治疗感冒或过敏性鼻炎的方法

本发明涉及用5-HT2拮抗剂治疗或缓解感冒或过敏性鼻炎的症 状。

自从四十多年前发现5-羟色胺(5-HT)以来，积累的多种研 究结果已表明，5-羟色胺在哺乳动物体内，不论在中枢神经系统和在 外周系统都有重要的功能作用。对中枢神经系统的形态学研究表明，起 源于脑干的5-羟色胺能神经元形成了一个非常扩散的系统，与脑和脊 髓的大部分区域都有投射联系。R.A.O′Brien,Serotonin in Mental Abnormalitise(5-羟色胺与精神失常)，1:41(1978)；H.W.M. Steinbusch,Handbook of Chemical Neuroanatomy(化学神经解剖学 手册)，Vol.3.partⅡ,68(1984)；N.E.Anden,et al,Acta physiologica Scandinavia,67:317(1966)。生物化学证据对这些 研究作了补充，证明脑和脊髓内存在高浓度5-HT。H.W.M. Steinbusch，同上。

对于这样一个扩散性系统，证明5-HT与某些行为的表达、与一 些生理学反应、以及与一些起源于中枢神经系统的疾病有关是不会令人 惊奇的。这些包括诸如睡眠、进食、痛感觉、体温控制、血压控制、抑 郁、精神分裂症，以及其它身体状况等广泛的方面。R.W.Fuller,Biology of Serotonergic Transmission(5-羟色胺能传递的生物学)，221 (1982)；D.J.Boullin,Serotonin in Mental Abnormalities(5- 羟色胺与精神失常)1:316(1987)；J.Barchas,et al.,Serotonin and Behavior(5-羟色胺与行为)(1973)。

5-羟色胺在外周系统也起重要的作用。例如，体内大约90％的5 -羟色胺是在胃肠道系统内合成的，并且已发现，5-羟色胺在此系统 内中介导各种收缩、分泌、和电生理作用。5-羟色胺可被血小板吸收， 一经引起血小板凝集，5-羟色胺又被释放，使心血管系统成为对5- 羟色胺非常敏感的外周网络中的另一个例子。鉴于5-羟色胺在体内的 广泛分布，可以理解到，对于能影响5-羟色胺能系统的药物具有巨大的 兴趣。特别是受体特异性激动剂和拮抗剂对治疗广泛的疾病是有价值 的，包括焦虑、抑郁、高血压、周期怀偏头痛、强迫性失常，精神分裂 症、孤独症，神经退化性疾病如阿尔海茨墨症，帕金森氏病和亨氏舞蹈 病，以及癌症化疗引起的呕吐。M.D.Gershon,et al,The Peripheral Actions of 5-Hydroxytryptamine(5-羟色胺的外周性作用)，246 (1989)；P.R.Saxena,et al,Journel of Cardiovascular Pharmacology,15:Supplement7(1990)。

5-羟色胺通过与细胞表面的特异性受体相结合发挥其细胞生理学 作用。对包括5-羟色胺在内的许多神经递质和激素存在多种类型的受 体。存在多种结构不同的5-羟色胺受体，为能生产出亚型选择性药剂 提供了可能性。开发这种化合物可能导致产生具有更少副作用的新型高 选择性治疗药剂，因为，激活单个受体亚型就可能发挥影响中枢和/或外 周5-羟色胺能系统不同部分特异性作用的功能。

通过用血管系统作例子，可为这种特异性提供例证。对于某些血管， 刺激内皮细胞上的某种5-HT受体产生血管舒张作用，而刺激平滑肌 细胞上的某种5-HT受体则产生血管收缩作用。

根据其药理学或结构差异，目前被正式分类的主要5-羟色胺(5 -HT1、5-HT2,5-HT3,5-HT4,5-HT5,5-HT6，和5 -HT7)受体种类包含大约14-18种不同的受体。〔有关各种5-HT 受体的药理学作用和临床意义的出色综述，参见Glennon et al., Neuroscience and Behavioral Reviews(神精科学与行为述评)，14: 35(1990)〕。

一种5-羟色胺受体是5-HT2。已知这种受体存在几个亚型。这 些亚型包括5-HT2A,5-HT2B，和5-HT2C。亚型5-HT2A定位 于血管平滑肌，血小板，肺，中枢神经系统和胃肠道。认为这种受体与 血管收缩，血小板凝集，和支气管收缩有关。5-HT2B受体定位于大鼠 肺，胃底部，子宫，膀胱，和结肠。对于人，5-HT2B重要的定位区包 括，但不局限于，脑和血管。亚型5-HT2C定位于中枢神经系统，脉络 丛中具有高密度。

长时间认为花粉是引起过敏性鼻炎的原因，通常被称为“枯草热”。 花粉含有蛋白酶，它能诱导肥大细胞释放介体，从而刺激IgE生物合成。 由IgE引起的肥大细胞脱颗粒作用，使之释放组胺，导致引起鼻窦充血， 发痒和肿胀的炎症反应。感觉神经释放的炎症性神经肽，如P物质，也能 引起肥大细胞的脱颗粒作用。肥大细胞脱颗粒后释放的组胺可激活感觉 神经增加释放炎症性神经肽，并传递信号至脑，引起打喷嚏，过敏性反 应还扩散至附近其它区域，例如引起流泪。以此方式，感觉神经参与了 炎症过程。有鼻粘液的过敏病出现很多嗜曙红白细胞，而有感染性鼻粘 液的患者出现很多嗜中性白细胞。

抗组胺剂是常用的药物，口服时常有镇静作用。另一方面，含有色 甘酸钠的喷鼻剂是由于色甘酸阻断过敏原与组织肥大细胞反应而有效。 但是，色甘酸并不完全有效，因为看来它不与某些刺激肥大细胞脱颗粒， 并从肥大细胞产生组胺的炎症介体或IgE生物合成激活剂相结合。

炎症是组织对不同刺激或损伤的一种非特异性反应，并导致在炎症 部位释放引起疼痛的物质。现在认识到，肥大细胞，嗜中性的白细胞，T -细胞和感觉神经与皮肤炎症的病理生理状态以及其它的生理失常有 关。肥大细胞在由IgE引起脱颗粒之后，是急性炎症中组胺最大的来源， 也是胃促胰酶最大的来源。

“感冒”是内科医生、同时也是非专业人员用于识别急性轻呼吸道 病症的一个时代赋予的称呼。自从1956年鉴定鼻病毒以来，对感冒的病 原学和流行病学已获得相当大的知识体系。认识到感冒不是一个单独的 病症，而是由几个病毒家族成员引起的一组病症，包括付流感病毒，鼻 病毒，呼吸道合胞病毒，肠道病毒，和冠状病毒。对鉴定引起感冒的病 毒已进行了大量的工作。此外，对最重要的感冒病毒，鼻病毒的分子生 物学有了更详尽的认识。相反，尽管有这些成就，对感冒的治疗却进展 缓慢。虽然现在已发现有大量化合物对细胞培养的感冒病毒表现出抗病 毒活性，但是对患者的抗病毒化合物仅有局限的效果。

因为对受感染人群中的感冒和过敏性鼻炎目前市场推行的治疗法普 遍不满意，所以需要有更有效，更满意的治疗法。本发明提供了这样一 种治疗法。

本发明提供了一种治疗或缓解哺乳动物感冒或过敏性鼻炎症状的方 法，包括对需要治疗的哺乳动物给予有效剂量具有5-HT2拮抗剂活性 的化合物。

用于制剂和实施例中的名词和缩写具有其正常的含义，除非另有标 明。例如“℃”指的是摄氏度，“N”指的是正常或正常状态，“mmol” 指的是毫摩尔，“g”指的是克，“ml”表示毫升，“L”表示升，“M” 指的是摩尔的或摩尔浓度，“MS”指的是质谱测定法，“IR”指的是 红外光谱测定法，“NMR”指的是核磁共振光谱测定法。

在此使用的名词“过敏性鼻炎”应理解包括药物性鼻炎(rhinitis medicamentosa)，干燥性鼻炎，和萎缩性鼻炎。

本发明的方法使用了5-HT2受体。存在5-HT受体的3个5- 羟色胺2(5-HT2)家族成员，5-HT2A,5-HT2B和5-HT2C受 体。这些受体是G-蛋白结合受体，至少在这些受体的克隆化型式中它 们与磷酸次黄嘌呤核苷酸代谢作用发生正偶联。这些受体具有序列同源 性，具有相同的内含子和外显子模式。这些受体对配体类似的特异性进 一步显示出在此家族中受体的共性。虽然本发明的方法可使用任何5- HT2受体亚型，但是更优选的受体亚型是5-HT2B。

本发明提供了一种治疗或缓解感冒或过敏性鼻炎症状的方法，包括 给需要治疗的哺乳动物有效剂量的5-HT2受体拮抗剂。本发明的一个 更优选的实施方案提供了一种治疗或缓解感冒或过敏性鼻炎症状的方 法，包括给需要治疗的哺乳动物有效剂量的5-HT2B受体拮抗剂。

新近的出版物中描述了许多可用于本发明方法的不同的5-HT2受 体拮抗剂。

例如，在此引入作为参考的美国专利第5,428,036号描述了一组具 有结构式Ⅱ和其药用盐的5-HT2拮抗剂：

其中X选自CO,CS和CH2，如果X是CO或CS，则R选自如下 的基团：

ⅰ)氢，C1-C24烷基，C2-C24烯基，C3-C8环烷基，C3-C8 环烯基或C4-C32环烷(烯)基烷(烯)基，这些基团可任选地以1 个或2个羟基取代，或者是任选地以1个或多个选自如下取代基取代的 苯基：卤素，三氟甲基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，C1-C4烷硫 基，酰氧基或氰基，或

ⅱ)YR1，其中Y是O或S，R1选自上面ⅰ)中对R限定的取代基，

ⅲ)NR2R3，其中R2和R3独立地选自上面ⅰ)中对R限定的取代 基，或者R2和R3结合形成4-8元杂环，其含有1-3个氮原子和0 -3个氧或硫原子，或者如果X是CH2时，R选自如下的基团：

ⅳ)如在(ⅱ)中限定的基团YR1，

ⅴ)如在ⅲ)中限定的基团NR2R3，或

ⅵ)基团OC(O)R4，其中R4是对R1限定的基团。

另一组5-HT2拮抗剂包括在此引入作为参考的美国专利第 5,229,382号中描述的化合物，它们具有通式Ⅲ的结构：

还有另外一组5-HT2拮抗剂是在此引入作为参考的美国专利第 5,457,115号中描述的，具有结构式Ⅳ的拮抗剂及其可药用盐或前药：

其中Ar是一个苯基；被至少一个选自如下取代基取代的苯基：卤 素，低级烷基，低级烷氧基，羟基，三氟甲基，和氰基；或是选自如下 的芳香杂环基：2-噻吩基，3-噻吩基，2-呋喃基，3-呋喃基，2 -噁唑基，2-咪唑基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基；每条 虚线是一个任选的双键；X和X1独立地选自氢，卤素，低级烷基，低级 烷氧基，羟基，低级烷硫基，低级烷基磺酰基，低级烷氨基，低级二烷 氨基，氰基，三氟甲基，和三氟甲硫基；或者X和X1在一起形成5-7 元碳环；R1选自氢，低级烷基和被1个或2个羟基取代的烷基；前提条 件是当X是氢或氟时，R1不是氢；R是具有如下结构式的取代基：

其中n是2-6的整数，w是氧或硫；V1选自OR4,SR5,CHR6R7和NR8R9；

其中R3-R9独立地选自氢，低级烷基，低级烯基，环烷基，被一 个或二个羟基取代的低级烷基，以及被一个或二个羟基取代的低级烯 基。

还有一组可用于本发明方法的5-HT2拮抗剂，包括在此引入作为 参考的美国专利第5,480,885号中描述的结构式Ⅴ的拮抗剂，其外消旋 体及其酸加成盐。

其中R1,R2和R3独立地代表一个氢原子或者直链或支链的C1-C6 烷基；

X代表一个氢原子或一个卤素原子；

Z代表羰基或亚甲基，C9 C10代表一个单键或双键。

上述各组化合物仅表明最近研制的5-HT2受体拮抗剂。在此列入 的几组化合物不表示是全面的，本发明的方法可能使用任何一种5-HT2 受体拮抗剂，不局限于任何特定的一种化合物。

更优选的一类拮抗剂是结构式Ⅵ的5-HT2受体拮抗剂，其可药用 盐或溶剂化物。 其中

R1是氢或C1-C3烷基；

R3是氢或C1-C3烷基；

R6选自氢、C1-C6烷基、C2-C6烯基、卤素、卤代(C1-C6) 烷基、卤代(C2-C6)烯基、COR5、C1-C10烷酰基、CO2R5′、(C1-C6 烷基)m氨基，NO2、-SR5和OR5；

R7和R8独立地选自氢、C1-C6烷基、C2-C6烯基、NO2、卤素、 卤代(C1-C6)烷基、卤代(C2-C6)烯基、COR5、C1-C10烷酰 基、C7-C16芳烷基、CO2R5′、(C1-C6烷基)m氨基，-SR5和OR5；

n是1、2或3；

n′是1、2或3；

m是1或2；

R5独立地是氢或C1-C4烷基；

R5′是C1-C4烷基；

---是任选的双键；

结构式Ⅵ化合物的实例包括，但不局限于如下：

螺-9,9[2-(3,4-二氯)-1,2,3,4-四氢化萘基]-5-甲氧 基-1,2,3,9-四氢-8H-吡啶并吲哚，

螺-9,9[2-(3,4-二甲氧基)-1,2,3,4-四氢化萘基]-5- 甲基-1,2,3,9-四氢-8H-吡啶并吲哚，

螺-9,9[2-(3,4-二乙氧基)-1,2,3,4-四氢化萘基]-5- 甲基-1,2,3,9-四氢-8H-吡啶并吲哚，

螺-9,9[2-(3,5-二氯)-1,2,3,4-四氢化萘基]-5-二甲 氨基-1,2,3,9-四氢-8H-吡啶并吲哚，

螺-9,9[2-(3-氟，4-氯)-1,2,3,4-四氢化萘基]-5- 乙基-1,2,3,9-四氢-8H-吡啶并吲哚，

螺-9,9[2-(3,4-二甲氧基)-1,2,3,4-吲哚，

螺-9,9[2-(3,4-二甲氧基)-1,2,3,4-四氢化萘基]-5- 溴-1,2,3,9-四氢-8H-吡啶并吲哚，

螺-9,9[2-(3,4-二甲氧基)-1,2,3,4-四氢化萘基]-5- 氯-1,2,3,9-四氢-8H-吡啶并吲哚。

这些化合物的合成在1996年3月25提交的共同未决美国临时专利 申请序列号06/014,119，律师案卷号P-10656中已有描述，在此引入 作为参考。包括在六个特定实施例中的这类典型化合物的合成将在下面 详述。

结构式Ⅵ化合物可用本领域熟知的化学方法制备。这些实施例仅是 说明性的，不打算限制本发明的范围。

                      吲哚原料

下面的吲哚原料(1a,1b和1c)中购买(1a)，按照Bartoli的方 法制备(1b)〔G.Bartoli,et al.Tetrahedron Lett,1989,30, 2129〕，或者从2-碘-4,6-二甲基苯胺(5)合成(1c)。可用 如下反应路线说明此方法：

                    反应路线Ⅳ

2-碘代-4,6-甲基苯胺(5)的合成可按如下完成：在氩气下， 向在30ml无水三乙基胺中的5(24mmol),CuI(0.05当量)和 (PPh3)2PdCl2(0.05当量)悬浮液中加入三甲基甲硅烷基乙炔(1.1当 量)，并对形成的混合物搅拌3小时。然后在真空下除去溶剂，残留物 通过快速层析法纯化，用己烷/乙酸乙酯(3∶1)作洗脱液，以定量产率 产生6。将6(23mmol)和CuI(2当量)在50ml无水二甲基甲酰 胺中的浆状物，在氩气中100℃加热2.5小时。冷却至室温之后，将反 应混合物过滤，固体物用乙醚(20ml)洗2次。此有机相用水洗(3× 50ml)，用Na2SO4干燥，然后将溶剂蒸发至干。此粗制品通过快速层 析法纯化，用己烷/乙酸乙酯(3∶1)作洗脱液，获得1c(1.5g,45％)。

                     实施例1

将相应的色胺盐酸盐(3a)(1g)和相应的二甲氧基萘满酮(3b) (1g)在乙醇(10ml)中的悬浮液回流加热128小时。此后，使反应 混合物降温至室温并过滤，洗粗制固体并干燥。 熔点261℃

    理论值             测定值

C   69.25              69.34

H   6.82               6.97

N   7.02               6.98

                      实施例2

将相应的色胺盐酸盐(2a)(575mg)和相应的酮(2b)(464mg) 在乙醇(10ml)中的悬浮液回流加热128小时。此后，使反应混合物降 温至室温并过滤。洗粗制固体并干燥。 产量：525mg

    理论值            测定值

C    74.43             74.36

H    6.84              6.84

N    8.27              8.25 MS(质谱分析)：301

                     实施例3

将相应的色胺盐酸盐(2a)(500mg)和相应的酮(2b)(396mg) 在乙醇(10ml)中的悬浮液回流加热72小时。此后使反应混合物冷却 至约0℃，并过滤。洗粗制固体并干燥。 产量：262mg MS:274

                     实施例4

将相应的色胺盐酸盐(4a)(500mg)和对应的酮(4b)(396mg) 在乙醇(10ml)中的悬浮液回流加热72小时。此后使反应混合物冷却 至约0℃，持续约24小时再过滤。洗粗制固体并干燥。

提交作质谱分析，发现mi为274。

                     实施例5

将相应的色胺盐酸盐(5a)(500mg)和相应的酮(5b)(397μl) 在乙醇(10ml)中的悬浮液回流加热72小时。此后使反应混合物冷却 至约0℃，持续约14小时再过滤。洗粗制固体并干燥。 产量：630mg

     理论值             测定值

C    73.95              73.32

H    6.52               6.73

N    8.62               8.59 MS:288

                       实施例6

将相应的色胺盐酸盐(4a)(1g)和相应的酮(4b)(800mg) 在乙醇(10ml)中的悬浮液回流加热72小时。此后使反应混合物冷却 至约0℃，持续约24小时，再过滤。洗粗制固体并干燥。 产量：550mg

     理论值            测定值

C    70.67             70.88

H    7.06              7.16

N    7.85              7.88

在此引入作为参考的WO95/24200中描述了另一种优选的具有如下 结构式Ⅰ的5-HT2受体拮抗剂或其可药用盐或溶剂化物： 其中

Q是氢或(CHR2)R4；

R1是氢或C1-C3烷基；

R2是氢或C1-C3烷基；

R3是氢或C1-C3烷基；

R4是C5-C8环烷基，取代的C5-C8环烷基，C5-C8环烯基，取 代的C5-C8环烯基，二环的或取代二环的；

A选自下式结构式： 其中

R6和R7独立地是氢，C1-C6烷基、C2-C6烯基、卤素、卤代 (C1-C6)烷基，卤代(C2-C6)烯基、COR5、C1-C10烷酰基、 CO2R5′、(C1-C6烷基)m氨基，NO2、-SR5或OR5；

m是1或2；

R5独立地是氢或C1-C4烷基；

R5′是C1-C4烷基；

R8独立地选自R6的基因，取代的C3-C8环烷基、C3-C8环烷基、 C3-C8环烷基-(C1-C3)烷基、C5-C8环烯基、取代的C5-C8 环烯基、C5-C8环烯基-(C1-C3)烷基、C7-C16芳烷基，或者

R6和R7同基团A的碳原子一起构成5-8元碳环。

结构式Ⅰ化合物的例子包括但不局限于如下化合物：

8-甲基-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四氢 -9H-吡啶并[3,4-b]吲哚，

8-溴-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四氢- 9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐，

6,8-二溴-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四 氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚，

6-甲基-8-溴-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4 -四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

8-甲氧基-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四 氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚；    

6,8-二氟-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四 氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚；

7-甲基-8-溴-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4 -四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-(1,1-二甲基乙基)-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕- 1,2,3,4-四氢-1-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

5-氟-6-甲基-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4 -四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚；

7,8,9,10-四氢-10-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕-11H- 苯并[g]吡啶并[3,4-b]吲哚；

6-环己基-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四 氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

5,8-二甲基-1,2,3,4-四氢-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲 基〕-9H-吡啶并[3,4 b]吲哚盐酸盐；

6-(1-甲基乙基)-1,2,3,4-四氢-1-〔(3,4-二甲氧苯 基)甲基〕-9H-吡啶并[3,4b]吲哚；

6,8-二甲基-1,2,3,4-四氢-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲 基〕-9H-吡啶并[3,4b]吲哚盐酸盐；

5,7-二甲基-1,2,3,4-四氢-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲 基〕-9H-吡啶并[3,4b]吲哚盐酸盐；

6,7-二甲基-1,2,3,4-四氢-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲 基〕-9H-吡啶并[3,4b]吲哚；

6-乙基-1,2,3,4-四氢-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕 -9H-吡啶并[3,4b]吲哚；

6-溴-1,2,3,4-四氢-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕- 9H-吡啶并[3,4b]吲哚；

7,8-二甲基-1,2,3,4-四氢-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲 基〕-9H-吡啶并[3,4b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1,2,3,4-四氢-1-〔(3,4-二甲氧苯基)甲基〕 -9H-吡啶并[3,4b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(3,4,5-三甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四 氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(2,3,4-三甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四 氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(2-甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四氢-9H -吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(2,4-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四氢 -9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(2,5-二甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四氢 -9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(2,4,5-三甲氧苯基)甲基〕-1,2,3,4-四 氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-(1-甲基乙基)-1-〔(2,3,4-三甲氧苯基)甲基〕-1, 2,3,4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(3,4-二甲氧基-5-硝基苯基)-甲基〕-1,2, 3,4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(3-碘代-4,5-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3, 4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚；

6-甲基-1-〔(3,4-二甲氧基-5-氨基苯基)-甲基〕-1,2, 3,4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚二盐酸盐；

6-甲基-1-〔(3-甲氧基-4-丙氧苯基)-甲基〕-1,2,3,4 -四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚；

6-甲基-1-〔(4-二甲氨基苯基)甲基〕-1,2,3,4-四氢- 9H-吡啶并[3,4-b ]吲哚二盐酸盐；

6-甲基-1-〔(4-二丁基氨基苯基)甲基〕-1,2,3,4-四氢 -9H-吡啶并[3,4-b]吲哚二盐酸盐；

6-甲基-1-〔(3-氟-4-甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3,4- 四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(3,4-二甲基苯基)甲基〕-1,2,3,4-四氢 -9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(2-氯-3,4-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3,4 -四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(2-氯-3-甲氧基-4-羟基苯基)甲基〕- 1,2,3,4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]-吲哚盐酸盐；

5-氟-6-甲基-1-〔(2-氯-3,4-二甲氧苯基)甲基〕- 1,2,3,4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-(环己基甲基)-1,2,3,4-四氢-9H-吡啶并[3, 4-b]吲哚盐酸盐；

6-甲基-1-〔(2-溴-3,4-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3,4 -四氢-9H-吡啶并[2,4-b]吲哚；以及

6-碘代-1-〔(3,4-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3,4-四氢 -9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐。

                实施例7 制备6-甲基-1-〔(2-氯-3,4-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3, 4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐：

将2-氯-3,4-二甲氧基苯甲醛(10.45g),N-乙酰甘氨酸 (11.9g,0.10mol)和乙酸钠(8.4g,0.1mol)在乙酸酐(100ml)中的 溶液加热至100，维持2小时。使反应混合物冷却至环境温度，然后 被倾倒在冰水(300ml)上，同时搅拌。过滤分离出产物，用水洗(3 ×50ml)，再用乙醚洗，然后减压干燥(5.26g)。

将上面制备的氮杂内酯(1.34g,4.76mmol)和5-甲基色胺盐酸盐 (1.0g,4.75mmol)在1N HCl(30ml)中的悬浮液，在氮气中加热回 流24小时。使反应混合物冷却至环境温度后，过滤分离出粗制产物。将 此固体在乙醇中研磨碎，再用乙醚洗。过滤分离出产物(1.19g)。

m/e=370,m.p.244(分解)。

    分析      计算值        测定值

     C        61.92         61.67

     H        5.94          5.94

     N        6.88          6.94

                     实施例8 制备6-甲基-1-〔(2-溴-3,4-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3, 4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚

以和实施例7中所述相同的方法制备实施例8的化合物，仅有如下 不同：用2-溴-3,4-二甲氧基苯甲醛作原料，而不是2-氯-3,4 -二甲氧基苯甲醛。最终的化合物 具有79.2％的产率，M/I416,414,mp:272-4℃。

    分析       计算值        测定值

     C         55.83         55.57

     H         5.35          5.36

     N         6.20          6.09

                  实施例9 制备6-碘-1-〔(3,4-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3,4-四氢- 9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐

以和实施例7相同的方法制备实施例9化合物，仅有如下不同：用 3,4-二甲氧苯甲醛而不是2-氯-3,4-二甲氧苯甲醛，用5-碘-色 胺而不是5-甲基-色胺作原料。反应完成后立即用碳酸钾水溶液中和 此混合物，并用氯仿萃取。合并氯仿相，用无水碳酸钠干燥后减压浓缩。 产物在硅胶柱上作层析纯化，用含2％甲醇的氯仿洗脱。合并含有产物 的组分并浓缩。将残留物溶解在乙醚中并用HCl气体处理。过滤分离出 形成的HCl盐并减压干燥。最终的化合物 具有31.3％的产率，M/I448,mp:270-3℃。

    分析      计算值        测定值

     C         49.55         49.62

     H         4.57          4.51

     N         5.78          5.66

对于认为是有效的5-HT2受体拮抗剂的化合物，其生物学效力首 先可通过应用初筛测定法证实，此测定法可快速、准确地测定待测化合 物对5-HT2受体的结合。一旦确定了待测化合物的结合，就可以证实 在体内待测化合物对受体的活性。本领域的技术人员都熟知用于评价5 -HT2拮抗剂的测定法。下面将列举各种5-HT2受体的测定法。 结合5-HT2B受体的活性：

用如下面列举的标准方法测定化合物结合5-HT2B受体的能力。 测定方法：

本发明的某些化合物和中间体可用于调节5-HT2B受体。对结合5 -HT2B受体最有效的化合物可用下面的方法鉴定。进而在下面还要提供 一个有用的体内模型，用于证实5-HT2B活性。 放射性配体对5-HT2B结合的研究：

转化细胞膜的制备

通过在4℃以2,200xg离心15分钟收集表达克隆化大鼠5-HT2B 受体的悬浮细胞。J.D.Kursar,et al,Mol,Pharmacol.42:549-557 (1992)。通过在50mM Tris-HCl,pH7.4缓冲液中(0.5×109 个细胞/30ml)旋转搅拌此沉淀制备用于结合测定的膜。然后将此组织 悬液在4℃以39,800xg离心10分钟。用此方法重复总共洗3次，在洗 第一次和第二次之间37℃温育10分钟。最后的沉淀用Tissumizer(匀 浆器)(Tekmar,Cincinnati,OH)作匀浆，在67mM Tris-HCl,pH7.4 的缓冲液中(分别以2000万-4000万和1250万和细胞/ml，原细胞成 员，分别为5-HT2B受体低水平表达和比较高水平表达的细胞)，仪器 设定位置65，匀浆15秒。

[3H]5-HT结合研究：用Biomek1000(Beckman Instruments, Fullerton,CA)自动进行结合测定，总量0.8ml的样品一式3份平行进行 测定。将膜悬液200μl(0.04-0.27mg蛋白质)和药物水稀释液200μl 加到含有〔3H〕5-HT，优降宁(pargyline),CaCl2，和L-抗坏 血酸的400μl67mM Tris-HCl,pH7.4缓冲液中。优降宁，CaCl2和L -抗坏血酸的最后浓度分别为10μm,3mM和0.1％。以37℃15分钟 或者以0℃2小时温育样品试管(以此二种条件检验结合平衡)，然后 用Brande细胞收集器(MB-48R型-Brende,Gaithersburg,MD)使样 品快速过滤通过whatman GF/B滤纸，此滤纸已在0.5％聚乙烯亚胺 中预浸透，并用冰冷的50mM Tris-HCl,pH7.4缓冲液预冷了。接着将 此滤纸用1ml冰冷的50mM Tris-HCl,pH7.4缓冲液快速洗4次。借 助于液体闪烁光谱测定法(Ready Protein and Beckmen LS6000 IC,Beckman Instruments,Fullerton,CA)测定滤纸上捕获的〔3H〕5 -HT量。对于饱和性实验，是通过对平行的饱和性实验的上清液取样 来测定实际的游离放射性配体浓度，其中被结合的放射活性已通过离心 分离出。对于以0℃和37℃温育的饱和性实验，〔3H〕5-HT的浓 度范围分别是0.02-5nM，和0.6-63nM。非特异性结合界定在5- HT 10μM或1-萘基哌嗪(1-NP)10μM。对于竞争性实验，使 用了不同药物的6-12个浓度，跨越了6个对数单位，〔3H〕5-HT 的最后浓度是2nM。借助于Bradford的方法测定蛋白质，用牛血清白蛋 白作标准。M.M.Bradford,Anal,Biochem.,72:248-254(1976)。 统计学分析：

为了最好地适合于一位点或二位点结合模型，来自饱和实验的Kd和 Bmax值可用部分F-检验(partial F-test)来检测。A.De Laan,et al, Mol,Pharmacol,21∶5-16(1981)。如下等式适用于一位点结合模 型， 在此结合量(Bound)=〔3H〕5-HT特异性结合量，Bamx=最大结 合位点数目，Kd=平衡离解常数，以及〔L〕=游离的〔3H〕5-HT 浓度， 如下等式适用于二位点结合模型，

在此结合量(Bound)=〔3H〕5-HT特异性结合量，Bmax1= 高亲和性结合位点的最大数目，Bmax2=低亲和性结合位点的最大数 目，Kd1=高亲和性位点的平衡离解常数，Kd2=低亲和性位点的平衡离 解常数，以及〔L〕=游离的〔3H〕5-HT浓度。来自竞争性实验的 IC50值，对IP3标准曲线的结合参数，以及来自IP3测定的EC50和Emax 值，可通过对四个参数对数等式(parameter logistic equations)作非 线性回归分析来确定(Systat,Systat Inc,Evanston,IL),A.De.Lean,et al,Mol.Pharmacol.21:5-16(1981)。可用Cheng-Prusoff等式将 IC50值转换成Ki值。Y.Cheng,et al,Biochem.Pharmacol,22:3099- 3108(1973)。 5-HT2B体外测定法：

通过颈脱法活杀雄性Wistar大鼠(150-375g，实验室提供， Indianapolis,IN)，制备胃底纵向片段用于体外测定。从1个大鼠胃底 制备4个标本。如Hooker所述制备抽出的颈静脉环状标本，Blood Vessels,14:1(1977)和M.L.Cohen,J.Pharmcol,Exp.Ther.227: 327(1983)。将组织标本安装在器浴槽内，其中含有10ml改进的Krebs 液，由如下成分结成(毫摩尔浓度)：NaCl.118.2；KCl4.6； CaCl2·H2O,1.6；KH2PO4,1.2；MgSO4,1.2；葡萄糖10.0；和 NaHCO3,24.8。使组浴液维持在37℃，并以95％O2和5％CO2平衡。 使组织标本处于最适静止张力(4g)下，在暴露于待测药物之前使其平 衡稳定约1小时。在带有Statham UC-3换能器的Beckman Dynograph 上记录标本的等长收缩，以张力改变的克数表示。

测定近似的拮抗剂离解常数：

胃底标本对5-HT的非积蓄性收缩浓度-反应曲线，以及颈静脉 标本的积蓄性浓度-反应曲线，可通过在洗去前面的浓度之后每隔15- 20分钟逐步增加浓度来得到。每个激动剂浓度与组织标本保持接触大约 2分钟，测定对每个化合物浓度的最大反应。ED50值以产生半数最大收 缩的激动剂浓度表示。得到对照反应之后，组织标本以适当浓度的缓冲 液或拮抗剂温育1小时。然后在存在拮抗剂的情况下，重复测定对5- HT的反应。每个组织标本的浓度反应仅采用了一个激动剂的一个拮抗剂 浓度。通常在有缓冲液处理的情况下，持续的激动剂反应不会改变(平 均剂量比是1.28+/-0.21)。

对于每个拮抗剂浓度，可按照如下等式确定近似的拮抗剂离解常数 (KB)：

KB=〔B〕/(剂量比-1) 在此〔B〕是拮抗剂浓度，剂量比是在拮抗剂存在时激动剂的ED50除以对 照ED50。通常在存在拮抗剂时，浓度-反应曲线会发生平行位移。这些 结果可以KB的负对数表示(即-logKB)。可用已知的方法进行计算。 B.R.Zaborowsky,J.Pharmacol.Methods.4:4165(1980)。 在5-HT2B转化细胞中IP3的形成：

IP3的形成和提取：对A600K-2-3-MTX细胞作悬浮培养， 通过以200xg离心收集细胞，然后再悬浮在无蛋白质的细胞培养基中。 将此细胞(2.5-3×106个细胞/管125μl)在37℃温育10分钟之后， 加入125μl在无蛋白质培养基中稀释的待研究的化合物。所有的培育都 以一式3份平行进行。当需用拮抗剂抑制5-HT的作用时，可先将细 胞与拮抗剂37℃共温育10分钟，然后加入5-HT。加入激动剂之后， 再在37℃对细胞悬液作旋转搅动和温育10秒钟(此10秒钟包括旋转动 的时间)。然后加入250μl冰冷的10％高氯酸终止反应。先将样品试管 在冰上冷却10分钟，然后以1500xg离心10分钟。离心之后，取400μl 上清液作样品。下面的IP3提取程序是根据已发表的程序(E.S.Sharps.et al.以高效液相色谱法测定培养细胞中32P对磷酸化代谢产物的掺入， Anal.Biochem.124:421-424(1982)和K.A.Wreggett,et al.硝 酸肌醇酯及其异构体的快速分离法，Biochem.J.245:655-660 (1987))作了修改。将此400μl样品加到内有100μl 10mM EDTA. pH9.0的1.5ml mierofuge试管中。随后加入500μl1,1,2-三氯三氧 乙烷/三-正-辛胺(1∶1,v/v)。将此试管剧烈旋转搅动5-7分钟， 然后以1500xg离心2分钟，使之分离成三层。从上面的水层取样100μl 用于以下述的测定法测定IP3的含量。

IP3结合测定：按照从已发表的程序(P.F.Worley.et al.对结合在 脑中的三磷酸肌醇酯受体的鉴定。J.Biol.Chem.262:12132-12136 (1987)和D.S.Bredt et al，对生物组织中1,4,5-三磷酸肌醇酯的 一种快速、灵敏，和特异性的放射受体测定法，Biochem,Biophys.Res. Commun,159:976-982(1989))改进的结合测定法，用大鼠小 脑膜作为IP3-结合蛋白质的来源。通过匀浆大鼠小脑制备膜，在30倍 体积的匀浆缓冲液(1mM EDTA和1mM 2-巯基乙醇，配制在50mM Tris.HCl.pH7.7缓冲液中)中，用Tissumizer(Tekmar)匀浆器作匀 浆，仪器设定位置65，匀浆15秒钟。在4℃以39800xg将此匀浆离心。 重复此步骤3次以上，总共洗4次。最后将沉淀悬浮于30倍体积的IP3 结合缓冲液(以64.3mM Tris.HCl.pH7.0缓冲液配制的1mM EDTA 和1mM 2-巯基乙醇)中，-70℃冷冻待用。

将含有〔3H〕IP3和50μl结合蛋白质匀浆的结合缓冲液(350μl) 加到已按上述提取步骤处理的100μl提取的IP3样品或已知的IP3标准品 中。〔3H〕IP3的最后浓度是1nM。先将样品试管在0℃冷却15分钟， 然后通过使用Brandel细胞收集器，使之过滤通过Whatmen GF/B滤纸 〔预先用水浸湿，并用2ml冰冷的IP3漂洗缓冲液(配制在50mM Tris. HCl.pH9.0缓冲液中的1mM EDTA)预冷〕。然后用1ml冰冷的IP3 漂洗缓冲液将滤纸快速漂洗2次。借助于液体闪烁计数器测定捕获在滤 纸上的〔3H〕IP3含量。可通过与标准曲线相比较，确定样品中IP3的含 量。

如果在加入5-HT之前，将表达5-HT2B受体的细胞预先与 mianserin，催产素，萝芙素，或1-NP共同温育，则相对于仅加入5 -HT,5-HT曲线已向移，Emax值也降低了。 结合5-HT2A和5-HT2C受体的活性：

用如下列举的标准程序测定化合物与5-HT2A或5-HT2C受体结 合的能力。

测定方法：

来自转化细胞株的膜制备品。

用以人-5-HT2A或5-HT2C受体稳定转化的AV12细胞(金黄 地鼠成纤维细胞，ATCC no.CRL9595)制备细胞膜(Wainscott et al，新克隆的大鼠5-羟色胺2F受体的药理学特征，Mol.Pharmacol. 48:419-426(1993))。概括地说，将表达待研究受体的细胞作悬 浮培养，然后通过离心收集细胞。将细胞再悬浮在最少量低渗缓冲液， 50mM Tris-HCl.pH7.4缓冲液中，-70℃冷冻备用。在测定的当天融 化此悬液，并用50mM Tris-HCl,pH7.4缓冲液稀释至35ml/0.5×102 个细胞的原细胞数，再在4℃以39800xg离心。将形成的沉淀通过旋转 搅动重新悬浮，并在37℃温育10分钟，然后在4℃以39800xg离心。 再次将此沉淀悬浮并离心。为了得到均匀的膜悬液，最后用Tissumizer 匀浆器(Tekmer,Cincinnati,OH)将沉淀再作成悬液，仪器设定在75， 处理10-15秒，对于表达人或大鼠5-HT2A受体的细胞，在67mM Tris-HCl.pH7.4缓冲液中作悬液，或者对于表达人5-HT2C受体的细胞， 在含有13mM MgCl2和0.67mM EDTA的67mM Tris-HCl,pH7.4 缓冲液中作悬液。

5-HT2A·2C[125I]DOI结合研究：用基本上用对〔3H〕5-HT结 合5-HT2B受体所述的方法进行人5-HT2A或5-HT2C的结合研究，仅 有如下区别。测定缓冲液含有(最后浓度)10mM优降宁(pargyline), 9.75mM MgCl2,0.5mM EDTA,0.1％抗坏血酸钠，以及50mM Tris-HCl,pH7.4。对于5-HT2A和5-HT2C受体，分别加入约40mg 和30mg蛋白质在37℃温育30分钟，然后过滤通过Whatman GF/C滤 纸，此滤纸已在0.5％(w/v)聚乙烯亚胺中预先浸透，并用4ml冰冷的 漂洗缓冲液预冷了。随后用1ml冰冷的漂洗缓冲液快速洗滤纸4次。用 γ-计数器检测捕获在滤纸上的〔125I〕DOI量。对于5-HT2C和5- HT2A受体，非特异性结合分别以10mM miansrin和1mM Ketansrin确 定。对于竞争性实验，最后的〔125I〕DOI浓度大约是0.07-0.15mM。

统计学分析：如以前所述(Wainscott et al.新克隆的大鼠5-羟 色胺2F受体的药理学特征，Mol.Pharmacol.48:419-426(1993)) 对饱和性和竞争性测定曲线进行非线性回归分析。先对pK1值(即logK.， 摩尔)进行差异的单向分析(One-way analysis)，随后进行Tukay- Kramer Honestly差异显著性测定(JMP；SAS Institute Inc.Cary, NC)。用Cheng-Prusoff(1973)等式将来自竞争性测定曲线的IC50 转变成Kd值。对于〔125I〕DOI-标记的受体，可通过重新整理Cheng -Prusoff等式确定对5-HT2A或5-HT2C受体的〔125I〕DOI的Kd值， 得到：Kd=IC50-〔L〕，在此IC50是引起特异性〔125I〕DOI结合 50％抑制的未标记DOI的浓度，〔L〕=游离的〔125I〕DOI浓度。 在5-HT2A和5-HT2C转化的细胞中IP3的形成

以如5-HT2B转化的细胞中IP3形成测定同样的方法，对5-HT2A 和5-HT2C转化的细胞中IP3形成进行测定，区别在于，对于5-HT2C 用人AHSIC-3S细胞，对于5-HT2A用人Hu2-3S细胞。

下面的实验用于测定5-HT2拮抗剂对治疗或缓解感冒或过敏性鼻 炎症状的效果。 实例#1

对Wistar大鼠(250-350g,Harlan Sprague Dawley,Indianapolis, IN)，或Hartley豚鼠(250-350g,Charles River Laboratories,Inc. Wilmington,MA)用戊巴比妥钠麻醉(分别胶腹内注射65mg/kg或45mg /kg)。

暴露出股静脉，按50mg/kg剂量静脉内注射一种荧光染料伊文思兰 (1ml/kg)。大约2分钟之后，再静脉内注射一次mCPP,α-甲基5 -羟色胺，或生理盐水。在血液中伊文思兰与蛋白质络合，对蛋白质外 渗起标记物作用。正好在注射激动剂或生理盐水后15分钟，通过放血杀 死动物，冲洗出血管中遗留的血液和染料。夹住动物的后腔静脉和主动 脉，并切开右心房以便于操作。通过对左心室注射生理盐水(40ml)， 以大约lmL/秒的灌流速度进行灌流放血。

分离出双侧的鼻粘膜样品，在纸巾上吸干并称重。然后将样品分别 放入加有3ml甲酰胺的试管内，在37℃温育18-24小时。温育之后从 组织样品中分离出甲酰胺，用Beckmen OU-7型分光光度计在620nm 测定其光密度。用三个已知浓度伊文思兰染料的光密度绘制标准曲线， 根据标准曲线可确定未知样品的伊文思兰染料浓度。通过原先的组织样 品重量，对全部测定值进行校正。 结果：

静脉内注射mCPP或α-甲基5-羟色胺，与注射生理盐水的对照 相比较，都可引起鼻粘膜组织中以伊文思兰染料指示的蛋白质渗出量增 加。 实验#2

对Wistar大鼠(250-350g,Harlan Sprague Dawley,Indianapolis, IN)，或Hartley豚鼠(250-350g,Charles River Laboratories,Inc. Wilmington,MA)用戊巴比妥钠麻醉(分别腹膜内注射65mg/kg或45mg /kg)。

暴露出股静脉，以50mg/kg剂量的伊文思兰和某一剂量的如下化合 物之一合并静脉内给药：6-甲基-1-〔(2-氯-3,4-二甲氧苯 基)-甲基〕-1,2,3,4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐、螺- 9,9-〔2-(3,4-二甲氧基)-1,2,3,4-四氢化萘基〕-5-甲 基-1,2,3,9-四氢-8H-吡啶并吲哚、6-甲基-1-〔(2-溴- 3,4-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3,4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲 哚，或6-碘-1-〔(3,4-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3,4-四氢 -9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐。大约2分钟之后，再静脉内注射一 次mCPP,α-甲基5-羟色胺，或生理盐水。在血液中伊文思兰与蛋 白质络合，对蛋白质外渗起标记作用。正好在注射激动剂或生理盐水后 15分钟，通过放血杀死动物，冲洗出血管中遗留的血液和染料，夹往动 物的后腔静脉和主动脉，并切开心房以便于操作。通过对左心室注射生 理盐水(40ml)，以大约1ml/秒的灌流速度进行灌流放血。

分离出双侧鼻粘膜样品，在纸巾上吸干并称重，然后将样品分别放 入加有3ml甲酰胺的试管内，在37℃温育18-24小时。温育之后从组 织样品中分离出甲酰胺，用Beckman OU-7型分光光度计在620nm 测定其光密度。用三个已知浓度伊文思兰的光密度绘制标准曲线，根据 标准曲线可确定未知样品的伊文思兰染料浓度。通过原先的组织样品重 量，对全部测定值进行校正。 结果：

静脉内注射mCPP或α-甲基5-羟色胺，与注射生理盐水的对照 相比较，都可引起鼻粘膜组织中以伊文思兰染料指示的蛋白质渗出量增 加。在注射激动剂之前2分钟给予如下化合物之一时，对激动剂诱发的 鼻粘膜组织蛋白质渗出增加有剂量依赖性抑制作用：6-甲基-1- 〔(2-氯-3,4-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3,4-四氢-9H-吡 啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐、螺-9,9-〔2-(3,4-二甲氧基)-1,2, 3,4-四氢化萘基〕-5-甲基-1,2,3,9-四氢-8H-吡啶并吲哚、 6-甲基-1-〔(2-溴-3,4-二甲氧苯基)-甲基〕-1,2,3,4- 四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚，以及6-碘-1-〔(3,4-二甲氧 苯基)-甲基〕-1,2,3,4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚盐酸盐。 制剂：

虽然有可能不作任何配制直接地给予本发明方法中使用的化合物， 但是，这些化合物通常是以药物制剂的形式给药，含有药剂学允许的赋 形剂以及至少一种活性成分(本发明的化合物)。这种组合物可含有按 重量大约0.1％-90％本发明化合物。这些组合物可以通过各种途径给 药，包括口服，直肠内，透皮(贴剂)，皮下注射，静脉内注射，肌肉 内注射，以及鼻内给药。本发明方法中使用的许多化合物作为注射和口 服组合物都有效。这些组合物可按照药剂学领域中所熟知的方法来制 备，含有至少一种活性化合物。参见例如，Remington′s Pharmaceutical Sciences,(16th ed.1980)。

在制备用于本发明的组合物时，通常是将活性成分同赋形剂混合， 被赋形剂稀释或者被封装在这样一种可成为胶囊、药囊、纸型，或其它 容器形式的载体中。当赋形剂作为稀释剂时，它可以是固体，半固体或 液体物质，对活性成分起赋形剂、载体或基质的作用。这样，该组合物 可成为如下多种形式：片剂、丸剂、粉剂、锭剂、药囊剂、扁囊剂、酏 剂、悬浮剂、乳剂、溶液、糖浆剂、气雾剂(固体或在液体基质中)、 软膏剂，例如含有按重量达10％的活性化合物，软、硬明胶胶囊剂、栓 剂、无菌注射液，以及无菌封装的粉剂。

制备一种制剂时，有可能必须先将活性化合物碾磨成适当大小的颗 粒，然后与其它成分合并。如果活性化合物是基本上不溶解的，则通常 被碾磨成小于200目的颗粒。如果活性化合物是基本上水溶性的，则颗 粒大小通常借助于碾磨调整，以便在制剂中获得基本上一致的，例如约 40目的颗粒分布。

某些适合的载体，赋形剂和稀释剂的例子包括：乳糖、葡萄糖、蔗 糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、海藻酸盐、黄蓍 质、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、黄蓍质、 明胶、水、糖浆和甲基纤维素。这类制剂还可以补充包括：润滑剂如滑 石粉、硬酯酸镁，和矿物油，湿润剂，乳化剂和悬浮剂，防腐剂如羟基 苯甲酸甲酯和羟基苯甲酸丙酯，甜味剂，以及芳香剂。本发明的组合物 还可以配制成在使用本领域熟知的方法对患者给药后，使活性成分能快 速释放，缓慢释放，或延迟释放。

本发明的化合物还可能用已知的透皮给药系统或赋形剂，通过透皮 给药。最优选地是，将本发明的化合物用渗透增强剂混合，并掺合成贴 剂或类似的给药系统，渗透增强剂包括，但不局限于，丙二醇、聚乙二 醇单月桂酸酯，和氮杂环烷烃-2-酮。另一些赋形剂包括胶凝剂，乳化 剂和缓冲液，也可以加入到所述的透皮制剂中。

对于口服给药，理想地可将本发明的化合物同载体和稀释剂混合， 并模压成片剂或封装在明胶胶囊中。

优选地可将本组合物配制成单位剂量形式，每个剂量含有活性成分 大约0.05-150mg，更通常是大约1.0-100mg。名词“单位剂量形式” 指的是适合于作为单一剂量用于患者或其它哺乳动物的物理学独立的单 位，每个单位含有经计算可产生理想治疗效果的预定量活性物质，并与 适当的药物赋形剂结合。

本活性化合物通常在一个很宽的剂量范围内都是有效的。例如，正 常情况下每天的剂量在大约0.01-30mg/kg体重的范围内。用于成年人 治疗时，特别优选的剂量范围是大约0.1-15mg/kg/天，单次或分次用 药。但是，应该认识到，本化合物的实际给药量将由医生决定，根据有 关的情况和患者症状的严重程度决定，有关的情况包括待治疗的病情， 选择的给药途径，实际给予的一个或几个化合物，患者的年龄、体重， 以及个体反应，因此，不打算以上面的剂量范围对本发明的范围作任何 形式的限制。在某些情况下，低于上述范围的下限剂量水平可能更适合， 而另一些情况下，可能使用更大的剂量也不引起任何有害的副作用，只 要将此较大的剂量先分成几个较小的剂量用于全天给药。

为了更充分地说明本发明的实施效果，将提供下面的制剂实施例。 这些实施例只是说明性的，不打算对本发明给予限制。这些制剂可能使 用本发明的任何化合物作为活性成分(化合物)。

                     制剂1

配制含有如下成分的明胶硬胶囊：

    成分                        含量(mg/胶囊)

    活性成分(一种或几种)            100.0

    淀粉                            235.0

    硬脂酸镁                        5.0

将上述成分混合，以340mg的量装入每个明胶硬胶囊。

                     制剂2

用下面的成分配制片剂：

    成分                         含量(mg/片)

    活性成分(一种或几种)           100.0

    微晶纤维素                     125.0

    胶态二氧化硅                   10.0

    硬脂酸                            5.0

将各成分混匀，模压成片剂，每片重240mg。

                    制剂3

配制含有如下成分的干粉吸入制剂：

    成分                            重量％

    活性成分(一种或几种)             5

    乳糖                             95

将活性成分与乳糖混匀，混合物被装入干粉吸入器。

                    制剂4

每片含有30mg活性成分的片剂按如下配制：

    成分                         含量(mg/片)

    活性成分(一种或几种)            30.0mg

    淀粉                            45.0mg

    微晶纤维素                      35.0mg

    聚乙烯吡咯烷酮(10％水溶液)      4.0mg

    羧甲基淀粉钠                    4.5mg

    硬脂酸镁                        0.5mg

    滑石粉                          1.0mg

    总量                            120.mg

使活性成分，淀粉和纤维素通过No.20目的U.S筛，并彻底混匀。 将聚乙烯吡咯烷酮溶液与形成的细粉混匀，然后使之通过16目的U.S. 筛。将这样产生的颗粒在50-60℃干燥，再通过16目的U.S筛。先使 羧甲基淀粉钠，硬脂酸镁和滑石粉通过No.30目U.S筛，然后将它们加 入到上面的颗粒中，混匀后在压片机上压片，产生每片重120mg的片剂。

                     制剂5

按如下制备每个含有40mg药物的胶囊：

    成分                          含量(mg/胶囊)

    活性成分(一种或几种)             40.0mg

    淀粉                             109.0mg

    硬脂酸镁                         1.0mg

    总量                             150.0mg

将活性成分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混匀，通过No.20目U.S筛， 以每个150mg的量装入明胶硬胶囊内。

                         制剂6

按如下制备每个含25mg活性成分的栓剂：

    成分                           含量

    活性成分(一种或几种)           25mg

    加饱和脂肪酸甘油酯至           2000mg

使活性成分通过No.60的U.S.筛后，悬浮在预先用最少必需热量 熔化的饱和脂肪酸甘油酯内。然后将此混合物倒入通常2.0g容量的栓剂 模具中，使其冷却。

                         制剂7

按如下配制每5.0ml剂量含有50mg药物的悬浮剂：

    成分                          含量

    活性成分(一种或几种)          50.0mg

    黄原胶                        4.0mg

    羧甲基纤维素钠(11％)

    微晶纤维素(89％)              50.0mg

    蔗糖                          1.75g

    苯甲酸钠                      10.0mg

    香料和色素                    适量

    纯水                          5.0ml

将药物，蔗糖和黄原胶混匀，通过No.10目的U.S.筛，然后与预先 溶解于水中的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠混合。以少许水稀释苯甲酸 钠，香料和色素，并加到上面的混合物中，同时搅拌。然后加入足够的 水至所需的体积。

                       制剂8

按如下制备每个含有15mg药物的胶囊：

    成分                     含量(mg/胶囊)

    活性成分(一种或几种)        15.0mg

    淀粉                        407.0mg

    硬脂酸镁                    3.0mg

    总量                        425.0mg

将活性成分，纤维素，淀粉和硬脂酸镁混匀，通过No.20目的U.S. 筛，以每个425mg的量装入明胶硬胶囊。

                      制剂9

按如下制备静脉注射制剂：

    成分                           含量

    活性成分(一种或几种)           250.0mg

    等渗生理盐水                   1000ml

                     制剂10

按如下制备局部用药制剂：

    成分                           含量

    活性成分(一种或几种)           1-10g

    乳化状蜡                       30g

    液体石蜡                       20g

    白凡士林                       至100g

将白凡士林加热至熔化。掺入液体石蜡和乳化状蜡，搅拌至溶解。 然后加入活性成分，继续搅拌至均匀分散。再使混合物冷却成固体。

                     制剂11

按如下制备每片含有10mg活性成分的舌下片或含片：

    成分                        每片含量

    活性成分(一种或几种)        10.0mg

    甘油                        210.5mg

    水                          143,0mg

    柠檬酸钠                    4.5mg

    聚乙烯醇                    26.5mg

    聚乙烯吡咯烷酮              15.5mg

    总计                        410.0mg

将甘油，水柠檬酸钠，聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮混合在一起，连 续搅拌并保持在大约90℃。当聚合物成为溶液后，使此溶液冷却至大约 50-55℃，缓慢地加入药物，使之混匀。将此均匀的混合物倒入由惰性 材料制成的模具中，制成厚度约2-4mm的含有药物的扩散基质片。然 后将此扩散基质片切制成具有适当大小的单个片剂。

另一种用于本发明方法的优选制剂是采用透皮给药法(“贴剂”)。 这种透皮性贴剂有可能用于使本发明的化合物按控制剂量连续或间断地 浸入体内。用于药剂给药的透皮贴剂，其构成和用途是本领域熟知的。 参见例如：U.S.Patent 5,023,252,1991,6.11发布的，在此引入作 为参考。这种贴剂可能被构成用于连续、间断地或者需要时给予药剂。

普遍优选的间接技术通常包括，通过将亲水性药物转变成脂溶性药 物或药物前体，把组合物配制成具有药物潜伏作用(drug latentiation)。 潜伏作用一般可通过如下处理达到：阻断存在了药物上的羟基，羰基， 硫酸基和伯氨基，使药物变成更具脂溶性，更适合于透过血-脑屏障。 另一方面，亲水性药物的给药效果可能通过高渗液的动脉内渗入作用可 暂时开放血-脑屏障而提高。

用于对本发明方法中所用化合物给药的剂型，可能取决于所使用的 特定化合物，据给药途径和化合物所预期的药物动力学分布类型，以及 患者的状况。