| 序号 | 专利名 | 申请号 | 申请日 | 公开（公告）号 | 公开（公告）日 | 发明人 |
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| 61 | 耦合机器学习结合机制引导的乙酰辅酶A合成酶改造策略及其应用 | CN202310893198.X | 2023-07-19 | CN116926025A | 2023-10-24 | 黄和; 施天穹; 李安妮; 李秀娟; 李雅文 |
| 本发明涉及基因工程领域，公开了一种耦合机器学习结合机制引导的乙酰辅酶A合成酶改造策略及其应用。该乙酰辅酶A合成酶突变体为将具有SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的酶在第112位、第184位、第223位、第256位、第260位、第360位、第449位、第469位、第504位和第612位中的至少一位进行突变。本发明还提供一种编码乙酰辅酶A合成酶突变体的基因，一种重组载体，一种重组菌株，一种乙酰辅酶A合成酶突变体的制备方法，一种酶制剂以及它们的应用。该乙酰辅酶A合成酶突变体具有优异的催化活性，在藤仓赤霉菌中过表达该突变体可有效提高赤霉素的产量。 | ||||||
| 62 | 基于模型指导提高赤霉素GA3产量的方法及应用 | CN202310866641.4 | 2023-07-14 | CN116837019A | 2023-10-03 | 黄和; 叶超; 施天穹; 钱金旖; 李雅文 |
| 本发明公开了一种基于模型指导提高赤霉素GA3产量的方法及应用，属于系统生物学领域，该方法通过首次构建得的藤仓赤霉菌基因组规模代谢网络模型，获得藤仓赤霉菌的优化培养条件与遗传改造靶点，将优化培养条件用于发酵生产赤霉素GA3，能够显著提高赤霉素GA3产量，通过过表达遗传改造靶点，构建基因工程菌，经发酵，能使赤霉素GA3产量提高75.0％。本发明的藤仓赤霉菌基因组规模代谢网络模型可用于指导藤仓赤霉菌的发酵生产，解决传统正交试验方法周期长、成本高、存在不确定性和随机性的问题。 | ||||||
| 63 | 一种合成赤霉素3的重组酿酒酵母菌株及其应用 | CN202310606617.7 | 2023-05-26 | CN116640677A | 2023-08-25 | 周景文; 李珊; 曾伟主; 陈坚; 高倩 |
| 本发明公开了一种合成赤霉素3的重组酿酒酵母菌株及其应用，属于基因工程与生物工程技术领域。本发明将关键基因KS整合于基因组位点表达，并将来源于藤仓赤霉菌的双功能二磷酸合成酶GfKS、GA碳13氧化酶GfC13ox、GA去饱和酶GfDES，来源于拟南芥的贝壳杉烷氧化酶AtKO、贝壳杉烯酸氧化酶AtKAO、GA碳3氧化酶AtC3ox和GA碳20氧化酶AtC20ox用于赤霉素3合成途径的构建，进一步通过启动子的筛选、引入电子传递系统，并融合AtKO和AtKAO进一步提高了重组酿酒酵母的赤霉素3产量，使发酵120h的产量达424.1mg/L，是目前赤霉素3在酿酒酵母中的最高产量。 | ||||||
| 64 | 提高赤霉菌中赤霉素GA3含量的方法 | CN202211616720.1 | 2022-12-16 | CN115595352B | 2023-03-28 | 黄和; 施天穹; 郭琪; 聂志奎; 孙小曼 |
| 本发明涉及微生物发酵领域，公开了一种提高赤霉菌中赤霉素GA3含量的方法。该方法包括：将赤霉菌接入到含有调节因子的培养基中进行发酵；所述调节因子选自氯贝丁酯、芳氧苯氧丙酸酯、烯草酮和环己二酮中的至少一种。该方法能够有效提高赤霉菌中赤霉素GA3的含量，进而提高赤霉素GA3的产量。 | ||||||
| 65 | 一种高产赤霉素GA3的基因工程菌、构建方法及应用 | CN202211123064.1 | 2022-09-15 | CN115786140A | 2023-03-14 | 柳志强; 柯霞; 王浩南; 贾瑞; 郑裕国 |
| 本发明涉及一种高产赤霉素GA3的基因工程菌、构建方法及应用。本发明通过增强表达藤仓赤霉菌中编码细胞色素P450还原酶CPR的基因和编码透明颤菌血红蛋白VHB的基因，增强赤霉素合成过程中的溶氧水平，增强了电子传递链的供应。本发明提供的高产赤霉素GA3的重组藤仓赤霉菌，经过改造后的重组藤仓赤霉菌相比于野生型增强了代谢后期氧化能力，提高了代谢过程的合成能力，提升了菌丝量的积累，能够更好的利用营养物质进行赤霉素GA3的生产，经过改造后性能最优的菌株在发酵产赤霉素GA3的水平相比于出发菌株从2g/L提高到3.45g/L，显著提升赤霉素GA3生产能力，并且菌丝量的提升可以增加赤霉素GA3合成的时空产率，可应用于大规模赤霉素GA3生产中。 | ||||||
| 66 | 解磷菌3-1及在产植物生长激素上的应用 | CN202111123664.3 | 2021-09-24 | CN113652378B | 2023-03-10 | 郭金玲; 孙语健; 方成; 龚大春; 吕育财; 任立伟; 杨潇 |
| 本发明涉及农业和微生物技术领域，公开了一株高耐盐耐重金属镉的解磷菌3‑1及其应用。所述菌株为路氏肠杆菌（Enterobacter ludwigii strain 3‑1）于2021年6月18日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号：CCTCC M 2021734。本发明的解磷菌3‑1（Enterobacter ludwigii strain 3‑1）具有溶磷、固氮、产植物生长激素、促进植株生长的作用，可应用于高盐度和高重金属浓度的土壤。将其应用于土壤和植物幼苗，可显著提高土壤有效磷的含量，大幅度增加植株的株高、湿重、干重和根茎长度，对农业生产及可持续发展具有重要的意义。 | ||||||
| 67 | 提高赤霉菌中赤霉素GA3含量的方法 | CN202211616720.1 | 2022-12-16 | CN115595352A | 2023-01-13 | 黄和; 施天穹; 郭琪; 聂志奎; 孙小曼 |
| 本发明涉及微生物发酵领域，公开了一种提高赤霉菌中赤霉素GA3含量的方法。该方法包括：将赤霉菌接入到含有调节因子的培养基中进行发酵；所述调节因子选自氯贝丁酯、芳氧苯氧丙酸酯、烯草酮和环己二酮中的至少一种。该方法能够有效提高赤霉菌中赤霉素GA3的含量，进而提高赤霉素GA3的产量。 | ||||||
| 68 | 一种赤霉素GA4的发酵工艺 | CN202211304462.3 | 2022-10-24 | CN115491401A | 2022-12-20 | 聂志奎; 黄和; 施天穹; 周金龙; 谌鹏飞; 周圣骄; 聂波; 廖海兵 |
| 本发明公开了一种赤霉素GA4的发酵工艺，其中涉及一株产赤霉素GA4的菌株，该菌株分类命名为：藤仓赤霉(Fusarium fujikuroi)NRF01，已于2022年5月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO.M2022683)，发酵过程采取分阶段控制发酵条件，流加补糖控制发酵液总糖浓度在0.5‑1.0％，流加补氮源控制发酵液氨基氮浓度在84‑126mg/L，发酵5‑7天，赤霉素GA4发酵水平为2186mg/L，本发明提供了一种赤霉素GA4发酵工艺及其应用研究，该菌株能够在较短发酵周期内产生较高产量的赤霉素GA4。通过对该菌株的逐级培养，发酵过程采取分阶段控制发酵条件，流加补糖控制发酵液总糖浓度，流加补氮源控制发酵液氨基氮浓度。 | ||||||
| 69 | 一种CRISPR/Cpf1基因编辑系统及其构建方法和在赤霉菌中的应用 | CN202110965413.3 | 2021-08-20 | CN113584033B | 2022-07-01 | 黄和; 施天穹; 杨彩玲; 沈琦; 彭倩倩 |
| 本发明公开了一种CRISPR/Cpf1基因编辑系统及其构建方法和在赤霉菌中的应用，该系统为骨架质粒pCpf1Ff‑DR，包括Fncpf1基因、功能性crRNA基因、启动子pGPD、启动子pTRPC、强RNA聚合酶III型启动子5srRNA、潮霉素筛选标记hph。本发明系统效率高、通用性强、易于操作而被迅速应用于丝状真菌赤霉菌中，通过该基因编辑系统可用于赤霉菌中实现长达17kb的比卡菌素基因簇的敲除。本发明首次在赤霉菌中实现大片段基因敲除，且首次发现比卡菌素基因簇敲除有利于提高赤霉素产量，该方法有望进一步用于改造赤霉素工业菌，缩短菌株升级的时间，为提高赤霉素产量、增加经济效益提供了强有力保障。 | ||||||
| 70 | 一种利用植物油改善赤霉素发酵的装置及方法 | CN201910516976.7 | 2019-06-14 | CN110229744B | 2022-06-28 | 林海萍; 袁静; 祝金山; 陈杰; 陆建卫; 司文; 尹良鸿; 张心齐; 王冰璇 |
| 本发明涉及微生物领域，具体的说是一种利用植物油改善赤霉素发酵的装置及方法，包括容纳结构；搅拌结构；驱动结构，所述容纳结构的内部上安装有滴油机构；所述滴油机构包括压块、弹簧、推杆、加油口、出油口和储油室，所述加油口设置在所述容纳结构的外侧壁上，且所述加油口与所述储油室内部连通，且所述储油室的底部设有出油口；所述储油室为橡胶材质制作，所述储油室与容纳结构之间设有推杆，且所述推杆的外侧壁上安装有弹簧，且所述推杆的一端连接有压块，且圆球形的所述压块的顶部与搅拌叶底部的凸起抵触。本发明提供的利用植物油改善赤霉素发酵的装置及方法具有减少赤霉素发酵过程中产生的泡沫，同时提高赤霉素发酵效率的优点。 | ||||||
| 71 | 高产赤霉素GA3的基因工程菌、构建方法及应用 | CN202210232658.X | 2022-03-10 | CN114517161A | 2022-05-20 | 柳志强; 王浩南; 柯霞; 黄良刚; 郑裕国 |
| 本发明涉及一种高产赤霉素GA3的基因工程菌、构建方法及应用。本发明通过增强表达藤仓赤霉菌中表达氮源调控因子AreA的基因和全局调控因子Lae1的基因，增强其对赤霉素合成代谢路径中相关基因的正向调控作用，提高了相关基因的转录水平，提高了赤霉素GA3的积累。本发明提供的高产赤霉素GA3的重组藤仓赤霉菌，经过改造后的重组藤仓赤霉菌相比于野生型增强了GA基因簇整体转录水平，提高了代谢过程的合成能力，削弱了GA3合成相关基因的转录抑制，能够更好的利用碳源物质、氮源物质进行赤霉素GA3的生产，经过改造后性能最优的菌株在发酵产赤霉素GA3的水平相比于出发菌株从2 g/L提高到3.25 g/L，显著提升赤霉素GA3生产能力，可应用于大规模赤霉素GA3生产中。 | ||||||
| 72 | 一种赤霉酸GA3≧7.5g/L的发酵方法 | CN202111157597.7 | 2021-09-30 | CN113817794A | 2021-12-21 | 景飞江; 王敏; 熊仁科; 吴红波; 张俊; 左建英; 徐旭; 杨怀亮; 李玉婷 |
| 本申请公开了一种赤霉酸GA3≧7.5g/L的发酵方法，该发酵方法的空气流量为变速空气流量，该发酵方法的发酵培养基包括：玉米蛋白粉1～9重量份；磷酸二氢钾1～10重量份；小分子有机碳源1～30重量份；植物油0.5～5重量份；硫酸镁0.5～2重量份；硫酸铵0.5～2重量份；微量元素0.1～1重量份；大豆蛋白1～10重量份；麦麸1～9重量份；以及吐温0.001‑0.5重量份。本申请发酵方法发酵出中霉酸含量≧7.5g/L。 | ||||||
| 73 | 一种高产赤霉酸的发酵培养基及高产赤霉酸的发酵方法 | CN202111157167.5 | 2021-09-30 | CN113755343A | 2021-12-07 | 景飞江; 王敏; 熊仁科; 吴红波; 张俊; 左建英; 徐旭; 杨怀亮; 李玉婷 |
| 本申请公开了一种高产赤霉酸的发酵培养基及高产赤霉酸的发酵方法，该高产赤霉酸的发酵培养基包括：玉米蛋白粉1～9重量份；磷酸二氢钾1～10重量份；小分子有机碳源1～30重量份；植物油0.5～5重量份；硫酸镁0.5～2重量份；硫酸铵0.5～2重量份；微量元素0.1～1重量份；以及大豆蛋白1～10重量份。本申请发酵培养基能提高发酵液中GA3的含量。 | ||||||
| 74 | 解磷菌3-1及在产植物生长激素上的应用 | CN202111123664.3 | 2021-09-24 | CN113652378A | 2021-11-16 | 郭金玲; 孙语健; 方成; 龚大春; 吕育财; 任立伟; 杨潇 |
| 本发明涉及农业和微生物技术领域，公开了一株高耐盐耐重金属镉的解磷菌3‑1及其应用。所述菌株为路氏肠杆菌（Enterobacter ludwigii strain 3‑1）于2021年6月18日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号：CCTCC M 2021734。本发明的解磷菌3‑1（Enterobacter ludwigii strain 3‑1）具有溶磷、固氮、产植物生长激素、促进植株生长的作用，可应用于高盐度和高重金属浓度的土壤。将其应用于土壤和植物幼苗，可显著提高土壤有效磷的含量，大幅度增加植株的株高、湿重、干重和根茎长度，对农业生产及可持续发展具有重要的意义。 | ||||||
| 75 | 赤霉酸的发酵方法 | CN201810048112.2 | 2018-01-18 | CN108285915B | 2021-07-23 | 刘健; 杨宝强; 沈颂娣; 熊仁科; 齐昊; 景飞江 |
| 本发明提供了一种赤霉酸的发酵方法，包括：将赤霉酸的种子液转入发酵罐中进行发酵，得到赤霉酸发酵液；在发酵过程中当溶氧高于20％时，补加葡萄糖与植物油。与现有技术相比，本发明在发酵过程中采用糖油混补，提高了产酸量，同时以玉米蛋白粉作为有机氮源，其蛋白质含量较高，达50％以上，能够实现赤霉素高密度发酵，且能够避免如花生饼粉产生黄曲霉的隐患，保证菌体的合成与代谢，使其能够快速稳定的发酵；再者，添加植物油不仅能够为发酵提供碳源，还可有效减少发酵气泡逃液等情况的发生，避免了物料损失、染菌等潜在风险；另外，在发酵培养基中添加微量元素能够全面保证微生物生长代谢过程中各类酶与代谢物的活性。 | ||||||
| 76 | 用于生产赤霉酸的发酵培养基 | CN201810048034.6 | 2018-01-18 | CN108004290B | 2021-06-29 | 刘健; 杨宝强; 沈颂娣; 熊仁科; 齐昊 |
| 本发明提供了一种用于赤霉酸的发酵培养基，包括：玉米蛋白粉10～40g/L；磷酸二氢钾1～10g/L；小分子有机碳源5～30g/L；植物油0.5～5g/L；硫酸镁0.5～2g/L；硫酸铵0.5～2g/L；微量元素0.1～1g/L。与现有技术相比，本发明以玉米蛋白粉作为有机氮源，其蛋白质含量较高，达50％以上，能够实现赤霉素高密度发酵，且能够避免如花生饼粉产生黄曲霉的隐患，保证菌体的合成与代谢，使其能够快速稳定的发酵；添加植物油不仅能够为发酵提供碳源，还可有效减少发酵气泡逃液等情况的发生；在发酵培养基中添加微量元素能够全面保证微生物生长代谢过程中各类酶与代谢物的活性。 | ||||||
| 77 | 一株利用ARTP诱变技术选育的藤仓赤霉菌突变株及应用 | CN201910438160.7 | 2019-05-24 | CN110527630B | 2021-04-20 | 柳志强; 蒋欢; 张博; 郑裕国 |
| 本发明涉及一种利用ARTP诱变技术选育的藤仓赤霉突变株——水稻恶苗病菌GA‑347(Fusarium fujikuroi GA‑347)及其应用，本发明的菌株命能大规模应用于工业化生产。该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，邮编430072，保藏编号：CCTCC NO：M 2019378，保藏日期2019年5月20日。本发明菌株生长过程中不产生分生孢子，接种到液体种子培养基中，待细胞长成熟后，转接到发酵培养基中，发酵水平大幅度提高，赤霉素产率达到野生菌的22倍，为国际领先。赤霉素在胞外分泌，可直接从发酵液汇总获取，有利于固液分离，提取收率升高。同时，提高了设备和原料的利用率，大大降低了生产成本，具有显著的经济效益与社会效益。 | ||||||
| 78 | 一种使用MVR工艺浓缩的赤霉酸提取方法 | CN201811596456.3 | 2018-12-26 | CN109776467A | 2019-05-21 | 姜国平; 孙银龙; 钱永根; 姜加杰 |
| 本发明涉及一种使用MVR工艺浓缩的赤霉酸提取方法，包括：步骤1)赤霉酸菌种的发酵；步骤2)将步骤1中的发酵液过滤，分别得到滤液和滤渣；步骤3)将步骤2中的滤液通过MVR工艺进行浓缩，得到浓缩液；步骤4)将步骤3中的浓缩液使用乙酯浸提，后分离乙酯，得到赤霉酸粗品；步骤5)将步骤4中的粗品进行后处理，得到赤霉酸成品。本发明在赤霉酸提取浓缩过程中应用MVR，在国内外为首例，其意义在于促进赤霉酸工艺的发展，以高质量产品、低价格的产品回馈于农，有利于提高农民收入，促进农业增效、农民增收。 | ||||||
| 79 | 赤霉酸种子液的制备方法 | CN201810048047.3 | 2018-01-18 | CN107974413A | 2018-05-01 | 刘健; 杨宝强; 沈颂娣; 熊仁科; 齐昊 |
| 本发明提供了一种赤霉酸种子液的制备方法，包括：将冷冻保藏的GA3菌种接入至种子培养基中进行摇瓶培养，得到悬浮液；将所述悬浮液转入种子罐中进行发酵培养，得到种子液；所述种子罐的培养基包括5～15g/L第二有机氮源、5～15g/L第二小分子有机碳源、1～5g/L磷酸二氢钾、0.1～1g/L硫酸镁与0.1～1g/L聚丙二醇。与现有技术相比，本发明将冷冻菌种直接接入摇瓶，避免了斜面活化剂在斜面生长过程中出现的菌种变异风险，冷冻管能很好地保持菌种的平行性，缩短种子液制备时间，从而保证后续扩大生长的稳定性。 | ||||||
| 80 | 一种发酵法生产赤霉素A |
CN201710316511.8 | 2017-05-08 | CN107177659A | 2017-09-19 | 吴烨飞; 陆建卫; 沈波 |
| 本发明公开了一种发酵法生产赤霉素A7的方法，利用赤霉素A4发酵生产用菌种通过改变培养基组成、发酵工艺控制，代谢途径向积累赤霉素A7转变，赤霉素A7发酵水平达到1039mg/L，特别的，赤霉素A7占赤霉素A4+7混合物的90％以上，所述菌种于2015年7月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号：CGMCC NO.11101，分类命名为：藤仓镰刀菌，菌种拉丁学名为：Fusarium fujikuroi。本发明中根据赤霉素A4与赤霉素A7转化机制，通过改变培养基组成及工艺条件，使其代谢途径由累积赤霉素A4向累积赤霉素A7转变，使得发酵终产物中赤霉素A7含量占赤霉素A4+7混合物的90％以上。 | ||||||
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