[0001] 相关申请案

[0002] 本专利申请要求提交于2011年2月14日的美国临时申请序列No.61/442,781的优先权。该临时申请的完整公开内容据此以引用的方式并入本文。

[0003] 发明背景

[0004] 纤维素和木质纤维素物质可大量制备、加工并且用于多种应用。通常此类物质使用一次，然后作为废弃物丢弃，或只是作为废弃物质，如蔗渣、锯屑和秸秆。在一些情况下，纤维素和木质纤维素物质通过种植和收割植物获得。发明概要

[0005] 一般来讲，本发明涉及使用和/或加工原料物质，如纤维素和/或木质纤维素原料物质，包括相对于其野生型修饰的植物，如经基因修饰的植物，以及中间物和由其制备的产物。本文所述的多种方法提供了可更容易被多种微生物利用，以制备可用中间物和产物，如能量、燃料、食物或材料的物质。

[0006] 在一个方面，本发明的特征是制备产物的方法，该方法包括物理处理至少部分从相对于植物的野生型品种修饰的植物，如经基因修饰的植物获得的纤维素、木质纤维素和/或淀粉原料。在一些实施例中，可使用整个植物。在某些实施例中，利用植物的一部分。

[0007] 一些具体实施包括下列一个或多个特征。原料可包括具有重组DNA和/或重组基因的植物。修饰植物可表达一种或多种重组物质，例如蛋白质、聚合物和/或大分子。该方法还可包括从原料物质例如药物、营养物、蛋白质、脂肪、维生素、油、纤维、矿物、糖、碳水化合物和醇获得。原料可包括作物残留物，如玉米棒和/或玉米秸秆、小麦秸秆，或原料可以是经基因修饰的玉米、小麦或大豆植物。该方法还可包括用生物体和/或酶处理原料，在一些情况下制备糖，如溶液或悬浮液的形式。任选地，糖可以是发酵的。物理处理可包括原料的辐照。在一些具体实施中，辐照的原料可用作可食用物质，如作为动物饲料。如果需要，酶例如纤维素酶可加入可食用物质，例如以便增加营养价值释放。

[0008] 辐照在一些情况下可使用一种或多种电子束装置进行。在一些情况下，辐照包括给原料施加约5兆拉德至约50兆拉德的辐射总剂量。在进一步加工和/或使用前储存之前，辐照可对物质杀菌。在优选的具体实施中，辐照减少了原料的顽拗性。

[0009] 植物可以例如通过包括如下的修饰来修饰：增强对昆虫、真菌疾病和其他害虫和致病原的抗性；增加对除草剂的耐受性；增加耐旱性；延伸温度范围；增强对贫瘠土壤的耐受性；增强稳定性或储藏期限；增加产率；增加果实大小；增强茎秆；增强抗破损性；减少作物成熟的时间；统一发芽时间；提高或改变淀粉产量；增加营养物质产量，例如增加类固醇、甾醇、激素、脂肪酸、甘油、聚羟基链烷酸酯、氨基酸、维生素和/或蛋白质产量；改变木质素含量；增强纤维素、半纤维素和/或木质素降解；包括表型标记物以允许定性检测；减少顽拗性和增强植酸代谢。植物可以是例如经基因修饰的苜蓿、马铃薯、甜菜、玉米、小麦、棉花、油菜籽、稻谷或甘蔗植物。原料可包括来自修饰植物的作物残留物，例如原料可包括玉米棒和/或玉米秸秆。植物可以是例如经基因修饰的玉米或大豆植物，或任何多种栽培的经基因修饰的植物。

[0010] 在另一个方面，本发明的特征是包含糖的产物，所述糖来源于至少部分从相对于植物的野生型品种修饰的植物，例如经基因修饰的植物获得的原料。

[0011] 在另外的方面，本发明的特征是包含辐照的纤维素或木质纤维素原料的产物，所述原料至少部分从相对于植物的野生型品种修饰的植物获得。产物还可包括微生物和/或酶，并且在一些情况下包括液体介质。

[0012] 不受任何理论的束缚，据信修饰植物的使用可优于非修饰的野生型。例如，增强对昆虫、真菌疾病和其他害虫和致病原的抗性；增加对除草剂的耐受性；增加耐旱性；延伸温度范围；增强对贫瘠土壤的耐受性；增加果实大小；增强茎秆；增强抗破损性；减少作物成熟的时间；统一发芽时间；可提供更高的产率和更多样化的原料来源，它们二者均可降低生物质原料的成本。在另一个例子中，增强稳定性或储藏期限对生物质库存质量可为有利的。在另一个例子中，增加营养物质产量，例如增加类固醇、甾醇、激素、脂肪酸、甘油、聚羟基链烷酸酯、氨基酸、维生素和/或蛋白质产量可提供具有高营养质量的产物或中间物，所述高营养质量可改善工艺例如发酵，或产物例如动物饲料。此外，例如，提高或改变淀粉产量，改变木质素含量；和/或增强纤维素、半纤维素和/或木质素降解可减少原料的顽拗性，使其易于加工。

[0013] 如本文所用，术语“植物”是指植物界的任何多种光合作用、真核、多细胞生物，包括（但不限于）农作物、树、草和藻类。

[0014] 如本文所用，短语“结构修饰”原料意指以任何方式改变原料的分子结构，包括化学键合排列、晶体结构或原料的构象。所述改变可以是例如晶体结构完整性的改变，如通过结构内的微观断裂，所述微观断裂不能由物质结晶度的衍射测量反映。此类物质结构完整性的改变可通过测量不同水平结构修饰处理下产物的产率来间接测量。除此之外或作为另外一种选择，分子结构的改变可包括物质超分子结构的改变、物质的氧化、平均分子量的变化、平均结晶度的变化、表面积的变化、聚合度的变化、孔隙度的变化、支化度的变化、接枝到其他物质上、晶畴大小的变化或总体域大小的变化。

[0015] 除非另外定义，本文所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员的通常理解相同的意义。虽然与本文所述的那些类似或等同的方法和材料可用于本发明的实施和测试，但合适的方法和材料在下文也有所描述。所有出版物、专利申请、专利和本文所述的其他参考文献全文以引用方式并入。材料、方法和例子仅出于示例性目的，不旨在进行限制。

[0016] 从以下具体实施方式和所附权利要求中，其他特征和优点将显而易见。附图说明

[0017] 图1是示出原料转化为产物和副产物的方框图。

[0018] 图2是示出原料的处理以及将处理的原料用于发酵工艺的方框图。

[0019] 从相对于野生型品种修饰，如通过基因修饰或其他类型修饰的植物获得的原料可加工以制备可用中间物和产物，例如本文所述的那些中间物和产物。本文所述的系统和工艺可用于原料物质，如易得但难以通过工艺例如发酵加工的纤维素和/或木质纤维素物质。本文所述的多种工艺可有效地降低原料的顽拗性水平，使其易于加工，例如通过生物加工（如，使用本文所述的任何微生物，例如同型产乙酸菌或异型产乙酸菌，和/或本文所述的任何酶）、热加工（如，气化或热解）或化学方法（如，酸水解或氧化）。原料可使用一种或多种本文所述的任何方法，例如机械处理、化学处理、辐射、声处理、氧化、热解或蒸汽爆破来处理或加工。各种处理系统和方法可结合两种、三种或甚至四种或更多种这些技术或本文或别处所述的其他技术使用。

[0020] 除减少顽拗性之外，上文概述的方法还可对木质纤维素或纤维素原料杀菌。这可为有利的，因为原料可感染例如细菌、酵母、昆虫和/或真菌，它们可对其他工艺具有有害影响和/或过早降解物质。

[0021] 原料物质，例如纤维素和木质纤维素原料物质，可从相对于野生型品种修饰的植物获得。此类修饰可以例如通过本文引用的任何专利或专利申请描述的任何方法进行。在另一个例子中，植物可通过选择和繁育的迭代步骤修饰，以获得植物中的所需性状。此外，植物的遗传物质可相对于野生型品种移除、修饰、沉默和/或添加。例如，经基因修饰的植物可通过重组DNA方法制备，其中遗传修饰包括引入或修饰来自亲本品种的特定基因，或例如通过使用转基因繁育，其中来自不同植物和/或细菌物种的一个或多个特定基因引入植物。产生基因变异的另一种方法通过突变繁育进行，其中新等位基因由内源基因人工生成。人工基因可通过多种方式生成，包括使用例如化学诱变剂（如，使用烷化剂、环氧化物、生物碱、过氧化物、甲醛）、辐照（如，X-射线、γ射线、中子、β粒子、α粒子、质子、氘核、UV辐射）和温度骤变或其他外部胁迫以及后续的选择技术来处理植物或种子。提供修饰基因的其他方法通过易错PCR和DNA改组，然后将所需的修饰DNA插入所需的植物或种子进行。将所需基因变异引入种子或植物的方法包括例如使用细菌载体、基因枪、磷酸钙沉淀、电穿孔、基因剪接、基因沉默、脂质转染、显微注射和病毒载体。

[0022] 原料可来源于植物，包括（但不限于）芥花籽、海甘蓝、椰子、玉米、芥菜、蓖麻、芝麻、棉籽、亚麻籽、大豆、拟南芥菜豆、花生、苜蓿、小麦、稻谷、燕麦、高粱、油菜籽、黑麦、大小麦、粟、羊茅、黑麦草、甘蔗、越橘、番木瓜、香蕉、红花、油棕、亚麻、香瓜、苹果、黄瓜、石斛、剑兰、菊花、百合、棉花、桉树、向日葵、小白菜、甘蓝型油菜、草坪草、柳枝稷、绳草、甜菜、咖啡、薯蓣、金合欢、杏、洋蓟、芝麻菜、芦笋、鳄梨、大麦、豆、甜菜、黑莓、蓝莓、西兰花、球芽甘蓝、卷心菜、香瓜、胡萝卜、木薯、菜花、芹菜、樱桃、芫荽叶、克莱门小柑橘、玉米、棉花、花旗松、竹子、海藻、藻类、茄子、菊苣、茅菜、茴香、无花果、森林树木、葫芦、葡萄、柚子、蜜瓜、豆薯、弥猴桃、莴苣、韭葱、柠檬、酸橙、火炬松、芒果、甜瓜、蘑菇、坚果、燕麦、秋葵、洋葱、橙、欧芹、豌豆、桃、梨、胡椒、柿树、松树、菠萝、车前草、李子、石榴、杨树、马铃薯、水稻、南瓜、温柏、辐射松、红菊苣、萝卜、悬钩子、黑麦、南方松、大豆、菠菜、南瓜、草莓、甘薯、枫香树、橘子、茶、烟草、番茄、西瓜、小麦、薯蓣、西葫芦或这些的混合物。优选地，原料物质来源于不适于人消耗的植物物质，例如木质、农业废物、草例如柳枝稷或芒草、稻壳、蔗渣、棉花、黄麻、大麻、亚麻、竹子、剑麻、蕉麻、稻草、玉米棒、玉米秸秆、干草、椰子毛、海藻、藻类或这些的混合物。

[0023] 植物修饰的优点包括例如增强对昆虫、真菌疾病和其他害虫和致病原的抗性；增加对除草剂的耐受性；增加耐旱性；延伸温度范围；增强对贫瘠土壤的耐受性；增强稳定性或储藏期限；增加产率；增加果实大小；增强茎秆；增强抗破损性；减少作物成熟的时间；统一发芽时间；提高或改变淀粉产量；增加营养物质产量，例如增加类固醇、甾醇、激素、脂肪酸、甘油、聚羟基链烷酸酯、氨基酸、维生素和/或蛋白质产量；改变木质素含量；增强纤维素、半纤维素和/或木质素降解；包括表型标记物以允许定性检测（如，种皮颜色）；以及改变植酸含量。来源于这些修饰植物任何原料物质也可受益于这些多个优点。例如，原料物质如木质纤维素物质与用于木质纤维素物质加工的任何微生物相比，可具有更好的储藏期限，更容易加工，具有更好的土地-能量转化率，和/或具有更好的营养价值。此外，来源于此类植物的任何原料物质可为更便宜和/或更丰富的。在一些情况下，修饰植物可在更多种类的气候和/或土壤类型，例如在边际或贫瘠土壤中生长。

[0024] 原料物质可从具有增加疾病抗性的修饰植物获得。例如，具有减轻真菌病原体致病疫霉的侵染症状的马铃薯在美国专利No.7,122,719中有所讨论。此类抗性的可能优点是可改善原料物质的产率、质量和储藏期限。

[0025] 原料物质可从对寄生生物具有增加抗性的修饰植物获得，如通过编码产生δ-内毒素的基因，如美国专利No.6,023,013中所示例。此类抗性的可能优点是可改善原料物质的产率、质量和储藏期限。

[0026] 原料物质可从对除草剂具有增加抗性的修饰植物获得。例如，苜蓿植物J-101，如美国专利No.7,566,817中所述，对草甘膦除草剂具有增加抗性。在另外的例子中，美国专利No.6,107,549中所述的修饰植物对吡啶族除草剂具有增加抗性。此外，美国专利No.7,498,429中所述的修饰植物对咪唑啉酮具有增加抗性。此类抗性的可能优点是可改善原料物质的产率和质量。

[0027] 原料物质可从具有增加抗逆性（例如，水分缺欠、冷、热、盐、害虫、疾病或营养物质胁迫）的修饰植物获得。例如，此类植物在美国专利No.7,674,952中有所描述。此类抗性的可能优点是可改善原料物质的产率和质量。此外，此类植物可在不利条件下，如边际或贫瘠土壤或恶劣气候中生长。

[0028] 原料物质可从具有改善特性，例如果实增大的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.7,335,812中有所描述。此类抗性的可能优点是可改善原料物质的产率和质量。

[0029] 原料物质可从具有改善特性，例如减少豆荚破损的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.7,659,448中有所描述。此类抗性的可能优点是可改善原料物质的产率和质量。

[0030] 原料物质可从具有提高或改变淀粉含量的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.6,538,178中有所描述。此类修饰的可能优点是改善原料的质量。

[0031] 原料物质可从具有改变的油、脂肪酸或乙二醇产量的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.7,405,344中有所描述。脂肪酸和油是微生物产能代谢的优质底物，可为原料的下游加工，例如燃料制备提供优点。在原料的下游加工期间，脂肪酸和油的变化也可对各种组分的粘度和溶解度变化有利。剩余的原料可具有更好的营养物质组合，可用作动物饲料，或具有更高的卡路里含量，可用作直接燃料供燃烧。

[0032] 原料物质可从具有改变的类固醇、甾醇和激素含量的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.6,822,142中有所描述。可能的优点是，这可以为用于原料加工的微生物提供更好的营养物质组合。在加工后，剩余的原料可具有更好的营养物质组合，可用作动物饲料。

[0033] 原料物质可从具有产生聚羟基链烷酸酯能力的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.6,175,061中有所描述。聚羟基链烷酸酯是各种微生物的可用能源和碳储备，并且可对用于下游原料加工的微生物有利。另外，由于聚羟基链烷酸酯是可生物降解的，因此可在储存原料熟化期后可能地减少植物物质的顽拗性来赋予优点。在更下游中，剩余的原料可具有更好的营养物质组合，可用作动物饲料，或具有更高的卡路里含量，可用作直接燃料供燃烧。

[0034] 原料物质可从具有增加氨基酸产量的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.7,615,621中有所描述。可能的优点是，这可以为用于原料加工的微生物提供更好的营养物质组合。在加工后，剩余的原料可具有更好的营养物质组合，可用作动物饲料。

[0035] 原料物质可从具有提高维生素合成的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.6,841,717中有所描述。可能的优点是，这可以为用于原料加工的微生物提供更好的营养物质组合。在加工后，剩余的原料可具有更好的营养物质组合，可用作动物饲料。

[0036] 原料物质可从降解收割后的植物中木质素和纤维素的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.7,049,485中有所描述。原料物质还可从具有改变的木质素含量的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.7,799,906中有所描述。此类植物的可能优点是相对于野生型相同植物减少顽拗性。

[0037] 原料物质可从具有改变表型以易于定性检测的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.7,402,731中有所描述。可能的优点是，易于管理作物和种子，以用于不同的产物流，例如生物燃料、建筑材料和动物饲料。

[0038] 原料物质可从具有减少植酸含量的修饰植物获得。此类植物在美国专利No.7,714,187中有所描述。可能的优点是，这可以为用于原料加工的微生物提供更好的营养物质组合。在加工后，剩余的原料可具有更好的营养物质组合，可用作动物饲料。

[0039] 用于产生此类修饰的修饰植物和/或植物物质和方法本文档末尾（在权利要求之前）列出的美国专利和美国公布专利申请中有所描述，每个专利的整个公开内容全文据此以引用的方式并入本文。

[0040] 处理原料的系统

[0041] 图1示出了一种将原料，尤其是至少部分从修饰植物物质获得的原料转化为可用中间物和产物的特定工艺。工艺10包括初始机械处理原料(12)，例如以减小原料110大小。然后，通过物理处理(14)来处理机械处理的原料，以改变其结构，例如通过使物质晶体结构中的键减弱或微观断裂。然后，结构修饰的物质在一些情况下可经受另外的机械处理(16)。该机械处理可以与初始机械处理相同或不同。例如，初始处理可以是大小减小（如，切割）步骤，然后是剪切步骤，而另外的处理可以是碾磨或铣削步骤。

[0042] 如果在进一步加工之前，另外的结构变化（如，顽拗性减少）是所期望的，则物质可经受另外的结构修饰处理和机械处理。

[0043] 然后，处理的物质可进行初级加工步骤18，如糖化和/或发酵，以生成中间物和产物（如，能量、燃料、食物和材料）。在一些情况下，初级加工步骤的输出可直接使用，但在其他情形下，需要通过后加工步骤(20)提供进一步加工。例如，就醇而言，后加工可涉及蒸馏，在一些情况下，变性。

[0044] 如本文所述，可利用工艺10的多种变化。

[0045] 图2示出了一个利用上述步骤处理原料，然后使用发酵工艺中的处理原料生成醇的特定系统。系统100包括其中原料初始机械处理（上述步骤12）的模块102，其中机械处理原料为结构修饰（上述步骤14）如辐照的模块104，以及其中结构修饰原料经受另外的机械处理（上述步骤16）的模块106。如上面所讨论，模块106的类型可以与模块102相同或不同。在一些具体实施中，结构修饰原料可返回模块102，用于进一步机械处理，而不是在单独的模块106中进一步机械处理。

[0046] 如本文所述，可利用系统100的多种变化。

[0047] 在这些处理后，处理的原料被递送到发酵系统108，所述处理可按需要重复多次以获得所需的原料特性。混合可在发酵期间进行，在这种情况下，混合优选地相对温和（低剪切）以使剪切敏感成分，例如酶和其他微生物的损伤最小化。在一些实施例中，使用射流混合，如美国序列No.12/782,694、13/293,977和13/293,985中所描述，其完整公开内容以引用的方式并入本文。

[0048] 再次参见图2，发酵生成粗制乙醇混合物，其流入接受罐110。水或其他溶剂，和其他非乙醇组分使用汽提塔112从粗制乙醇混合物汽提，然后乙醇使用蒸馏单元114，如精馏器蒸馏。蒸馏可通过真空蒸馏进行。最后，乙醇可使用分子筛116干燥和/或变性，如果需要，输出到所需的装运方法。

[0049] 在一些情况下，本文所述的系统或其组件，可为便携式的，以使得系统可以（如，通过铁轨、卡车或航海船舶）从一个位置运输到另一个。本文所述的方法步骤可在一个或多个位置进行，在一些情况下一个或多个步骤可在运输中进行。此类移动加工在美国序列No.12/374,549和国际专利申请No.WO2008/011598中有所描述，它们的全部公开内容以引用的方式并入本文。

[0050] 本文所述的任何或所有方法步骤可在环境温度下进行。如果需要，在某些步骤期间可利用冷却和/或加热。例如，原料可在机械处理期间冷却，以增加其脆性。在一些实施例中，在初始机械处理和/或后续机械处理之前、期间或之后利用冷却。冷却可以如美国序列No.12/502,629，现为美国专利No.7,900,857所述进行，其全部公开内容以引用的方式并入本文。此外，发酵系统108中的温度可控制为增强糖化和/或发酵。

[0051] 现在进一步详细描述上述方法的单个步骤，以及所用物质。

[0052] 物理处理

[0053] 物理处理工艺可包括一种或多种任何本文所述的那些工艺，例如机械处理、化学处理、辐照、超声、氧化、热解或蒸汽爆破。处理方法可结合两种、三种、四种或甚至所有这些技术（任何顺序）使用。当使用多于一种处理方法时，方法可同时或在不同时间施用。也可单独或结合本文所公开的工艺使用改变原料分子结构的其他工艺。

[0054] 机械处理

[0055] 在一些情况下，方法可包括机械处理原料。机械处理包括例如切割、铣削、挤压、碾磨、剪切和劈砍。铣削可包括例如球磨、锤磨、转子/定子干或湿磨、冷冻磨、浆叶磨、刀磨、盘磨、辊磨或其他类型的铣削。其他机械处理包括，如石磨、破裂、机械锯切或撕裂、销磨或空气碾磨。

[0056] 机械处理对于“打通”、“压迫”、破碎和破损原料中的纤维素或木质纤维素物质可为有利的，使物质的纤维素更容易断链和/或减少结晶度。当辐照时，打开的物质也更容易氧化。

[0057] 在一些情况下，机械处理可包括按原样初始制备原料，如磨碎物质，例如通过切割、碾磨、剪切、磨碎或劈砍。例如，在一些情况下，松散原料（如，回收纸、淀粉物质或柳枝稷）通过剪切或切碎制备。

[0058] 作为另外一种选择或除此之外，原料物质可首先通过一种或多种其他物理处理方法物理处理，如化学处理、辐射、超声、氧化、热解或蒸汽爆破，然后机械处理。该顺序可为有利的，因为通过一种或多种其他处理法，如辐照或热解处理的物质往往更易碎，因此更容易通过机械处理进一步改变物质的分子结构。

[0059] 在一些实施例中，原料为纤维材料的形式，机械处理包括剪切以暴露纤维材料的纤维。剪切可以例如使用圆盘刀切割器进行。机械处理原料的其他方法包括例如铣削或碾磨。铣削可使用例如锤磨机、球磨机、胶体磨机、圆锥或锥磨机、盘磨机、轮磨机、维利磨机或谷磨机进行。碾磨可使用例如石磨机、销磨机、咖啡磨机或磨盘式磨碎机进行。碾磨可以例如通过往复式销或其他元件提供，如销磨机的情况。其他机械处理方法包括机械锯切或撕裂、给物质施加压力的其他方法以及空气碾磨。合适的机械处理还包括改变原料分子结构的任何其他技术。

[0060] 如果需要，机械处理的物质可通过筛网，如具有的平均开口尺寸为1.59mm或更小（1/16英寸，0.0625英寸）。在一些实施例中，剪切或其他机械处理和筛分同时进行。例如，圆盘刀切割器可用于同时剪切和筛分原料。原料在静止浆叶和旋转浆叶之间剪切，以提供通过筛网并且捕获在料斗中的剪切物质。

[0061] 原料可在干燥状态（如，其结构上有很少或没有游离水）、水合状态（如，具有最多10重量%的吸收水）或润湿状态（如具有约10重量%和约75重量%之间的水）机械处理。
纤维源甚至可以在部分或完全浸入液体，例如水、乙醇或异丙醇时机械处理。

[0062] 原料也可在气体（例如除空气之外的气体流或气氛），如氧气或氮气或蒸气下机械处理。

[0063] 如果需要，木质素可从包含木质素的任何纤维材料移除。另外，为了帮助包含纤维素物质的降解，物质可在机械处理或辐照之前或期间用热、化学（如，无机酸、碱或强氧化剂例如次氯酸钠）和/或酶处理。例如，碾磨可在存在酸的情况下进行。

[0064] 机械处理系统可配置为生成具有特定形态特性例如表面积、孔隙度、堆积密度，就纤维原料而言，纤维特性例如长宽比的流。

[0065] 在一些实施例中，机械处理物质的BET表面积大于0.1m2/g，如大于0.25m2/g、大于2 2 2 2 2 2 2
0.5m/g、大于1.0m/g、大于1.5m/g、大于1.75m/g、大于5.0m/g、大于10m/g、大于25m/
2 2 2 2 2 2
g、大于35m/g、大于50m/g、大于60m/g、大于75m/g、大于100m/g、大于150m/g、大于
2 2
200m/g或甚至大于250m/g。

[0066] 机械处理物质的孔隙度可以例如大于20%、大于25%、大于35%、大于50%、大于60%、大于70%、大于80%、大于85%、大于90%、大于92%、大于94%、大于95%、大于97.5%、大于99%或甚至大于99.5%。

[0067] 在一些实施例中，在机械处理后，物质具有的堆积密度小于0.75g/cm3，如小于约3
0.7、0.65、0.60、0.50、0.35、0.25、0.20、0.15、0.10、0.05或更小，如小于0.025g/cm。堆积密度使用ASTM D1895B确定。简而言之，方法涉及用样品填充已知体积的量筒，以及获得样品的重量。堆积密度通过将样品重量（单位为克）除以量筒的已知体积（单位为立方厘米）来计算。

[0068] 如果原料是纤维材料，则机械处理物质的纤维可具有相对较大的平均长径比（如，大于20:1），甚至它们的剪切超过一次。此外，本文所述的纤维材料的纤维可具有相对较窄的长度和/或长径比分布。

[0069] 如本文所用，平均纤维宽度（如，直径）为通过随机选择大约5,000条纤维来目测确定的那些。平均纤维长度为纠正长度-加权长度。BET（Brunauer、Emmet和Teller）表面积为多点表面积，孔隙度为通过压汞法确定的那些。

[0070] 如果原料是纤维材料，则机械处理物质的纤维的平均长径比可为例如大于8/1、例如大于10/1、大于15/1、大于20/1、大于25/1或大于50/1。机械处理物质的平均纤维长度可为例如在约0.5mm和2.5mm之间，例如在约0.75mm和1.0mm之间，第二纤维材料14的平均宽度（如，直径）可为例如在约5μm和50μm之间，例如在约10μm和30μm之间。

[0071] 在一些实施例中，如果原料是纤维材料，则机械处理物质的纤维长度的标准偏差可以小于机械处理物质的平均纤维长度的60%，如小于平均长度的50%，小于平均长度的40%，小于平均长度的25%，小于平均长度的10%，小于平均长度的5%，或甚至小于平均长度的1%。

[0072] 在一些情况下，制备低堆积密度物质，使物质致密化（如，使其更容易和廉价地运输到另一个部位），然后使物质恢复低堆积密度状态可为所期望的。致密物质可通过本文所述的任何方法加工，或通过本文所述的任何方法加工的任何物质可随后致密化，例如美国序列No.12/429,045，现为美国专利No.7,932,065和WO2008/073186中所公开，它们的全部公开内容以引用的方式并入本文。

[0073] 辐射处理

[0074] 一种或多种辐射加工顺序可用于加工原料，并且提供结构修饰的物质，该物质作为输入用于进一步加工步骤和/或顺序。辐照可以例如减少原料的分子量和/或结晶度。辐射也可对物质，或需要对物质进行生物加工的任何介质杀菌。

[0075] 在一些实施例中，沉积在从其原子轨道释放电子的物质中的能量用于辐照物质。辐射可通过如下方式提供：(1)重带电粒子，例如α粒子或质子，(2)例如在β衰变或电子束加速器中产生的电子，或(3)电磁辐射，例如γ射线、X射线或紫外线。在一个方法中，放射性物质产生的辐射可用于辐照原料。在另一个方法中，电磁辐射（如，使用电子束发射器产生）可用于辐照原料。在一些实施例中，可利用(1)至(3)的任何顺序或同时的任何组合。施用的剂量取决于所需的效果和特定原料。

[0076] 在某些情况下，当断链为所期望时和/或聚合物链官能化为所期望时，可利用比电子重的粒子，例如质子、氦核、氩离子、硅离子、氖离子、碳离子、磷离子、氧离子或氮离子。当开环断链为所期望时，带正电的粒子可将其路易斯酸特性用于增强开环断链。例如，当最大氧化作用为所期望时，可利用氧离子，当最大硝化作用为所期望时，可利用氮离子。重粒子和带正电的粒子的使用在美国序列No.12/417,699，现为美国专利No.7,931,784中有所描述，其全部公开内容以引用的方式并入本文。

[0077] 在一个方法中，辐照作为或包含具有第一数均分子量(MN1)的纤维素的第一物质，如通过用电离辐射（如，γ辐射、X-射线辐射、100nm至280nm紫外(UV)光、电子束或其他带电粒子的形式）处理，以提供包含具有第二数均分子量(MN2)的纤维素的第二物质，所述第二数均分子量小于第一数均分子量。第二物质（或第一和第二物质）可与可利用第二和/或第一物质或其组分糖或木质素生成中间物或产物，例如本文所述的那些的中间物或产物的微生物（使用或不使用酶处理）组合。

[0078] 由于第二物质包含具有相对于第一物质减小的分子量，在某些情况下，还具有减小的结晶度的纤维素，第二物质的分散性、溶胀性和/或溶解度，如在包含微生物和/或酶的溶液中的溶解度通常更大。这些特性使第二物质相对于第一物质更易于加工，并且对化学、酶学和/或生物学攻击更敏感，其大大提高了所需产物，如乙醇的产率和/或生产水平。

[0079] 在一些实施例中，第二数均分子量(MN2)小于第一数均分子量(MN1)超过约10%，如超过约15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%，或甚至超过约75%。

[0080] 在某些情况下，第二物质包含的纤维素具有的结晶度(C2)小于第一物质的纤维素的结晶度(C1)。例如，(C2)可小于(C1)超过约10%，如超过约15%、20%、25%、30%、35%、40%，或甚至超过约50%。

[0081] 在一些实施例中，起始结晶度指数（在辐照之前）为约40至约87.5%，如约50至约75%或约60至约70%，并且辐照后的结晶度指数为约10至约50%，如约15至约45%或约20至约40%。然而，在一些实施例中，如大规模辐照后，可具有小于5%的结晶度指数。在一些实施例中，辐照后的物质基本上为无定形的。

[0082] 在一些实施例中，起始数均分子量（在辐照之前）为约200,000至约3,200,000，如约250,000至约1,000,000或约250,000至约700,000，并且辐照后的数均分子量为约50,000至约200,000，如约60,000至约150,000或约70,000至约125,000。然而，在一些实施例中，如大规模辐照后，可具有小于约10,000或甚至小于约5,000的数均分子量。

[0083] 在一些实施例中，第二物质可具有氧化水平(O2)大于第一物质的氧化水平(O1)。物质的高氧化水平可有助于其分散性、溶胀性和/或溶解度，还增强了物质对化学、酶学或生物学攻击的敏感性。在一些实施例中，为了增加第二物质相对于第一物质的氧化水平，辐照在氧化环境下，如在空气或氧气的覆盖层下进行，生成氧化性比第一物质更强的第二物质。例如，第二物质可具有更多的羟基、醛基、酮基、酯基或羧酸基团，它们可增加其亲水性。

[0084] 电离辐射

[0085] 每种形式的辐射使含碳物质通过特定相互作用电离，如通过辐射能量确定。重带电粒子主要通过库仑散射电离物质；此外，这些相互作用生成还可电离物质的高能电子。α粒子与氦原子核相同，并且由各种放射性核，例如铋、钋、砹、氡、钫、镭、多个锕系元素例如锕、钍、铀、镎、锯、锎、镅和钚的同位素的α衰变生成。

[0086] 当使用粒子时，它们可为中性的（不带电的）、带正电的或带负电的。当带电时，带电的粒子可具有单正或负电荷，或多电荷，如一个、两个、三个或甚至四个或更多个电荷。在其中断链为所期望的情况下，带正电的粒子可为所期望的，部分是由于其酸性性质。当利用粒子时，粒子可具有静止电子质量，或更大如500、1000、1500、2000、10,000或甚至100,000倍静止电子质量。例如，粒子可具有约1个原子单位至约150个原子单位，如约1个原子单位至约50个原子单位，或约1至约25，如1、2、3、4、5、10、12或15amu的质量。用于使粒子加速的加速器可为静电DC、电动DC、RF线性、磁感应线性或连续波。例如，回旋型加速器可得自比利时IBA公司(IBA,Belgium)，例如 系统，而DC型加速器可得自RDI，现为IBA工业公司(IBA Industrial)，例如 离子和离
子加速器在Introductory Nuclear Physics,Kenneth S.Krane,John Wiley&Sons,Inc.(1988)、Krsto Prelec,FIZIKA B6(1997)4,177-206、Chu,William T.,“Overview of Light-Ion Beam Therapy”Columbus-Ohio,ICRU-IAEA Meeting,18-20March2006、Iwata,Y.et al.,“Alternating-Phase-Focused IH-DTL for Heavy-Ion Medical Accelerators”Proceedings of EPAC2006,Edinburgh,Scotland 和 Leaner,C.M.et al.,“Status of the Superconducting ECR Ion Source Venus”Proceedings of EPAC2000,Vienna,Austria中有所讨论。

[0087] γ辐射具有穿透多种物质的显著穿透深度优点。γ射线源包括放射性核，例如钴、钙、锝、铬、镓、铟、碘、铁、氪、钐、硒、钠、铊和氙的同位素。

[0088] X射线源包括电子束与金属目标，例如钨或钼或合金的碰撞，或致密光源，例如Lyncean商业化生产的那些。

[0089] 紫外辐射源包括氘或镉灯。

[0090] 红外辐射源包括蓝宝石、锌或硒化物窗口陶瓷灯。

[0091] 微波源包括速度调制管、Slevin型RF源或采用氢气、氧气或氮气的原子束源。

[0092] 在一些实施例中，电子束用作辐射源。电子束具有高剂量率（如，1、5或甚至10兆拉德/秒）、高通量、低容积和少吸持设备的优点。电子也可对引起断链更有效。此外，具有4-10MeV能量的电子可具有5至30mm或更多，例如40mm的穿透深度。

[0093] 电子束可以例如通过静电发生器、级联发生器、感应变频机、具有扫描系统的低能量加速器、具有线性阴极的低能量加速器、直线加速器和脉冲加速器生成。作为电离辐射源的电子可用于例如相对较薄的物质部分，如小于0.5英寸，如小于0.4英寸、0.3英寸、0.2英寸或小于0.1英寸。在一些实施例中，电子束的每个电子的能量为约0.3MeV至约2.0MeV（兆电子伏），如约0.5MeV至约1.5MeV，或约0.7MeV至约1.25MeV。

[0094] 电子束辐照装置可从比利时新鲁汶离子束应用公司(Ion Beam Applications,Louvain-la-Neuve,Belgium)或加利福尼亚州圣迭戈泰坦公司(Titan Corporation,San Diego,CA)商购获得。典型的电子能量可为1MeV、2MeV、4.5MeV、7.5MeV或10MeV。典型的电子束辐照装置功率可为1kW、5kW、10kW、20kW、50kW、100kW、250kW或500kW。原料的解聚水平取决于所用的电子能量和所施用的剂量，而暴露时间取决于功率和剂量。典型的剂量可采取1kGy、5kGy、10kGy、20kGy、50kGy、100kGy或200kGy的值。在一些实施例中，可使用在0.25-10MeV（如，0.5-0.8MeV、0.5-5MeV、0.8-4MeV、0.8-3MeV、0.8-2MeV或0.8-1.5MeV）之间的能量。在一些实施例中，可使用在1-100兆拉德（如，2-80兆拉德、5-50兆拉德、5-40兆拉德、5-30兆拉德或5-20兆拉德）之间的剂量。在一些优选的实施例中，可使用在0.8-3MeV（如，0.8-2MeV或0.8-1.5MeV）之间的能量以及在5-50兆拉德（如，5-40兆拉德、5-30兆拉德或5-20兆拉德）之间剂量的组合。

[0095] 离子粒子束

[0096] 比电子重的粒子可用于辐照物质，例如碳水化合物或包含碳水化合物的物质，如纤维素物质、木质纤维素物质、淀粉物质或本文所述的任何这些和其他物质的混合物。例如，可利用质子、氦核、氩离子、硅离子、氖离子、碳离子、磷离子、氧离子或氮离子。在一些实施例中，比电子重的粒子可引起更高数量的断链（相对于较轻的粒子）。在某些情况下，与带负电的粒子（由于其酸性）相比，带正电的粒子可引起更高数量的断链。

[0097] 可以例如使用直线加速器或回旋加速器生成更重的粒子束。在一些实施例中，所述束的每个粒子的能量为约1.0MeV/原子单位(MeV/amu)至约6,000MeV/原子单位，如约3MeV/原子单位至约4,800MeV/原子单位，或约10MeV/原子单位至约1,000MeV/原子单位。

[0098] 在某些实施例中，离子束用于辐照含碳物质，如从植物获得的物质可包含多于一种离子类型。例如，离子束可包含两种或更多种（如，三种、四种或更多种）不同类型离子的混合物。示例性混合物可包含碳离子和质子、碳离子和氧离子、氮离子和质子以及铁离子和质子。更一般地说，上述讨论的任何离子（或任何其他离子）的混合物可用于形成辐照离子束。具体地讲，相对较轻和相对较重的离子的混合物可用于单离子束。

[0099] 在一些实施例中，用于辐照物质的离子束包括带正电的离子。带正电的离子可包括例如带正电的氢离子（如，质子）、稀有气体离子（如，氦、氖、氩）、碳离子、氮离子、氧离子、硅原子、磷离子和金属离子，例如钠离子、钙离子和/或铁离子。不希望受任何理论的限制，据信此类带正电的离子暴露于物质时，在化学上作为路易斯酸部分，在氧化环境中引发和保持阳离子开环断链反应。

[0100] 在某些实施例中，用于辐照物质的离子束包括带负电的离子。带负电的离子可包括例如带负电的氢离子（如，氢化物离子），以及各种相对电负性核的带负电的离子（如，氧离子、氮离子、碳离子、硅离子和磷离子）。不希望受任何理论的限制，据信此类带负电的离子暴露于物质时，在化学上作为路易斯碱部分，在还原环境中引起阴离子开环断链反应。

[0101] 在一些实施例中，辐照物质的束可包括中性原子。例如，氢原子、氦原子、碳原子、氮原子、氧原子、氖原子、硅原子、磷原子、氩原子和铁原子中的任何一个或多个可包括在用于辐照的束中。一般来讲，任何两个或更多个（如，三个或更多个、四个或更多个或甚至更多个）上述类型原子的混合物可存在于束中。

[0102] 在某些实施例中，用于辐照物质的离子束包括单带电离子，例如H+、H-、He+、Ne+、+ + - + - + - + - + - + + +Ar、C、C、O、O、N、N、Si、Si、P、P、Na、Ca 和Fe 中的一者或多者。在一些实施例中，
2+ 3+ 4+ 3+ 5+ 3- 2+ 2- 2- 2+ 4+ 2- 4-
离子束可包括多带电离子，例如C 、C 、C 、N 、N 、N 、O 、O 、O2 、Si 、Si 、Si 和Si 中的一者或多者。一般来讲，离子束也可包括具有多个正或负电荷的更复杂的多核离子。在某些实施例中，借助多核离子的结构，正或负电荷可有效地分布于离子的基本上整个结构。
在一些实施例中，正或负电荷可一定程度地定位于离子的部分结构。

[0103] 电磁辐射

[0104] 在其中辐照使用电磁辐射进行的实施例中，电磁辐射可具有例如大于102eV的每3 4 5 6 7
光子能量（单位为电子伏），如大于10、10、10、10 或甚至大于10eV。在一些实施例中，电
4 7 5 6
磁辐射具有在10 和10 之间，如在10 和10eV之间的每光子能量。电磁辐射可具有例如
16 17 18 19 20 21
大于10 hz、大于10 hz、10 hz、10 hz、10 hz或甚至大于10 hz的频率。典型的剂量可采用大于1兆拉德（如，大于1兆拉德、大于2兆拉德）的值。在一些实施例中，电磁辐射具有
18 22 19 21
在10 和10 hz之间，例如在10 至10 hz之间的频率。在一些实施例中，可使用在1-100兆拉德（如，2-80兆拉德、5-50兆拉德、5-40兆拉德、5-30兆拉德或5-20兆拉德）之间的剂量。

[0105] 淬灭和控制官能化

[0106] 在用电离辐射处理之后，本文所述的任何物质或混合物可称为电离的；即处理的物质可包含自由基，其水平可用电子自旋共振光谱仪检测。如果电离的原料保留在大气环境中，将被氧化，例如达到通过与大气氧反应生成羧酸基团的程度。在某些情况下，对于一些物质，此类氧化是所期望的，因为它可有助于含碳水化合物生物质的分子量的进一步降解，并且在某些情况下，氧化基团如羧酸基团可有助于溶解度和微生物利用率。然而，由于辐照后自由基可“存活”一些时间，如大于1天、5天、30天、3个月、6个月或甚至大于1年，物质特性可随时间推移继续变化，在某些情况下，这不是所期望的。因此，淬灭电离的物质可为所期望的。

[0107] 在电离后，任何电离的物质可淬灭，以减少电离物质中的自由基水平，例如使得电子自旋共振光谱仪不再检测到自由基。例如，自由基可通过给物质施加足够的压力和/或通过利用与电离物质接触的流体，例如与自由基反应（淬灭）的气体或液体来淬灭。将气体或液体用于至少帮助自由基淬灭可用于使电离物质与所需数量和种类的官能团，例如羧酸基团、烯醇基、醛基、硝基、腈基、氨基、烷基氨基、烷基、氯烷基或氯氟烷基官能化。

[0108] 在某些情况下，此类淬灭可提高一些电离物质的稳定性。例如，淬灭可提高物质的耐氧化性。通过淬灭的官能化也可提高本文所述的任何物质的溶解度，可提高其热稳定性，可提高物质的各种微生物利用率。例如，通过淬灭赋予物质的官能团可作为微生物附着的接受部位，例如以提高纤维素被各种微生物的水解。

[0109] 在一些实施例中，淬灭包括给电离物质施加压力，例如通过使物质机械变形，如在一个、两个或三个维度上直接机械压缩物质，或给其中物质浸没的流体施加压力，如等静压。在此类情况下，物质本身的变形带来自由基，其通常足够接近地陷于晶畴中，使得自由基可与另一个基团重组或反应。在某些情况下，压力的施加与热的施加一起进行，例如施加足够量的热，以升高物质的温度，达到大于物质组分例如木质素、纤维素或半纤维素的熔点或软化点。热可提高物质中的分子流动性，所述分子流动性可有助于自由基的淬灭。当压力用于淬灭时，压力可大于约1000psi，例如大于约1250psi、1450psi、3625psi、5075psi、7250psi、10000psi或甚至大于15000psi。

[0110] 在一些实施例中，淬灭包括使电离物质与流体，例如液体或气体，如与自由基反应的气体，例如乙炔或氮气中的乙炔、乙烯、氯化乙烯或氯氟乙烯、丙烯的混合物或这些气体的混合物接触。在其他特定实施例中，淬灭包括使电离物质与液体，如可溶于或至少能够渗入物质并且与自由基，例如二烯如1,5-环辛二烯反应的液体接触。在一些特定实施例中，淬灭包括使物质与抗氧化剂，例如维生素E接触。如果需要，原料可包含分散于其中的抗氧化剂，淬灭可来自使分散于原料中的抗氧化剂与自由基接触。

[0111] 官能化可通过利用重带电离子，例如本文所述的任何更重的离子来增强。例如，如果提高氧化是所期望的，则带电氧离子可用于辐照。如果氮官能团是所期望的，则可利用氮离子或包含氮的离子。同样，如果硫或磷基团是所期望的，则硫或磷离子可用于辐照。

[0112] 剂量

[0113] 在某些情况下，辐照在大于约0.25兆拉德/秒，如大于约0.5、0.75、1.0、1.5、2.0，或甚至大于约2.5兆拉德/秒的剂量率下进行。在一些实施例中，辐照在5.0和1500.0千拉德/小时之间，如在10.0和750.0千拉德/小时之间或在50.0和350.0千拉德/小时之间的剂量率下进行。在一些实施例中，辐照在大于约0.25兆拉德/秒，如大于约0.5、0.75、1、1.5、2、5、7、10、12、15，或甚至大于约20兆拉德/秒，如约0.25至2兆拉德/秒的剂量率下进行。

[0114] 在一些实施例中，辐照（使用任何辐射源或源的组合）的进行直到物质接收0.25兆拉德，如至少1.0、2.5、5.0、8.0、10、15、20、25、30、35、40、50，或甚至至少100兆拉德的剂量。在一些实施例中，辐照的进行直到物质接收在1.0兆拉德和6.0兆拉德之间，如在1.5兆拉德和4.0兆拉德、2兆拉德和10兆拉德、5兆拉德和20兆拉德、10兆拉德和30兆拉德、10兆拉德和40兆拉德或20兆拉德和50兆拉德之间的剂量。在一些实施例中，辐照的进行直到物质接收约0.1兆拉德至约500兆拉德、约0.5兆拉德至约200兆拉德、约1兆拉德至约100兆拉德或约5兆拉德至约60兆拉德的剂量。在一些实施例中，施加相对较低剂量的辐射，如小于60兆拉德。

[0115] 超声

[0116] 超声可减小物质，例如一种或多种本文所述的任何物质，如一种或多种碳水化合物源，例如纤维素或木质纤维素物质或淀粉物质的分子量和/或结晶度。超声也可用于对物质进行杀菌。如上文参照辐射所讨论，用于超声的加工参数可根据各种因素，如根据原料的木质素含量而变化。例如，具有更高木质素水平的原料通常需要更高的停留时间和/或能量水平，使递送至原料的总能量更高。

[0117] 在一个方法中，包含具有第一数均分子量(MN1)的纤维素的第一物质分散于介质例如水中，并且超声和/或涡凹，以提高包含具有小于第一数均分子量的第二数均分子量(MN2)的纤维素的第二物质。第二物质（或在某些实施例中第一和第二物质）可与可利用第二和/或第一物质生成中间物或产物的微生物（使用或不使用酶处理）组合。

[0118] 由于第二物质包含具有相对于第一物质减小的分子量，在某些情况下，还具有减小的结晶度的纤维素，第二物质的分散性、溶胀性和/或溶解度，如在包含微生物的溶液中的溶解度通常更大。

[0119] 在一些实施例中，第二数均分子量(MN2)小于第一数均分子量(MN1)超过约10%，如超过约15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%，或甚至超过约75%。

[0120] 在某些情况下，第二物质包含的纤维素具有的结晶度(C2)小于第一物质的纤维素的结晶度(C1)。例如，(C2)可小于(C1)超过约10%，如超过约15%、20%、25%、30%、35%、40%，或甚至超过约50%。

[0121] 在一些实施例中，起始结晶度指数（在超声之前）为约40至约87.5%，如约50至约75%或约60至约70%，并且超声后的结晶度指数为约10至约50%，如约15至约45%或约20至约40%。然而，在某些实施例中，如大规模超声后，可具有小于5%的结晶度指数。在一些实施例中，超声后的物质基本上为无定形的。

[0122] 在一些实施例中，起始数均分子量（在超声之前）为约200,000至约3,200,000，如约250,000至约1,000,000或约250,000至约700,000，并且超声后的数均分子量为约50,000至约200,000，如约60,000至约150,000或约70,000至约125,000。然而，在一些实施例中，如大规模超声后，可具有小于约10,000或甚至小于约5,000的数均分子量。

[0123] 在一些实施例中，第二物质可具有氧化水平(O2)大于第一物质的氧化水平(O1)。物质的高氧化水平可有助于其分散性、溶胀性和/或溶解度，还增强了物质对化学、酶学或微生物攻击的敏感性。在一些实施例中，为了增加第二物质相对于第一物质的氧化水平，超声在氧化剂中进行，生成氧化性比第一物质更强的第二物质。例如，第二物质可具有更多的羟基、醛基、酮基、酯基或羧酸基团，它们可增加其亲水性。

[0124] 在一些实施例中，超声介质是含水介质。如果需要，介质可包含氧化剂例如过氧化物（如，过氧化氢）、分散剂和/或缓冲剂。分散剂的例子包括离子分散剂，如月桂基硫酸钠，和非离子分散剂，如聚(乙二醇)。

[0125] 在其他实施例中，超声介质是非水性的。例如，超声可在烃如甲苯或庚烷，醚如乙醚或四氢呋喃，或甚至液化气体例如氩气、氙气或氮气中进行。

[0126] 热解

[0127] 一种或多种热解加工顺序可用于加工多种不同来源的含碳物质，以从物质提取可用的物质，并且提供部分降解的物质，作为进一步加工步骤和/或顺序的输入。热解也可用于对物质进行杀菌。热解条件可根据原料特性和/或其他因素变化。例如，具有高木质素水平的原料需要高温、较长停留时间和/或在热解期间引入高水平的氧。

[0128] 在一个例子中，热解包含具有第一数均分子量(MN1)的纤维素的第一物质，如在管式炉中（在存在或不存在氧气的情况下）加热第一物质，以提供包含具有小于第一数均分子量的第二数均分子量(MN2)的纤维素的第二物质。

[0129] 由于第二物质包含具有相对于第一物质减小的分子量，在某些情况下，还具有减小的结晶度的纤维素，第二物质的分散性、溶胀性和/或溶解度，如在包含微生物的溶液中的溶解度通常更大。

[0130] 在一些实施例中，第二数均分子量(MN2)小于第一数均分子量(MN1)超过约10%，如超过约15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%，或甚至超过约75%。

[0131] 在某些情况下，第二物质包含的纤维素具有的结晶度(C2)小于第一物质的纤维素的结晶度(C1)。例如，(C2)可小于(C1)超过约10%，如超过约15%、20%、25%、30%、35%、40%，或甚至超过约50%。

[0132] 在一些实施例中，起始结晶度（在热解之前）为约40至约87.5%，如约50至约75%或约60至约70%，并且热解后的结晶度指数为约10至约50%，如约15至约45%或约20至约40%。然而，在某些实施例中，如大规模热解后，可具有小于5%的结晶度指数。在一些实施例中，热解后的物质基本上为无定形的。

[0133] 在一些实施例中，起始数均分子量（在热解之前）为约200,000至约3,200,000，如约250,000至约1,000,000或约250,000至约700,000，并且热解后的数均分子量为约50,000至约200,000，如约60,000至约150,000或约70,000至约125,000。然而，在一些实施例中，如大规模热解后，可具有小于约10,000或甚至小于约5,000的数均分子量。

[0134] 在一些实施例中，第二物质可具有氧化水平(O2)大于第一物质的氧化水平(O1)。物质的高氧化水平可有助于其分散性、溶胀性和/或溶解度，还增强了物质对化学、酶学或微生物攻击的敏感性。在一些实施例中，为了增加第二物质相对于第一物质的氧化水平，热解在氧化环境中进行，生成氧化性比第一物质更强的第二物质。例如，与第一物质相比，第二物质可具有更多的羟基、醛基、酮基、酯基或羧酸基团，从而增加了物质的亲水性。

[0135] 在一些实施例中，物质的热解是连续的。在其他实施例中，物质热解预定时间，然后使其冷却第二预定时间，再次热解。

[0136] 氧化

[0137] 一种或多种氧化加工顺序可用于加工多种不同来源的含碳物质，以从物质提取可用的物质，并且提供部分降解和/或改性的物质，作为进一步加工步骤和/或顺序的输入。氧化条件可以例如根据原料的木质素含量变化，较高程度的氧化通常对于高木质素含量的原料是所期望的。

[0138] 在一个方法中，包含具有第一数均分子量(MN1)并且具有第一氧含量(O1)的纤维素的第一物质被氧化，如通过在空气或富含氧气的空气流中加热第一物质，以提供包含具有第二数均分子量(MN2)并且具有大于第一氧含量(O1)的第二氧含量(O2)的纤维素的第二物质。

[0139] 第二物质的第二数均分子量通常小于第一物质的第一数均分子量。例如，分子量可以如上文所讨论相对于其他物理处理减少相同的程度。第二物质的结晶度也可以如上文所讨论相对于其他物理处理减少相同的程度。

[0140] 在一些实施例中，第二氧含量比第一氧含量高至少约5%，如高7.5%、高10.0%、高12.5%、高15.0%或高17.5%。在一些优选的实施例中，第二氧含量比第一物质的第一氧含量高至少约20.0%。氧含量通过元素分析测量，所述元素分析在1300℃或更高运行的炉中热解样品进行。合适的元素分析仪为具有VTF-900高温热解炉的LECOCHNS-932分析仪。

[0141] 一般来讲，物质的氧化在氧化环境中进行。例如，氧化可通过在氧化环境中，例如空气或富含氩气的空气中的热解来实现或辅助。为了帮助氧化，各种化学剂，例如氧化剂、酸或碱可在氧化之前或期间加入物质中。例如，过氧化物（如，过氧化苯甲酰）可在氧化之前加入。

[0142] 一些减少生物质原料顽拗性的氧化方法采用Fenton型化学反应。此类方法在例如美国序列No.12/639,289中有所公开，其完整公开内容以引用的方式并入本文。

[0143] 示例性氧化剂包括过氧化物例如过氧化氢和过氧化苯甲酰、过硫酸盐例如过硫酸铵、氧的活性形式例如臭氧、高锰酸盐例如高锰酸钾、高氯酸盐例如高氯酸钠以及次氯酸盐例如次氯酸钠（家用漂白剂）。

[0144] 在一些情况下，在接触期间pH保持等于或低于约5.5，例如在1和5之间、在2和5之间、在2.5和5之间或在约3和5之间。氧化条件也可包括在2和12小时之间，如在
4和10小时之间或在5和8小时之间的接触时间期。在某些情况下，温度保持等于或低于
300℃，如等于或低于250、200、150、100或50℃。在某些情况下，温度保持基本上环境温度，如为或约为20-25℃。

[0145] 在一些实施例中，一种或多种氧化剂作为气体施用，例如用粒子例如电子束通过空气辐照物质原位生成臭氧。

[0146] 在一些实施例中，混合物还包含一种或多种氢醌例如2,5-二甲氧基氢醌(DMHQ)和/或一种或多种苯醌例如2,5-二甲氧基-1,4-苯醌(DMBQ)，它们可帮助电子转移反应。

[0147] 在一些实施例中，一种或多种氧化剂在原位电化学生成。例如，过氧化氢和/或臭氧可以在接触或反应容器中电化学生成。

[0148] 其他增溶、减少顽拗性或官能化的工艺

[0149] 本段落的任何工艺可单独使用，无需本文所述的任何工艺，或与本文所述的任何工艺（以任何顺序）结合使用：蒸汽爆破、化学处理（如，酸处理（包括使用浓和稀的无机酸例如硫酸、盐酸和有机酸例如三氟乙酸处理）和/或碱处理（如，用石灰或氢氧化钠处理））、UV处理、螺旋挤压处理（参见例如美国序列No.13/099,151）、溶剂处理（如，用离子型液体处理）和冷冻磨（参见例如美国序列No.12/502,629，现为美国专利No.7,900,857）。

[0150] 燃料、酸、酯和/或其他产物的制备和使用

[0151] 至少部分从植物获得的典型原料包含纤维素、半纤维素和木质素加上少量蛋白质、可提取物和矿物。在上文讨论的一个或多个加工步骤使用原料进行之后，包含于纤维素和半纤维素级分中的复合碳水化合物在一些情况下可加工为可发酵糖，任选地伴随着酸或酶水解。释放的糖可转化为多种产物，例如醇或有机酸。所获得的产物取决于所利用的微生物和生物加工进行的条件。在其他实施例中，处理的原料可经受热化学转化或其他加工。

[0152] 进一步加工处理原料的方法例子在以下部分有所讨论。

[0153] 糖化

[0154] 为了将处理的原料转化为可易于发酵的形式，在一些具体实施中，原料中的纤维素首先水解为低分子量碳水化合物，例如糖，所述水解通过糖化剂如酶，称为糖化的加工进行。在一些具体实施中，糖化剂包括酸，如无机酸。当使用酸时，可生成对微生物有毒的副产物，在这种情况下，加工还可包括移除此类副产物。移除可使用活性炭，如活性焦炭，或其他合适的技术进行。

[0155] 处理的原料可使用酶水解，如通过将物质和酶在溶剂，如水溶液中组合。

[0156] 分解生物质的酶和生物质破坏生物，例如原料的纤维素和/或木质素部分，包含或生成各种纤维分解酶（纤维素酶）、木质素酶或各种小分子生物质破坏代谢物。这些酶可以是协同作用以降解生物质的结晶纤维素或木质素部分的酶复合物。

[0157] 纤维分解酶的例子包括：内葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和纤维二糖酶（β-葡萄糖苷酶）。纤维素底物初始通过内葡聚糖酶在随机位置水解，生成低聚中间物。然后这些中间物作为外切葡聚糖酶，例如纤维二糖水解酶的底物，从纤维素聚合物的末端产生纤维二糖。纤维二糖是葡萄糖的水溶性1,4-连接二聚体。最后，纤维二糖酶裂解纤维二糖生成葡萄糖。

[0158] 发酵

[0159] 微生物可通过低分子量糖的发酵产生多种可用中间物和产物，所述低分子量糖由处理原料的糖化产生。例如，发酵或其他生物加工可生成醇、有机酸、烃、氢、蛋白质或任何这些物质的混合物。

[0160] 酵母和发酵单胞菌(Zymomonas)细菌，例如可用于发酵或转化。其他微生物在如下物质部分中讨论。发酵的最佳pH为约pH4至7。酵母的最佳pH为约pH4至5，而发酵单胞菌的最佳pH为约pH5至6。典型的发酵时间为约24至168（如，24-96小时）小时，温度在20℃至40℃（如，26℃至40℃）的范围内，然而嗜热微生物偏好高温。

[0161] 在一些实施例中，如当使用厌氧生物时，至少部分发酵在缺乏氧气的条件下，如在惰性气体例如N2、Ar、He、CO2或其混合物的覆盖层下进行。另外，在部分或所有发酵期间通过槽后，可用惰性气体不断清扫混合物。在一些情况下，厌氧条件可通过发酵期间产生二氧化碳实现或保持，不需要另外的惰性气体。

[0162] 在一些实施例中，所有或部分发酵工艺可在低分子量糖完全转化为产物（如乙醇）前中断。中间物发酵产物包含高浓度的糖和碳水化合物。糖和碳水化合物可如下文所讨论分离。这些中间物发酵产物可用于制备人或动物消耗的食物。除此之外或作为另外一种选择，中间物发酵产物可在不锈钢实验型磨中研磨为细小粒度，产生粉状物质。

[0163] 发酵包括提交于2011年12月的美国临时申请序列No.61/579,559和提交于2011年12月的美国临时申请序列No.61/579,576中公开的方法和产物，它们以引用的方式并入本文。

[0164] 可利用移动发酵罐，如美国临时专利申请序列No.60/832,735，现为公布国际专利申请No.WO2008/011598中所描述。相似地，糖化设备可为移动的。此外，糖化和/或发酵可在部分或整个运输期间进行。

[0165] 燃料电池

[0166] 当本文所述的方法生成糖溶液或悬浮液时，该溶液或悬浮液可随后用于燃料电池。例如，利用糖的燃料电池，所述糖来源于纤维素或木质纤维素物质在提交于2011年12月22日的美国临时申请序列No.61/579,568中有所公开，其完整公开内容以引用的方式并入本文。

[0167] 热化学转化

[0168] 热化学转化可使用处理的原料进行，生成一种或多种所需的中间物和/或产物。热化学转化工艺包括在高温下改变含碳物质的分子结构。具体例子包括气化、热解、重整、部分氧化以及这些的混合（以任何顺序）。

[0169] 气化将含碳物质转化为合成气体（合成气），所述合成气可包括甲醇、一氧化碳、二氧化碳和氢气。多种微生物，例如产乙酸菌或同型产乙酸菌能够利用生物质热化学转化产生的合成气，生成包含醇、羧酸、羧酸盐、羧酸酯或任何这些的混合物的产物。生物质（如，纤维素或木质纤维素物质）的气化可通过多种技术实现。例如，气化可利用上升蒸气重整使用流化床反应器实现，其中含碳物质在缺乏氧气的条件下首先热解，然后热解蒸气重整为含蒸汽的合成气，提供添加的氢气和氧气。在此类技术中，加工热来自灼热的炭。另一种技术利用螺旋推进反应器，其中水分和氧气在热解阶段引入，并且加工热由后面阶段生成的一些气体的燃烧生成。另一种技术利用气流重整，其中外部蒸汽和空气二者引入单级气化反应器。在部分氧化气化中，纯氧的利用无需蒸汽。

[0170] 后加工

[0171] 蒸馏

[0172] 在发酵后，所得的流体可使用例如“啤酒柱”蒸馏，以将乙醇和其他醇从大量水和残余固体中分离。离开啤酒柱的蒸气可以是例如35重量%乙醇，并且可送入精馏柱。来自精馏柱的乙醇和水的几乎共沸(92.5%)混合物可使用蒸气相分子筛纯化为纯(99.5%)乙醇。啤酒柱底部可送入三效蒸发器的第一效。精馏柱回流冷凝器可为该第一效提供热量。在第一效后，固体可使用离心机分离，并且在旋转干燥器中干燥。部分(25%)离心机流出物可循环至发酵，其余送入蒸发器第二和第三效。大多数蒸发器冷凝物可返回工艺，作为具有少量分离物的十分清洁冷凝物进入废水处理，以防止低沸点化合物的累积。

[0173] 糖的其他可能加工

[0174] 在糖化期间或之后的加工可包括通过色谱如模拟移动床色谱法、沉淀、离心、结晶、溶剂蒸发及其组合进行的糖分离和/或浓缩。此外或任选地，加工可包括糖溶液或悬浮液中一种或多种糖的异构化。此外或任选地，糖溶液或悬浮液可化学加工，如葡萄糖和木糖可分别氢化为山梨糖醇和木糖醇。氢化可通过在高压如10至12000psi下使用催化剂如Pt/γ-Al2O3、Ru/C、雷内镍与H2结合实现。

[0175] 一些可能的加工步骤在提交于2011年12月22日的美国临时申请序列No.61/579,552以及提交于2011年12月22日的美国临时申请序列No.61/579,576中有所公开，上述申请以引用方式并入。

[0176] 中间物和产物

[0177] 利用例如此类初级加工和/或后加工，处理的生物质可转化为一种或多种产物，例如能量、燃料、食物和材料。产物的具体例子包括（但不限于）氢、糖（如，葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖、果糖、二糖、低聚糖和多糖）、醇（如，一元醇或二元醇，例如乙醇、正丙醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇或正丁醇）、水合或含水醇如包含大于10%、20%、30%或甚至大于40%的水、糖、生物柴油、有机酸（如，乙酸和/或乳酸）、烃、副产物（如，蛋白质例如纤维分解蛋白质（酶）或但细胞蛋白质）以及任何这些物质的任何组合或相对浓度，以及任选地与任何添加剂如燃料添加剂组合的混合物。其他例子包括羧酸，例如乙酸或丁酸、羧酸盐、羧酸和羧酸盐以及羧酸酯（如，甲酯、乙酯和正丙酯）的混合物、酮、醛、α、β不饱和酸例如丙烯酸、烯烃例如乙烯以及任何这些物质的混合物。其他醇和醇衍生物包括丙醇、丙二醇、1,4-丁二醇、1,3-丙二醇、糖醇（如，赤藓醇、乙二醇、甘油、山梨糖醇、苏丁醇、阿拉伯糖醇、核糖醇、甘露糖醇、己六醇、岩藻糖醇、艾杜糖醇、异麦芽、麦芽糖醇、乳糖醇、木糖醇和其他多元醇）、任何这些醇的甲酯或乙酯。其他产物包括丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯、乳酸、丙酸、丁酸、琥珀酸、3-羟基丙酸、任何酸的盐以及任何酸和相应盐的混合物。

[0178] 在一些实施例中，利用例如此类初级加工和/或后加工，处理的生物质可转化为平台化合物。例如，如上所述，处理的生物质可转化为丁醇（如，异丁醇、仲丁醇、叔丁醇或正丁醇），丁醇是重要的平台化合物。例如，丁醇的脱水可生成丁烯，例如1-丁烯、顺式-2-丁烯、反式-2-丁烯和异丁烯，它们是用于合成燃料、润滑剂和其他有用化合物的非常有价值的起始物质。具体地，1-丁烯可用于生成聚合物，如线性低密度聚乙烯，2-丁烯异构体是用于润滑剂和农用化学剂的有用起始物质，异丁烯可聚合为丁基橡胶、甲基叔丁基醚和异辛烷。此外，合成石油煤油可通过丁烯的低聚化合成。其他中间物和产物，包括食物和药物产物，例如选自药物、营养物、蛋白质、脂肪、维生素、油、纤维、矿物、糖、碳水化合物和醇的可食用物质在美国专利No.12/417,900中有所描述，其全部公开内容据此以引用的方式并入本文。

[0179] 物质

[0180] 修饰植物物质

[0181] 植物原料至少部分从一种或多种类型的修饰植物获得，如本文所讨论。在一些情况下，原料包括多于一种类型的植物，和/或植物的多于一个部分，如茎、果实和玉米植物棒。植物可为例如玉米、大豆、甜菜、棉花、油菜籽、马铃薯、稻谷、苜蓿或甘蔗植物。植物也可以是任何多种类型栽培的经基因修饰的植物。原料可包含不同类型植物、特定植物的不同部分的混合物，和/或植物物质与其他物质如生物质物质的混合物。

[0182] 在一些情况下，可使用整个植物。例如，在其中作物被不利生长条件（如，干旱、霜冻、溢流、害虫侵染）破坏的情况下，破坏的作物可用于本文所述的方法和工艺。

[0183] 其他原料物质

[0184] 除此之外或作为上述讨论的修饰植物物质的替代形式，原料可包括其他物质，如可以是或不可以是经基因修饰的生物质物质。生物质可以是例如纤维素或木质纤维素物质。此类物质包括纸材和纸材产物（如，聚涂层纸和牛皮纸）、木材、木材相关物质如刨花板、草、稻谷壳、蔗渣、黄麻、大麻、亚麻、竹子、剑麻、蕉麻、稻草、柳枝稷、苜蓿、干草、玉米棒、玉米秸秆、椰子毛；以及纤维素含量高的物质，如，棉花。原料可从天然的废纺织品物质，如零料、消费后废料如抹布获得。当使用纸材产物时，它们可为天然物质，如天然的废弃物质，或它们可为消费后废料。除天然原料之外，消费后、工业（如，碎屑）和加工废料（如，纸材加工的流出物）也可用作纤维来源。生物质原料也可得自或来源于人（如，污水）、动物或植物废料。另外的纤维素和木质纤维素物质在美国专利No.6,448,307、6,258,876、6,207,729、5,973,035和5,952,105中有所描述。

[0185] 在一些实施例中，生物质物质包括作为或包含具有一个或多个β-1,4-连接并且具有约3,000和50,000之间的数均分子量的物质的碳水化合物。此类碳水化合物是或包含纤维素(I)，其来源于通过β(1,4)-糖苷键缩合的（β-葡萄糖1）。该键与淀粉和其他碳水化合物中存在的α(1,4)-糖苷键有所区别。

[0186]

[0187] 淀粉物质包括淀粉本身，如玉米淀粉、小麦淀粉、马铃薯淀粉或稻谷淀粉、淀粉的衍生物，或包含淀粉的物质，例如可食用食物产品或作物。例如，淀粉物质可以是秘鲁胡萝卜、荞麦、香蕉、大麦、木薯、葛藤、酢浆草、西米、高粱、常规家用马铃薯、甘薯、芋头、薯蓣，或一种或多种豆，例如蚕豆、小扁豆或豌豆。任何两种或更多种淀粉物质的共混物也是淀粉物质。

[0188] 在某些情况下，生物质是微生物物质。微生物来源包括（但不限于）任何天然存在的或经基因修饰的微生物或生物体，它们包含或能够提供碳水化合物（如，纤维素）来源，例如，真核单细胞生物如真核单细胞动物（如，原生动物例如鞭毛虫、变形虫、纤毛虫和孢子虫）和真核单细胞植物（如，藻类例如囊泡虫、丝足虫、隐滴虫、眼虫、灰胞藻、定鞭藻、红藻、原生藻菌和绿鞭毛藻）。其他例子包括海藻、浮游生物（如，大型浮游生物、中型浮游生物、小型浮游生物、微型浮游生物、超微型浮游生物和极微型浮游生物）、浮游植物、细菌（如，革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和嗜极生物）、酵母和/或这些的混合物。在某些情况下，微生物生物质可从天然来源，如海洋、湖泊、水体如盐水或淡水或陆地获得。作为另外一种选择或除此之外，微生物生物质可从培养系统，如大规模干燥和润湿培养系统获得。

[0189] 糖化剂

[0190] 合适的酶包括能够降解生物质的纤维二糖酶和纤维素酶。

[0191] 合适的纤维二糖酶包括得自黑曲霉(Aspergillus niger)的纤维二糖酶，其以商TM品名NOVOZYME188 销售。

[0192] 纤维素酶能够降解生物质，并且可以来源于真菌或细菌。合适的酶包括来源于芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、腐质霉属(Humicola)、镰孢属(Fusarium)、草根霉属(Thielavia)、枝顶孢属(Acremonium)、金孢属(Chrysosporium)和木霉属(Trichoderma)的纤维素酶，并且包括如下种：腐质霉属、Coprinus、Thielavia、Fusarium、Myceliophthora、Acremonium、Cephalosporium、Scytalidium、Penicillium或Aspergillus（参见例如EP458162），尤其是由选自如下物种的菌株产生的那些：特异腐质霉(Humicola insolens)（重新分类为嗜热色串孢(Scytalidium thermophilum)，参见例如美国专利No.4,435,307）、灰盖鬼伞(Coprinus cinereus)、尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、嗜 热 毁 丝 菌 (Myceliophthora thermophila)、巨 多 孔 菌(Meripilus giganteus)、太瑞斯梭孢壳霉(Thielavia terrestris)、枝顶孢(Acremonium sp.)、桃色枝顶孢(Acremonium persicinum)、Acremonium acremonium、Acremonium brachypenium、Acremonium dichromosporum、Acremonium obclavatum、Acremonium pinkertoniae、红灰枝顶孢(Acremonium roseogriseum)、Acremonium incoloratum和Acremonium furatum；优选地来自如下物种：特异腐质霉DSM1800、尖孢镰孢菌DSM2672、嗜热毁丝菌CBS117.65、Cephalosporium sp.RYM-202、Acremonium sp.CBS478.94、Acremonium sp.CBS265.95、桃色枝顶孢CBS169.65、Acremonium acremonium AHU9519、Cephalosporium sp.CBS535.71、Acremonium brachypenium CBS866.73、Acremonium dichromosporum CBS683.73、Acremonium obclavatum CBS311.74、Acremonium pinkertoniae CBS157.70、Acremonium roseogriseum CBS134.56、Acremonium incoloratum CBS146.62和Acremonium furatum CBS299.70H。纤维分解酶也可从Chrysosporium，优选地Chrysosporium lucknowense菌株获得。另外，可使用木霉属（尤其是绿色木霉(Trichoderma viride)、里氏木霉(Trichoderma reesei)和康宁木霉(Trichoderma koningii)）、嗜碱芽孢杆菌属（参见例如美国专利No.3,844,890和EP458162）以及链霉菌属(Streptomyces)（参见例如EP458162）。

[0193] 可利用酶复合物，例如以商品名 得自杰能科(Genencore)的那些，例如 1500酶复合物。Accellerase1500酶复合物包含多种酶活性，
主要是外切葡聚糖酶、内切葡聚糖酶(2200-2800CMC U/g)、半纤维素酶和β-葡萄糖苷酶(525-775pNPG U/g)，并且具有的pH为4.6至5.0。酶复合物的内切葡聚糖酶活性以羟甲基纤维素活性单位(CMC U)表示，而β-葡萄糖苷酶活性以pNP-葡糖苷活性单位(pNPG U)TM
报告。在一个实施例中，使用 1500酶复合物和NOVOZYME 188纤维二糖酶
的共混物。

[0194] 发酵剂

[0195] 用于发酵的微生物可以是天然微生物和/或工程化的微生物。例如，微生物可以是细菌如纤维分解细菌、真菌如酵母、植物或原生生物如藻类、原生动物或类真菌原生生物如粘菌。当生物体相容时，可使用生物体的混合物。

[0196] 合适的发酵微生物具有将碳水化合物例如葡萄糖、果糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖、低聚糖或多糖转化为发酵产物的能力。发酵微生物包括酵母属(Sacchromyces spp.)，如酿酒酵母(Sacchromyces cerevisiae)（面包酵母）、糖化酵母(Saccharomyces distaticus)、葡萄汁酵母(Saccharomyces uvarum)；克鲁维酵母菌属(Kluyveromyces)，如马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)、脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)物种；假丝酵母属(Candida)，如伪热带念珠菌(Candida pseudotropicalis)和Candida brassicae；树干毕赤酵母(Pichia stipitis)（与休哈塔假丝酵母(Candida shehatae)相近）；棒孢酵母属(Clavispora)，如葡萄牙棒孢酵母(Clavispora lusitaniae)和Clavispora opuntiae物种；管囊酵母属(Pachysolen)，如嗜鞣管囊酵母(Pachysolen tannophilus)物种；酒香酵母属(Bretannomyces)，如克劳森酒香酵母(Bretannomyces clausenii) 物 种 的 菌 株（Philippidis,G.P.,1996,Cellulose bioconversion technology,in Handbook on Bioethanol:Production and Utilization,Wyman,C.E.,ed.,Taylor&Francis,Washington,DC,179-212）。其他合适的微生物包括例如运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)、热纤梭菌(Clostridium thermocellum)（Philippidis，1996年，同上）、糖丁基丙酮梭菌(Clostridium saccharobutylacetonicum)、糖丁醇梭菌(Clostridium saccharobutylicum)、紫色梭菌(Clostridium Puniceum)、拜氏梭菌(Clostridium beijernckii)、丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum)、丛梗孢酵母(Moniliella pollinis)、解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)、出芽短梗霉(Aureobasidium sp.)、三型孢菌(Trichosporonoides sp.)、变异三角酵母(Trigonopsis variabilis)、丝孢酵母(Trichosporon sp.)、丛梗孢酵母(Moniliella acetoabutans)、Typhula variabilis、木兰假丝酵母(Candida magnoliae)、黑粉菌(Ustilaginomycetes)、Pseudozyma tsukubaensis、接 合 酵 母 属(Zygosaccharomyces)、德 巴 利 酵 母 属(Debaryomyces)、汉逊酵母属(Hansenula)和毕赤酵母属(Pichia)酵母物种以及暗丛梗孢形圆酵母(Torula)属真菌。

[0197] 可商购获得的酵母包括例如 /Lesaffre Ethanol Red（得自美国Red Star/Lesaffre）、 （得自Fleischmann’s Yeast，美国Bums Philip食
品公 司(Bums Philip Food Inc.)分部）、 （得自 Alltech，现 为
Lalemand）、 （得自瑞典Gert Strand AB）和 （得自DSM
Specialties）。

[0198] 其他实施例

[0199] 本发明的多个实施例已有所描述。然而，应当理解在不脱离本发明的精神和范围的情况下可作出各种修改。

[0200] 例如，可根据原料的木质素含量调整本文讨论的任何加工步骤的加工参数，例如美国专利No.12/704,519中所公开，其全部公开内容以引用的方式并入本文。

[0201] 加工可包括美国专利申请序列No.13/276,192中描述的任何特征，其全部公开内容以引用的方式并入本文，包括处理纤维素或木质纤维素物质，以通过用相对较低的电压、高功率电子束辐射辐照物质，在糖化前煮沸或浸渍原料，以及用至少0.5兆拉德/秒剂量率的电子束辐照纤维素或木质纤维素物质来改变物质的结构。

[0202] 虽然在一个物理位置进行本文所述的所有工艺是可能的，但在一些实施例中，工艺可在多个位置完成，和/或可在运输期间进行。

[0203] 可捕获和利用本文所述的任何工艺中释放的木质素。例如，木质素可用作捕获的塑料，或可合成提升至其他塑料。在某些情况下，可用作能量来源，如燃烧以提供热量。在某些情况下，也可转化成木质素磺酸盐，木质素磺酸盐可用作粘合剂、分散剂、乳化剂或螯合剂。

[0204] 起始原料木质素含量的测量可用于此类木质素捕获工艺的过程控制。

[0205] 当用作粘合剂时，木质素或木质素磺酸盐可以例如用于煤块、陶瓷、结合炭黑、结合肥料和除草剂、作为粉尘抑制剂、制备胶合板和刨花板、结合动物饲料、作为纤维玻璃粘合剂、作为油毡浆料粘合剂以及作为土壤稳定剂。

[0206] 作为分散剂时，木质素或木质素磺酸盐可用于例如混凝土混合物、粘土和陶瓷、染料和颜料、皮革鞣剂和石膏板。

[0207] 作为乳化剂时，木质素或木质素磺酸盐可用于例如沥青、颜料和染料、杀虫剂和蜡乳液。

[0208] 作为螯合剂时，木质素或木质素磺酸盐可用于例如微营养系统，清洁化合物和水处理系统如锅炉和冷却系统。

[0209] 作为加热源时，木质素通常具有比全纤维素（纤维素和半纤维素）更高的能量含量，因为其包含的碳比全纤维素多。例如，干燥木质素可具有约11,000和12,500BTU/磅之间的能量含量，而全纤维素只有7,000和8,000BTU/磅。因此，木质素可致密化，并且转化为块和颗粒用于燃烧。例如，木质素可通过本文所述的任何方法转化为颗粒。对于较慢的燃烧颗粒或块，木质素可为交联的，例如施加约0.5兆拉德和5兆拉德之间的辐射剂量。交联可使燃烧形状因子变慢。形状因子例如颗粒或块可通过在缺乏空气的条件下，如在400和950℃之间热解来转化为“合成煤”或木炭。在热解之前，交联木质素以保持结构完整性可为所期望的。

[0210] 因此，其他实施例在以下权利要求的范围内。

[0211] 经基因修饰的植物的例子

[0212] 以下美国专利和美国专利申请以举例的方式公开了用于本文所述的工艺或连同本文所述的任何物质的经基因修饰的物质（如，植物、植物部分）。

[0213] 7566817 7763783 7714209 7659459 7615694 7534943

[0214] 7652202 7763782 7714208 7659458 7615693 7531724

[0215] 7569747 7763780 7709712 7659457 7615692 7528305

[0216] 7405344 7759563 7709711 7659456 7612268 7528304

[0217] 7683237 7759562 7709710 7659455 7612267 7525029

[0218] 7615621 7759561 7709709 7655849 7612266 7525027

[0219] 7816591 7759560 7709708 7655847 7612260 7525026

[0220] 7816590 7759559 7705221 7655846 7608765 7521614

[0221] 7816589 7750215 7705220 7655845 7608763 7521613

[0222] 7816587 7745707 7705216 7655844 7608762 7521612

[0223] 7807904 7741547 7700859 7655841 7605316 7521609

[0224] 7807903 7741546 7700858 7642433 7605315 7521607

[0225] 7807902 7737348 7700857 7642432 7605314 7518044

[0226] 7807901 7737347 7692077 7642431 7605313 7518043

[0227] 7807900 7737346 7692076 7642430 7605312 7518042

[0228] 7807899 7737345 7687689 7642429 7605311 7518041

[0229] 7807898 7737344 7683243 7642428 7605309 7514612

[0230] 7807897 7737343 7683242 7638694 7601900 7514611

[0231] 7807896 7732685 7683241 7638693 7601899 7514610

[0232] 7807895 7732684 7683239 7638692 7598441 7514609

[0233] 7807894 7728208 7678976 7638691 7598440 7511204

[0234] 7807893 7723589 7678975 7638690 7595440 7511203

[0235] 7807892 7723588 7678974 7638689 7595439 7511202

[0236] 7807891 7723587 7678973 7632995 7595438 7511201

[0237] 7807890 7723586 7678972 7632994 7595437 7511200

[0238] 7807889 7723585 7678971 7632990 7592527 7507880

[0239] 7807888 7718870 7678970 7629519 7592526 7507879

[0240] 7807887 7718869 7678969 7629518 7592525 7504569

[0241] 7804011 7718868 7678968 7629517 7592521 7504567

[0242] 7804010 7718867 7678967 7629516 7592520 7504566

[0243] 7804009 7718866 7678966 7629515 7582434 7501565

[0244] 7804008 7718865 7674961 7626101 7576265 7501564

[0245] 7804007 7718864 7671256 7626100 7566822 7498494

[0246] 7804006 7718863 7667113 7626099 7563966 7495157

[0247] 7804005 7718862 7667112 7626098 7563965 7495156

[0248] 7804004 7718861 7667111 7622660 7560625 7495155

[0249] 7804003 7718860 7667110 7622659 7557279 7488874

[0250] 7804002 7718859 7667109 7619153 7550655 7488873

[0251] 7804001 7714216 7663037 7619152 7547827 7488872

[0252] 7804000 7714215 7663036 7619151 7547826 7485783

[0253] 7803999 7714214 7663035 7619150 7547824 7479589

[0254] 7786359 7714213 7663034 7619147 7544868 7479586

[0255] 7781651 7714212 7659462 7615697 7544867 7479585

[0256] 7781650 7714211 7659461 7615696 7541527 7476785

[0257] 7772469 7714210 7659460 7615695 7541523 7476784

[0258] 7476783 7381870 7262348 7179972 7737332 7544863

[0259] 7473830 7381869 7259303 7179969 7732679 7544862

[0260] 7473829 7381868 7256335 7176365 7728206 7534939

[0261] 7473826 7375266 7256334 7173172 7718854 7531718

[0262] 7470839 7375265 7256333 7169983 7714202 7528246

[0263] 7470836 7371948 7250564 7166778 7714201 7521594

[0264] 7468477 7371947 7247777 7166777 7709706 7511130

[0265] 7462765 7371946 7241944 7166776 7709705 7465849

[0266] 7462764 7371945 7235726 7164068 7388135 7423203

[0267] 7462763 7368643 7235725 7164065 7388134 7417177

[0268] 7459613 7368640 7235724 7161070 7381861 7417176

[0269] 7459612 7365252 7235722 7161069 7253345 7408096

[0270] 7459611 7365251 7235720 7157630 7250563 7405343

[0271] 7456345 7365250 7232945 7157626 7247774 7385107

[0272] 7456344 7365249 7232944 7157625 7223907 7365241

[0273] 7456343 7361820 7232943 7157624 7189514 7335812

[0274] 7456342 7361819 7230173 7157281 RE39.580 7329799

[0275] 7453031 7361818 7227062 7154031 7816581 7304206

[0276] 7453030 7361817 7227061 7151208 7812219 7294711

[0277] 7449622 7361815 7223908 7148410 7807874 7288408

[0278] 7449621 7361814 7220900 6906250 7807873 7268276

[0279] 7449620 7358427 7217874 6864409 7807812 7262339

[0280] 7449619 7355107 7217873 6855877 7807811 7250501

[0281] 7439424 7351890 7217872 6825400 7803928 7244877

[0282] 7432427 7351888 7217871 6114610 7799970 7230165

[0283] 7432426 7342156 7211717 6103959 7790953 7227056

[0284] 7429696 7342155 7211716 6103958 7786353 7217867

[0285] 7423207 7342152 7208663 6084161 7786350 7217865

[0286] 7423206 7339101 7208662 6054640 7750207 7205457

[0287] 7423204 7339100 7208661 7112725 7745694 7195917

[0288] 7417183 7339099 7208660 7825304 7728190 7186893

[0289] 7417182 7339098 7205466 7825303 7714189 7157619

[0290] 7414181 7335827 7205465 7825302 7705201 7151204

[0291] 7408099 7335826 7205464 7825301 7700838 7148398

[0292] 7399915 7335822 7199291 7825300 7692067 7141722

[0293] 7399912 7329803 7199290 7825300 7674952 7138278

[0294] 7399911 7321088 7193146 7820888 7674894 7122719

[0295] 7394003 7321087 7193143 7820887 7662940 7112717

[0296] 7390946 7321086 7189906 7803997 7655838 7078592

[0297] 7390945 7321085 7189904 7799972 7635764 7067722

[0298] 7388140 7321084 7189903 7750213 7625738 7064249

[0299] 7388139 7319182 7186906 7750212 7615680 7022897

[0300] 7385122 7317155 7186904 7745704 7605244 6943281

[0301] 7385121 7297848 7186903 7741543 7601890 6916970

[0302] 7385120 7294772 7186901 7737335 7595382 6841717

[0303] 7381874 7288704 7186899 7737334 7589188 6822142

[0304] 7381873 7268279 7183471 7737333 7553952 6803501

[0305] 6620988 7728196 7626089 7557277 7491870 7381867

[0306] 6538179 7723583 7626088 7557276 7488869 7381866

[0307] 6538178 7714198 7626087 7557275 7488868 7378578

[0308] 6501009 7709703 7626086 7557274 7488867 7378577

[0309] 6476295 7705211 7622646 7557273 7485781 7375262

[0310] 6448476 7705208 7622645 7557272 7485780 7371938

[0311] 6448473 7705207 7622644 7557271 7482516 7368637

[0312] 6284949 7700849 7622643 7557270 7479583 7368635

[0313] 6281016 7700847 7622642 7554016 7479582 7358420

[0314] 6177615 7700846 7619143 7554015 7468474 7355103

[0315] 6175061 7700844 7619142 7554014 7459609 7355102

[0316] 6156573 7700843 7619141 7554013 7453029 7351886

[0317] 6107549 7692070 7619140 7550653 7453028 7351885

[0318] 6023013 7687686 7619139 7531722 7446244 7345228

[0319] 5463175 7687685 7615688 7531721 7442864 7345227

[0320] 7531725 7687684 7615687 7531720 7442863 7345226

[0321] 7468476 7678965 7612259 7531719 7442862 7345225

[0322] 7253346 7678964 7608761 7528306 7442860 7345224

[0323] 7214863 7678963 7605306 7528301 7439422 7342151

[0324] 7186900 7678962 7598434 7525028 7423200 7342150

[0325] 7166780 7659454 7595435 7525025 7423199 7332656

[0326] 7166779 7659453 7592517 7525019 7414177 7332655

[0327] 7157628 7659452 7592516 7525018 7414176 7329801

[0328] 7157627 7655839 7592514 7525017 7408097 7326832

[0329] 7563949 7652199 7592513 7521608 7405349 7321082

[0330] 7807884 7652198 7592512 7521605 7405348 7321079

[0331] 7799973 7652197 7592511 7518036 7399909 7314983

[0332] 7790964 7649129 7582810 7514607 7399907 7314982

[0333] 7786357 7649128 7579525 7514606 7396983 7314981

[0334] 7781649 7649127 7579524 7514605 7394000 7314980

[0335] 7777104 7649126 7579523 7514604 7390942 7312382

[0336] 7777103 7642413 7572960 7514603 7390941 7312380

[0337] 7767887 7642412 7572958 7514602 7390940 7309818

[0338] 7759556 7642411 7572957 7507878 7390939 7307201

[0339] 7759553 7642410 7572956 7507877 7390938 7304218

[0340] 7759551 7642409 7569752 7504565 7388132 7304214

[0341] 7732677 7642408 7569751 7504564 7388131 7304213

[0342] 7732676 7642407 7569750 7501563 7388130 7301076

[0343] 7732675 7632987 7566821 7501562 7385117 7297843

[0344] 7732674 7632985 7566820 7501560 7385116 7294770

[0345] 7732673 7629510 7563955 7498491 7385115 7294768

[0346] 7732672 7629509 7563954 7498490 7385113 7294765

[0347] 7728204 7629508 7563953 7498489 7385112 7294764

[0348] 7728203 7629507 7560619 7498486 7385111 7294763

[0349] 7728202 7629506 7560618 7498485 7385110 7291771

[0350] 7728201 7626091 7560617 7498484 7385109 7291769

[0351] 7728199 7626090 7560616 7491871 7385108 7285704

[0352] 7279621 7132591 7045687 6900373 6080916 5902923

[0353] 7276648 7129399 7045686 6900372 6063990 5898100

[0354] 7271324 7126046 7041881 6894207 6063989 5880346

[0355] 7265277 7119260 7041880 6888049 6051761 5880345

[0356] 7265276 7119259 7041879 6888048 6043414 5880344

[0357] 7265275 7119258 7038114 6884927 6040499 5872304

[0358] 7265274 7115801 7034210 6884926 6037529 5872303

[0359] 7265273 7109399 7034209 6884925 6034303 5866774

[0360] 7265272 7105728 7030301 6884924 6034302 5866773

[0361] 7265271 7105727 7030300 6884923 6034301 5866772

[0362] 7265270 7105726 7019199 6881879 6034300 5866771

[0363] 7259299 7102062 7012174 6875908 6034299 5859352

[0364] 7259298 7102061 7005563 6870079 6031159 5723745

[0365] 7256330 7098385 7002062 6861579 6020542 7268274

[0366] 7247772 7098384 7002058 6858784 6020541 7402731

[0367] 7247771 7091403 6982367 6858783 6018108 6865556

[0368] 7244881 7087815 6982366 6852912 6018107 5424412

[0369] 7241941 7084328 6979761 6849786 6005171 5463175

[0370] 7241939 7084326 6979760 6849785 6005170 5484956

[0371] 7235718 7084325 6972355 6846973 6002073 5554798

[0372] 7217870 7084324 6972354 6835873 5998709 559387

[0373] 7217869 7081572 6972353 6828489 5998708 5641876

[0374] 7217868 7078600 6969787 6815589 5998707 5659122

[0375] 7196253 7078598 6967263 6815588 5998706 571084

[0376] 7196252 7078597 6960707 6815587 5998705 5728925

[0377] 7196251 7078595 6958436 6815586 5998704 5750871

[0378] 7193140 7074989 6953876 6809237 5998703 5804425

[0379] 7193139 7074988 6951973 6781040 5990391 5859347

[0380] 7193137 7071390 6936754 6653534 5986179 6020190

[0381] 7189900 7071389 6936753 6198027 5986178 6025545

[0382] 7189898 7071388 6933423 6177618 5981851 6040497

[0383] 7183467 7071387 6924418 6169227 5981850 6051753

[0384] 7183465 7067723 6919498 6137034 5981849 6180774

[0385] 7183464 7064253 6914174 6133510 5981848 6218188

[0386] 7183463 7060878 6914173 6124527 5981845 6340593

[0387] 7183462 7060877 6914172 6121518 5977449 6489542

[0388] 7183461 7057096 6911585 6121517 5977448 6501009

[0389] 7176359 7057095 6911581 6121516 5977447 6548291

[0390] 7176358 7057094 6911580 6121515 5977444 6573240

[0391] 7176357 7057093 6911579 6114604 5973235 6645497

[0392] 7173168 7057092 6911578 6103957 5969218 6660911

[0393] 7169976 7053280 6906248 6100454 5969217 6737273

[0394] 7169975 7053279 6906247 6096949 5945588 6753463

[0395] 7169974 7053272 6906246 6091005 5942666 6825400

[0396] 7166774 7049494 6903253 6087562 5932786 6893872

[0397] 7148408 7049493 6903251 6084159 5929310 6900371

[0398] 7138570 7045691 6900376 6080918 5907088 6943282

[0399] 6949696 7482510 7834247 7772465 7663031 7601894

[0400] 6962705 7473819 7834246 7772370 7663029 7598443

[0401] 7064249 7465850 7834245 7767889 7655848 7598442

[0402] 7112665 7456337 7834240 7767888 7655843 7598439

[0403] 7112725 7456335 7829764 7763778 7655842 7598438

[0404] 7141722 7442853 7829760 7763465 7652201 7598437

[0405] 7157281 7439417 7825310 7759564 7652200 7598435

[0406] 7223907 7435875 7825309 7759555 7652195 7595436

[0407] 7227056 7427698 7825308 7759554 7645923 7592524

[0408] 7250501 7427696 7825307 7759544 7645922 7592523

[0409] 7288643 7425666 7825299 7759543 7645921 7592522

[0410] 7381861 7425665 7825294 7754949 7642421 7592519

[0411] 7435807 7423196 7825234 7754948 7642420 7592505

[0412] 7449564 7399904 7820895 7750216 7642419 7589264

[0413] 7514544 7399903 7820894 7745706 7642418 7589263

[0414] RE38825 7375209 7820893 7745705 7642417 7589261

[0415] RE39247 7317140 7820892 7745702 7638695 7589260

[0416] 7829761 7303919 7820891 7745701 7638688 7589259

[0417] 7807882 7271316 7820886 7741545 7632993 7589258

[0418] 7803987 7259294 7820885 7737342 7632992 7589257

[0419] 7799971 7238856 7816586 7737341 7632989 7589176

[0420] 7795500 7235713 7816585 7737340 7632988 7586028

[0421] 7795414 7220585 7812231 7737336 7629514 7586027

[0422] 7790873 7189893 7812230 7737330 7629513 7586026

[0423] 7763777 7186561 7812226 7736897 7629512 7586025

[0424] 7763776 7179962 7812225 7732683 7629511 7582816

[0425] 7718858 7176026 7812223 7732668 7629505 7582815

[0426] 7718857 7166767 7812216 7728207 7629504 7582814

[0427] 7714190 7164057 7807883 7718856 7624533 7582813

[0428] 7709698 7161063 7807876 7714205 7622647 7582812

[0429] 7652203 7135618 7803998 7714187 7622637 7582811

[0430] 7622570 7125719 7803996 7714184 7619149 7582808

[0431] 7619137 7105723 7803993 7709702 7619148 7579530

[0432] 7608759 7087261 7803990 7705219 7615690 7579529

[0433] 7608757 7034208 7803989 7705218 7612265 7579522

[0434] 7598431 6867351 7799977 7700856 7612264 7576271

[0435] 7579517 6825399 7799975 7700855 7612263 7576270

[0436] 7563948 6818805 7799974 7700854 7612262 7576269

[0437] 7521598 6784338 7799566 7700836 7612256 7576268

[0438] 7521597 6774288 7795508 7700832 7612254 7576267

[0439] 7514599 6720477 7795506 7692061 7612251 7576266

[0440] 7504559 6710229 7790969 7687687 7608764 7572963

[0441] 7498482 6689939 7790874 7683240 7608755 7572962

[0442] 7498429 6677504 7777107 7667115 7608752 7572961

[0443] 7495151 6329518 7777106 7667107 7605307 7572955

[0444] 7485775 6225526 7772468 7663033 7601898 7569757

[0445] 7482511 7834257 7772467 7663032 7601897 7569756

[0446] 7569755 7525023 7456339 7371936 7317149 7276650

[0447] 7569754 7525022 7442861 7365253 7317148 7276649

[0448] 7569753 7525021 7439425 7361812 7317147 7276647

[0449] 7569749 7525020 7439421 7361807 7317146 7276596

[0450] 7566819 7521611 7439348 7358425 7317145 7273975

[0451] 7563964 7521610 7435885 7358424 7317143 7273973

[0452] 7563963 7521604 7435883 7358423 7317137 7273972

[0453] 7563962 7521603 7435881 7355108 7314990 7273971

[0454] 7563961 7521602 7435880 7355106 7314989 7273965

[0455] 7563960 7521601 7435879 7355105 7314988 7271327

[0456] 7563959 7518037 7432424 7355104 7314987 7271326

[0457] 7563958 7514601 7432423 7351882 7312385 7271323

[0458] 7563957 7511205 7432422 7351878 7312384 7271319

[0459] 7560624 7511196 7432421 7348469 7312377 7270380

[0460] 7560623 7511195 7432418 7348468 7312375 7268278

[0461] 7560612 7511194 7429695 7345230 7309816 7268277

[0462] 7557266 7511193 7427702 7342157 7306946 7268270

[0463] 7557263 7511192 7427701 7342154 7304222 7268226

[0464] 7554020 7511188 7427700 7339097 7304221 7265279

[0465] 7553951 7504568 7423202 7339096 7304212 7265265

[0466] 7550657 7504558 7423197 7339092 7304211 7262350

[0467] 7550656 7501561 7420103 7335828 7301082 7262349

[0468] 7550575 7498488 7414180 7335825 7301080 7262347

[0469] 7547832 7498487 7414179 7335824 7301079 7262346

[0470] 7547831 7498413 7414174 7335823 7301075 7262345

[0471] 7547830 7495154 7411118 7335817 7301069 7262342

[0472] 7547829 7495150 7411113 7332660 7297850 7259305

[0473] 7547825 7491869 7411112 7332659 7297849 7259304

[0474] 7547822 7485779 7399914 7332658 7297841 7259302

[0475] 7544869 7485778 7399910 7332650 7294774 7259301

[0476] 7544866 7482515 7399908 7329806 7294769 7256332

[0477] 7544865 7482513 7399906 7329805 7294767 7256331

[0478] 7544864 7479588 7396980 7329804 7294766 7256322

[0479] 7544857 7479581 7393999 7326836 7291774 7256280

[0480] 7541526 7476781 7388141 7326835 7291773 7253000

[0481] 7541525 7473828 7388137 7326833 7288703 7250552

[0482] 7541524 7473827 7388133 7326830 7288701 7241943

[0483] 7541521 7473821 7388128 7323623 7288700 7241942

[0484] 7541520 7470838 7388125 7321089 7288699 7241940

[0485] 7541517 7470834 7381872 7321083 7285707 7241934

[0486] 7538261 7470833 7381871 7321031 7285706 7238859

[0487] 7528308 7468278 7381865 7319183 7285702 7235723

[0488] 7528307 7465856 7381863 7317154 7282629 7232946

[0489] 7528300 7465852 7378574 7317153 7282627 7230172

[0490] 7528299 7462766 7375264 7317152 7282626 7230171

[0491] 7528293 7462760 7375263 7317151 7279615 7230169

[0492] 7525024 7459610 7371944 7317150 7276652 7230158

[0493] 7227065 7179971 7151207 7064255 7005565 6951974

[0494] 7227064 7179970 7151205 7064252 7002061 6949699

[0495] 7227063 7179968 7148406 7064251 7002056 6946589

[0496] 7227060 7179967 7148401 7064250 6998518 6943279

[0497] 7227059 7179963 7141721 7064247 6995305 6936756

[0498] 7227058 7179955 7129402 7060879 6995304 6936755

[0499] 7220902 7179599 7129401 7060813 6995303 6936752

[0500] 7220901 7176364 7129395 7053286 6992240 6936751

[0501] 7214865 7176363 7122725 7053285 6992239 6933427

[0502] 7214864 7176362 7115802 7053284 6992238 6933425

[0503] 7214860 7176360 7112731 7053283 6992237 6930230

[0504] 7214857 7176356 7112729 7053282 6989481 6930229

[0505] 7214855 7176349 7112728 7053275 6989480 6930225

[0506] 7214854 7176027 7109403 7049499 6989479 6927327

[0507] 7214852 7173174 7109391 7049495 6989478 6927326

[0508] 7211718 7173173 7109390 7045692 6989475 6924421

[0509] 7211714 7169988 7102064 7045682 6989474 6921852

[0510] 7211712 7169987 7102063 7041887 6987217 6921850

[0511] 7205455 7169986 7098390 7041886 6987212 6921847

[0512] 7205453 7169985 7098381 7041874 6984778 6919500

[0513] RE39.562 7169984 7094957 7038109 6982371 6919499

[0514] 7202403 7169980 7094956 7038108 6979764 6916975

[0515] 7202402 7169979 7091407 7034214 6979763 6914178

[0516] 7199294 7169978 7091406 7034213 6979759 6914177

[0517] 7199293 7169977 7091398 7034211 6977327 6914171

[0518] 7199292 7169973 7087823 7030303 6974900 6914170

[0519] 7199289 7166784 7087822 7030302 6974899 6911587

[0520] 7196256 7166782 7087821 7030298 6972357 6911577

[0521] 7196255 7166781 7087820 7026533 6972356 6909039

[0522] 7196254 7166769 7084335 7022904 6972352 6909038

[0523] 7193145 7166765 7084332 7022902 6969790 6906251

[0524] 7193144 7164070 7084327 7022899 6969789 6906243

[0525] 7193141 7164069 7081566 7019200 6969788 6905857

[0526] 7193136 7164067 7078603 7019198 6969786 6903254

[0527] 7193135 7164066 7078602 7015386 6967269 6903205

[0528] 7193130 7164063 7078601 7015385 6967268 6900378

[0529] 7189905 7164062 7078596 7015381 6967267 6900377

[0530] 7189902 7164061 7078589 7015380 6967264 6897365

[0531] 7189901 7164056 7074991 7015379 6965063 6897364

[0532] 7189899 7161074 7071397 7015376 6960708 6897363

[0533] 7189889 7161073 7071396 7015375 6958438 6897362

[0534] 7186905 7161072 7071395 7012177 6958437 6897361

[0535] 7186902 7161071 7071394 7012176 6956153 6897360

[0536] 7186896 7161068 7071393 7009094 6956150 6891090

[0537] 7183472 7161065 7067727 7009093 6953878 6891085

[0538] 7183469 7157632 7067720 7009087 6953877 6888051

[0539] 7183460 7154030 7064256 7005566 6951975 6887708

[0540] 6881881 6815585 6759578 6706949 6555732 6333452

[0541] 6881880 6815584 6759577 6700041 6555673 6333451

[0542] 6878865 6815583 6756530 6693231 6541684 6331661

[0543] 6878864 6815578 6756529 6677503 6538177 6329579

[0544] 6878863 6812384 6756528 6677502 6538176 6326530

[0545] 6875907 6812383 6753464 6667427 6528704 6326529

[0546] 6872874 6812380 6750384 6660907 6518487 6323402

[0547] 6872873 6809242 6750380 6657107 6518483 6323401

[0548] 6864411 6809241 6747196 6646182 6515202 6323400

[0549] 6864408 6809236 6747193 6639131 6504084 6323399

[0550] 6864407 6806408 6743970 6639126 6504083 6323398

[0551] 6861577 6806407 6740798 6635807 6504082 6323015

[0552] 6858785 6806406 6740796 6630615 6479730 6320106

[0553] 6858782 6806405 6740795 6630614 6476292 6320105

[0554] 6858781 6806404 6737566 6627797 6472185 6316704

[0555] 6858778 6806401 6737565 6617499 6444874 6316703

[0556] 6855878 6803508 6737562 6617498 6441151 6316702

[0557] 6855876 6803498 6737560 6613967 6433259 6316700

[0558] 6855875 6800796 6734348 6613966 6429362 6313384

[0559] 6855874 6800795 6734347 6613965 6426452 6313383

[0560] 6855871 6797868 6734345 6613964 6423888 6313382

[0561] 6852913 6797867 6734341 6613963 6423886 6313381

[0562] 6849791 6797866 6730837 6610911 6410829 6313376

[0563] 6849789 6797865 6730836 6610910 6407315 6313375

[0564] 6849788 6797864 6730835 6608243 6403862 6310274

[0565] 6849787 6797863 6730834 6608240 6403860 6307132

[0566] 6846976 6797859 6730829 6605762 6399856 6307131

[0567] 6846975 6794563 6727413 6605761 6392127 6303851

[0568] 6846974 6791016 6727412 6605760 6392126 6297433

[0569] 6844488 6784350 6727410 6605759 6388179 6297432

[0570] 6838593 6784349 6723903 6605758 6388171 6297426

[0571] 6835877 6784347 6723902 6605757 6388169 6291745

[0572] 6835875 6784341 6720487 6605756 6384302 6288310

[0573] 6833498 6781043 6720486 6605755 6372961 6287843

[0574] 6831215 6781042 6720481 6600095 6369301 6284953

[0575] 6828493 6781041 6720478 6586659 6369300 6284950

[0576] 6828490 6777599 6720475 6586657 6362400 6284948

[0577] 6825405 6777598 6717040 6583343 6359201 6271439

[0578] 6825404 6777597 6717039 6583342 6346657 6271437

[0579] 6825397 6777596 6717038 6583341 6344603 6268553

[0580] 6822144 6777590 6717037 6580018 6342659 6265646

[0581] 6822140 6774290 6717036 6576819 6339186 6265636

[0582] 6818813 6774289 6717033 6576814 6339144 6259005

[0583] 6818811 6774282 6713666 6573433 6337100 6259004

[0584] 6818809 6770802 6713665 6566589 6335476 6255090

[0585] 6818808 6765132 6706954 6566584 6335197 6248935

[0586] 6815592 6759580 6706951 6563020 6333453 6242673

[0587] 6242672 6156958 6111167 5990392 5902921 5792909

[0588] 6235976 6153817 6107551 5990389 5900526 5792908

[0589] 6235972 6153816 6107550 5986185 5900524 5792907

[0590] 6232529 6147285 6107545 5986184 5895835 5783190

[0591] 6232527 6147284 6100030 5986183 5889188 5773697

[0592] 6229079 6147283 6096953 5981854 5866768 5773684

[0593] 6229078 6143962 6096951 5977457 5866767 5773682

[0594] 6229077 6143956 6096947 5977456 5866766 5770790

[0595] 6229074 6143955 6093875 5977451 5866765 5767347

[0596] 6229073 6143954 6091007 5977445 5861541 5767344

[0597] 6225537 6140562 6091006 5973237 5859354 5767343

[0598] 6225529 6140557 6087567 5973234 5859341 5767340

[0599] 6222103 6137037 6087566 5962772 5859320 5763757

[0600] 6222102 6137036 6087565 5962771 5859319 5763747

[0601] 6222101 6133514 6087564 5959185 5859318 5763746

[0602] 6215049 6133513 6087559 5955361 5859317 5763744

[0603] 6211445 6133508 6084164 5952550 5859316 5763743

[0604] 6211440 6130370 6084160 5952549 5859313 5763243

[0605] 6211437 6127610 6080919 5948957 5852226 5750868

[0606] 6211435 6127609 6080913 5945587 5852225 5750849

[0607] 6211434 6127603 6077998 5945586 5850024 5750847

[0608] 6211433 6127602 6077997 5942671 5850016 5750843

[0609] 6198026 6127600 6077993 5942670 5850013 5750842

[0610] 6197561 6124535 6075186 5942669 5850012 5750841

[0611] 6194638 6124534 6075182 5942668 5850011 5750839

[0612] 6194637 6124533 6072104 5942667 5850010 5750838

[0613] 6191343 6124532 6069304 5939608 5850009 5750835

[0614] 6188001 6124531 6057491 5939607 5850007 5750834

[0615] 6188000 6124530 6054639 5936148 5844118 5750832

[0616] 6184448 6124529 6040505 5936147 5844117 5750831

[0617] 6184445 6124526 6037530 5936142 5844116 5750829

[0618] 6184439 6121524 6037523 5936141 5841015 5741684

[0619] 6180857 6121523 6028254 5936140 5827940 5736627

[0620] 6180856 6121522 6028252 5929313 5824844 5731499

[0621] 6180850 6121520 6025547 5929311 5824524 5731497

[0622] 6177613 6121514 6020543 5929301 5817918 5731496

[0623] 6177611 6118056 6018113 5920002 5811651 5731494

[0624] 6175065 6118055 6018112 5917134 5811650 5731493

[0625] 6175058 6118054 6018111 5917130 5811639 5731492

[0626] 6169234 6118053 6018110 5917129 5811638 5731491

[0627] 6166305 6118052 6018109 5917125 5811637 5728926

[0628] 6166303 6118051 6015941 5912417 5804692 5728921

[0629] 6166296 6114614 6013859 5910634 5804691 5728920

[0630] 6162968 6114613 6005172 5910633 5792915 5728919

[0631] 6162964 6114612 6005168 5908976 5792912 5728558

[0632] 6160211 6114607 5998711 5907086 5792911 5723723

[0633] 6160209 6111173 5990393 5905189 5792910 5723722

[0634] 5717129 5541352 5159133 6495738 5451514

[0635] 5708189 5534661 5159132 6410828

[0636] 5689036 5530184 5157208 6384207

[0637] 5689034 5527986 5157206 6331664

[0638] 5675066 5506368 5097096 6323395

[0639] 5639946 5506367 5097095 6166302

[0640] 5638637 5502272 5097093 6048838

[0641] 5633427 5495069 5097092 7799906

[0642] 5625133 5495066 5095174 7723584

[0643] 5625132 5495065 5082992 7709697

[0644] 5625130 5491295 5082991 7674951

[0645] 5625129 5491290 5049503 7663023

[0646] 5618987 5491289 4996049 7598430

[0647] 5608140 5491287 4812600 7288409

[0648] 5608139 5491286 4812599 7232941

[0649] 5608138 5478369 4806669 7148406

[0650] 5602318 5476999 4806652 7135616

[0651] 5602317 5463173 4737596 7087426

[0652] 5602312 5461171 4731499 7071384

[0653] 5585538 5453564 7820883 7071376

[0654] 5585537 5444178 7795395 7049485

[0655] 5583210 5436390 7728195 7012172

[0656] 5576472 5434346 7723582 6906239

[0657] 5574209 5432068 7723581 6855864

[0658] 5574208 5426041 7723580 6831208

[0659] 5569822 5416254 7723579 6703539

[0660] 5569821 5387758 7723578 6653528

[0661] 5569819 5387755 7723577 6635805

[0662] 5569818 5387754 7718852 6610908

[0663] 5569817 5367109 7709707 6489538

[0664] 5569816 5365014 7709623 6479732

[0665] 5567861 5356799 7671253 6476291

[0666] 5563326 5354941 7667100 6455762

[0667] 5563325 5349119 7635798 6441272

[0668] 5563323 5347081 7566818 6252135

[0669] 5563322 5347080 7456340 6242381

[0670] 5563321 5347079 7411117 6211432

[0671] 5563320 5316930 7371935 6204434

[0672] 5563055 5304720 7355100 6066780

[0673] 5557038 5304719 7348473 6015943

[0674] 5557035 5285004 7332657 5981837

[0675] 5557034 5276265 7179965 5959178

[0676] 5545814 5276264 7071386 5952486

[0677] 5545813 5260503 7071385 5922928

[0678] 5545812 5245125 6791013 5886243

[0679] 5545809 5220114 6753460 5850020

[0680] 5543575 5159134 6753459 5646333

[0681] 20100071092 20100293639 20100275304

[0682] 20100058498 20100293638 20100275303

[0683] 20100058496 20100293637 20100275301

[0684] 20090119796 20100293634 20100275300

[0685] 20090106862 20100293633 20100275299

[0686] 20090044294 20100293632 20100275298

[0687] 20090019605 20100293630 20100275297

[0688] 20080313774 20100293629 20100275296

[0689] 20080235820 20100287653 20100275295

[0690] 20080213871 20100287652 20100275294

[0691] 20080118954 20100287651 20100275293

[0692] 20080058510 20100287650 20100275292

[0693] 20060206964 20100287649 20100275291

[0694] 20060130183 20100287648 20100275290

[0695] 20060101535 20100287647 20100275289

[0696] 20050091707 20100287646 20100275288

[0697] 20050076403 20100287645 20100275287

[0698] 20040049802 20100287644 20100275286

[0699] 20030163839 20100287643 20100273987

[0700] 20030131373 20100287642 20100272880

[0701] 20020138870 20100285202 20100269224

[0702] 20020078477 20100281564 20100269211

[0703] 20020078474 20100281563 20100269210

[0704] 20100293661 20100281562 20100269209

[0705] 20100293660 20100281561 20100269208

[0706] 20100293659 20100281560 20100269207

[0707] 20100293658 20100281559 20100269206

[0708] 20100293657 20100281558 20100269205

[0709] 20100293656 20100281557 20100269204

[0710] 20100293655 20100278996 20100269203

[0711] 20100293654 20100275332 20100269202

[0712] 20100293653 20100275322 20100269201

[0713] 20100293652 20100275318 20100269200

[0714] 20100293651 20100275317 20100269199

[0715] 20100293650 20100275316 20100269198

[0716] 20100293649 20100275315 20100269197

[0717] 20100293648 20100275314 20100269196

[0718] 20100293647 20100275313 20100269195

[0719] 20100293646 20100275312 20100263083

[0720] 20100293645 20100275310 20100263082

[0721] 20100293644 20100275309 20100263081

[0722] 20100293643 20100275308 20100263080

[0723] 20100293642 20100275307 20100263079

[0724] 20100293640 20100275305 20100263078

[0725] 20100263077 20100115649 20090288198

[0726] 20100263076 20100115648 20090288197

[0727] 20100263075 20100115647 20090288195

[0728] 20100263074 20100115646 20090288194

[0729] 20100263073 20100115645 20090288191

[0730] 20100263072 20100115644 20090288189

[0731] 20100263071 20100115643 20090288188

[0732] 20100263070 20100112182 20090282575

[0733] 20100263069 20100107272 20090282574

[0734] 20100263068 20100107271 20090282573

[0735] 20100260921 20100107270 20090282572

[0736] 20100260920 20100107268 20090282571

[0737] 20100257630 20100107267 20090282570

[0738] 20100257629 20100100980 20090282569

[0739] 20100257628 20100080887 20090282568

[0740] 20100257627 20100064394 20090282567

[0741] 20100257626 20100043094 20090282566

[0742] 20100257625 20100043093 20090282565

[0743] 20100257621 20100043091 20090282564

[0744] 20100255175 20100043090 20090282563

[0745] 20100251412 20100043088 20090282562

[0746] 20100251411 20100043087 20090282561

[0747] 20100251410 20100043086 20090282560

[0748] 20100251408 20100037339 20090282559

[0749] 20100251407 20100037338 20090282558

[0750] 20100251406 20100037337 20090282557

[0751] 20100251405 20100037336 20090282556

[0752]

[0753] 20100251403 20100037333 20090282555

[0754] 20100251402 20100024064 20090282554

[0755] 20100251401 20100024063 20090282553

[0756] 20100251400 20100024062 20090282552

[0757] 20100251399 20100024054 20090282551

[0758] 20100251398 20100024052 20090282550

[0759] 20100249389 20090288216 20090282549

[0760] 20100248963 20090288215 20090282548

[0761] 20100247733 20090288213 20090282547

[0762] 20100242132 20090288212 20090282546

[0763] 20100242130 20090288211 20090282545

[0764] 20100242129 20090288210 20090282544

[0765] 20100218269 20090288208 20090282543

[0766] 20100196580 20090288207 20090282542

[0767] 20100192245 20090288206 20090282541

[0768] 20100173061 20090288205 20090282540

[0769] 20100168455 20090288203 20090282539

[0770] 20100146656 20090288202 20090282538

[0771] 20100138953 20090288201 20090282536

[0772] 20100115652 20090288200 20090282535

[0773] 20090282534 20090276895 20090081353

[0774] 20090282533 20090276894 20090077694

[0775] 20090282532 20090276893 20090070902

[0776] 20090282531 20090276892 20090070891

[0777] 20090282530 20090276891 20090055957

[0778] 20090282529 20090276885 20090055956

[0779] 20090282528 20090276884 20090055955

[0780] 20090282527 20090276883 20090031438

[0781] 20090282526 20090276882 20090029861

[0782] 20090282525 20090276881 20090019604

[0783] 20090282523 20090276880 20090019603

[0784] 20090282522 20090276879 20090019595

[0785] 20090282521 20090276878 20090019594

[0786] 20090282520 20090276871 20090019593

[0787] 20090282519 20090276870 20090019592

[0788] 20090282517 20090276869 20090019591

[0789] 20090282516 20090275741 20090019590

[0790] 20090282515 20090246350 20090019589

[0791] 20090282514 20090241213 20090019588

[0792] 20090282513 20090241212 20090019587

[0793] 20090282512 20090241211 20090019586

[0794] 20090282511 20090241210 20090019585

[0795] 20090282510 20090235379 20090019584

[0796] 20090282509 20090235378 20090019583

[0797] 20090282508 20090235377 20090019582

[0798] 20090282500 20090229004 20090019581

[0799] 20090282499 20090229003 20090019580

[0800] 20090282498 20090229002 20090019579

[0801] 20090276916 20090210961 20090019578

[0802] 20090276915 20090169709 20090019577

[0803] 20090276914 20090165163 20090019576

[0804] 20090276913 20090165162 20090019575

[0805] 20090276910 20090165161 20090019574

[0806] 20090276909 20090165159 20090019573

[0807] 20090276908 20090165158 20090019572

[0808] 20090276907 20090151020 20090019571

[0809] 20090276906 20090138989 20090019570

[0810] 20090276905 20090138985 20090019569

[0811] 20090276904 20090133147 20090019568

[0812] 20090276903 20090133146 20090019567

[0813] 20090276902 20090133145 20090019565

[0814] 20090276901 20090133144 20090019564

[0815] 20090276900 20090133143 20090013429

[0816] 20090276899 20090133142 20090013428

[0817] 20090276898 20090100536 20090013427

[0818] 20090276897 20090098099 20090013426

[0819] 20090276896 20090083886 20090013425

[0820] 20090007290 20080313765 20080313760

[0821] 20090007289 20080313764 20080313759

[0822] 20090007288 20080313763 20080313758

[0823] 20090007287 20080313762 20080313757

[0824] 20090007286 20080313761 20080282432

[0825] 20080282422 20080282378 20080263712

[0826] 20080282421 20080282377 20080263711

[0827] 20080282420 20080282376 20080263706

[0828] 20080282419 20080282375 20080263705

[0829] 20080282418 20080282374 20080260929

[0830] 20080282417 20080282373 20080256669

[0831] 20080282416 20080282372 20080235819

[0832] 20080282415 20080282371 20080227639

[0833] 20080282414 20080282370 20080216190

[0834] 20080282413 20080282366 20080216189

[0835] 20080282412 20080280361 20080178345

[0836] 20080282411 20080276330 20080178344

[0837] 20080282410 20080271197 20080178343

[0838] 20080282409 20080271196 20080178342

[0839] 20080282408 20080271195 20080178341

[0840] 20080282407 20080271194 20080178340

[0841] 20080282406 20080271193 20080178338

[0842] 20080282405 20080271192 20080178337

[0843] 20080282404 20080271191 20080178336

[0844] 20080282403 20080271190 20080178335

[0845] 20080282402 20080271189 20080178334

[0846] 20080282401 20080271188 20080178333

[0847] 20080282400 20080271187 20080178332

[0848] 20080282399 20080271186 20080178331

[0849] 20080282398 20080271185 20080178330

[0850] 20080282397 20080271184 20080178329

[0851] 20080282396 20080271183 20080178328

[0852] 20080282395 20080271182 20080178327

[0853] 20080282394 20080271181 20080178326

[0854] 20080282393 20080271180 20080178322

[0855] 20080282392 20080271179 20080178320

[0856] 20080282389 20080271178 20080178319

[0857] 20080282388 20080271177 20080178318

[0858] 20080282387 20080271176 20080178317

[0859] 20080282386 20080271175 20080172761

[0860] 20080282385 20080271174 20080172756

[0861] 20080282384 20080271173 20080172755

[0862] 20080282383 20080271172 20080172754

[0863] 20080282382 20080271171 20080168576

[0864] 20080282381 20080271170 20080155711

[0865] 20080282380 20080271168 20080155710

[0866] 20080282379 20080263713 20080155708

[0867] 20080155707 20060162007 20040237150

[0868] 20080148428 20060111254 20040237149

[0869] 20080148427 20060107348 20040237148

[0870] 20080148426 20060101543 20040237139

[0871] 20080148425 20060070140 20040221346

[0872] 20080148424 20060064777 20040221344

[0873] 20080148423 20060064776 20040221343

[0874] 20080148422 20060059590 20040221342

[0875] 20080148421 20060059589 20040221341

[0876] 20080148420 20060021081 20040221339

[0877] 20080070296 20060010530 20040221335

[0878] 20080066202 20060010529 20040221329

[0879] 20080064866 20060010528 20040221328

[0880] 20080050506 20060010527 20040210958

[0881] 20080022423 20060010526 20040205862

[0882] 20070266456 20060010525 20040205861

[0883] 20070256190 20060010524 20040205860

[0884] 20070256187 20060010523 20040205859

[0885] 20070256186 20060010522 20040205857

[0886] 20070256185 20060010521 20040205856

[0887] 20070256184 20050289664 20040205854

[0888] 20070256182 20050193440 20040205849

[0889] 20070256181 20050193438 20040168228

[0890] 20070256180 20050193437 20040168225

[0891] 20070256179 20050193436 20040168224

[0892] 20070256171 20050183155 20040168223

[0893] 20070256170 20050183154 20040168222

[0894] 20070256155 20050183153 20040168219

[0895] 20070250957 20050155114 20040148665

[0896] 20070250955 20050155106 20040148664

[0897] 20070250954 20050144680 20040148663

[0898] 20070250952 20050144679 20040148662

[0899] 20070250951 20050144678 20040148660

[0900] 20070250950 20050144677 20040148659

[0901] 20070250949 20050144676 20040148650

[0902] 20070250947 20050144675 20040132975

[0903] 20070214516 20050144674 20040111772

[0904] 20070067871 20050132437 20040111770

[0905] 20070054400 20050114929 20040093637

[0906] 20070037708 20050114928 20040060082

[0907] 20070022494 20050079494 20040055059

[0908] 20070011761 20050071900 20040055058

[0909] 20060288451 20050022272 20040055057

[0910] 20060288447 20050022261 20040055056

[0911] 20060282915 20050005332 20040055055

[0912] 20060265778 20050005321 20040055054

[0913] 20060174372 20040237152 20040055051

[0914] 20040055049 20100175149 20090089891

[0915] 20040055048 20100162434 20090083882

[0916] 20040055047 20100162432 20090075819

[0917] 20040055045 20100162431 20090064374

[0918] 20040055044 20100162430 20090055970

[0919] 20040055043 20100162429 20090038025

[0920] 20040049821 20100132071 20090031451

[0921] 20040049820 20100115664 20090031446

[0922] 20040049817 20100095404 20090031440

[0923] 20040049816 20100095403 20090029860

[0924] 20040049815 20100093715 20080307543

[0925] 20040049814 20100088784 20080301835

[0926] 20040016030 20100088783 20080263725

[0927] 20040010824 20100088782 20080229453

[0928] 20040010823 20100071093 20080229452

[0929] 20030237111 20100071091 20080209588

[0930] 20030233679 20100043100 20080201799

[0931] 20030232757 20100037350 20080189806

[0932] 20030195336 20100031392 20080178356

[0933] 20030192072 20100011466 20080178355

[0934] 20030182682 20100011465 20080172759

[0935] 20030182678 20100005542 20080168585

[0936] 20030172416 20090320158 20080168578

[0937] 20030154524 20090320157 20080168577

[0938] 20030131375 20090282580 20080163398

[0939] 20030119158 20090276921 20080127369

[0940] 20030101482 20090249514 20080120748

[0941] 20030097672 20090241230 20080076179

[0942] 20030068335 20090241227 20080072350

[0943] 20030056243 20090235389 20080072347

[0944] 20030005491 20090217417 20080052794

[0945] 20020152496 20090217406 20080052792

[0946] 20100293665 20090203094 20080050820

[0947] 20100287665 20090188004 20080022427

[0948] 20100287641 20090186762 20080005808

[0949] 20100269219 20090172834 20070294783

[0950] 20100263088 20090170173 20070261132

[0951] 20100251416 20090165173 20070226842

[0952] 20100229259 20090165170 20070209092

[0953] 20100227924 20090158461 20070209087

[0954] 20100205690 20090158454 20070199103

[0955] 20100205689 20090144859 20070174927

[0956] 20100199382 20090138987 20070118920

[0957] 20100199380 20090113572 20070111311

[0958] 20100199379 20090100541 20070033670

[0959] 20100192254 20090100540 20070022497

[0960] 20100190794 20090089896 20060206961

[0961] 20060179515 20100192253 20090288217

[0962] 20060174373 20100190707 20090282586

[0963] 20060168684 20100186116 20090275473

[0964] 20060162021 20100186115 20090265818

[0965] 20060137043 20100186113 20090265802

[0966] 20060112452 20100175150 20090264351

[0967] 20060064784 20100167403 20090264290

[0968] 20060037102 20100162440 20090260106

[0969] 20060010514 20100162425 20090260105

[0970] 20050241020 20100162424 20090235392

[0971] 20040194163 20100154083 20090229018

[0972] 20100293670 20100132072 20090227013

[0973] 20100287669 20100132070 20090222954

[0974] 20100287662 20100122367 20090222943

[0975] 20100287656 20100115667 20090210970

[0976] 20100287655 20100115662 20090205078

[0977] 20100285591 20100115661 20090205067

[0978] 20100281579 20100100985 20090205065

[0979] 20100281578 20100100981 20090192117

[0980] 20100281570 20100095401 20090192116

[0981] 20100281569 20100088785 20090188008

[0982] 20100269229 20100077508 20090188003

[0983] 20100269228 20100077507 20090183285

[0984] 20100269221 20100071087 20090183279

[0985] 20100269218 20100058495 20090183278

[0986] 20100269194 20100050293 20090183277

[0987] 20100269193 20100037347 20090183276

[0988] 20100269189 20100031391 20090178159

[0989] 20100269188 20100029725 20090172841

[0990] 20100269187 20100017915 20090165177

[0991] 20100269186 20100017908 20090165174

[0992] 20100269185 20100017907 20090158471

[0993] 20100242138 20100017906 20090158459

[0994] 20100242137 20100017905 20090158458

[0995] 20100242131 20090328252 20090151022

[0996] 20100236146 20090325804 20090151017

[0997] 20100235944 20090320163 20090144843

[0998] 20100235939 20090320162 20090138986

[0999] 20100229257 20090320156 20090137395

[1000] 20100223695 20090320155 20090136646

[1001] 20100221238 20090313722 20090133161

[1002] 20100218276 20090313721 20090119804

[1003] 20100212049 20090307800 20090119799

[1004] 20100199383 20090307797 20090113570

[1005] 20100192263 20090300789 20090106860

[1006] 20100192256 20090293147 20090106859

[1007] 20100192255 20090293141 20090106857

[1008] 20090094713 20080256666 20080078004

[1009] 20090094712 20080244767 20080072346

[1010] 20090089897 20080244766 20080072345

[1011] 20090089895 20080244765 20080072344

[1012] 20090081354 20080241927 20080072343

[1013] 20090077691 20080235827 20080060099

[1014] 20090077690 20080234130 20080057564

[1015] 20090077689 20080227091 20080051288

[1016] 20090077688 20080222753 20080047031

[1017] 20090069182 20080216200 20080040825

[1018] 20090055966 20080216191 20080040824

[1019] 20090055961 20080209582 20080034652

[1020] 20090049571 20080200415 20080034448

[1021] 20090049570 20080189810 20080034447

[1022] 20090049569 20080178353 20080022426

[1023] 20090038034 20080178350 20080020968

[1024] 20090038028 20080178325 20080020967

[1025] 20090038027 20080178323 20080020966

[1026] 20090038026 20080172762 20080020123

[1027] 20090036308 20080171321 20080016596

[1028] 20090035765 20080168581 20080016595

[1029] 20090031449 20080163402 20080016594

[1030] 20090031448 20080163401 20070300323

[1031] 20090025103 20080163400 20070294781

[1032] 20090025102 20080141392 20070289030

[1033] 20090007302 20080134362 20070283461

[1034] 20090005306 20080134361 20070277256

[1035] 20090000188 20080127377 20070274972

[1036] 20090000187 20080127375 20070271628

[1037] 20080320617 20080124804 20070266462

[1038] 20080320613 20080124797 20070266458

[1039] 20080313777 20080124796 20070261136

[1040] 20080313770 20080120747 20070256198

[1041] 20080305238 20080120746 20070250959

[1042] 20080299658 20080120745 20070245430

[1043] 20080286434 20080120744 20070245429

[1044] 20080280018 20080120743 20070245428

[1045] 20080280017 20080120742 20070245427

[1046] 20080280016 20080120741 20070245425

[1047] 20080280015 20080115241 20070240238

[1048] 20080280014 20080109925 20070238179

[1049] 20080280013 20080109924 20070234444

[1050] 20080280012 20080108072 20070234443

[1051] 20080280011 20080090294 20070231905

[1052] 20080274261 20080090293 20070226837

[1053] 20080274260 20080086783 20070226836

[1054] 20080271198 20080083043 20070226835

[1055] 20070226834 20070136866 20070107091

[1056] 20070226833 20070136865 20070107090

[1057] 20070226832 20070136864 20070107089

[1058] 20070226831 20070136863 20070107088

[1059] 20070220627 20070136862 20070107084

[1060] 20070220626 20070136861 20070094747

[1061] 20070214514 20070136860 20070089200

[1062] 20070199105 20070136859 20070089181

[1063] 20070192899 20070136858 20070079402

[1064] 20070192897 20070136857 20070079397

[1065] 20070180578 20070136856 20070079393

[1066] 20070180577 20070136855 20070074311

[1067] 20070180576 20070136854 20070074303

[1068] 20070169227 20070136853 20070061926

[1069] 20070169226 20070136852 20070044180

[1070] 20070169225 20070136851 20070016980

[1071] 20070169220 20070136850 20070011771

[1072] 20070162999 20070136849 20070006350

[1073] 20070157342 20070136848 20060294625

[1074] 20070157341 20070136847 20060294624

[1075] 20070157335 20070136846 20060293913

[1076] 20070150980 20070136845 20060288453

[1077] 20070150979 20070136844 20060288448

[1078] 20070143880 20070136843 20060288440

[1079] 20070136891 20070136842 20060282918

[1080] 20070136888 20070136838 20060281910

[1081] 20070136887 20070130653 20060272058

[1082] 20070136886 20070130652 20060272057

[1083] 20070136885 20070130651 20060272055

[1084] 20070136884 20070130650 20060272054

[1085] 20070136883 20070130649 20060272046

[1086] 20070136882 20070130648 20060260006

[1087] 20070136881 20070130647 20060242733

[1088] 20070136880 20070130646 20060225161

[1089] 20070136879 20070130642 20060225160

[1090] 20070136878 20070118919 20060225152

[1091] 20070136877 20070107102 20060225151

[1092] 20070136876 20070107101 20060223102

[1093] 20070136875 20070107100 20060212971

[1094] 20070136874 20070107099 20060212966

[1095] 20070136873 20070107098 20060212964

[1096] 20070136872 20070107097 20060206967

[1097] 20070136871 20070107096 20060200874

[1098] 20070136870 20070107095 20060195954

[1099] 20070136869 20070107094 20060195953

[1100] 20070136868 20070107093 20060195937

[1101] 20070136867 20070107092 20060185039

[1102] 20060174382 20060107413 20060107365

[1103] 20060174381 20060107412 20060107364

[1104] 20060168692 20060107411 20060107363

[1105] 20060162030 20060107410 20060107362

[1106] 20060162027 20060107409 20060107361

[1107] 20060162015 20060107408 20060107360

[1108] 20060162009 20060107407 20060107359

[1109] 20060156439 20060107406 20060107358

[1110] 20060150277 20060107405 20060107357

[1111] 20060150275 20060107404 20060107356

[1112] 20060150274 20060107403 20060107355

[1113] 20060143744 20060107402 20060107354

[1114] 20060143743 20060107401 20060107347

[1115] 20060143733 20060107400 20060101546

[1116] 20060143728 20060107399 20060095991

[1117] 20060137035 20060107398 20060095990

[1118] 20060137033 20060107397 20060090225

[1119] 20060130190 20060107396 20060070143

[1120] 20060130189 20060107395 20060070139

[1121] 20060130188 20060107394 20060064789

[1122] 20060130187 20060107393 20060064786

[1123] 20060130184 20060107391 20060064779

[1124] 20060112465 20060107390 20060064773

[1125] 20060112464 20060107389 20060037109

[1126] 20060112463 20060107388 20060037095

[1127] 20060112462 20060107387 20060031962

[1128] 20060112461 20060107386 20060026710

[1129] 20060112460 20060107385 20060026709

[1130] 20060112459 20060107384 20060026708

[1131] 20060112458 20060107383 20060026707

[1132] 20060112457 20060107382 20060021082

[1133] 20060112456 20060107381 20060015968

[1134] 20060112444 20060107380 20060010534

[1135] 20060107427 20060107379 20060005287

[1136] 20060107426 20060107378 20060005275

[1137] 20060107425 20060107377 20060005274

[1138] 20060107424 20060107376 20060005269

[1139] 20060107423 20060107375 20050289670

[1140] 20060107422 20060107374 20050283862

[1141] 20060107421 20060107373 20050283314

[1142] 20060107420 20060107372 20050278812

[1143] 20060107419 20060107371 20050278811

[1144] 20060107418 20060107370 20050278810

[1145] 20060107417 20060107369 20050278805

[1146] 20060107416 20060107368 20050278803

[1147] 20060107415 20060107367 20050273889

[1148] 20060107414 20060107366 20050273881

[1149] 20050273879 20050150020 20050120404

[1150] 20050257298 20050150019 20050114955

[1151] 20050257289 20050150018 20050114954

[1152] 20050246798 20050150017 20050114953

[1153] 20050246796 20050144690 20050114952

[1154] 20050235383 20050144689 20050114951

[1155] 20050229483 20050144688 20050114950

[1156] 20050229274 20050144687 20050114949

[1157] 20050229271 20050144686 20050114948

[1158] 20050223443 20050144685 20050114947

[1159] 20050223439 20050144683 20050114946

[1160] 20050223432 20050144682 20050114945

[1161] 20050223426 20050144681 20050114944

[1162] 20050216977 20050138697 20050114943

[1163] 20050216974 20050138696 20050114942

[1164] 20050216968 20050138695 20050114941

[1165] 20050210551 20050138686 20050114940

[1166] 20050210550 20050132453 20050114939

[1167] 20050204418 20050132452 20050114938

[1168] 20050202486 20050132451 20050114937

[1169] 20050198706 20050132450 20050114936

[1170] 20050198702 20050125866 20050114935

[1171] 20050188441 20050120443 20050114934

[1172] 20050188440 20050120442 20050114933

[1173] 20050188439 20050120441 20050114932

[1174] 20050188437 20050120440 20050114931

[1175] 20050177898 20050120439 20050114930

[1176] 20050177897 20050120438 20050108796

[1177] 20050177892 20050120437 20050108795

[1178] 20050172369 20050120436 20050108794

[1179] 20050172368 20050120435 20050102717

[1180] 20050172367 20050120434 20050097636

[1181] 20050166291 20050120433 20050097634

[1182] 20050166287 20050120432 20050097633

[1183] 20050166286 20050120431 20050081265

[1184] 20050166284 20050120430 20050076404

[1185] 20050160506 20050120429 20050071901

[1186] 20050160505 20050120428 20050070697

[1187] 20050160496 20050120427 20050050590

[1188] 20050160494 20050120426 20050039226

[1189] 20050160488 20050120425 20050034193

[1190] 20050155118 20050120424 20050028231

[1191] 20050155102 20050120423 20050010975

[1192] 20050150025 20050120422 20040248304

[1193] 20050150023 20050120421 20040237147

[1194] 20050150022 20050120420 20040231017

[1195] 20050150021 20050120419 20040216192

[1196] 20040210963 20040172707 20030200557

[1197] 20040210960 20040172706 20030167532

[1198] 20040210043 20040172705 20030167530

[1199] 20040205864 20040172704 20030167528

[1200] 20040205863 20040172703 20030167506

[1201] 20040199965 20040172702 20030167504

[1202] 20040199960 20040172701 20030166855

[1203] 20040199959 20040172700 20030163840

[1204] 20040194171 20040172699 20030163839

[1205] 20040194170 20040172698 20030163838

[1206] 20040194169 20040172697 20030159185

[1207] 20040194168 20040172696 20030150016

[1208] 20040194167 20040172695 20030150014

[1209] 20040187179 20040172694 20030140381

[1210] 20040181836 20040172693 20030140369

[1211] 20040181835 20040172692 20030140368

[1212] 20040181833 20040172691 20030131381

[1213] 20040181832 20040172668 20030110528

[1214] 20040181824 20040168212 20030101484

[1215] 20040180436 20040166563 20030101483

[1216] 20040177420 20040154059 20030097689

[1217] 20040177419 20040148654 20030097680

[1218] 20040177418 20040148652 20030088890

[1219] 20040177417 20040143871 20030084486

[1220] 20040177416 20040143870 20030084476

[1221] 20040177415 20040123345 20030079251

[1222] 20040177414 20040122592 20030079247

[1223] 20040177413 20040118754 20030073239

[1224] 20040177412 20040111761 20030041348

[1225] 20040177411 20040098769 20030033632

[1226] 20040177410 20040098760 20030033629

[1227] 20040177409 20040083500 20030028921

[1228] 20040177408 20040082770 20030028920

[1229] 20040177407 20040073971 20030017566

[1230] 20040177406 20040068767 20030009782

[1231] 20040172728 20040064856 20030005482

[1232] 20040172727 20040049804 20020166146

[1233] 20040172726 20040040056 20020166143

[1234] 20040172725 20040025206 20020166141

[1235] 20040172724 20040019931 20020162142

[1236] 20040172723 20040005713 20020148007

[1237] 20040172722 20030226178 20020144307

[1238] 20040172721 20030226167 20020124284

[1239] 20040172711 20030221224 20020108149

[1240] 20040172710 20030217387 20020083493

[1241] 20040172709 20030213016 20020078475

[1242] 20040172708 20030213014 20020069428

[1243] 20020029392

[1244] 20020004940

[1245] 20010023501

[1246] 20100281574

[1247] 20100257638

[1248] 20100235943

[1249] 20100169999

[1250] 20100168452

[1251] 20100041610

[1252] 20100037358

[1253] 20100004177

[1254] 20090320159

[1255] 20090203612

[1256] 20090158473

[1257] 20090093366

[1258] 20090029863

[1259] 20090023782

[1260] 20080295195

[1261] 20080260933

[1262] 20080178323

[1263] 20080085856

[1264] 20080058248

[1265] 20070220629

[1266] 20070143876

[1267] 20060168683

[1268] 20060070139

[1269] 20060037095

[1270] 20050216969

[1271] 20050039226

[1272] 20040194164