一种消除底物毒性的方法
专利汇可以提供一种消除底物毒性的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及利用固定化载体对有毒底物进行固定化，然后用固定化底物替代传统的游离底物进行反应可有效消除底物对催化剂的毒害作用，大幅度提高目的产物产量的方法。它包括固定化载体的选择，固定化底物的制备，反应条件优化，产物分离纯化和固定化载体的回收及循环使用等工艺步骤。采用本发明可有效消除底物对 生物 催化剂的毒害作用，提高了催化剂对有毒底物的耐受度，延长了催化剂的使用寿命，简化了后续产物分离纯化工艺，并减少了生产过程中有毒 废 水 的排放；具有产量高、生产工艺简单、催化剂使用寿命长、环境友好等优点，大大降低了目的产物生产成本，为实现底物对生物催化剂具有毒害作用的目的产物的大规模低成本生产奠定了 基础 。，下面是一种消除底物毒性的方法专利的具体信息内容。
1.一种消除底物毒性的方法,其特征在于:用固定化载体对有毒底物进行固定化，然后用固定化底物替代传统的游离底物进行反应可有效消除底物对催化剂的毒害作用，大幅度提高产物产量，该方法由下列工艺步骤组成：
（1）固定化底物的制备，其中包括固定化载体的选择和底物的固定化；
（2）加入固定化底物进行催化反应；
（3）产物的分离纯化；
（4）固定化载体的重复使用。
2.根据权利要求1所述的一种消除底物毒性的方法，其特征在于：所述的（1）步骤中固定化载体为壳聚糖及其改性，纤维素及其衍生物，有机合成聚合物，凝胶材料，磁性微粒，无机材料，丝素或甲壳素。
3.根据权利要求1所述的一种消除底物毒性的方法，其特征在于：所述的（1）步骤中底物的固定化方法为吸附法，共价结合法，交联法或包埋法。
4.据权利要求1或2所述的一种消除底物毒性的方法，其特征在于：所述的有机合成聚合物为大孔吸附树脂，离子交换树脂，接枝聚合物或β-环糊精聚合；凝胶材料为卡拉胶，聚乙烯醇，海藻酸钙凝胶，烯丙基葡聚糖树脂凝胶，微乳液凝胶或明胶；无机材料为硅胶，硅藻土，活性炭，CaCO3粉末，蛋壳，二氧化钛，陶瓷拉西环或膨润土基多孔粘土材料。
5.根据权利要求1所述的一种消除底物毒性的方法，其特征在于：所述的（2）步骤中催化反应为酶催化反应，细胞催化反应或有机催化反应。
6.根据权利要求1所述的一种消除底物毒性的方法，其特征在于：所述的（3）步骤中产物为固定在载体上或在反应体系中，产物分离纯化可以采用洗脱、萃取、离交或蒸馏。
7.根据权利要求1或6所述的一种消除底物毒性的方法，其特征在于：所述的催化体系为无机催化体系如水溶液或有机催化体系如正己烷。
8.根据权利要求1所述的一种消除底物毒性的方法，其特征在于：所述的（4）步骤中的固定化载体的使用寿命为50-300个周期。
一种消除底物毒性的方法
技术领域
背景技术
发明内容
（2）加入固定化底物进行催化反应；
（3）产物的分离纯化；
（4）固定化载体的重复使用。
根据有毒底物的理化性质选择该底物最适的固定化载体，然后对固定化过程中涉及的固定化温度、底物溶液pH、搅拌转速、底物浓度及固定化时间等条件进行优化，确定最佳的固定化条件。
如此重复循环，固定化载体的使用寿命可达50-300个周期。
（1）利用固定化底物提高生物催化剂对有毒底物的耐受度，提高单位体积反应液中底物浓度，进而提高目的产物的产率，降低目的产物的生产成本，使大规模生产目的产物成为了可能；
（2）通过采用固定化底物替代传统的游离底物，消除了底物对生物催化剂的毒性，避免了生物催化剂酶活的下降并延长其使用寿命；
（3）在反应结束后，未反应的有毒底物依然固定在载体上，反应液中没有有毒底物的存在，从而减少有毒废水的排放，对环境不造成任何污染。
具体实施方式
根据底物对苯二酚含有两个酚羟基的理化性质，选择大孔吸附树脂作为固定化载体。
首先制得质量百分比浓度为10％的对苯二酚水溶液；然后往每100 ml对苯二酚水溶液加入10 g预处理好的大孔吸附树脂如NKA-9、NKA-II、S-8、AB-8、D201、D3520、D4006、D4020、H1020、H103、H107、X-5、NKA-II、X-5、YWD01B、HPD100、HPD450、HPD600或HPD700在温度为
10-40 ℃转速为100-150 r/min的摇床上固定化1-5 h；最后把吸附好的树脂用滤纸过滤，并用去离子水清洗树脂表面1-3次以洗净残留在树脂表面的对苯二酚溶液，即制得吸附量为0.1-1 g对苯二酚/g树脂的固定化底物对苯二酚。
在4-羟苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷合成反应中，使用的菌种为野油菜黄单胞菌（Xanthomonas campestris）CGMCC NO.1243；挑取1环斜面保存的野油菜黄单胞菌，加入到体积为250 ml的液体培养基中，在温度为20-30 ℃，转速为100-200 r/min摇床中培养
10-20 h后即制得菌体发酵液。
② 把经过①步骤的大孔吸附树脂用体积百分比浓度为1-90%的酒精进行洗脱，收集洗脱液；
③ 把经过②步骤的洗脱液进行真空浓缩，在浓缩到产品处于饱和状态时，放入温度为
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