一种豌豆蛋白肽的制作方法及应用 |
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| 申请号 | CN201610638202.8 | 申请日 | 2016-08-08 | 公开(公告)号 | CN106260498A | 公开(公告)日 | 2017-01-04 |
| 申请人 | 山东理工大学; | 发明人 | 刘娜; 周泉城; 冯传兴; 王琪; 王赛; 孙婉婷; 孙阳; 解志柯; | ||||
| 摘要 | 本 发明 属于 食品加工 领域，具体涉及一种豌豆蛋白肽的制作方法及应用。本发明所述的豌豆蛋白肽的制作方法，是将豌豆蛋白粉进行 挤压 ， 粉碎 。将酶促进剂8–((4–(2,4–二甲 氧 基苯基)哌嗪–1–基)甲基)–5,7–二羟基–3–(4–羟基苯基)–4H–苯并吡喃–4– 酮 与中性蛋白酶一起添加到挤压过的豌豆蛋白粉中，对豌豆蛋白粉进行酶解制备豌豆蛋白多肽粉。本发明的豌豆蛋白粉经过挤压，空间结构变成有利于酶作用的链状结构，降低了中性蛋白酶的使用量，此外，中性蛋白酶促进剂提高了中性蛋白酶的活性，缩短了酶解时间，提高了酶解效率；豌豆蛋白粉酶解后经 冷冻干燥 得到豌豆蛋白多肽粉，清除自由基效率更高；相比于未添加中性蛋白酶促进剂的豌豆蛋白多肽粉，超氧阴离子自由基清除率提高了10.5～31.7%，能够用于抗衰老、抗氧化的 功能性食品 的开发。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种豌豆蛋白肽的制作方法及应用，其特征在于：将豌豆蛋白粉进行挤压操作，并粉碎； |
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| 说明书全文 | 一种豌豆蛋白肽的制作方法及应用技术领域背景技术[0002] 豌豆蛋白质是一种比较理想的植物蛋白，其组成比较平衡，特别是赖氨酸的含量高达1.5%，并且含有丰富的维生素和矿物质!豌豆蛋白是一种较好的必需氨基酸源，与FAO/WHO 推荐的标准模式较为接近，富含赖氨酸，缺乏含硫氨基酸，并与其它的植物蛋白一样，蛋氨酸和胱氨酸是限制氨基酸。然而，由于豌豆蛋白溶解度低以及抗营养因子的存在，降低了其消化率和生物效价，并大大限制了其应用范围，因此为了改善豌豆蛋白的营养性和生物利用率常采用发酵法或酶法将豌豆蛋白酶解制备豌豆多肽或采用糖基化法制备具有益生特性的糖蛋白”。 [0003] 挤压是一种食品加工方法，适合于工业化、连续化、大生产，高效、节能的质构重组核心技术。它能够将输送、压缩、混合、蒸煮、变性、脱水、杀菌、膨化、成型等多种操作单元同时完成，具有连续的高温高压加工、短时低损处理、高效的生化反应器特性、高质量和高效率的杀菌效果、挤压产品清洁卫生、品种多样等优点，因此被认为是食品工业中一种新的集约化单元操作形式，应用领域广阔。由挤压法生产的组织化大豆蛋白是现代大豆蛋白工业的重要组成部分。但挤压加工处理豌豆蛋白的研究鲜有报道”。 [0004] 中性蛋白酶别名沙雷肽酶，分子量为35～40KD，是一种在中性条件下活性较高的蛋白酶，可用于各种蛋白质酶解，作为一种生物催化剂，它具有催化反应速度快，无工业污染等优点。根据《GB 2760-2011 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》的规定，中性蛋白酶可用作食品工业的加工助剂（酶制剂）”。 [0005] 8–((4–(2,4–二甲氧基苯基)哌嗪–1–基)甲基) –5,7 –二羟基–3–(4–羟基苯基) –4H–苯并吡喃–4–酮是染料木素与1-(2,4-二甲基苯基)哌嗪经化学合成得到的一种染料木素衍生物。8–((4–(2,4–二甲氧基苯基)哌嗪–1–基)甲基) –5,7 –二羟基–3–(4–羟基苯基) –4H–苯并吡喃–4–酮分子式为C28H28N2O5，分子量472.52，其结构式如下”。 [0006] 目前，国内外未见8–((4–(2,4–二甲氧基苯基)哌嗪–1–基)甲基) –5,7 –二羟基–3–(4–羟基苯基) –4H–苯并吡喃–4–酮在促进中性蛋白酶活性方面的应用报道”。 发明内容[0007] 本发明的目的是提供一种豌豆蛋白肽的制作方法及应用。本发明所述的豌豆蛋白肽的制作方法及应用，是将豌豆蛋白粉进行挤压，粉碎。将酶促进剂8–((4–(2,4–二甲氧基苯基)哌嗪–1–基)甲基) –5,7 –二羟基–3–(4–羟基苯基) –4H–苯并吡喃–4–酮与中性蛋白酶一起添加到挤压过的豌豆蛋白粉中，对豌豆蛋白粉进行酶解制备豌豆蛋白多肽粉。本发明的豌豆蛋白粉经过挤压，空间结构变成有利于酶作用的链状结构，降低了中性蛋白酶的使用量，此外，中性蛋白酶促进剂提高了中性蛋白酶的活性，缩短了酶解时间，提高了酶解效率；豌豆蛋白粉酶解后经冷冻干燥得到豌豆蛋白多肽粉，清除自由基效率更高；相比于未添加中性蛋白酶促进剂的豌豆蛋白多肽粉，超氧阴离子自由基清除率提高了10.5～31.7%，能够用于抗衰老、抗氧化的功能性食品的开发”。 [0008] 本发明所述的豌豆蛋白肽的制作方法及应用，是将酶促进剂8–((4–(2,4–二甲氧基苯基)哌嗪–1–基)甲基) –5,7 –二羟基–3–(4–羟基苯基) –4H–苯并吡喃–4–酮与中性蛋白酶一起添加到挤压并粉碎了的豌豆蛋白粉中，对豌豆蛋白粉进行酶解制备豌豆蛋白多肽粉”。 [0009] 其中：豌豆蛋白粉的挤压操作如下：将含水量为20%~40%的豌豆蛋白粉。在机筒温度60 ℃，螺杆转速为170 r/min，膜孔孔径为12 mm的条件下进行挤压。挤压后的产品冷却，粉碎至40目”。 [0010] 中性蛋白酶促进剂的添加量为中性蛋白酶质量的2～4%，中性蛋白酶的添加量为豌豆蛋白粉质量的10～12%”。 [0011] 酶解的pH为6.3-6.5，酶解温度为60～65℃，酶解时间为1.5～2.5h”。 [0012] 酶解之后，灭酶温度为95～100℃”。 [0013] 将豌豆蛋白多肽粉以15～17.2mg/mL的浓度添加到普通饮料中，制成抗氧化、抗衰老的功能性饮料”。 [0014] 中性蛋白酶促进剂8–((4–(2,4–二甲氧基苯基)哌嗪–1–基)甲基) –5,7 –二羟基–3–(4–羟基苯基) –4H–苯并吡喃–4–酮，为染料木素与1-(2,4-二甲基苯基)哌嗪的化学合成物，具体制备过程如下”。 [0015] 在50mL圆底烧瓶中加入染料木素1mmol，无水乙醇25mL和37%甲醛水溶液0.08mL，加热至55～60 ℃，反应液澄清后，加入1-(2,4-二甲基苯基)哌嗪0.19mL，室温搅拌48h，有固体析出，过滤， 固体经重结晶分离纯化，得到本发明的酶促进剂”。 [0016] 中性蛋白酶促进剂与中性蛋白酶的一个酪氨酸残基以一个氢键相互结合，两个π键和一个赖氨酸残基结合，三个π键和一个色氨酸残基结合，这种结合导致了中性蛋白酶构象的改变，从而提高了中性蛋白酶的活性”。与现有的技术相比，本发明的有益效果如下”。 [0017] （1）本发明的中性蛋白酶促进剂提高了中性蛋白酶的活性，其与中性蛋白酶一起添加到挤压的豌豆蛋白粉中，具有协同作用，缩短了酶解时间，提高了酶解效率”。 [0018] （2）本发明的豌豆蛋白经过挤压，空间结构发生了一定改变，链状结构比例增加，孔隙增多，表面的凹凸感更为强烈，比表面积增加。这样的结构，使得挤压后的豌豆蛋白与酶的接触面积更大，更有利于酶进入豌豆蛋白内部，有助于酶解，从而降低了酶解时间，提高了酶解效率”。 [0019] （3）豌豆蛋白粉酶解后经冷冻干燥得到豌豆蛋白多肽粉，清除自由基效率更高；相比于未添加中性蛋白酶促进剂的豌豆蛋白多肽粉，羟基自由基清除率提高了5.3～18%，能够用于抗衰老、抗氧化的功能性食品的开发”。 具体实施方式[0020] 以下结合实施例对本发明做进一步描述”。 [0021] 实施例 1将含水量为20%的豌豆蛋白粉进行挤压，挤压条件为机筒温度60℃，螺杆转速170 r/min，膜孔孔径12 mm。挤压后的产品冷却，粉碎至40目”。 [0022] 将挤压豌豆蛋白粉溶解于pH值为6.5的磷酸缓冲溶液中，形成豌豆蛋白粉质量浓度为7%的分散液，加入占豌豆蛋白粉质量12%的中性蛋白酶，同时加入占中性蛋白酶质量2%的中性蛋白酶促进剂8–((4–(2,4–二甲氧基苯基)哌嗪–1–基)甲基) –5,7 –二羟基–3–(4–羟基苯基) –4H–苯并吡喃–4–酮，在pH值为6.5，温度为65℃条件下水浴震荡酶解1.5h，酶解结束后，酶解液在100℃维持5min灭酶，然后冷却至室温，过滤得到豌豆多肽液。相同酶解时间并舔加中性蛋白酶促进剂的条件下，挤压过豌豆蛋白的酶解度比未挤压豌豆蛋白酶解度提高10.7%；在添加中性蛋白酶促进剂，与未挤压豌豆蛋白相同酶解度时，挤压过豌豆蛋白的酶解时间比未挤压豌豆蛋白酶解时间缩短17.6%”。 [0023] 将豌豆多肽液经真空冷冻干燥得豌豆多肽粉。将豌豆多肽粉以16mg/mL的浓度添加到普通饮料中，得到具有抗氧化、抗衰老作用的功能性饮料，其超氧阴离子自由基清除率达63.4%，与未挤压、未使用中性蛋白酶促进剂相比，清除率提高了15.9%”。 [0024] 实施例 2将含水量为25%的豌豆蛋白粉进行挤压，挤压条件为机筒温度60℃，螺杆转速170 r/min，膜孔孔径12 mm。挤压后的产品冷却，粉碎至40目”。 [0025] 将豌豆蛋白粉溶解于pH值为6.3的磷酸缓冲溶液中，形成豌豆蛋白粉质量浓度为7%的分散液，加入占豌豆蛋白粉质量10%的中性蛋白酶，同时加入占中性蛋白酶质量4%的中性蛋白酶促进剂8–((4–(2,4–二甲氧基苯基)哌嗪–1–基)甲基) –5,7 –二羟基–3–(4–羟基苯基) –4H–苯并吡喃–4–酮，在pH值为6.3，温度为60℃条件下水浴震荡酶解2.5h，酶解结束后，酶解液在95℃维持10min灭酶，然后冷却至室温，过滤得到豌豆多肽液。相同酶解时间并舔加中性蛋白酶促进剂的条件下，挤压过豌豆蛋白的酶解度比未挤压豌豆蛋白酶解度提高 28.3%；在添加中性蛋白酶促进剂，与未挤压豌豆蛋白相同酶解度时，挤压过豌豆蛋白的酶解时间比未挤压豌豆蛋白酶解时间缩短25.4%”。 [0026] 将豌豆多肽液经真空冷冻干燥得豌豆多肽粉。将豌豆多肽粉以15mg/mL的浓度添加到普通饮料中，得到具有抗氧化、抗衰老作用的功能性饮料，其超氧阴离子自由基清除率达76.4%，与未挤压、未使用中性蛋白酶促进剂相比，超氧阴离子清除率提高了31.7%”。 [0027] 实施例 3将含水量为40%的豌豆蛋白粉进行挤压，挤压条件为机筒温度60℃，螺杆转速170 r/min，膜孔孔径12 mm。挤压后的产品冷却，粉碎至40目”。 [0028] 将豌豆蛋白粉溶解于pH值为6.4的磷酸缓冲溶液中，形成豌豆蛋白粉质量浓度为7%的分散液，加入占豌豆蛋白粉质量11%的中性蛋白酶，同时加入占中性蛋白酶质量3%的中性蛋白酶促进剂8–((4–(2,4–二甲氧基苯基)哌嗪–1–基)甲基) –5,7 –二羟基–3–(4–羟基苯基) –4H–苯并吡喃–4–酮，在pH值为6.4，温度为63℃条件下水浴震荡酶解2h，酶解结束后，酶解液在95℃维持10min灭酶，然后冷却至室温，过滤得到豌豆多肽液。相同酶解时间并添加中性蛋白酶促进剂的条件下，挤压过豌豆蛋白的酶解度比未挤压豌豆蛋白酶解度提高 15.7%；在添加中性蛋白酶促进剂，与未挤压豌豆蛋白相同酶解度时，挤压过豌豆蛋白的酶解时间比未挤压豌豆蛋白酶解时间缩短18.4%”。 [0029] 将豌豆多肽液经真空冷冻干燥得豌豆多肽粉。将豌豆多肽粉以17.2mg/mL的浓度添加到普通饮料中，得到具有抗氧化、抗衰老作用的功能性饮料，其超氧阴离子自由基清除率达63.8%，与未挤压、未使用中性蛋白酶促进剂相比，超氧阴离子自由基清除率提高了16.6%”。 |
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