一种酶的工艺方法 |
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| 申请号 | CN201710709123.6 | 申请日 | 2017-08-17 | 公开(公告)号 | CN107384901A | 公开(公告)日 | 2017-11-24 |
| 申请人 | 芜湖通全科技有限公司; | 发明人 | 季一全; 汤佳; | ||||
| 摘要 | 一种酶的工艺方法，包括以下步骤：(1)DEAE-sephadex A50 平衡方法；(2) 线性洗脱方法，共分离出9 个峰，将合格峰合峰；本 发明 优点是通过蛇毒提取降纤酶的工艺方法相较于原工艺分离时间短、 试剂 用量小、工艺简单，收率高、 质量 稳定。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种酶的工艺方法，其特征在于包括以下步骤： |
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| 说明书全文 | 一种酶的工艺方法技术领域背景技术[0002] 降纤酶 ，能溶解血栓，抑制血栓形成，改善微循环； 主要治疗（1）急性脑梗死，包括脑血栓、脑栓塞，短暂性脑缺血发作（TIA），以及脑梗死再复发的预防。（2）心肌梗死，不稳定性心绞痛以及心肌梗死再复发的预防。（3）四肢血管病，包括股动脉栓塞，血栓闭塞性脉管炎，雷诺氏病。（4）血液呈高粘状态、高凝状态、血栓前状态。（5）突发性耳聋。（6）肺栓塞。但是由于 工艺繁琐，不易掌握，收率较低、质量不稳定等问题导致降纤酶产量和纯度较低。 发明内容[0003] 为解决上述问题，本发明采用如下技术方案：一种酶的工艺方法，包括以下步骤： (1) DEAE-sephadex A50 平衡方法：取DEAE-sephadex A50 适量，加入新鲜蒸馏水，加热煮沸50min，放至室温，加pH 值8，0.08mol/L Tris 缓冲液搅拌，放置数小时，弃去上清液，再加入pH 值8，0.08mol/L Tris 缓冲液，如此反复数次，测pH 值＝8； (2) 线性洗脱方法：蛇毒均匀加在DEAE-sephadex A50 柱中，第1 梯度，在搅拌瓶中加pH 值7.2，0.1mol/LNaCl Tris 缓冲液1000ml，以10-15 滴/ 分速度洗脱；第2 梯度在搅拌瓶中加pH 值7.2，0.1mol/L NaCl Tris 缓冲液1000ml，贮存瓶中加pH 值7.0 ～ 7.8， 0.8mol/LNaCl Tris 缓冲液2000ml，以10-15 滴/ 分速度洗脱；共分离出9 个峰，将合格峰合峰。 [0004] 所述步骤（1）中室温为20-25℃。 [0005] 本发明优点是：通过蛇毒提取降纤酶的工艺方法相较于原工艺分离时间短、试剂用量小、工艺简单，收率高、质量稳定。 具体实施方式[0006] 一种酶的工艺方法，包括以下步骤：(1) DEAE-sephadex A50 平衡方法：取DEAE-sephadex A50 适量，加入新鲜蒸馏水，加热煮沸50min，放至室温，加pH 值8，0.08mol/L Tris 缓冲液搅拌，放置数小时，弃去上清液，再加入pH 值8，0.08mol/L Tris 缓冲液，如此反复数次，测pH 值＝8； (2) 线性洗脱方法：蛇毒均匀加在DEAE-sephadex A50 柱中，第1 梯度，在搅拌瓶中加pH 值7.2，0.1mol/LNaCl Tris 缓冲液1000ml，以10-15 滴/ 分速度洗脱；第2 梯度在搅拌瓶中加pH 值7.2，0.1mol/L NaCl Tris 缓冲液1000ml，贮存瓶中加pH 值7.0 ～ 7.8， 0.8mol/LNaCl Tris 缓冲液2000ml，以10-15 滴/ 分速度洗脱；共分离出9 个峰，将合格峰合峰。 [0007] 以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。 |
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