳杆菌种子液的制备:取出菌种保藏管,用MRS固体培养基划平板进行复苏,37度厌氧培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种250毫升MRS培养基中,在培养箱中37度厌氧培养24小时。种子采用5%的接种量,接种至10L大三角瓶中(装液量为9L),37度厌氧培养20-28小时,检测其菌液浓度,菌含量超过100亿/毫升,即可作为乳杆菌液体菌种接种。其中所述的MRS培养基:蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,牛肉膏10g/L,葡萄糖20g/L,醋酸钠5g/L,柠檬酸二铵2g/L,吐温-801ml/L,硫酸镁0.6g/L,硫酸锰0.05g/L,磷酸氢二钾2g/L,琼脂 20g/L,碳酸钙20g/L,固体培养基中加入琼脂2%。其中所述的乳酸菌种子培养基:葡萄糖 5%,蛋白胨1.5%,牛肉膏0.75%,氯化钠0.1%,硫酸锰0.001%,硫酸镁0.02%,醋酸钠 0.05%,碳酸钙1%,pH6.0。各培养基灭菌的条件为:0.10-0.15MPa,121℃灭菌30分钟。 [0039] 2)将各菌种发酵液混合后离心,弃上清,菌体沉淀洗涤,离心,灭菌,得菌泥; [0040] 3)配制干粉保护剂; [0041] 4)将干粉保护剂和菌泥混合,进行成膜反应,然后,将混合物预冻,再冷冻干燥,制成具有包埋层的活性益生菌干粉;益生菌干粉、黄连提取物粉、黄芪提取物粉、金银花提取物粉均购自西安天一生物技术有限公司。 [0042] (2)过筛 [0043] 将步骤(1)中的益生菌干粉、黄连提取物粉、黄芪提取物粉、金银花提取物粉分别过80~100目筛。 [0044] (3)配料 [0045] 称量过筛后的原料,按益生菌干粉60%、黄连提取物粉15%、黄芪提取物粉15%、金银花提取物粉10%,以上含量均为重量百分比含量。 [0046] (4)混合 [0047] 将配好的益生菌干粉、黄连提取物粉、黄芪提取物粉、金银花提取物粉于三维混合机中混合至色泽均匀一致,无色差,即得到具有降血糖功能的益生菌组合物。 [0048] 实施例2: [0049] 具体步骤同实施例1,区别在于:称量过筛后的原料,按益生菌干粉70%、黄连提取物粉10%、黄芪提取物粉10%、金银花提取物粉10%,以上含量均为重量百分比含量。 [0050] 实施例3: [0051] 具体步骤同实施例1,区别在于:称量过筛后的原料,按益生菌干粉65%、黄连提取物粉15%、黄芪提取物粉15%、金银花提取物粉5%,以上含量均为重量百分比含量。 [0052] 实施例4: [0053] 具体步骤同实施例1,区别在于:称量过筛后的原料,按益生菌干粉65%、黄连提取物粉12%、黄芪提取物粉15%、金银花提取物粉8%,以上含量均为重量百分比含量。 [0054] 实施例5:具有降血糖功能的益生菌组合物实验性糖尿病大鼠的血压的影响[0055] (1)实验性糖尿病大鼠模型的建立:实验性糖尿病大鼠模型动物模型的建立:采用注射化学诱导剂(链脲佐菌素或四氧嘧啶)的方法,引起短时间内胰岛β细胞大量损害而诱发糖尿病动物模型的建立。 [0056] 大鼠在武汉大学生命科学学院实验动物中心饲养室饲养。饲养期间大鼠4只一笼,自由摄食和饮水,明暗周期为12h,室温22~25℃,相对湿度40%~60%,通风良好。取80只雄性SD大鼠,随机分为普通组(10只)和造模组(70只)。普通组投喂基础饲料,造模组注射化学诱导剂。每天量一次血糖浓度,喂养、注射7周后,高血糖组大鼠中有36只大鼠的血糖浓度超过基础饲料组大鼠血糖浓度加1.3倍标准差,成模率50.6%。 [0057] (2)分组与给药 [0058] 随机取24只作为益生菌组合物干预实验大鼠,分为3组,分别为模型对照组、实施例1—4组合物组、益生菌干粉组,每组8只;基础饲料组中随机取8只作为正常对照组,共7组,各组与正常对照组相比差异显著。用药组与模型组继续注射化学诱导剂,正常对照组投喂基础饲料。实施例1组合物和益生菌干粉分别为1000,500mg·kg-1,用纯净水配成10%、5%的混悬液,灌胃给药体积为10mL·kg-1,连续6周。给药时间在下午15:00一l7:00。模型组灌胃给予等体积的纯净水,正常对照组不作任何处理。 [0059] (3)益生菌组合物对糖尿病大鼠血糖浓度的影响 [0060] 实施例1组合物和益生菌干粉都能显著降低大鼠的血糖浓度,其中实施例1组合物效果更好。用药第1、2周,大鼠的血糖浓度开始降低,第3、4、5、6周与模型组相比差异非常显著,并且低于正常对照组(表1)。 [0061] 表1益生菌组合物对大鼠血糖浓度的影响.n=8 [0062] [0063] 益生菌组合物组都能显著降低大鼠的血糖浓度,用药第1、2周,大鼠的血糖浓度开始降低,第3、4、5、6周与模型组相比差异非常显著。 |