具有黄原胶降解活性的多肽以及编码其的核苷酸 |
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申请号 | CN201380023711.4 | 申请日 | 2013-05-07 | 公开(公告)号 | CN104271723A | 公开(公告)日 | 2015-01-07 |
申请人 | 诺维信公司; | 发明人 | D.R.塞居拉; P.F.哈林; A.维克索-尼尔森; L.安德森; M.S.博彻特; L.墨菲; A.博伊森; L.G.帕尔曼; K.詹森; C.斯乔霍尔姆; T.霍夫; C.布卢姆; | ||||
摘要 | 本 发明 涉及具有黄原胶降解活性的分离的多肽,涉及催化结构域,以及编码这些多肽和催化结构域的多核苷酸。本发明还涉及包括这些多核苷酸的核酸构建体、载体以及宿主细胞连同生产和使用这些多肽和催化结构域的方法。 | ||||||
权利要求 | 1.一种组合物,该组合物包括一种对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的分离的GH9内切葡聚糖酶,该分离的GH9内切葡聚糖酶选自下组,该组由以下各项组成: |
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说明书全文 | 具有黄原胶降解活性的多肽以及编码其的核苷酸[0002] 本申请包括一个计算机可读形式的序列表,将其通过引用结合在此。 [0003] 发明背景发明领域 [0004] 本发明涉及具有黄原胶降解活性,特别是黄原胶裂解酶活性的多肽并且涉及对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶,催化结构域,以及编码这些 多肽和催化结构域的多核苷酸。本发明还涉及包括这些多核苷酸的核酸构建体、载体以及 宿主细胞连同生产和使用这些多肽和催化结构域的方法。本发明进一步涉及包括用于在洗 涤剂以及用于在钻探和石油工业中使用的GH9内切葡聚糖酶和/或黄原胶裂解酶的组合 物。 [0005] 相关技术说明 [0006] 黄原胶是一种来源于野油菜黄单胞菌的细菌包被的多糖。黄原胶通过由野油菜黄单胞菌细菌发酵葡萄糖、蔗糖或乳糖而产生。在一个发酵周期后,用异丙醇将该多糖从生长培养基中沉淀,干燥,并磨成细粉。稍后,将其添加至液体介质中,以形成胶质。 [0007] 黄原胶是一种由不同糖组成的天然多糖,这些不同糖通过若干不同键连接,例如β-D-甘露糖基-β-D-1,4-葡萄糖醛酸基键和β-D-葡糖基-β-D-1,4-葡糖基键。黄原 胶在水中至少部分地可溶并且形成高粘稠溶液或凝胶。 [0008] 黄原胶的完全酶降解需要若干酶活性,包括黄原胶裂解酶活性和内切-β-1,4-葡聚糖酶活性。黄原胶裂解酶是切割黄原胶的β-D-甘露糖基-β-D-1,4-葡 萄糖醛酸基键的酶并且已经被描述于文献中。黄原胶降解酶在本领域中是已知的,例如具 有两种分离自溶藻弧菌类芽孢杆菌XL-1的黄原胶裂解酶(例如,Ruijssenaars(鲁基森纳 斯)等人.(1999)‘A pyruvated mannose-specific xanthan lyase involved in xanthan degradation by Paenibacillus alginolyticus XL-1(在由溶藻弧菌类芽孢杆菌XL-1降 解黄原胶中涉及的一种丙酮酸甘露糖特异性黄原胶裂解酶)’,Appl.Environ.Microbiol. (应用与环境微生物)65(6):2446-2452,和Ruijssenaars(鲁基森纳斯)等人.(2000),‘A novel gene encoding xanthan lyase of Paenibacillus alginolyticus strain XL-1(一种编码溶藻弧菌类芽孢杆菌菌株XL-1的黄原胶降解酶的新颖基因)’,Appl.Environ. Microbiol.(应用与环境微生物)66(9):3945-3950)。 [0009] 糖苷水解酶是催化糖基键水解以释放更小的糖的酶。存在超过100种已经被分类的糖苷水解酶,参见Henrissat(汉丽塞塔)等人(1991)‘A classification of glycosyl hydrolases based on amino-acid sequence similarities(基于氨基酸序 列相似性的糖基水解酶分类)’,J.Biochem.(生物化学杂志)280:309-316和Uniprot 网站,www.cazy.org。糖苷水解酶家族9(GH9)由超过70种不同的酶组成,这些酶大部 分是内切-葡聚糖酶(EC3.2.1.4)、纤维二糖水解酶(EC 3.2.1.91)、β-葡糖苷酶(EC 3.2.1.21)和外切-β-葡糖胺酶(EC 3.2.1.165)。已经由T.Morohoshi(莫拉浩施)等 人,(2011)J.Bacteriol.(细菌学杂志)193(8),2072-2073公开了一种来自砖红色微杆菌 (Microbacterium testaceum)StLB037的GH9,该GH9与SEQ ID NO:12具有84.5%序列一 致性、与SEQ ID NO:10具有79.1%序列一致性并且与SEQ ID NO:14具有74.0%序列一致 性。 [0010] 近年来,黄原胶已经被用作许多消费品中的成分,包括食品(例如在沙拉酱(salat dressing)和乳制品中作为增稠剂)和化妆品(例如在牙膏和化妆品中作为稳定剂 和增稠剂,以阻止成分分离)和化妆品(例如防晒霜)。另外,已经发现了黄原胶在石油工 业中的用途,连同作为添加剂以调节钻井液的粘度的用途等。黄原胶的广泛使用已经使得 希望降解黄原胶的溶液或凝胶从而允许更简单地去除副产品。已经提议向洗涤剂组合物中 添加黄原胶裂解酶以便除去包含黄原胶的污物,例如在EP0896998A中,但是这一公开物不 包含展示其任何效果的任何实验数据。 [0011] 本发明提供了用于降解黄原胶的新的且改进的酶以及此类酶用于清洁目的(例如除去黄原胶污物)以及在钻探和石油工业中的用途。 发明内容[0012] 在一个方面中,本发明涉及一种对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的分离的GH9内切葡聚糖酶,该分离的GH9内切葡聚糖酶选自下组,该组由以下各项组成: [0013] (a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性; [0014] (b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0015] (c)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:12的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0016] (d)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:14的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0017] (e)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:48的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0018] (f)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:52的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0019] (g)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:56的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0020] (h)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:82的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0021] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:86的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0022] (j)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:90的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0023] (k)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:94的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0024] (l)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:98的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0025] (m)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:102的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0026] (n)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:130的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0027] (o)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:134的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0028] (p)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:138的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0029] (q)一种多肽,该多肽由在中严谨度条件、中-高严谨度条件、高严谨度条件或非常高严谨度条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码: [0030] (i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列; [0031] (ii)SEQ ID NO:9的成熟多肽编码序列; [0032] (iii)SEQ ID NO:11的成熟多肽编码序列; [0033] (iv)SEQ ID NO:13的成熟多肽编码序列; [0034] (v)SEQ ID NO:47的成熟多肽编码序列; [0035] (vi)SEQ ID NO:51的成熟多肽编码序列; [0036] (vii)SEQ ID NO:55的成熟多肽编码序列; [0037] (viii)SEQ ID NO:81的成熟多肽编码序列; [0038] (ix)SEQ ID NO:85的成熟多肽编码序列; [0039] (x)SEQ ID NO:89的成熟多肽编码序列; [0040] (xi)SEQ ID NO:93的成熟多肽编码序列; [0041] (xii)SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列; [0042] (xiii)SEQ ID NO:101的成熟多肽编码序列; [0043] (xiv)SEQ ID NO:129的成熟多肽编码序列; [0044] (xv)SEQ ID NO:133的成熟多肽编码序列; [0045] (xvi)SEQ ID NO:137的成熟多肽编码序列;或 [0046] (xvii)(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)、(xv)、或(xvi)的全长互补体; [0047] (r)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0048] (s)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:9的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0049] (t)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:11的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0050] (u)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:13的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0051] (v)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:47的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0052] (w)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:51的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0053] (x)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:55的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0054] (y)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:81的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0055] (z)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:85的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0056] (aa)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:89的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0057] (ab)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:93的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0058] (ac)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0059] (ad)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:101的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0060] (ae)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:129的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0061] (af)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:133的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0062] (ag)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:137的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0063] (ah)SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:94、SEQ ID NO:98、SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:134或SEQ ID NO:138的成熟多肽的一种变体,该变体在一个或多个位置(例如若干个)处包括取代、缺失、和/或插入; 以及 [0064] (ai)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)或(ah)的多肽的一个片段,该片段对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性、具有黄原胶降解活性和/或内切-β-1,4-葡聚糖酶活性。 [0065] 在另一个方面中,本发明涉及一种具有黄原胶裂解酶活性的分离的多肽,该多肽选自下组,该组由以下各项组成: [0066] (a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:4的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性; [0067] (b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:46的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0068] (c)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:60的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0069] (d)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:64的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0070] (e)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:106的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0071] (f)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:110的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0072] (g)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:114的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0073] (h)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:118的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0074] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:122的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0075] (j)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:126的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0076] (k)一种多肽,该多肽由在中严谨度条件、中-高严谨度条件、高严谨度条件或非常高严谨度条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码: [0077] (i)SEQ ID NO:3的成熟多肽编码序列; [0078] (ii)SEQ ID NO:45的成熟多肽编码序列; [0079] (iii)SEQ ID NO:59的成熟多肽编码序列; [0080] (iv)SEQ ID NO:63的成熟多肽编码序列; [0081] (v)SEQ ID NO:105的成熟多肽编码序列; [0082] (vi)SEQ ID NO:109的成熟多肽编码序列; [0083] (vii)SEQ ID NO:113的成熟多肽编码序列; [0084] (viii)SEQ ID NO:117的成熟多肽编码序列; [0085] (ix)SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列; [0086] (x)SEQ ID NO:125的成熟多肽编码序列;或 [0087] (xi)(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、或(x)的全长互补体; [0088] (l)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:3的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0089] (m)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:45的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0090] (n)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:59的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0091] (o)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:63的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0092] (p)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:105的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0093] (q)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:109的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0094] (r)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:113的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0095] (s)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:117的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0096] (t)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0097] (u)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:125的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0098] (v)SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:118、SEQ ID NO:122或SEQ ID NO:126的成熟多肽的一种变体,该变体在一个或多个位置(例如若干个)处包括取代、缺失、和/或插入;以及 [0099] (w)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)或(v)的多肽的一个片段,该片段具有黄原胶裂解酶活性。 [0100] 在另一个方面中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括一种根据本发明的对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的分离的GH9内切葡聚糖酶。在一个另外的方面 中,该组合物进一步包括一种根据本发明的具有黄原胶裂解酶活性的分离的多肽。本发明 的组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括用于降解黄原胶的一种或多种洗 涤剂组分或一种组合物。 [0101] 已经出人意料地发现,包括一种黄原胶裂解酶及一种对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶的组合物在降解黄原胶方面比基于单独的酶的活性 所预期的显著更有效。 [0102] 本发明还涉及编码本发明的多肽的分离的多核苷酸;核酸构建体;重组表达载体;包括这些多核苷酸的重组宿主细胞;以及产生这些多肽的方法。 [0103] 本发明进一步涉及本发明的组合物用于降解黄原胶,用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)的用途,其中该组合物具有酶洗涤益处,或用于控制钻井液的粘 度的益处。本发明还涉及降解黄原胶的方法,其中黄原胶位于硬表面或纺织品的表面上,其中黄原胶用于压裂由钻井孔造成的地下地层,或其中黄原胶是一种钻孔滤饼中的组分。 [0104] 序列表综述 [0105] SEQ ID NO:1是如分离自类芽孢杆菌属NN062047的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0106] SEQ ID NO:2是如从SEQ ID NO:1推导的氨基酸序列。 [0107] SEQ ID NO:3是如分离自类芽孢杆菌属NN018054的黄原胶裂解酶的截短的DNA序列。 [0108] SEQ ID NO:4是如从SEQ ID NO:3推导的氨基酸序列。 [0109] SEQ ID NO:5是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:1的重组体表达序列的DNA序列。 [0110] SEQ ID NO:6是如从SEQ ID NO:5推导的氨基酸序列。 [0111] SEQ ID NO:7是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:3的重组体表达序列的DNA序列。 [0112] SEQ ID NO:8是如从SEQ ID NO:7推导的氨基酸序列。 [0113] SEQ ID NO:9是如分离自微杆菌属NN062149的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0114] SEQ ID NO:10是如从SEQ ID NO:9推导的氨基酸序列。 [0115] SEQ ID NO:11是如分离自微杆菌属NN062148的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0116] SEQ ID NO:12是如从SEQ ID NO:11推导的氨基酸序列。 [0117] SEQ ID NO:13是如分离自微杆菌属NN062045的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0118] SEQ ID NO:14是如从SEQ ID NO:13推导的氨基酸序列。 [0119] SEQ ID NO:15是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:9的重组体表达序列的DNA序列。 [0120] SEQ ID NO:16是如从SEQ ID NO:15推导的氨基酸序列。 [0121] SEQ ID NO:17是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:11的重组体表达序列的DNA序列。 [0122] SEQ ID NO:18是如从SEQ ID NO:17推导的氨基酸序列。 [0123] SEQ ID NO:19是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:13的重组体表达序列的DNA序列。 [0124] SEQ ID NO:20是如从SEQ ID NO:19推导的氨基酸序列。 [0125] SEQ ID NO:21是引物D88F。 [0126] SEQ ID NO:22是引物D89R。 [0127] SEQ ID NO:23是引物D124F。 [0128] SEQ ID NO:24是引物D125R。 [0129] SEQ ID NO:25是引物D126F。 [0130] SEQ ID NO:26是引物D127R。 [0131] SEQ ID NO:27是引物D128F。 [0132] SEQ ID NO:28是引物D129R。 [0134] SEQ ID NO:30是His-标记(也叫做聚组氨酸标记)。 [0135] SEQ ID NO:31是引物D117F。 [0136] SEQ ID NO:32是引物D118R。 [0137] SEQ ID NO:33是引物D158F。 [0138] SEQ ID NO:34是引物D159R。 [0139] SEQ ID NO:35是引物D168F。 [0140] SEQ ID NO:36是引物D169R。 [0141] SEQ ID NO:37是引物D170F。 [0142] SEQ ID NO:38是引物D170R。 [0143] SEQ ID NO:39是引物D171F。 [0144] SEQ ID NO:40是引物D172R。 [0145] SEQ ID NO:41是引物D160F。 [0146] SEQ ID NO:42是引物D161R。 [0147] SEQ ID NO:43是引物F-C3AQX。 [0148] SEQ ID NO:44是引物R-C3AQX。 [0149] SEQ ID NO:45是如分离自类芽孢杆菌属NN018054的黄原胶裂解酶的全长的DNA序列。 [0150] SEQ ID NO:46是如从SEQ ID NO:45推导的氨基酸序列。 [0151] SEQ ID NO:47是如分离自类芽孢杆菌属NN062047的截短的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0152] SEQ ID NO:48是如从SEQ ID NO:47推导的氨基酸序列。 [0153] SEQ ID NO:49是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:47的重组体表达序列的DNA序列。 [0154] SEQ ID NO:50是如从SEQ ID NO:49推导的氨基酸序列。 [0155] SEQ ID NO:51是如分离自类芽孢杆菌属NN062047的截短的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0156] SEQ ID NO:52是如从SEQ ID NO:51推导的氨基酸序列。 [0157] SEQ ID NO:53是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:51的重组体表达序列的DNA序列。 [0158] SEQ ID NO:54是如从SEQ ID NO:53推导的氨基酸序列。 [0159] SEQ ID NO:55是如分离自类芽孢杆菌属NN062253的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0160] SEQ ID NO:56是如从SEQ ID NO:55推导的氨基酸序列。 [0161] SEQ ID NO:57是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:55的重组体表达序列的DNA序列。 [0162] SEQ ID NO:58是如从SEQ ID NO:57推导的氨基酸序列。 [0163] SEQ ID NO:59是如分离自类芽孢杆菌属NN062250的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0164] SEQ ID NO:60是如从SEQ ID NO:59推导的氨基酸序列。 [0165] SEQ ID NO:61是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:59的重组体表达序列的DNA序列。 [0166] SEQ ID NO:62是如从SEQ ID NO:61推导的氨基酸序列。 [0167] SEQ ID NO:63是如分离自类芽孢杆菌属NN062047的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0168] SEQ ID NO:64是如从SEQ ID NO:63推导的氨基酸序列。 [0169] SEQ ID NO:65是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:63的重组体表达序列的DNA序列。 [0170] SEQ ID NO:66是如从SEQ ID NO:65推导的氨基酸序列。 [0171] SEQ ID NO:67是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:45的重组体表达序列的DNA序列。 [0172] SEQ ID NO:68是如从SEQ ID NO:67推导的氨基酸序列。 [0173] SEQ ID NO:69是引物D244F。 [0174] SEQ ID NO:70是引物D245R。 [0175] SEQ ID NO:71是引物D242F。 [0176] SEQ ID NO:72是引物D243R。 [0177] SEQ ID NO:73是引物D271F。 [0178] SEQ ID NO:74是引物D272R。 [0179] SEQ ID NO:75是引物D289F。 [0180] SEQ ID NO:76是引物D290R。 [0181] SEQ ID NO:77是引物D293F。 [0182] SEQ ID NO:78是引物D294R。 [0183] SEQ ID NO:79是引物D332F。 [0184] SEQ ID NO:80是引物D333R。 [0185] SEQ ID NO:81是如分离自类芽孢杆菌属NN062046的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0186] SEQ ID NO:82是如从SEQ ID NO:81推导的氨基酸序列。 [0187] SEQ ID NO:83是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:81的重组体表达序列的DNA序列。 [0188] SEQ ID NO:84是如从SEQ ID NO:83推导的氨基酸序列。 [0189] SEQ ID NO:85是如分离自类芽孢杆菌属NN018054的截短的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0190] SEQ ID NO:86是如从SEQ ID NO:85推导的氨基酸序列。 [0191] SEQ ID NO:87是来自SEQ ID NO:85的重组体表达序列的DNA序列。 [0192] SEQ ID NO:88是如从SEQ ID NO:87推导的氨基酸序列。 [0193] SEQ ID NO:89是如分离自类芽孢杆菌属NN062408的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0194] SEQ ID NO:90是如从SEQ ID NO:89推导的氨基酸序列。 [0195] SEQ ID NO:91是来自SEQ ID NO:89的重组体表达序列的DNA序列。 [0196] SEQ ID NO:92是如从SEQ ID NO:91推导的氨基酸序列。 [0197] SEQ ID NO:93是如分离自类芽孢杆菌属NN018054的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0198] SEQ ID NO:94是如从SEQ ID NO:93推导的氨基酸序列。 [0199] SEQ ID NO:95是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:93的重组体表达序列的DNA序列。 [0200] SEQ ID NO:96是如从SEQ ID NO:95推导的氨基酸序列。 [0201] SEQ ID NO:97是如分离自类芽孢杆菌属NN062332的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0202] SEQ ID NO:98是如从SEQ ID NO:97推导的氨基酸序列。 [0203] SEQ ID NO:99是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:97的重组体表达序列的DNA序列。 [0204] SEQ ID NO:100是如从SEQ ID NO:99推导的氨基酸序列。 [0205] SEQ ID NO:101是如分离自砖红色微杆菌的GH9内切葡聚糖酶的DNA序列。 [0206] SEQ ID NO:102是如从SEQ ID NO:101推导的氨基酸序列。 [0207] SEQ ID NO:103是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:101的重组体表达序列的DNA序列。 [0208] SEQ ID NO:104是如从SEQ ID NO:103推导的氨基酸序列。 [0209] SEQ ID NO:105是如分离自类芽孢杆菌属NN062147的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0210] SEQ ID NO:106是如从SEQ ID NO:105推导的氨基酸序列。 [0211] SEQ ID NO:107是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:105的重组体表达序列的DNA序列。 [0212] SEQ ID NO:108是如从SEQ ID NO:107推导的氨基酸序列。 [0213] SEQ ID NO:109是如分离自类芽孢杆菌属NN062193的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0214] SEQ ID NO:110是如从SEQ ID NO:109推导的氨基酸序列。 [0215] SEQ ID NO:111是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:109的重组体表达序列的DNA序列。 [0216] SEQ ID NO:112是如从SEQ ID NO:111推导的氨基酸序列。 [0217] SEQ ID NO:113是如分离自类芽孢杆菌属NN062408的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0218] SEQ ID NO:114是如从SEQ ID NO:113推导的氨基酸序列。 [0219] SEQ ID NO:115是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:113的重组体表达序列的DNA序列。 [0220] SEQ ID NO:116是如从SEQ ID NO:115推导的氨基酸序列。 [0221] SEQ ID NO:117是如分离自类芽孢杆菌属NN062332的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0222] SEQ ID NO:118是如从SEQ ID NO:117推导的氨基酸序列。 [0223] SEQ ID NO:119是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:117的重组体表达序列的DNA序列。 [0224] SEQ ID NO:120是如从SEQ ID NO:119推导的氨基酸序列。 [0225] SEQ ID NO:121是如分离自类芽孢杆菌属NN062046的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0226] SEQ ID NO:122是如从SEQ ID NO:121推导的氨基酸序列。 [0227] SEQ ID NO:123是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:121的重组体表达序列的DNA序列。 [0228] SEQ ID NO:124是如从SEQ ID NO:123推导的氨基酸序列。 [0229] SEQ ID NO:125是如分离自类芽孢杆菌属NN062253的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0230] SEQ ID NO:126是如从SEQ ID NO:125推导的氨基酸序列。 [0231] SEQ ID NO:127是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:125的重组体表达序列的DNA序列。 [0232] SEQ ID NO:128是如从SEQ ID NO:127推导的氨基酸序列。 [0233] SEQ ID NO:129是如分离自微杆菌属NN062175的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0234] SEQ ID NO:130是如从SEQ ID NO:129推导的氨基酸序列。 [0235] SEQ ID NO:131是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:129的重组体表达序列的DNA序列。 [0236] SEQ ID NO:132是如从SEQ ID NO:131推导的氨基酸序列。 [0237] SEQ ID NO:133是如分离自类芽孢杆菌属NN062193的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0238] SEQ ID NO:134是如从SEQ ID NO:133推导的氨基酸序列。 [0239] SEQ ID NO:135是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:133的重组体表达序列的DNA序列。 [0240] SEQ ID NO:136是如从SEQ ID NO:135推导的氨基酸序列。 [0241] SEQ ID NO:137是如分离自类芽孢杆菌属NN062193的截短的黄原胶裂解酶的DNA序列。 [0242] SEQ ID NO:138是如从SEQ ID NO:137推导的氨基酸序列。 [0243] SEQ ID NO:139是来自与His-标记可操作地连接的SEQ ID NO:137的重组体表达序列的DNA序列。 [0244] SEQ ID NO:140是如从SEQ ID NO:139推导的氨基酸序列。 [0245] SEQ ID NO:141是引物F-C597B。 [0246] SEQ ID NO:142是引物R-C597B。 [0247] SEQ ID NO:143是引物F-C5B9G。 [0248] SEQ ID NO:144是引物R-C5B9G。 [0249] SEQ ID NO:145是引物F-C59T2。 [0250] SEQ ID NO:146是引物R-C59T2。 [0251] SEQ ID NO:147是引物F-C4AM9。 [0252] SEQ ID NO:148是引物R-C4AM9。 [0253] SEQ ID NO:149是引物F-C4AKF。 [0254] SEQ ID NO:150是引物R-C4AKF。 [0255] SEQ ID NO:151是引物F-C59TM。 [0256] SEQ ID NO:152是引物R-C59TM。 [0257] SEQ ID NO:153是引物F-C59SY。 [0258] SEQ ID NO:154是引物R-C59SY。 [0259] SEQ ID NO:155是引物F-C3AX4。 [0260] SEQ ID NO:156是引物R-C3AX4。 [0261] SEQ ID NO:157是引物F-C4AKA。 [0262] SEQ ID NO:158是引物R-C4AKA。 [0263] SEQ ID NO:159是引物F-C3BXT。 [0264] SEQ ID NO:160是引物R-C3BXT。 [0265] SEQ ID NO:161是引物F-C597E。 [0266] SEQ ID NO:162是引物R-C597E。 [0267] SEQ ID NO:163是引物F-C597F。 [0268] SEQ ID NO:164是引物R-C597F。 [0269] SEQ ID NO:165是引物F-C3FCE。 [0270] SEQ ID NO:166是引物R-C3FCE。 [0271] SEQ ID NO:167是引物D14KMG。 [0272] SEQ ID NO:168是引物D14KMH。 [0273] SEQ ID NO:169是引物D14N38。 [0274] SEQ ID NO:170是引物D14N39。 [0275] GH9内切葡聚糖酶序列的一致性矩阵 [0276] [0277] 黄原胶裂解酶序列的一致性矩阵 [0278] [0280] 图1示出了具有用于SEQ ID NO:87的基因插入的线性载体的质粒图。 [0281] 定义 [0282] 等位基因变体:术语“等位基因变体”意指占用同一染色体位点的一种基因的两个或更多个替代形式中的任一者。等位基因变异由突变天然产生,并且可以导致群体内的多态性。基因突变可以是静默的(在所编码的多肽中没有改变)或可编码具有改变的氨基酸 序列的多肽。多肽的等位基因变体是由基因的等位基因变体编码的多肽。 [0283] 催化结构域:术语“催化结构域”意指一种酶的含有该酶的催化机构的区域。 [0284] cDNA:术语“cDNA”是指可以通过得自真核或原核细胞的成熟的、剪接的mRNA分子的反转录而制备的DNA分子。cDNA缺乏可以存在于对应基因组DNA中的内含子序列。早先的初始RNA转录本是mRNA的前体,其在呈现为成熟的剪接的mRNA之前要经一系列的步骤 进行加工,包括剪接。 [0285] 清洁或洗涤剂应用:术语“清洁或洗涤剂应用”意指应用内切葡聚糖酶在任何组合物中用于手动、机械或自动化清洁或洗涤硬表面或纺织品的目的的应用。 [0286] 清洁或洗涤剂组合物:术语“清洁或洗涤剂组合物”是指用于从有待清洁的物品(例如纺织品、餐具和硬表面)除去不希望的化合物的组合物。这些术语涵盖选择用于希 望的具体类型的清洁组合物和产品的形式(例如、液体、凝胶、粉末、颗粒、糊状、或喷雾组合物)的任何材料/化合物,并且包括但不限于洗涤剂组合物(例如,液体和/或固体衣 物洗涤剂和精细织物洗涤剂;硬表面清洁配制品,例如用于玻璃、木材、陶瓷以及金属台面和窗户;地毯清洁剂;炉灶清洁剂;织物清新剂;织物柔软剂;以及纺织品和衣物预去污剂(pre-spotter),连同餐具洗涤剂)。除了内切葡聚糖酶之外,该洗涤剂配制品还可以包含一种或多种另外的酶(例如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、卤代加过氧酶、过氧化氢酶以及甘露聚糖酶,或其任何混合物),和/或组分,例如表面活性剂、助洗剂、螯合剂(chelator)或螯合试剂(chelating agent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调理剂、泡沫促进剂、泡沫抑制剂、染料、香料、晦暗抑制剂、光增亮剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、防蚀剂、酶抑制剂或稳定剂、酶激活剂、一种或多种转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂以及荧光染料、抗氧化剂、和增溶剂。 [0287] 编码序列:术语“编码序列”意指直接指定一个多肽的氨基酸序列的多核苷酸。编码序列的边界一般由一个开放阅读框架决定,该开放阅读框架从一个起始密码子(如ATG、GTG或TTG)开始并且以一个终止密码子(如TAA、TAG或TGA)结束。编码序列可以是一种 基因组DNA、cDNA、合成DNA或其组合。 [0288] 颜色澄清:在洗涤和穿着过程中,松动或破损纤维可以在织物的表面上积聚。一种后果是由于表面污染,织物的颜色看起来不太亮或不太强烈。从纺织品上除去松动或断裂的纤维将部分地恢复该纺织品的初始颜色和外观。如在此使用,术语“颜色澄清”意指纺织品的原始颜色的部分恢复。 [0289] 控制序列:术语“控制序列”是指表达编码本发明的成熟多肽的多核苷酸所必需的核酸序列。每个控制序列对于编码该多肽的多核苷酸来说可以是原生的(即,来自相同基因)或外源的(即,来自不同基因),或相对于彼此是原生的或外源的。此类控制序列包括 但不限于前导子、聚腺苷酸化序列、前肽序列、启动子、信号肽序列、以及转录终止子。至少,控制序列包括启动子,以及转录和翻译终止信号。出于引入有利于将这些控制序列与编码 一种多肽的多核苷酸的编码区连接的特异性限制酶切位点的目的,这些控制序列可以提供 有多个接头。 [0290] 降解黄原胶:在此将术语“降解黄原胶”定义为将黄原胶解聚、降解或分解为更小的组分。黄原胶的降解可以是除去一个或多个侧链糖,将黄原胶的骨架切成更小的组分,或除去一个或多个侧链糖并且将黄原胶的骨架切成更小的组分。黄原胶的降解优选地可以使用如描述于实例6中的粘度降低方法而测量。可替代地,黄原胶的降解可以使用如描述于 实例6中的还原末端方法或如描述于实例25和26中的比色测定而测量。 [0291] δ反射值(Delta remission value)(ΔRem):在此将术语“δ反射”或“δ反射值”定义为在460nm处的反射比或反射测量值的结果。用一种具有类似颜色的小块布样,优选一种来自重复洗涤的小块布样作为背景测量该小块布样。在洗涤之前,测量代表每种小 块布样类型的小块布样。δ反射是洗涤的小块布样的反射值减去未洗涤的小块布样的反射 值。 [0292] δ酶性能值(ΔRem酶值):在此将术语“δ酶反射值”定义为在460nm处的反射比或反射测量值的结果。用一种具有类似颜色的小块布样,优选一种来自重复洗涤的小块 布样作为背景测量该小块布样。在洗涤之前,测量代表每种小块布样类型的小块布样。δ 反射是用存在一种酶的洗涤剂洗涤的小块布样的反射值减去用不存在酶的洗涤剂洗涤的 类似小块布样的反射值。 [0293] δ酶强度值(ΔInt酶值):在此将术语“δ酶强度”或“δ酶强度值”定义为如在AMSA测定中所定义的酶强度值的结果。δ强度是用存在一种酶的洗涤剂洗涤的小块布 样区域的强度值减去用不存在酶的洗涤剂洗涤的小块布样区域的强度值。 [0294] 洗涤剂组分:在此将术语“洗涤剂组分”定义为意指可以用于洗涤剂组合物中的化学品的类型。洗涤剂组分的实例是表面活性剂、助水溶剂、助洗剂、共助洗剂、螯合剂(chelator)或螯合试剂(chelating agent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调色剂、织物调理剂、泡沫促进剂、泡沫抑制剂、分散剂、染料转移抑制剂、荧光增白剂、香料、光增亮剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、污物释放聚合物、抗再沉积剂、酶抑制剂或稳定剂、酶激活剂、抗氧化剂、以及增溶剂。该洗涤剂组合物可以包括一种或多种任何类型的洗涤剂组分。 [0295] 洗涤剂组合物:术语“洗涤剂组合物”是指用于从有待清洁的物品(例如纺织品、餐具和硬表面)除去不希望的化合物的组合物。该洗涤剂组合物可以用于例如清洁纺织品、餐具以及硬表面,用于家用清洁剂和工业清洁二者。这些术语涵盖选择用于希望的具体类型的清洁组合物和产品的形式(例如、液体、凝胶、粉末、颗粒、糊状、或喷雾组合物)的任何材料/化合物,并且包括但不限于洗涤剂组合物(例如,液体和/或固体衣物洗涤剂和精 细织物洗涤剂;硬表面清洁配制品,例如用于玻璃、木材、陶瓷以及金属台面和窗户;地毯清洁剂;炉灶清洁剂;织物清新剂;织物柔软剂;以及纺织品和衣物预去污剂,连同餐具洗涤剂)。除了包含本发明的GH9内切葡聚糖酶和/或本发明的黄原胶裂解酶之外,该洗涤 剂配制品还可以包含一种或多种另外的酶(例如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、卤代加过氧酶(haloperoxygenase)、过氧化氢酶以及甘露聚糖酶,或其任何混合物),和/或组分,例如表面活性剂、助洗剂、螯合剂(chelator)或螯合试剂(chelating agent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调理剂、泡沫促进剂、泡沫抑制剂、染料、香料、晦暗抑制剂、光增亮剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、防蚀剂、酶抑制剂或稳定剂、酶激活剂、一种或多种转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂以及荧光染料、抗氧化剂、和增溶剂。 [0296] 餐具洗涤:术语“餐具洗涤”是指所有形式的洗涤餐具,例如手动或自动化餐具洗涤。洗涤餐具包括但不限于,清洁所有形式的陶器,例如盘子、杯子、玻璃杯、碗,所有形式的刀具,例如匙、刀、叉,以及服务用具连同陶瓷,塑料,金属,瓷器,玻璃及丙烯酸酯。 [0297] 餐具洗涤组合物:术语“餐具洗涤组合物”是指用于清洁硬表面的所有形式的组合物。本发明不局限于任何具体类型的餐具洗涤组合物或任何具体洗涤剂。 [0298] 内切葡聚糖酶:术语“内切葡聚糖酶”意指一种内切-1,4-(1,3;1,4)-β-D-葡聚糖4-葡聚糖水解酶(E.C.3.2.1.4),其催化纤维素、纤维素衍生物(如羧甲基纤维素和 羟乙基纤维素)、地衣多糖中的1,4-β-D-糖苷键和混合β-1,3葡聚糖如谷类β-D-葡 聚糖、木葡聚糖、黄原胶以及含有纤维素组分的其他植物材料中的β-1,4键的内切水解。 可以通过测量底物粘度的减小,或通过还原糖测定确定还原端增加来确定内切葡聚糖酶 活性(Zhang(张)等人,2006,Biotechnology Advances(生物技术进展)24:452-481)。 出出于本发明的目的,根据Ghose(高斯),1987,Pure and Appl.Chem.(纯粹与应用化 学)59:257-268的程序,在pH 5、40℃下,使用羧甲基纤维素(CMC)作为底物,确定内切葡聚糖酶活性。 [0299] 酶洗涤益处:在此将术语“酶洗涤益处”定义为将一种酶添加至洗涤剂中与不具有该酶的同一洗涤剂相比的有利效果。可以由酶提供的重要的洗涤益处是在洗涤和或清洁之后没有或有非常少的可见污垢的污物去除,预防或减少在洗涤过程中释放的污垢的再沉积 (一种也被称作抗再沉积的效果),完全或部分恢复纺织品的白度(一种也被称作增白的效 果),这些纺织品初始是白色的但是在重复使用和洗涤后获得浅灰色或浅黄色的外观。不直接与污垢的催化去污或其再沉积的预防相关的纺织品护理益处对于酶洗涤益处而言也是 重要的。此类纺织品护理益处的实例是预防或减少染料从一织物转移至另一织物或同一织 物的另一部分(一种也被称作染料转移抑制或抗返染的效果),从织物表面去除突出或断 裂的纤维以减少起球倾向或去除已经存在的绒球或绒毛(一种也被称作抗起球的效果), 改善织物柔软性,织物的颜色澄清以及去除陷在织物或服装的纤维中的微粒状污垢。酶漂 白是一种另外的酶洗涤益处,其中通常将催化活性用于催化漂白组分(例如过氧化氢或其 他过氧化物)的形成。 [0300] 表达:术语“表达”包括涉及多肽产生的任何步骤,包括但不限于,转录、转录后修饰、翻译、翻译后修饰、以及分泌。 [0301] 表达载体:术语“表达载体”意指一种直链或环状DNA分子,该分子包括编码一种多肽的一种多核苷酸并且可操作地连接至提供用于其表达的控制序列。 [0302] 片段:术语“片段”意指具有从成熟多肽或结构域的氨基和/或羧基端缺失的一个或多个(例如,若干个)氨基酸的多肽或催化结构域;其中该片段具有黄原胶降解活性,例如对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性或具有黄原胶裂解酶活性。 [0303] 对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶:将术语“对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶”或一种“对用黄原胶裂解酶 预处理的黄原胶具有活性且属于GH9类的糖基水解酶的酶”定义为一种多肽,该多肽包括 一个属于GH9类的糖基水解酶的结构域且对对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有显著 活性。在本发明的一个方面中,对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡 聚糖酶可以是一种具有选自以下各项的序列的多肽:SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:94、SEQ ID NO:98、SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:134以及SEQ ID NO:138。在一个具体方面中,对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具 有活性的GH9内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有比对CMC(羧甲基纤维 素)的比活性高的特异性,已知CMC是内切葡聚糖酶的一种极好底物。可以如以下实例8 所披露地确定对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶的活性。 [0304] 硬表面清洁:在此将术语“硬表面清洁”定义为清洁硬表面,其中硬表面可以包括地板、桌子、墙壁、屋顶等,连同硬物体的表面,例如汽车(汽车洗涤)和餐具(餐具洗涤)。餐具洗涤包括但不限于,清洁盘子、杯子、玻璃杯、碗、及刀具(例如匙、刀、叉)、上菜用具、陶瓷、塑料、金属、瓷器、玻璃及丙烯酸酯。 [0305] 宿主细胞:术语“宿主细胞”意指易于用包括本发明的一种多核苷酸的一种核酸构建体或表达载体进行转化、转染、转导等的任何细胞类型。术语“宿主细胞”涵盖由于复制期间发生的突变而与亲本细胞不同的亲本细胞的任何后代。 [0306] 改进的洗涤性能:在此将术语“改进的洗涤性能”定义为一种(变体)酶(还有酶的共混物,不只是变体还有骨架,以及与某种清洁组合物组合,等)相对于亲本蛋白酶变体的洗涤性能展示出一种蛋白质变体的洗涤性能的改变,例如增加的去污。术语“洗涤性能”包括在衣物洗涤并且例如在餐具洗涤中的洗涤性能。 [0307] 分离的:术语“分离的”意指处于非天然存在的形式或环境中的物质。分离的物质的非限制性实例包括(1)任何非天然发生的物质,(2)包括但不限于任何酶、变体、核酸、蛋白质、肽或辅因子的任何物质,该物质至少部分地从与其本质相关的一种或多种或所有天然发生的成分中去除;(3)相对于天然发现的物质通过人工修饰的任何物质;或(4)通过增 加该物质相对于与其本质相关的其他组分的量而修饰的任何物质(例如,编码该物质的基 因的多拷贝;使用比编码该物质的基因本质相关的启动子强的启动子)。分离的物质可以 存在于发酵液样品中。 [0308] 湿洗(laundering):术语“湿洗”涉及家用湿洗和工业湿洗两者并且意指用一种包含本发明的清洁或洗涤剂组合物的溶液处理纺织品的过程。湿洗过程可以例如使用例如 家用或工业洗衣机进行或可以手动进行。 [0309] 成熟多肽:术语“成熟多肽”意指在翻译和任何翻译后修饰如N-末端加工、C-末端截短、糖基化作用、磷酸化作用等之后处于其最终形式的多肽。在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:2的氨基酸-38至-1是信号肽的SignalP程序(Nielsen(尼尔森)等人,1997, Protein Engineering(蛋白质工程)10:1-6),成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸1至1055。 在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:10的氨基酸-33至-1是信号肽的SignalP程序,成 熟多肽是SEQ ID NO:10的氨基酸1至918。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:12 的氨基酸-32至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:12的氨基酸1至916。 在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:14的氨基酸-33至-1是信号肽的SignalP程序,成熟 多肽是SEQ ID NO:14的氨基酸1至918。在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:48的氨 基酸-36至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:48的氨基酸1至1007。 在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:52的氨基酸-36至-1是信号肽的SignalP程 序,成熟多肽是SEQ ID NO:52的氨基酸1至915。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:56的氨基酸-38至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:56的氨基酸1 至1056。 [0310] 在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:82的氨基酸-37至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:82的氨基酸1至1371。在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:86的氨基酸-37至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:86的氨基酸 1至1203。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:90的氨基酸-37至-1是信号肽的 SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:90的氨基酸1至1379。在一个另外的方面中,基于预 测SEQ ID NO:94的氨基酸-37至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:94 的氨基酸1至1371。在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:98的氨基酸-37至-1是信号肽 的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:98的氨基酸1至1372。在另一个方面中,基于预 测SEQ ID NO:102的氨基酸-32至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:102 的氨基酸1至922。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:130的氨基酸-36至-1是 信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:130的氨基酸1至916。在一个另外的方 面中,基于预测SEQ ID NO:134的氨基酸-37至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是 SEQ ID NO:134的氨基酸1至1373。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:138的氨 基酸-37至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:138的氨基酸1至1204。 [0311] 在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:4的氨基酸-31至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:4的氨基酸1至760。在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:46 的氨基酸-31至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:46的氨基酸1至1043。 在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:60的氨基酸-41至-1是信号肽的SignalP程 序,成熟多肽是SEQ ID NO:60的氨基酸1至896。在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:64的 氨基酸-24至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:64的氨基酸1至1038。 [0312] 在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:106的氨基酸-32至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:106的氨基酸1至901。在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:110的氨基酸-32至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:110的氨基 酸1至899。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:114的氨基酸-61至-1是信号肽 的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:114的氨基酸1至897。在一个另外的方面中,基 于预测SEQ ID NO:118的氨基酸-27至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:118的氨基酸1至933。在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:122的氨基酸-42至-1是 信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:122的氨基酸1至1049。在另一个方面中, 基于预测SEQ ID NO:126的氨基酸-33至-1是信号肽的SignalP程序,成熟多肽是SEQ ID NO:126的氨基酸1至900。 [0313] 本领域中已知的是,一个宿主细胞可以产生由同一多核苷酸表达的两种或更多种不同成熟多肽(即,具有不同C-末端和/或N-末端氨基酸)的混合物。本领域还已知,不 同的宿主细胞不同地加工多肽,并且因此一个表达一种多核苷酸的宿主细胞当与另一个表 达相同多核苷酸的宿主细胞相比时可以产生一种不同的成熟多肽(例如,具有一个不同的 C-末端和/或N-末端氨基酸)。 [0314] 成熟多肽编码序列:术语“成熟多肽编码序列”意指一种编码成熟多肽的多核苷酸,该成熟多肽具有酶活性,例如对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性或具有黄原 胶裂解酶活性。在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:1的核苷酸1至114编码信号肽的 SignalP程序(Nielsen(尼尔森)等人,1997,同上),成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:1的 核苷酸115至3279。在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:3的核苷酸1至93编码信号肽 的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:3的核苷酸94至2373。在一个另外的方 面中,基于预测SEQ ID NO:9的核苷酸501至599编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编 码序列是SEQ ID NO:9的核苷酸600至3353。在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:11的核 苷酸78至173编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:11的核苷酸 174至2921。在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:13的核苷酸101至199编码信号肽的 SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:13的核苷酸200至2953。在一个另外的方 面中,基于预测SEQ ID NO:45的核苷酸116至208编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽 编码序列是SEQ ID NO:45的核苷酸209至3337。在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:47 的核苷酸1至108编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:47的核苷 酸109至3129。在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:51的核苷酸1至108编码信号肽 的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:51的核苷酸109至2853。在一个另外的 方面中,基于预测SEQ ID NO:55的核苷酸1至114编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽 编码序列是SEQ ID NO:55的核苷酸115至3282。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:59的核苷酸1至123编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:59 的核苷酸124至2811。在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:63的核苷酸1至72编码信号 肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:63的核苷酸73至3195。 [0315] 在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:81的核苷酸1至111编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:81的核苷酸112至4224。在另一个方面中,基于预 测SEQ ID NO:85的核苷酸1至111编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:85的核苷酸112至3720。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:89的核苷 酸1至111编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:89的核苷酸112 至4248。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:93的核苷酸1至111编码信号肽的 SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:93的核苷酸112至4224。在一个方面中, 基于预测SEQ ID NO:97的核苷酸1至111编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列 是SEQ ID NO:97的核苷酸112至4227。在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:101的核苷 酸1至75编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:101的核苷酸76 至2841。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:105的核苷酸1至96编码信号肽的 SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:105的核苷酸97至2799。在一个另外的方 面中,基于预测SEQ ID NO:109的核苷酸1至96编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编 码序列是SEQ ID NO:109的核苷酸97至2793。在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:113的 核苷酸1至183编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:113的核苷 酸184至2874。在另一个方面中,基于预测SEQ ID NO:117的核苷酸1至81编码信号肽 的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:117的核苷酸82至2880。在一个另外的 方面中,基于预测SEQ ID NO:121的核苷酸1至126编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽 编码序列是SEQ ID NO:121的核苷酸127至3273。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:125的核苷酸1至99编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:125 的核苷酸100至2799。在一个方面中,基于预测SEQ ID NO:129的核苷酸1至96编码信号 肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:129的核苷酸97至2844。在另一个 方面中,基于预测SEQ ID NO:133的核苷酸1至111编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽 编码序列是SEQ ID NO:133的核苷酸112至4230。在一个另外的方面中,基于预测SEQ ID NO:137的核苷酸1至111编码信号肽的SignalP程序,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:137 的核苷酸112至3723。 [0316] 核酸构建体:术语“核酸构建体”意指单链或双链核酸分子,其分离自天然存在的基因,或其被修饰成以本来在自然界中不存在的方式含有核酸的区段,或其为合成的,其包含一个或多个控制序列。 [0317] 可操作地连接:术语“可操作地连接”意指一种配置,其中一个控制序列相对于一种多核苷酸的编码序列放置在一个适当位置处,以使得控制序列指引编码序列的表达。 [0318] 序列一致性:两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的相关性由参数“序列一致性”描述。出于本发明的目的,使用如在EMBOSS包(EMBOSS:欧洲分子生物学开放软件套件,Rice(赖斯)等人,2000,Trends Genet.(遗传学趋势)16:276-277)(优选5.0.0版 或更新版本)的尼德尔(Needle)程序中所实施的尼德尔曼-翁施算法(Needleman-Wunsch algorithm)(Needleman(尼德尔曼)和Wunsch(翁施),1970,J.Mol.Biol.(分子生物学杂 志)48:443-453)来测定两个氨基酸序列之间的序列一致性。使用的这些参数是空位开放 罚分10、空位延伸罚分0.5,以及EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取代矩阵。标记为 “最长一致性”的尼德尔的输出(使用–非简化选项获得)被用作百分比一致性并且被计 算如下: [0319] (一致的残基X 100)/(比对长度-比对中的空位总数) [0320] 出于本发明的目的,使用如在EMBOSS包(EMBOSS:欧洲分子生物学开放软件套件,赖斯等人,2000,同上)(优选5.0.0版或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德尔曼-翁施算法(尼德尔曼和翁施,1970,同上)来测定两个脱氧核糖核苷酸序列之间的序列一致 性。使用的这些参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5以及EDNAFULL(NCBI NUC4.4的 EMBOSS版本)取代矩阵。标记为“最长一致性”的尼德尔的输出(使用–非简化(nobrief) 选项获得)被用作百分比一致性并且被计算如下: [0321] (一致的脱氧核糖核苷酸X 100)/(比对长度-比对中的空位总数) [0322] 严谨度条件:不同的严谨度条件定义如下。 [0323] 术语“非常低严谨度条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹(Southern blotting)程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和25%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用 2X SSC、0.2%SDS,在45℃下洗涤三次,每次15分钟。 [0324] 术语“低严谨度条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和 25%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用2X SSC、0.2%SDS,在50℃ 下洗涤三次,每次15分钟。 [0325] 术语“中严谨度条件”意指对于至少100个核苷酸长度的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切和变性的鲑精DNA和35%甲 酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用2X SSC、0.2%SDS,在55℃下洗涤 三次,每次15分钟。 [0326] 术语“中-高严谨度条件”是指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子 DNA和35%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用2X SSC、0.2%SDS, 在60℃下洗涤三次,每次15分钟。 [0327] 术语“高严谨度条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和 50%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用2X SSC、0.2%SDS,在65℃ 下洗涤三次,每次15分钟。 [0328] 术语“非常高严谨度条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200毫克/ml剪切并变性的鲑鱼精子 DNA和50%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用2X SSC、0.2%SDS, 在70℃下洗涤三次,每次15分钟。 [0329] 子序列:术语“子序列”意指使一个或多个(例如,若干个)核苷酸从成熟多肽编码序列的5'端和/或3'端缺失的多核苷酸;其中该子序列编码一个片段,该片段具有酶活 性,例如对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性或具有黄原胶裂解酶活性。 [0330] 纺织品:术语“纺织品”意指包括纱线、纱线中间体、纤维、非机织物材料、天然材料、合成材料、以及任何其他纺织品材料的任何纺织品材料,这些材料制造的织物和由这些织物制成的产品(例如服装和其他物品)。该纺织品或织物可以处于针织品、机织物、牛仔布、非机织物、毡、纱线、以及毛巾布的形式。这些纺织品可以是纤维素基的,如天然纤维素,包括棉布、亚麻/亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维或者人造纤维素(例如,来源于木浆),包括纤维胶/人造丝、苎麻、醋酸纤维素纤维(三胞)、莱赛尔纤维(lyocell)或其 共混物。纺织品或织物也可以不基于纤维素,如天然聚酰胺,包括羊毛、驼毛、羊绒、马海毛、兔毛和蚕丝或合成聚合物如尼龙、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯和氨纶/弹性纤维(spandex/elastane)、或其共混物其以及基于纤维素和不基于纤维素的纤维的共混物。共 混物的例子是棉和/或人造丝/纤维胶与一种或几种伴随材料的共混物,该伴随材料例如 是羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚乙烯醇纤维、聚氯乙烯纤维、聚亚胺酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)以及含纤维素的纤维(例如人造丝/纤维 胶、苎麻、亚麻/亚麻布、黄麻、醋酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)。织物可以是常规的可洗涤衣物,例如玷污的家居衣物。当使用术语织物或衣服时,旨在也包括广义术语纺织品。 [0331] 纺织品护理益处:不直接与污垢的催化去污或其再沉积的预防相关的“纺织品护理益处”对于酶洗涤益处而言也是重要的。此类纺织品护理益处的实例是预防或减少染料 从一纺织品转移至另一纺织品或同一纺织品的另一部分(一种也被称作染料转移抑制或 抗返染的效果),从纺织品表面去除突出或断裂的纤维以减少起球倾向或去除已经存在的 绒球或绒毛(一种也被称作抗起球的效果),改善纺织品柔软性,纺织品的颜色澄清以及去 除陷在纺织品的纤维中的微粒状污垢。酶漂白是一种另外的酶洗涤益处,其中通常将催化 活性用于催化漂白组分(例如过氧化氢或其他过氧化物或其他漂白种类)的形成。 [0332] 变体:术语“变体”意指一种对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶,在一个或多个(例如,若干个)位置处的具有取代、插入、和/或缺失。取代意指用一个不同氨基酸置换占用一个位置的氨基酸;缺失意指去除占据一个位置的氨基酸;并且插入意指邻近于并且紧跟着占据一个位置的氨基酸之后添加一个或多个(例如,若干 个)氨基酸(例如,1-5个氨基酸)。 [0333] 在一个实施例中,术语“变体”意指具有黄原胶裂解酶活性、在一个或多个(例如,若干个)位置处包括改变(即取代、插入、和/或缺失)的一个多肽。取代意指用一个不同氨基酸置换占用一个位置的氨基酸;缺失意指去除占据一个位置的氨基酸;并且插入意 指邻近于并且紧跟着占据一个位置的氨基酸之后添加一个或多个(例如,若干个)氨基酸 (例如,1-5个氨基酸)。 [0334] 在另一个实施例中,术语“变体”意指一种对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性、在一个或多个(例如,若干个)位置处包括改变(即取代、插入、和/或缺失)的GH9内切葡聚糖酶。取代意指用一个不同氨基酸置换占用一个位置的氨基酸;缺失意指去除占 据一个位置的氨基酸;并且插入意指邻近于并且紧跟着占据一个位置的氨基酸之后添加一 个或多个(例如,若干个)氨基酸(例如,1-5个氨基酸)。 [0335] 洗涤性能:术语“洗涤性能”被用作酶在例如洗涤或硬表面清洁过程中除去存在于有待清洁的物体上的污物的能力。可以通过计算如在此的‘用于衣物洗涤的自动机械应力测定(AMSA)’中所定义的所谓的强度值(Int)或如在此所定义的反射值(Rem)来量化洗涤 性能的改进。还参见在此的实例9、18、19、28、31以及32中的洗涤性能测试。 [0336] 白度:在此将术语“白度”定义为在不同领域并且针对不同顾客具有不同含义的广义术语。白度的损失可以例如归因于灰化、黄化、或光增亮剂/调色剂的去除。灰化和黄化可归因于污垢再沉积、身体污垢、来自例如铁和铜离子或染料转印的着色。白度可以包括来自以下列表的一个或若干问题:着色剂或染料作用;不完全污物去除(例如身体污垢、皮脂等);再沉积(物体的灰化、黄化或其他变色)(去除的污垢与纺织品的其他部分(弄脏的或未弄脏的)再关联);在应用过程中纺织品的化学变化;以及颜色的澄清或淡色化。 [0337] 黄原胶裂解酶:在此将术语“黄原胶裂解酶”定义为一种切割黄原胶中的β-D-甘露糖基-β-D-1,4-葡萄糖醛酸基键的酶(EC 4.2.2.12)。出于本发明的目的,根据实例中描述的程序确定黄原胶裂解酶活性。在一个方面中,本发明的多肽具有至少20%,例如至 少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、或至少100%的SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:60或SEQ ID NO:64的成熟多肽的黄原胶裂解酶 活性。可以如在实例部分中描述,如在‘黄原胶裂解酶活性测定’中描述确定黄原胶裂解酶活性。 [0338] 发明详细说明 [0339] 本发明提供了具有黄原胶裂解酶活性的多肽和对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶以及编码这些多肽的多核苷酸。先前未显示这些GH9内切 葡聚糖酶类的酶降解黄原胶。另外,黄原胶裂解酶与本发明的对用黄原胶裂解酶预处理的 黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶的组合显示超过单独使用黄原胶裂解酶或对用黄原 胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶的协同的改进洗涤性能。 [0340] 对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶及具有黄原胶裂解酶活性的多肽 [0341] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80%, 例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少 92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性,这些内切葡聚糖酶具有黄原胶降解活性。 [0342] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80%, 例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。 [0343] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0344] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有内切葡聚糖酶活性并且对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片 段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:2的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:2的氨基酸1至1055或由其组成。 [0345] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:10的成熟多肽具有至少 85%,例如至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性,这些内切葡聚糖酶具有黄原胶降解活性。 [0346] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:10的成熟多肽具有至少80%, 例如至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。 [0347] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:10的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:10的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0348] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:10的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有内切葡聚糖酶活性并且对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片 段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:10的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:10的氨基酸1至918或由其组成。 [0349] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:12的成熟多肽具有至 少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。 [0350] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:12的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:12的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0351] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:12的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:12的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:12的 氨基酸1至916或由其组成。 [0352] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:14的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0353] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:14的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:14的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0354] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:14的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:14的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:14的 氨基酸1至918或由其组成。 [0355] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:48的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0356] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:48的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:48的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0357] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:48的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:48的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:48的 氨基酸1至1007或由其组成。 [0358] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:52的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0359] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:52的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:52的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0360] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:52的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:52的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:52的 氨基酸1至915或由其组成。 [0361] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:56的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0362] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:56的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:56的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0363] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:56的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:56的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:56的 氨基酸1至1056或由其组成。 [0364] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:82的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0365] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:82的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:82的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0366] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:82的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:82的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:82的 氨基酸1至1371或由其组成。 [0367] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:86的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0368] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:86的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:86的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0369] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:86的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:86的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:86的 氨基酸1至1203或由其组成。 [0370] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:90的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0371] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:90的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:90的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0372] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:90的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:90的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:90的 氨基酸1至1379或由其组成。 [0373] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:94的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0374] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:94的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:94的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0375] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:94的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:94的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:94的 氨基酸1至1371或由其组成。 [0376] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:98的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0377] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:98的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:98的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0378] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:98的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:98的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:98的 氨基酸1至1372或由其组成。 [0379] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:130的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0380] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:130的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:130的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0381] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:130的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:130的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:130 的氨基酸1至916或由其组成。 [0382] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:134的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0383] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:134的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:134的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0384] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:134的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:134的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:134 的氨基酸1至1373或由其组成。 [0385] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:138的成熟多肽具有至 少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或 100%的序列一致性。 [0386] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:138的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:138的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0387] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:138的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:138的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:138 的氨基酸1至1204或由其组成。 [0388] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由在中严谨度条件、中-高严谨度条件、高严谨度条件或非常高严谨度条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:97、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:137的成熟多肽编码序列或其全长互补体(Sambrook(萨姆布鲁克)等人,1989,Molecular Cloning,A Laboratory Manual(分子克隆,实验室手册),第2版,Cold Spring Harbor(冷泉港),纽约)。在一个 另外的实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶 裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由在高严谨度条件或非常高严谨度条件下与以下各项杂 交的多核苷酸编码:SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13的成熟多肽编码序列或其全长互补体。 [0389] 可以根据本领域中熟知的方法,使用SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:97、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:133或SEQ ID NO:137的多核苷酸或其子序列,连同SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:94、SEQ ID NO:98、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:134、SEQ ID NO:138的多肽或其片段来设计从不同属或种的菌株中鉴定并克隆编码对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶的DNA的核酸探针。具体而言,可以根据标准DNA印 迹程序,使用这类探针与感兴趣的细胞的基因组DNA或cDNA杂交,以便鉴别和分离其中的 对应基因。这类探针可以明显短于完整序列,但是长度应为至少15,例如至少25、至少35、或至少70个核苷酸。优选地,该核酸探针的长度为至少100个核苷酸,例如长度为至少200 个核苷酸、至少300个核苷酸、至少400个核苷酸、至少500个核苷酸、至少600个核苷酸、至少700个核苷酸、至少800个核苷酸、或至少900个核苷酸。DNA和RNA探针都可使用。典 32 3 35 型地将探针进行标记(例如,用 P、H、S、生物素、或抗生物素蛋白),以检测相应的基因。 本发明涵盖此类探针。 [0390] 可以针对与以上描述的探针杂交并且编码对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶的DNA对由这类其他菌株制备的基因组DNA或cDNA文库进行 筛选。来自这类其他菌株的基因组DNA或其他DNA可以通过琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电 泳,或其他分离技术来分离。来自文库的DNA或分离的DNA可转移到并固定在硝酸纤维素 或其他适合的载体材料上。为了鉴定与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:97、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:133或SEQ ID NO:137或其子序列杂交的克隆或DNA,在DNA印迹中使用载体材料。 [0391] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:4的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。 [0392] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:4的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:4的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0393] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:4的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:4的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:4的氨基酸1至760或由其 组成。 [0394] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:46的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。 [0395] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:46的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:46的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0396] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:46的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:46的 成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:46的氨基酸1至1043或 由其组成。 [0397] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:60的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。 [0398] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:60的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:60的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0399] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:60的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:60的 成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:60的氨基酸1至896或由 其组成。 [0400] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:64的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。 [0401] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:64的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:64的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0402] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:64的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:64的 成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:64的氨基酸1至1038或 由其组成。 [0403] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:106的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至 少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。 [0404] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:106的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:106的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0405] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:106的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:106的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:106的氨基酸1至901或 由其组成。 [0406] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:110的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至 少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。 [0407] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:110的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:110的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0408] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:110的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:110的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:110的氨基酸1至899或 由其组成。 [0409] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:114的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至 少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。 [0410] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:114的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:114的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0411] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:114的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:114的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:114的氨基酸1至897或 由其组成。 [0412] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:118的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至 少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。 [0413] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:118的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:118的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0414] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:118的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:118的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:118的氨基酸1至933或 由其组成。 [0415] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:122的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至 少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。 [0416] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:122的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:122的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0417] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:122的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:122的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:122的氨基酸1至1049或 由其组成。 [0418] 在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:126的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至 少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。 [0419] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:126的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:126的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0420] 本发明的多肽优选地包括或由SEQ ID NO:126的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:126的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:126的氨基酸1至900或 由其组成。 [0421] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由在中严谨度条件、中-高严谨度条件、高严谨度条件或非常高严谨度条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码:SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:125的成熟多肽编码序列或其全长互补体(Sambrook(萨姆布鲁克)等人,1989,Molecular Cloning、A Laboratory Manual(分子克隆,实验室手册),第2版,Cold Spring Harbor(冷泉港),纽约)。 [0422] 可以根据本领域中熟知的方法,使用SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:125的多核苷酸或其子序列,连同SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:118、SEQ ID NO:122、SEQ ID NO:126的多肽或其片段来设计从不同属或种的菌株中鉴定并克隆编码具有黄原胶裂解酶活性的多肽的DNA的核酸探针。具体而言,可以根据标准DNA印迹程 序,使用这类探针与感兴趣的细胞的基因组DNA或cDNA杂交,以便鉴别和分离其中的对应 基因。这类探针可以明显短于完整序列,但是长度应为至少15,例如至少25、至少35、或至少70个核苷酸。优选地,该核酸探针的长度为至少100个核苷酸,例如长度为至少200个 核苷酸、至少300个核苷酸、至少400个核苷酸、至少500个核苷酸、至少600个核苷酸、至 少700个核苷酸、至少800个核苷酸、或至少900个核苷酸。DNA和RNA探针都可使用。典 32 3 35 型地将探针进行标记(例如,用 P、H、S、生物素、或抗生物素蛋白),以检测相应的基因。 本发明涵盖此类探针。 [0423] 可以针对与以上描述的探针杂交并且编码具有黄原胶裂解酶活性的多肽的DNA对由这类其他菌株制备的基因组DNA或cDNA文库进行筛选。来自这类其他菌株的基因组 DNA或其他DNA可以通过琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳,或其他分离技术来分离。来自文 库的DNA或分离的DNA可转移到并固定在硝酸纤维素或其他适合的载体材料上。为了鉴 定与SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:125或其子序列杂交的克隆或DNA,在DNA印迹中使用载体材料。 [0424] 出于本发明的目的,杂交指示该多核苷酸在中严谨度条件至非常高严谨度条件下与对应于以下各项的标记的核酸探针杂交:(i)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:97、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:133或SEQ ID NO:137;(ii)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:97、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:133或SEQ ID NO:137的成熟多肽编码序列;(iii)其全长互补体;(iv)其子序列;(v)SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:125;(vi)SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:125的成熟多肽编码序列;(vii)其全长互补体;或(viii)其子序列。可以使用例如X-射线胶片或本领 域已知的任何其他检测手段来检测在这些条件下该核酸探针所杂交的分子。 [0425] 在一个方面中,该核酸探针是一种编码以下各项的多核苷酸:SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:94、SEQ ID NO:98、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:134或SEQ ID NO:138的多肽;其成熟多肽;或其片段。在另一个方面中,该核酸探针是SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:97、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:133或SEQ ID NO:137。 [0426] 在一个方面中,该核酸探针是一种编码以下各项的多核苷酸:SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:118、SEQ ID NO:122或SEQ ID NO:126的多肽;其成熟多肽;或其片段。在另一个方面中,该核酸探针是SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:121或SEQ ID NO:125。 [0427] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0428] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:9的成熟多肽编码序列 具有至少85%,例如至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少 92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0429] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:11的成熟多肽编码序列 具有至少90%,例如至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0430] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:13的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0431] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:47的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0432] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:51的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0433] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:55的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0434] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:81的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0435] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:85的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0436] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:89的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0437] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:93的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0438] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0439] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:129的成熟多肽编码序 列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0440] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:133的成熟多肽编码序 列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0441] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:137的成熟多肽编码序 列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0442] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:3的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0443] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:45的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0444] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:59的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0445] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:63的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0446] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:105的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0447] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:109的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0448] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:113的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0449] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:117的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0450] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0451] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的多肽,该多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:125的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少 95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。 [0452] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:2 的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0453] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:4的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:4 的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0454] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:10的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:10的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0455] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:12的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:12的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0456] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:14的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:14的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0457] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:46的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:46的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0458] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:48的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:48的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0459] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:52的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:52的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0460] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:52的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:52的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0461] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:56的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:56的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0462] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:60的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:60的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0463] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:64的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:64的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0464] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:82的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:82的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0465] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:86的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:86的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0466] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:90的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:90的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0467] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:94的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:94的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0468] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:98的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:98的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或 9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保 守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0469] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:102的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:102的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、 7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末 端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结 合结构域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0470] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:106的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:106的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、 7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末 端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结 合结构域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0471] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:110的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:110的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、 7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末 端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结 合结构域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0472] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:114的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:114的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、 7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末 端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结 合结构域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0473] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:118的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:118的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、 7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末 端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结 合结构域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0474] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:122的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:122的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、 7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末 端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结 合结构域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0475] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:126的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:126的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、 7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末 端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结 合结构域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0476] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:130的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:130的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、 7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末 端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结 合结构域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0477] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:134的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:134的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、 7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末 端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结 合结构域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0478] 在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:138的成熟多肽的变体。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:138的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、 7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末 端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结 合结构域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0479] 保守取代的实例是在下组的范围内:碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸及组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮 氨酸、异亮氨酸及缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸)及小氨基酸(甘氨 酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸及甲硫氨酸)。一般不会改变特异性活性的氨基酸取代是本领域已知的并且例如由H.Neurath(诺伊拉特)和R.L.Hill(希尔),1979在The Proteins(蛋 白质),Academic Press(学术出版社),纽约中描述。常见取代是Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu、和Asp/Gly。 [0480] 可替代地,氨基酸改变具有这样一种性质:改变多肽的物理化学特性。例如,氨基酸改变可以提高多肽的热稳定性、改变底物特异性、改变最适pH,等等。 [0481] 可以根据本领域中已知的程序,如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(Cunningham(坎宁汉)和Wells(威尔斯),1989,Science(科学)244:1081-1085)来鉴定多肽中的必需氨 基酸。在后一技术中,在分子中的每个残基处引入单一的丙氨酸突变,并对得到的突变体分子测试纤维素酶和/或黄原胶裂解酶活性从而鉴定对分子活性至关重要的氨基酸残基。还 参见,Hilton(Hilton)等人,1996,J.Biol.Chem.(生物化学杂志)271:4699-4708。也可 结合假定接触位点氨基酸的突变,如通过以下技术例如核磁共振、结晶学、电子衍射、或光亲和标记进行确定的对结构进行物理学分析,从而确定酶的活性位点或其他生物学相互作 用。参见例如de Vos(德沃斯)等人,1992,Science(科学)255:306-312;Smith(史密斯) 等人,1992,J.Mol.Biol.(分子生物学杂志)224:899-904;Wlodaver(沃德弗)等人,1992,FEBS Lett.(欧洲生物化学学会联盟简讯)309:59-64。还可以从与相关多肽的比对来推断 鉴别必需氨基酸。 [0482] 使用已知的诱变、重组和/或改组方法、随后进行一个相关的筛选程序可以做出单一或多种氨基酸取代、缺失和/或插入并对其进行测试,这些相关的筛选程序例如由 Reidhaar-Olson(瑞德哈尔-奥尔森)和Sauer(萨奥尔),1988,科学241:53-57;Bowie(鲍 依)和萨奥尔,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美国国家科学院院刊)86:2152-2156;WO 95/17413;或者WO 95/22625所描述的那些。可以使用的其他方法包括易错PCR、噬菌体展 示(例如Lowman(洛曼)等人,1991,Biochemistry(生物化学)30:10832-10837;美国专 利号5,223,409;WO 92/06204)以及区域定向突变诱发(Derbyshire(德贝夏)等人,1986, Gene(基因)46:145;Ner(内尔)等人,1988,DNA 7:127)。 [0483] 可以结合诱变/改组方法与高通量自动化筛选方法来检测由宿主细胞表达的克隆的、诱变的多肽的活性(Ness(内斯)等人,1999,Nature Biotechnology(自然生物技 术)17:893-896)。编码活性多肽的诱变的DNA分子可以回收自宿主细胞,并且使用本领域 的标准方法对其进行迅速测序。这些方法允许迅速确定多肽中单个氨基酸残基的重要性。 [0484] 该多肽可以是一种杂合多肽,其中一种多肽的一个区域在另一种多肽的一个区域的N-末端或C-末端处融合。 [0485] 该多肽可以是融合多肽或可切割的融合多肽,其中另一种多肽在本发明多肽的N-末端或C-末端处融合。通过将编码另一多肽的多核苷酸融合到本发明的多核苷 酸而产生融合多肽。用于产生融合多肽的技术在本领域是已知的,并包括连接编码多肽 的编码序列,这样使得它们在框内并且使得融合多肽的表达处于相同的一个或多个启动 子和终止子的控制下。融合多肽还可以使用内含肽技术来构建,其中融合多肽在翻译后 产生(Cooper(库珀)等人,1993,欧洲分子生物学学会杂志(欧洲分子生物学学会杂 志)12:2575-2583;Dawson(道森)等人,1994,Science(科学)266:776-779)。 [0486] 融合多肽可以在两个多肽之间进一步包括一个切割位点。在融合蛋白分泌之时,该位点被切割,从而释放出这两个多肽。切割位点的实例包括但不限于以下各 项中披露的位点:Martin(马丁)等人,2003,J.Ind.Microbiol.Biotechnol.(工业微 生物学与生物技术杂志)3:568-576;Svetina(斯韦蒂纳)等人,2000,J.Biotechnol. (生物技术杂志)76:245-251;Rasmussen(拉斯马森)-Wilson(威尔逊)等人,1997, Appl.Environ.Microbiol.(应用环境微生物学)63:3488-3493;Ward(华德)等人, 1995,Biotechnology(生物技术)13:498-503;以及Contreras(孔特拉斯)等人,1991, Biotechnology(生物技术)9:378-381;Eaton(伊顿)等人,1986,Biochemistry(生物 化学)25:505-512;Collins(柯林斯)-Racie(莱斯)等人,1995,Biotechnology(生 物技 术)13:982-987;Carter(卡 特)等 人,1989,Proteins:Structure,Function,and Genetics(蛋白质:结构、功能和遗传学)6:240-248;以及史蒂文斯(Stevens),2003,Drug Discovery World(世界药物发现)4:35-48。 [0487] 该多肽可以由包含对于His标记或HQ标记的编码的重组DNA序列来表达,以在任意翻译后修饰之后给出包含该His标记或HQ标记的全部或部分的成熟多肽。该HQ标 记(具有序列–RHQHQHQ)可以在该翻译后修饰过程中完全或部分切割掉,得到例如另外的 氨基酸-附接至该成熟多肽的N端的RHQHQ。该His标记(具有序列–RPHHHHHH)可以在 该翻译后修饰期间完全或部分裂解掉,得到另外的氨基酸,例如附接至该成熟多肽的N端 的–RPHHHHH、–RPHHHH、–RPHHH、–RPHH、–RPH、-RP或–R。 [0488] 包括对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶及具有黄原胶裂解酶活性的多肽的组合物 [0489] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:2的 成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少 90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或 硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液 的粘度。 [0490] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0491] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有内切葡聚糖酶活性并且对用黄原胶裂解酶预处理的 黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:2的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:2的氨基酸1至1055或由其组成。 [0492] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:10 的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或 硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液 的粘度。 [0493] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:10的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:10的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0494] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:10的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有内切葡聚糖酶活性并且对用黄原胶裂解酶预处理的 黄原胶具有活性的其片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:10的成熟多肽或由其 组成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:10的氨基酸1至 918或由其组成。 [0495] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:12的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0496] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:12的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:12的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0497] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:12的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。 在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:12的成熟多肽或由其组 成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:12的氨基酸1至916 或由其组成。 [0498] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:14的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0499] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:14的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:14的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0500] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:14的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。 在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:14的成熟多肽或由其组 成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:14的氨基酸1至918 或由其组成。 [0501] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:48的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0502] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:48的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:48的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0503] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:48的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。 在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:48的成熟多肽或由其组 成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:48的氨基酸1至1007或由其组成。 [0504] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:52的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0505] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:52的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:52的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0506] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:52的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。 在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:52的成熟多肽或由其组 成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:52的氨基酸1至915 或由其组成。 [0507] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:56的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0508] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:56的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:56的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0509] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:56的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。 在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:56的成熟多肽或由其组 成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:56的氨基酸1至1056或由其组成。 [0510] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:82的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0511] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:82的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:82的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0512] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:82的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。 在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:82的成熟多肽或由其组 成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:82的氨基酸1至1371或由其组成。 [0513] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:86的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0514] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:86的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:86的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0515] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:86的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。 在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:86的成熟多肽或由其组 成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:86的氨基酸1至1203或由其组成。 [0516] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:90的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0517] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:90的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:90的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0518] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:90的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。 在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:90的成熟多肽或由其组 成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:90的氨基酸1至1379或由其组成。 [0519] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:94的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0520] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:94的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:94的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0521] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:94的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。 在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:94的成熟多肽或由其组 成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:94的氨基酸1至1371或由其组成。 [0522] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:98的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0523] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:98的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:98的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0524] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:98的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片段。 在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:98的成熟多肽或由其组 成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:98的氨基酸1至1372或由其组成。 [0525] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:102的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0526] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:102的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:102的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0527] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:102的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片 段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:102的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:102的氨基酸1 至922或由其组成。 [0528] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:130的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0529] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:130的成熟 多肽具有至少85%序列一致性。 [0530] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:130的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:130的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0531] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:130的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片 段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:130的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:130的氨基酸1 至916或由其组成。 [0532] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:134的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0533] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:134的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:134的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0534] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:134的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片 段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:134的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:134的氨基酸1 至1373或由其组成。 [0535] 在一个另外的实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性并且与SEQ ID NO:138的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%的序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织 品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控 制钻井液的粘度。 [0536] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:138的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:138的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0537] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:138的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的其片 段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:138的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:138的氨基酸1 至1204或由其组成。 [0538] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由在中严谨度条 件、中-高严谨度条件、高严谨度条件或非常高严谨度条件下与以下各项杂交的多核苷酸 编码:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:97、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:137的成熟多肽编码序列或其全长互补体(Sambrook(萨姆布鲁克)等人,1989,Molecular Cloning,A Laboratory Manual(分子 克隆,实验室手册),第2版,Cold Spring Harbor(冷泉港),纽约)。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用 于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄 原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0539] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性并且与SEQ ID NO:4的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组 分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物 可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0540] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:4的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:4的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0541] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:4的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:4的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:4的氨基酸1至760或由其组成。 [0542] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有裂解酶活性并且与SEQ ID NO:46的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且 可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于 降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0543] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:46的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:46的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0544] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:46的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:46的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中, 该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:46的氨基酸1至1043或由其组成。 [0545] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有裂解酶活性并且与SEQ ID NO:60的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且 可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于 降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0546] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:60的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:60的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0547] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:60的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:60的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中, 该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:60的氨基酸1至896或由其组成。 [0548] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有裂解酶活性并且与SEQ ID NO:64的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且 可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于 降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0549] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:64的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、 16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、 30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、 44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:64的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0550] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:64的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:64的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中, 该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:64的氨基酸1至1038或由其组成。 [0551] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有裂解酶活性并且与SEQ ID NO:106的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于 降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0552] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:106的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:106的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0553] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:106的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:106的成熟多肽或由其组成。在另一个方面 中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:106的氨基酸1至901或由其组成。 [0554] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有裂解酶活性并且与SEQ ID NO:110的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于 降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0555] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:110的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:110的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0556] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:110的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:110的成熟多肽或由其组成。在另一个方面 中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:110的氨基酸1至899或由其组成。 [0557] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有裂解酶活性并且与SEQ ID NO:114的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于 降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0558] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:114的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:114的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0559] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:114的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:114的成熟多肽或由其组成。在另一个方面 中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:114的氨基酸1至897或由其组成。 [0560] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有裂解酶活性并且与SEQ ID NO:118的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于 降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0561] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:118的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:118的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0562] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:118的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:118的成熟多肽或由其组成。在另一个方面 中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:118的氨基酸1至933或由其组成。 [0563] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有裂解酶活性并且与SEQ ID NO:122的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于 降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0564] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:122的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:122的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0565] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:122的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:122的成熟多肽或由其组成。在另一个方面 中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:122的氨基酸1至1049或由其组成。 [0566] 在一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有裂解酶活性并且与SEQ ID NO:126的成熟多肽具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于 降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0567] 在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:126的成熟多肽的区别不超过50个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、 15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、 29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、 43个、44个、45个、46个、47个、48个、或49个。在一个优选的方面中,这些多肽与SEQ ID NO:126的成熟多肽的区别不超过10个氨基酸,例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个氨基酸。 [0568] 一种包括本发明的多肽的组合物,该多肽优选地包括或由SEQ ID NO:126的氨基酸序列或其等位基因变体组成;或是具有黄原胶裂解酶活性的其片段。在另一个方面中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:126的成熟多肽或由其组成。在另一个方面 中,该组合物包括一种多肽,该多肽包括SEQ ID NO:126的氨基酸1至900或由其组成。 [0569] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由在中严谨度条件、中-高严谨度条件、高严谨度条件或非常 高严谨度条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码:SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:125的成熟多肽编码序列或其全长互补体(Sambrook(萨姆布 鲁克)等人,1989,Molecular Cloning、A Laboratory Manual(分子克隆,实验室手册),第 2版,Cold Spring Harbor(冷泉港),纽约)。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤 剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和 /或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻 井液的粘度。 [0570] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用 于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄 原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0571] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:9的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用 于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄 原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0572] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:11的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0573] 在另一个实施例中,本发明涉及一种分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:13的成熟多肽编码序列 具有至少80%,例如至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0574] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:47的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0575] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:51的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0576] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:55的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0577] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:81的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0578] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:85的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0579] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:89的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0580] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:93的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0581] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0582] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:101的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0583] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:129的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0584] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:133的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0585] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的GH9内切葡聚糖酶,这些内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性,由一种与SEQ ID NO:137的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少 88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少 96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0586] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:3的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少 93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种 如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗 涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0587] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:45的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少 93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种 如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗 涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0588] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:59的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少 93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种 如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗 涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0589] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:63的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少 93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种 如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗 涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0590] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:105的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少 93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种 如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗 涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0591] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:109的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少 93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种 如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗 涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0592] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:113的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少 93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种 如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗 涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0593] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:117的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少 93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种 如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗 涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0594] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:121的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少 93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种 如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗 涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0595] 在另一个实施例中,本发明涉及一种组合物,该组合物包括分离的多肽,这些多肽具有黄原胶裂解酶活性,由与SEQ ID NO:125的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少 93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多核苷酸编码。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种 如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗 涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0596] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:2的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸 取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末 端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功 能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构域。该变 体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0597] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:4的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并 且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用 于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:4的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸 取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末 端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或另一种功 能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构域。该变 体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0598] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:10的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:10的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0599] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:12的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:12的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0600] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:14的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:14的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0601] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:46的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:46的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0602] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:48的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:48的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0603] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:52的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:52的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0604] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:56的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:56的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0605] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:60的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:60的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0606] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:64的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:64的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0607] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:82的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:82的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0608] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:86的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:86的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0609] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:90的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:90的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0610] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:94的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:94的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0611] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:98的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:98的 成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0612] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:102的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:102的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0613] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:106的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:106的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0614] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:110的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:110的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0615] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:114的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:114的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0616] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:118的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:118的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0617] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:122的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:122的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0618] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:126的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:126的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地具有黄原胶裂解酶活性。 [0619] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:130的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:130的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0620] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:134的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:134的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0621] 在另一个实施例中,本发明涉及组合物,这些组合物包括在一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:138的成熟多肽的变体。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分, 并且可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可 以用于降解黄原胶,例如用于控制钻井液的粘度。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:138的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。 这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守 氨基酸取代或插入;典型地1-30个氨基酸的较小缺失;较小的氨基-或羧基-末端延伸, 如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的较小接头肽;或便于通过改变净电荷或 另一种功能来纯化的较小延伸,如His-标记(聚组氨酸段(tract))、抗原表位或结合结构 域。该变体优选地对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [0622] 保守取代的实例是在下组的范围内:碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸及组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮 氨酸、异亮氨酸及缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸)及小氨基酸(甘氨 酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸及甲硫氨酸)。一般不会改变特异性活性的氨基酸取代是本领域已知的并且例如由H.Neurath(诺伊拉特)和R.L.Hill(希尔),1979在The Proteins(蛋 白质),Academic Press(学术出版社),纽约中描述。常见取代是Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu、和Asp/Gly。 [0623] 可替代地,氨基酸改变具有这样一种性质:改变多肽的物理化学特性。例如,氨基酸改变可以提高多肽的热稳定性、改变底物特异性、改变最适pH,等等。 [0624] 可以根据本领域中已知的程序,如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(坎宁汉(Cunningham)和威尔斯(Wells),1989,科学(Science)244:1081-1085)来鉴定多肽中的必 需氨基酸。在后一技术中,在分子中的每个残基处引入单一的丙氨酸突变,并对得到的突变体分子测试纤维素酶和/或黄原胶裂解酶活性从而鉴定对分子活性至关重要的氨基酸残 基。还参见,Hilton(Hilton)等人,1996,J.Biol.Chem.(生物化学杂志)271:4699-4708。 也可结合假定接触位点氨基酸的突变,如通过以下技术例如核磁共振、结晶学、电子衍射、或光亲和标记进行确定的对结构进行物理学分析,从而确定酶的活性位点或其他生物学相 互作用。参见例如de Vos(德沃斯)等人,1992,Science(科学)255:306-312;Smith(史密 斯)等人,1992,J.Mol.Biol.(分子生物学杂志)224:899-904;Wlodaver(沃德弗)等人, 1992,FEBS Lett.(欧洲生物化学学会联盟简讯)309:59-64。还可以从与相关多肽的比对 来推断鉴别必需氨基酸。 [0625] 使用已知的诱变、重组和/或改组方法、随后进行一个相关的筛选程序可以做出单一或多种氨基酸取代、缺失和/或插入并对其进行测试,这些相关的筛选程序例如由 Reidhaar-Olson(瑞德哈尔-奥尔森)和Sauer(萨奥尔),1988,科学241:53-57;Bowie(鲍 依)和萨奥尔,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美国国家科学院院刊)86:2152-2156;WO 95/17413;或者WO 95/22625所描述的那些。可以使用的其他方法包括易错PCR、噬菌体展 示(例如Lowman(洛曼)等人,1991,Biochemistry(生物化学)30:10832-10837;美国专 利号5,223,409;WO 92/06204)以及区域定向突变诱发(Derbyshire(德贝夏)等人,1986, Gene(基因)46:145;Ner(内尔)等人,1988,DNA 7:127)。 [0626] 可以结合诱变/改组方法与高通量自动化筛选方法来检测由宿主细胞表达的克隆的、诱变的多肽的活性(Ness(内斯)等人,1999,Nature Biotechnology(自然生物技 术)17:893-896)。编码活性多肽的诱变的DNA分子可以回收自宿主细胞,并且使用本领域 的标准方法对其进行迅速测序。这些方法允许迅速确定多肽中单个氨基酸残基的重要性。 实施例 [0627] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:2的GH9 内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗 涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于 洗涤或清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原 胶,例如用于控制钻井液的粘度。 [0628] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0629] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0630] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0631] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0632] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0633] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0634] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0635] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0636] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:10的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0637] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:10的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0638] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:10的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0639] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:10的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0640] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:10的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0641] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:10的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0642] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:10的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0643] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:10的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0644] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:10的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0645] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:10的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0646] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:12的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0647] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:12的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0648] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:12的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0649] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:12的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0650] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:12的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0651] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:12的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0652] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:12的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0653] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:12的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0654] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:12的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0655] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:12的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0656] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:14的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0657] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:14的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0658] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:14的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0659] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:14的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0660] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:14的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0661] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:14的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0662] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:14的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0663] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:14的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0664] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:14的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0665] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:14的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0666] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:48的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0667] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:48的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0668] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:48的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0669] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:48的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0670] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:48的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0671] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:48的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0672] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:48的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0673] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:48的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0674] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:48的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0675] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:48的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0676] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:52的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0677] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:52的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0678] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:52的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0679] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:52的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0680] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:52的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0681] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:52的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0682] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:52的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0683] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:52的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0684] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:52的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0685] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:52的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0686] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:56的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0687] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:56的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0688] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:56的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0689] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:56的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0690] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:56的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0691] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:56的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0692] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:56的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0693] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:56的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0694] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:56的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0695] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:56的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0696] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:82的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0697] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:82的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0698] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:82的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0699] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:82的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0700] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:82的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0701] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:82的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0702] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:82的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0703] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:82的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0704] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:82的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0705] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:82的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0706] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:86的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0707] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:86的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0708] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:86的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0709] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:86的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0710] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:86的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0711] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:86的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0712] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:86的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0713] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:86的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0714] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:86的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0715] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:86的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0716] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:90的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0717] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:90的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0718] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:90的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0719] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:90的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0720] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:90的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0721] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:90的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0722] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:90的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0723] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:90的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0724] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:90的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0725] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:90的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0726] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:94的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0727] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:94的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0728] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:94的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0729] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:94的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0730] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:94的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0731] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:94的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0732] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:94的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0733] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:94的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0734] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:94的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0735] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:94的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0736] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:98的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清洁纺 织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如用于 控制钻井液的粘度。 [0737] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:98的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0738] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:98的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0739] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:98的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0740] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:98的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0741] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:98的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0742] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:98的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0743] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:98的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0744] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:98的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0745] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:98的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0746] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:102的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0747] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:102的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0748] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:102的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0749] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:102的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0750] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:102的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0751] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:102的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0752] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:102的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0753] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:102的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0754] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:102的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0755] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:102的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0756] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:130的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0757] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:130的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0758] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:130的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0759] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:130的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0760] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:130的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0761] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:130的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0762] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:130的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0763] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:130的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0764] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:130的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0765] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:130的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0766] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:134的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0767] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:134的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0768] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:134的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0769] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:134的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0770] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:134的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0771] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:134的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0772] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:134的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0773] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:134的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0774] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:134的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0775] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:134的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0776] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:138的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:4的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组合 物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或清 洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例如 用于控制钻井液的粘度。 [0777] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:138的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:46的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0778] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:138的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:60的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0779] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:138的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:64的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0780] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:138的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:106的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0781] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:138的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:110的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0782] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:138的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:114的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0783] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:138的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:118的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0784] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:138的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:122的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0785] 本发明的一个实施例是一种组合物,该组合物包括SEQ ID NO:138的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:126的具有黄原胶裂解酶活性的多肽。该组合物优选是一种洗涤剂组 合物,该洗涤剂组合物包括一种或多种如在此所定义的洗涤剂组分,并且可以用于洗涤或 清洁纺织品和/或硬表面(例如餐具洗涤)。可替代地,该组合物可以用于降解黄原胶,例 如用于控制钻井液的粘度。 [0786] 对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶及具有黄原胶裂解酶活性的多肽的来源 [0787] 本发明的对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶及具有黄原胶裂解酶活性的多肽可以获得自任何属的微生物。出于本发明的目的,如在此结合 一种给定的来源使用的术语“从...中获得”应意指由多核苷酸编码的多肽是由该来源或 者由其中已经插入来自该来源的多核苷酸的一种菌株产生的。在一个方面中,获得自给定 来源的多肽被分泌到细胞外。 [0788] 在一个方面中,该多肽来自杆菌纲的细菌,例如来自芽孢杆菌目,或来自类芽孢杆菌科,或来自类芽孢杆菌属或来自类芽孢杆菌种,例如类芽孢杆菌属NN062047、类芽孢杆菌属NN062250、类芽孢杆菌属NN062253、类芽孢杆菌属NN018054、类芽孢杆菌属NN062046、类芽孢杆菌属NN062408、类芽孢杆菌属NN062332、类芽孢杆菌属NN062147或类芽孢杆菌属NN062193。 [0789] 在另一个方面中,该多肽来自放线菌纲的细菌,例如来自放线菌目,或来自微杆菌科,或来自微杆菌属或来自微杆菌种,例如砖红色微杆菌、微杆菌属NN062045、微杆菌属NN062148、微杆菌属NN062175或微杆菌属NN062149。 [0790] 将理解的是,对于以上提到的物种而言,本发明涵盖完全状态和不完全状态(perfect and imperfect states)二者、以及其他分类学等效物,例如无性型,而不管它们已知的物种名称是什么。本领域的普通技术人员将容易地识别适当等效物的身份。 [0791] 这些物种的株系可以容易地在许多培养物保藏中心为公众所获得,如美国典型培养物保藏中心(ATCC)、德国微生物菌种保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH,DSMZ)、荷兰菌种保藏中心(Centraalbureau Voor Schimmelcultures,CBS)、以及美国农业研究菌种保藏中心北方地区研究中心 (NRRL)。 [0792] 可以使用以上提到的探针从其他来源,包括从自然界(例如,土壤、堆肥、水等等)分离的微生物或直接从自然材料(例如,土壤、堆肥、水等等)获得的DNA样品鉴定和获得该多肽。用于从自然生活环境中直接分离微生物和DNA的技术是本领域熟知的。然后可以 通过类似地筛选另一微生物的基因组DNA或cDNA文库或混合的DNA样品来获得编码该多 肽的多核苷酸。一旦用一种或多种探针检测到编码多肽的多核苷酸,就可以通过使用本领 域普通技术人员已知的技术分离或克隆该多核苷酸(参见例如,Sambrook(萨姆布鲁克)等 人,1989,同上)。 [0793] 多核苷酸 [0794] 本发明还涉及编码本发明的多肽的分离的多核苷酸,如在此所述。 [0795] 用于分离或克隆多核苷酸的技术是本领域中已知的并且包括从基因组DNA或cDNA,或其组合进行分离。来自基因组DNA的多核苷酸的克隆可以例如通过使用众所周知 的聚合酶链反应(PCR)或用以对具有共有的结构特征的克隆的DNA片段进行检测的表达库 抗体筛选来实现。参见例如,Innis(伊尼斯)等人,1990,PCR:A Guide to Methods and Application(PCR:方法和应用指南),学术出版社,纽约。可以使用其他核酸扩增程序例如连接酶链式反应(LCR)、连接激活转录(LAT)和基于多核苷酸的扩增(NASBA)。这些多核苷 酸可以克隆进枯草芽孢杆菌或大肠杆菌的菌株或相关有机体中,并且因此,例如可以是该 多核苷酸的多肽编码区的等位基因变体或物种变体。 [0796] 编码本发明多肽的多核苷酸的修饰对于合成实质上类似于该多肽的多肽可以是必需的。术语“实质上类似于”该多肽是指该多肽的非天然发生的形式。这些多肽可能以 某种工程化方式而不同于从其天然来源分离的多肽,例如在比活性、热稳定性、pH最佳值等方面不同的变体。可以在表示为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID:NO:13、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:93、SEQ ID NO:97、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:125、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:133或SEQ ID NO:137的成熟多肽 编码序列(例如其子序列)的多核苷酸的基础上,和/或通过引入不造成该多肽的氨基酸 序列改变但是对应于旨在产生该酶的宿主有机体的密码子使用的核苷酸取代,或通过引入 可以产生不同氨基酸序列的核苷酸取代来构建这些变体。对于核苷酸取代的一般描述,参 见例如Ford(福德)等人,1991,‘Protein Expression and Purification(蛋白表达与纯 化)’2:95-107。 [0797] 核酸构建体 [0798] 本发明还涉及核酸构建体,这些核酸构建体包括可操作地连接至一个或多个控制序列的本发明的多核苷酸,在与控制序列相容的条件下,这些控制序列指导编码序列在合 适的宿主细胞中的表达。 [0799] 可以按多种方式操纵多核苷酸,以提供多肽的表达。取决于表达载体,在其插入载体以前操纵多核苷酸可以是希望的或必需的。用于利用重组DNA方法修饰多核苷酸的技术是本领域熟知的。 [0800] 该控制序列可以是一个启动子,即,被宿主细胞识别以对编码本发明多肽的多核苷酸进行表达的一种多核苷酸。该启动子包含转录控制序列,这些序列介导了该多肽的表 达。该启动子可以是在宿主细胞中显示出转录活性的任何多核苷酸,包括突变型、截短型及杂合型启动子,并且可以是由编码与该宿主细胞同源或异源的细胞外或细胞内多肽的基因 获得。 [0801] 用于在细菌宿主细胞中指导本发明的核酸构建体的转录的合适启动子的实例是从以下基因中获得的启动子:解淀粉芽孢杆菌α-淀粉酶基因(amyQ)、地衣芽孢杆菌 α-淀粉酶基因(amyL)、地衣芽孢杆菌青霉素酶基因(penP)、嗜热脂肪芽孢杆菌麦芽糖淀 粉酶基因(amyM)、枯草芽孢杆菌果聚糖蔗糖酶基因(sacB)、枯草芽孢杆菌xylA和xylB基 因、苏云金芽孢杆菌cryIIIA基因(Agaisse(Agaisse)和Lereclus(勒尔克吕),1994, Molecular Microbiology(分子微生物学)13:97-107)、大肠杆菌lac操纵子、大肠杆菌trc 启动子(Egon(埃贡)等人,1988,Gene(基因)69:301-315)、天蓝色链霉菌琼脂水解酶基因 (dagA)、以及原核β-内酰胺酶基因(Villa-Kamaroff(维拉-卡马洛夫)等人,1978,Proc. Natl.Acad.Sci.USA(美国国家科学院院刊)75:3727-3731)、以及tac启动子(DeBoer(德 波尔)等人,1983,Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美国国家科学院院刊)80:21-25)。其他启动 子描述在Gilbert(吉尔伯特)等人,1980,Scientific American(科学美国人)242:74-94 的“来自重组细菌的有用蛋白质(Useful proteins from recombinant bacteria)”;以及在Sambrook(萨姆布鲁克)等人,1989,同上中。串联启动子的实例披露在WO 99/43835中。 [0802] 用于指导本发明的核酸构建体在丝状真菌宿主细胞中的转录的合适启动子的实例是从以下各项的基因获得的启动子:构巢曲霉乙酰胺酶、黑曲霉中性α-淀粉酶、黑曲 霉酸稳定性α-淀粉酶、黑曲霉或泡盛曲霉葡糖淀粉酶(glaA)、米曲霉TAKA淀粉酶、米曲 霉碱性蛋白酶、米曲霉丙糖磷酸异构酶、尖镰孢胰蛋白酶样蛋白酶(WO 96/00787)、镶片 镰孢淀粉葡糖苷酶(WO 00/56900)、镶片镰孢Daria(WO 00/56900)、镶片镰孢Quinn(WO 00/56900)、米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)脂肪酶、米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶、里氏 木霉β-葡糖苷酶、里氏木霉纤维二糖水解酶I、里氏木霉纤维二糖水解酶II、里氏木霉内 切葡聚糖酶I、里氏木霉内切葡聚糖酶II、里氏木霉内切葡聚糖酶III、里氏木霉内切葡聚 糖酶IV、里氏木霉内切葡聚糖酶V、里氏木霉木聚糖酶I、里氏木霉木聚糖酶II、里氏木霉 β-木糖苷酶,以及NA2-tpi启动子(一种修饰的启动子,其来自曲霉属中性α-淀粉酶基 因,其中未翻译的前导序列由曲霉属丙糖磷酸异构酶基因的未翻译的前导序列替代;非限 制性实例包括修饰的启动子,其来自黑曲霉中性α-淀粉酶的基因,其中未翻译的前导序 列由构巢曲霉或米曲霉丙糖磷酸异构酶基因的未翻译的前导序列替代);以及其突变型启 动子、截短型启动子、以及杂合型启动子。 [0803] 在酵母宿主中,有用的启动子从以下的基因获得:酿酒酵母烯醇酶(ENO-1)、酿酒酵母半乳糖激酶(GAL1)、酿酒酵母醇脱氢酶/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(ADH1/GAP、ADH2/GAP)、酿酒酵母丙糖磷酸异构酶(TPI)、酿酒酵母金属硫蛋白(CUP1)、以及和酿酒酵母3-磷酸甘油酸激酶。Romanos(罗马诺斯)等人,1992,Yeast(酵母)8:423-488描述了酵母宿主 细胞的其他有用的启动子。 [0804] 控制序列还可以是由宿主细胞识别以终止转录的一种转录终止子。该终止子可操作地连接到编码该多肽的多核苷酸的3’-末端。在该宿主细胞中起作用的任何终止子都可 以用于本发明中。 [0805] 用于细菌宿主细胞的优选终止子是从克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶(aprH)、地衣芽孢杆菌α-淀粉酶(amyL)、以及大肠杆菌核糖体RNA(rrnB)的基因获得。 [0806] 丝状真菌宿主细胞的优选终止子是从以下各项的基因中获得的:构巢曲霉邻氨基苯甲酸合酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、黑曲霉α-葡萄糖苷酶、米曲霉TAKA淀粉酶以及尖孢镰刀菌胰蛋白酶样蛋白酶。 [0807] 用于酵母宿主细胞的优选终止子从以下各项的基因获得:酿酒酵母烯醇酶、酿酒酵母细胞色素C(CYC1)、以及酿酒酵母甘油醛-3-磷酸脱氢酶。用于酵母宿主细胞的其他有 用的终止子由罗马努斯等人,1992,见上文描述。 [0808] 控制序列还可以是启动子下游和基因的编码序列上游的mRNA稳定子区,其增加该基因的表达。 [0809] 适合的mRNA稳定区的实例是从以下获得的:苏云金芽孢杆菌cryIIIA基因(WO94/25612)和枯草芽孢杆菌SP82基因(Hue(化)等人,1995,Journal of Bacteriology(细 菌学杂志)177:3465-3471)。 [0810] 该控制序列还可以是一个前导子,一种对宿主细胞翻译很重要的非翻译mRNA区域。该前导序列可操作地连接到编码该多肽的多核苷酸的5’-末端。可以使用在宿主细胞 中具有功能的任何前导子。 [0811] 用于丝状真菌宿主细胞的优选前导子是从米曲霉TAKA淀粉酶和构巢曲霉丙糖磷酸异构酶的基因获得。 [0812] 适用于酵母宿主细胞的前导子从以下各项的基因获得:酿酒酵母烯醇酶(ENO-1)、酿酒酵母3-磷酸甘油酸激酶、酿酒酵母α因子、以及酿酒酵母醇脱氢酶/甘油 醛-3-磷酸脱氢酶(ADH2/GAP)。 [0813] 控制序列还可以是一种聚腺苷酸化序列,可操作地连接至该多核苷酸的3’-末端并且当转录时由宿主细胞识别为将聚腺苷酸残基添加至所转录的mRNA的信号的序列。在 宿主细胞中起作用的任何聚腺苷酸化序列都可以使用。 [0815] 有用于酵母宿主细胞的聚腺苷酸化序列在Guo(郭)和Sherman(谢尔曼),1995,Mol.Cellular Biol.(分子细胞生物学)15:5983-5990中有过描述。 [0816] 控制序列也可以是编码与多肽的N-端连接并指导多肽进入细胞的分泌通路的信号肽的信号肽编码区。多核苷酸的编码序列的5’-端可以固有地包括在翻译阅读框架中 与编码多肽的编码序列的区段天然地连接的一个信号肽编码序列。可替代地,编码序列 5’-末端可以包括对于该编码序列是外源的信号肽编码序列。在编码序列不天然地包含信 号肽编码序列的情况下,可能需要外源信号肽编码序列。可替代地,外源信号肽编码序列可简单地替换天然的信号肽编码序列以便增强该多肽的分泌。然而,指导所表达的多肽进入 宿主细胞的分泌路径中的任何信号肽编码序列都可以使用。 [0817] 用于细菌宿主细胞的有效信号肽编码序列是从以下各项的基因获得的信号肽编码序列:芽孢杆菌属NCIB 11837产麦芽糖淀粉酶、地衣芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶、地衣芽 孢杆菌β-内酰胺酶、嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶、嗜热脂肪芽孢杆菌中性蛋白酶(nprT、nprS、nprM)、以及枯草芽孢杆菌prsA。西蒙纳(Simonen)和帕尔瓦(Palva),1993,《微生物学评论》(Microbiological Reviews)57:109-137描述了另外的信号肽。 [0818] 用于丝状真菌宿主细胞的有效信号肽编码序列是获得自以下项的基因的信号肽编码序列:黑曲霉中性淀粉酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、米曲霉TAKA淀粉酶、特异腐质 霉(Humicola insolens)纤维素酶、特异腐质霉内切葡聚糖酶V、柔毛腐质霉(Humicola lanuginosa)脂肪酶、以及米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶。 [0819] 对于酵母宿主细胞有用的信号肽获得自以下项的基因:酿酒酵母α-因子和酿酒酵母转化酶。上文的罗马诺斯等人(1992)描述了其他有用的信号肽编码序列。 [0820] 该控制序列还可以是编码位于多肽的N-末端处的前肽的一个前肽编码序列。生成的多肽被称为前体酶(proenzyme)或多肽原(或者在一些情况下被称为酶原 (zymogen))。多肽原通常是无活性的并且可以通过从该多肽原上催化切割或自动催化切割 前肽而被转化成一种活性多肽。前肽编码序列可以从以下各项的基因获得:枯草芽孢杆菌 碱性蛋白酶(aprE)、枯草芽孢杆菌中性蛋白酶(nprT)、嗜热毁丝霉漆酶(WO 95/33836)、曼赫根毛霉天冬氨酸蛋白酶、以及酿酒酵母α因子。 [0821] 在信号肽序列和前肽序列二者都存在的情况下,该前肽序列定位成紧邻多肽的N-末端并且该信号肽序列定位成紧邻该前肽序列的N-末端。 [0822] 还可以希望添加调节序列,这些调节序列相对于宿主细胞的生长来调节多肽的表达。调节系统的实例是响应于化学或物理刺激而引起基因的表达开启或关闭的那些,包括 调节化合物的存在。原核系统中的调节序列包括lac、tac、以及trp操纵子系统。在酵母 中,可以使用ADH2系统或GAL1系统。在丝状真菌中,可以使用黑曲霉葡糖淀粉酶启动子、 米曲霉TAKAα-淀粉酶启动子、以及米曲霉葡糖淀粉酶启动子。调节序列的其他实例是允 许基因扩增的那些。在真核系统中,这些调节序列包括在氨甲蝶呤存在下被扩增的二氢叶 酸还原酶基因以及用重金属扩增的金属硫蛋白基因。在这些情况下,编码该多肽的多核苷 酸将与调节序列可操作地连接。 [0823] 表达载体 [0824] 本发明还涉及包括本发明的多核苷酸、启动子、以及转录和翻译终止信号的重组表达载体。不同的核苷酸和控制序列可以连接在一起以产生一个重组表达载体,这一重组 表达载体可以包括一个或多个便利的限制酶切位点以允许在这些位点处插入或取代编码 该变体的多核苷酸。可替代地,该多核苷酸可以通过将该多核苷酸或包括该多核苷酸的核 酸构建体插入用于表达的适当载体中来表达。在产生该表达载体时,该编码序列是位于该 载体中,这样使得该编码序列与该供表达的适当控制序列可操作地连接。 [0825] 重组表达载体可以是任何载体(例如,质粒或病毒),其能够方便地进行重组DNA程序,并且能够引起多核苷酸的表达。载体的选择将典型地取决于该载体与有待引入该载 体的宿主细胞的相容性。该载体可以是一种线性的或闭合的环状质粒。 [0826] 载体可以是自主复制载体,即,作为染色体外实体存在的载体,其复制独立于染色体复制,例如,质粒、染色体外元件、微染色体、或人工染色体。该载体可以包含用于确保自我复制的任何装置。可替代地,该载体可以是这样一种载体,当它被引入该宿主细胞中时,被整合到基因组中并且与其中已整合了它的一个或多个染色体一起复制。此外,可以使用单一载体或质粒或两个或更多个载体或质粒(这些载体或质粒共同包含有待引入到宿主 细胞的基因组中的总DNA)或转座子。 [0827] 该载体优选包含允许容易选择转化细胞、转染细胞、转导细胞或类似细胞的一个或多个选择性标记。选择性标记是一种基因,该基因的产物提供了杀生物剂抗性或病毒抗 性、重金属抗性、营养缺陷型的原养型、等。 [0828] 细菌选择性标记的实例是地衣芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌dal基因、或赋予抗生素抗性(例如氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、新霉素、大观霉素、或四环素抗性)的标记。用于酵母宿主细胞的适合的标记包括但不限于ADE2、HIS3、LEU2、LYS2、MET3、TRP1、以及URA3。 用于在丝状真菌宿主细胞中使用的选择性标记包含但不限于amdS(乙酰胺酶)、argB(鸟氨 酸氨甲酰基转移酶)、bar(草胺膦乙酰转移酶)、hph(潮霉素磷酸转移酶)、niaD(硝酸还 原酶)、pyrG(乳清苷-5’-磷酸脱羧酶)、sC(硫酸腺苷基转移酶)、以及trpC(邻氨基苯 甲酸合酶)、连同其等效物。优选在曲霉属细胞中使用的是构巢曲霉或米曲霉amdS和pyrG 基因以及吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)bar基因。 [0829] 载体优选含有允许载体整合到宿主细胞的基因组中或载体在细胞中独立于基因组自主复制的一个或多个元件。 [0830] 对于整合到该宿主细胞基因组中,该载体可以依靠编码该多肽的多核苷酸序列或者通过同源或非同源重组整合到该基因组中的该载体的任何其他元件。可替代地,该载体 可以包含用于指导通过同源重组而整合到宿主细胞基因组中的一个或多个染色体中的一 个或多个精确位置处的另外的多核苷酸。为了增加在精确位置处整合的可能性,这些整合 的元件应包含足够数量的核酸,例如100至10,000个碱基对、400至10,000个碱基对、以 及800至10,000个碱基对,这些碱基对与对应的靶序列具有高度的序列一致性以提高同源 重组的可能性。这些整合元件可以是与宿主细胞的基因组内的靶序列同源的任何序列。此 外,这些整合元件可以是非编码多核苷酸或编码多核苷酸。另一方面,该载体可以通过非同源重组整合到宿主细胞的基因组中。 [0831] 对于自主复制,载体可以进一步包含使该载体能够在所讨论的宿主细胞中自主复制的复制起点。复制起点可以是在细胞中起作用的介导自主复制的任何质粒复制子。术语 “复制起点”或“质粒复制子”意指使质粒或载体能够在体内复制的多核苷酸。 [0832] 细菌复制起点的实例是允许在大肠杆菌中复制的质粒pBR322、pUC19、pACYC177、以及pACYC184的复制起点,以及允许在芽孢杆菌中复制的质粒pUB110、pE194、pTA1060、以及pAMβ1的复制起点。 [0833] 用于在酵母宿主细胞中使用的复制起点的实例是2微米复制起点、ARS1、ARS4、ARS1与CEN3的组合、以及ARS4与CEN6的组合。 [0834] 在丝状真菌细胞内有用的复制起点的实例是AMA1和ANS1(Gems(格姆斯)等人,1991,Gene(基因)98:61-67;Cullen(卡伦)等人,1987,Nucleic Acids Res.(核酸研 究)15:9163-9175;WO 00/24883)。AMA1基因的分离和包括该基因的质粒或载体的构建可 根据WO 00/24883披露的方法完成。 [0835] 可以将本发明的多核苷酸的多于一个的拷贝插入到宿主细胞中以增加多肽的产生。通过将序列的至少一个另外的拷贝整合到宿主细胞基因组中或者通过包含一个与该多 核苷酸的可扩增的选择性标记基因可以获得增加的多核苷酸拷贝数目,其中通过在适当选 择性试剂的存在下培养细胞可以选择包含选择性标记基因的经扩增的拷贝的细胞、以及由 此该多核苷酸的另外的拷贝。 [0836] 用于连接以上所描述的元件以构建本发明的重组表达载体的程序是本领域的普通技术人员熟知的(参见,例如,萨姆布鲁克等人,1989,同上文)。 [0837] 宿主细胞 [0838] 本发明还涉及重组宿主细胞,这些重组宿主细胞包括本发明的多核苷酸,该多核苷酸可操作地连接至一个或多个控制序列,该一个或多个控制序列指导本发明的多肽的产 生。将包含多核苷酸的构建体或载体引入到宿主细胞中,这样使得该构建体或载体被维持 作为染色体整合体或作为自主复制的染色体外载体,如早前所描述。术语“宿主细胞”涵盖由于复制期间发生的突变与亲本细胞不同的亲本细胞的任何后代。宿主细胞的选择在很大 程度上取决于编码该多肽的基因及其来源。 [0839] 该宿主细胞可以是有用于重组产生本发明的多肽的任何细胞,例如原核细胞或真核细胞。 [0840] 原核宿主细胞可以是任何革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌。革兰氏阳性细菌包括但不限于:芽孢杆菌属、梭菌属、肠球菌属、土芽孢杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、海洋芽孢杆菌属、葡萄球菌属、链球菌属、以及链霉菌属。革兰氏阴性细菌包括但不限于:弯曲杆菌属、大肠杆菌、黄杆菌菌、梭杆菌菌、螺旋杆菌属、泥杆菌属、奈瑟氏菌属、假单胞菌属、沙门氏菌属、以及脲原体属。 [0841] 细菌宿主细胞可以是任何芽孢杆菌属细胞,包括(但不限于)嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alkalophilus)、解淀粉芽孢杆菌、短芽孢杆菌(Bacillus brevis)、环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)、克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、灿烂芽胞杆菌(Bacillus lautus)、迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、短小 芽胞杆菌(Bacillus pumilus)、嗜热脂肪芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌、以及苏云金芽孢杆菌细胞。 [0842] 细菌宿主细胞还可以是任何链球菌属细胞,包括但不限于似马链球菌、酿脓链球菌、乳房链球菌、以及马链球菌兽瘟亚种细胞。 [0843] 细菌宿主细胞还可以是任何链霉菌属细胞,包括但不限于:不产色链霉菌、阿维链霉菌、天蓝色链霉菌、灰色链霉菌以及变铅青链霉菌细胞。 [0844] 将DNA引入芽孢杆菌属细胞中可通过以下来实现:原生质体转化(参见例如,Chang(张)和Cohen(科恩),1979,Mol.Gen.Genet.(分子遗传学与基因组 学)168:111-115)、感受态细胞转化(参见,例如,Young(杨格)和Spizizen(斯 皮宰曾),1961,J.Bacteriol.(细菌学杂志)81:823-829;或Dubnau(杜拜努)以 及Davidoff-Abelson(大卫杜夫-阿贝尔森),1971,J.Mol.Biol.(分子生物学杂 志)56:209-221)、电穿孔(参见,例如,Shigekawa(茂川)和Dower(道尔),1988, Biotechniques(生物技术)6:742-751)、或者接合(参见,例如Koehler(克勒)和 Thorne(Thorne),1987,J.Bacteriol.(细菌学杂志)169:5271-5278)。将DNA引入大肠杆 菌细胞中可通过以下来实现:原生质体转化(参见例如,Hanahan(哈纳汗),1983,J.Mol. Biol.(分子生物学杂志)166:557-580)或电穿孔(参见例如,Dower(道尔)等人,1988, Nucleic Acids Res.(核酸研究)16:6127-6145)。DNA引入链霉菌属细胞中可通过以下来 实现:原生质体转化、电穿孔(参见例如,Gong(贡)等人,2004,Folia Microbiol.(Folia微生物学)(布拉格(Praha))49:399-405)、接合(参见例如,Mazodier(马佐迪耶)等 人,1989,J.Bacteriol.(细菌学杂志)171:3583-3585)、或转导(参见例如,Burke(伯 克)等人,2001,Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美国国家科学院院刊)98:6289-6294)。将 DNA引入假单孢菌属细胞中可通过以下来实现:电穿孔(参见例如,Choi(蔡)等人,2006, J.Microbiol.Methods(微生物学方法杂志)64:391-397)或接合(参见例如,Pinedo(皮内 多)和Smets(斯梅茨),2005,Appl.Environ.Microbiol.(应用环境微生物学)71:51-57)。 将DNA引入链球菌属细胞中可通过以下来实现:天然感受态(参见例如,Perry(佩里)和 Kuramitsu(藏满),1981,Infect.Immun.(感染与免疫)32:1295-1297)、原生质体转化(参 见,例如,Catt(凯特)和Jollick(乔力克),1991,Microbios(微生物学)68:189-207)、 电穿孔(参见,例如,Buckley(巴克利)等人,1999,Appl.Environ.Microbiol.(应用环境 微生物学)65:3800-3804)、或者接合(参见,例如,Clewell(克莱威尔),1981,Microbiol.Rev.(微生物学评论)45:409-436)。然而,可以使用本领域已知的用于将DNA引入宿主细 胞中的任何方法。 [0846] 宿主细胞可以是真菌细胞。如在此所用的“真菌”包括子囊菌门(Ascomycota)、担子菌门(Basidiomycota)、壶菌门(Chytridiomycota)、以及接合菌门(Zygomycota)、连同卵菌门(Oomycota)和全部有丝分裂孢子真菌(如由霍克斯沃思(Hawksworth)等人在《安 斯沃思和拜斯比真菌词典》(Ainsworth and Bisby’s Dictionary of The Fungi),第8版, 1995,国际应用生物科学中心(CAB International),大学出版社(University Press),英国剑桥(Cambridge,UK)中进行定义的)。 [0847] 该真菌宿主细胞可以是酵母细胞。如在此所用的“酵母”包括产子嚢酵母(内孢霉目)、产担子酵母和属于半知菌类(芽孢纲)的酵母。由于酵母的分类在未来可能改变, 因此出于本发明的目的,酵母应如《酵母的生物学和活性》(Biology and Activities of Yeast)(斯金纳(Skinner)、帕斯莫尔(Passmore)、以及达文波特(Davenport)编辑,应用细菌学学会讨论会系列号9(Soc.App.Bacteriol.Symposium Series No.9),1980)中所描述 来定义。 [0848] 酵母宿主细胞可以是假丝酵母属(Candida)、汉逊酵母属(Hansenula)、克鲁维酵母属(Kluyveromyces)、毕赤酵母属(Pichia)、酵母属属(Saccharomyces)、裂殖酵 母属(Schizosaccharomyces)、或者亚罗酵母属(Yarrowia)细胞,例如乳酸克鲁维酵母 (Kluyveromyces lactis)、卡尔斯伯酵母(Saccharomyces carlsbergensis)、酿酒酵母、糖化酵母(Saccharomyces diastaticus)、道格拉氏酵母(Saccharomyces douglasii)、克鲁 维氏酵母(Saccharomyces kluyveri)、诺地酵母(Saccharomyces norbensis)、卵形酵母 (Saccharomyces oviformis)、或解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)细胞。 [0849] 真菌宿主细胞可以是丝状真菌细胞。“丝状真菌”包括真菌门(Eumycota)和卵菌门的亚门(如由霍克斯沃思等人,1995,见上文所定义)的所有丝状形式。丝状真菌通常 的特征在于由壳多糖、纤维素、葡聚糖、壳聚糖、甘露聚糖、以及其他复杂多糖构成的菌丝体壁。营养生长是通过菌丝延长,而碳分解代谢是专性需氧的。相反,酵母(如酿酒酵母)的 营养生长是通过单细胞菌体的出芽(budding),而碳分解代谢可以是发酵的。 [0850] 丝状真菌宿主细胞可以是枝顶孢霉属、曲霉属、短梗霉属、烟管菌属、拟蜡菌属、金孢子菌属、鬼伞菌属、革盖菌属、隐球菌属、线黑粉酵母属、镰刀菌属、腐质霉属、稻瘟菌属、毛霉菌属、毁丝霉属、新考玛脂霉属、脉孢菌属、拟青霉属、青霉属、平革菌属、白腐菌属、瘤胃壶菌属、侧耳属、裂褶菌属、踝节菌属、嗜热子囊菌属、梭孢壳菌属、弯颈霉属、栓菌属、或木霉属的细胞。 [0851] 例如,丝状真菌宿主细胞可以是泡盛曲霉、臭曲霉、烟曲霉、日本曲霉、构巢曲霉、黑曲霉、米曲霉、烟管菌、干拟蜡菌、卡内基拟蜡菌(Ceriporiopsiscaregiea)、 浅 黄 拟 蜡 孔 菌、潘 诺 希 塔 拟 蜡 菌(Ceriporiopsispannocinta)、环 带 拟 蜡 菌 (Ceriporiopsisrivulosa)、微 红 拟 蜡 菌 (Ceriporiopsissubrufa)、虫 拟 蜡 菌、狭边金孢子菌(Chrysosporiuminops)、嗜角质金孢子菌、拉克淖金孢子菌 (Chrysosporiumlucknowense)、粪状金孢子菌(Chrysosporiummerdarium)、毡金孢子菌、 女王杜香金孢子菌(Chrysosporiumqueenslandicum)、热带金孢子菌、褐薄金孢子菌、灰盖鬼伞、毛云芝菌、杆孢状镰孢、禾谷镰孢、库威镰孢、黄色镰刀菌、禾谷镰刀菌、禾赤镰孢、异孢镰孢、合欢木镰孢、尖孢镰刀菌、多枝镰孢、粉红镰孢菌、接骨木镰孢、肤色镰孢、拟分枝孢镰刀菌、硫色镰孢、圆镰孢、拟丝孢镰刀菌、镶片镰孢菌、特异腐质霉、疏棉状腐质霉、米黑毛霉、嗜热毁丝霉、粗糙脉孢菌、产紫青霉、黄孢原毛平革菌、射纹革菌、杏鲍菇、太瑞斯梭孢壳霉、长绒毛栓菌、韩国白腐菌、哈茨木霉、康宁木霉、长枝木霉、里氏木霉或绿色木霉细胞。 [0852] 可以将真菌细胞通过涉及原生质体形成、原生质体转化、以及细胞壁再生的方法以本身已知的方式转化。用于转化曲霉属和木霉属宿主细胞的适合程序描述于EP 238023、Yelton(约尔顿)等人,1984,Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美国国家科学院院 刊)81:1470-1474和Christensen(克里斯滕森)等人,1988,Bio/Technology(生物技 术)6:1419-1422中。用于转化镰刀菌属物种的适合方法由Malardier(马拉迪尔)等人, 1989,Gene(基因)78:147-156、以及WO 96/00787描述。可以使用由如以下文献描述的程 序转化酵母:Becker(贝克尔)和Guarente(瓜伦特),在Abelson(阿贝尔森),J.N.和 Simon(西蒙),M.I.编,Guide to Yeast Genetics and Molecular Biology,Methods in Enzymology(酵母遗传学与分子生物学指南,酶学方法),第194卷,第182-187页,Academic Press,Inc.(学术出版社有限公司),纽约;Ito(伊藤)等人,1983,J.Bacteriol.(细菌学 杂志)153:163;以及Hinnen(哈尼恩)等人,1978,Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美国科学院 院刊)75:1920。 [0853] 产生方法 [0854] 本发明还涉及产生本发明的多肽的方法,包括(a)在有益于产生该多肽的条件下培养细胞,该细胞以其野生型形式产生该多肽;并且(b)回收该多肽。在一个优选的方面 中,该细胞是类芽孢杆菌属细胞或微杆菌属细胞。 [0855] 本发明还涉及产生本发明的多肽的方法,包括(a)在有益于产生该多肽的条件下培养一个本发明的重组宿主细胞;并且(b)回收该多肽。 [0856] 这些宿主细胞是在适合于使用本领域中已知的方法产生该多肽的一种营养培养基中培养的。例如,可以通过在适合的培养基中和在允许表达和/或分离该多肽的条件下,进行摇瓶培养,或者在实验室或工业发酵罐中进行小规模或大规模发酵(包括连续,分批,分批补料,或固态发酵)来培养细胞。该培养是使用本领域中已知的程序,在一种适合营养培养基中发生,该培养基包含碳和氮来源及无机盐。合适的培养基可从商业供应商获得或 可以根据公开的组成(例如,在美国典型培养物保藏中心的目录中)制备。如果多肽分泌 到该营养培养基中,那么可直接从培养基中直接回收多肽。如果多肽不分泌,那么其可从细胞裂解液中进行回收。 [0857] 该多肽可以使用本领域中已知的特定用于这些多肽的方法进行检测,例如用于确定纤维素或黄原胶裂解酶活性的方法。这些检测方法包括但不限于,特异性抗体的使用、酶产物的形成或酶底物的消失。例如,可以使用酶测定来确定该多肽的活性。 [0859] 可以通过本领域中已知的多种程序来纯化该多肽以获得基本上纯的多肽,这些程序包括但不限于:色谱法(例如,离子交换色谱、亲和色谱、疏水作用色谱、色谱聚焦、以及尺寸排阻色谱)、电泳程序(例如,制备型等电点聚焦)、差别溶解度(例如,硫酸铵沉淀)、SDS-PAGE、或萃取(参见例如,Protein Purification(蛋白质纯化),Janson(詹森)和 Ryden(赖登)编辑,VCH Publishers(VCH出版社),纽约,1989)。 [0860] 在一个替代性方面中,没有回收该多肽,而是将表达该多肽的本发明的宿主细胞用作该多肽的来源。 [0861] 发酵液配制品或细胞组合物 [0862] 本发明还涉及包括本发明的多肽的一种发酵液配制品或细胞组合物。发酵液产物进一步包含在发酵过程中使用的另外的成分,例如像,细胞(包括含有编码本发明的多肽 的基因的宿主细胞,这些宿主细胞被用于产生感兴趣的多肽)、细胞碎片、生物质、发酵介质和/或发酵产物。在一些实施例中,该组合物是含有一种或多种有机酸、杀死的细胞和/或 细胞碎片、以及培养基的细胞杀死全培养液。 [0863] 如在此使用的术语“发酵液”是指由细胞发酵产生、不经历或经历最低限的回收和/或纯化的制剂。举例来说,当微生物培养物生长至饱和,在碳限制条件下孵育以允许蛋白质合成(例如,由宿主细胞表达酶)并且分泌到细胞培养基中时,发酵液产生。发酵液可以包含在发酵结束时得到的发酵材料的未分级的或分级的内容物。典型地,发酵液是未分级 的并且包含用过的培养基以及例如通过离心去除微生物细胞(例如,丝状真菌细胞)之后 存在的细胞碎片。在一些实施例中,发酵液包含耗尽的细胞培养基、胞外酶、以及有活力的和/或无活力的微生物细胞。 [0864] 在一个实施例中,该发酵液配制品和细胞组合物包括一种第一有机酸组分(包括至少一种1-5碳的有机酸和/或其盐)以及一种第二有机酸组分(包括至少一种6碳或 更多碳的有机酸和/或其盐)。在一个具体实施例中,该第一有机酸组分是乙酸、甲酸、丙 酸、其盐,或前述酸中的两种或更多种的混合物;并且该第二有机酸组分是苯甲酸、环己烷羧酸、4-甲基戊酸、苯乙酸、其盐,或前述酸中的两种或更多种的混合物。 [0865] 在一个方面中,该组合物包含一种或多种有机酸,并且任选地进一步包含杀死的细胞和/或细胞碎片。在一个实施例中,从细胞杀死全培养液中去除这些杀死的细胞和/ 或细胞碎片,以提供不含这些组分的组合物。 [0867] 细胞杀死全培养液或组合物可以含有在发酵结束时衍生的发酵材料的未分级的内容物。典型地,该细胞杀死全培养液或组合物包含用过的培养基以及在微生物细胞(例 如,丝状真菌细胞)生长至饱和、在碳限制条件下孵育以允许蛋白质合成之后存在的细胞 碎片。在一些实施例中,细胞杀死全培养液或组合物含有耗尽的细胞培养基、胞外酶、和杀死的丝状真菌细胞。在一些实施例中,可以使用本领域已知方法来使细胞杀死全培养液或 组合物中存在的微生物细胞透性化和/或裂解。 [0868] 在此描述的全培养液或细胞组合物典型地是液体,但是可以含有不溶组分,例如杀死的细胞、细胞碎片、培养基组分、和或一种或多种不溶的酶。在一些实施例中,可以除去不溶组分以提供澄清的液体组合物。 [0869] 可以通过WO 90/15861或WO 2010/096673所述的方法产生本发明的全培养液配制品和细胞组合物。 [0870] 洗涤剂组合物 [0871] 在一个实施例中,本发明针对洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包含结合一种或多种额外的清洁组合物组分的本发明的酶。另外的组分的选择在普通技术人员技术内并且包 括常规成分,包括以下列出的示例性、非限制性组分。 [0872] 对于纺织品保养,组分的选择可以包括以下考虑:有待清洁的纺织品的类型、污物的类型和/或程度、进行清洁时的温度、以及洗涤剂产品的配制。尽管根据一种具体的功能性将以下提及的组分通过一般标题进行了分类,但是由于该组分可能具有熟练的业内人士将领会的一种或多种另外的功能,因此不应该将这理解为限制。 [0873] 洗涤剂组合物可以适于洗涤纺织品,例如像织物、衣服或亚麻布,或用于清洁硬表面,例如像地板、桌子、或洗碗盘。 [0874] 本发明的酶 [0875] 在本发明的一个实施例中,可以将本发明的多肽以对应于以下的量添加至一种洗涤剂组合物中:每升的洗涤液0.0001-200mg的酶蛋白,例如0.0005-100mg的酶蛋白,优选 0.001-30mg的酶蛋白,更优选0.005-8mg的酶蛋白,甚至更优选0.01-2mg的酶蛋白。 [0876] 用于在自动洗碗机(ADW)中使用的组合物例如可以包含按该组合物的重量计0.0001%-50%,例如0.001%-20%,例如0.01%-10%,例如0.05%-5%的酶蛋白。 [0877] 用于在洗衣造粒(laundry granulation)中使用的组合物例如可以包含按该组合物的重量计0.0001%-50%,例如0.001%-20%,例如0.01%-10%,例如0.05%-5%的 酶蛋白。 [0878] 用于在洗衣液中使用的组合物例如可以包含按该组合物的重量计0.0001%-10%,例如0.001-7%,例如0.1%-5%的酶蛋白。 [0879] 可以使用常规稳定剂稳定本发明的洗涤剂组合物的一种或多种酶,这些常规稳定剂例如是多元醇,例如丙二醇或甘油、糖或糖醇、乳酸、硼酸或硼酸衍生物,例如芳香族硼酸酯,或苯基硼酸衍生物,例如4-甲酰苯基硼酸,并且可以如在例如WO 92/19709和WO 92/19708中所述配制该组合物。 [0880] 在某些市场中,不同洗涤条件并且就其本身而言,使用不同类型的洗涤剂。这披露于例如EP 1025240中。例如,在亚洲(日本)使用低的洗涤剂浓度体系,而美国使用中等洗涤剂浓度体系,并且欧洲使用高的洗涤剂浓度体系。 [0881] 低的洗涤剂浓度体系包含以下洗涤剂,其中在洗涤水中存在少于约800ppm的洗涤剂组分。日本洗涤剂典型地被认为是低的洗涤剂浓度体系,因为它们具有存在于洗涤水 中的大约667ppm的洗涤剂组分。 [0882] 中等洗涤剂浓度体系包含以下洗涤剂,其中在洗涤水中存在约800ppm与约2000ppm之间的洗涤剂组分。北美洗涤剂通常被认为是中等洗涤剂浓度体系,因为它们具有存在于洗涤水中的大约975ppm的洗涤剂组分。 [0883] 高的洗涤剂浓度体系包含以下洗涤剂,其中在洗涤水中存在多于约2000ppm的洗涤剂组分。欧洲洗涤剂通常被认为是高的洗涤剂浓度体系,因为在洗涤水中它们具有大约 4500-5000ppm的洗涤剂组分。 [0884] 拉丁美洲洗涤剂通常是高泡沫磷酸盐助洗剂洗涤剂并且在拉丁美洲使用的洗涤剂的范围可以落入中等和高的洗涤剂浓度两者中,因为在洗涤水中它们的洗涤剂组分的范 围从1500ppm至6000ppm。此类洗涤剂组合物都是本发明的实施例。 [0885] 本发明的多肽还可以结合到WO 97/07202中所披露的洗涤剂配制品中,通过引用将其结合在此。 [0886] 表面活性剂 [0887] 洗涤剂组合物可以包括一种或多种表面活性剂,它们可以是阴离子的和/或阳离子的和/或非离子的和/或半极性的和/或兼性离子的,或其混合物。在一个具体实施例 中,洗涤剂组合物包括一种或多种非离子型表面活性剂和一种或多种阴离子表面活性剂的 混合物。这种或这些表面活性剂典型地以按重量计从约0.1%至60%的水平存在,例如约 1%至约40%、或约3%至约20%、或约3%至约10%。基于所希望的清洁应用来选择这种 或这些表面活性剂,并且这种或这些表面活性剂包括本领域中已知的任何一种或多种常规 表面活性剂。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何表面活性剂。 [0888] 当被包括在其中时,洗涤剂将通常包括按重量计从约1%至约40%,例如从约5%至约30%(包括从约5%至约15%)、或从约20%至约25%的阴离子表面活性剂。阴离 子表面活性剂的非限制性实例包括硫酸盐和磺酸盐,具体地说是直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES,也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、 石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或 SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸 (DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或皂的二酯和单酯、及其组合。 [0889] 当被包括在其中时,洗涤剂将通常包括按重量计从约0%至约10%的阳离子表面活性剂。阳离子表面活性剂的非限制性实例包括烷基二甲基乙醇季胺(ADMEAQ)、十六烷基 三甲基溴化铵(CTAB)、二甲基二硬脂酰氯化铵(DSDMAC)、以及烷基苄基二甲基铵、烷基季 铵化合物、烷氧基化季铵(AQA)化合物、及其组合。 [0890] 当被包括在其中时,洗涤剂将通常包含按重量计从约0.2%至约40%的非离子型表面活性剂,例如从约0.5%至约30%,特别是从约1%至约20%、从约3%至约10%,例如从约3%至约5%、或从约8%至约12%。非离子型表面活性剂的非限制性实例包括醇乙 氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA),烷氧基化的脂肪酸烷基酯 (例如乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯),烷基酚乙氧基化物(APE),壬基酚乙氧 基化物(NPE),烷基多糖苷(APG),烷氧基化胺,脂肪酸单乙醇酰胺(FAM),脂肪酸二乙醇酰胺(FADA),乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM),丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM), 多羟基烷基脂肪酸酰胺,或葡萄糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA),或脂肪酸葡 糖酰胺(FAGA)),连同在SPAN和TWEEN商品名下可获得的产品,及其组合。 [0891] 当被包括在其中时,洗涤剂将通常包括按重量计从约0%至约10%的半极性表面活性剂。半极性表面活性剂的非限制性实例包括氧化胺(AO),例如烷基二甲胺氧化物、 N-(椰油基烷基)-N,N-二甲胺氧化物和N-(牛油-烷基)-N,N-双(2-羟乙基)胺氧化物、 脂肪酸链烷醇酰胺和乙氧基化的脂肪酸链烷醇酰胺,及其组合。 [0892] 当被包括在其中时,洗涤剂将通常包括按重量计从约0%至约10%的兼性离子表面活性剂。兼性离子表面活性剂的非限制性实例包括甜菜碱、烷基二甲基甜菜碱、磺基甜菜碱、及其组合。 [0893] 助水溶剂 [0894] 助水溶剂是一种化合物,该化合物在水性溶液中溶解疏水化合物(或相反地,在非极性环境中的极性物质)。典型地,助水溶剂同时具有亲水的和疏水的特征(如从 表面活性剂已知的所谓两亲特性);然而助水溶剂的分子结构一般并不有利于自发自聚 集,参见例如Hodgdon(霍奇登)和Kaler(卡勒)(2007)的综述,Current Opinion in Colloid&Interface Science(胶体&界面科学新见),12:121-128。助水溶剂并不显示一个 临界浓度,高于该浓度就会发生如对表面活性剂而言所发现的自聚集并且脂质形成胶束、 薄层或其他很好地定义的中间相。很多助水溶剂反而示出一个连续型聚集过程,其中聚集 体的大小随着浓度增加而增长。然而,很多助水溶剂改变了包括极性和非极性特征的物质 的系统(包括水、油、表面活性剂、和聚合物的混合物)的相行为、稳定性、和胶体特性。经典地从制药、个人护理、食品跨行业至技术应用使用助水溶剂。助水溶剂在洗涤剂组合物中的使用允许例如更浓的表面活性剂配制品(如在通过除去水而压缩液体洗涤剂的过程中) 而不引起不希望的现象,例如相分离或高黏度。 [0895] 洗涤剂可以包括按重量计0%-5%,例如约0.5%至约5%、或约3%至约5%的助水溶剂。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何助水溶剂。助水溶剂的非限 制性实例包括苯磺酸钠、对甲苯磺酸钠(STS)、二甲苯磺酸钠(SXS)、枯烯磺酸钠(SCS)、伞花烃磺酸钠、氧化胺、醇和聚乙二醇醚、羟基萘甲酸钠、羟基萘磺酸钠、乙基己基磺酸钠、及其组合。 [0896] 助洗剂和共助洗剂 [0897] 洗涤剂组合物可以包含按重量计约0-65%,例如约5%至约45%的洗涤剂助洗剂或共助洗剂、或其混合物。在洗涤餐具洗涤剂中,助洗剂的水平典型地是40%-65%,特别是50%-65%。助洗剂和/或共助洗剂可以具体是形成具有Ca和Mg的水溶性复合物的螫 合剂。可以利用本领域中已知的用于在衣物洗涤剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。 助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐例如三磷酸钠(STP或 STPP)、碳酸盐例如碳酸钠、可溶性硅酸盐例如硅酸钠、层状硅酸盐(例如来自赫斯特公司 (Hoechst)的SKS-6)、乙醇胺例如2-氨基乙-1-醇(MEA)、二乙醇胺(DEA,也称为亚氨基二 乙醇)、三乙醇胺(TEA,也称为2,2’,2”-次氨基三乙醇)、以及羧甲基菊粉(CMI)、及其组合。 [0898] 洗涤剂组合物还可以包含按重量计0-20%,例如约5%至约10%的洗涤剂共助洗剂、或其混合物。洗涤剂组合物可以单独地包括一种共助洗剂,或与一种助洗剂,例如沸石助洗剂组合。共-助洗剂的非限制性实例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物,例如聚 (丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/马来酸)(PAA/PMA)。另外的非限制性实例包括柠檬酸 盐,螯合剂,例如氨基羧酸盐、氨基多羧酸盐和膦酸盐,以及烷基-或链烯基琥珀酸。另外的具体实例包括2,2’,2”-次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、亚氨基二丁二酸(iminodisuccinic acid)(IDS)、乙二胺-N,N’-二丁二酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸-N,N-二乙酸(GLDA)、1-羟基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、 乙二胺四-(亚甲基膦酸)(EDTMPA)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTPMPA或DTMPA)、 N-(2-羟乙基)亚氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸-N-单乙酸(ASMA)、天冬氨酸-N,N-二乙 酸(ASDA)、天冬氨酸-N-单丙酸(ASMP)、亚氨基二丁二酸(iminodisuccinic acid)(IDA)、 N-(2-磺甲基)-天冬氨酸(SMAS)、N-(2-磺乙基)-天冬氨酸(SEAS)、N-(2-磺甲基)-谷 氨酸(SMGL)、N-(2-磺乙基)-谷氨酸(SEGL)、N-甲基亚氨基二乙酸(MIDA)、α-丙氨 酸-N,N-二乙酸(α-ALDA)、丝氨酸-N,N-二乙酸(SEDA)、异丝氨酸-N,N-二乙酸(ISDA)、 苯丙氨酸-N,N-二乙酸(PHDA)、邻氨基苯甲酸-N,N-二乙酸(ANDA)、磺胺酸-N,N-二乙酸 (SLDA)、牛磺酸-N,N-二乙酸(TUDA)以及磺甲基-N,N-二乙酸(SMDA)、N-(2-羟乙基)-亚 乙基二胺-N,N’,N’-三乙酸盐(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦 酸)(DTPMP)、氨基三(亚甲基膦酸)(ATMP)、及其组合和盐。另外的示例性助洗剂和/或共 助洗剂描述于例如WO 09/102854、US 5977053中。 [0899] 漂白系统 [0900] 该洗涤剂可以包括按重量计0-50%,例如约0.1%至约25%的漂白系统。可以利用本领域中已知的用于在衣物洗涤剂中使用的任何漂白系统。合适的漂白系统组分包 括漂白催化剂、光漂白剂(photobleach)、漂白活化剂、过氧化氢源(例如过碳酸钠和过硼 酸钠)、预成型过酸以及其混合物。合适的适合的预成型过酸包括,但不限于:过氧羧酸 及盐,过碳酸及盐,过白啶酸(perimidic acid)及盐,过氧单硫酸及盐(例如过硫酸氢钾 (Oxone(R)),及其混合物。漂白系统的非限制性实例包括基于过氧化物的漂白系统,该系 统可以包括例如一种与过酸形成漂白活化剂组合的无机盐,包括碱金属盐,例如过硼酸盐 (通常是单水合物或四水合物)、过碳酸盐、过硫酸盐、过磷酸盐、过硅酸盐的钠盐。术语漂白活化剂在此意指一种与过氧化物漂白剂(像过氧化氢)反应以形成过酸的化合物。以此 方式形成的过酸构成活化的漂白剂。有待在此使用的适合漂白活化剂包括属于酯酰胺、酰 亚胺或酸酐类别的那些。适合的实例是四乙酰基乙二胺(TAED)、4-[(3,5,5-三甲基己酰) 氧基]苯磺酸钠(ISONOBS)、二过氧月桂酸、4-(十二酰基氧基)苯磺酸盐(LOBS)、4-(癸 酰基氧基)苯磺酸盐、4-(癸酰基氧基)苯甲酸盐(DOBS)、4-(壬酰基氧基)-苯磺酸盐 (NOBS)、和/或披露于WO 98/17767中的那些。感兴趣的漂白活化剂的具体家族披露于EP 624154中,并且在那个家族中特别优选的是乙酰柠檬酸三乙酯(ATC)。ATC或短链甘油三酸 酯(像三醋汀)具有以下优点,它是环境友好的,因为它最终降解为柠檬酸和醇。此外,乙 酰柠檬酸三乙酯和三醋汀在存储时在产品中具有良好的水解稳定性,并且它是一种有效的 漂白活化剂。最后,ATC为洗衣添加剂提供一种良好的助洗能力。可替代地,漂白系统可以包括例如酰胺、酰亚胺、或砜型的过氧酸。漂白系统还可以包括过酸,例如6-(苯二甲酰亚氨基)过己酸(PAP)。漂白系统还可以包括一种漂白催化剂。在一些实施例中,漂白组分可 以是选自下组的有机催化剂,该组由以下各项组成:具有下式的有机催化剂: [0901] [0902] (iii)及其混合物;其中每个R1独立地是包含从9至24个碳的支链烷基基团或包1 含从11至24个碳的直链烷基基团,优选地,每个R 独立地是包含从9至18个碳的支链烷基 1 基团或包含从11至18个碳的直链烷基基团,更优选地,每个R 独立地选自下组,该组由以 下各项组成:2-丙基庚基、2-丁基辛基、2-戊基壬基、2-己基癸基、正-十二烷基、正-十四烷基、正-十六烷基、正-十八烷基、异-壬基、异-癸基、异-十三基和异-十五烷基。其 他示例性漂白系统描述于例如WO 2007/087258、WO 2007/087244、WO 2007/087259以及WO 2007/087242中。适合的光漂白剂可以例如是磺化的酞菁锌。 [0903] 聚合物 [0904] 该洗涤剂可以包括按重量计0-10%,例如0.5%-5%、2%-5%、0.5%-2%或0.2%-1%的一种聚合物。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何聚合物。 聚合物可以作为如以上提到的共-助洗剂起作用,或可以提供抗再沉积、纤维保护、污物释放、染料转移抑制、油污清洁和/或防沫特性。一些聚合物可以具有多于一种的以上提到 的特性和/或多于一种的以下提到的基序(motifs)。示例性聚合物包括(羧甲基)纤维 素(CMC)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(乙烯吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙二醇)或聚(环氧乙烷) (PEG)、乙氧基化的聚(亚乙基亚胺)、羧甲基菊粉(CMI)、和聚羧化物,例如PAA、PAA/PMA、聚-天冬氨酸、和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物、疏水改性CMC(HM-CMC)和硅酮、对苯 二甲酸和低聚乙二醇的共聚物、聚(对苯二甲酸乙二酯)和聚(氧乙烯对苯二甲酸乙二酯) 的共聚物(PET-POET)、PVP、聚(乙烯基咪唑)(PVI)、聚(乙烯吡啶-N-氧化物)(PVPO或 PVPNO)以及聚乙烯吡咯烷酮-乙烯基咪唑(PVPVI)。另外的示例性聚合物包括磺化的聚羧 酸酯、聚环氧乙烷和聚环氧丙烷(PEO-PPO)以及乙氧基磺酸二季铵盐。其他示例性聚合物 披露于例如WO 2006/130575中。也考虑了以上提到的聚合物的盐。 [0905] 织物调色剂 [0906] 本发明的洗涤剂组合物还可以包括织物调色剂,例如染料或色素,当配制在洗涤剂组合物中时,当所述织物与一种洗液接触时织物调色剂可以沉积在织物上,该洗液包括 所述洗涤剂组合物,并且因此通过可见光的吸收/反射改变所述织物的色彩。荧光增白 剂发射至少一些可见光。相比之下,因为它们吸收至少一部分可见光光谱,所以织物调色 剂改变表面的色彩。适合的织物调色剂包括染料和染料-黏土轭合物,并且还可以包括 色素。适合的染料包括小分子染料和聚合物染料。适合的小分子染料包括选自下组的小 分子染料,该组由落入颜色索引(Colour Index)(C.I.)分类的以下染料组成:直接蓝、直 接红、直接紫、酸性蓝、酸性红、酸性紫、碱性蓝、碱性紫和碱性红、或其混合物,例如描述于WO2005/03274、WO2005/03275、WO2005/03276和EP1876226中(将其通过引用结合在此)。 洗涤剂组合物优选包括从约0.00003wt%至约0.2wt%、从约0.00008wt%至约0.05wt%、 或甚至从约0.0001wt%至约0.04wt%的织物调色剂。该组合物可以包括从0.0001wt%至 0.2wt%的织物调色剂,当该组合物处于单位剂量袋的形式时,这可以是尤其优选的。适合的调色剂还披露于例如WO 2007/087257和WO 2007/087243中。 [0907] 另外的酶 [0908] 洗涤剂添加剂连同洗涤剂组合物可以包括一种或多种另外的酶,例如蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、碳水化合物酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶,例如漆酶、和/或过氧化物酶。 [0910] 纤维素酶:适合的纤维素酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白工程化的突变体。适合的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、镰 刀菌属、梭孢壳属、枝顶孢霉属的纤维素酶,例如,从在US 4,435,307、US 5,648,263、US 5,691,178、US 5,776,757以及WO 89/09259中披露的特异腐质霉、嗜热毁丝霉和尖镰孢产 生的真菌纤维素酶。 [0911] 尤其适合的纤维素酶是具有颜色保护益处的碱性或中性纤维素酶。此类纤维素酶的实例是描述于EP 0495257、EP 0531372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中的纤维素酶。其他实例为纤维素酶变体,例如在WO 94/07998、EP 0531315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307以及PCT/DK98/00299中描述的那 些。 [0912] 展现内切-β-1,4-葡聚糖酶活性的纤维素酶(EC 3.2.1.4)的实例是已经描述于WO 02/099091中的那些。 [0913] 纤维素酶的其他实例包括描述于WO 96/29397中的家族45纤维素酶,并且特别是在对应于WO 02/099091的SEQ ID NO:8中的以下位置的一个或多个位置处具有取代、 插入和/或缺失的其变体:2、4、7、8、10、13、15、19、20、21、25、26、29、32、33、34、35、37、40、 42、42a、43、44、48、53、54、55、58、59、63、64、65、66、67、70、72、76、79、80、82、84、86、88、90、 91、93、95、95d、95h、95j、97、100、101、102、103、113、114、117、119、121、133、136、137、138、 139、140a、141、143a、145、146、147、150e、150j、151、152、153、154、155、156、157、158、159、 160c、160e、160k、161、162、164、165、168、170、171、172、173、175、176、178、181、183、184、 185、186、188、191、192、195、196、200、和/或20,优选选自P19A、G20K、Q44K、N48E、Q119H或Q146R。 [0914] 可商购的纤维素酶包括CelluzymeTM、和CarezymeTM(诺维信公司)、ClazinaseTM、TM和Puradax HA (杰能 科国际 有限公 司(Genencor International Inc.))、以 及 TM KAC-500(B) (花王株式会社(Kao Corporation))。 [0915] 蛋白酶:另外的酶可以是另一种蛋白酶或蛋白酶变体。该蛋白酶可以是动物、植物或微生物来源的,包括化学或基因修饰的突变体。优选微生物来源。它可以是碱性蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如是S1家族(如胰蛋白酶)或S8家族(如枯草杆菌蛋白酶)。金属蛋白酶的蛋白酶可以例如是来自例如家族M4、M5、M7或M8 的嗜热菌蛋白酶。 [0916] 术语“类枯草杆菌蛋白酶”是指根据斯艾森(Siezen)等人,蛋白质工程学(Protein Engng.)4(1991)719-737和斯艾森(Siezen)等人,蛋白质科学(Protein Science)6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶子组。丝氨酸蛋白酶是特征为在活性位点具有与 底物形成共价加合物的丝氨酸的蛋白酶的一个亚类。类枯草杆菌蛋白酶(subtilase)可以 划分为6个亚部,即,枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶(Thermitase)家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶(Lantibiotic peptidase)家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。在 本发明的一个方面,该蛋白酶可以是一种类枯草杆菌蛋白酶,例如枯草杆菌蛋白酶或其变 体。另外,类枯草杆菌蛋白酶(以及丝氨酸蛋白酶)的特征为除了丝氨酸以外,还具有两个 活性位点氨基酸残基,即一个组氨酸和一个天冬氨酸残基。 [0917] 枯草杆菌蛋白酶的实例是来源于芽孢杆菌属的那些,例如描述于WO 89/06279中的枯草杆菌蛋白酶lentus、迟缓芽孢杆菌、枯草杆菌蛋白酶Novo、枯草杆菌蛋白酶 Carlsberg、地衣芽孢杆菌、枯草杆菌蛋白酶BPN’、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶 147和枯草杆菌蛋白酶168以及蛋白酶PD138(WO 93/18140)。另外的丝氨酸蛋白酶实例 是描述于WO 98/020115、WO 01/44452、WO 01/58275、WO 01/58276、WO 03/006602以及WO 04/099401中。枯草杆菌酶变体的实例可以是在以下任意位置中具有突变的那些:3、4、9、 15、27、36、68、76、87、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、106、118、120、123、128、129、 130、160、167、170、194、195、199、205、217、218、222、232、235、236、245、248、252以 及274,使用BPN’编号。更优选地,这些枯草杆菌酶变体可以包含以下突变:S3T、V4I、S9R、A15T、* * K27R、36D、V68A、N76D、N87S,R、97E、A98S、S99G,D,A、S99AD、S101G,M,R S103A、V104I,Y,N、S106A、G118V,R、H120D,N、N123S、S128L、P129Q、S130A、G160D、Y167A、R170S、A194P、G195E、V199M、V205I、L217D、N218D、M222S、A232V、K235L、Q236H、Q245R、N252K、T274A(使用BPN’编号)。另外的优选的蛋白酶是来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的碱性蛋白酶(如在(例如) WO 95/23221中所述)、以及其变体(在WO 92/21760、WO 95/23221、EP 1921147以及EP 1921148中描述的)。 [0918] 胰蛋白酶样蛋白酶的实例为胰蛋白酶(例如来自猪或牛的)和如WO 89/06270和WO 94/25583中所公开的镰孢霉属的蛋白酶。适用蛋白酶的实例为在WO 92/19729、WO 98/20115、WO 98/20116、以及WO 98/34946中描述的变体,特别是具有在一个或多个以下 位置处的取代的变体:27、36、57、76、87、97、101、104、120、123、167、170、194、206、218、222、 224、235、以及274。 [0919] 金属蛋白酶的实例是如描述于WO 07/044993中的中性金属蛋白酶。 [0920] 优选的可商购的蛋白酶酶类包括AlcalaseTM、CoronaseTM、DuralaseTM、DurazymTM、TM TM TM TM TM TMEsperase 、Everlase 、Kannase 、Liquanase 、Liquanase Ultra 、Ovozyme 、 TM TM TM TM TM Polarzyme 、Primase 、Relase 、Savinase 和Savinase Ultra (诺维信公司(Novozymes TM A/S)),Axapem (Gist-Brocases N.V. 公 司 ),BLAP 和 BLAP X(Henkel AG&Co.KGaA), TM TM TM TM TM TM TM TM TM Excellase 、FN2 、FN3 、FN4 、Maxaca 、Maxapem 、Maxatase 、Properase 、Purafast 、TM TM TM TM Purafect 、Purafect OxP 、Purafect Prime 和Puramax (杰能科有限公司(Genencor int.))。 [0921] 脂肪酶和角质酶:适合的脂肪酶和角质酶包括细菌或真菌起源的那些。包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变酶。实例包括来自嗜热真菌属的脂肪酶,例如如描述于EP 258068和EP 305216中的来自疏绵状嗜热丝孢菌(早先命名为疏棉状腐质霉);来自腐质 霉属的角质酶,例如特异腐质霉(WO 96/13580);来自假单胞菌属的菌株的脂肪酶(这些中 的一些现在改名为伯克霍尔氏菌属),例如产碱假单胞菌或类产碱假单胞菌(EP 218272)、 洋葱假单胞菌(EP 331376)、假单胞菌属菌株SD705(WO 95/06720&WO 96/27002)、 P.wisconsinensis(WO 96/12012);GDSL-型链霉菌属脂肪酶(WO 10/065455);来自稻瘟病 菌的角质酶(WO 10/107560);来自门多萨假单胞菌的角质酶(US 5,389,536);来自褐色嗜 热裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO 11/084412);嗜热脂肪土芽孢杆菌脂肪酶 (WO 11/084417);来自枯草芽孢杆菌的脂肪酶(WO 11/084599);以及来自灰色链霉菌(WO 11/150157)和始旋链霉菌(S.pristinaespiralis)的脂肪酶(WO 12/137147)。 [0922] 另外的实例是有时被称为酰基转移酶或过水解酶(perhydrolase)的脂肪酶,例如与南极假丝酵母脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO 10/111143)、来自耻垢分枝杆菌 的酰基转移酶(WO 05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO 09/67279)、以及耻垢分枝杆 菌过水解酶的变体,特别是用于在来自亨斯迈纺织染化私人有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业化产品Gentle Power Bleach(柔和漂白剂)中使用的S54V变体 (WO 10/100028)。 [0923] 其他实例是脂肪酶变体,例如描述于EP 407225、WO 92/05249、WO 94/01541、WO 94/25578、WO 95/14783、WO 95/30744、WO 95/35381、WO 95/22615、WO 96/00292、WO 97/04079、WO 97/07202、WO 00/34450、WO 00/60063、WO 01/92502、WO 07/87508以及WO 09/109500中的那些。 [0924] 优选的商业化脂肪酶产品包括LipolaseTM、LipexTM;LipolexTM和LipocleanTM(诺维信公司),Lumafast(来自杰能科公司(Genencor))以及Lipomax(来自吉斯特公司(Gist-Brocades))。 [0925] 淀粉酶 [0926] 淀粉酶可以是一种α-淀粉酶、β-淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以是细菌或真菌来源的。包括化学修饰的或蛋白工程化的突变体。淀粉酶包括例如获得自芽孢杆菌属的 α-淀粉酶,例如GB 1,296,839中更详细描述的地衣芽孢杆菌具体株系的α-淀粉酶。 [0927] 淀粉酶的实例是具有WO 95/10603中的SEQ ID NO:3的那些或与SEQ ID NO:3具有90%序列一致性的其变体。优选的变体描述于WO 94/02597、WO 94/18314、WO 97/43424以及WO 99/019467的SEQ ID NO:4中,例如在WO 95/10603中的SEQ ID NO:3的一个或多 个以下位置处具有取代的变体:15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、 190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408以及444。 [0928] 可以使用的另外的淀粉酶是具有WO 02/010355中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQ ID NO:6具有90%序列一致性的变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在位置181和 182中具有缺失并且在位置193中具有取代的那些。 [0929] 其他淀粉酶实例是包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:4中的地衣芽孢 杆菌α-淀粉酶的残基36-483的杂合α-淀粉酶或具有90%序列一致性的其变体。这一杂 合α-淀粉酶的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些: G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209以及Q264。包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和SEQ ID NO:4的 残基36-483的杂合α-淀粉酶的最优选的变体是具有以下取代的那些: [0930] M197T; [0931] H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S;或 [0932] G48+T49+G107+H156+A181+N190+I201+A209+Q264。 [0933] 另外的淀粉酶实例是具有WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQID NO:6具有90%序列一致性的变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在以下位置中的一个或 多个中具有取代、缺失或插入的那些:R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216以及K269。特别优选的淀粉酶是在位置G182和H183或位置H183和G184中具有缺失的那些。 [0934] 另外的淀粉酶是具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的那些或其与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7具有90%序列一致性的变体。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取 代、缺失或插入的那些:140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304以及476。 最优选的变体是在位置182和183或位置183和184中具有缺失的那些。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的最优选的淀粉酶变体是在位置183和184中具有缺失并且在位 置140、195、206、243、260、304以及476中具有取代的那些。 [0935] 可以使用的其他淀粉酶是具有WO 08/153815的SEQ ID NO:2、WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的淀粉酶或与WO 08/153815的SEQ ID NO:2具有90%序列一致性或与 WO 01/66712中的SEQ ID NO:10具有90%序列一致性的其变体。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:176、 177、178、179、190、201、207、211以及264。 [0936] 可以使用的另外的淀粉酶是具有WO 09/061380的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQ ID NO:2具有90%序列一致性的变体。SEQ ID NO:2的优选变体是在以下位置中 的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444以及G475。SEQ ID NO:2的最优选的变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代: Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E以及G475K,和/或在位置R180和/或 S181具有缺失的那些。SEQ ID NO:2的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些: [0937] N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K; [0938] N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K; [0939] S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K;或 [0940] S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K,其中该变体任选地进一步在位置243处包括取代和/或在位置180和/或位置181处包括缺失。 [0941] 淀粉酶的其他实例是具有WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的α-淀粉酶或与SEQ ID NO:12具有至少90%,例如至少95%序列一致性的变体。优选的淀粉酶变体是在 WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那 些:R28,R118,N174;R181,G182,D183,G184,G186,W189,N195,M202,Y298,N299,K302,S303,N306,R310,N314;R320,H324,E345,Y396,R400,W439,R444,N445,K446,Q449,R458,N471,N484。特别优选的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具有取代R118K、N195F、 R320K及R458K的变体,以及一种在选自下组的一个或多个位置中另外具有取代的变体: M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345及A339,最优选的是在所有这些位置中另外具有取代的变体。 [0942] 可商购的淀粉酶是DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM、Stainzyme TM、Stainzyme TM TM TM TM TMPlus 、Natalase 和BAN (诺维信公司),Rapidase 和Purastar (来自杰能科国际有限 公司)。 [0943] 过氧化物酶/氧化酶:适合的过氧化物酶/氧化酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自鬼伞属, 例如来自灰盖鬼伞的过氧化物酶,以及其变体,如在WO 93/24618、WO 95/10602、以及WO 98/15257中描述的那些。 [0944] 可商购获得的过氧化物酶包括GuardzymeTM(诺维信公司)。 [0945] 这一种或多种洗涤剂酶可以通过添加包括一种或多种酶的独立添加剂,或通过添加包括所有这些酶的组合添加剂而被包括于洗涤剂组合物中。本发明的洗涤剂添加剂,即 单独的添加剂或组合的添加剂,可以例如配制为颗粒、液体、浆料等。优选的洗涤剂添加剂配制品是颗粒,尤其是非尘颗粒;液体,尤其是稳定化的液体;或浆料。 [0946] 无尘颗粒可以例如如在US 4,106,991和4,661,452中所披露而产生,并且可以任选地通过本领域已知的方法进行涂覆。蜡状包衣材料的实例为具有1000至20000的平均 摩尔重量的聚(环氧乙烷)产物(聚乙二醇,PEG);具有从16至50个环氧乙烷单元的乙氧 化壬基苯酚;乙氧化脂肪醇,其中该醇含有12至20个碳原子,并且其中具有15至80个环 氧乙烷单元;脂肪醇;脂肪酸;以及脂肪酸的甘油单酯、和甘油二酯、以及甘油三酯。适用于通过流化床技术应用的成膜包衣材料的实例在GB 1483591中给出。液体酶制剂可以例如 通过根据已确立的方法添加多元醇(如丙二醇)、糖或糖醇、乳酸或硼酸而稳定化。受保护 的酶可以根据EP 238,216中披露的方法制备。 [0947] 辅料 [0948] 还可以利用本领域中已知的用于在衣物洗涤剂中使用的任何洗涤剂组分。其他任选的洗涤剂组分包括防腐剂、防缩剂、抗污物再沉积剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、腐蚀抑制剂、崩解剂(disintegrant)/崩解试剂(disintegration agent)、染料、酶稳定剂(包括 硼酸、硼酸盐、CMC、和/或多元醇如丙二醇)、织物整理剂(包括黏土)、填充剂/加工助剂、荧光剂增白剂/光增亮剂、泡沫促进剂、泡沫(泡)调节剂、香料、污物助悬剂、软化剂、抑泡剂、晦暗抑制剂、以及芯吸剂,单独抑或组合使用。可以利用本领域中已知的用于在衣物洗涤剂中使用的任何成分。此类成分的选择完全在普通技术人员的技术范围内。 [0949] 分散剂:本发明的洗涤剂组合物还可以包含分散剂。具体地说,粉状洗涤剂可以包括分散剂。合适的水溶性有机材料包括均聚合或共聚合的酸或其盐,其中多羧酸包括至少两个羧基,这两个羧基被不超过两个碳原子彼此分开。合适的分散剂例如描述于粉状洗涤 剂,表面活性剂科学系列(Powdered Detergents,Surfactant science series),第71卷 中,马塞尔·德克尔公司(Marcel Dekker,Inc.)。 [0950] 染料转移抑制剂:本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种染料转移抑制剂。适合的聚合物染料转移抑制剂包括但不局限于聚乙烯吡咯烷酮聚合物、多胺N-氧化物 聚合物、N-乙烯吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯噁唑烷酮和聚乙烯咪唑或其混 合物。当存在于主题组合物中时,染料转移抑制剂可以按组合物重量计的以下水平存在:从约0.0001%至约10%、从约0.01%至约5%或甚至从约0.1%至约3%。 [0951] 荧光增白剂:本发明的洗涤剂组合物将优选地还包含另外的组分,这些组分可以给正在清洁的物品着色,例如荧光增白剂或光增亮剂。其中增亮剂优选以约0.01%至约 0.5%的水平存在。在本发明的组合物中可以使用适合用于在衣物洗涤剂组合物中使用的 任何荧光增白剂。最常用的荧光增白剂是属于以下类别的那些:二氨芪-磺酸衍生物、二 芳基吡唑啉衍生物和二苯基-联苯乙烯基衍生物。荧光增白剂的二氨芪-磺酸衍生物型 的实例包括以下各项的钠盐:4,4'-双-(2-二乙醇氨基-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基) 芪-2,2'-二磺酸盐;4,4'-双-(2,4-二苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2.2'-二磺酸盐; 4,4'-双-(2-苯胺基-4(N-甲基-N-2-羟基-乙氨基)-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二 磺酸盐,4,4'-双-(4-苯基-2,1,3-三唑-2-基)芪-2,2'-二磺酸盐;4,4'-双-(2-苯胺 基-4(1-甲基-2-羟基-乙氨基)-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐和2-(二苯乙 烯基-4"-萘-1.,2':4,5)-1,2,3-三唑-2"-磺酸盐。优选的荧光增白剂是可从汽巴–嘉 基股份有限公司(Ciba-Geigy AG)(巴塞尔,瑞士)获得的天来宝(Tinopal)DMS和天来宝 CBS。天来宝DMS是4,4'-双-(2-吗啉基-4苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪二磺酸盐的二 钠盐。天来宝CBS是2,2'-双-(苯基-苯乙烯基)二磺酸盐的二钠盐。还优选荧光增白剂, 是可商购的Parawhite KX,由派拉蒙矿物与化学(Paramount Minerals and Chemicals), 孟买(Mumbai),印度(India)供应。适合用于本发明的其他荧光剂包括1-3-二芳基吡唑啉 和7-氨烷基香豆素。适合的荧光增白剂水平包括从约0.01wt%、从0.05wt%、从约0.1wt%或甚至从约0.2wt%的较低水平至0.5wt%或甚至0.75wt%的较高水平。 [0952] 污物释放聚合物:本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种污物释放聚合物,这些污物释放聚合物有助于从织物,例如棉的或聚酯基织物上除去污物,特别是从聚酯基织物上除去疏水污物。污物释放聚合物可以例如是非离子型或阴离子型对苯二甲酸基聚 合物、聚乙烯基己内酰胺和相关共聚物、乙烯基接枝共聚物、聚酯聚酰胺,参见例如粉状洗涤剂,表面活性剂科学系列第71卷第7章,马塞尔·德克尔公司(Marcel Dekker,Inc.)。 另一种类型的污物释放聚合物是包括一个芯结构和连接至该芯结构的多个烷基化基团的 两亲性烷基化油污清洁聚合物。芯结构可以包括聚烷基亚胺结构或聚烷醇胺结构,如WO 2009/087523中详细描述的(将其通过引用结合在此)。此外,任意接枝共聚物是合适的污 物释放聚合物。合适的接枝共聚物更详细地描述于WO 2007/138054、WO 2006/108856以及 WO 2006/113314中(将其通过引用结合在此)。其他污物释放聚合物是取代的多糖结构,尤 其是取代的纤维素结构,例如改性纤维素衍生物,例如EP 1867808或WO 2003/040279中描 述的那些(将二者都通过引用结合在此)。合适的纤维素聚合物包括纤维素、纤维素醚、纤 维素酯、纤维素酰胺以及其混合物。合适的纤维素聚合物包括阴离子改性的纤维素、非离子改性的纤维素、阳离子改性的纤维素、兼性离子改性的纤维素、以及其混合物。合适的纤维素聚合物包括甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、酯羧甲基纤维素、以及其混合物。 [0953] 抗再沉积剂:本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种抗再沉积剂,例如羧甲基纤维素(CMC)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚环氧乙烷和/或聚乙二醇 (PEG)、丙烯酸的均聚物、丙烯酸和马来酸的共聚物、和乙氧基化的聚乙亚胺。以上在污物释放聚合物下描述的基于纤维素的聚合物的功能还可以是抗再沉积剂。 [0954] 其他适合的辅料包括但不限于防缩剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、载体、染料、酶稳定剂、织物软化剂、填充剂、泡沫调节剂、助水溶剂、香料、色素、抑泡剂、溶剂、和用于液体洗涤剂的结构剂和/或结构弹性剂。 [0955] 洗涤剂产品的配制 [0956] 本发明的洗涤剂组合物可以处于任何常规形式,例如棒、均匀的片剂、具有两个或更多个层的片剂、具有一个或多个室的袋、规则的或压缩的粉、颗粒、膏、凝胶、或规则压缩的或浓缩的液体。存在多种洗涤剂配制品形式,例如层(相同或不同相)、袋以及用于机械给料装置的形式。 [0957] 袋可以被配置为单个或多个的室。它可以具有适合保存该组合物的任何形式、形状和材料,例如在与水接触之前,不允许该组合物从袋中释放出来。袋由封装内体积的水溶性膜制成。可以将所述内体积分为袋的室。优选的膜是形成膜或片的聚合材料,优选是聚 合物。优选的聚合物、共聚物或其衍生物选自聚丙烯酸酯、和水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纤维素、羧甲基纤维素、糊精钠、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、麦芽糊精、聚甲基丙烯酸酯,最优选地是聚乙烯醇共聚物以及,羟丙基甲基纤维素(HPMC)。优选地,在膜中的聚合物(例如PVA)的水平是至少约60%。优选的平均分子量将典型地是约20,000 至约150,000。膜还可以是共混物组合物,该共混物组合物包括可水解降解并且水可溶的聚合物共混物,例如聚乳酸和聚乙烯醇(已知在贸易参考M8630下,如由美国印第安纳州盖里 (Gary,Ind.,US)的克里斯克拉夫特工业产品公司(Chris Craft In.Prod.)销售)加增塑 剂,像甘油、乙二醇、丙二醇、山梨醇及其混合物。这些袋可以包括固体衣物清洁组合物或部分组分和/或液体清洁组合物或由水溶性膜分开的部分组分。用于液体组分的室在组成上 可以与包括固体的室不同。参考文献:(US2009/0011970 A1)。 [0958] 可以由水可溶的袋中或片剂的不同层中的室来将洗涤剂成分物理地彼此分开。由此可以避免组分之间的负面的存储相互作用。在洗涤溶液中,每个室的不同溶解曲线还可 以引起选择的组分的延迟溶解。 [0959] 非单位剂量的液体或凝胶洗涤剂可以是水性的,典型地包含按重量计至少20%并且最高达95%的水,例如高达约70%的水、高达约65%的水、高达约55%的水、高达约45%的水、高达约35%的水。包括但不限于链烷醇、胺、二醇、醚以及多元醇的其他类型的液体可以被包括在水性液体或凝胶中。水性液体或凝胶洗涤剂可以包括从0%-30%的有机溶剂。 液体或凝胶洗涤剂可以是非水性的。 [0960] 洗衣皂条 [0961] 本发明的酶可以被添加至洗衣皂条中并且用于手洗洗衣、织物和/或纺织品。术语洗衣皂条包括洗衣条、皂条、组合条(combo bar)、合成洗涤剂条以及洗涤剂条。条的类型通常区别在于它们包含的表面活性剂的类型,并且术语洗衣皂条包括包含来自脂肪酸的 肥皂和/或合成皂的那些。洗衣皂条具有在室温下为固体而非液体、凝胶或粉末的物理形 式。术语固体被定义为不随着时间显著变化的物理形式,即如果将一固体物体(例如洗衣 皂条)放置于一个容器内部,该固体物体不发生改变来填充它被放置于其中的容器。条典 型地是处于条形的固体但是可以处于其他固体形状,例如圆形或卵形。 [0962] 洗衣皂条可以包含一种或多种另外的酶,蛋白酶抑制剂例如肽醛类(或次硫酸盐加合物或半缩醛加合物),硼酸,硼酸盐,硼砂和/或苯基硼酸衍生物例如4-甲酰基苯基硼 酸,一种或多种肥皂或合成表面活性剂,多元醇例如甘油,pH控制化合物例如脂肪酸、柠檬酸、乙酸和/或甲酸,和/或一价阳离子和有机阴离子的盐,其中该一价阳离子可以是例如 + + + Na、K 或NH4 并且该有机阴离子可以是例如甲酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐或乳酸盐,这样使得一价阳离子和有机阴离子的盐可以是例如甲酸钠。 [0963] 洗衣皂条还可以包含络合剂像EDTA和HEDP,香料和/或不同类型的填充剂,表面活性剂例如阴离子型合成表面活性剂,助洗剂,聚合的污物释放剂,洗涤剂螯合剂,稳定剂,填充剂,染料,着色剂,染料转移抑制剂,烷氧基化的聚碳酸酯,抑泡剂,结构剂,粘合剂,浸出剂,漂白活化剂,粘土去污剂,抗再沉积剂,聚合分散剂,增白剂,织物柔软剂,香料和/或本领域已知的其他化合物。 [0964] 洗衣皂条可以在常规的洗衣皂条制造设备中进行加工,例如但不限制于:混合器、压条机例如双级真空压条机、挤出机、切割机、标识压模机(logo-stamper)、冷却隧道以及包装机。本发明不局限于通过任何单一方法制备洗衣皂条。可以在过程的不同阶段向肥皂中添加本发明的预混料。例如,可以制备包含肥皂、酶、任选地一种或多种另外的酶、蛋白酶抑制剂以及一价阳离子和有机阴离子的盐的预混料并且然后将该混合物压条。可以同时添 加作为例如处于液态的蛋白酶抑制剂的酶以及任选的另外的酶。除了混合步骤和压条步骤 以外,该工艺还可以进一步包括研磨、挤出、切割、压模、冷却和/或包装的步骤。 [0965] 颗粒洗涤剂配制品 [0966] 如描述于WO 09/092699、EP 1705241、EP 1382668、WO 07/001262、US 6472364、WO 04/074419或WO 09/102854中的,可以配制颗粒洗涤剂。其他有用的洗涤剂配制品描述于以下各项中:WO 09/124162、WO 09/124163、WO 09/117340、WO 09/117341、WO 09/117342、WO 09/072069、WO 09/063355、WO 09/132870、WO 09/121757、WO 09/112296、WO 09/112298、WO 09/103822、WO 09/087033、WO 09/050026、WO 09/047125、WO 09/047126、WO 09/047127、WO 09/047128、WO 09/021784、WO 09/010375、WO 09/000605、WO 09/122125、WO 09/095645、WO 09/040544、WO 09/040545、WO 09/024780、WO 09/004295、WO 09/004294、WO 09/121725、WO 09/115391、WO 09/115392、WO 09/074398、WO 09/074403、WO 09/068501、WO 09/065770、WO 09/021813、WO 09/030632以及WO 09/015951。 [0967] WO 2011025615、WO 2011016958、WO 2011005803、WO 2011005623、WO2011005730、WO 2011005844、WO 2011005904、WO 2011005630、WO 2011005830、 WO 2011005912、WO 2011005905、WO 2011005910、WO 2011005813、WO 2010135238、 WO 2010120863、WO 2010108002、WO 2010111365、WO 2010108000、WO 2010107635、 WO 2010090915、WO 2010033976、WO 2010033746、WO 2010033747、WO 2010033897、 WO 2010033979、WO 2010030540、WO 2010030541、WO 2010030539、WO 2010024467、WO 2010024469、WO 2010024470、WO 2010025161、WO 2010014395、WO 2010044905、 [0968] WO 2010145887、WO 2010142503、WO 2010122051、WO 2010102861、WO2010099997、WO 2010084039、WO 2010076292、WO 2010069742、WO 2010069718、WO 2010069957、WO 2010057784、WO 2010054986、WO 2010018043、WO 2010003783、WO 2010003792、 [0969] WO 2011023716、WO 2010142539、WO 2010118959、WO 2010115813、WO2010105942、WO 2010105961、WO 2010105962、WO 2010094356、WO 2010084203、 WO 2010078979、WO 2010072456、WO 2010069905、WO 2010076165、WO 2010072603、 WO 2010066486、WO 2010066631、WO 2010066632、WO 2010063689、WO 2010060821、WO 2010049187、WO 2010031607、WO 2010000636。 [0970] 产生组合物的方法 [0971] 本发明还涉及产生组合物的方法。该方法可以与洗涤剂组合物的(存储)稳定性相关:例如,肥皂条预混方法WO 2009155557。 [0972] 用途 [0973] 本发明还针对用于使用其组合物的方法。所述发明可以例如用于任何需要降解黄原胶的应用中,例如在洗涤剂中以及在石油工业中。在石油工业中,将黄原胶用于增加钻井液(特别是钻井泥浆)的粘度。在所有此类用途中,还将需要通过降解黄原胶来降低粘度, 并且用于这样的粘度减少,可以适合地使用本发明的组合物,该组合物包括一种黄原胶裂 解酶以及对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性的GH9内切葡聚糖酶。 [0974] 用于降解黄原胶的用途 [0975] 已经将黄原胶用作许多消费品(包括食品和化妆品)中的成分并且已经用于石油工业中。因此,黄原胶的降解可以导致改进的清洁过程,例如更容易除去包含胶质(例如黄原胶)的污物,连同通常用于石油与钻探工业中的黄原胶的降解。因此,本发明针对本发明的GH9内切葡聚糖酶或其组合物用于降解黄原胶的用途。本发明还针对本发明的黄原胶裂 解酶或其组合物用于降解黄原胶的用途。一个实施例是本发明的GH9内切葡聚糖酶与本发 明的黄原胶裂解酶一起或其组合物用于降解黄原胶的用途。优选地使用如描述于实例6中 的粘度减小测定(ViPr测定)或可替代地,如描述于实例6中的还原末端测定或如描述于 实例25和26中的比色测定测量黄原胶的降解。 [0976] 在一个实施例中,可以使用如有关黄原胶的在此描述的粘度减小测定测量黄原胶的降解。一个优选实施例是黄原胶(0.25%或0.5%)在缓冲液或水中的用途,其中在5分 钟、30分钟、1小时、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、3.5小时或4小时后测量粘度的下降。一个更优选的实施例是黄原胶(0.25%)在水中的用途,其中在3小时后测量粘度的下 降。用于GH9内切葡聚糖酶和黄原胶裂解酶的优选酶浓度分别是31.25mg EP/L和31.25mg EP/L。 [0977] 当使用粘度减小测定时,用于降解黄原胶的粘度的下降是至少200Pa。当使用粘度减小测定时,用于降解黄原胶的粘度的下降是至少250Pa。当使用粘度减小测定时,用于降解黄原胶的粘度的下降是至少300Pa。当使用粘度减小测定时,用于降解黄原胶的粘度的下降是至少350Pa。当使用粘度减小测定时,用于降解黄原胶的粘度的下降是至少400Pa。当使用粘度减小测定时,用于降解黄原胶的粘度的下降是至少450Pa。当使用粘度减小测定 时,用于降解黄原胶的粘度的下降是至少500Pa。当使用粘度减小测定时,用于降解黄原胶的粘度的下降是至少550Pa。当使用粘度减小测定时,用于降解黄原胶的粘度的下降是至少 600Pa。 [0978] 可替代地,可以使用由Lever(莱韦尔)(1972),Anal.Biochem.(分析化学)47:273-279,1972研发的比色测定通过用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶上的还原末端 测量GH9内切葡聚糖酶活性。一个优选实施例是用黄原胶裂解酶预处理的0.1%黄原胶的 用途。可以通过计算空白与样品之间的差异确定用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶的降解, 其中大于0.5mAU,优选大于0.6mAU,更优选大于0.7mAU或甚至更优选大于0.8mAU的差异 显示用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶的降解。 [0979] 可替代地,可以使用由Lever(莱韦尔)(1972),Anal.Biochem.(分析化学)47:273-279,1972研发的比色测定通过黄原胶上的还原末端测量黄原胶裂解酶活性。 一个优选实施例是0.1%黄原胶的用途。可以通过计算空白与样品之间的差异确定黄原 胶的降解,其中大于0.1mAU,优选大于0.15mAU,更优选大于0.2mAU或甚至更优选大于 0.25mAU的差异显示黄原胶的降解。 [0980] 可替代地,可以使用由Lever(莱韦尔)(1972),Anal.Biochem.(分析化学)47:273-279,1972研发的比色测定通过黄原胶上的还原末端测量GH9内切葡聚糖酶和 黄原胶裂解酶活性。一个优选实施例是0.1%黄原胶的用途。可以通过计算空白与样品之 间的差异确定黄原胶的降解,其中大于0.4mAU,优选大于0.5mAU,更优选大于0.6mAU或甚 至更优选大于0.8mAU的差异显示黄原胶的降解。本发明还涉及用于降解黄原胶的方法,这 些方法包括向黄原胶施用包括一种或多种本发明的GH9内切葡聚糖酶的组合物。本发明进 一步涉及用于降解黄原胶的方法,这些方法包括向黄原胶施用包括一种或多种本发明的黄 原胶裂解酶的组合物。一个实施例是一种用于降解黄原胶的方法,该方法包括向黄原胶施 用包括一种或多种本发明的GH9内切葡聚糖酶连同一种或多种本发明的黄原胶裂解酶的 组合物。 [0981] 在洗涤剂中的用途。 [0982] 本发明针对本发明的GH9内切葡聚糖酶或其组合物在清洁过程中的用途,例如纺织品和织物的湿洗,例如家用衣物洗涤和工业衣物洗涤,以及家用和工业硬表面清洁,例如餐具洗涤。可以将本发明的GH9内切葡聚糖酶添加至包括一种或多种洗涤剂组分的洗涤剂 组合物中。 [0983] 本发明还针对本发明的黄原胶裂解酶或其组合物在清洁过程中的用途,例如纺织品和织物的湿洗,例如家用衣物洗涤和工业衣物洗涤,以及家用和工业硬表面清洁,例如餐具洗涤。可以将本发明的黄原胶裂解酶添加至包括一种或多种洗涤剂组分的洗涤剂组合物 中。 [0984] 一个实施例是本发明的GH9内切葡聚糖酶连同本发明的黄原胶裂解酶或其组合物在清洁过程中的用途,例如纺织品和织物的湿洗(例如家用衣物洗涤和工业衣物洗涤) 以及家用和工业硬表面清洁,例如餐具洗涤。可以将本发明的GH9内切葡聚糖酶连同本发 明的黄原胶裂解酶添加至包括一种或多种洗涤剂组分的洗涤剂组合物中。 [0985] 可以将本发明的多肽被添加至洗涤剂组合物中并且因此变成洗涤剂组合物的组分。本发明的洗涤剂组合物可以配制为例如用于家用和工业衣物清洁两者的手洗或机洗衣 物洗涤剂组合物,包括适用于预处理有污物的织物的洗衣添加剂组合物和漂洗添加的织物 软化剂组合物,或者配制为用于一般家用或工业硬表面清洁操作的洗涤剂组合物,或者配 制用于手洗或机洗(家用和工业两者)餐具洗涤操作。在一个特定的方面中,本发明提供 了一种洗涤剂添加剂,该添加剂包括如在此描述的本发明的多肽。 [0986] 在一个实施例中,可以使用如在此描述的AMSA,关于黄原胶与碳黑小块布样测量ΔInt酶值。一个优选实施例是黄原胶与碳黑(DN31、DN31C或DN31D)小块布样在20℃或 40℃下的使用。一个更优选的实施例是黄原胶与碳黑(DN31C或DN31D)小块布样在40℃ 下的使用。一个甚至更优选的实施例是黄原胶与碳黑(DN31D)小块布样在40℃下的使用。 用于GH9内切葡聚糖酶和黄原胶裂解酶的优选酶浓度分别是0.5mg EP/L和1.0mg EP/L。 [0987] 如通过AMSA所确定,黄原胶与碳黑小块布样的δ强度值是至少3个单位。如通过AMSA所确定,黄原胶与碳黑小块布样的δ强度值是至少3.5个单位。如通过AMSA所确 定,黄原胶与碳黑小块布样的δ强度值是至少4个单位。如通过AMSA所确定,黄原胶与碳 黑小块布样的δ强度值是至少4.5个单位。如通过AMSA所确定,黄原胶与碳黑小块布样的 δ强度值是至少5个单位。如通过AMSA所确定,黄原胶与碳黑小块布样的δ强度值是至 少5.5个单位。如通过AMSA所确定,黄原胶与碳黑小块布样的δ强度值是至少6个单位。 如通过AMSA所确定,黄原胶与碳黑小块布样的δ强度值是至少7个单位。如通过AMSA所 确定,黄原胶与碳黑小块布样的δ强度值是至少8个单位。如通过AMSA所确定,黄原胶与 碳黑小块布样的δ强度值是至少9个单位。如通过AMSA所确定,黄原胶与碳黑小块布样 的δ强度值是至少10个单位。 [0988] 在一个实施例中,可以使用如在此描述的MiniLOM测定,测量关于黄原胶与碳黑小块布样的ΔRem酶值。一个优选实施例是黄原胶与碳黑(DN31、DN31C或DN31D)小块布 样在20℃或40℃下的使用。一个更优选的实施例是黄原胶与碳黑(DN31C或DN31D)小块布 样在40℃下的使用。一个甚至更优选的实施例是黄原胶与碳黑(DN31D)小块布样在40℃ 下的使用。优选地在460nm处测量反射值。用于GH9内切葡聚糖酶和黄原胶裂解酶的优选 酶浓度分别是0.5mg EP/L和1.0mg EP/L。 [0989] 如通过MiniLOM所确定,黄原胶与碳黑小块布样的ΔRem酶值是至少1.5个单位。如通过MiniLOM所确定,黄原胶与碳黑小块布样的ΔRem酶值是至少1.75个单位。如通过 MiniLOM所确定,黄原胶与碳黑小块布样的ΔRem酶值是至少2个单位。如通过MiniLOM所 确定,黄原胶与碳黑小块布样的ΔRem酶值是至少2.25个单位。如通过MiniLOM所确定, 黄原胶与碳黑小块布样的ΔRem酶值是至少2.5个单位。如通过MiniLOM所确定,黄原胶 与碳黑小块布样的ΔRem酶值是至少2.75个单位。如通过MiniLOM所确定,黄原胶与碳黑 小块布样的ΔRem酶值是至少3个单位。如通过MiniLOM所确定,黄原胶与碳黑小块布样 的ΔRem酶值是至少3.5个单位。如通过MiniLOM所确定,黄原胶与碳黑小块布样的ΔRem 酶值是至少4个单位。如通过MiniLOM所确定,黄原胶与碳黑小块布样的ΔRem酶值是至 少4.5个单位。如通过MiniLOM所确定,黄原胶与碳黑小块布样的ΔRem酶值是至少5个 单位。 [0990] 本发明还涉及用于降解纺织品的表面或硬表面上的黄原胶的方法,这些方法包括向黄原胶施用包括一种或多种本发明的GH9内切葡聚糖酶的组合物。本发明进一步涉及用 于降解纺织品的表面或硬表面上的黄原胶的方法,这些方法包括向黄原胶施用包括一种或 多种本发明的黄原胶裂解酶的组合物。一个实施例是一种用于纺织品的表面或硬表面上的 降解黄原胶的方法(例如餐具洗涤),该方法包括向黄原胶施用包括一种或多种本发明的 GH9内切葡聚糖酶连同一种或多种本发明的黄原胶裂解酶的组合物。一个实施例是包括如 在此描述的一种或多种洗涤剂组分的组合物。具有酶洗涤益处的GH9内切葡聚糖酶的用途 [0991] 已经出人意料地发现,单独使用GH9给出酶洗涤益处,优选是对黄原胶的酶洗涤益处。这是出人意料的,因为内切葡聚糖酶不能显著降解黄原胶的骨架,除非黄原胶已经被黄原胶裂解酶预处理。 [0992] 因此,本发明的另一个方面是一种洗涤剂组合物的用途,该洗涤剂组合物包括一种或多种洗涤剂组分以及一种具有酶洗涤益处的分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖 酶选自下组,该组由优选各项组成: [0993] (a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性; [0994] (b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0995] (c)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:12的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0996] (d)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:14的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0997] (e)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:48的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0998] (f)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:52的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [0999] (g)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:56的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1000] (h)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:82的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1001] (i)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:86的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1002] (j)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:90的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1003] (k)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:94的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1004] (l)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:98的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1005] (m)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:102的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1006] (n)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:130的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1007] (o)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:134的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1008] (p)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:138的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1009] (q)一种多肽,该多肽由在中严谨度条件、中-高严谨度条件、高严谨度条件或非常高严谨度条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码: [1010] (i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列; [1011] (ii)SEQ ID NO:9的成熟多肽编码序列; [1012] (iii)SEQ ID NO:11的成熟多肽编码序列; [1013] (iv)SEQ ID NO:13的成熟多肽编码序列; [1014] (v)SEQ ID NO:47的成熟多肽编码序列; [1015] (vi)SEQ ID NO:51的成熟多肽编码序列; [1016] (vii)SEQ ID NO:55的成熟多肽编码序列; [1017] (viii)SEQ ID NO:81的成熟多肽编码序列; [1018] (ix)SEQ ID NO:85的成熟多肽编码序列; [1019] (x)SEQ ID NO:89的成熟多肽编码序列; [1020] (xi)SEQ ID NO:93的成熟多肽编码序列; [1021] (xii)SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列; [1022] (xiii)SEQ ID NO:101的成熟多肽编码序列; [1023] (xiv)SEQ ID NO:129的成熟多肽编码序列; [1024] (xv)SEQ ID NO:133的成熟多肽编码序列; [1025] (xvi)SEQ ID NO:137的成熟多肽编码序列;或 [1026] (xvii)(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)、(vii)、(viii)、(ix)、(x)、(xi)、(xii)、(xiii)、(xiv)、(xv)、或(xvi)的全长互补体; [1027] (r)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1028] (s)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:9的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1029] (t)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:11的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1030] (u)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:13的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1031] (v)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:47的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1032] (w)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:51的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1033] (x)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:55的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1034] (y)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:81的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1035] (z)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:85的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1036] (aa)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:89的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1037] (ab)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:93的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1038] (ac)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:97的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1039] (ad)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:101的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1040] (ae)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:129的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1041] (af)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:133的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1042] (ag)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:137的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1043] (ah)SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:94、SEQ ID NO:98、SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:134或SEQ ID NO:138的成熟多肽的一种变体,该变体在一个或多个位置(例如若干个)处包括取代、缺失、和/或插入; 以及 [1044] (ai)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)、(p)、(q)、(r)、(s)、(t)、(u)、(v)、(w)、(x)、(y)、(z)、(aa)、(ab)、(ac)、(ad)、(ae)、(af)、(ag)或(ah)的多肽的一个片段,该片段对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [1045] 一个实施例是一种洗涤剂组合物的用途,该洗涤剂组合物包括一种或多种洗涤剂组分以及一种具有酶洗涤益处的分离的GH9内切葡聚糖酶,该内切葡聚糖酶选自下组,该 组由优选各项组成: [1046] (a)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性; [1047] (b)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:10的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1048] (c)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:14的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1049] (d)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:48的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1050] (e)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:52的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1051] (f)一种多肽,该多肽与SEQ ID NO:56的成熟多肽具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1052] (g)一种多肽,该多肽由在中严谨度条件、中-高严谨度条件、高严谨度条件或非常高严谨度条件下与以下各项杂交的多核苷酸编码: [1053] (i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列; [1054] (ii)SEQ ID NO:9的成熟多肽编码序列; [1055] (iii)SEQ ID NO:13的成熟多肽编码序列; [1056] (iv)SEQ ID NO:47的成熟多肽编码序列; [1057] (v)SEQ ID NO:51的成熟多肽编码序列; [1058] (vi)SEQ ID NO:55的成熟多肽编码序列; [1059] (vii)(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)或(vi)的全长互补体; [1060] (h)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1061] (i)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:9的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1062] (j)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:13的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1063] (k)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:47的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1064] (l)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:51的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1065] (m)一种多肽,该多肽由以下多核苷酸编码,该多核苷酸与SEQ ID NO:55的成熟多肽编码序列具有至少80%,例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性; [1066] (n)SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52或SEQ ID NO:56的成熟多肽的一种变体,该变体在一个或多个位置(例如若干个)处包括取代、缺失、和/或插入;以及 [1067] (o)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)或(n)的多肽的片段,该片段对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [1068] 另一个实施例是一种洗涤剂组合物的用途,该洗涤剂组合物包括一种或多种洗涤剂组分和一种本发明的分离的GH9内切葡聚糖酶连同一种黄原胶裂解酶。一个优选实施例 是一种洗涤剂组合物的用途,该洗涤剂组合物包括一种或多种洗涤剂组分和一种本发明的 分离的GH9内切葡聚糖酶连同一种本发明的黄原胶裂解酶。 [1069] 在地下地层的压裂(石油钻探)中的用途 [1070] 使用水力压裂来创造自钻孔延伸至岩层的地下压裂,以便增加通过地层可以产生的流体的流速。通常,将高粘度压裂液以足够压裂地下地层的压力泵入井中。为了维持向地层的增加的暴露,将固体支撑剂添加至压裂液中,通过施加至流体的高压将其带进压裂处。 一旦高粘度压裂液将该支撑剂带进地层中,破碎物用于减少流体的粘度,这允许该支撑剂 停留在压裂处中并且由此增加地层向井的暴露。破碎物通过减少聚合物的分子量而工作, 以此方式‘破碎’或降解聚合物。压裂处然后变为一种高渗透性管道,用于有待产生的流体和空气回至井中。此类过程进一步披露于美国专利号7,360,593、5,806,597、5,562,160、 5,201,370以及5,067,566中。 [1071] 因此,本发明涉及本发明的GH9内切葡聚糖酶作为酶破碎物的用途。本发明还涉及本发明的黄原胶裂解酶作为酶破碎物的用途。本发明的一个实施例是本发明的GH9内切 葡聚糖酶连同本发明的黄原胶裂解酶作为酶破碎物的用途。 [1072] 因此,本发明提供了一种用于破碎钻井孔中的黄原胶的方法,该方法包括:(i)将包括水性流体的可胶凝压裂液、一种或多种能水合的聚合物、用于交联能水合的聚合物以形成一种聚合物凝胶的适合的交联剂,以及一种或多种本发明的酶(即,酶破碎物)共混在 一起;(ii)将交联聚合物凝胶在足够压裂周围地层的压力下泵入钻井孔中;并且(iii)允 许酶破碎物降解交联聚合物,以减少流体的粘度,这样使得可以将流体从地层泵回至井表 面。因此,本发明的GH9内切葡聚糖酶可以用于控制压裂液的粘度。此外,本发明的黄原胶裂解酶可以用于控制压裂液的粘度。在一个实施例中,一种或多种本发明的GH9内切葡聚 糖酶连同一种或多种本发明的黄原胶裂解酶可以用于控制压裂液的粘度。 [1073] 本发明的酶破碎物可以是压裂液或破碎物-交联剂-聚合物复合物的一种成分,该压裂液或复合物进一步包括一种能水合的聚合物和一种交联剂。压裂液或复合物可以是 一种凝胶或可以是可胶凝化的。该复合物在以下方法中是有用的,该方法用于在一种压裂 液中使用该复合物以将钻井孔周围的地下地层压裂,这是通过在足够将周围的地下地层压 裂的压力下将该流体泵至钻井孔中的所希望的位置。该复合物可以通过维持特定条件的pH 和温度来维持基本上非反应的状态,直到该流体被放置在钻井孔中的时刻并且完成所希望 的压裂。一旦压力完成,该复合物维持无活性的特定条件便不再维持。当这些条件显著变化时,该复合物变得有活性并且破碎物开始催化聚合物降解,从而导致压裂液变得足够流动,以从地下地层泵至井表面。 [1074] 其他用途 [1075] 本发明的多肽可以另外地用于其中除去黄原胶是有益的应用中。 [1076] 方法 [1077] 降解黄原胶的方法,其中黄原胶用于压裂由钻井孔形成的地下地层 [1078] 当钻井时,储层钻井液(RDF)在钻探设备内循环以冷却并清洁钻头,除去钻井孔外的钻屑,减少钻柱与钻孔的侧边之间的摩擦力,并且形成滤饼以便阻止流体渗漏进入地 层中。用于形成滤饼的驱动力是应用以维持钻孔稳定性的较高的钻井孔压力。这一滤饼限 制储层流体在钻探以及完井设备的放置过程中流入钻井孔。如果在井竣工之前或过程中未 除去在钻探过程中造成的滤饼损伤,则当该井投入生产时可以出现一系列问题,即完井设 备失败和受损的储层生产力。 [1079] 钻井液(泥浆)(也称为储层钻井液(RDF))可以是合成/油基的或水基的。为了使钻井液对地层的侵入最小化,油基和水基泥浆滤饼两者都典型地包含一种桥接剂或增重 剂,通常是碳酸钙颗粒、重晶石或两者的混合物,其桥接在地层的孔喉处并且由此形成相对低渗透性滤饼。油基和水基泥浆滤饼两者还都包含在钻探过程中带出的称作钻屑的固体, 与添加在钻井液的配制品中的桥接/增重剂截然相反。这些固体可以是石英(砂)、粉砂 和/或页岩,取决于储层地层以及由钻探路径至储层穿过的地层。另外,油基钻井泥浆包含陷于滤饼的孔域中的水滴,而水基泥浆滤饼包含聚合物,例如淀粉和黄原胶,以及其他无机盐。 [1080] 形成泥浆滤饼对于钻探而言通常是必须的,特别是在具有钻井孔稳定性问题并且典型地具有高渗透性的疏松地层中。然后将滤饼用不同化学品处理,例如螯合剂或酸,以溶解方解石组分;和/或酶或氧化剂,以降解聚合物组分,从而恢复渗透性。 [1081] 在一个方面中,本发明提供了一种用于降解黄原胶的方法,其中黄原胶用于压裂由钻井孔造成的地下地层,该方法是通过应用包括一种或多种本发明的酶的组合物。该方 法可以包括以下步骤:(i)将包括一种或多种本发明的酶的处理流体泵入与有待去除的滤 饼接触的钻孔中,以在该处理流体与邻接该滤饼的地层之间建立不同的压力并且(ii)在 不同的压力周期过程中均匀地传播滤饼的处理,以通过该处理流体延迟突破。 [1082] 在一个实施例中,该方法包括在地层与钻孔之间通过处理的滤饼建立渗透性。在另一个实施例中,该滤饼可以包括钻井固体和黏土,并且可以形成自水性钻井液。如果希望的话,用于处理水性钻井液滤饼的处理流体还可以包括一种氧化剂和/或螯合剂,或它可 以是基本上不含螯合剂和氧化剂添加剂的。在另一个实例中,该滤饼可以形成自油或反相 乳化钻井液。如果希望的话,用于处理油或反相乳化钻井液滤饼的处理流体还可以包括一 种互溶溶剂、水湿润剂或其组合,以分散滤饼中的疏水性组分。 [1083] 在一个实施例中,该处理流体包括一种或多种本发明的GH9内切葡聚糖酶。在另一个实施例中,该处理流体包括一种或多种本发明的黄原胶裂解酶。在一个优选实施例中,该处理流体包括本发明的一种或多种GH9内切葡聚糖酶以及一种或多种黄原胶裂解酶。 [1084] 降解黄原胶的方法,其中黄原胶是钻孔滤饼中的一种组分 [1085] 在一个方面中,本发明提供了一种一旦钻孔滤饼被泵至表面,用于清洁该滤饼的方法,该滤饼包括聚合物,例如黄原胶和钻井液固体。钻井泥浆从泥浆池泵至钻头然后再泵出至表面,在该过程中带出除其他东西之外的破碎的或切碎的岩石(钻屑)。将钻屑滤出 并且将泥浆返回至泥浆池,在泥浆池中细粒可以沉淀和/或可以将添加化学品或酶(破碎 物)进行添加。 [1086] 用于降解黄原胶的方法(其中黄原胶是钻孔滤饼中的一种组分)可以包括以下步骤:(i)用一种处理流体处理该钻孔滤饼,该处理流体包括一种或多种本发明的酶并且 (ii)将固体与流体分离。在一个实施例中,该处理流体包括一种或多种本发明的GH9内切 葡聚糖酶。在另一个实施例中,该处理流体包括一种或多种本发明的黄原胶裂解酶。在一 个优选实施例中,该处理流体包括一种或多种本发明的GH9内切葡聚糖酶以及一种或多种 本发明的黄原胶裂解酶。 [1087] 可以将钻孔滤饼在泥浆池中用一种或多种本发明的酶处理并且可以再循环钻井液。可替代地,一旦滤饼已经被一种或多种本发明的酶处理,使用固液分离方法(例如离 心)将固体与流体分离。 [1088] 通过以下实例进一步描述本发明,这些实例不应当解释为限制本发明的范围。 [1089] 实例 [1090] 培养基和溶液 [1091] YP+2%葡萄糖培养基由1%酵母提取物、2%蛋白胨以及2%葡萄糖构成。 [1092] PDA琼脂板是由马铃薯浸出液(马铃薯浸出液是通过将300g切片的(经过洗涤但未削皮)的马铃薯在水中煮沸30分钟,并且然后将该培养液倾析或滤过粗滤布而制成)构 成的。然后添加蒸馏水,直到悬浮液的总体积为一升,随后添加20g的右旋糖和20g的琼脂 粉。该培养基通过在15psi下高压杀菌15分钟来进行灭菌(《细菌学分析手册》,第8版, 修订A,1998)。 [1093] LB板由10g的细菌用胰蛋白胨(Bacto-Tryptone)、5g的酵母提取物、10g的氯化钠、15g的细菌用琼脂及补足到1升的去离子水构成。该培养基通过在15psi下高压杀菌 15分钟来进行灭菌(《细菌学分析手册》,第8版,修订A,1998)。 [1094] COVE蔗糖板由以下构成:342g蔗糖(西格玛(Sigma)S-9378)、20g琼脂粉、20mlCove盐溶液(26g MgSO4.7H2O、26g KCL、26g KH2PO4、50ml Cove痕量金属溶液)以及补足到 1升的去离子水。该培养基通过在15psi下高压杀菌15分钟来进行灭菌(《细菌学分析手 册》,第8版,修订A,1998)。将该培养基冷却至60℃并且添加10mM的乙酰胺、15mM的CsCl、曲通(Triton)X-100(50μl/500ml)。 [1095] COVE痕量金属溶液由以下构成:0.04g Na2B4O7.10H2O、0.4g CuSO4.5H2O、1.2g FeSO4.7H2O、0.7g MnSO4.H2O、0.8g Na2MoO4.2H2O、10g ZnSO4.7H2O、以及补足到1升的去离子水。 [1096] Dap-4C培养基由以下构成:20g右旋糖、10g麦芽糖、11g MgSO4.7H2O、1g KH2PO4、2g柠檬酸、5.2g K3PO4.H2O、0.5g酵母提取物(Difco)、1ml Dowfax 63N10(陶氏化学公司(Dow Chemical Company))、0.5ml KU6痕量金属溶液、2.5g CaCO3、以及补足到1升的去离子水。该培养基通过在15psi下高压杀菌15分钟来进行灭菌(《细菌学分析手册》,第8版,修订 A,1998)。使用之前,Dap-4C培养基中添加3.5ml无菌的50%(NH4)2HPO4和5ml无菌的20% 乳酸/150ml培养基。 [1097] KU6痕量金属溶液由以下构成:0.13g NiCl2、2.5g CuSO4.5H2O、13.9g FeSO4.7H2O、8.45g MnSO4.H2O、6.8g ZnCl2、3g柠檬酸、以及补足到1升的去离子水。 [1098] 表1:标准洗涤剂A的组成 [1099] [1100] [1101] 最后用NaOH或柠檬酸将pH调节至pH 8 [1102] 表2:标准液体洗涤剂B的组成 [1103]洗涤剂成分 Wt% 直链烷基苯磺酸(LAS) 7.2 醚硫酸烷基钠(C12)(AEOS)(SLES) 4.2 可可皂(Radiacid 631) 2.75 大豆皂(Edenor SJ) 2.75 醇乙氧基化物(AEO)(Bio-Soft N25-7) 6.6 氢氧化钠 1.2 乙醇 3 丙烷-1,2-二醇(MPG) 6 甘油 2 三乙醇胺(TEA) 3 甲酸钠 1 柠檬酸钠 2 二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTMPA) 0.2 聚羧酸酯聚合物(PCA)(Sokalan CP-5) 0.2 水 直至100 [1104] 洗涤测定 [1105] 用于衣物洗涤的自动机械应力测定(AMSA) [1106] 为了评定洗涤性能,使用自动机械应力测定(AMSA)进行衣物洗涤实验。使用AMSA,可以检査大量小体积酶洗涤剂溶液的洗涤性能。AMSA板具有许多用于测试溶液的孔 和盖子,盖子针对所有缝开口强力挤压洗涤样品(有待洗涤的纺织品)。在洗涤时间期间, 板、测试溶液、纺织品和盖子在控制温度下剧烈振动从而使测试溶液与纺织品接触并以规 则、周期性摆动方式施加机械压力。关于进一步描述,参见WO 02/42740,尤其是第23-24页的“特定方法实施例(Special method embodiments)”段落。 [1107] 将洗涤性能作为所洗涤纺织品颜色的亮度进行测量。亮度也可以表达为当用白光照亮时从样品反射的光的强度。当样品受到污染时,反射光的强度低于干净样品的反射光 的强度。因此,反射光的强度可以用于测量洗涤性能。 [1108] 使用专业平板扫描仪(Kodak iQsmart,柯达,Midtager 29,DK-2605丹麦,或Epson Expression 10000XL,丹麦爱普生(Epson Danmark),Transformervej 6, 2730Herlev,丹麦)进行颜色测量,该扫描仪用于捕获所洗涤纺织品的图像。 [1110] [1111] 迷你洗衣指数计(Launder-O-Meter)(MiniLOM)测定 [1112] MiniLOM测定是洗衣指数计(LOM)的小规模版本。它被用于确定“酶洗涤益处”。miniLOM基本上由在给定的时间和温度下在加热柜中旋转的封闭的试管组成。每个试管构 成一个小的洗衣机并且在一次实验过程中,每个试管将包含一种具有特定的有待测试的洗 涤剂/酶系统连同在关于其进行测试的有污物及无污物的织物。机械压力由旋转的试管并 且由包括在管中的金属球实现。 [1113] 小规模标准洗涤系统主要用于在欧洲洗涤条件下测试洗涤剂和酶。 [1114] 来自mini-LOM的污物的评估 [1115] 将洗涤性能表示为反射值(Rem)。洗涤并冲洗之后,将小块布样摊开铺平并且允许在室温下风干过夜。评估所有洗涤,应该在洗涤后2天评估。使用具有非常小孔径的 Macbeth Color Eye 7000反射分光光度计进行小块布样的光反射评估。在入射光中没有 UV的情况下进行测量并且提取460nm处的反射。在洗涤的小块布样上进行测量。将有待测 量的测试小块布样放置在相同类型和颜色的另一个小块布样的顶部(成对小块布样)。每 个烧杯中仅有每一种的一个小块布样,以此方式使用来自复制洗涤的一个小块布样。可以 通过将没有使用酶的反射值与使用一种或多种酶的反射值进行比较来观察酶性能。发射值 越高,清洁效果越好。 [1116] 活性测定 [1117] 黄原胶裂解酶活性测定(黄原胶裂解酶特异性测定) [1118] 将0.8mL 100mM HEPES缓冲液(pH 6.0)与溶解于的水中的0.2mL黄原胶(5mg/mL)混合在1mL 1cm比色杯中。将比色杯插入将温度控制设置在40℃的分光光度计(安 捷伦(Agilent)G1103A 8453A,加利福尼亚州,美国)中。将溶液预孵育10min并且添加 0.1mL样品,并且通过使用移液管将溶液吸液并分配至少5次来混合该溶液。总反应体积是 1.1mL。使用30sec测量间隔,将235nm处的吸光度收集10min。通过使用软件(紫外-可 见化学工作站版本(UV-Visible Chemstation Rev)A.10.01[81],安捷伦)计算初始活性。 [1119] 实例1:GH9黄原胶酶基因的鉴定 [1120] 通过将黄原胶用作唯一碳源从获得自不同地方的土壤样品分离四种细菌菌株(参见下表3)。 [1121] 表3:细菌菌株的分离 [1122]菌株 鉴别编号 来源 国家 类芽孢杆菌属 NN062047 森林土壤 中国 微杆菌属 NN062149 大田土壤 西班牙 微杆菌属 NN062148 沙滩 丹麦 微杆菌属 NN062045 花园土壤 丹麦 [1123] 通过QIAamp DNA血液迷你试剂盒(凯杰公司(Qiagen),希尔登,德国)分离四种细菌菌株的染色体DNA。使2ug的染色体DNA经受部分鸟枪基因组测序,一种在FASTERIS SA,瑞士可商购的服务。针对具有糖基水解酶结构域的蛋白质序列分析基因组序列(根据 以上的CAZY基因)。从每种细菌菌株鉴定一种基因和相应的蛋白质序列(SEQ ID NO:1、9、 11及13)并且在此处证明实际上对黄原胶具有所希望的活性。 [1124] 实例2:在枯草芽孢杆菌中有N-末端His标记的GH9的克隆及其表达 [1125] 用特异性引物从四种细菌菌株的染色体DNA扩增GH9基因的基因片段:D88F-正向和D89R-反向,用于类芽孢杆菌属NN062047;D124F-正向和D125R-反向,用于微杆菌属 NN062149;D126F-正向和D127R-反向,用于微杆菌属NN062148;D128F-正向和D129R-反 向,用于微杆菌属NN062045(参见表4,用于序列细节)。这些引物包含至克隆载体的突出 端,该克隆载体是质粒C6221的一种衍生物(描述于WO 2012/025577中),通过在分泌信号 后引入聚组氨酸标记(HHHHHHPR)而修饰。 [1126] 表4:用于PCR扩增的引物 [1127] [1128] 根据来自制造商的说明(PT5162-1),使用In-Fusion HD克隆试剂盒(克隆技术产品编号639648)将PCR片段克隆进用AvrII和MluI酶消化的质粒中。 [1129] 用具有以下氨基酸序列(MKKPLGKIVASTALLISVAFSSSIASA,(SEQ ID NO:29))的分泌信号代替天然分泌信号来表达GH9多肽,从而形成重组基因和蛋白质序列。(通过这样 做,熟多肽成随可操作地连接至成熟的GH9黄原胶酶的聚组氨酸-标记(HHHHHHPR(SEQ ID NO:30)而表达))。 [1130] 将In-Fusion反应转化进大肠杆菌中并且选择并培养氨比西林抗性转化体,用于随后的DNA质粒制备。通过DNA测序分析每种构建体的7个克隆,以验证这些构建体的正 确的DNA序列。融合产物的核苷酸序列对应于SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17 以及SEQ ID NO:19。翻译的蛋白质序列对应于SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:18以及SEQ ID NO:20。 [1131] 选择一个具有正确重组基因序列的克隆并且通过同源重组将对应的质粒整合进枯草芽孢杆菌宿主细胞基因组中并且在三联启动子系统的控制下表达该基因构建体, 如描述于WO 99/43835中。将编码氯霉素乙酰转移酶的基因用作标记物(如描述于 Diderichsen(狄代丽柯森)等人,1993,Plasmid(质粒)30:312-315中)。 [1133] 实例3:黄原胶裂解酶基因的鉴定、基因组测序及鉴定 [1134] 通过将黄原胶用作唯一碳源从来自新西兰的土壤样品分离类芽孢杆菌属菌株NN018054。通过QIAamp DNA血液迷你试剂盒(凯杰公司,希尔登,德国)分离细菌菌株类 芽孢杆菌属NN018054的染色体DNA。将2ug的染色体DNA送至FASTERIS SA,瑞士进行基 因组测序。将该基因组通过亿明达(Illumina)测序进行测序。分析基因组序列并且通过 BLASTP检索鉴定XL蛋白(SEQ ID NO:3)。 [1135] 实例4:枯草芽孢杆菌中具有N-末端His标记的黄原胶裂解酶的克隆的及表达 [1136] 用基因特异性引物(D117F:5’TCACCATCATCCTAGGGCGGAGGCGTCCGACATGTTCGACG3’(SEQ ID NO:31)(和D118R:5’TTATTGATTAACGCGTTTACGGCTGCTGCGCGCCGGTCAGG 3’(SEQ ID NO:32))从类芽孢杆菌属菌株NN018054的染色体DNA扩增截短的黄原胶裂解酶。这 些引物包含至克隆载体的突出端,该克隆载体是质粒C6221的一种衍生物(描述于WO 2012/025577中),通过在分泌信号后引入聚组氨酸标记(HHHHHHPR(SEQ ID NO:30))而修 饰。 [1137] 根据来自制造商的说明(PT5162-1),使用In-Fusion HD克隆试剂盒(克隆技术(Clontech)639648)将PCR片段克隆进用AvrII和MluI酶消化的质粒中。 [1138] 用具有以下氨基酸序列(MKKPLGKIVASTALLISVAFSSSIASA,(SEQ ID NO:29))的分泌信号代替天然分泌信号来表达截短的黄原胶裂解酶蛋白,从而形成重组基因和蛋白质 序列SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8。通过这样做,成熟多肽随可操作地连接至成熟的黄原胶 裂解酶的聚组氨酸-标记(HHHHHHPR(SEQ ID NO:30)而表达。 [1139] 将In-Fusion反应转化进大肠杆菌中并且选择并培养氨比西林抗性转化体,用于随后的DNA质粒制备。通过DNA测序分析7个克隆,以验证该构建体的正确的DNA序列。融 合产物的核苷酸序列对应于SEQ ID NO:7。翻译的蛋白质序列对应于SEQ ID NO:8。 [1140] 选择一个具有正确的重组基因序列的克隆并且通过同源重组将对应的质粒整合进枯草芽孢杆菌宿主细胞基因组中。在三联启动子系统的控制下表达该基因构建体 (如描述于WO 99/43835中)。将编码氯霉素乙酰转移酶的基因用作标记物(如描述于 Diderichsen(狄代丽柯森)等人,1993,Plasmid(质粒)30:312-315中)。 [1141] 通过PCR分析氯霉素抗性转化体,以验证扩增片段的正确大小。选择包含整合的表达构建体的重组枯草芽孢杆菌并使其在液体培养物中生长。收获包含上清液的酶并如实 例5中所述的将该酶进行纯化。 [1142] 实例5:GH9和黄原胶裂解酶蛋白的纯化 [1143] 如在实例2和4中所描述构建枯草芽孢杆菌菌株,以将该蛋白表达至培养基中。将培养液离心(17.696×g,30min)并且将上清液小心地与沉淀物滗析分开。上清液通过耐洁 (Nalgene)0.2μm过滤装置过滤以便除去剩余的芽孢杆菌宿主细胞。 [1144] 使用具有10K截留过滤器的Filtron系统减少体积。将体积减少至大约80mL,然后向样品中添加缓冲液A:50mM TRIS+10mM咪唑(pH 8.0)。将样品的pH调节至8并且应 用至在缓冲液A中平衡的Ni-NTA Superflow柱(凯杰公司)上。装载后,用3个柱体积 (CV)的缓冲液A洗涤该柱。然后,应用至100%缓冲液B:缓冲液B:50mM MES+10mM咪唑 (pH 7.0)的分级梯度并且连续地,应用至100%缓冲液C:50mM MES+1M咪唑(pH 7.0)(在 4CV中)的第二梯度。所有的阳性级分在SDS-PAGE上跑胶并且通过条带鉴定对应的蛋白 质。将分别包含XL或GH9的级分池化在缓冲液Tris 20mM(pH 7.0)中并脱盐。 [1145] 用于进一步纯化,将对应的池装载在20mM Tris(pH 7.0)中平衡的Q-Sepharose离子交换柱(GE医疗集团(GE Healthcare))中。装载后,使用0-100%20mM Tris+1M NaCl,pH 7.0洗脱蛋白。阳性级分在SDS-PAGE凝胶上跑胶并在20mM Tris(pH 7.0)中脱盐。 [1146] 使用由成熟蛋白的推导的氨基酸序列计算的对应的消光系数,通过280处的吸光度确定纯化的蛋白的浓度。 [1147] 实例6:黄原胶裂解酶和GH9对黄原胶裂解酶的活性筛选 [1148] 黄原胶裂解酶活性 [1149] 如上所述,对纯化的黄原胶裂解酶蛋白确定黄原胶裂解酶活性。将数据呈现于下表5中。 [1150] 表5:SEQ ID NO:8的黄原胶裂解酶的比活性 [1151] [1152] 数据显示黄原胶裂解酶对黄原胶具有活性。 [1153] 还原末端 [1154] 用于确定还原末端产物的量的方法是如描述于Murphy(墨菲)等人,2012,J.Biol.Chem.(生物化学杂志)287:1252-1260中并且改编自Zhang(张)等人,2005, Biomacromolecules(生物大分子)6:1510-1515和Dubois(杜布瓦)等人,1956,Anal. Chem.(分析化学)28:350-356的2,2’二喹啉酸测定(BCA)。还原末端的定量基于葡萄糖 标准曲线。包括适当的底物和酶控制并且针对每个分析进行修正。使用适当的稀释度来保 证样品在葡萄糖校准曲线范围内。结果示于下表7中。 [1155] 粘度减小 [1156] 使用描述于WO 2011/107472中的诺维信研发的粘度压力测定进行粘度测量。每1mL水解或对照的100μL是样品大小。呈现的结果是三个测量值的平均值并且示于下表6 中。 [1157] 水解 [1158] 水解条件如下:40℃,在50mM MES缓冲液中的0.25%黄原胶(XG)+0.01%曲通x-100pH 7.0。热平衡后添加酶。使用之前,所有的酶使用NAP5柱(GE医疗集团)进行缓 冲液交换为MES缓冲液。 [1159] 酶剂量 [1160] 使用实例5的纯化的酶制剂按以下浓度用于分析: [1161] GH9(SEQ ID NO:6):7.25mg/L [1162] 黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8):40μg/L [1163] 表6:GH9(SEQ ID NO:6)和/或黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8)对黄原胶的粘度测量 [1164] [1165] [1166] 表7:使用GH9(SEQ ID NO:6)和/或黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8)的还原末端结果 [1167] [1168] 来自表5的上面的结果显示黄原胶裂解酶和GH9的组合可以通过减小培养基的粘度来降解黄原胶。这些结果与获得自示于表6中的还原末端测定的结果一致,该测定显示 通过添加黄原胶裂解酶或黄原胶裂解酶+GH9增加了还原末端的数目,因为黄原胶通过酶 降解。 [1169] 实例7:GH9内切葡聚糖酶与黄原胶裂解酶之间的协同的展示 [1170] 将使用液相层析的方法用来展示GH9内切葡聚糖酶和黄原胶裂解酶在黄原胶上具有的解聚作用。用于这一实例,使用具有SEQ ID NO:8的His-标记的黄原胶裂解酶和具 有SEQ ID NO:6的His-标记的GH9内切葡聚糖酶。如描述于实例5中纯化酶。 [1171] 将底物混合物与0.02mg/mL黄原胶裂解酶和0.02mg/mL GH9混合,该底物混合物由反应缓冲液100mM HEPES缓冲液(pH 6.0)中的0.25%(w/v)黄原胶(科通(Keltron) (补充有0.01%(w/v)曲通-X)组成。在固定的时间点取出50μL样品并且用150μL HEPES 缓冲液(pH 6.0)稀释这些样品。使用100μL样品环立即将样品注射并在26mL Superdex S200柱(GE医疗集团,乌普萨拉,瑞典)上分离。在这一实验中使用的系统是放置于冷室 (+4℃)中的 探测器(GE医疗集团)。以0.7mL/min的流速并且使用0.1M HEPES, pH 7.0缓冲液进行多糖的分离。监测235nm处的吸光度,以检测黄原胶裂解酶反应产物的 双键。在保留体积9mL和19mL处洗脱的层析谱中可以观察到两个峰。对照样品仅产生一 个具有9mL的保留体积的峰,该对照样品由在反应缓冲液中孵育3h的0.02mg/mL黄原胶裂 解酶和0.25%(w/v)黄原胶组成。因此,出现在9mL处的峰对应于黄原胶裂解酶处理的黄 原胶。随着时间,9mL峰的大小减少而在19mL处洗脱的峰的大小增加。结果呈现于下表8 中。 [1172] 表8:GH9(SEQ ID NO:6)和/或黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8)针对黄原胶的层析结果 [1173]时间(min) 峰高9mL(mAU) 峰高19mL(mAU) 3 36 5 40 20 15 85 11 20 [1174] 数据指示黄原胶裂解酶和GH9内切葡聚糖酶的组合可以将黄原胶降解为更小的黄原胶衍生的低聚糖。 [1175] 实例8:黄原胶裂解酶处理的黄原胶与CMC的比活性 [1176] 用于确定GH9内切葡聚糖酶的比活性的方法是对羟基苯甲酸法(PHBAH)。用于这一实例,使用来源于类芽孢杆菌属并且具有SEQ ID NO:6的序列的His-标记的GH9内切葡 聚糖酶。 [1177] 还原末端的定量基于葡萄糖标准曲线。通过使用1%w/v的底物浓度确定对于羧甲基-纤维素7LF(赫拉克勒斯(Hercules))的比活性。使用0.25%w/v溶液确定对于黄 原胶裂解酶处理的黄原胶(根据Nankai(南凯)等人(1999)制备自科通(Keltran)来源) 的比活性。测定缓冲液是0.1M HEPES,pH 7.0。将溶解于测定缓冲液中的1.5mL底物在玻 璃管中预加热5min。添加0.5mL适当的酶稀释物并且通过10sec的涡旋将样品混合。将这 些样品在40℃下孵育20min。通过添加1.0mL终止试剂来终止酶促反应,该终止试剂由溶解 于100mL 2%w/v NaOH中的1.5g PHBAH,5g K/Na酒石酸盐组成。将这些样品煮沸10min 并且将来自每个管的200μL转移至96孔微量滴定板。收集410nm处的吸光度。通过使用 葡萄糖标准曲线将吸光度值转化为IU。将一个IU定义为在40℃和pH 7.0下,每分钟形成 的1μmol葡萄糖等效物的释放。结果示于下表9中。 [1178] 表9:与黄原胶裂解酶处理的黄原胶相比,GH9(SEQ ID NO:6)对CMC的比活性 [1179]底物 比活性(IU/mg) CMC 2.1 黄原胶裂解酶处理的黄原胶 41.5 [1180] 结果显示与CMC相比,GH9内切葡聚糖酶对黄原胶裂解酶处理的黄原胶更有活性。 [1181] 参考 [1182] Nankai( 南 凯 ),H.,Hashimoto( 桥 本 ),W.,Miki( 三 木 ),H.,Kawai( 卡瓦 一 ),S.,Murata( 村 太 ),K.(1999)“Microbial system for polysaccharide depolymerization:enzymatic route for xanthan depolymerization by Bacillus sp.Strain GL1(微生物系统多糖解聚:用于通过芽孢杆菌属菌株GL1解聚的黄原胶的酶途 径)”,Applied and Environmental Microbiology(应用与环境微生物),第65卷(6),第 2520-2526页。 [1183] 实例9:黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8)和/或GH9(SEQ ID NO:6)的AMSA洗涤性能 [1184] 如描述于用于洗衣方法中的自动机械应力测定(AMSA)进行这些实验,使用2个循环洗涤程序以及表10和11中指定的实验条件:在循环1中添加如在表12和13中所述的 一种或多种酶。 [1185] 表10:循环1的条件 [1186]测试溶液 缓冲液(50mM MES) 测试溶液体积 160μL pH 调节至pH 7 洗涤时间 30分钟 温度 20℃或40℃ 水硬度 15°dH Ca2+:Mg2+:CO32-比率 4:1:7.5 小块布样 DN31:黄原胶与碳黑 [1187] [1188] 表11:循环2的条件 [1189]测试溶液 3.33g/L标准洗涤剂A 测试溶液体积 160μL pH 未调节的 洗涤时间 30分钟 温度 20℃或40℃ 水硬度 15°dH Ca2+:Mg2+:CO32-比率 4:1:7.5 [1190] 通过向测试系统中添加CaCl2、MgCl2及NaHCO3来调节水硬度。洗涤后,将纺织品在自来水中沖洗并风干。通过向棉织物中添加与碳黑混合的来自野油菜黄单胞菌(西格玛 目录号C1253)黄原胶来制备这些小块布样。 [1191] 表12:黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8)和/或GH9(SEQ ID NO:6)在20℃下,在AMSA测定中的结果。 [1192] [1193] [1194] 表13:黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8)和/或GH9(SEQ ID NO:6)在40℃下,在AMSA测定中的结果 [1195] [1196] 这些结果显示黄原胶裂解酶和GH9的组合在测试条件下具有洗涤效果。并且单独的GH9在这一测定中表现良好,而单独的黄原胶裂解酶在这一测定中仅具有少的效果。 [1197] 实例10:通过测量粘度减小的GH9酶和黄原胶裂解酶的黄原胶降解活性 [1198] 粘度减小 [1199] 使用描述于WO 2011/107472中的诺维信研发的粘度压力测定进行粘度测量。400μL是样品大小。呈现的结果是三个测量值的平均值并且示于下表14中。 [1200] 水解 [1201] 水解条件如下:30℃,在50mM MES缓冲液中的0.25%黄原胶(XG)+0.01%曲通x-100pH 7.0。热平衡后添加酶。使用之前,所有的酶使用NAP5柱(GE医疗集团)进行缓 冲液交换为MES缓冲液。 [1202] 酶剂量 [1203] 使用实例5的纯化的酶制剂用于在31.25mg/L的分析。一式两份地测试黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8)和GH9内切葡聚糖酶的酶混合物。 [1204] 表14:不同GH9(SEQ ID NO:6、16、18或20)和/或黄原胶裂解酶(XL,SEQ ID NO:8)针对黄原胶的粘度测量 [1205] [1206] [1207] 上面呈现的结果显示不同GH9与黄原胶裂解酶的组合可以降解存在于培养基中的黄原胶,从而导致粘度减小。 [1208] 实例11:枯草芽孢杆菌中不具有N-末端His标记的GH9的克隆及表达 [1209] 用特异性引物从四种细菌菌株的染色体DNA扩增GH9基因的基因片段:D158F-正向和D159R-反向,用于类芽孢杆菌属NN062047;D168F-正向和D169R-反向,用于微杆菌属 NN062149;D170F-正向和D170R-反向,用于微杆菌属NN062148;D171F-正向和D172R-反 向,用于微杆菌属NN062045(参见表15,用于序列细节)。这些引物在分泌信号后包含至克 隆载体的突出端C6221(如描述于WO 2012/025577中)。 [1210] 表15:用于PCR扩增的引物 [1211] [1212] [1213] 根据来自制造商的说明(PT5162-1),使用In-Fusion HD克隆试剂盒(克隆技术公司产品编号639648)将PCR片段克隆进用ClaI和MluI酶消化的质粒中。 [1214] 用具有以下氨基酸序列(MKKPLGKIVASTALLISVAFSSSIASA(SEQ ID NO:29))的分泌信号代替天然分泌信号来表达GH9蛋白,从而形成重组基因和蛋白质序列。 [1215] 将In-Fusion反应转化进大肠杆菌中并且选择并培养氨比西林抗性转化体,用于随后的DNA质粒制备。通过DNA测序分析7个克隆,以验证该构建体的正确的DNA序列。 [1216] 选择一个具有正确重组基因序列的克隆并且通过同源重组将对应的质粒整合进枯草芽孢杆菌宿主细胞基因组中并且在三联启动子系统的控制下表达该基因构建体, 如描述于WO 99/43835中。将编码氯霉素乙酰转移酶的基因用作标记物(如描述于 Diderichsen(狄代丽柯森)等人,1993,Plasmid(质粒)30:312-315中)。 [1217] 通过PCR分析氯霉素抗性转化体,以验证扩增片段的正确大小。 [1218] 实例12:枯草芽孢杆菌中不具有N-末端His标记的黄原胶裂解酶的克隆及表达 [1219] 用基因特异性引物(D160F:5’GCTTTTAGTTCATCGATCGCATCGGCTGCGGAGGCGTCCGACATGTTCGACG 3’(SEQ ID NO:41))和D161R:5’TTATTGATTAACGCGTTTACGGCTGCTGCGCGCCGGTCAGG 3’(SEQ ID NO:42))从类芽孢杆菌属菌株NN018054的染色体DNA扩增截短的黄原胶裂 解酶。这些引物在分泌信号后包含至克隆载体的突出端C6221(如描述于WO 2012/025577 中)。 [1220] 根据来自制造商的说明(PT5162-1),使用In-Fusion HD克隆试剂盒(克隆技术公司639648)将PCR片段克隆进用ClaI和MluI酶消化的质粒中。 [1221] 用具有以下氨基酸序列(MKKPLGKIVASTALLISVAFSSSIASA(SEQ ID NO.29))的分泌信号代替天然分泌信号来表达黄原胶裂解酶,从而形成重组基因和蛋白质序列。 [1222] 将In-Fusion反应转化进大肠杆菌中并且选择并培养氨比西林抗性转化体,用于随后的DNA质粒制备。通过DNA测序分析7个克隆,以验证该构建体的正确的DNA序列。 [1223] 选择一个具有正确重组基因序列的克隆并且通过同源重组将对应的质粒整合进枯草芽孢杆菌宿主细胞基因组中并且在三联启动子系统的控制下表达该基因构建体, 如描述于WO 99/43835中。将编码氯霉素乙酰转移酶的基因用作标记物(如描述于 Diderichsen(狄代丽柯森)等人,1993,Plasmid(质粒)30:312-315中)。 [1224] 通过PCR分析氯霉素抗性转化体,以验证扩增片段的正确大小。 [1225] 实例13包含对具有黄原胶酶活性的C-末端截短的黄原胶裂解酶多肽进行编码的序列的米曲霉表达载体的构建 [1226] 设计示于以下的两种合成寡核苷酸引物来从制备自类芽孢杆菌属NN018054的基TM 因组DNA进行PCR扩增具有SEQ ID NO:4的黄原胶裂解酶基因。使用IN-FUSION 克隆试 剂盒(BD生物科学公司(BD Biosciences),帕洛阿尔托(Palo Alto),加利福尼亚州,美国)将片段直接克隆进表达载体pDau109中(WO 2005/042735)。 [1227] F-C3AQX [1228] 5’-GGTGAAGCGTACGCGTGCGGAGGCGTCCGACATGTT-3’(SEQ ID NO:43) [1229] R-C3AQX [1230] 5’-AGATCTCGAGAAGCTTTTACGGCTGCTGCGCGCCGG-3’(SEQ ID NO:44) [1231] 粗体字母代表基因序列。加下划线的序列与pDau109的插入位点是同源的。 [1232] 使用MJ Research PTC-200DNA引擎进行PCR反应。使用 高保真PCR试剂盒( High-Fidelity PCR Kit)(FINNZYMES Oy公司,艾斯堡,芬兰)用于 PCR扩增。PCR反应由4μl的5X GC缓冲液(Finnzymes Oy公司,艾斯堡,芬兰)、0.4μl 的dNTPs(10mM)、0.2μl的 DNA聚合酶(0.2单位/μl)(Finnzymes Oy公司,艾 斯堡,芬兰)、1μl的引物F-C3AQX(10μM)、1μl的引物R-C3AQX(5μM)、0.5μl的基因组 DNA(100ng/μl)、以及12.9μl的去离子水组成,总体积为20μl。PCR条件为:1个循环, 在98℃持续1分钟;30个循环,每个在98℃持续10秒,以及在72℃持续1.5分钟;以及1 个循环,在72℃持续5分钟。然后将样品保持在10℃,直至从PCR仪中移出。 [1233] 使用40mM Tris碱、20mM乙酸钠、1mM EDTA二钠(TAE)缓冲液,通过1.0%琼脂糖凝胶电泳分离反应产物,其中从凝胶切下2283bp产物带,并且根据厂商说明书,使用 illustra PCR DNA和凝胶带纯化试剂盒(GE医疗集团生命科学部(GE Healthcare TM Life Sciences),布隆德比,丹麦)进行纯化。然后使用IN-FUSION 克隆试剂盒将该片段 克隆进Mlu I和Hind III消化的pDau109中(WO 2005/042735),从而生成质粒pC3AQX。将 C3AQX基因克隆进Mlu I-Hind III消化的pDau109中导致类芽孢杆菌属-18054C3AQX基因 在NA2-tpi双启动子的控制下进行转录。类芽孢杆菌属-18054黄原胶裂解酶C3AQX基因 的核苷酸序列和推导的氨基酸序列分别示于SEQ ID NO:45和SEQ ID NO:46中。 TM [1234] 根据产生C3AQX黄原胶裂解酶构建体的IN-FUSION 克隆试剂盒的说明进行克隆方案。根据厂商的方案将处理的质粒和插入片段转化进One TOP10F′化学感受 态大肠杆菌细胞(英杰公司(Invitrogen),卡尔斯巴德,加利福尼亚州,美国)中,并且将 其铺板在补充有0.1mg的氨比西林/ml的LB板上。在37℃下孵育过夜后,看到菌落在LB 氨比西林板上在选择下生长。将用C3AQX黄原胶裂解酶构建体转化的两个菌落在补充有 0.1mg的氨比西林/ml的LB培养基中进行培养并且根据厂商的方案,用 Spin Miniprep试剂盒(凯杰公司,巴伦西亚,加利福尼亚州,美国)分离质粒。 [1235] 用载体引物和C3AQX基因特异性引物对分离的质粒进行测序以便确定不含PCR错误的代表性质粒表达克隆。 [1236] 实例14:类芽孢杆菌属-18054黄原胶裂解酶在曲霉属中的表达 [1237] 将表达质粒pC3AQX转化进米曲霉MT3568中。米曲霉MT3568是JaL355的AMDS(乙酰胺酶)破坏的衍生物(WO 2002/40694),其中在敲除米曲霉乙酰胺酶(AMDS)基因的过程 中修复pyrG营养缺陷型。根据欧洲专利EP0238023,第14-15页中的方法制备MT3568原生 质体,将其通过引用结合在此。 [1238] 在使转化体在PDA板上形成孢子之前,在COVE蔗糖选择板上通过单个的分生孢子纯化转化体。在30℃下,在YP+2%葡萄糖培养基中,分析来自0.75ml的96深孔固定培养的 培养上清液的由转化体对类芽孢杆菌属-18054黄原胶裂解酶多肽的产生。在E-Page 8% SDS-PAGE 48孔凝胶((英杰公司,卡尔斯巴德,加州,美国)上通过考马斯亮蓝染色确认表 达。选择一个转化体用于进一步的工作并且将其指定为米曲霉XL-4。 [1239] 用于较大规模的生产,将米曲霉XL-4孢子分散到PDA板上并且在37℃下孵育五天。用5ml的0.01% 20将融合的孢子板洗涤两次,以使收集的孢子的数目最大 化。然后使用孢子悬浮液接种包含100ml的Dap-4C培养基的七个500ml烧瓶。将培养物在 30℃下进行孵育,同时以100rpm进行恒定振荡。在接种后第五天,通过经由瓶盖MF75Supor MachV 0.2μm PES过滤器(bottle top MF75 MachV 0.2μm PES filter)(赛默 飞世尔科技(Thermo Fisher Scientific),罗斯基勒,丹麦)过滤收集培养液。来自这一转化体的新鲜的培养液产生大约90kDa的黄原胶裂解酶蛋白带。 [1240] 菌株 [1241] 米曲霉MT3568菌株用于对具有内切葡聚糖酶活性的多肽进行编码的Acremoniumalcalophilum基因的表达。米曲霉MT3568是米曲霉JaL355的amdS(乙酰胺酶)破坏的基 因衍生物(WO 2002/40694),其中通过破坏米曲霉乙酰胺酶(amdS)基因修复pyrG营养缺陷 型。 [1242] 实例15:表达于米曲霉中的非标记黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:4)的活性筛选 [1243] 通过 20离心柱(赛多利斯Stedim生物技术公司(Sartorius Stedimbiotech),产品编号VS2092)将来自如描述于实例14中的所进行的发酵的过滤的上清液浓 缩十倍。通过粘度减小和还原末端来测量浓缩的样品中的黄原胶裂解酶活性,如实例6中 针对纯化的His-标记的酶所描述。 [1244] 还原末端 [1245] 用于确定产生的还原末端的量的方法是如描述于Murphy(墨菲)等人,2012,J.Biol.Chem.(生物化学杂志)287:1252-1260中并且改编自Zhang(张)等人,2005, Biomacromolecules(生物大分子)6:1510-1515和Dubois(杜布瓦)等人,1956,Anal. Chem.(分析化学)28:350-356的2,2’二喹啉酸测定(BCA)。还原末端的定量基于葡萄糖 标准曲线。包括适当的底物和酶控制并且针对每个分析进行修正。使用适当的稀释度来保 证样品在葡萄糖校准曲线范围内。结果示于下表17中。 [1246] 粘度减小 [1247] 使用描述于WO 2011/107472中的诺维信研发的粘度压力测定进行粘度测量。400μL是样品大小。呈现的结果是两个测量值的平均值并且示于下表16中。 [1248] 水解 [1249] 水解条件如下:30℃,TY培养基中的0.25%黄原胶(XG)。热平衡后添加酶。 [1250] 酶剂量 [1251] 使用实例5的纯化的酶制剂按以下终浓度用于分析: [1252] GH9(SEQ ID NO:6):31.25mg/L [1253] 黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:4):31.25mg/L [1254] 基于SDS-page分析,估计浓缩的上清液中的黄原胶裂解酶的浓度大致上类似于纯化的酶。 [1255] 表16:粘度测量值 [1256] [1257] 表17:还原末端结果 [1258] [1259] [1260] 黄原胶裂解酶在米曲霉中的产生显示单独的分泌的黄原胶裂解酶对黄原胶是有活性的,而同一系统的稳定的粘度测量值显示这是一种外切酶作用,对大块聚合物骨架几 乎没有作用。 [1261] 实例16:新的GH9黄原胶酶和XL基因的鉴定 [1262] 遵循如描述于实例1和3中的相同的程序,从土壤样品中分离两种新的类芽孢杆菌(参见表18)。 [1263] 表18:细菌菌株的分离 [1264]菌株 鉴别编号 来源 国家 类芽孢杆菌属 NN062253 森林土壤 美国 类芽孢杆菌属 NN062250 森林土壤 美国 [1265] 如描述于实例1和3中进行两种新的菌株的染色体DNA提取和基因组测序。鉴定来自新的细菌菌株的基因连同新的黄原胶裂解酶的分离和来自类芽孢杆菌属NN062047的 2个截短的GH9基因以及对应的蛋白质序列并呈现于表19中。 [1266] 表19:天然基因及对应的多肽ID序列 [1267] [1268] [1269] 实例17:枯草芽孢杆菌中具有N-末端His标记的GH9和黄原胶裂解酶的克隆及表达 [1270] 如描述于实例2和4中,用特异性引物(参见表20)从这些细菌菌株的染色体DNA扩增来自实例16的基因片段(与对应的翻译的蛋白质),并且在枯草芽孢杆菌中进行克隆 与表达,在分泌信号后具有N-末端聚组氨酸标记(HHHHHHPR-)。 [1271] 表20:用于PCR扩增的引物 [1272] [1273] [1274] 实例18:黄原胶裂解酶和GH9的AMSA洗涤性能 [1275] 如描述于用于洗衣方法中的自动机械应力测定(AMSA)进行这些实验,使用单循环洗涤程序以及在下表21中指定的实验条件。在表22和23中给出了使用6种不同的GH9 内切葡聚糖酶和4种不同的黄原胶裂解酶连同对照的结果,在对照中GH9内切葡聚糖酶和 /或黄原胶裂解酶是不存在的。将结果显示为ΔInt酶值。 [1276] 表21:用于洗涤循环的实验条件 [1277] [1278] [1279] 通过向测试系统中添加CaCl2、MgCl2及NaHCO3来调节水硬度。洗涤后,将纺织品在自来水中沖洗并风干。通过向棉织物中添加来与碳黑混合的自野油菜黄单胞菌(食品级 Keltrol T,凯儿蔻公司(Kelco))的黄原胶来制备这些小块布样。 [1280] 表22:在40℃下,使用标准液体洗涤剂B的编辑的AMSA洗涤数据 [1281] [1282] 1:SEQ ID NO:2的定量是不确定的,因为在SDS-凝胶中存在第二个接近的跑胶带。 [1283] 2:未确定 [1284] 表23:在20℃下,使用标准液体洗涤剂B的编辑的AMSA洗涤数据 [1285]1 [1286] :SEQ ID NO:2的定量是不确定的,因为在SDS-凝胶中存在第二个接近的跑胶带。2 [1287] :未确定 [1288] 这些结果显示GH9内切葡聚糖酶和黄原胶裂解酶的不同组合在20℃和40℃下都对黄原胶与碳黑污物给出协同洗涤效果,因此指示这一协同效果可以推延至所有黄原胶裂 解酶和GH9内切葡聚糖酶。 [1289] 实例19:黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8)和/或GH9(SEQ ID NO:6、16、50、54或58)的MiniLOM洗涤性能 [1290] 使用miniLOM测定来测试本发明的酶,以便确定‘酶洗涤作用’。将试管填充上测试溶液、有污物的织物和钢球并且在给定的温度下在加热柜中旋转。当在缓冲液或标准液体洗涤剂A中洗涤时,研究清洁益处。用于这些实验的实验条件指定于表24中。 [1291] 表24:用于MiniLOM的实验条件 [1292] [1293] 通过向测试系统中添加CaCl2、MgCl2及NaHCO3来调节水硬度。洗涤后,将纺织品在自来水中沖洗并风干。通过向棉织物中添加来与碳黑混合的自野油菜黄单胞菌(食品级 Keltrol T,凯儿蔻公司(Kelco))的黄原胶来制备这些小块布样。 [1294] 通过使用ColorEye在460nm处测量纺织品小块布样的反射来评估一种或多种酶的性能。 [1295] 表25:使用5种不同的GH9和/或黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8)的MimiLOM洗涤的结果 [1296] [1297] 这些结果显示向洗涤中添加GH9内切葡聚糖酶(所有五种变体)在测试条件下给出显著的清洁益处。此外,添加GH9内切葡聚糖酶(所有五种变体)连同XL导致另外的洗 涤效果,即使黄原胶裂解酶自身不具有显而易见的效果。 [1298] 实例20:GH9黄原胶酶和黄原胶裂解酶基因的鉴定 [1299] 遵循如描述于实例1和3中的相同的程序,从土壤样品中分离六种新的类芽孢杆菌属物种(参见表26)。 [1300] 表26:细菌菌株的鉴定 [1301]菌株 鉴别编号 来源 国家 类芽孢杆菌属 NN062046 森林土壤 中国 类芽孢杆菌属 NN062408 土壤 丹麦 类芽孢杆菌属 NN062332 土壤 美国 类芽孢杆菌属 NN062147 沙滩 丹麦 类芽孢杆菌属 NN062193 花园土壤 丹麦 微杆菌属 NN062175 土壤 丹麦 [1302] 如描述于实例1和3中进行六种新的菌株的染色体DNA提取和基因组测序。鉴定来自新的细菌菌株的基因连同6种新的黄原胶裂解酶的分离和8个GH9基因以及对应的蛋 白质序列并呈现于表27中。 [1303] 表27:天然基因及对应的多肽ID序列 [1304] [1305] 实例21:枯草芽孢杆菌中具有N-末端His标记的GH9和黄原胶裂解酶候选者的克隆及表达 [1306] 如描述于实例2和4中,用特异性引物(参见表28)从这些细菌菌株的染色体DNA扩增来自实例20的基因片段(与对应的翻译的蛋白质),并且在枯草芽孢杆菌中进行克隆 与表达,在分泌信号后具有N-末端聚组氨酸标记(HHHHHHPR-)。 [1307] 表28:用于PCR扩增的引物 [1308] [1309] [1310] [1311] 实例22:来自砖红色微杆菌的GH9基因的克隆与表达 [1312] 在公共数据库中发现编码GH9的基因(DNA参考分别是EMBL:AP012052;SWISSPROT:E8N9Z4;SEQ ID NO:101及SEQ ID NO102)。如描述于实例2和4中,使用特异 性寡核苷酸(oligo)扩增合成基因(表29),并且在枯草芽孢杆菌中进行克隆与表达,在分 泌信号后具有N-末端聚组氨酸标记(HHHHHHPR-)。融合产物的核苷酸序列对应于SEQ ID NO:103。翻译的蛋白质序列对应于SEQ ID NO:104。 [1313] 表29:用于PCR扩增的引物 [1314] [1315] 实例23:来自类芽孢杆菌属-18054和类芽孢杆菌属sp-62408的2种GH9酶在枯草芽孢杆菌中的克隆与表达 [1316] 将线性整合载体-系统用于来自类芽孢杆菌属-18054(SEQ ID NO:85)的GH9和来自类芽孢杆菌属-62408(SEQ ID NO:89)的GH9的表达克隆。线性整合构建体是一种PCR融 合产物,该融合产物由两个枯草芽孢杆菌同源染色体区域之间的基因连同一个强启动子与 氯霉素抗性标记的融合制备。通过SOE PCR进行融合(Horton(霍顿),R.M.,Hunt(亨特), H.D.,Ho(胡),S.N.,Pullen(皮伦),J.K.以及Pease(皮斯),L.R.(1989),“Engineering hybrid genes without the use of restriction enzymes,gene splicing by overlap extension(通过未使用限制酶。通过重叠延伸的基因剪接的工程化杂种基因)”,Gene(基 因)77:61-68)。专利申请WO 2003095658中也描述了SOE PCR方法。在三联启动子系统 (如WO 99/43835中所述)的控制下表达该基因,该启动子系统由包含稳定化序列的地衣芽 孢杆菌α-淀粉酶基因启动子(amyL)、解淀粉芽孢杆菌α-淀粉酶基因启动子(amyQ)和苏 云金芽孢杆菌cryIIIA启动子组成。编码氯霉素乙酰基转移酶的基因被用作标记物(描述 于例如Diderichsen(戴德瑞奇森),B.;Poulsen(波尔森),G.B.;Joergensen(约根森), S.T.,(1993),A useful cloning vector for Bacillus subtilis(枯草芽孢杆菌的一种 有用的克隆载体)30:312)。在芽孢杆菌染色体上通过同源重组将最终的基因构建体整合到 果胶酸裂解酶位点中。将编码来自类芽孢杆菌属-18054的GH9的基因表达为截短的版本 (SEQ ID NO 87)。将来自类芽孢杆菌属-62408的GH9表达为全长基因(SEQ ID NO 91)。 用包含至两个侧翼载体片段的突出端的基因特异性引物从对应的菌株的染色体DNA扩增 基因片段(引物序列列于表30中)。用克劳氏芽孢杆菌分泌信号(具有以下氨基酸序列: MKKPLGKIVASTALLISVAFSSSIASA)代替天然分泌信号来表达两种基因并且两种基因表示为 具有连接至蛋白的C-末端的聚组氨酸-标记(HHHHHH)。图1示出了具有基因插入的线性 载体的质粒图。 [1317] 表30:用于PCR扩增的引物 [1318] [1319] [1320] 通过重叠延伸(SOE)PCR反应使这2个载体片段和基因片段经受剪接,以将这3个片段装配进一个线性载体构建体中。针对两种基因中的每者,单独进行。将两种PCR产物 的每者的等分部分转化进枯草芽孢杆菌中。在每ml补充有6μg氯霉素的LB板上选择转 化体。对于每个构建体而言,使包含整合表达构建体的重组枯草芽孢杆菌克隆在液体培养 基中生长。收获包含酶的上清液并如实例5中所述的将这些酶进行纯化。 [1321] 实例24:通过粘度减小测量的GH9酶和黄原胶裂解酶的黄原胶降解活性 [1322] 如描述于实例10中,使用黄原胶裂解酶和GH9内切葡聚糖酶的不同组合进行粘度测量。用于分析的纯化的酶制剂的浓度是31.25mg/L。呈现的结果是三个测量值的平均值。 [1323] 表31:不同GH9(SEQ ID NO:6、84、88、92、136、140)和黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8、108、112、116)针对黄原胶的粘度测量 [1324] [1325] [1326] [1327] 表32:GH9(SEQ ID NO:88)和黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:120)针对黄原胶的粘度测量 [1328] [1329] 表33:不同GH9(SEQ ID NO:96、100)和一种黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:68)针对黄原胶的粘度测量 [1330] [1331] 表34:GH9(SEQ ID NO:88)和两种黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:124、128)针对黄原胶的粘度测量 [1332] [1333] [1334] 表35:不同GH9(SEQ ID NO:6、58、104、132)和黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8、66、124、128)针对黄原胶的粘度测量 [1335] [1336] [1337] 表36:不同GH9(SEQ ID NO:136、140)和一种黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:68)针对黄原胶的粘度测量 [1338] [1339] 表37:不同GH9(SEQ ID NO:96、100)和不同黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8、66)针对黄原胶的粘度测量 [1340] [1341] 上面呈现的结果显示所有的测试的不同GH9与黄原胶裂解酶的组合可以降解存在于培养基中的黄原胶,从而导致粘度减小。 [1342] 实例25:GH9内切葡聚糖酶针对预处理的黄原胶的比色测定 [1343] 可替代地,可以使用由Lever(莱韦尔)(1972),Anal.Biochem.(分析化学)47:273-279,1972研发的比色测定,通过用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶上的还原末 端确定GH9内切葡聚糖酶活性。产生的任何还原末端都将与PAHBAH反应,从而产生颜色的 变化,该颜色变化在用于该测定的条件下与酶活性成比例。下表38示出了与单独的底物相 比,通过对应的吸光度测量的GH9的活性。 [1344] 材料与化学品 [1345] 0.1%底物:24ml Milli-Q水中的用黄原胶裂解酶预处理的6ml(5mg/ml)黄原胶。 [1346] 活性缓冲液:100mM乙酸钠,100mM MES,1mM CaCl2,在0.01%曲通X100中,pH 7。 [1347] Ka-Na-酒石酸盐/NaOH缓冲液:将Ka-Na-酒石酸盐(50g)和NaOH(20g)溶解于水中,至总体积为1升。存储在4℃下。 [1348] 终止溶液:将PAHBAH(西格玛H-9882)溶解于Ka-Na-酒石酸盐/NaOH溶液中,至浓度为15mg/ml(例如,将500mg PAHBAH溶解于33ml Ka-Na-酒石酸盐/NaOH溶液中) [1349] 样品制备: [1350] 使用BioMek液体处理机器人,将酶样品在柯仕达条(costarstrip)中的活性缓冲液中稀释至0.1mg/ml。将50μl的底物和50μl的每种稀释的样品转移至96孔PCR-MTP 板,向每个样品中添加50μl活性缓冲液并将溶液混合。将密封的PCR-板在37℃下、在PCR 机中孵育15min,然后立即冷却至10℃。向每个样品中添加75μl的终止溶液,将混合物振 荡,并且将75μl的每个样品丢弃。将这些样品在95℃下孵育10min,然后在10℃下孵育 1min。将150μl的每种样品转移至一个新的96孔PCR-MTP并且测量405nm处的吸光度。 [1351] 表38:不同GH9针对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶的比色还原末端测定 [1352] [1353] 数据显示用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶与GH9内切葡聚糖酶的反应导致更强的比色应答。由于比色应答与产生的还原末端的量成比例,则可以清楚地看到,GH9内切葡聚糖酶对用黄原胶裂解酶预处理的黄原胶具有活性。 [1354] 实例26:黄原胶裂解酶针对黄原胶的比色测定 [1355] 如描述于实例25中通过还原末端测量黄原胶裂解酶活性,除了将0.1%黄原胶用作底物以外。结果呈现于下表39中。 [1356] 表39:不同黄原胶裂解酶针对黄原胶的比色还原末端测定 [1357] [1358] [1359] 数据显示黄原胶与黄原胶裂解酶的反应导致更强的比色应答并且因此黄原胶裂解酶对黄原胶具有活性。 [1360] 实例27:黄原胶裂解酶和GH9内切葡聚糖酶针对黄原胶的比色测定 [1361] 如描述于实例25中通过还原末端测量单独的黄原胶裂解酶活性以及与GH9内切葡聚糖酶一起的活性,除了将0.1%黄原胶用作底物以外。结果呈现于下表40和41中。 [1362] 表40:单独的不同黄原胶裂解酶或与GH9内切葡聚糖酶组合而针对黄原胶的比色还原末端测定 [1363] [1364] 表40:单独的不同黄原胶裂解酶或与GH9内切葡聚糖酶组合而针对黄原胶的比色还原末端测定的相对应答 [1365] [1366] [1367] 相对于设置至为100的SEQ ID NO:8的黄原胶裂解酶的应答而设置应答。 [1368] 数据显示黄原胶与黄原胶裂解酶的反应导致显著更强的比色应答并且因此单独的黄原胶裂解酶对黄原胶具有显著活性。此外,添加SEQ ID NO:6的GH9内切葡聚糖酶导 致超过使用单独的黄原胶裂解酶的至少3-4倍的比色应答的增加,显示一起使用两种酶导 致黄原胶的协同降解。 [1369] 实例28:黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:)和/或GH9(SEQ ID NO:)的MiniLOM洗涤性能 [1370] 使用miniLOM测定来测试本发明的酶,以便确定“酶洗涤作用”。将试管填充上测试溶液、有污物的织物和钢球并且在给定的温度下在加热柜中旋转。当在标准液体洗涤剂A中洗涤时,研究清洁益处。用于这些实验的实验条件指定于表41中。 [1371] 表41:用于MiniLOM的实验条件 [1372] [1373] [1374] 通过向测试系统中添加CaCl2、MgCl2及NaHCO3来调节水硬度。洗涤后,将纺织品在自来水中沖洗并风干。通过向棉织物中添加来与碳黑混合的自野油菜黄单胞菌(食品级 Keltrol T,凯儿蔻公司(Kelco))的黄原胶来制备这些小块布样。将DN31C小块布样制备 为具有一半量的黄原胶;否则,它与DN31D小块布样相同。然而,这的确具有减小酶效果的测量窗的作用,因为可以被除去的黄原胶的量是减少的。实际上,当与单独的洗涤剂效果相比时,这导致更小的强度增加,但是不应该被限制为更少的酶效果。 [1375] 通过使用ColorEye在460nm处测量纺织品小块布样的反射来评估一种或多种酶的性能。将使用小块布样C的结果呈现于表42和43中,同时将使用小块布样D的结果呈 现于表44和45中。 [1376] 洗涤之前测量的反射: [1377] 小块布样DN31C:28.87±0.37 [1378] 小块布样DN31D:29.34±0.66 [1379] 仅使用洗涤剂测量的反射: [1380] 小块布样DN31C:35.37±1.00 [1381] 小块布样DN31D:39.79±1.28 [1382] 表42:使用6种不同的GH9内切葡聚糖酶和6种不同的黄原胶裂解酶针对小块布样DN31C的MimiLOM洗涤的反射(460nm)值 [1383] [1384] 表43:针对小块布样DN31C的MimiLOM结果的标准差 [1385] [1386] 结果显示,在所有情况下,SEQ ID NO:6、84、88及92的GH9内切葡聚糖酶与SEQID NO:8、66、108、112、116及120的黄原胶裂解酶一起在小块布样DN31C上根据ANOVA杜 克(tukey)测试给出统计学上显著的洗涤性能。此外,SEQ ID NO:100的GH9内切葡聚糖 酶与SEQ ID NO:66、108、112及120的黄原胶裂解酶显示出统计学上显著的洗涤性能,并且与SEQ ID NO:8及116的黄原胶裂解酶至少显示出数字上改进的洗涤性能。 [1387] 表44:使用6种不同的GH9内切葡聚糖酶和6种不同的黄原胶裂解酶针对小块布样DN31D的MimiLOM洗涤的反射(460nm)值 [1388] [1389] 表45:针对小块布样DN31D的MimiLOM结果的标准差 [1390] [1391] 结果显示,在所有情况下,SEQ ID NO:6、84及92的GH9内切葡聚糖酶与SEQ IDNO:8、66、108、112、116及120的黄原胶裂解酶一起在小块布样DN31D上根据ANOVA杜克测 试显示出统计学上显著的洗涤性能。此外,SEQ ID NO:88的GH9内切葡聚糖酶与SEQ ID NO:66、108、112、116及120的黄原胶裂解酶显示出统计学上显著的洗涤性能,并且与SEQ ID NO:8的黄原胶裂解酶显示出数字上改进的洗涤性能。SEQ ID NO:100的GH9内切葡聚 糖酶与SEQ ID NO:66、108及112的黄原胶裂解酶显示出统计学上显著的洗涤性能,并且与 其他3种黄原胶裂解酶显示出数字上改进的洗涤性能。SEQ ID NO:96的GH9内切葡聚糖酶 与所有测试的黄原胶裂解酶一起显示出数字上改进的洗涤性能。 [1392] 实例29:通过粘度减小测量的GH9内切葡聚糖酶和黄原胶裂解酶的黄原胶降解活性 [1393] 如描述于实例10中针对两个不同批次的SEQ ID NO:6的GH9内切葡聚糖酶和一个单批次的SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶连同两种不同的黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8 和66)进行粘度测量。SEQ ID NO:6与SEQ ID NO:2相同,除了它包含附接至成熟多肽的 N-末端的His-标记(即–RPHHHHHH)之外。用于分析的纯化的酶制剂的浓度是31.25mg/ L。呈现的结果是三个测量值的平均值并且示于下表46中。 [1394] 表46:具有和不具有His-标记的同一GH9(SEQ ID NO:2、6)和两种不同黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8、66)针对黄原胶的粘度测量 [1395] [1396] *:批次1;**-批次2 [1397] 表46中的结果显示在两个批次(具有His-标记的SEQ ID NO:6的GH9内切葡聚糖酶与不具有His-标记的SEQ ID NO:2的GH9内切葡聚糖酶)之间,与任一黄原胶裂解酶 一起,在粘度下降方面不存在显著差异。因此可以推断,His-标记不改变SEQ ID NO:2的 GH9内切葡聚糖酶的黄原胶降解特性。 [1398] 实例30:GH9内切葡聚糖酶和黄原胶裂解酶针对黄原胶的比色测定 [1399] 如描述于实例25中通过还原末端测量单独的GH9内切葡聚糖酶以及与不同黄原胶裂解酶组合而针对黄原胶的活性,除了将0.1%黄原胶用作底物以外。结果呈现于下表 47中。 [1400] 表47:不同GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:2、6、16、58、84、92、96及100)和黄原胶裂解酶(SEQ ID NO:8、66、68、120)针对黄原胶的比色还原末端测定 [1401] [1402] [1403] *:批次1;**-批次2 [1404] 结果展示所测试的所有GH9内切葡聚糖酶连同所有黄原胶裂解酶在比色应答中都给出显著增加,显示这些GH9内切葡聚糖酶和黄原胶裂解酶的组合对降解黄原胶具有显 著活性。结果进一步显示,在测试的两个批次的SEQ ID NO:6的GH9内切葡聚糖酶之间不 存在显著差异,存在于SEQ ID NO:6的GH9内切葡聚糖酶上的His-标记在性能上不导致超 过对应的不具有His-标记的GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:2)的任何显著变化。 [1405] 实例31:黄原胶裂解酶和GH9内切葡聚糖酶的AMSA洗涤性能 [1406] 如描述于用于洗衣方法中的自动机械应力测定(AMSA)进行这些实验,使用单循环洗涤程序以及在下表48中指定的实验条件。在表49和50中给出了使用3种不同的GH9 内切葡聚糖酶和6种不同的黄原胶裂解酶连同对照的结果,在对照中GH9内切葡聚糖酶和 /或黄原胶裂解酶是不存在的。将结果显示为ΔInt酶值。 [1407] 表48:用于洗涤循环的实验条件 [1408] [1409] 通过向测试系统中添加CaCl2、MgCl2及NaHCO3来调节水硬度。洗涤后,将纺织品在自来水中沖洗并风干。通过向棉织物中添加来与碳黑混合的自野油菜黄单胞菌(食品级 Keltrol T,凯儿蔻公司(Kelco))的黄原胶来制备这些小块布样。将DN31C小块布样制备 为具有一半量的黄原胶;否则,它与DN31D小块布样相同。然而,这的确具有减小酶效果的测量窗的作用,因为可以被除去的黄原胶的量是减少的。实际上,当与单独的洗涤剂效果相比时,这导致更小的强度增加,但是不应该被限制为更少的酶效果。 [1410] 表49:在20℃下,针对小块布样DN31C的使用标准液体洗涤剂B的AMSA洗涤数据 [1411] [1412] 表50:在40℃下,针对小块布样DN31C的使用标准液体洗涤剂B的AMSA洗涤数据 [1413] [1414] [1415] 数据显示SEQ ID NO:6的GH9内切葡聚糖酶在20℃和40℃下与所有测试的黄原胶裂解酶(即SEQ ID NO:8、66、108、116、124及128)都给出显著洗涤效果。此外,SEQ ID NO:88的GH9内切葡聚糖酶与两种测试的黄原胶裂解酶都给出显著的洗涤效果,并且与SEQ ID NO:66的黄原胶裂解酶一起给出显著的协同效果。SEQ ID NO:100的GH9内切葡聚糖酶 在20℃和40℃下与SEQ ID NO:66的黄原胶裂解酶显示出显著洗涤效果。 [1416] 实例32:GH9内切葡聚糖酶的MiniLOM洗涤性能 [1417] 使用miniLOM测定来测试GH9内切葡聚糖酶,以便确定GH9内切葡聚糖酶的酶洗涤益处。通过以下研究酶洗涤益处:使用描述于表51中的条件,比较在缓冲液(2-(N-吗啉 代)乙磺酸,MES)或标准洗涤剂A中用以及不用GH9内切葡聚糖酶的针对黄原胶与碳黑污 物的洗涤效果。针对污物DN31C的结果给出于表52和53中并且针对污物DN31D的结果给 出于表54和55中。 [1418] 表51:MiniLOM洗涤条件 [1419] [1420] [1421] 通过向测试系统中添加CaCl2、MgCl2及NaHCO3来调节水硬度。洗涤后,将纺织品在自来水中沖洗并风干。通过每平方米的棉织物应用碳黑(0.05-0.06g)和黄原胶 (1.2-1.4g,对于DN31C;2.4-2.6g,对于DN31D;野油菜黄单胞菌(食品级Keltrol T,凯儿蔻公司(Kelco)))的混合物来准备小块布样。如描述于污物评估中,通过使用ColorEye在 460nm处测量纺织品小块布样的反射来评估一种或多种酶的酶洗涤益处。 [1422] 表52:GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)针对黄原胶/碳黑污物(DN31C)的结果 [1423] [1424] [1425] 表53:GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)针对黄原胶/碳黑污物(DN31C)的结果 [1426] [1427] 1BSA-添加牛血清白蛋白替代GH9内切葡聚糖酶 [1428] 表54:GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)针对黄原胶/碳黑污物(DN31D)的结果 [1429] [1430] 表55:GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)针对黄原胶/碳黑污物(DN31D)的结果 [1431] [1432]1 [1433] BSA-添加牛血清白蛋白替代GH9内切葡聚糖酶 [1434] 结果显示当向洗涤溶液中添加GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)时,使用缓冲液(50mM MES)或用标准洗涤剂A,存在显著的酶洗涤、去污和清洁益处。表52和54显示当 使用0.2与0.8mg之间的酶蛋白/L洗涤液时,观察到相同的酶洗涤益处,指示当给予高于 0.2mg EP/L时已经可以达到平台水平。 [1435] 使用较低量的内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)重复该实验(表53和55)显示甚至在0.05mg酶蛋白/L洗涤液处,显著的酶洗涤益处也是显而易见的。添加0.5ppm牛血清白 蛋白替代GH9内切葡聚糖酶显示酶洗涤益处不是由于非特异性蛋白作用。 [1436] 可以在污物DN31D上看到最大效果,其中当使用缓冲液(50mM MES)或用标准洗涤剂A时,发现高达7个δREM单位的益处。 [1437] 实例33:如通过粘度减小所确定,GH9内切葡聚糖酶对(预处理的)黄原胶的作用 [1438] 0.5%预处理黄原胶通过用黄原胶裂解酶预处理黄原胶而制备,如描述于Nankai(南凯),H.,Hashimoto(桥本),W.,Miki(三木),H.,Kawai(卡瓦一),S.,Murata(村太),K.(1999)“Microbial system for polysaccharide depolymerization:enzymatic route for xanthan depolymerization by Bacillus sp.Strain GL1(微生物系统多糖解 聚:用于通过芽孢杆菌属菌株GL1解聚的黄原胶的酶途径)”,Applied and Environmental Microbiology(应用与环境微生物),65,第2520-2526页。中。使用之前,所有的酶使用 NAP 5柱(GE医疗集团)进行缓冲液交换为MES缓冲液。 [1439] 使用以下条件水解样品:50mM MES缓冲液中的0.25%黄原胶或0.5%预处理的黄原胶+0.01%曲通x-100,在pH 7.0和40℃下。 [1440] 热平衡后并且添加酶之前,使用ViPr测定测量初始粘度。热平衡后,如果适当的话,添加GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)(20mg/L)并且然后在不同时间点测量粘度。将 数据呈现于下表56中。 [1441] 表56:如通过粘度减小所确定,GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)对黄原胶和预处理的黄原胶的结果 [1442] [1443] 缓冲液对照代表表示的是完全水解的粘度。此时,存在极少至不存在溶剂-聚合物相互作用,这种相互作用将导致溶剂粘度增加。黄原胶和修饰的黄原胶对照贯穿孵育保 持恒定,展示测定的健壮性。在3h孵育的过程中看到GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)减 少黄原胶底物,但是粘度未达到对照的粘度。黄原胶裂解酶预处理的黄原胶几乎立即在这 些条件下由GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)减小至缓冲液粘度。 [1444] 实例34:如通过还原末端所确定,GH9内切葡聚糖酶对(预处理的)黄原胶的作用 [1445] 如描述于实例33中,0.25%预处理的黄原胶通过用黄原胶裂解酶预处理黄原胶而制备。使用之前,所有的酶使用NAP 5柱(GE医疗集团)进行缓冲液交换为MES缓冲 液。使用以下条件水解样品:50mM MES缓冲液中的0.25%黄原胶或0.25%预处理的黄原 胶+0.01%曲通x-100,在pH 7.0和30℃下。 [1446] 热平衡后,如果适当的话,添加GH9内切葡聚糖酶(SEQ ID NO:6)(62mg/L)并且在终点处使用BCA还原末端测定测量产生的还原末端。还原末端的定量是基于葡萄糖标准曲 线并且结果示于下表57中。 [1447] 表57:如通过还原末端所确定,GH9内切葡聚糖酶((SEQ ID NO:6)对黄原胶和预处理黄原胶的结果 [1448] |