苦瓜多肽冻干粉的制备方法 |
|||||||
| 申请号 | CN201610185301.5 | 申请日 | 2016-03-29 | 公开(公告)号 | CN105613937A | 公开(公告)日 | 2016-06-01 |
| 申请人 | 北海阿西罗拉生物科技有限公司; | 发明人 | 卢泽芳; | ||||
| 摘要 | 本 发明 公开了一种苦瓜多肽冻干粉的制备方法，属于 生物 医药技术领域，所述方法包括原料预处理、 脱脂 、 碱 溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、 冷冻干燥 步骤，所述酶解使用的酶为 质量 比为1.5～3:1的木瓜蛋白酶和 风 味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量1～6%的维生素C。本发明具有提高苦瓜多肽纯度，改善苦瓜多肽口感的优点。 | ||||||
| 权利要求 | 1.苦瓜多肽冻干粉的制备方法，其特征在于：包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为1.5～3:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量1～6%的维生素C。 |
||||||
| 说明书全文 | 苦瓜多肽冻干粉的制备方法技术领域背景技术[0002] 糖尿病(diabetesmellitus，DM)是一组由环境和遗传因素共同作用引起的综合征，其基本病理特点为胰岛素分泌绝对或相对不足，或外周组织对胰岛素不敏感，引起以糖代谢紊乱为主，包括脂肪、蛋白质代谢紊乱的一种全身性疾病。糖尿病控制与并发症的临床试验（DCCT）、英国前瞻性糖尿病研究（UKPDS）等多项循证医学研究已使人们对强化血糖控制的意义达成共识，血糖达标不仅可以预防或延缓糖尿病慢性并发症的发生，提高患者的生活质量，而且会大大降低糖尿病相关的医疗费用。然而现实中糖尿病患者的血糖达标率较低。注射胰岛素是治疗糖尿病的方法之一，但是临床治疗中发现，胰岛素注射本身也存在如下问题（：1）只能降低注射期间的血糖，不能完全按血糖变化曲线控制血糖；（2）容易产生低血糖（；3）胰岛素的吸收稳定性差，吸收差异达52%；（4）不能有效控制并发症。口服降糖药治疗糖尿病是一种长期的治疗和维持过程，但是单纯依靠口服降糖已经无法达到强化治疗的目标，主要由于长期口服降糖药物产生的耐药性和副反应造成的。因此，寻求更为有效的降糖药物是迫切的。 [0003] 苦瓜多肽是一种纯天然植物成分，通过激活胰岛素、激活胰岛素受体，提高胰岛素有效利用率来调节血糖，从而实现了血糖按照人体正常生理自然规律表达的目的，且没有副作用。苦瓜多肽为糖尿病患者及血糖偏高人群提供了一种安全，持久的血糖调节的解决方案，缓解了人们在使用药物调节血糖时，给自身带来的一系列身心伤害难题。 [0004] 苦瓜多肽的制备方法现有技术中已有报道，如国家知识产权局于2011年3月16日公开的公开号为CN101985644A，名称为“一种苦瓜多肽及其制备方法与应用”的发明专利，该专利是通过采用木瓜蛋白酶直接酶解苦瓜粉，然后经沉降、过滤、收集滤液来实现提取的目的，该方法使用的原料为苦瓜粉，即是包括苦瓜籽和苦瓜肉，但苦瓜多肽存在于苦瓜籽中，将苦瓜肉与苦瓜籽粉碎后一并进行多肽的提取，会大大提高成本，且产物杂质含量高，苦瓜多肽的纯度低，相应的使用效果也差。 发明内容[0005] 本发明提出一种苦瓜多肽冻干粉的制备方法，通过选择木瓜蛋白酶和风味蛋白酶以特定比例混合后对原料进行水解，能将大分子蛋白质水解成小分子蛋白质的同时，改善苦瓜多肽的口感，使其更适宜用于食品、药品中；另外通过脱脂、碱溶、酸沉等步骤，进一步提高苦瓜多肽的纯度，从而提高产品品质。 [0006] 为了实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：苦瓜多肽冻干粉的制备方法，其特征在于：包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为1.5～3:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量1～6%的维生素C。 [0008] 所述脱脂是指向灭菌后的苦瓜籽粉末中加入重量为苦瓜粉重量10～15倍的丙酮，搅拌均匀后，静置30～60min，再过滤。 [0009] 所述碱溶是指向脱脂后的苦瓜籽中加入苦瓜籽重量10倍的氨水，搅拌均匀后，静置5～8h，取上清液备用；所述氨水的体积浓度为12～15%。 [0010] 所述酶解的温度为38～45℃， pH值为5.0～6.0。 [0011] 所述酸沉是指向酶解后的溶液中加入与溶液体积比为1:100的浓硫酸，搅拌后静置10～20min；所述浓硫酸的体积浓度为98%以上。 [0012] 所述离心的转速为10000～11000转/分，离心时间为10～20min。 [0013] 所述洗涤是将酸沉得到的沉淀加丙酮进行洗涤2～4次。 [0014] 所述冷冻干燥是指将洗涤后的沉淀于温度为-20～-10℃，压力为5～8Pa下干燥1～2h。 [0015] 本发明的有益效果如下：（1）本发明通过选择木瓜蛋白酶和风味蛋白酶以特定比例混合后对原料进行水解，将大分子蛋白质水解成小分子蛋白质，经进一步纯化后得到苦瓜多肽，其中的风味蛋白酶可将风味前体物水解，从而释放风味物质，增强和改善成品的风味，且可控制肽的苦味，使其口感更适用于食品、药品，易被消费者所接受，本发明还添加特定比例的维生素C，维生素C对酶具有激活作用，从而减少酶的实际使用量，降低生产成本；另外通过脱脂、碱溶、酸沉等步骤的设计，以及参数的选择，进一步提高苦瓜多肽的纯度，从而提高产品品质和保证药物活性。 [0016] （2）本发明在苦瓜籽先进行烘干处理，待苦瓜籽变硬脆后，再进行研磨，可提高研磨效果和生产效率。 [0017] （3）本发明离心得到的沉淀，经加丙酮进一步洗涤，将沉淀中的多种杂质分离出来，进一步提高苦瓜多肽的纯度。 具体实施方式[0018] 下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明，但本发明的实施方式不限于此。 [0019] 实施例1苦瓜多肽冻干粉的制备方法，包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为1.5:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量1%的维生素C。 [0020] 实施例2苦瓜多肽冻干粉的制备方法，包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为3:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量6%的维生素C。 [0021] 本实施例中，原料预处理是指将苦瓜籽去壳后，挑选无腐烂的籽仁，将籽仁于烘箱中烘20min后，研磨，过40目筛，收集筛下物并进行灭菌处理。 [0022] 实施例3苦瓜多肽冻干粉的制备方法，包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为2:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量3%的维生素C。 [0023] 本实施例中，原料预处理是指将苦瓜籽去壳后，挑选无腐烂的籽仁，将籽仁于烘箱中烘40min后，研磨，过60目筛，收集筛下物并进行灭菌处理；脱脂是指向灭菌后的苦瓜籽粉末中加入重量为苦瓜粉重量10倍的丙酮，搅拌均匀后，静置30min，再过滤。 [0024] 实施例4苦瓜多肽冻干粉的制备方法，包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为3:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量3%的维生素C。 [0025] 本实施例中，原料预处理是指将苦瓜籽去壳后，挑选无腐烂的籽仁，将籽仁于烘箱中烘30min后，研磨，过50目筛，收集筛下物并进行灭菌处理；脱脂是指向灭菌后的苦瓜籽粉末中加入重量为苦瓜粉重量15倍的丙酮，搅拌均匀后，静置60min，再过滤。 [0026] 所述碱溶是指向脱脂后的苦瓜籽中加入苦瓜籽重量10倍的氨水，搅拌均匀后，静置5h，取上清液备用；所述氨水的体积浓度为12%。 [0027] 实施例5苦瓜多肽冻干粉的制备方法，包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为1.5:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量5%的维生素C。 [0028] 本实施例中，原料预处理是指将苦瓜籽去壳后，挑选无腐烂的籽仁，将籽仁于烘箱中烘25min后，研磨，过50目筛，收集筛下物并进行灭菌处理；脱脂是指向灭菌后的苦瓜籽粉末中加入重量为苦瓜粉重量12倍的丙酮，搅拌均匀后，静置40min，再过滤。 [0029] 本实施例的碱溶是指向脱脂后的苦瓜籽中加入苦瓜籽重量10倍的氨水，搅拌均匀后，静置8h，取上清液备用；所述氨水的体积浓度为15%。本实施例使用的酶的总量为碱溶后得到的上清液的重量的0.5%；酶解的温度为38℃， pH值为5.0。 [0030] 实施例6苦瓜多肽冻干粉的制备方法，包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为2:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量3%的维生素C。 [0031] 本实施例中，原料预处理是指将苦瓜籽去壳后，挑选无腐烂的籽仁，将籽仁于烘箱中烘35min后，研磨，过50目筛，收集筛下物并进行灭菌处理；脱脂是指向灭菌后的苦瓜籽粉末中加入重量为苦瓜粉重量13倍的丙酮，搅拌均匀后，静置45min，再过滤。 [0032] 本实施例的碱溶是指向脱脂后的苦瓜籽中加入苦瓜籽重量10倍的氨水，搅拌均匀后，静置6h，取上清液备用；所述氨水的体积浓度为12%。 [0033] 本实施例使用的酶的总量为碱溶后得到的上清液的重量的2%；酶解的温度为45℃， pH值为6.0；酸沉是指向酶解后的溶液中加入与溶液体积比为1:100的浓硫酸，搅拌后静置10min；所述浓硫酸的体积浓度为98%。 [0034] 实施例7苦瓜多肽冻干粉的制备方法，包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为3:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量4%的维生素C。 [0035] 本实施例中，原料预处理是指将苦瓜籽去壳后，挑选无腐烂的籽仁，将籽仁于烘箱中烘28min后，研磨，过60目筛，收集筛下物并进行灭菌处理；脱脂是指向灭菌后的苦瓜籽粉末中加入重量为苦瓜粉重量14倍的丙酮，搅拌均匀后，静置45min，再过滤。 [0036] 本实施例的碱溶是指向脱脂后的苦瓜籽中加入苦瓜籽重量10倍的氨水，搅拌均匀后，静置6h，取上清液备用；所述氨水的体积浓度为12%。 [0037] 本实施例使用的酶的总量为碱溶后得到的上清液的重量的3%；酶解的温度为42℃， pH值为6.0；酸沉是指向酶解后的溶液中加入与溶液体积比为1:100的浓硫酸，搅拌后静置20min；所述浓硫酸的体积浓度为98.5%；离心的转速为10000转/分，离心时间为10min，取沉淀。 [0038] 实施例8苦瓜多肽冻干粉的制备方法，包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为3:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量6%的维生素C。 [0039] 本实施例中，原料预处理是指将苦瓜籽去壳后，挑选无腐烂的籽仁，将籽仁于烘箱中烘40min后，研磨，过60目筛，收集筛下物并进行灭菌处理；脱脂是指向灭菌后的苦瓜籽粉末中加入重量为苦瓜粉重量14倍的丙酮，搅拌均匀后，静置60min，再过滤。 [0040] 本实施例的碱溶是指向脱脂后的苦瓜籽中加入苦瓜籽重量10倍的氨水，搅拌均匀后，静置6h，取上清液备用；所述氨水的体积浓度为15%。 [0041] 本实施例的酶解的温度为40℃， pH值为5.0；酸沉是指向酶解后的溶液中加入与溶液体积比为1:100的浓硫酸，搅拌后静置20min；所述浓硫酸的体积浓度为98%以上；离心的转速为11000转/分，离心时间为20min，取沉淀。 [0042] 本实施例的洗涤是将酸沉得到的沉淀加丙酮进行洗涤4次。 [0043] 实施例9苦瓜多肽冻干粉的制备方法，包括原料预处理、脱脂、碱溶、酶解、酸沉、离心、洗涤、冷冻干燥步骤，所述酶解使用的酶为质量比为3:1的木瓜蛋白酶和风味蛋白酶；所述酶解步骤还加入酶总量6%的维生素C。 [0044] 本实施例中，原料预处理是指将苦瓜籽去壳后，挑选无腐烂的籽仁，将籽仁于烘箱中烘40min后，研磨，过60目筛，收集筛下物并进行灭菌处理，灭菌方式为巴氏灭菌；脱脂是指向灭菌后的苦瓜籽粉末中加入重量为苦瓜粉重量14倍的丙酮，搅拌均匀后，静置40min，再过滤。 [0045] 本实施例的碱溶是指向脱脂后的苦瓜籽中加入苦瓜籽重量10倍的氨水，搅拌均匀后，静置6h，取上清液备用；所述氨水的体积浓度为15%。 [0046] 本实施例使用的酶的总量为碱溶后得到的上清液的重量的2.5%；酶解的温度为40℃， pH值为5.0；酸沉是指向酶解后的溶液中加入与溶液体积比为1:100的浓硫酸，搅拌后静置15min；所述浓硫酸的体积浓度为98%以上；离心的转速为10000转/分，离心时间为12min，取沉淀。 |
||||||
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈