囊距翠雀或囊距翠雀提取物在防治剑麻新菠萝灰粉蚧中的应用 |
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| 申请号 | CN202011072786.X | 申请日 | 2020-10-09 | 公开(公告)号 | CN112244042A | 公开(公告)日 | 2021-01-22 |
| 申请人 | 华南农业大学; | 发明人 | 曾鑫年; 郑丹杰; 刘家莉; | ||||
| 摘要 | 本 发明 属于热带作物 害虫 防治技术领域，具体涉及囊距翠雀或囊距翠雀提取物在防治剑麻新菠萝灰粉蚧中的应用。本发明研究发现，囊距翠雀提取物对剑麻新菠萝灰粉蚧具有高效的毒杀作用，且囊距翠雀提取物属于 植物 源成分，能够有效防止剑麻新菠萝灰粉蚧抗药性的产生，对人畜无毒无害，环境友好，作用周期较长。为防控剑麻新菠萝灰粉蚧植物源 农药 的开发提供了一种更加绿色安全的选择。 | ||||||
| 权利要求 | 1.囊距翠雀或囊距翠雀提取物在防治剑麻新菠萝灰粉蚧中的应用。 |
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| 说明书全文 | 囊距翠雀或囊距翠雀提取物在防治剑麻新菠萝灰粉蚧中的应用 技术领域背景技术[0002] 新菠萝灰粉蚧是剑麻上一种重要害虫，主要危害菠萝、香蕉、番荔枝、柑橘、葡萄等植物。卵、幼虫和成虫均寄生在寄主植物表面，可造成寄主植物营养不良，树势衰弱、大量落叶和落果，严重时引起植株死亡。雌虫吸食叶肉汁液为生，同时该害虫还分泌蜜露，引起煤烟病大量的发生，严重影响植物的光合作用，导致植物的经济价值下降。该虫在热带和亚热带地区分布较广，一旦传播开，对水果、蔬菜、花卉等植物造成严重危害。 [0003] 目前的主要防治策略为化学药剂的防治，如文献【新烟碱类杀虫剂对新菠萝灰粉蚧的毒力[J].环境昆虫学报】中提到的利用新烟碱类杀虫剂对新菠萝灰粉蚧的毒杀作用，但此类化学药剂对人畜安全和生态环境都存在很大的危害，且长期大量地使用化学合成药剂易引发剑麻新菠萝灰粉蚧产生抗药性。此外，公开号为CN102776130A的中国专利提供一株金龟子绿僵菌可用于制备新菠萝灰粉蚧杀虫剂，但是生物药剂的防治效果有比较缓慢。而植物源杀虫剂的主要成分来源于植物，在自然环境中易降解，不易引起环境污染，对人畜的安全性优于化学合成的杀虫剂，且能够有效缓解害虫抗药性的产生，但目前很少见到关于利用植物源杀虫药剂防治剑麻新菠萝灰粉蚧的报道。 发明内容[0004] 本发明要解决的技术问题是克服现有防治剑麻新菠萝灰粉蚧技术存在的缺陷和不足，提供囊距翠雀或囊距翠雀提取物在防治剑麻新菠萝灰粉蚧中的应用，为有效防治剑麻新菠萝灰粉蚧提供了一种新型天然植物药物来源。 [0005] 囊距翠雀为毛茛科植物囊距翠雀花(Delphinium brunonianum Royle)的全草。主要分布于西藏。具有祛风止痒，凉血解毒之功效。常用于流行性感冒，皮肤痒疹，蛇咬伤。据记载，全草中含有囊距翠雀碱(brunonine)，花还含囊距翠雀宁(delbrunine)、囊距翠雀灵(delbruline)及囊距翠雀星(delbrusine)等生物碱。在植物化学研究中发现，该物种含有生物碱、蒽醌苷、抗坏血酸、碳水化合物、香豆素、黄酮类化合物、酚类化合物、蛋白质和皂苷等具有较强的抑菌和杀虫活性，因此可以用于植物源农药的开发，应用前景十分广阔，本发明首次研究发现囊距翠雀全草的甲醇提取物、萃取物对剑麻新菠萝灰粉蚧具有高效的毒杀作用，可有效防治剑麻新菠萝灰粉蚧，且囊距翠雀提取物属于植物源成分，能够有效防止剑麻新菠萝灰粉蚧抗药性的产生，对人畜无毒无害，环境友好，作用周期较长。为防控剑麻新菠萝灰粉蚧植物源农药的开发提供了一种更加绿色安全的选择。 [0006] 本发明的首要目的是提供囊距翠雀或囊距翠雀提取物在防治剑麻新菠萝灰粉蚧中的应用。 [0007] 本发明的另一目的是提供囊距翠雀或囊距翠雀提取物在制备防治剑麻新菠萝灰粉蚧的药剂中的应用。 [0008] 本发明的再一目的是提供一种包含囊距翠雀或囊距翠雀提取物的防治剑麻新菠萝灰粉蚧的药剂。 [0009] 本发明上述目的是通过以下技术方案实现的： [0010] 本发明研究发现，囊距翠雀提取物对剑麻新菠萝灰粉蚧具有毒杀活性，因此本发明请求保护囊距翠雀或囊距翠雀提取物在防治剑麻新菠萝灰粉蚧中的应用以及囊距翠雀或囊距翠雀提取物在制备防治剑麻新菠萝灰粉蚧的药剂中的应用。 [0011] 优选地，所述囊距翠雀提取物为囊距翠雀甲醇提取物、囊距翠雀石油醚萃取物、囊距翠雀三氯甲烷萃取物、囊距翠雀乙酸乙酯萃取物、囊距翠雀正丁醇萃取物和囊距翠雀总生物碱。 [0012] 其中，在上述提取物中，囊距翠雀总生物碱在防治剑麻新菠萝灰粉蚧中效果最佳。 [0013] 作为一种优选的可实施方式，所述囊距翠雀甲醇提取物的制备囊距翠雀甲醇提取物的制备方法为：将干燥的囊距翠雀全草粉碎，按料液比1g∶10～15mL加入无水甲醇浸提，每次36～48h，浸提3～4次，合并提取液，50～55℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀甲醇提取物。 [0014] 作为一种优选的可实施方式，所述囊距翠雀石油醚萃取物的制备方法为：取所述囊距翠雀甲醇提取物，悬于150倍蒸馏水中，按照甲醇提取物水溶液：石油醚＝1：2的体积比，加入石油醚进行萃取，萃取温度为28～30℃，时间为2～2.5h，分液，40～50℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀石油醚萃取物。 [0015] 作为一种优选的可实施方式，所述囊距翠雀三氯甲烷萃取物的制备方法为：取所述囊距翠雀甲醇提取物，悬于150倍体积的蒸馏水中，按照甲醇提取物水溶液：三氯甲烷＝1：2的体积比加入三氯甲烷进行萃取，萃取温度为28～30℃，时间为2～2.5h，分液，45～55℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀三氯甲烷萃取物。 [0016] 作为一种优选的可实施方式，所述囊距翠雀乙酸乙酯萃取物的制备方法为：取所述囊距翠雀甲醇提取物，悬于150倍体积的蒸馏水中，按照甲醇提取物水溶液：乙酸乙酯＝1：2的体积比加入乙酸乙酯进行萃取，萃取温度为28～30℃，时间为2～2.5h，分液，55～65℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀乙酸乙酯萃取物。 [0017] 作为一种优选的可实施方式，所述囊距翠雀正丁醇萃取物的制备方法为：取所述囊距翠雀甲醇提取物，悬于150倍体积的蒸馏水中，按照甲醇提取物水溶液：正丁醇＝1：2的比例加入正丁醇进行萃取，萃取温度为28～30℃，时间为2～2.5h，分液，65～75℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀正丁醇萃取物。 [0018] 作为一种优选的可实施方式，所述囊距翠雀总生物碱的制备方法为：取所述囊距翠雀甲醇提取物，悬于150倍体积的蒸馏水中，加盐酸调节pH为2～3，按照甲醇提取物水溶液：乙酸乙酯＝1：2的体积比加入乙酸乙酯萃取，萃取温度为28～30℃，时间为2～2.5h，水层调节pH为9～10，按照水层：乙酸乙酯＝1：1的体积比再次加乙酸乙酯萃取，萃取温度为28～30℃，时间为2～2.5h，55～65℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀总生物碱。 [0019] 本发明还请求保护一种包含囊距翠雀或囊距翠雀提取物的防治剑麻新菠萝灰粉蚧的药剂。 [0021] 优选地，所述药剂的剂型为悬浮剂，为用0.1％的吐温-80加囊距翠雀提取物配制而成，其中囊距翠雀提取物的质量体积比含量可以为5000～10000mg/L。 [0022] 进一步优选地，对于2龄、3龄的剑麻新菠萝灰粉蚧，所用药剂中囊距翠雀甲醇提取物的浓度为5000mg/L。 [0023] 进一步优选地，对于剑麻新菠萝灰粉蚧雌成虫，所用药剂中囊距翠雀甲醇提取物的浓度为10000mg/L。 [0024] 进一步优选地，对于2龄、3龄、雌成虫剑麻新菠萝灰粉蚧，所用药剂中囊距翠雀石油醚萃取物或三氯甲烷萃取物或乙酸乙酯萃取物或正丁醇萃取物或囊距翠雀总生物碱的浓度为5000mg/L。 [0025] 本发明具有以下有益效果： [0026] 本发明首次研究发现囊距翠雀全草的甲醇提取物、萃取物对剑麻新菠萝灰粉蚧具有高效的毒杀作用，可有效防治剑麻新菠萝灰粉蚧，且囊距翠雀提取物属于植物源成分，能够有效防止剑麻新菠萝灰粉蚧抗药性的产生，对人畜无毒无害，环境友好，作用周期较长。为防控剑麻新菠萝灰粉蚧植物源农药的开发提供了一种更加绿色安全的选择。 具体实施方式[0028] 除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。 [0029] 实施例1囊距翠雀甲醇提取物的制备 [0030] 将囊距翠雀全草粉碎，按料液比1g∶10mL加入无水甲醇密封浸提，每次48h，浸提3次，合并提取液，50℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀甲醇提取物。 [0031] 实施例2囊距翠雀萃取物的制备 [0032] 1、囊距翠雀石油醚萃取物的制备 [0033] 取实施例1中得到的囊距翠雀甲醇提取物，悬于150倍蒸馏水中，按照甲醇提取物水溶液：石油醚＝1：2的体积比，加入石油醚进行萃取，萃取温度为28℃，时间为2h，分液，50℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀石油醚萃取物。 [0034] 2、囊距翠雀三氯甲烷萃取物的制备 [0035] 取实施例1中得到的囊距翠雀甲醇提取物，悬于150倍体积的蒸馏水中，按照甲醇提取物水溶液：三氯甲烷＝1：2的体积比加入三氯甲烷进行萃取，萃取温度为30℃，时间为2h，分液，45℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀三氯甲烷萃取物。 [0036] 3、囊距翠雀乙酸乙酯萃取物的制备 [0037] 取实施例1中得到的囊距翠雀甲醇提取物，悬于150倍体积的蒸馏水中，按照甲醇提取物水溶液：乙酸乙酯＝1：2的体积比加入乙酸乙酯进行萃取，萃取温度为30℃，时间为2.5h，分液，65℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀乙酸乙酯萃取物。 [0038] 4、囊距翠雀正丁醇萃取物的制备 [0039] 取实施例1中得到的囊距翠雀甲醇提取物，悬于150倍体积的蒸馏水中，按照甲醇提取物水溶液：正丁醇＝1：2的比例加入正丁醇进行萃取，萃取温度为28℃，时间为2h，分液，75℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀正丁醇萃取物。 [0040] 5、囊距翠雀生总物碱的制备 [0041] 取实施例1中得到的囊距翠雀甲醇提取物，悬于150倍体积的蒸馏水中，加盐酸调节pH为2，按照甲醇提取物水溶液：乙酸乙酯＝1：2的体积比加入乙酸乙酯萃取，萃取温度为30℃，时间为2.5h，水层调节pH为9，按照水层：乙酸乙酯＝1：1的体积比再次加乙酸乙酯萃取，萃取温度为30℃，时间为2.5h，65℃旋转蒸发，浓缩至浸膏状即得囊距翠雀总生物碱。 [0042] 实施例3囊距翠雀提取物对剑麻新菠萝灰粉蚧的毒杀活性测定 [0043] 1、实验方法 [0044] 将实施例2制备的囊距翠雀提取物分别用0.1％吐温-80水溶液稀释，配置成10000mg/L和5000mg/L的浓度。2龄、3龄剑麻新菠萝灰粉蚧所用囊距翠雀甲醇提取物的浓度为5000mg/L，雌成虫所用囊距翠雀甲醇提取物的浓度为10000mg/L；2龄、3龄、雌成虫剑麻新菠萝灰粉蚧所用的囊距翠雀萃取物和囊距翠雀总生物碱的浓度均为5000mg/L。 [0045] 将新鲜的剑麻叶片剪成2cm小段，将饲养在南瓜的同一批的若虫或成虫用小毛刷轻轻的分别扫到剑麻叶片上。然后将虫子扫到相对应的植物提取物或对照溶剂中浸泡5s后取出，放置到皿底铺有保湿滤纸的培养皿中的剑麻叶片上(直径为90mm，高15mm)，每个培养中皿供试虫数为20头，每个处理重复3次，以含有0.1％吐温-80水溶液作为对照，分别在24h、48h、72h后记录死亡头数。判断死亡的标准：体视镜下观察新菠萝灰粉蚧虫体干瘪、色泽暗黑或用毛刷轻轻触动虫体不动者为死亡。 [0046] 2、实验结果 [0047] 结果如表1所示。 [0048] 表1 [0049] [0050] 从表1的毒杀实验结果可以看出，囊距翠雀甲醇提取物48h对新菠萝灰粉蚧2龄、3龄、雌成虫的毒杀作用为83.33％、81.67％、71.67％；囊距翠雀石油醚萃取物、三氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物48h对新菠萝灰粉蚧2龄的毒杀作用分别为36.67％、55.00％、66.67％、80.00％；对3龄的毒杀作用分别为33.33％、41.67％、46.67％、75.00％； 对雌成虫的毒杀作用分别为18.33％、36.67％、41.67％、66.67％。囊距翠雀全草总生物碱对新菠萝灰粉蚧蚧2龄、3龄、雌成虫的毒杀作用分别为90.00％、81.67％、75.00％。可见囊距翠雀提取物对剑麻新菠萝灰粉蚧不同虫龄都具有效的毒杀作用，尤其是囊距翠雀总生物碱对不同虫龄的剑麻新菠萝灰粉蚧毒杀力最强。 [0051] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。 |
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