一种速溶药食同源食品提取物冻干粉及其制备方法 |
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| 申请号 | CN201610743227.4 | 申请日 | 2016-08-27 | 公开(公告)号 | CN106360720A | 公开(公告)日 | 2017-02-01 |
| 申请人 | 北京科慧通智慧科技有限公司; | 发明人 | 邵素英; | ||||
| 摘要 | 本 发明 公开了一种速溶药食同源食品提取物冻干粉，以药食同源食品为原料，全程采用低温提取工艺，得到的提取物最大限度地保留了药食同源食品的天然色泽、 风 味和口感；提取物在 真空 冷冻干燥 过程采用天然 植物 原料制备的具有显著抗冻效果的抗冻剂代替传统的、现有的 冷冻保护剂 ，进一步大大降低了冻干工艺造成的冷冻损失，有效提高了提取物冻干粉的 生物 活性和营养价值，并与功能性膳食 纤维 粉、益生因子和植物乳杆菌粉科学复配，显著增强了提取物冻干粉的药食营养均衡性以及功能性、溶解性和益生性，延长了产品的保质期，最终制得一种营养物质及生物活性物质含量高、功能强、抗冻效果及溶解性好、成本低的速溶药食同源食品提取物冻干粉。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种速溶药食同源食品提取物冻干粉，主要由以下重量份数的原料制备：药食同源食品30-50份，膳食纤维粉10-20份，抗冻剂5-15份，益生因子5-15份，植物乳杆菌粉2-10份； |
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| 说明书全文 | 一种速溶药食同源食品提取物冻干粉及其制备方法技术领域[0001] 本发明涉及冻干粉的制备，具体涉及一种速溶药食同源食品提取物冻干粉及其制备方法。 背景技术[0002] 冻干粉是在无菌环境下将药液冷冻成固态，抽真空将水分升华干燥而成的无菌粉。对于干燥热敏性制品和需要保持生物活性的物质，冻干是一种有效的方法。此法是将需要干燥的制品在低温下使其所含的水分冻结，然后放在真空的环境下干燥，让水分由固体状态直接升华为水蒸气并从制品中排除而使制品活动干燥。该方法有效地防止了制品理化及生物特性的改变，对生物组织和细胞结构和特征的损伤较小，使其快速进入休眠状态，有效保护了许多热敏性药物生物制品有效成份的稳定性，如蛋白质、微生物类不会发生变性和丢失其生物活性；其次，冻干制品在干燥后形态疏松、颜色基本不发生改变，加水后能够快速溶解并恢复原有水溶液的理化特性和生物活性；由于干燥在真空条件下进行，对于一些易氧化的物质具有很好的保护作用；制品经过冻干后水份含量非常低，使制品的稳定性提高，受污染的机会减小，这不仅方便了运输还延长了制品保存期限。 [0003] 药食同源"是我国劳动人民在食物和药物发现中总结的智慧结晶,体现了食物在保健和治疗方面的功能。在我国古代,劳动者认识到药食同功、同理而亦有界限,并产生了"药食两用"物品这一类群。古代本草,尤其是食物类本草著作,记载了大量的"药食两用"中药材,并对相关原理、功效、禁忌及用法等进行详述,为今天的"药食两用"品种研究提供了宝贵的依据。 [0004] 无论从国际市场看还是国内市场，带有功能的健康食品需求越来越旺盛，国际国内出现的粮食问题也将抬高健康食品的整体需求，从消费者不断发出对健康食品的追求与食品本身衍生出来的话题来看，已经开始影响到消费行为的整体变化，包括营养食品、功能食品、有机食品、保健食品等。健康产业无论从政府行为到企业行为，正经历一场前所未有的大变革当中，健康食品将是这个变革当中的首膳之区，随着生活水平的提高，人们对于食品的要求也越来越高，人们除了要求吃得健康的同时，也希望通过吃来实现强身健体的愿望。所以消费者在选择食品的时候会有意识的去选择药食同源的食品与之搭配。而且药食同源的食品价格比较大众化，一般的人都能消费得起，相对保健品而言更多的人会选择前者，因此药食同源食品的前景是可观的。总之，药以治病为务，食以养生为主，你中有我，我中有你，难分彼此，难辨高下。“药食同源，同病异治，异病同治”。 [0005] 目前，以中药材制备冻干粉针剂的较多：中国专利CN 103462911 B公开了一种冻干粉针剂的制备技术。包括如下步骤：40％～90％处方量的注射用水冷却至20～60℃，调节或不调节pH，顺序加入各处方物质，搅拌、测pH或调节pH，补水，控温条件下加处方量的活性炭、搅拌脱色、压滤，过滤除菌得无菌药液，将其分装至西林瓶中，冷冻干燥，轧盖，即得冻干粉针剂。该方法操作简单、生产周期短，适于工业化生产，可以避免产品因高热而分解，且避免药物间缓慢的配伍变化，产品计量准确、外观优良，有利于增加药物的稳定性，便于药品的长期储存。本发明生产技术广泛适用于磷酸川芎嗪、奥扎格雷钠、左卡尼汀、奥美拉唑等药物的冻干粉针剂的制备。中国专利CN 103211772 B公开了一种依托泊苷冻干粉针剂，能够克服上述依托泊苷的缺陷，提高依托泊苷生物利用度，使用方便，吸收快，发挥作用迅速。本发明通过对依托泊苷冻干粉针处方的筛选，发现使用特定的赋形剂，并且同时使用抗氧化剂和螯合剂，得到的注射用依托泊苷冻干粉针制剂成品的稳定性高，杂质少，副作用小，安全性更高，具有方便储存和使用，生产成本低等优点。中国专利CN 105232478 A公开了一种氨酪酸冻干粉针及其制备方法，该氨酪酸冻干粉针由氨酪酸、亚硫酸氢钠、甘露醇、pH调节剂制成，通过稳定剂的加入，制得的氨酪酸冻干粉针成品质量稳定、主药含量高，有关物质含量低，并且有效地抑制了喷瓶或者严重萎缩等现象。 [0006] 以药食同源物品为原料制备冻干粉的较少：中国专利CN 103610141 B公开了一种白果冻干粉的制备方法，属于农产品、食品加工技术领域。其包括以下工艺步骤：将破碎后的白果放入清水中浸泡，然后取出沥干；沥干后的白果进行微波熟化；熟化的白果去壳、去囊，然后进行粉碎、挤压成片和脱油脂；脱脂后的白果进行预冻，预冻后进行升温冻干；冻干后的白果磨成粉，即得到白果冻干粉。本发明得到的白果冻干粉有害成分少，重量轻，易于携带和运输，白果更浓缩，营养成分更高。中国专利CN 103229920 A公开了一种蜂蜜冻干粉，它包括蜂蜜，所述的蜂蜜是一种被封装在密闭包装容器内的粉末状冻干粉。所述的粉末状冻干粉可以是每100克所述的粉末状冻干粉中葡萄糖含量为5克至38克，果糖含量为90克至40克，蔗糖含量小于3克，酶值大于9。采用本发明提供的蜂蜜冻干粉的制造方法得到的蜂蜜冻干粉，利用加入适量的冷蒸馏水提高原蜂蜜水的含量的方法，使得蜂蜜能够在低温下形成冰架结构，从而实现冷冻干燥，使得最终得到固体状态的蜂蜜冻干粉，并封装在密闭的包装容器内，从而实现既保存新鲜蜂蜜原有的营养成分，又能实现长期保存。中国专利CN101199344 B公开了一种制取芦笋全营养活性物浓缩汁的冻干粉的“分部——集成”制备方法：将破碎的芦笋组织榨汁，再将汁液中的蛋白质酶类大分子活性物质，以生物絮凝——沉淀剂处理，再以固态“绿泥”(A)形式离析，使之与芦笋酶类水溶性底物脱离，并避免了浓缩工艺中的变性因素(温度、空气、微生物)的影响。相对稳定的上清液中的中小分子，经10倍左右的低温浓缩被富集至澄明微黄的浓缩汁(B)。B分部因生物絮凝——沉降剂及柠檬酸的加入而避免褐变反应。A、B二分部可以单独也可以混合后冻干，即集成为终产物冻干粉。中国专利CN 105249129 A公开了一种蓝莓冻干粉固体饮料，涉及保健饮料加工技术领域，饮料组成为：蓝莓全果冻干粉15-30％、调味剂(白糖等)白糖5％-15％，饮料以蓝莓全果冻干粉为原料直接冲泡而成，加工工艺主要包括冻干、包装和杀菌三道工序，加工工艺简单，设备投资少，生产成本低。相关加工技术成熟，易于工业化生产。全果入料、低温冻干加工处理，产品营养价值高，保健功能好，适应市场发展趋势。 [0007] 虽然冻干粉相对于其它粉剂有很多优势，但是，在真空冷冻干燥过程中会产生大量的冰晶体，对动植物细胞、产品的组织结构、质地及基本构架、营养物质细胞等“冷敏性”物质都会造成刺伤，进而降低营养物质及生物活性物质效价，尤其在活性微生物粉剂制备方面会大大提高微生物的致死率，显著降低活菌数量，上述公开的专利不论是医药领域的冻干粉针，还是药食同源领域的冻干粉食品，均没有在现有真空冷冻干燥的基础上进行改进以解决冷冻过程防冻害问题，并且，虽然有些医药技术领域应用了冷冻保护剂，但多为有毒、有害和化学物质，不能适用于食品技术领域，同时，冻干粉药食同源食品原料单一，溶解性差、功能性低且不全面。 [0008] 中国专利CN 103109930 B一种添加丝胶抗冻肽的果味益生菌酸奶片，其原料由以下按重量份数的组分组成：脱脂奶粉10～14份、蔗糖2～5份、丝胶肽1～3份、果料1～4份、冻干的活性益生菌0.1～0.6份和硬脂酸镁0.1～0.4份，该发明还提供了产品的制备方法，主要工艺流程包括：脱脂乳食品级培养基的制备、益生菌的发酵、丝胶抗冻肽的添加、发酵乳的真空冷冻干燥、粉末压片等工艺，益生菌酸奶片中添加了丝胶抗冻肽和富含B族维生素的水果冻干粉，不仅使酸奶片中益生菌活菌数高，菌活性保存时间较长，而且提高了其口感风味。戚永明对近年来冻干片技术发展和临床优势进行简要总结，并对Zydis技术存在的问题进行分析，同时对冻干片最新研究进展进行介绍，主要论述了冻干技术在国际及国内医药领域的历史、现状和发展趋势，冻干技术存在的缺陷和需要解决的技术问题(戚永明.冻干片制剂研究新进展.Journal of China Prescription Drug 2012.10(4).57-59)。但是，以桑蚕茧制备丝胶抗冻肽原料成本高，抗冻效果单一且仍不很理想。 [0009] 采用药食同源食品制备一种营养物质及生物活性物质含量高、功能强、抗冻效果好、溶解性好、成本低的速溶药食同源食品冻干粉是本领域技术人员的期望和责任。 发明内容[0010] 本发明的目的是克服现有药食同源食品冻干粉的缺陷，以药食同源食品为原料，全程采用低温提取工艺，得到的提取物最大限度地保留了药食同源食品的天然色泽、风味和口感，同时使得提取物含有的生物活性物质和营养保健物质含量最大化，原料提取率和利用率最高，降低了提取成本；提取物在真空冷冻干燥过程采用天然植物原料制备的具有显著抗冻效果的抗冻剂代替传统的、现有的冷冻保护剂，进一步大大降低了冻干工艺造成的冷冻损失，有效提高了提取物冻干粉的生物活性和营养价值，并与功能性膳食纤维粉、益生因子和植物乳杆菌粉科学复配，显著增强了提取物冻干粉的药食营养均衡性以及功能性、溶解性和益生性，延长了产品的保质期，最终制得一种营养物质及生物活性物质含量高、功能强、抗冻效果及溶解性好、成本低的速溶药食同源食品冻干粉。 [0011] 为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案： [0012] 一种速溶药食同源食品提取物冻干粉，主要由以下重量份数的原料制备： [0013] 药食同源食品30-50份，膳食纤维粉10-20份，抗冻剂5-15份，益生因子5-15份，植物乳杆菌粉2-10份； [0014] 优选地，所述速溶药食同源食品提取物冻干粉，主要由以下重量份数的原料制备： [0015] 药食同源食品35-45份，膳食纤维粉13-17份，抗冻剂8-12份，益生因子8-12份，植物乳杆菌粉4-8份； [0016] 更优选地，所述速溶药食同源食品提取物冻干粉，主要由以下重量份数的原料制备： [0017] 药食同源食品40份，膳食纤维粉15份，抗冻剂10份，益生因子10份，植物乳杆菌粉6份； [0019] 进一步地，所述膳食纤维粉是将膳食纤维经物理、化学或生物的方法处理而得到的可溶性纤维素含量高、生物活性强、对人体益生菌群有重要的、积极作用的纤维素，与普通膳食纤维相比，其功能性、生物活性更强大； [0020] 优选地，所述膳食纤维粉是由菊粉、苹果纤维、小麦纤维、燕麦纤维中的一种或多种经超微粉碎、挤压膨化和生物酶酶解而得到的； [0021] 更优选地，所述膳食纤维粉的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、小麦纤维按质量比4-6:2-4:1-3均匀混合，超微粉碎至粒径3-6μm，调整粉碎物水分含量为19-21％，于螺杆转速160-180r/min、温度185-200℃条件挤压膨化，加入膨化物质量2-4倍的水，室温200-400W、35-40KHz条件超声提取10-15min,然后在电场强度20-40kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-400Hz条件下进行高压脉冲电场处理10-15min；用乳酸调节pH值为4.5-6.5，加入混合物质量0.1-0.3％的生物酶，于45-55℃酶解20-48min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥即得膳食纤维粉； [0023] 进一步地，所述抗冻剂是以含有丰富抗冻基质的天然植物种子为原料制备的植物提取物与海藻糖、丝胶肽学复配、充分溶解而成，既可防止药食同源食品原料的香味等挥发性有效成分被水蒸气带出，又可降低冻干粉营养物质和生物活性物质的冰晶体刺伤损失，提高了冻干粉的收得率，同时又增加了冻干粉的溶解性和稳定性，产生了意想不到的有益效果，特别适合作为药食同源食品原料提取物冻干粉制备过程的冻干保护剂； [0024] 优选地，所述抗冻剂的质量组成为：植物提取物:海藻糖:丝胶肽＝37-53:2-8:1-4； [0025] 优选地，所述植物提取物是以冬黑麦、洋葱、沙地柏、沙冬青的种子中的一种或几种为原料，经高压静电、高压脉冲电场辅助水杨酸浸泡、冷藏冷冻处理后再经复合酶分段酶解而制得； [0026] 更优选地，所述植物提取物的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、洋葱、沙地柏、沙冬青的种子按质量比13-17:5-11:3-5:1-3均匀混合，装盘，首先于电场强度5-7kV/cm高压静电处理2-4min；接着在浓度为40-60mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡2-4h，同时在电场强度10-20kV/cm，脉冲时间150-250μs,脉冲频率150-250Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于3-5℃静置18-24h,然后依次在1-3℃冷藏2-4d,-3--5℃冷冻1-3d、-15--18℃冷冻20-30h,立即放在室外于光照强度0.5-5万Lx自然光照2-4h，使混合料半解冻后立即进行粉碎，粉碎物粒径0.5-1.5mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5；最后加入混合料液质量1-2％的复合酶，首先于35-50℃酶解10-30min,然后于50-60℃酶解 20-40min；酶解液过滤、滤液减压浓缩至固形物含量为15-25％即得植物提取物； [0028] 进一步地，所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖15-25份，低聚半乳糖15-25份，低聚果糖10-20份，低聚木糖10-20份，水苏糖5-11份，大豆低聚糖5-11份，棉子糖4-10份，低聚麦芽糖3-7份。 [0029] 进一步地，所述植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC NO.11763为出发菌株按常规方法制备的，其活菌含量为：7×1012-9×1012cfu/g； [0030] 优选地，所述植物乳杆菌粉制备时冷冻干燥工艺采用的冷冻保护剂为本发明制备的抗冻剂，可显著提高植物乳杆菌粉在冷冻干燥过程活菌存活率至94％以上。 [0031] 更优选地，植物乳杆菌CGMCC NO.11763湿菌体与抗冻剂混合的质量比为1:0.6-1.4。 [0032] 本发明另一目的是提供上述速溶药食同源食品提取物冻干粉的制备方法，包括如下步骤： [0033] 1)提取液的制备：按照配方，称取各组份原料，首先将药食同源食品放入装有0.8-1.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200-400W、20-40KHz清洗3-5min，沥干，预处理，置微波干燥中于功率3-5kW、料层厚度2-4cm、50-70℃、干燥4-6min，然后浸泡在质量百分比为 8-12％的丝胶肽溶液中10-15min,取出，于-18--22℃冷冻30-50min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3-5cm，粉碎物粒径0.3-0.5mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5，于室温下在电场强度25-35kV/cm，脉冲时间300-500μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场处理20-30min；然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提取15-20min，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；最后真空脱气得果蔬汁，加入其质量0.2-0.6％的混合酶，于40-50℃酶解30-50min，取酶解液质量0.5- 1％的蛋清，放入搅拌机中于转速800-1000r/min搅拌10-12min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸1-3min,迅速降至室温，80-100目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至30-50％得药食同源食品提取液； [0034] 所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、脂肪酶按质量比2-4:1-3:1-2:1-2均匀混合； [0035] 2)混料：将抗冻剂和膳食纤维粉质量的4-6％依次加入提取液中，均匀混合，在功率300-500W,频率35-45KHz条件下进行超声溶解10-15min,得混合液； [0036] 3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-40～-50℃，并在-40～-50℃下预冻2～3h；然后将冻干仓内抽真空至15～20Pa后，在8-10h内逐步升温并控制混合液最终温度在-15～-18℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在5-7h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下与植物乳杆菌粉、剩余的膳食纤维粉、益生因子均匀混合得速溶药食同源食品提取物冻干粉。 [0037] 本发明植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏号为CGMCC NO.11763，保藏地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所，邮编：100101。 [0038] 植物乳杆菌益生特性如下： [0039] 本发明所提供的植物乳杆菌CGMCC NO.11763经实验发现能够在pH为1.50的条件下存活，在1％胆盐培养4小时后仍处于存活状态；植物乳杆菌CGMCC NO.11763降解亚硝酸盐速度快，分解能力达到10.9mg/h/kg，该菌种在生产泡菜时，整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在4.8mg/kg以下；CGMCC NO.11763在发酵60h小时后，对胆固醇降解率可达到64.76％。CGMCC NO.11763黏附能力测定的自凝集率为95.71％。 [0040] 植物乳杆菌CGMCC NO.11763对胆固醇降解能力研究和测定： [0041] 取1ml CGMCC NO.11763母液接种于10mL的MRS胆固醇液体培养基(胆固醇含量0.1mg/ml,pH 6.2)中，37℃的恒温静置分别培养20h、40h、60h备用，以接入1mL无菌水的MRS胆固醇培养基为对照，取以上培养不同时间的菌液样品及对照液各1ml,9000r/min，4℃下离心10min，得到发酵上清液，邻苯二甲醛法测定上清液中胆固醇含量(具体为：取各上清液 0.1ml于相应的试管中,加冰醋酸0.3ml,1mg/ml的邻苯二甲醛0.15ml，缓缓加入浓硫酸 1.0ml，混合均匀。室温静置10min，于550nm下测吸光值)。每一处理3个重复，以同样方法制作胆固醇标准曲线，计算上清液中胆固醇含量及降解率,结果见表1。可知，CGMCCNO.11763对胆固醇有很好的降解作用，在发酵60h小时后，降解率可达到64.76％。 [0042] 表1对胆固醇的降解情况。 [0043]降解时间(h) 0 20h 40h 60h 胆固醇含量(mg/ml) 0.2273±0.0058 0.1356±0.0018 0.1011±0.0094 0.801±0.0231胆固醇降解率％ 40.34％ 55.52％ 64.76％ [0044] 植物乳杆菌CGMCC NO.11763菌株的耐胆盐试验： [0045] 取CGMCCNO.11763菌液1mL接种菌种于含有不同胆盐(含量梯度为0.0％、0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1％)的10mL MRS液体培养基(PH＝6.4)，置于37℃下分别培养0、2、4h，每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释度溶液，取0.1ml稀释液于MRS中涂布，于37℃生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表2。可知该菌在胆盐浓度为1％处理4h后菌的生长量依然达到 7 0.59±0.92×10 (cfu/ml)，有很好的耐胆盐能力。 [0046] 表2耐胆盐能力检测[(±s)×107cfu/ml] [0047] [0048] 植物乳杆菌CGMCC NO.11763菌株的耐酸试验 [0049] 取HLX37母液按1ml接种菌种于不同pH值(pH梯度为1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0)的10mLMRS液体培养基，置于37℃下分别培养0、2、4h，每一处理3个重复。各取1ml样品菌液于 9ml生理盐水中混匀，制备稀释溶液，取0.1ml稀释液于MRS中涂布，于37℃生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录平板上的菌落个数。结果见表3。说明该菌具有很强的耐酸能力。 [0050] 表3耐酸能力检测[(±s)×107cfu/ml] [0051] [0052] 植物乳杆菌CGMCC NO.11763的黏附能力测定 [0053] 培养CGMCC NO.11763(MRS液体培养基)、大肠杆菌DH5α(LB液体培养基)24h得发酵液，分别置于3000r/min、4℃下离心10min，收集菌泥，分别用pH＝7.0的无菌磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤菌泥2次(即在菌落中加入PBS，震荡混合均匀后，置于3000r/min、4℃下离心10min，收集菌体)。自凝集率(％)：用无菌的PBS将菌泥CGMCC NO.11763制成在波长600nm处的吸光值为0.4±0.1(A0)的悬浮菌液及菌悬液,静置24h后测定吸光值A24，自凝集率(％)公式为(A0—A24)/A0。；他凝集率(％)：将CGMCC NO.11763和大肠杆菌DH5α的悬菌液调节成在波长600nm处的吸光值为0.6±0.1(A0)的混合悬浮菌液。静置24H后测定吸光值A 24，他凝集率(％)公式为(A 0—A 24)/A 0。测定结果见表5，可知CGMCC NO.11763的自凝集率为 95.71％，有很强的黏附能力。 [0054] 表4黏附能力表 [0055] [0056] 植物乳杆菌CGMCC NO.11763的菌株生理特性 [0057] 所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏号为CGMCC NO.11763，保藏地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所，邮编：100101。 [0059] 理化特征为：过氧化氢酶(-)，明胶液化(-)，吲哚实验(+)，运动性(-)，发酵产气(-)，亚硝酸盐还原(-)，发酵产气(-)，产硫化氢气体(-)，pH4.0MRS培养基中生长(+)。经过生理生化鉴定为为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)XH。 [0060] 菌株能够在57℃下生长良好，葡萄糖耐受能力为275g/L。 [0061] 本发明植物乳杆菌由采集人李建树，从新疆维吾尔族老乡家中酸奶中分离得到，采集时间2015年6月2日。 [0062] 本发明植物乳杆菌CGMCC NO.11763经实验发现能够在pH为1.50的条件下存活，在1％胆盐培养4小时后仍处于存活状态；植物乳杆菌CGMCC NO.11763降解亚硝酸盐速度快，分解能力达到10.9mg/h/kg，该菌种在生产泡菜时，整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在4.8mg/kg以下；CGMCCNO.11763在发酵60h小时后，对胆固醇降解率可达到64.76％。CGMCC NO.11763黏附能力测定的自凝集率为95.71％，菌株能够在57℃下生长良好，葡萄糖耐受能力为275g/L。 [0063] 有益效果： [0064] 本发明以药食同源食品为原料，首先采用超声清洗对药食同源食品药食同源食品进行杀虫灭卵、杀灭微生物、去除农药残留和重金属离子等，大大提高了冻干粉的食品安全性；采用微波干燥在使得药食同源食品短时、低温膨化干燥的同时主要是灭酶、固色，最大限度地保留了药食同源食品的天然色泽，经微波固色后的药食同源食品天然色泽在后续的加工过程中非常稳定，不会变色、褪色，色泽非常鲜艳，可保持药食同源食品的天然色泽；在含有丝胶肽的水溶液中浸泡复水，可最大限度地减少经冷冻而造成的药食同源食品活性物质及冷敏性成分的损失，提高了药食同源食品有效成分的提取率，全程采用低温提取工艺，将超声清洗、微波灭酶固色和膨化、高压脉冲电场提取、超声辅助微波提取、生物酶解和真空脱气有机结合，得到的提取物最大限度地保留了药食同源食品的天然色泽、风味和口感，同时使得提取物含有的生物活性物质和营养保健物质含量最大化，原料提取率和利用率最高，降低了提取成本；采用蛋清制备的蛋清泡沫对酶解液短时凝絮，进一步提高了冻干粉的溶解性和稳定性；将部分膳食纤维粉加入提取液中和抗冻剂均匀混合，可提高混料的固形物含量，降低水分含量，减轻了冻结过程的负担，缩短了冻干时间，提高了冻干效率，经超声溶解，进一步增强了混料的均一性、稳定性和溶解性，进而提高了冻干粉的均一性、稳定性和溶解性；提取物在真空冷冻干燥过程采用天然植物原料制备的具有显著抗冻效果的抗冻剂代替传统的、现有的冷冻保护剂，进一步大大降低了冻干工艺造成的冷冻损失，有效提高了提取物冻干粉的生物活性和营养价值，并与功能性膳食纤维粉和植物乳杆菌粉科学复配，显著增强了提取物冻干粉的药食营养均衡性以及功能性、溶解性和益生性，延长了产品的保质期，最终制得一种营养物质及生物活性物质含量高、功能强、抗冻效果及溶解性好、成本低的速溶药食同源食品冻干粉。具体试验效果见实施例7-13，具体技术原理如下： [0065] 1.本发明的植物乳杆菌粉活菌存活率高、功能全、益生性强，植物乳杆菌CGMCC NO.11763经实验发现能够在pH为1.50的条件下存活，在1％胆盐培养4小时后仍处于存活状态；植物乳杆菌CGMCC NO.11763降解亚硝酸盐速度快，分解能力达到10.9mg/h/kg，该菌种在生产泡菜时，整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在4.8mg/kg以下；CGMCC NO.11763在发酵60h小时后，对胆固醇降解率可达到64.76％。CGMCC NO.11763黏附能力测定的自凝集率为95.71％。 [0066] 2.本发明制备的抗冻剂是以含有丰富抗冻基质的天然植物种子为原料制备的植物提取物与海藻糖、丝胶肽学复配而成，不含任何化学物质和食品添加剂，天然抗冻基质全面、丰富，抗冻蛋白及抗冻多肽含量高，大大提高了冻干粉的食品安全性，既可防止药食同源食品原料的香味等挥发性有效成分被水蒸气带出，又可降低冻干粉营养物质和生物活性物质的冰晶体刺伤损失，提高了冻干粉的收得率，同时又增加了冻干粉的溶解性和稳定性，产生了意想不到的有益效果，特别适合作为药食同源食品原料提取物冻干粉制备过程的冻干保护剂，可完全替代现有的冷冻保护剂，并且产生更好的效果；同时，将其应用于植物乳杆菌粉的冻干过程，可显著提高活菌存活率至94％以上。其中的植物提取物将含有丰富抗冻基质的天然植物种子原料科学复配，将高压静电处理、高压脉冲电场辅助水杨酸诱导、低温分段胁迫处理和自然光照有机结合，使得本身含有抗冻基质的活性种子在外界环境的胁迫和诱导下，抗冻基质成分得到了最全面、最丰富的合成和积累，经生物酶解后可最大化溶出，同时可使抗冻肽含量增加，提高了植物提取物的溶解性和稳定性，进而消除了因抗冻剂造成的冻干粉溶解性差的问题，与膳食纤维粉、植物乳杆菌粉、益生因子科学复配，效果更佳。 [0067] 3.本发明制备的膳食纤维粉将超微粉碎、挤压膨化、超声提取、高压脉冲电场提取和生物酶解科学结合，所得膳食纤维粉持水性、膨胀性、增稠性更强，比单一方法制备的改性膳食纤维提高20-40％，且不受酸、碱、盐的影响，可溶性纤维素含量高，比单一方法制备的改性膳食纤维提高10-30％，更容易被乳酸菌利用，提高乳酸菌在人体肠道的生长及繁殖能力，增加益生菌菌群的种类和数量，降低人体肠道pH值，改善人体肠道微生态环境；吸附能力强，经改性后，纤维素的比表面积增大，网格结构丰富，吸附力增强，螯合、吸附胆固醇和胆汁酸类的有机分子能力更强、抑制人体对他们的吸收；离子交换能力增强，对金属元素，特别是重金属元素吸附效果更强，有效防止了人体重金属中毒；调节和维持肠道菌群的定植时间，增强肠道的消化和吸收能力，提高机体免疫力；有效促进胃肠蠕动，减缓并消除胃胀、腹胀等不良反应；强大的包埋作用可防止环境(氧气、温度、光照、水分活度等)因素对冻干粉品质的影响，进一步稳定了冻干粉的生物活性，延长了冻干粉的保质期。 [0068] 4.本发明冻干粉的制备方法采用非热加工技术，工作效率高，能源消耗少，对环境友好，无污染，减少了食品添加剂和化学助剂的引入，有效提高了食品安全性，提高了产品质量和降低了生产成本，实现了低碳生产目标，可规模化、产业化发展。特别是：1)采用微波干燥在使得药食同源食品短时、低温膨化干燥的同时主要是灭酶、固色，最大限度地保留了药食同源食品的天然色泽，经微波固色后的药食同源食品天然色泽在后续的加工过程中非常稳定，不会变色、褪色，色泽非常鲜艳，可保持药食同源食品的天然色泽；2)在含有丝胶肽的水溶液中浸泡复水，可最大限度地减少经冷冻而造成的药食同源食品活性物质及冷敏性成分的损失，提高了药食同源食品有效成分的提取率，全程采用低温提取工艺，将超声清洗、微波灭酶固色和膨化、高压脉冲电场提取、超声辅助微波提取、生物酶解和真空脱气有机结合，得到的提取物最大限度地保留了药食同源食品的天然色泽、风味和口感，同时使得提取物含有的生物活性物质和营养保健物质含量最大化，原料提取率和利用率最高，降低了提取成本；3)采用蛋清制备的蛋清泡沫对酶解液短时凝絮，进一步提高了冻干粉的溶解性和稳定性；4)将提取液适度减压浓缩，然后加入部分膳食纤维粉和抗冻剂均匀混合，可提高混料的固形物含量，降低水分含量，减轻了冻结过程的负担，缩短了冻干时间，提高了冻干效率，经超声溶解，进一步增强了混料的均一性、稳定性和溶解性，进而提高了冻干粉的均一性、稳定性和溶解性，提高了冻干过程的冻干率。 [0069] 需要说明的是该冻干粉的食用效果是各组分相互协同、相互作用的结果，并非简单的原料功能的叠加，各原料组分的科学复配和提取，产生的效果远远超过各单一组份功能和效果的叠加，具有较好的先进性和实用性。 具体实施方式[0070] 下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。 [0071] 实施例1原料制备 [0072] 1.膳食纤维粉的制备 [0073] 所述膳食纤维粉的制备方法，包括以下步骤：将菊粉、苹果纤维、小麦纤维按质量比5:3:2均匀混合，超微粉碎至粒径5μm，调整粉碎物水分含量为20％，于螺杆转速170r/min、温度192℃条件挤压膨化，加入膨化物质量3倍的水，室温300W、40KHz条件超声提取12min,然后在电场强度30kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理12min；用乳酸调节pH值为5.5，加入混合物质量0.2％的生物酶，于50℃酶解35min；酶解液减压浓缩、冷冻干燥即得膳食纤维粉； [0074] 所述生物酶为纤维素酶、木聚糖酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比3:2:1.5:1:0.6均匀混合。 [0075] 2.植物提取物的制备 [0076] 所述植物提取物的制备方法，包括如下步骤：将冬黑麦、洋葱、沙地柏、沙冬青的种子按质量比15:8:4:2均匀混合，装盘，首先于电场强度6kV/cm高压静电处理3min；接着在浓度为50mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡3h，同时在电场强度15kV/cm，脉冲时间200μs,脉冲频率200Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于4℃静置21h,然后依次在2℃冷藏3d,-4℃冷冻2d、-16℃冷冻25h,立即放在室外于光照强度3万Lx自然光照3h，使混合料半解冻后立即进行粉碎，粉碎物粒径1.0mm,接着加入粉碎物质量5倍的水，用乳酸调节pH值为 4.5；最后加入混合料液质量1.5％的复合酶，首先于42℃酶解20min,然后于55℃酶解 30min；酶解液过滤、滤液减压浓缩至固形物含量为20％即得植物提取物； [0077] 所述复合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、脂肪酶按质量比6:3:2:1.5:1.5均匀混合。 [0078] 以下实施例2-6所使用的膳食纤维粉、植物提取物均为实施例1制备。 [0079] 实施例2 [0080] 一种枸杞提取物冻干粉，主要由以下重量份数的原料制备： [0081] 枸杞40份，膳食纤维粉15份，抗冻剂10份，益生因子10份，植物乳杆菌粉6份； [0082] 所述抗冻剂的质量组成为：植物提取物:海藻糖:丝胶肽＝45:5:2； [0083] 所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖20份，低聚半乳糖20份，低聚果糖15份，低聚木糖15份，水苏糖8份，大豆低聚糖8份，棉子糖7份，低聚麦芽糖5份； [0084] 所述植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC NO.11763为出发菌株按常规方法制备的，其活菌含量为：9×1012cfu/g；其中，冷冻干燥工艺采用的冷冻保护剂为本发明制备的上述抗冻剂，湿菌体与抗冻剂混合的质量比为1:1。 [0085] 制备方法，包括如下步骤： [0086] 1)提取液的制备：按照配方，称取各组份原料，首先将枸杞放入装有1％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于300W、30KHz清洗4min，沥干，置微波干燥中于功率4kW、料层厚度3cm、60℃、干燥5min，然后浸泡在质量百分比为10％的丝胶肽溶液中12min,取出，于-20℃冷冻40min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度4cm，粉碎物粒径0.4mm,接着加入粉碎物质量5倍的水，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度30kV/cm，脉冲时间400μs,脉冲频率 250Hz条件下进行高压脉冲电场处理25min；然后于室温在功率200W条件下进行微波辐照提取18min，同时在功率250W,频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；最后真空脱气得果蔬汁，加入其质量0.4％的混合酶，于45℃酶解40min，取酶解液质量0.8％的蛋清，放入搅拌机中于转速900r/min搅拌11min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸2min,迅速降至室温，90目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至40％得枸杞提取液； [0087] 所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、脂肪酶按质量比3:2:1.5:1.5均匀混合； [0088] 2)混料：将抗冻剂和膳食纤维粉质量的5％依次加入提取液中，均匀混合，在功率400W,频率40KHz条件下进行超声溶解12min,得混合液； [0089] 3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-45℃，并在-45℃下预冻2.5h；然后将冻干仓内抽真空至18Pa后，在9h内逐步升温并控制混合液最终温度在-17℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在6h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下与植物乳杆菌粉、剩余的膳食纤维粉、益生因子均匀混合得枸杞提取物冻干粉。 [0090] 实施例3 [0091] 一种红枣提取物冻干粉，主要由以下重量份数的原料制备： [0092] 红枣35份，膳食纤维粉13份，抗冻剂8份，益生因子8份，植物乳杆菌粉4份； [0093] 所述抗冻剂的质量组成为：植物提取物:海藻糖:丝胶肽＝37:2:1； [0094] 所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖15份，低聚半乳糖15份，低聚果糖10份，低聚木糖10份，水苏糖5份，大豆低聚糖5份，棉子糖4份，低聚麦芽糖3份； [0095] 所述植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC NO.11763为出发菌株按常规方法制备的，其活菌含量为：8×1012cfu/g；其中，冷冻干燥工艺采用的冷冻保护剂为本发明制备的上述抗冻剂，湿菌体与抗冻剂混合的质量比为1:0.6。 [0096] 制备方法，包括如下步骤： [0097] 1)提取液的制备：按照配方，称取各组份原料，首先将红枣放入装有0.8％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、20KHz清洗3min，沥干，去核、切片，置微波干燥中于功率3kW、料层厚度2cm、50℃、干燥4min，然后浸泡在质量百分比为8％的丝胶肽溶液中10min,取出，于-18℃冷冻30min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3cm，粉碎物粒径0.3mm,接着加入粉碎物质量4倍的水，用乳酸调节pH值为3.5，于室温下在电场强度25kV/cm，脉冲时间300μs,脉冲频率200Hz条件下进行高压脉冲电场处理20min；然后于室温在功率150W条件下进行微波辐照提取15min，同时在功率200W,频率30KHz条件下进行超声波辅助提取；最后真空脱气得果蔬汁，加入其质量0.2％的混合酶，于40℃酶解30min，取酶解液质量0.5％的蛋清，放入搅拌机中于转速800r/min搅拌10min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸1min,迅速降至室温，80目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至 30％得红枣提取液； [0098] 所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、脂肪酶按质量比2:1:1:1均匀混合； [0099] 2)混料：将抗冻剂和膳食纤维粉质量的4％依次加入提取液中，均匀混合，在功率300W,频率35KHz条件下进行超声溶解10min,得混合液； [0100] 3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-40℃，并在-40℃下预冻2h；然后将冻干仓内抽真空至15Pa后，在8h内逐步升温并控制混合液最终温度在-15℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在5h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下与植物乳杆菌粉、剩余的膳食纤维粉、益生因子均匀混合得红枣提取物冻干粉。 [0101] 实施例4 [0102] 一种山楂提取物冻干粉，主要由以下重量份数的原料制备： [0103] 山楂45份，膳食纤维粉17份，抗冻剂12份，益生因子12份，植物乳杆菌粉8份； [0104] 所述抗冻剂的质量组成为：植物提取物:海藻糖:丝胶肽＝53:8:4； [0105] 所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖25份，低聚半乳糖25份，低聚果糖20份，低聚木糖20份，水苏糖11份，大豆低聚糖11份，棉子糖10份，低聚麦芽糖7份； [0106] 所述植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC NO.11763为出发菌株按常规方法制备的，其活菌含量为：7×1012cfu/g；其中，冷冻干燥工艺采用的冷冻保护剂为本发明制备的上述抗冻剂，湿菌体与抗冻剂混合的质量比为1:1.4。 [0107] 制备方法，包括如下步骤： [0108] 1)提取液的制备：按照配方，称取各组份原料，首先将山楂放入装有1.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于400W、40KHz清洗5min，沥干，预处理，置微波干燥中于功率5kW、料层厚度4cm、70℃、干燥6min，然后浸泡在质量百分比为12％的丝胶肽溶液中15min,取出，于-22℃冷冻50min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度5cm，粉碎物粒径0.5mm,接着加入粉碎物质量6倍的水，用乳酸调节pH值为5.5，于室温下在电场强度35kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理30min；然后于室温在功率300W条件下进行微波辐照提取20min，同时在功率300W,频率40KHz条件下进行超声波辅助提取；最后真空脱气得果蔬汁，加入其质量0.6％的混合酶，于50℃酶解50min，取酶解液质量1％的蛋清，放入搅拌机中于转速1000r/min搅拌12min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸3min,迅速降至室温，100目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至50％得山楂提取液； [0109] 所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、脂肪酶按质量比4:3:2:2均匀混合； [0110] 2)混料：将抗冻剂和膳食纤维粉质量的6％依次加入提取液中，均匀混合，在功率500W,频率45KHz条件下进行超声溶解15min,得混合液； [0111] 3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-50℃，并在-50℃下预冻3h；然后将冻干仓内抽真空至20Pa后，在10h内逐步升温并控制混合液最终温度在-18℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在7h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下与植物乳杆菌粉、剩余的膳食纤维粉、益生因子均匀混合得山楂提取物冻干粉。 [0112] 实施例5 [0113] 一种金银花提取物冻干粉，主要由以下重量份数的原料制备： [0114] 金银花30份，膳食纤维粉10份，抗冻剂5份，益生因子5份，植物乳杆菌粉2份； [0115] 所述抗冻剂的质量组成为：植物提取物:海藻糖:丝胶肽＝37:8:1； [0116] 所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖15份，低聚半乳糖25份，低聚果糖10份，低聚木糖20份，水苏糖5份，大豆低聚糖11份，棉子糖4份，低聚麦芽糖7份； [0117] 所述植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC NO.11763为出发菌株按常规方法制备12 的，其活菌含量为：9×10 cfu/g；其中，冷冻干燥工艺采用的冷冻保护剂为本发明制备的抗冻剂，湿菌体与抗冻剂混合的质量比为1:0.8。 [0118] 制备方法，包括如下步骤： [0119] 1)提取液的制备：按照配方，称取各组份原料，首先将金银花放入装有0.8％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于400W、20KHz清洗5min，沥干，切片，置微波干燥中于功率3kW、料层厚度4cm、50℃、干燥6min，然后浸泡在质量百分比为8％的丝胶肽溶液中15min,取出，于-18℃冷冻50min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3cm，粉碎物粒径0.5mm,接着加入粉碎物质量4倍的水，用乳酸调节pH值为5.5，于室温下在电场强度25kV/cm，脉冲时间500μs,脉冲频率200Hz条件下进行高压脉冲电场处理30min；然后于室温在功率150W条件下进行微波辐照提取20min，同时在功率200W,频率40KHz条件下进行超声波辅助提取；最后真空脱气得果蔬汁，加入其质量0.2％的混合酶，于50℃酶解30min，取酶解液质量1％的蛋清，放入搅拌机中于转速800r/min搅拌12min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸1min,迅速降至室温，100目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至30％得金银花提取液； [0120] 所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、脂肪酶按质量比2:3:1:2均匀混合； [0121] 2)混料：将抗冻剂和膳食纤维粉质量的4％依次加入提取液中，均匀混合，在功率300-500W,频率45KHz条件下进行超声溶解10min,得混合液； [0122] 3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-40℃，并在-50℃下预冻2h；然后将冻干仓内抽真空至20Pa后，在8h内逐步升温并控制混合液最终温度在-18℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在5h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下与植物乳杆菌粉、剩余的膳食纤维粉、益生因子均匀混合得金银花提取物冻干粉。 [0123] 实施例6 [0124] 一种山楂、红枣提取物冻干粉，主要由以下重量份数的原料制备： [0125] 山楂30份，红枣20份，膳食纤维粉20份，抗冻剂15份，益生因子15份，植物乳杆菌粉10份； [0126] 所述抗冻剂的质量组成为：植物提取物:海藻糖:丝胶肽＝53:2:4； [0127] 所述益生因子重量组成为：低聚异麦芽糖25份，低聚半乳糖15份，低聚果糖20份，低聚木糖10份，水苏糖11份，大豆低聚糖5份，棉子糖10份，低聚麦芽糖3份。 [0128] 所述植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC NO.11763为出发菌株按常规方法制备的，其活菌含量为：9×1012cfu/g；其中，冷冻干燥工艺采用的冷冻保护剂为本发明制备的抗冻剂，湿菌体与抗冻剂混合的质量比为1:1.2。 [0129] 制备方法，包括如下步骤： [0130] 1)提取液的制备：按照配方，称取各组份原料，首先将山楂、红枣分别放入装有0.8-1.2％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于400W、20KHz清洗5min，沥干，去核、切片，均匀混合，置微波干燥中于功率5kW、料层厚度2cm、70℃、干燥4min，然后浸泡在质量百分比为 12％的丝胶肽溶液中10min,取出，于-22℃冷冻30min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度5cm，粉碎物粒径0.3mm,接着加入粉碎物质量6倍的水，用乳酸调节pH值为3.5，于室温下在电场强度35kV/cm，脉冲时间300μs,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理20min；然后于室温在功率300W条件下进行微波辐照提取15min，同时在功率300W,频率30KHz条件下进行超声波辅助提取；最后真空脱气得果蔬汁，加入其质量0.6％的混合酶，于40℃酶解50min，取酶解液质量0.5％的蛋清，放入搅拌机中于转速1000r/min搅拌10min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸3min,迅速降至室温，80目筛网过滤，滤液减压浓缩至固形物含量至50％得山楂、红枣提取液； [0131] 所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、脂肪酶按质量比4:1:2:1均匀混合； [0132] 2)混料：将抗冻剂和膳食纤维粉质量的5％依次加入提取液中，均匀混合，在功率500W,频率35KHz条件下进行超声溶解15min,得混合液； [0133] 3)冻干：混合液置冻干仓内速冻至-50℃，并在-40℃下预冻3h；然后将冻干仓内抽真空至15Pa后，在10h内逐步升温并控制混合液最终温度在-15℃；接着在冻干仓内真空度不变的情况下，调节冻干仓内温度使其在7h内逐步升温至室温，到冻干粉水分小于4％时出料，无菌条件下与植物乳杆菌粉、剩余的膳食纤维粉、益生因子均匀混合得山楂、红枣提取物冻干粉。 [0134] 实施例7本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉溶解性试验 [0135] 冻干粉作为一种主要由药食同源食品制备的粉剂，参照固体饮料的稳定性标准，将溶解时间、溶解后澄明度确定为冻干粉的质量稳定性指标，它不仅直接反映了产品的溶解程度，亦反映了产品内在质量及稳定性，是冻干粉最重要质控指标。 [0136] 溶解时间：按质量比1:5加入55-65℃温水，充分搅拌，完全溶解的时间； [0137] 澄明度表征方法：澄清透明90-100分；微浊80-89分；浑浊70-79分；较混浊60-69分；严重浑浊50-59分；沉淀49分以下(沉淀颗粒越大、数量越多，分数越低)。 [0138] 将本发明实施例2制备的枸杞提取物冻干粉和市售同类型、同规格、同生产日期的枸杞提取物冻干粉于玻璃杯中溶解后，静置，观察澄明度，每5min观察记录结果一次，结果见表1： [0139] 表1：溶解后冻干粉澄明度检测结果 [0140] [0141] 以上结果表明：本发明冻干粉和市售冻干粉相比，溶解性较好，溶解时间短，溶解后的溶液稳定性强，澄清度高，外观质量较好，随着静置时间的延长，市售冻干粉溶液液相相对不稳定，产生沉淀，大大影响了饮料的外观质量和内在质量，同时也说明本发明冻干粉内在质量较好，食用效果安全、稳定。 [0142] 需要说明的是：本发明实施例3-6制备的速溶药食同源食品提取物冻干粉同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。 [0143] 实施例8食用速溶药食同源食品提取物冻干粉后总胆固醇的变化 [0144] 选总胆固醇180mg/dl-250mg/dl的成年人48名，男女各半，随机分成三组；第一组每天晚餐饮用200毫升矿泉水；第二组每天晚餐冲饮普通市售枸杞提取物冻干粉40g，按质量比1:5加入55-65℃温水，充分搅拌，完全溶解；第三组每天晚餐冲饮本发明实施例2的枸杞提取物冻干粉80g，按质量比1:5加入55-65℃温水，充分搅拌，完全溶解；期间每天食用同样的食物，食物包括肉、蛋、蔬菜和水果。分别在实验开始的前一天和第20、40、60天采集试验者的血液，测定血液中的总胆固醇含量，结果如表2： [0145] 表2：血液中总胆固醇含量检测结果 [0146]时间 0天 20天 40天 60天 第一组(mg/dl) 202.3 203.8 206.2 209.3 第二组(mg/dl) 207.6 206.5 203.2 202.1 第三组(mg/dl) 209.8 201.9 190.5 168.3 [0147] 由上表可知冲饮本发明实施例2的枸杞提取物冻干粉后，成年人血液中的总胆固醇的含量发生明显变化。与普通市售枸杞提取物冻干粉相比，本发明枸杞提取物冻干粉对成年人血液中的总胆固醇的含量明显的降低，而矿泉水组成年人血液中的总胆固醇的含量明显的增加，市售枸杞提取物冻干粉虽然有所降低，但与本发明产品相比，效果不显著，由此可知，本发明采用具有降低胆固醇特性的特定菌株制备的冻干粉具有很好的降低胆固醇的保健效果。 [0148] 需要说明的是：本发明实施例3-6所制备的速溶药食同源食品提取物冻干粉同样具有上述技术效果，各实施例之间差异性不显著。 [0149] 实施例9本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉保质期内植物乳杆菌活菌含量稳定性试验 [0150] 取本发明实施例2制备的枸杞提取物冻干粉于室温22-25℃、通风条件下分别储藏3个月、6个月、12个月、24个月、36个月并测定植物乳杆菌活菌含量，结果如表3： [0151] 表3：保质期内植物乳杆菌活菌含量检测结果 [0152] [0153] [0154] 以上结果表明：本发明冻干粉的储存稳定性极好，抗环境(冷热温度、湿度、氧气、光照、水分等)影响因素能力大，保质期内植物乳杆菌活菌含量损失率最大(36个月)为10％,比现有的同类产品活菌含量高、损失率低、保质期长，同时反映出冻干粉的其它生物活性成分具有同样的储存稳定性。 [0155] 需要说明的是：本发明实施例3-6制备的速溶药食同源食品提取物冻干粉同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。 [0156] 实施例10本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉的感官品评试验 [0157] 邀请24名人员对本发明实施例2制备的枸杞提取物冻干粉与市售两种同类相同生产日期的冻干粉进行品评，感官打分，其中专业和非专业人员各12名，专业人员青年、中年、老年各4名，男女各半，非专业人员少年、青年、中年、老年各3名，男女各半；打分包括外观(20分)、质地(25分)、风味(30分)、口感(25分)四个方面，打分人员独立进行，互不影响，以保证品评结果准确。对品评结果进行了统计，均分值取近似值，保留整数，具体见表4： [0158] 表4：感官品评统计结果 [0159] [0160] 注：同一行内标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，标不同大写字母表示差异极显著(P＜0.01)，标有相同字母表示差异不显著(P＞0.05)。 [0161] 以上结果表明，本发明制备的冻干粉从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明显优于市售冻干粉，特别是外观、风味和口感极好，最大限度地保留了药食同源食品原料的天然色泽、口感和风味，同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者食用。 [0162] 需要说明的是：本发明实施例3-6制备的速溶药食同源食品提取物冻干粉同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。 [0163] 实施例11本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉益生性试验 [0164] 将本发明实施例2制备的枸杞提取物冻干粉，用无菌水制备成活菌数为2×1010CFU/mL的植物乳杆菌溶液，于4℃保存备用； [0165] 1、取保存好的10mL植物乳杆菌溶液注入到试管1中，采用十倍逐级稀释至10-8，取1mL稀释液在平板上，将灭菌后冷却至45℃的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌)上，迅速摇匀。再将装有10mL植物乳杆菌溶液的试管2置于80-90℃水浴锅中加热15-25min，取加热后的植物乳杆菌溶液进行十倍逐级稀释至10-8，取1mL稀释液在平板上，将灭菌后冷却至45℃的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌)上并迅速摇匀。最后将加热前和加热后的平板均在35℃条件下培养24h，计算加热前后的数量。 [0166] 结果表明，活菌存活率达到了88％以上。 [0167] 2、模拟胃液及肠液的耐受试验：取100g/L的盐酸16.4mL加蒸馏水稀释，使pH值分别为1.5、2.5和3.5，取100mL稀盐酸溶液，分别加入1g胃蛋白酶，使其充分溶解，得模拟胃液，微孔滤膜除菌(0.22μm)备用。取磷酸二氢钾6.8g，加水500mL使溶解，用0.1moL/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰蛋白酶10g，加水100mL使溶解，将两液混合后，加水稀释至1000ml，得模拟肠液，微孔滤膜除菌(0.22μm)备用。取1mL保存好的植物乳杆菌溶液加入到 9mL的模拟胃液中(即十倍逐级稀释)，并迅速在振荡器上充分混匀，然后置于30-45℃静置培养2-4h。分别在1h、2h、3h、4h的时候取出培养液并立即计数残存活菌数，与原活菌数进行比较，结果表明，活菌存活率为98％。然后取在人工胃液中消化不同时间的培养液各1mL，分别接种于9mL pH值为6.8的人工肠液中，置于30-45℃静置培养2-4h，并分别在0、3、6、24h取样，测定其活菌数，与原活菌数进行比较，结果表明活菌存活率为99％。 [0168] 3、模拟胆盐的耐受试验：用胰液素制成1g/L的溶液，并在溶液中加入0.8％的猪胆盐，用10％的NaOH调整pH为8.0，然后用0.45μm微滤膜过滤并除菌。将0.5mL保存好的植物乳杆菌溶液接种到4.5mL模拟胆盐中，培养24h后得到培养液，计数残存的活菌数。将培养液在灭菌生理盐水中十倍逐级稀释至10-8，并用MRS倾注，然后置于35℃静置培养24h。结果表明活菌存活率为99％。 [0169] 以上试验结果表明，本发明冻干粉中的植物乳杆菌益生性(耐热性、耐pH性、耐胆盐)较强，非常适合人体胃肠环境，在模拟胃肠环境中存活率大，可有效改善胃肠功能。 [0170] 需要说明的是：本发明实施例3-6制备的速溶药食同源食品提取物冻干粉同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。 [0171] 实施例12本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉小鼠肠道性能试验[0172] 将本发明实施例2制备的枸杞提取物冻干粉，用无菌水制备成活菌数为2×1010CFU/mL的植物乳杆菌溶液，于4℃保存备用； [0173] 选取普通昆明小白鼠60只，雌雄各半，18-20g，常规词养。从中随机挑选40只，每天早晨9:00灌胃盐酸林可霉素0.2mL(20mg)/只，其它作为对照组，每天同一时间灌胃等量灭菌生理盐水，连续一周，制备肠道菌群失调的小鼠模型。模型组小鼠饮食下降，未出现死亡和明显的腹泻现象，排软粪，外形正常含水分较多，垫料潮湿。将40只肠道菌群失调小鼠，随机分为2组，一组20只作为治疗组，每天灌胃保存好的植物乳杆菌溶液0.5ml(2×1010cfu/ml)/只，另20只作为自然恢复组，每天同一时间灌胃等量灭菌生理盐水，连续两周。整个试验期21天，每天观察小白鼠的生长和排便情况，于第8、21天对冻干粉治疗组和自然恢复组的小鼠进行称重，计算各组体重平均增长率，结果如表5；每5天测各组小鼠粪便大肠杆菌数量，计算平均数，结果如表6。取小鼠粪便约0.1g，于无菌操作台内加入3粒玻璃珠(以0.1g粪样加0.5mL稀释液)，稀释并接种麦康凯琼脂培养基，计算每克湿便中的大肠杆菌数。 [0174] 表5：小鼠增重情况 [0175]分组 平均始重(g/只) 平均末重(g/只) 平均增长率(％) 自然恢复组 20.69±1.33 27.34±1.59 32.14a 治疗组 20.41±1.45 34.28±1.62 67.96b [0176] 表6：小鼠粪便中大肠杆菌数的情况 [0177] [0178] 冻干粉治疗组小鼠体重平均增长率(67.96％)显著高于自然恢复组(32.14％)；饲喂溶液后肠道大肠杆菌数量显著下降，降低97.07％，显著低于自然恢复组(24.78％)，表明本发明冻干粉中的植物乳杆菌在小白鼠肠道内迅速定植，形成优势菌群，并有效抑制大肠杆菌等病原菌的生长繁殖，并且定植时间长，持续、有效改善了肠道性能。 [0179] 需要说明的是：本发明实施例3-6制备的速溶药食同源食品提取物冻干粉同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。 [0180] 实施例13本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉对机体免疫力的影响[0181] 1实验目的 [0182] 通过运动耐力测试(小鼠游泳试验)，验证本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉的提高免疫力、抗疲劳作用。 [0183] 2实验材料与试剂 [0184] 2.1供试药物： [0185] 市售速溶药食同源食品提取物冻干粉(G1)；市售速溶药食同源食品提取物冻干粉(G2)；本发明实施例2-6制备的速溶药食同源食品提取物冻干粉(G3-G7)。 [0186] 2.2试剂： [0187] 肝/肌糖原测试盒，购自南京建成生物制品研究所；浓硫酸(AR)，南京化学试剂有限公司；生理盐水，山东长富洁晶药业有限公司。 [0188] 3.实验动物 [0189] ICR小鼠，♂，清洁级，体重18-22g，由宁夏医科大学比较医学中心提供，实验期间小鼠自由饮食。 [0190] 4.主要仪器 [0191] 铝制游泳箱(50cm×50cm×40cm)，铅丝，低温高速离心机：5804R型，Eppendrof公司；水浴锅：DK-S26型，上海精宏实验设备有限公司；电子称：BS224S型，Sartorius公司；秒表，温度计 [0192] 5.实验分组 [0193] 5.1剂量分组及受试样品给予时间随机将小鼠分为8组，每组10只，第1组至第7组分别给G1～G7的药物，第8组为空白对照组，给予等体积的双蒸水，每组每日均灌胃1次，灌胃体积为0.2ml/10g，连续给予受试样品30天。 [0194] 5.2样品配制第1组至第7组：称取2.25g药物样品，用蒸馏水配至150ml；空白对照组：双蒸水150ml。 [0195] 6.实验方法 [0196] 6.1负重游泳实验末次给药30min后，置小鼠于游泳箱中，水深不少于30cm，水温25±1℃，鼠尾根部负荷5％体重的铅皮，记录小鼠游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。 [0197] 6.2小鼠血清尿素测定末次给药30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后摘眼球采血0.5mL(不加抗凝剂),置4℃冰箱3h,血凝固后2000r/min离心15min,取血清送宁夏医科大学附属医院检验科检测。 [0198] 6.3肝糖原的测定末次给药30min后，在温度为25±1℃的水中不负重游泳90min，颈椎脱臼处死小鼠，用生理盐水洗净，并用滤纸吸干水分后，准确称取肝脏100mg，肝糖原检测试剂盒检测小鼠肝糖原含量。 [0199] 6.4血乳酸的测定末次给药30min后采血，然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止。乳酸仪测定方法：分别在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20μL加入40μL破膜液中，立即充分振荡破碎细胞用乳酸仪测定。(血乳酸曲线下面积＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min的血乳酸值+2×游泳后20min的血乳酸值) [0200] 7.观察指标负重游泳时间，血乳酸、尿素、肝糖原值 [0201] 8.统计方法实验数据用 表示，采用t检验进行组间比较 [0202] 9.实验结果 [0203] 9.1本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉对小鼠体重的影响 [0204] 各组小鼠在给予G1～G9药物后，前、中，后期体重分别见下表所示,各组小鼠的初始体重和增重体重与对照组比较均无统计学差异(P＞0.05)，表明G1～G9药物均无明显的毒性。实验结果详见表7。 [0205] 表7负重游泳实验小鼠的初始体重、中期体重和结束体重 [0206] [0207] 9.2本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉对小鼠负重游泳时间的影响[0208] 经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物与空白对照组比较，可以明显延长小鼠负重游泳时间，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉G3～G7药物与空白对照组比较，可以显著延长小鼠负重游泳时间，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表8。 [0209] 表8速溶药食同源食品提取物冻干粉对小鼠负重游泳时间的影响 [0210] [0211] [0212] “*”p<0.05vs空白对照； [0213] “**”p<0.01vs空白对照； [0214] 9.3本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉对小鼠运动前后血乳酸的影响[0215] 经口给予小鼠本发明的速溶药食同源食品提取物冻干粉后，本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉G3～G7药物对小鼠运动后血乳酸曲线下面积与对照组比较有统计学差异(P＜0.05)，G1～G2药物组小鼠血乳酸曲线下面积与对照组比较虽有所降低，但并无统计学差异(P＞0.05)。结果见表9。 [0216] 表9本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉对小鼠运动前后血乳酸水平的影响[0217] [0218] “*”p<0.05vs空白对照； [0219] 9.4本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉对小鼠肝糖原的影响 [0220] 经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉G3～G7药物与与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表10。 [0221] 表10本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉对小鼠肝糖原含量的影响[0222] [0223] “*”p<0.05vs空白对照； [0224] “**”p<0.01vs空白对照； [0225] 9.5本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉对小鼠血清尿素的影响 [0226] 经口给予小鼠G1～G7药物后，G1～G2药物组与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉G3～G7药物与与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表11。 [0227] 表11本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉对小鼠血清尿素含量的影响[0228] [0229] “*”p<0.05vs空白对照； [0230] “**”p<0.01vs空白对照； [0231] 10.实验结论 [0232] 本实验主要通过小鼠负重游泳实验，同时检测小鼠肝糖原的储备来观察本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉提高免疫力、抗疲劳的效果。初步研究结果显示如下： [0233] 1、本发明G3～G7速溶药食同源食品提取物冻干粉均能延长小鼠负重游泳时间(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的速溶药食同源食品提取物冻干粉。 [0234] 2、生化检测方面显示，本发明G3～G7速溶药食同源食品提取物冻干粉各剂量组均能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)，而其它G1～G2的速溶药食同源食品提取物冻干粉虽然也能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，但与对照组比较，无统计学差异(P＞0.05)； [0235] 3、本发明G3～G7速溶药食同源食品提取物冻干粉各剂量组均能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的速溶药食同源食品提取物冻干粉； [0236] 4、高尿酸模型发现，本发明G3～G7速溶药食同源食品提取物冻干粉能显著降低小鼠游泳后血清中尿素的含量(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2速溶药食同源食品提取物冻干粉； [0237] 11.结论 [0238] 上述实验证明本发明速溶药食同源食品提取物冻干粉能显著提高机体免疫力，提高小鼠的体力和耐力，降低小鼠运动后血清中尿素及乳酸的含量，且能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备，有助于缓解运动负荷引起的疲劳；能延长小鼠负重游泳至力竭的时间。 |
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