一种印奇果分离蛋白的制造方法 |
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| 申请号 | CN201610128459.9 | 申请日 | 2016-03-07 | 公开(公告)号 | CN105707408A | 公开(公告)日 | 2016-06-29 |
| 申请人 | 湖北工业大学; | 发明人 | 吴正奇; 凌秀菊; | ||||
| 摘要 | 本 发明 公开了一种印奇果分离蛋白的制造方法。利用印奇果 蛋白质 在不同条件下的 溶解度 有差异和 超滤 膜对不同分子量的物质截留率不同的性质，印奇果粕用 水 提取蛋白质，分离印奇果渣，水提取液调节等电点沉淀蛋白质，得蛋白质沉淀和上清液；蛋白质沉淀经水洗去杂后得到 净化 的蛋白质沉淀和水洗液，合并上清液和水洗液，用超滤方法分离杂质得到超滤浓缩液；合并超滤浓缩液和净化的蛋白质沉淀，调节pH至中性，经老化后均质得到蛋白质的均质液；蛋白质的均质液经 喷雾干燥 即得印奇果分离蛋白。本发明的印奇果分离蛋白的制造方法成本低、 颜色 白、无涩味、可食用、得率高、功能性强、可机械化。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种印奇果分离蛋白的制造方法，其特步骤是： |
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| 说明书全文 | 一种印奇果分离蛋白的制造方法技术领域背景技术[0002] 印奇果又称印加果，南美油藤，星油藤，学名Plukenetia volubilis linneo，英文名Sacha inchi。印奇果属大戟科多年生木质藤本植物，原生长在南美洲南部的热带雨林，在南美洲印加地区当地土著人已有上千年的食用历史，2006年被中国科学院西双版纳热带植物园成功引进。印奇果当年种植就可以挂果，进入盛产期后一年四季开花结果，产量高，是一种经济型作物。印奇果幼果表面光滑，呈绿色，成熟时为茶褐色，具有4～6个棱角，每个棱角内含有一粒种子。印奇果种子中含有丰富的油脂、蛋白质、氨基酸和维生素。从印奇果种子中榨取的印奇果油富含多不饱和脂肪酸，其中亚麻酸的含量高，价格昂贵，功能突出；印奇果油在调整血脂、预防心血管疾病、保养肌肤、增强免疫力、保养肌肤、预防糖尿病、提神健脑和增加记忆力等方面具有重要作用。印奇果油的安全性好，可广泛用于食品、保健品和医药等领域。 成熟的印奇果在采摘后，经机器破瓣脱壳后即为印奇果种子，种子再脱黑色壳得印奇果果仁，印奇果果仁经采用压榨法榨油或者浸出法浸出油脂后得到印奇果粕。印奇果粕色白、味道涩口，人无法直接食用，猪牛鸡鸭等也不吃，被直接废弃或者仅用作肥料使用。印奇果粕蛋白质含量丰富，达到55%以上，比大豆粕还高，氨基酸种类齐全；不同方法得到的印奇果粕的残油量大约为0.5～10%，印奇果油价格昂贵；印奇果粕还含有量比较高的成分未知的涩味物质。蛋白质是最重要的营养和保健成分，价格高，资源稀缺。因此，如果以印奇果粕为原料采用技术手段制造蛋白质含量高、没有涩味和功能突出的印奇果蛋白质，在食品工业、制药工业和饲料领域将会具有广阔的应用空间和经济效益。 [0003] 目前，我国云南省2006年从国外引种并大规模种植印奇果，印奇果经压榨提油后或者浸出提油后产生大量的具有显著涩味同时蛋白质含量很高的的印奇果粕，由于缺乏利用技术和方法，印奇果粕无法利用，只好作为废弃物，既浪费资源，又不利于印奇果油成本的降低，还会污染环境，因此，研究利用印奇果粕中蛋白质的利用技术与方法具有很强的社会、经济和环境意义。 [0004] 以植物为原料生产分离蛋白，主要集中在以大豆粕为原料采用碱溶酸沉工艺技术制造大豆分离蛋白，大豆分离蛋白在食品与医药工业部门中具有广阔的用途。印奇果蛋白质与大豆蛋白质相比，在结构、性质、分子量和溶解性能等方面有很大的差异，因此生产大豆分离蛋白的成熟技术不可能直接应用于印奇果分离蛋白的制造。由于印奇果引种时间短，有关印奇果蛋白质的利用研究技术与专利，处于空白状态。 发明内容[0006] 为了实现上述的目的，本发明采用了以下技术措施：本发明的技术构思如下：利用印奇果蛋白质在不同条件下的溶解度有差异和超滤膜对不同分子量的物质截留率不同的性质，印奇果粕用水提取蛋白质，分离印奇果渣，水提取液调节等电点沉淀蛋白质，得蛋白质沉淀和上清液；蛋白质沉淀经水洗去杂后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液，合并上清液和水洗液，用超滤方法分离杂质得到超滤浓缩液；合并超滤浓缩液和净化的蛋白质沉淀，调节pH至中性，经老化后均质得到蛋白质的均质液；蛋白质的均质液经喷雾干燥即得印奇果分离蛋白。 [0007] 一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤如下：⑴粉碎过筛： 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； 所述的印奇果粕，是指：a.印奇果仁采用食用油脂加工中的浸出方法（来源写明？）浸出油脂后残油量≦1%的印奇果仁残余物；b.或者印奇果仁先采用食用油脂加工中的压榨方法（来源写明？）压榨出油脂后的印奇果仁残余物，再采用食用油脂加工中的浸出方法浸出油脂后残油量≦1%的印奇果仁残余物；c.印奇果仁采用食用油脂加工中的压榨方法压榨出油脂后残油量≦10%的印奇果仁残余物；所述的印奇果粕粉的颗粒大小为经10～200目标准筛过筛。 [0008] 优选的，所述的印奇果粕，是指a.印奇果仁采用食用油脂加工中的浸出方法浸出油脂后残油量≦1%的印奇果仁残余物和b.印奇果仁先采用食用油脂加工中的压榨方法压榨出油脂后的印奇果仁残余物，再采用食用油脂加工中的浸出方法浸出油脂后残油量≦1%的印奇果仁残余物。 [0009] ⑵水提取蛋白质： 向印奇果粕粉中加入其质量1～25倍的水，搅拌0.1～8小时后，在搅拌的条件下用碱液调节pH为6.5～12.5，继续搅拌0.3～10小时，溶解提取蛋白质，离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量1～20倍的水，搅拌0.1～8小时，离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液。控制本步骤整个过程中物料的温度为0～80℃，搅拌速度为10～250rpm；所述的碱为分析纯或者食用级的氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾其中的一种或两至四种（多种）碱任意比例的混合物，碱液的质量百分浓度范围为1～60%；优选的碱为氢氧化钠或者氢氧化钾，优选的碱液质量百分浓度范围为5～30%，所述的离心方法为卧式螺旋离心分离、双锥卧式螺旋离心分离、沉降式离心分离、过滤式离心分离或者任意两种方法的组合。 [0010] ⑶沉淀蛋白质： 在搅拌的条件下，用酸液调节印奇果蛋白质提取液的pH为2.5～6.5并维持2.5～6.5，搅拌0～5小时，离心后得到蛋白质沉淀和上清液。控制本步骤整个过程中物料的温度为0～80℃，搅拌速度为10～250rpm； 所述的酸为分析纯或者食用级的盐酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、苹果酸、富马酸、酒石酸、乳酸、醋酸一种或两至九种（多种）酸任意比例的混合物，酸液的质量百分浓度范围为1～60%； 优选的酸为盐酸、硫酸、磷酸、富马酸，优选的酸液的质量百分浓度范围为5～30%；所述的酸液调节pH的速度为0.5～3pH单位/小时，优选的酸液调节pH的速度为1～2pH单位/小时，所述的离心方法为卧式螺旋离心分离、双锥卧式螺旋离心分离、沉降式离心分离、过滤式离心分离或者任意两种方法的组合。 [0011] ⑷水洗蛋白质： 向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量1～25倍的水，搅拌0.1～5小时，离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液。控制本步骤整个过程中物料的温度为0～80℃，搅拌速度为10～200rpm；所述的离心方法为卧式螺旋离心分离、双锥卧式螺旋离心分离、沉降式离心分离、过滤式离心分离或者任意两种方法的组合。 [0012] ⑸合并与超滤浓缩 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，用超滤法对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/2～1/10，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用。控制本步骤整个过程中物料的温度为0～80℃；所述的超滤法，其膜组件为管式膜、中空纤维膜、板式膜或者卷式膜，其膜材料为纤维素酯类、聚砜类、聚烯烃类、氟材料、聚氯乙烯等有机高分子聚合物或者陶瓷、玻璃、氧化铝、氧化锆等无机材料，其截留分子量范围为1～20万；优选的超滤膜组件为管式膜、中空纤维膜，优选的超滤膜材料为纤维素酯类、聚砜类、氟材料、聚氯乙烯、陶瓷，优选的超滤膜截留分子量范围为1～10万。 [0013] ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，搅拌0.1～8小时后，在搅拌的条件下用碱液调节pH为6.5～11.0，继续搅拌0.3～10小时使蛋白质充分老化，用均质机在5～80MPa的压力下均质1～2次，得到印奇果蛋白质的均质液。控制本步骤整个过程中物料的温度为0～80℃，搅拌速度为10～350rpm； 所述的碱为分析纯或者食用级的氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾或者两种或多种碱任意比例的混合物，碱液的质量百分浓度范围为1～60%；优选的碱为氢氧化钠或者氢氧化钾，优选的碱液质量百分浓度范围为5～30%；所述的均质液中固体颗粒的粒度≦2μm，其总固形物的质量百分浓度为≧10%。 [0014] ⑺喷雾干燥： 在热风温度为130～220℃和热风流速为1～15m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到0～60℃，即为印奇果分离蛋白。 [0015] 所述的喷雾干燥，其喷雾法为压力喷雾或者离心喷雾。 [0016] 所得印奇果分离蛋白产品，按标准方法测定，其蛋白质含量≧90%，水分含量≦4.5%，灰分含量≦4.5%。 [0017] 与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果在于：工艺过程简便、成本低、颜色白、无涩味、可食用、得率高、功能性强、可以机械化生产，能适应于大型与小型的生产规模。 [0019] 图1为一种印奇果多肽的制造方法方框示意图。 具体实施方式[0021] 实施例1：下面根据图1可知，一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤是： ⑴粉碎过筛: 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经80目标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； ⑵水提取蛋白质： 取印奇果粕粉500g，加入其质量15倍的水，以100rpm的速度搅拌0.5小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为20%的氢氧化钠溶液调节pH为10.5或10.7或 11.0，将混合物料加热到45℃并维持45℃，继续搅拌2.0～2.5小时，溶解提取蛋白质，用沉降式离心机离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量5倍的水，搅拌1.0或1.31.5小时，用沉降式离心机离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液； ⑶沉淀蛋白质： 在自然温度和搅拌速度为100rpm的搅拌条件下，用质量百分浓度为 20%的盐酸溶液，控制pH下降速度为1.5pH单位/小时，调节印奇果蛋白质提取液的pH为3.9或4.2或4.4并维持pH为3.9或4.1或4.4，继续搅拌1小时，沉降式离心机离心后得到蛋白质沉淀和上清液； ⑷水洗蛋白质： 在自然温度下，向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量5倍的水，以 100rpm的搅拌速度搅拌2小时，沉降式离心机离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液； ⑸合并与超滤浓缩 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，在自然温度下，用截留分子量为3万的管式超滤膜设备对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/4，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用； ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，以100rpm的搅拌速度搅拌0.1小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为20%的氢氧化钠溶液调节pH为6.9或7.2或7.4，继续搅拌3小时使蛋白质充分老化，用均质机在 30MPa的压力下均质1次，得到印奇果蛋白质的均质液； ⑺喷雾干燥： 在热风温度为170或173或175℃和热风流速为3.0或3.33.5m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到 0或10或20或30或40或50或60℃，得印奇果分离蛋白290g。按标准方法测定，其蛋白质含量≧90%，水分含量≦4.5%，灰分含量≦4.5%。 [0022] 实施例2：一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤是： ⑴粉碎过筛： 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经120目标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； ⑵水提取蛋白质： 取印奇果粕粉500g，加入其质量10倍的水，以120rpm的速度搅拌1小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为20%的氢氧化钾溶液调节pH为9.5或9.7或10.0，将混合物料加热到35℃并维持35℃，继续搅拌3.0或3.2或3.5小时，溶解提取蛋白质，用沉降式离心机离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量10倍的水，将混合物料加热到35℃并维持35℃，继续搅拌1.5或1.7或2.0小时，用沉降式离心机离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液； ⑶沉淀蛋白质： 在自然温度和搅拌速度为100rpm的搅拌条件下，用质量百分浓度为 20%的磷酸溶液，控制pH下降速度为1.0pH单位/小时，调节印奇果蛋白质提取液的pH为4.0或4.2或4.5并维持pH为4.0或4.3或4.5，继续搅拌0.5小时，沉降式离心机离心后得到蛋白质沉淀和上清液； ⑷水洗蛋白质： 在自然温度下，向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量8倍的水，以 90rpm的搅拌速度搅拌2.5小时，沉降式离心机离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液； ⑸合并与超滤浓缩： 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，在自然温度下，用截留分子量为1万的管式超滤膜设备对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/3，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用； ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，以100rpm的搅拌速度搅拌0.1小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为20%的氢氧化钾溶液调节pH为7.0或7.3或7.5，继续搅拌2小时使蛋白质充分老化，用均质机在 20MPa的压力下均质2次，得到印奇果蛋白质的均质液； ⑺喷雾干燥： 在热风温度为175或178或180℃和热风流速为2.5或2.7或3.0m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到 0或15或25或35或45或55或60℃，得印奇果分离蛋白296g。按标准方法测定，其蛋白质含量≧90%，水分含量≦4.5%，灰分含量≦4.5%。 [0023] 实施例3：一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤是： ⑴粉碎过筛： 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经120目标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； ⑵水提取蛋白质： 取印奇果粕粉500g，加入其质量10倍的水，以110rpm的速度搅拌0.5小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为20%的氢氧化钠溶液调节pH为10.0或10.3或 10.5，将混合物料加热到65℃并维持65℃，继续搅拌1.5或1.8或2.0小时，溶解提取蛋白质，用沉降式离心机离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量10倍的水，将混合物料加热到65℃并维持65℃，以80rpm的速度搅拌0.5或0.8或1.0小时后，用沉降式离心机离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液； ⑶沉淀蛋白质： 在自然温度和搅拌速度为80rpm的搅拌条件下，用质量百分浓度为20%的硫酸溶液，控制pH下降速度为2.0pH单位/小时，调节印奇果蛋白质提取液的pH为3.5或 3.8或4.0并维持pH为3.5或3.7或4.0，继续搅拌2小时，沉降式离心机离心后得到蛋白质沉淀和上清液； ⑷水洗蛋白质： 在自然温度下，向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量10倍的水，以 100rpm的搅拌速度搅拌2小时，沉降式离心机离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液； ⑸合并与超滤浓缩： 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，在自然温度下，用截留分子量为2万的管式超滤膜设备对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/5，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用； ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，以110rpm的搅拌速度搅拌0.5小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为10%的氢氧化钾溶液调节pH为6.5或6.8或7.0，继续搅拌3.5小时使蛋白质充分老化，用均质机在 30MPa的压力下均质1次，得到印奇果蛋白质的均质液； ⑺喷雾干燥 在热风温度为180或182或185℃和热风流速为2.0或2.2或2.5m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到 0或18或26或36或44或56或60℃，得印奇果分离蛋白299g。按标准方法测定，其蛋白质含量≧90%，水分含量≦4.5%，灰分含量≦4.5%。 [0024] 实施例4：一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤是： ⑴粉碎过筛： 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经100目标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； ⑵水提取蛋白质： 取印奇果粕粉500kg，加入其质量13倍的水，以100rpm的速度搅拌1小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为10%的氢氧化钠溶液调节pH为10.5或11.0，继续搅拌3.0或3.5小时，溶解提取蛋白质，用卧式螺旋离心机离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量12倍的水，将混合物料加热到55℃并维持55℃，搅拌 1.5或2.0小时，用卧式螺旋离心机离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液； ⑶沉淀蛋白质： 将印奇果蛋白质提取液加热到30℃并维持30℃，在搅拌速度为70rpm的搅拌条件下，用质量百分浓度为5%的盐酸溶液，控制pH下降速度为0.5单位/小时，调节印奇果蛋白质提取液的pH为3.7或4.2并维持pH为3.7或4.2，继续搅拌0.5小时，卧式螺旋离心机离心后得到蛋白质沉淀和上清液； ⑷水洗蛋白质： 向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量5倍的水，以100rpm的搅拌速度搅拌2小时，将混合物料加热到30℃并维持30℃，卧式螺旋离心机离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液； ⑸合并与超滤浓缩： 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，在自然温度下，用截留分子量为1.5万的超滤设备对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/6，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用； ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，以120rpm的搅拌速度搅拌0.5小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为5%的氢氧化钠溶液调节pH为7.5或8.0，继续搅拌4小时使蛋白质充分老化，用均质机在20MPa的压力下均质2次，得到印奇果蛋白质的均质液； ⑺喷雾干燥： 在热风温度为180～185℃和热风流速为3.0或3.5m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到0或8或16或24或32或42或52或60℃，得印奇果分离蛋白298kg。按标准方法测定，其蛋白质含量≧ 90%，水分含量≦4.5%，灰分含量≦4.5%。 [0025] 实施例5：一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤是： ⑴粉碎过筛： 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经100目标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； ⑵水提取蛋白质： 取印奇果粕粉100kg，加入其质量10倍的水，以110rpm的速度搅拌 1.5小时后，将混合物料加热到65℃并维持65℃,在搅拌的条件下用质量百分浓度为5%的氢氧化钠溶液调节pH为8.5或9.0，继续搅拌1.0或1.5小时，溶解提取蛋白质，用卧式螺旋离心机离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量15倍的水，将混合物料加热到65℃并维持65℃，在搅拌的条件下用质量百分浓度为5%的氢氧化钠溶液调节pH为9.0～9.5，继续搅拌1.5或2.0小时，用卧式螺旋离心机离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液； ⑶沉淀蛋白质： 将印奇果蛋白质提取液加热到40℃并维持40℃，在搅拌速度为50rpm的搅拌条件下，用质量百分浓度为3%的盐酸溶液，控制pH下降速度为0.5单位/小时，调节印奇果蛋白质提取液的pH为3.8～4.3并维持pH为3.8～4.3，继续搅拌0.5小时，混合物料冷却到室温，卧式螺旋离心机离心后得到蛋白质沉淀和上清液； ⑷水洗蛋白质： 向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量12倍的水，以70rpm的搅拌速度搅拌1.5小时，将混合物料加热到20℃并维持20℃，卧式螺旋离心机离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液； ⑸合并与超滤浓缩： 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，在自然温度下，用截留分子量为1万的超滤设备对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/7，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用； ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，以120rpm的搅拌速度搅拌0.2小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为5%的氢氧化钠溶液调节pH为7.0～7.5，继续搅拌3.5小时使蛋白质充分老化，用均质机在40MPa的压力下均质1次，得到印奇果蛋白质的均质液； ⑺喷雾干燥： 在热风温度为175或180℃和热风流速为3.0～3.5m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到0或20或35或48或60℃，得印奇果分离蛋白58kg。按标准方法测定，其蛋白质含量≧90%，水分含量≦ 4.5%，灰分含量≦4.5%。 [0026] 实施例6：一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤是： ⑴粉碎过筛： 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经100目标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； ⑵水提取蛋白质： 取印奇果粕粉215kg，加入其质量14倍的水，以90rpm的速度搅拌2.5小时后，混合物料的温度为自然温度,在搅拌的条件下用质量百分浓度为15%的氢氧化钠溶液调节pH为11.5或12.5，继续搅拌0.5或1.0小时，溶解提取蛋白质，用卧式螺旋离心机离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量15倍的水，将混合物料加热到65℃并维持65℃，搅拌0.5或1.0小时，用卧式螺旋离心机离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液； ⑶沉淀蛋白质： 在自然温度和搅拌速度为60rpm的搅拌条件下，用质量百分浓度为15%的盐酸溶液，控制pH下降速度为1.5单位/小时，调节印奇果蛋白质提取液的pH为3.6或4.1并维持pH为3.6或4.1，继续搅拌1.5小时，卧式螺旋离心机离心后得到蛋白质沉淀和上清液； ⑷水洗蛋白质： 向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量15倍的水，以50rpm的搅拌速度搅拌1.5小时，卧式螺旋离心机离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液； ⑸合并与超滤浓缩： 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，在自然温度下，用截留分子量为2.5万的超滤设备对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/8，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用； ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，以90rpm的搅拌速度搅拌0.5小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为15%的氢氧化钠溶液调节pH为6.6或7.1，继续搅拌4.0小时使蛋白质充分老化，用均质机在40MPa的压力下均质1次，得到印奇果蛋白质的均质液； ⑺喷雾干燥： 在热风温度为170或175℃和热风流速为3.0或3.5m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到0或7或16或27或38或49或54或60℃，得印奇果分离蛋白128kg。按标准方法测定，其蛋白质含量≧ 90%，水分含量≦4.5%，灰分含量≦4.5%。 [0027] 实施例7：一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤是： ⑴粉碎过筛： 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经100目标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； ⑵水提取蛋白质： 取印奇果粕粉10kg，加入其质量20倍的水，以90rpm的速度搅拌2.5小时后，将混合物料加热到45℃并维持45℃，在搅拌的条件下用质量百分浓度为15%的氢氧化钾溶液调节pH为10.5或11.0，继续搅拌1.0或1.5小时，溶解提取蛋白质，用过滤式离心机离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量10倍的水，混合物料的温度为自然温度，搅拌0.5或1.0小时，用过滤式离心机离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液； ⑶沉淀蛋白质： 在自然温度和搅拌速度为70rpm的搅拌条件下，用质量百分浓度为15%的磷酸溶液，控制pH下降速度为0.5单位/小时，调节印奇果蛋白质提取液的pH为4.0或4.5并维持pH为4.0或4.5，继续搅拌0.2时，过滤式离心机离心后得到蛋白质沉淀和上清液； ⑷水洗蛋白质： 向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量20倍的水，以40rpm的搅拌速度搅拌1.0小时，过滤式离心机离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液； ⑸合并与超滤浓缩： 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，在自然温度下，用截留分子量为5万的超滤设备对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/10，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用； ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，以90rpm的搅拌速度搅拌0.3小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为15%的氢氧化钠溶液调节pH为6.9或7.4，继续搅拌5.0小时使蛋白质充分老化，用均质机在35MPa的压力下均质1次，得到印奇果蛋白质的均质液； ⑺喷雾干燥： 在热风温度为185或187或190℃和热风流速为1.0或1.5m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到0或22或33或47或57或60℃，得印奇果分离蛋白5.52kg。按标准方法测定，其蛋白质含量≧90%，水分含量≦4.5%，灰分含量≦4.5%。 [0028] 实施例8：一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤是： ⑴粉碎过筛： 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经100目标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； ⑵水提取蛋白质： 取印奇果粕粉8kg，加入其质量25倍的水，以60rpm的速度搅拌2.5小时后，将混合物料加热到40℃并维持40℃，在搅拌的条件下用质量百分浓度为10%的氢氧化钠溶液调节pH为9.5或10.0，继续搅拌1.5或2.0小时，溶解提取蛋白质，用过滤式离心机离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量20倍的水，以60rpm的速度搅拌，将混合物料加热到50℃并维持50℃，继续搅拌0.5或1.0小时，用过滤式离心机离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液； ⑶沉淀蛋白质： 在自然温度和搅拌速度为50rpm的搅拌条件下，用质量百分浓度为15%的盐酸溶液，控制pH下降速度为1.0单位/小时，调节印奇果蛋白质提取液的pH为4.2或4.5并维持pH为4.2或4.5，继续搅拌1.5小时，过滤式离心机离心后得到蛋白质沉淀和上清液； ⑷水洗蛋白质： 向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量25倍的水，以40rpm的搅拌速度搅拌0.3小时后，将混合物料加热到45℃并维持45℃，继续搅拌1小时，过滤式离心机离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液； ⑸合并与超滤浓缩： 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，在自然温度下，用截留分子量为2.5万的超滤设备对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/10，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用； ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，以90rpm的搅拌速度搅拌0.5小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为15%的氢氧化钠溶液调节pH为6.8或7.2，继续搅拌5.0小时使蛋白质充分老化，用均质机在35MPa的压力下均质1次，得到印奇果蛋白质的均质液； ⑺喷雾干燥： 在热风温度为180或183或185℃和热风流速为1.0或1.5m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到0或19或33或48或60℃，得印奇果分离蛋白4.65kg。按标准方法测定，其蛋白质含量≧90%，水分含量≦4.5%，灰分含量≦4.5%。 [0029] 实施例9：一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤是： ⑴粉碎过筛： 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经100目标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； ⑵水提取蛋白质： 取印奇果粕粉15kg，加入其质量9倍的水，以85rpm的速度搅拌2.5小时后，将混合物料加热到60℃并维持60℃，在搅拌的条件下用质量百分浓度为20%的氢氧化钾溶液调节pH为9.0或9.5，继续搅拌1.0或1.5小时，溶解提取蛋白质，用过滤式离心机离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量5倍的水，以85rpm的速度搅拌，将混合物料加热到50℃并维持50℃，继续搅拌0.5或1.0小时，用过滤式离心机离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液； ⑶沉淀蛋白质： 在搅拌速度为50rpm的搅拌条件下，将印奇果蛋白质提取液加热到35℃并维持35℃，用质量百分浓度为,20%的盐酸溶液，控制pH下降速度为1.0单位/小时，调节印奇果蛋白质提取液的pH为4.0或4.5并维持pH为4.0或4.5，继续搅拌1小时，过滤式离心机离心后得到蛋白质沉淀和上清液； ⑷水洗蛋白质： 向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量5倍的水，以90rpm的搅拌速度搅拌2小时，过滤式离心机离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液； ⑸合并与超滤浓缩： 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，在自然温度下，用截留分子量为1.5万的超滤设备对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/2，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用； ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，以90rpm的搅拌速度搅拌0.5小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为20%的氢氧化钾溶液调节pH为6.9或7.4，继续搅拌3.5小时使蛋白质充分老化，用均质机在30MPa的压力下均质1次，得到印奇果蛋白质的均质液； ⑺喷雾干燥： 在热风温度为170或175℃和热风流速为3.0或3.5m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到0或9或28或37或51或60℃，得印奇果分离蛋白8.25kg。按标准方法测定，其蛋白质含量≧90%，水分含量≦4.5%，灰分含量≦4.5%。 [0030] 实施例10：一种印奇果分离蛋白的制造方法，其步骤是： ⑴粉碎过筛： 取印奇果粕，用不锈钢粉碎机粉碎并经80目标准筛过筛后得印奇果粕粉备用； ⑵水提取蛋白质： 取印奇果粕粉60g，加入其质量14倍的水，以90rpm的速度搅拌0.5小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为10%的氢氧化钠溶液调节pH为10.5或11.0，继续搅拌2.0或2.5小时，溶解提取蛋白质，用沉降式离心机离心后得到第一次蛋白质提取液和印奇果渣；向印奇果渣中加入其质量6倍的水，搅拌1.0或1.5小时，用沉降式离心机离心后得到第二次蛋白质提取液和印奇果渣，弃印奇果渣，合并第一次蛋白质提取液和第二次蛋白质提取液，得到印奇果蛋白质提取液； ⑶沉淀蛋白质： 在自然温度和搅拌速度为55rpm的搅拌条件下，用质量百分浓度为10%的盐酸溶液，控制pH下降速度为2pH单位/小时，调节印奇果蛋白质提取液的pH为3.8或4.3维持pH为3.8或4.3，继续搅拌1.5小时，沉降式离心机离心后得到蛋白质沉淀和上清液； ⑷水洗蛋白质： 在自然温度下，向步骤⑶所得蛋白质沉淀加入其质量4倍的水，以 110rpm的搅拌速度搅拌3小时，沉降式离心机离心后得到净化的蛋白质沉淀和水洗液； ⑸合并与超滤浓缩： 合并步骤⑶中的上清液和步骤⑷中的水洗液得到混合溶液，在自然温度下，用截留分子量为2万的管式超滤膜设备对混合溶液进行浓缩，直到所得浓缩液的体积为混合溶液体积的1/2，弃去超滤透过液，取超滤浓缩液备用； ⑹合并、中和、老化与均质： 向步骤⑶所得净化的蛋白质沉淀中加入步骤⑸所得的超滤浓缩液，以100rpm的搅拌速度搅拌0.5小时后，在搅拌的条件下用质量百分浓度为20%的氢氧化钠溶液调节pH为6.9或7.4，将混合物料加热到60℃并维持60℃，继续搅拌,1.5小时使蛋白质充分老化，用均质机在40MPa的压力下均质1次，得到印奇果蛋白质的均质液； ⑺喷雾干燥： 在热风温度为175或180℃和热风流速为3.0～3.5m/s的条件下，将步骤⑹所得的印奇果蛋白质的均质液，喷雾干燥成固体粉末，收集并冷却固体粉末到0或11或23或37或45或53或60℃，得印奇果分离蛋白35g。按标准方法测定，其蛋白质含量≧90%，水分含量≦4.5%，灰分含量≦4.5%。 |
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