用于生物芯片的印刷方法及其应用 |
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申请号 | CN201510902943.8 | 申请日 | 2015-12-09 | 公开(公告)号 | CN105463586A | 公开(公告)日 | 2016-04-06 |
申请人 | 杨华卫; | 发明人 | 杨华卫; 曾冀; | ||||
摘要 | 本 发明 涉及一种用于 生物 芯片的印刷方法及其应用。该印刷方法包括以图形的形式将待测样品和标志物或者将待测样品、标志物和对待测样品具有质控作用的生物分子固定到生物芯片的基片上,由此制得生物芯片。采用该方法印刷生物芯片,不会抑制任何芯片反应,芯片反应会非常稳定。该生物印刷方法简化了芯片 制造过程 ,且使得芯片反应结果的判读变得更为便捷,同时增加了芯片的检测通量,使得芯片上探针的 定位 更加精准。 | ||||||
权利要求 | 1.一种用于生物芯片的印刷方法,其包括以图形的形式将待固定物固定到生物芯片的基片上,其中,所述待固定物包括待测样品和标志物;所述标志物为生物分子。 |
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说明书全文 | 用于生物芯片的印刷方法及其应用技术领域[0001] 本发明属于生物芯片制备和应用技术领域,涉及一种用于生物芯片的印刷方法及其应用。 背景技术[0002] 生物芯片技术是一种用于多指标检测的高通量分子生物学检测技术。生物芯片包括蛋白芯片和基因芯片等。芯片的基质包括玻璃、瓷片、尼龙膜和硝酸纤维素膜等。其中基于玻璃基质的芯片,一般是通过荧光标记来获得芯片检测信号;而基于膜基质的芯片,一般是通过酶促显色的方式,通过肉眼或者机器来判读芯片上不同位置的显色点,从而获得芯片检测结果。 [0003] 芯片又称作微阵列,构成阵列的每一个探针都检测不同的指标。为了达到多指标检测的目的,需要对整个芯片进行区域划分,以便制备芯片时,每个区域用于固定特性的探针;以及在判读芯片结果时可以根据不同的位置读出对应的指标信息。其中对于膜基质的芯片,为了让操作者能够清楚有效地区分判读不同探针区域的显色点,目前市场上的芯片产品都是采用油墨印刷的方式,在不同探针之间印出线条,来对不同探针区域进行间隔,以方便肉眼判读。 [0004] 油墨印刷存在的问题是:油墨本身含有多种复杂的物理和化学物质,对蛋白芯片所使用的蛋白及酶,对基因芯片所使用的显色酶都可能会有抑制作用;而且在印刷膜的时候,印刷设备产生的高温可能对膜材质产生影响,从而影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。 [0005] 因此,目前需要研究开发一种用于生物芯片的生物印刷方法,采用该方法印刷生物芯片,不会对蛋白芯片所使用的蛋白及酶,以及对基因芯片所使用的显色酶产生抑制作用,也不会影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。 发明内容[0006] 本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足,提供了一种用于生物芯片的印刷方法。采用该方法印刷生物芯片,不会对蛋白芯片所使用的蛋白及酶,以及对基因芯片所使用的显色酶产生抑制作用,也不会影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。 [0007] 为此,本发明提供了一种用于生物芯片的印刷方法,其包括以图形的形式将待固定物固定到生物芯片的基片上,其中,所述待固定物包括待测样品和标志物;所述标志物为生物分子。 [0008] 根据本发明,所述待固定物还包括对待测样品具有质控作用的生物分子;优选对待测样品具有阴性质控作用的生物分子。 [0009] 根据本发明,所述图形包括数字、字母、汉字、标志性符号、标志性线条和标志性图案中的一种或几种。 [0010] 在本发明的一些优选实施例中,所述标志物的图形在生物芯片的基片上形成分割区域。 [0011] 本发明中,在同一芯片上,所述标志物包括一种或几种生物分子。 [0012] 在本发明的一些优选实施例中,所述标志物为对待测样品具有阳性质控作用的生物分子。 [0013] 根据本发明,所述生物分子包括核酸、蛋白质、糖类、酶及其衍生物中的一种或几种。 [0015] 在本发明的一些优选实施例中,所述生物分子为核酸和/或抗体。 [0016] 根据本发明的一些实施方式,以涂抹、喷射、印刷的方式将待固定物溶液涂覆到生物芯片的基片上,干燥后即将待固定物固定到生物芯片的基片上;所述待固定物溶液包括待测样品溶液和标志物溶液。 [0017] 在本发明的一些优选实施例中,采用点样仪将固定物溶液印制到生物芯片的基片上。 [0018] 根据本发明的一些优选实施方式,所述待固定物溶液还包括对待测样品具有质控作用的生物分子溶液;优选对待测样品具有阴性质控作用的生物分子溶液。 [0019] 本发明中,优选所述标志物溶液的浓度为0.2-10μM;更为优选地,所述标志物溶液的浓度为0.2-4μM。 [0020] 本发明还提供了上述生物印刷方法在基因芯片上的应用。 [0023] 图1是实施例1中制备的生物印刷型HPV基因芯片上探针排布图。 [0024] 图2是采用实施例1中制备的生物印刷型HPV基因芯片检测HPV16样本前对芯片表面观察结果图。 [0025] 图3是采用实施例1中制备的生物印刷型HPV基因芯片检测HPV16样本后芯片表面所显示的检测结果图。 [0026] 图4是对比例1中制备的常规HPV基因芯片上探针排布图。 [0027] 图5是采用对比例1中制备的常规HPV基因芯片检测HPV16样本前对芯片表面观察结果图。 [0028] 图6是采用对比例1中制备的常规HPV基因芯片检测HPV16样本后芯片表面所显示的检测结果图。 [0029] 图7是实施例2中制备的生物印刷型蛋白芯片上探针排布图。 [0030] 图8是采用实施例2中制备的生物印刷型蛋白芯片检测TOX抗体样本前对芯片表面观察结果图。 [0031] 图9是采用实施例2中制备的生物印刷型蛋白芯片检测TOX抗体样本后芯片表面所显示的检测结果图。 [0032] 图10是对比例2中制备的常规蛋白芯片上探针排布图。 [0033] 图11是采用对比例2中制备的常规蛋白芯片检测TOX抗体样本前对芯片表面观察结果图。 [0034] 图12是采用对比例2中制备的常规蛋白芯片检测TOX抗体样本后芯片表面所显示的检测结果图。 具体实施方式[0035] 为使本发明更加容易理解,下面将结合实施例和附图来详细说明本发明,这些实施例仅起说明性作用,并不局限于本发明的应用范围,下列实施例中未提及的具体实验方法,通常按照常规实验方法进行。 [0036] 如前所述,油墨印刷存在的问题是:油墨本身含有多种复杂的物理和化学物质,对蛋白芯片所使用的蛋白及酶,以及对基因芯片所使用的显色酶都可能会有抑制作用;而且在印刷膜的时候,印刷设备产生的高温可能对膜材质产生影响,从而影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。 [0037] 本发明的发明人研究发现,以生物分子代替油墨作为标志物固定到生物芯片的基片上,既可以起到标记或指示作用,又不会对蛋白芯片所使用的蛋白及酶,以及对基因芯片所使用的显色酶产生抑制作用,也不会影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。 [0038] 本发明所涉及的用于生物芯片的印刷方法包括以图形的形式将待固定物固定到生物芯片的基片上,其中,所述待固定物包括待测样品和标志物。所述标志物为带有标记和/或具有指示作用的生物分子,其能够在光照作用下或显色剂的作用下或显色剂和显色酶的作用下显色。 [0040] 在本发明的一些优选实施例中,所述待固定物还包括对待测样品具有质控作用的生物分子;优选对待测样品具有阴性质控作用的生物分子。 [0041] 实际上,本发明所涉及的用于生物芯片的印刷方法,可以理解为包括以图形的形式将待测样品、标志物以及任选的对待测样品具有质控作用的生物分子固定到生物芯片的基片上,由此制得生物芯片。 [0042] 本发明中所述用语“任选的”是指含有或不含有,或者可以加入也可以不加入。 [0043] 本发明中对所述生物分子并没有特别的限制,理论上讲,只要能固定或印刷到芯片上的生物分子都可以使用,所述生物分子主要包括已知的或未知的核酸、蛋白质、糖类和酶以及核酸、蛋白质、糖类和酶的衍生物中的一种或几种。其中,所述蛋白质,例如,优选为已知的或未知的抗体、抗原和抗体结合蛋白中的一种或几种。在本发明的一些优选实施例中,所述生物分子例如可以为已知的或未知的核酸和/或抗体。 [0044] 根据本发明的一些具体实施例,所述标志物,例如可以为已知的或未知的核酸和/或抗体。 [0045] 本发明的印刷方法为一种生物印刷方法,其通过例如涂抹、喷射和印刷等方法中的至少一种待固定物溶液涂覆到生物芯片(包括膜芯片或其他基质的芯片)的基片上,干燥后即将待固定物固定到生物芯片的基片上。本发明中,所述待固定物溶液,例如包括待测样品溶液和标志物溶液。 [0046] 在本发明的一些优选实施例中,采用点样仪将固定物溶液印制到生物芯片的基片上。 [0047] 在本发明的一些优选实施例中,所述待固定物溶液还包括对待测样品具有质控作用的生物分子溶液;优选对待测样品具有阴性质控作用的生物分子溶液。 [0048] 在本发明的一些实施例中,所述图形包括数字、字母、汉字、标志性符号、标志性线条和标志性图案中的一种或几种。 [0049] 本发明中,所述标志物为带有标记和/或具有指示作用的生物分子,其在芯片检测反应过程中通过分子相互作用和显色反应后,能够形成包括数字、字母、汉字、标志性符号、标志性线条和标志性图案中的至少一种的图形。这些图形,例如标志性线条可以在生物芯片的基片上形成分割区域;优选形成有序的分割区域;因此这些标志性线条也可以称为分割线。 [0050] 本发明中,在同一芯片上,所述标志物包括一种或几种生物分子。这可以理解为,在同一芯片上,既可以采用同一种生物分子作为标记物,也可以采用若干不同种类的生物分子作为标记物。例如,所述标志物分子可以为已知的任何生物分子和/或对待测样品具有阳性质控作用的生物分子。优选所述标志物为待测样品的具有阳性质控作用的生物分子。 [0051] 本发明中对显色剂没有特别的限制,理论上讲,只要是能够与生物分子发生相互作用使其显色的物质都可用作显色剂,所述显色剂包括生物分子或其他非生物分子的化学物质。优选显色剂为生物分子。 [0052] 本发明中所述光照包括荧光照射和/或紫外光照射。 [0053] 本发明中所述用语“所述标志物能够在光照作用下或显色剂的作用下或显色剂和显色酶的作用下显色”是指固定在生物芯片的基质上的作为标志物的生物分子,有的可以通过与后续的未知的或已知的显色剂分子相互作用,例如生物分子相互作用显色;有的可以在显色酶的作用下,通过与后续的未知的或已知的显色剂分子相互作用显色;有的则因本身带有显色基团而可以在荧光和/或紫外光照射作用下彼此之间发生相互作用显色。 [0054] 本发明采用生物印刷方法,以图形的形式将待固定物,例如待测样品、作为标志物的生物分子,或待测样品、作为标志物的生物分子和对待测样品具有质控作用的生物分子同时固定到生物芯片的基片上,制得生物印刷型生物芯片。 [0055] 例如,在本发明的一些实施例中,可以根据本发明的生物印刷方法,以图形的形式将待测样品和作为标志物的生物分子同时固定到生物芯片的基片上,制得生物印刷型生物芯片。 [0056] 再例如,在本发明的一些实施例中,可以根据本发明的生物印刷方法,以图形的形式将待测样品、作为标志物的生物分子和对待测样品具有质控作用(阳性和阴性)的生物分子同时固定到生物芯片的基片上,制得生物印刷型生物芯片。 [0057] 又例如,在本发明的一些优选实施例中,可以根据本发明的生物印刷方法,以图形的形式将待测样品、作为标志物的对待测样品具有阳性质控作用的生物分子和对待测样品具有阴性质控作用的生物分子同时固定到生物芯片的基片上,制得生物印刷型生物芯片。 [0058] 本发明中,所述标志物溶液由作为标志物的生物分子溶于其对应的缓冲溶液中形成,例如,核酸分子溶于TE缓冲液或GT001溶液;蛋白溶于PBS磷酸缓冲液。本发明中,所述标志物溶液的浓度为0.2-10μM,优选所述标志物溶液的浓度为0.2-4μM,进一步优选所述标志物溶液的浓度为2μM。本发明的发明人研究发现,标志物采用此浓度进行固定既可以明显起到标记的作用又不会对待测样品和检测过程造成任何不利的影响。 [0059] 本发明中,所述待测样品溶液由待测样品溶于其对应的缓冲溶液中形成,例如,核酸分子溶于TE缓冲液或GT001溶液;蛋白溶于PBS磷酸缓冲液。本发明中,所述待测样品溶液的浓度≥0.01pg/μL。优选所述待测样品溶液的浓度≥0.1pg/μL。 [0060] 本发明中,所述对待测样品具有质控作用的生物分子溶液由对待测样品具有质控作用的生物分子溶于其对应的缓冲溶液中形成,例如,核酸分子溶于TE缓冲液或GT001溶液;蛋白溶于PBS磷酸缓冲液。本发明中,所述对待测样品具有质控作用的生物分子溶液的浓度为0.2-10μM。优选所述对待测样品具有质控作用的生物分子溶液的浓度为0.2-4μM。进一步优选所述对待测样品具有质控作用的生物分子溶液的浓度为2μM。 [0062] 本发明中所述用语“生物印刷”是指(实验人员借助仪器或手工)通过涂抹、喷射、印刷等方法将某种生物大分子的溶液涂覆到生物芯片(包括膜芯片或其他基质的芯片)的基片上,这些生物大分子通过电荷作用或分子结构的改变与生物芯片(包括膜芯片或其他基质的芯片)的基片上的膜相互作用,从而被到生物芯片(包括膜芯片或其他基质的芯片)的基片上,并在芯片检测反应过程中在光照作用下或显色剂的作用下或显色剂和显色酶的作用下显色,形成分割的线条或者其它标记图案的方法。 [0063] 在本发明的一个具体实施方式中,采用对待测样品的具有阳性质控作用的生物分子(一种生物大分子)作标志物,利用点样仪将该标志物溶液印制到生物芯片的基片上,从而在生物芯片的基片上以线条的方式将该标志物固定为不同分割区域。这样在一个芯片反应过程中,这些用于分割不同区域的标志物线条可以同时起到二个作用:分割不同探针区域,有利于判读;起到阳性质控作用。如果某次芯片反应失败,那么芯片的阳性质控就会显示阴性,而用于分割区域的标志物线条也将不复存在,芯片呈现的显色外观就与没有反应的芯片一模一样,这样极大地方便了操作者对芯片结果的判读。 [0064] 本发明还涉及上述生物印刷方法在基因芯片上的应用,其包括以下步骤: [0065] 1.采用本发明的印刷方法制备生物印刷型基因芯片 [0066] (1)制备标志物溶液及探针溶液 [0067] 采用阳性对照探针为标志物,分别制备阳性对照探针溶液、阴性对照探针溶液以及待测样品的特异性生物探针溶液。 [0068] (2)使用上述探针溶液制备生物印刷型基因芯片 [0069] 在基因芯片的基片上将阳性对照探针(标志物)溶液印制成分割不同区域的线条;同时,以图形的形式在同一基因芯片的基片上印制阴性对照探针和待测样品的特异性生物探针,使这些探针所印制的图形存在于阳性对照探针(标志物)所划分的区域内,制成生物印刷型基因芯片。 [0070] 2.使用该生物印刷型基因芯片检测待测样本。 [0071] 检测前观察基因芯片表面的状况,应为一光板。 [0072] 检测后观察基因芯片表面的状况: [0073] (1)如果芯片反应后分割线正常出现,说明芯片的阳性质控正常,就可以接着往下判读具体的各个探针信号;呈阳性的样品探针与阳性对照探针呈现相同颜色的阳性反应。 [0074] (2)如果反应后芯片分割线没有出现,芯片仍旧光板一个,那么说明芯片检测过程异常(即检测失败),就不必往下继续判读具体的探针信号。 [0075] 本发明还涉及上述生物印刷方法在蛋白芯片上的应用,其包括以下步骤: [0076] 1.采用本发明的印刷方法制备生物印刷型蛋白芯片 [0077] (1)制备标志物溶液及探针溶液 [0078] 采用阳性对照探针为标志物,分别制备阳性对照探针溶液、阴性对照探针溶液以及待测样品的特异性生物探针溶液。 [0079] (2)使用上述探针溶液制备生物印刷型蛋白芯片 [0080] 在蛋白芯片的基片上将阳性对照探针(标志物)溶液印制成分割不同区域的线条;同时,以图形的形式在同一蛋白芯片的基片上印制阴性对照探针和待测样品的特异性生物探针,使这些探针溶液所印制的图形存在于阳性对照探针所划分的区域内,制成生物印刷型蛋白芯片。 [0081] 2.使用该生物印刷型蛋白芯片检测待测样本。 [0082] 检测前观察蛋白芯片表面的状况,应为一光板。 [0083] 检测后观察蛋白芯片表面的状况: [0084] (1)如果芯片反应后分割线正常出现,说明芯片的阳性质控正常,就可以接着往下判读具体的各个探针信号;呈阳性的样品探针与阳性对照探针呈现相同颜色的阳性反应。 [0085] (2)如果反应后芯片分割线没有出现,芯片仍旧光板一个,那么说明芯片检测过程异常(即检测失败),就不必往下继续判读具体的探针信号。 [0086] 本发明所提供的生物芯片的生物印刷方法具有以下优点: [0087] (1)不像物理印刷那样要用到的含有多种化学组分的油墨会抑制后续的芯片反应,而是直接采用芯片反应体系本来就含有的生物大分子来印刷芯片分割线,因此不会抑制任何芯片反应。芯片反应会非常稳定。 [0088] (2)简化了芯片制造过程 [0089] 本发明的生物印刷操作步骤可以和常规芯片探针的点样同时进行,可以通过同一台点样仪进行。本来,印刷分割线的探针溶液和常规芯片探针溶液就是同一类物质,区别仅仅是前者不点成圆点状,而点成线状(即分割线)。这就显著简化了芯片的生产步骤。 [0090] (3)使得芯片反应结果的判读变得更为便捷 [0091] 如果芯片反应后分割线正常出现,说明芯片的阳性质控正常,就可以接着往下判读具体的各个探针信号;如果反应后芯片分割线没有出现,芯片仍旧光板一个,那么说明芯片检测过程异常(即检测失败),就不必往下继续判读具体的探针信号。 [0092] (4)增加了芯片的检测通量 [0093] 在印刷芯片上,由于阳性质控探针转移到了分割线位置,那么原来用于固定阳性质控探针的区域就空出来,可以来点制常规的检测探针,对于芯片增加了检测指标。 [0094] (5)使得芯片上探针的定位更加精准 [0095] 由于印刷探针与检测探针是同时并由同一个点样仪进行的,所以芯片上所有探针的形状和位置都是确定的:包括检测探针与检测探针之间,检测探针与分割线条(也即印刷探针或阳性质控探针)之间。 [0096] 根据本发明的用于生物芯片的印刷方法,以图形的形式将待测样品和标志物或者将待测样品、标志物和对待测样品具有质控作用的生物分子固定到生物芯片的基片上,以此制备生物芯片。采用该方法印刷生物芯片,不会对蛋白芯片所使用的蛋白及酶,以及对基因芯片所使用的显色酶产生抑制作用,也不会影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。采用该方法印刷生物芯片,不会抑制任何芯片反应,芯片反应会非常稳定。该生物印刷方法简化了芯片制造过程,且使得芯片反应结果的判读变得更为便捷,同时增加了芯片的检测通量,使得芯片上探针的定位更加精准。 [0097] 实施例 [0098] 实施例1:采用生物印刷方法制备生物印刷型HPV基因芯片,用于检测HPV16样本[0099] 1.采用本发明的生物印刷方法制备生物印刷型HPV基因芯片 [0100] (1)制备标志物溶液及探针溶液 [0101] 分别制备hpv6探针(阳性对照探针,标志物)、阴性探针、HPV16探针、hpv18探针、hpv31探针、hpv33探针、hpv35探针和hpv39探针溶液,探针溶液的浓度均为2μM。 [0102] (2)使用上述探针溶液制备生物印刷型HPV基因芯片 [0103] 以硝酸纤维素膜为芯片载体,使用博奥PresonalAssayer16点样仪设置程序,在基因芯片的基片的硝酸纤维素膜上将hpv6探针(阳性对照探针,标志物)溶液印制成分割不同区域的线条;同时,以圆点的形式在同一基因芯片的基片上印制阴性对照探针和待测样品的特异性生物探针,包括HPV16探针、hpv18探针、hpv31探针、hpv33探针、hpv35探针和hpv39探针,单个原点的点样体积为0.4μL;使这些探针所印制的圆点存在于阳性对照探针所划分的区域内,制得生物印刷型HPV基因芯片,该基因芯片上探针分布如图1所示。 [0104] 2.使用该生物印刷型HPV基因芯片检测HPV16样本。 [0105] 检测前对芯片表面观察的状况如图2所示。从图2可以看出,检测前对芯片表面观察的状况为一光板。 [0106] 使用HPV分型检测试剂盒对HPV16样本进行杂交检测后芯片表面观察的状况如图3所示。从图3可以看出,检测结果显示:hpv16为阳性;阳性对照探针(同时也是紫色的分割线)呈阳性,其它为阴性。 [0107] 对比例1:使用常规HPV基因芯片(芯片上的分割线为常规油墨印刷而成)检测HPV16样本 [0108] 1.利用常规油墨印刷成的基因芯片制作常规HPV基因芯片 [0109] (1)制备探针溶液 [0110] 分别制备,hpv6探针(阳性对照探针)、阴性探针、HPV16探针、hpv18探针、hpv31探针、hpv33探针、hpv35探针和hpv39探针溶液,探针溶液的浓度均为2μM。 [0111] (2)使用上述探针溶液制作常规HPV基因芯片 [0112] 以硝酸纤维素膜为芯片载体,使用常规油墨印刷(印刷仪型号:LQ-730K,厂商:爱普生)的方法,先在膜芯片上印制油墨分割线(标志线)将膜芯片划分成不同的区域,再分别将hpv6探针(阳性对照探针)、阴性对照探针和待测样品的特异性生物探针,包括HPV16探针、hpv18探针、hpv31探针、hpv33探针、hpv35探针和hpv39探针均以原点的形式印制在上述利用常规油墨印刷的由油墨划分的基因芯片上的不同区域内,制成常规HPV基因芯片,常规HPV基因芯片上探针排布如图4所示,单个探针的印刷体积和实施例1中完全相同。 [0113] 2.使用常规HPV基因芯片检测HPV16样本。 [0114] 检测前对芯片表面观察的状况如图5所示。 [0115] 使用HPV分析检测试剂盒检测HPV16样本后芯片表面观察的状况如图6所示。从图6可以看出,检测结果显示:hpv16阳性,阳性对照探针圆点也呈阳性,其它阴性。 [0116] 实施例2:采用生物印刷方法制备生物印刷型蛋白芯片,用于检测TOX抗体样本[0117] 1.采用生物印刷方法制备生物印刷型蛋白芯片 [0118] (1)制备标志物溶液及探针溶液 [0119] 分别制备阳性对照探针(标志物)、阴性对照探针、纯化抗原TOX探针、RV探针、CMV探针和HSV-II探针溶液,探针溶液的浓度均为2μM。 [0120] (2)使用上述探针溶液制备生物印刷型蛋白芯片 [0121] 在蛋白芯片的基片上将阳性对照探针印制成分割不同区域的线条;同时,以圆点的形式在同一基因芯片的基片上印制阴性对照探针和待测样品的特异性生物探针,包括纯化抗原TOX探针、RV探针、CMV探针和HSV-II探针;使这些探针所印制的圆点存在于阳性对照探针(标志物)所划分的区域内,制成生物印刷型蛋白芯片。该生物印刷型蛋白芯片上探针排布如图7所示。 [0122] 2.使用该生物印刷型蛋白芯片检测TOX抗体样本。 [0123] 检测前对芯片表面观察的状况如图8所示。从图8可以看出,检测前对芯片表面观察的状况为一光板。 [0124] 使用TOX抗体蛋白芯片检测试剂盒检测后芯片表面观察的状况如图9所示。从图9可以看出,检测结果显示:TOX抗体阳性,阳性对照探针(同时也是蓝紫色的分割线)呈阳性,其它阴性。 [0125] 对比例2:使用常规蛋白芯片(芯片上的分割线为常规油墨印刷而成)检测TOX抗体样本 [0126] 1.利用常规油墨印刷成的蛋白芯片制作常规蛋白芯片 [0127] (1)制备探针溶液 [0128] 分别制备阳性对照探针、阴性对照探针、纯化抗原TOX探针、RV探针、CMV探针和HSV-II探针溶液。 [0129] (2)使用上述探针溶液制作常规蛋白芯片 [0130] 使用常规油墨印刷(印刷仪型号:LQ-730K,厂商:爱普生)的方法,先在芯片的基片上印制油墨分割线(标志线)将芯片的基片上划分成不同的区域,再分别将阳性对照探针、阴性对照探针、纯化抗原TOX探针、RV探针、CMV探针和HSV-II探针以原点的形式印制在上述利用常规油墨印刷成的蛋白芯片上的由油墨划分的不同区域内,制成常规蛋白芯片,常规蛋白芯片上探针排布如图10所示。 [0131] 2.使用常规蛋白芯片检测TOX抗体样本。 [0132] 检测前对芯片表面观察的状况如图11所示。 [0133] 使用TOX抗体蛋白芯片检测试剂盒检测后芯片表面观察的状况如图12所示。从图12可以看出,检测结果显示:TOX抗体阳性,阳性对照探针圆点也呈阳性,其它阴性。 [0134] 从上述实施例可以看出,采用本发明方法印刷生物芯片,不会抑制任何芯片反应,也不会影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能,芯片反应非常稳定。 |