一种减轻胃黏膜损伤的海参酒及其制作方法 |
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| 申请号 | CN202311469557.5 | 申请日 | 2023-11-06 | 公开(公告)号 | CN117925354A | 公开(公告)日 | 2024-04-26 |
| 申请人 | 大连工业大学; | 发明人 | 宋爽; 曹馨怡; 温福丽; 闫春红; 牛曼思; 艾春青; 屠婷瑶; | ||||
| 摘要 | 本 发明 公开了一种减轻胃黏膜损伤的海参酒及其制作方法，属于保健食品技术领域。本发明海参酒的制备包括如下步骤：称取海参酒总重量0.1～1％的海参酶解粉，加 水 搅拌混匀，搅拌子转速为50～200r/min，搅拌时间为0.5～1h，得到海参酶解粉溶液；再向海参酶解粉溶液中加入52～68°白酒，搅拌混匀，控制酒 精度 在30～40vol％；然后置于高压均质机均质，均质压 力 为40～80MPa、循环次数6‑10次，得到海参酒；该海参酒 稳定性 高，海参添加量高，添加量可达1.0％，与预先饮用海参溶液再饮酒和先饮酒再饮用海参溶液相比，其对胃黏膜的影响更小，可有效改善酒精引起的胃黏膜破裂损伤和炎性细胞浸润等症状。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种减轻胃黏膜损伤的海参酒的制作方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤： |
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| 说明书全文 | 一种减轻胃黏膜损伤的海参酒及其制作方法技术领域[0001] 本发明涉及一种减轻胃黏膜损伤的海参酒及其制作方法，属于保健食品技术领域。 背景技术[0002] 白酒在酒种历史中源远流长，因为其酿造工艺和风味独特，在蒸馏酒中独树一帜，更成为一种文化象征，丰富了人民的生活，成为在社交、婚庆等重要活动中必不可少的特殊饮品。白酒有着促进血液循环、新陈代谢等功效；但还存在着一些有害饮酒行为导致某些疾病的发生，如酒精性肝损伤、酒精性胃黏膜损伤等。 [0003] 海参作为一种药食两用的补益食品，其营养价值逐渐被研究证实。海参多糖作为海参体壁重要成分之一，具有多种药理活性，包括抗肿瘤、抗疲劳、抗凝血与抗血栓形成、降血脂等作用。此外，海参中蛋白质含量十分丰富，经酶解后降解为多肽进入人体，可以起到抗疲劳、抗氧化、抗炎、免疫调节等功能。将海参酶解得到的产物作为衍生产品是现在海参食品生产常用的工艺，海参酶解后大部分蛋白质降解为多肽，更利于人体的吸收。 [0004] 海参多糖、多肽含量随酒精度的升高而溶解度降低，将这些大分子物质溶于酒中有一定的难度。现有的海参养生酒产品，溶于酒中时稳定性较差，静置容易有沉淀析出，在保证稳定性良好的同时，只能降低海参的添加量，使其产品中营养成分含量大打折扣。 发明内容[0005] 针对现有技术的不足，本发明提供了一种减轻胃黏膜损伤的海参酒及其制作方法，具体是将海参酶解后的产物加入酒中，采用高压均质的方法，有效的解决了稳定性与含量不能兼得的问题；高压均质后的海参酒更加稳定，并且高压均质增加了乙醇分子和水分子之间的相关性，减少了白酒的刺激性气味，增加了碰撞频率有助于酒精酯化，提高酒的质量；饮用该海参酒时，能够有效的减轻对胃黏膜损伤。 [0006] 本发明的第一个目的是提供一种减轻胃黏膜损伤的海参酒的制作方法，所述方法包括如下步骤： [0007] (1)称取海参酒总重量0.1～1％的海参酶解粉，加水搅拌混匀，搅拌子转速为50～200r/min，搅拌时间为0.5～1h，得到海参酶解粉溶液； [0008] (2)向步骤(1)配制好的海参酶解液溶液中加入52～68°白酒，搅拌混匀，控制酒精度在30～40vol％；然后置于高压均质机均质，均质压力为40～80MPa、循环次数6‑10次，得到海参酒。 [0009] 在一种实施方式中，步骤(1)所述水的加入量占海参酒总重量的20～40％。 [0010] 在一种实施方式中，步骤(1)所述海参酶解粉的添加量为海参酒总重量的1％。 [0011] 在一种实施方式中，步骤(1)所述海参酶解粉为脱盐后的海参经蛋白酶酶解后的产物，其海参酶解粉的海参多糖含量为8.53％，海参酶解粉肽分子量分布主要为2.5kDa和1kDa。 [0012] 在一种实施方式中，步骤(1)所述海参酶解粉的红外光谱3388cm‑1处有较强的酰胺‑1A带吸收峰和1648cm 处酰胺Ⅰ带强吸收峰。 [0013] 在一种实施方式中，步骤(1)所述海参酶解粉的氨基酸含量大于85％，主要氨基酸包括谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸。 [0014] 在一种实施方式中，步骤(2)所述搅拌混匀，搅拌子转速为50～100r/min，搅拌时间为10‑15min。 [0015] 在一种实施方式中，步骤(1)所述海参酶解粉的具体制备包括如下步骤： [0016] (1)将干海参泡发煮沸除盐烘干，经粉碎机打粉后，得海参粉； [0017] (2)向海参粉中加水搅拌，50～55℃加热10～15min后，调节pH为7.0，加入海参粉底物质量4％的2000U/g胰蛋白酶，在酶解罐中酶解3h，得酶解产物； [0018] (3)向步骤(2)获得的酶解产物中加入食品级无水乙醇，使其最终酒精度为30度，4～6℃静置12h，得醇沉产物；将醇沉产物离心后，取上清液，蒸发浓缩除去乙醇，得浓缩产物；将浓缩产物喷雾干燥后，即得海参酶解粉。 [0019] 本发明的第二个目的是提供一种由上述所述方法制备得到的减轻胃黏膜损伤的海参酒。 [0020] 本发明的第三个目的是提供一种上述所述的减轻胃黏膜损伤的海参酒在制备保健品中的应用。 [0021] 本发明的第四个目的是提供一种上述所述的海参酒在制备减轻酒精性胃黏膜损伤或胃炎症的产品中的应用。 [0022] 在一种实施方式中，所述减轻酒精性胃黏膜损伤或胃炎症是指酒精引起的胃黏膜充血、炎症因子浸润、黏膜破碎或酒精引起的胃组织炎症增加。 [0023] 本发明的有益效果： [0024] (1)本发明制备海参酒的方法，使得制备出的海参酒稳定性高，海参添加量高，添加量可达1.0％，解决了现有海参基料溶于酒中，溶解度低的问题，保证了酒中海参营养功效成分的含量； [0025] (2)本发明采用高压均质技术使海参酒稳定性大大提高，不易出现海参多糖多肽等大分子沉淀，增加了碰撞频率有助于酒精酯化，提高酒的质量； [0026] (3)采用本发明的方法制备的海参酒，与相同酒精度的白酒相比，可有效改善酒精引起的胃黏膜破裂损伤和炎性细胞浸润等症状；通过大鼠H&E染色切片观察得知，本发明制备的海参酒与预先饮用海参溶液再饮酒和先饮酒再饮用海参溶液相比，其对胃黏膜的影响更小，可见将海参溶液与白酒经混合工艺混匀后的效果比单独使用时效果更好； [0028] 图1为本发明实施例1制备的海参酶解粉肽分子量分布图； [0029] 图2为本发明实施例1制备的海参酶解粉傅里叶红外光谱分析图； [0030] 图3为本发明实施例1制备的海参酶解粉的1H NMR光谱图； [0031] 图4为本发明实施例2制备的海参酒的粒径和PDI数据图；(A)为粒径；(B)为PDI(多分散系数)； [0032] 图5为本发明实施例2制备的海参酒的离心稳定性和透光率数据图；(A)为离心稳定性；(B)为透光率；(C)为不同海参酶解粉添加量制备的海参酒的实物静置图； [0033] 图6为本发明实施例2制备的海参酒在1个月内的粒径的变化数据图；(A)为0.1％海参酒；(B)为0.3％海参酒；(C)为0.5％海参酒；(D)为0.7％海参酒；(E)为1.0％海参酒； [0034] 图7为本发明实施例2制备的海参酒在1个月内的多分散系数(PDI)的变化数据图；(A)为0.1％海参酒；(B)为0.3％海参酒；(C)为0.5％海参酒；(D)为0.7％海参酒；(E)为 1.0％海参酒； [0035] 图8为本发明实施例2制备的海参酒在1个月内的透光率的变化数据图；(A)为0.1％海参酒；(B)为0.3％海参酒；(C)为0.5％海参酒；(D)为0.7％海参酒；(E)为1.0％海参酒； [0036] 图9为本发明实施例2制备的海参酒在1个月内的离心稳定性的变化数据图；(A)为0.1％海参酒；(B)为0.3％海参酒；(C)为0.5％海参酒；(D)为0.7％海参酒；(E)为1.0％海参酒； [0037] 图10为实施例3中大鼠胃组织H&E染色图；(A)为空白组；(B)为模型组；(C)为0.1％海参酒组；(D)为1.0％海参酒组；(E)为1％高剂量海参溶液治疗组；(F)为1％高剂量海参溶液预防组； [0038] 图11为实施例3中大鼠胃组织中氧化应激因子水平变化数据图；(A)为过氧化物酶MPO活力；(B)为过氧化氢酶CAT活力；(C)为丙二醛MDA；(D)为总超过氧化物歧化酶T‑SOD；(E)谷胱甘肽GSH； [0039] 图12为实施例3中大鼠血清CAT和MPO水平数据图；(A)为CAT；(B)为MPO。 具体实施方式[0040] 以下结合实施例对本发明的具体实施方式进行更加详细的说明，以便能够更好地理解本发明的方案以及各个方面的优点。然而，以下描述的具体实施方式和实施例仅是说明的目的，而不是对本发明的限制。 [0041] 本发明实施例中涉及的干海参购自大连(产地大连)；52°白酒购自泸州老窖52度浓香型白酒。 [0042] 实施例1 [0043] 海参酶解粉的制备，具体步骤如下： [0044] (1)将干海参泡发煮沸除盐烘干，经粉碎机打粉后，得海参粉； [0045] (2)向海参粉中加水搅拌，料液比为1:30，55℃加热10～15min后，调节pH为7.0，加入海参粉质量4％的2000U/g胰蛋白酶，在酶解罐中酶解3h，得酶解产物； [0046] (3)向步骤(2)获得的酶解产物中加入食品级无水乙醇，使其最终酒精度为30度，4～6℃静置12h，得醇沉产物；将醇沉产物于4000r/min离心10min后，取上清液，蒸发浓缩除去乙醇，使其体积浓缩为原体积的1/3，得浓缩产物；将浓缩产物喷雾干燥后，即得海参酶解粉；其中喷雾干燥入口温度为130℃，蠕动泵转速为25rpm。 [0047] 海参酶解粉的结构特性和组成分析： [0048] 采用高效液相色谱‑质谱联用法+PMP衍生化法进行海参酶解粉海参多糖含量的测定； [0049] 采用凝胶渗透色谱法进行海参酶解粉分子量的测定； [0050] 采用傅里叶红外光谱进行海参酶解粉红外官能团的测定； [0051] 采用氨基酸分析仪进行海参酶解粉氨基酸的测定； [0052] 采用核磁共振氢谱进行海参酶解粉的结构测定。 [0053] 结果表明：海参酶解粉的多糖含量为8.53％；如图1所示，海参酶解粉的分子量主‑1要分布在2.5kDa和1kDa；海参酶解粉的红外光谱如图2所示，其中包括酰胺A带(3388cm )、‑1 ‑1 ‑1 ‑1 酰胺B带(2929cm )、酰胺Ⅰ带(1648cm )、酰胺Ⅱ带(1546cm )、酰胺Ⅲ带(1248cm )等蛋白质多肽链吸收峰；海参酶解粉中氨基酸含量大于85％；海参酶解粉的核磁氢谱中，如图3所示，在0.97～3ppm处的信号归属于未直接连杂原子的甲基、亚甲基或次甲基质子所在的氨基酸，3～4.65ppm处的信号归属于与杂原子直接相连的亚甲基或次甲基质子所在的氨基酸，6.9～7.5ppm范围内的信号归属于芳香族氨基酸。 [0054] 表1.海参酶解粉的氨基酸组成分析 [0055] [0056] *表示必需氨基酸 [0057] 实施例2 [0058] 一种海参酒(HPH)的制备方法，具体包括如下步骤： [0059] (1)预混 [0060] 称取0.3g(0.1％)、0.9g(0.3％)、1.5g(0.5％)、2.1g(0.7％)、3g(1.0％)实施例1制备的海参酶解粉，分别加入70mL纯净水搅拌均匀，搅拌子转速为120r/min，搅拌时间为0.5h，得到海参酶解粉溶液； [0061] (2)海参酒制备 [0062] 将230mL 52°白酒分别加入步骤(1)制备的海参酶粉溶液中，继续搅拌，搅拌子转速为120r/min，搅拌时间为15min，控制整个过程酒精度在40°，产品总体积300±10mL；配制完成后的海参酒倒入高压均质机进行均质，均质压力为40MPa，均质循环7次，得到经高压均质后的海参酒(HPH)。 [0063] 对比例1 [0064] 与实施例2的区别仅在于，省去步骤(2)中高压均质过程，其它参数和条件均与实施例1相同，得到海参酒(Non HPH)。 [0065] 结果测定 [0066] 1、海参酒的稳定性测试方法 [0067] 将实施例2中得到的5种不同添加量的海参酒和对比例1制备的5种不同添加量的海参酒进行稳定性测试，通过测定其产品的粒径、多分散系数(PDI)、透光率、离心稳定性进行稳定性观察。 [0068] (1)粒径和多分散系数(PDI)测定 [0069] 将不同添加量和不同工艺的海参酒于激光粒度仪中测定其粒径和PDI。 [0070] (2)离心稳定性测定 [0071] 将不同添加量和不同工艺的海参酒放入比色皿中，用紫外分光光度计在270nm波长测定其吸光度紫外吸光度A0，4000r/min离心10分钟后在相同纳米处测得紫外吸光度A1，设R为稳定系数，则R＝A1/A0(R≤1)，R值越大，说明海参酒的离心稳定性越好。 [0072] (3)透光率测定 [0073] 将不同添加量和不同工艺的海参酒放入比色皿中，用紫外分光光度计在600nm处测得。 [0074] (4)1个月内海参酒稳定性观察 [0075] 测定不同添加量和不同工艺的海参酒一个月内的粒径、PDI、离心稳定性、透光率变化。 [0076] 2、结果分析 [0077] (1)不同海参酒的粒径和PDI测定 [0078] 实施例2制备的海参酒粒径显著低于对比例1制备的海参酒，结果如图4A所示，海参酒在高压均质机的高剪切作用力和高压作用力下，使海参酒中物料的粒径经强烈剪切、高速撞击等机械力的综合作用后变小，有利于海参粉物料在酒中的溶解。 [0079] PDI是反映粒径分布宽度的无量纲数值，范围为0～1之间，数值越小，代表粒度越均匀，粒度分布越集中溶液体系中，经过高压均质海参酒的多分散系数始终处于0.5以下，而未经高压均质的海参酒一直保持在0.7以上，多分散系数越接近1，体系越不稳定，此时整个体系处于不均匀分散的状态。说明，高压均质后的海参酒(实施例2)稳定性更高。 [0080] (2)不同海参酒的离心稳定性和透光率测定 [0081] 结果如图5A可知，高压均质后的海参酒离心稳定性显著提高，均质后的每个添加量的稳定性都达到98％以上。高压均质可以使海参酒的离心稳定性提高。如图5B所示，高压均质后的各个浓度透光率保持在50％以上，未经高压均质后的透光率在添加量为0.7％时达到50％以下。 [0082] (3)1个月内不同海参酒粒径变化 [0083] 结果如图6所示，反映了1个月内高压均质和未高压均质的海参酒粒径和多分散系数的变化，利用高压均质得到的各个浓度海参酒1个月内粒径无显著变化，未经高压均质的海参酒粒径出现波动。 [0084] (4)1个月内不同海参酒PDI变化 [0085] 结果如图7所示，高压均质后多分散系数始终维持在0.5以下，这证明制得的海参酒在1个月内稳定性良好，物料粒度分布均匀分布在溶液体系中。未经高压均质的海参酒粒径、多分散系数逐渐增大，且出现PDI为1的情况，此时海参酒内部物料静置15天以上有肉眼可见的沉淀析出。 [0086] (5)1个月内不同海参酒透光率变化 [0087] 结果如图8所示，高压均质后的海参酒1个月内透光率保持稳定，未经高压均质的海参酒1个月内透光率呈下降趋势。 [0088] (6)1个月内不同海参酒离心稳定性变化 [0089] 结果如图9所示，高压均质后的各个浓度海参酒1个月内离心稳定性变化幅度很小，在2％的范围内浮动，而未均质的海参酒稳定性变化幅度较大。因此，高压均质后的海参酒更贮藏稳定性更好。 [0090] 实施例3 [0091] 实施例2制备的海参酒在预防/治疗急性胃黏膜损伤中的应用 [0092] 6周龄雄性成年SD大鼠，体重180±20g，购自辽宁长生生物股份有限公司，用于酒精诱导急性胃溃疡动物实验。实验动物进入大连工业大学国家海洋食品工程技术研究中心动物实验室，4只/笼，温度20‑25℃，相对湿度为50±5％，光暗循环12h。实验前，大鼠自由进食、饮水，适应实验环境1周。 [0093] 适应性喂养7天后，灌胃前禁食不禁水12h，将大鼠平均分为6组(n＝6)：空白组(Control)、模型组(Model)、0.1％海参酒组(SCW‑L)、1.0％海参酒组(SCW‑H)、1％高剂量海参水溶液治疗组(E‑SCH)、1％高剂量海参水溶液预防组(SCH‑E)；其中含酒的组别，酒精度均为40°。 [0094] Control组：每只大鼠灌胃生理盐水1mL； [0095] Model组：给予相同体积的40°白酒； [0096] SCW‑L组：灌胃40°海参酒1mL，相当于给予体重5.5mg/kg； [0097] SCW‑H组：灌胃40°海参酒1mL，相当于给予体重55.5mg/kg。 [0098] E‑SCH组：先灌胃1mL 40°白酒，1h后灌胃1mL 1％的海参溶液； [0099] SCH‑E组：先灌胃1％的海参溶液1mL，1小时后灌胃1mL40°白酒。 [0100] 大鼠在10％的水合三氯乙醛(0.3ml/100g)麻醉下被心脏取血，其胃被切除；沿胃大弯侧将胃剪开，无菌生理盐水冲洗胃，去除胃中食物残渣；血液于低温离心机12000r/min离心10min，取上清置于‑80℃待测；胃组织‑80℃保存待测。 [0101] 结果测定与分析 [0102] 1、H&E染色与观察 [0104] 通过H&E染色法观察试验动物胃组织病理学改变情况，结果详见附图10。Control组大鼠具有完整的胃组织结构，细胞排列紧密有序，腺体分布整齐，无细管充血、黏膜损伤等问题出现。Model组大鼠胃黏膜上皮细胞分离、脱落，黏膜出现破碎，腺体排列不规则，局部出现炎性细胞浸润。相较于模型组，SCW‑L组胃黏膜损伤情况有所减轻，但仍存在部分炎性细胞浸润。SCW‑H组改善效果最为明显，组织结构清晰，腺体紧密有规则，黏膜可见少量缺失但不严重。E‑SCH和SCH‑E组将白酒和海参溶液分别灌胃大鼠后，其切片结果表明仍存在部分炎性细胞浸润，与SCW‑H组相比，其减轻效果并不明显，可见将海参溶液与白酒经混合工艺混合后的效果比单独使用时更加显著。表明，0.1％和1.0％的海参基料加到酒中均能改善酒精引起的大鼠急性胃黏膜损伤。 [0105] 2、大鼠炎症因子测定 [0107] MPO、MDA在正常组织中表达较低，CAT、T‑SOD、GSH等氧化应激因子则在正常组中表达较高。结果如图11所示，在灌胃40°的白酒(Model组)后，与正常组(Control组)相比各个炎症因子均发生显著性变化，说明40°的白酒可引起大鼠胃组织的氧化损伤。在灌胃1％海参基料添加量的海参酒(SCW‑H组)后，与Model组相比，各炎症因子均发生显著性改变，说明1％海参基料添加量的海参酒可以有效改善酒精引起的急性氧化损伤。 [0108] 血清中MPO和CAT的测定结果水平与组织中的趋势相同，结果如图12所示，表明SCW‑H能够调节氧化应激指标，使抗氧化系统活性增强，一定程度实现对胃损伤的保护作用。 [0109] 以上所提供的实施例并非用以限制本发明所涵盖的范围，所描述的步骤也不是用以限制其执行顺序。本领域技术人员结合现有公知常识对本发明做显而易见的改进，亦落入本发明权力要求书所界定的保护范围之内。 |
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