技术领域

本发明涉及由取代的3-苯基-1-(苯基噻吩基)丙-1-酮类以及取 代的3-苯基-1-(苯基呋喃基)丙-1-酮类所衍生的化合物、涉及包括它 们的药物组合物、并涉及它们尤其是在人类以及动物健康领域的治 疗应用。

诸位发明人已经出人意料地证明根据本发明的这些化合物内 在地具有PPAR(过氧化物酶体增殖物激活受体)激动剂的特性。

因此，在本发明中所说明的这些分子对于治疗与以下病症相关 的并发症是特别令人感兴趣的：代谢性综合征、动脉硬化、心血管 疾病、胰岛素抵抗、肥胖症、高血压、糖尿病、血脂障碍、炎性疾 病(哮喘等)、脑缺血、自身免疫性疾病、神经退行性病状(阿耳 茨海默氏病等)、癌症等，连同使整体性心血管危险降低。优选地， 根据本发明的这些化合物可以用于血脂障碍的治疗以及整体性心 血管危险的改善。

糖尿病、肥胖症以及血脂障碍(高血浆水平的LDL胆固醇以 及甘油三酯、低血浆水平的HDL胆固醇等)是已清楚地鉴定的心 血管危险因素，这些心血管危险因素使个体容易患心血管的病状 (Mensah M，2004)。这些危险因素被加至与生活方式有关的危险 因素(如吸烟、身体不活动以及不平衡的膳食)中。这些不同的因 素之间存在协同效应：它们中的几个同时存在导致心血管危险的显 著加重，于是讨论心血管疾病的整体性危险是适当的。在主要的发 达国家中血脂障碍的患病率2004年已达到了人口的43.6％。目前表 现出净增长的糖尿病的患病率在心血管疾病的流行病学中即将变 得越来越显著：实际上据估计到2010年糖尿病的患病率为人口的 7.6％(Fox-Tucker J，2005)。

根据国际动脉硬化协会(International Atherosclerosis Society， 2003)，心血管疾病代表在工业化国家中死亡率的主要原因，并且 在发展中国家中正变得越来越常见。特别是，这些疾病是冠状动脉 性疾病、脑缺血以及外周动脉的疾病。

因此这些资料表明了采取有力措施来显著减小由于心血管病 状而产生的发病率以及死亡率的合理性；并且对于发现作用于心血 管疾病的这些危险因素并作用于其后果的有效治疗(作为对改变成 更健康的生活方式的补充)的需要现在正成为一个全球性紧急事 件。

由于根据本发明的这些化合物作为PPAR激动剂的特性，它们 对于治疗与脂类和/或碳水化合物代谢的紊乱有关的病状(如糖尿 病、肥胖症、血脂障碍、或炎症)连同对于降低整体性心血管的危 险是特别令人感兴趣的。

的确，已知PPAR(α、γ以及δ)与这种类型的病状有关(Kota BP et al.，2005)：出售这些受体的配体用于治疗此类病状(Lefebvre P et al.，2006)，并且许多PPAR调节剂、激动剂或拮抗剂(选择性 的或非选择性的)目前处于药物开发的晚期。对胰岛素抵抗、肥胖 症、血脂障碍、高血压和/或炎症具有有益作用的PPAR调节剂可被 用于治疗代谢性综合征(或综合征X)(Liu Y and Miller A，2005)。

PPAR家族包括三个同种型，被称为为α、γ以及δ(也称为β)， 各自均由一个不同的基因进行编码。这些受体形成部分的核受体以 及转录因子的超家族，这些核受体以及转录因子通过结合某些脂肪 酸和/或它们的脂类代谢产物而被激活。被激活的PPAR与9-顺式维 甲酸的受体(RXR或维甲类X受体)形成异源二聚体，并且在其 靶基因的启动子处附联于特定的应答元件(PPRE或过氧化物酶体 增殖物应答元件)，因而允许对转录进行控制。

PPARα主要控制脂类代谢(肝脏的以及肌肉的)以及葡萄糖稳 态，这是通过直接控制对涉及脂类稳态的蛋白进行编码的这些基因 的转录实现的。它发挥了抗炎以及抗增殖的效应，并通过刺激胆固 醇的外流来阻止巨噬细胞中胆固醇累积的促动脉粥样硬化作用 (proatherogenic effect)(Lefebvre P，Chinetti G，Fruchart JC and Staels B，2006)。因此，贝特类药物(非诺贝特、苯扎贝特、环丙贝 特、吉非贝齐)通过媒介物PPARα在通过降低甘油三酯水平并提高 HDL胆固醇(HDL：高密度脂蛋白)的血浆水平治疗某些血脂障碍 中找到了临床应用。

PPARγ参与了成熟的脂肪细胞(脂肪形成的一种关键调节剂) 的脂类代谢、葡萄糖稳态(特别是胰岛素抵抗)、炎症、在巨噬细 胞水平的胆固醇的累积以及细胞增殖(Lehrke M and Lazar MA， 2005)。所以PPARγ在肥胖症、胰岛素抵抗以及糖尿病的发病机理 中发挥作用。噻唑烷二酮类(罗格列酮、曲格列酮等)是在2型糖 尿病的治疗中所使用的PPARγ受体的配体。

目前在临床开发中存在PPARδ配体(例如GW501516(CAS 登记号317318-70-0))，但目前没有PPARδ配体作为药物而使用。 这种受体对于开发在与代谢性综合征以及动脉硬化有关的危险因 素(如血脂障碍、肥胖症、炎症以及胰岛素抵抗)的治疗中使用的 药物而言是一种有吸引力的靶点。PPARδ的确参与了脂类以及碳 水化合物代谢的控制、能量平衡、神经元的增殖与分化、以及炎症 应答有关(Gross B et al.，2005)。

除了PPAR配体的在脂类和碳水化合物代谢的调节中的直接作 用之外，这些分子由于这些PPAR靶基因的靶基因的巨大的多样性 而具有一系列的多效作用。这些多重特性使得PPAR成为用于治疗 不同病状(特别是心脏-代谢性病状(即，心血管以及代谢的病状)) 连同用于降低整体性心血管危险的感兴趣的治疗靶点。

PPAR配体在以下病症中具有神经保护作用：阿耳茨海默氏病， 多发性硬化症，帕金森病，并且更普遍的是涉及神经元的死亡或退 化的任何病状，不管它们是中枢神经系统或是外周神经系统的神经 元、少突胶质细胞的死亡或退化、神经胶质细胞的死亡或退化、神 经胶质细胞(即星形胶质细胞、小胶质细胞或少突胶质细胞)或者 许旺细胞的炎症。因此，最近表明PPARδ激动剂使之有可能在已 被诱导阿耳茨海默氏病的大鼠中保存学习和记忆(de la Monte SM et al.，2006)。也已经表明在一个多发性硬化症的模型中PPARδ激 动剂的口服给药减少了临床症状以及星形神经胶质与小胶质炎症 的激活(Polak，2005)。

因此，根据本发明的这些化合物由于其PPAR激动剂特性代表 了一种有利的治疗手段，用于改善与脂类的分布和/或碳水化合物代 谢有关的病状、降低整体性心血管危险、连同用于神经保护作用。

特别是，根据本发明的这些化合物拥有PPARδ以及PPARα激 动剂的特性，并因此在代谢性病状以及血脂障碍的治疗中是令人感 兴趣的，所述代谢性病状例如代谢性综合征(其特征是肥胖症(特 别是腹部肥胖)、血脂浓度异常(高水平的甘油三酯和/或低水平的 HDL胆固醇(血脂障碍))、糖血增高和/或胰岛素抵抗以及高血压)。

本发明涉及具有通式(I)的取代的3-苯基-1-(苯基噻吩基)丙 -1-酮类以及3-苯基-1-(苯基呋喃基)丙-1-酮类衍生的化合物：

其中：

X1代表一种卤素、一个R1、-SR1或-OR1基团；

X2代表一个硫原子或一个氧原子；

X3代表一种卤素、一个R3、-SR3或-OR3基团；

X4代表一种卤素、一个R4、-SR4或-OR4基团；

X5代表一个R5、-SR5或-OR5基团；

X6代表一种卤素、一个R6、-SR6或-OR6基团；

X7代表一种卤素、一个R7、-SR7或-OR7基团；

X8代表一个R8基团；

R1、R3、R4、R6、R7以及R8(它们可以是相同的或者是不 同的)代表一个氢或一个烷基基团；

R5代表由组1的或组2的一个或多个取代基所取代的一个烷 基基团；

除了以上所说明的一种或多种取代之外，R5可由如以下所限 定的基团取代：一个环烷基、杂环烷基、芳基、或杂芳基的基团；

A代表：

(i)一个羰基基团(CO)，

(ii)一个肟基团(C＝N-O-H)或肟醚基团(C＝N-O-R11)，

(iii)一个-CR9R10基团(R9和R10是不同的)代表一个氢、 一个烷基基团、或一个-OR11基团，

R11代表一个氢或一个如以下所限定的芳基、杂环烷基、或杂 芳基的基团，或一个烷基基团，该烷基基团由如以下所限定的一个 环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基的基团所取代或未被取代；

B代表：

(i)具有两个碳原子的一个未取代的饱和的烷基基团 (CH2-CH2)，

(ii)具有两个碳原子的一个未取代的烯基团(CH＝CH)，

(iii)具有两个碳原子的一个炔基团(C≡C)；

组1的这些取代基是选自-COOR12和-CONR12R13；

组2的这些取代基是选自-SO3H和-SO2NR12R13；

R12和R13(它们可以是相同的或者是不同的)代表一个氢或 一个未取代的烷基的基团；

它们的纯的或混合的立体异构体(非对映异构体、对映异构 体)，消旋混合物，几何异构体，互变异构体，盐类，水合物类， 溶剂化物类，多种固体形式以及它们的多种混合物。

在本发明的范围之内：

-术语“烷基”表示一个饱和的、直链的、支链的、卤化的或 未卤化的烃基团，该烃基团具有更特别地从1至24个碳原子、优 选从1至10个，并且具有更特别地1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个碳原子。例如，我们可以提及甲基、三氟甲基、乙基、正 丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基 或正己基的基团。

特别地，具有1至4个碳原子的烷基或链烯基的基团优选地是 选自下组，该组包括：甲基、乙基、正丙基、正丁基、异丙基、仲 丁基、异丁基、叔丁基以及具有至少一个双键(如特别是：CH＝CH) 的它们的不饱和衍生物。

-术语“环烷基”表示如以上所限定的并形成至少一个环的烷 基。作为具有从3至8个碳原子的环烷基基团，我们可以提及环丙 基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基以及环辛基。

-术语“杂环烷基”表示一个饱和或不饱和的烷基基团，该烷 基基团形成被一个或多个杂原子断开的至少一个环，这个或这些杂 原子选自N、O、S或P。作为杂环烷基基团，我们可以提及氮丙啶、 吡咯烷、四氢噻吩、咪唑啉、哌啶、哌嗪以及吗啉。

-术语“芳基”指优选包括5至14个碳原子、有利的是6至 14个碳原子(即6、7、8、9、10、11、12、13或14个碳原子)的 芳香基团。它们总体上是单环或二环的。我们可以提及例如苯基、 苄基、α-萘基、β-萘基、蒽基或芴基。在本发明的范围内，芳基基 团可由一个或多个取代基取代，这些取代基可以是相同的或者是不 同的。在这些芳基基团的取代基中，作为实例，我们可以提及卤素； 烷基基团(如以上所定义)以及烷氧基基团(被定义为通过一个氧 (醚键)键合至该分子的一个烷基链(如以上所定义))，烷硫基基 团(被定义为通过一个硫(硫醚键)键合至该分子的一个烷基链(如 以上所定义))，如甲基、三氟甲基、甲氧基和三氟甲氧基、甲硫基 和三氟甲硫基；胺类；硝基基团；羟基基团；芳基的、杂芳基的以 及杂环的基团。

-术语“杂芳基”指优选包括3至14个碳原子、有利的是3 至8个碳原子(即3、4、6、7或8个碳原子)的芳香基团，这些 芳香基团被一个或多个杂原子断开，这个或这些杂原子选自N、O、 S或P。作为具有3至8个碳原子的杂芳基基团，我们可以提及如 吡咯、咪唑、以及吡啶。

在杂芳基的取代基中，我们可以提及例如卤素、烷基基团(如 以上所定义)以及烷氧基基团(被定义为通过一个氧(醚键)键合 至该分子的一个烷基链(如以上所定义))、烷硫基(被定义为通过 一个硫(硫醚键)键合至该分子的一个烷基链(如以上所定义))。 这些取代基的实例是甲基、三氟甲基、甲氧基和三氟甲氧基、甲硫 基和三氟甲硫基、胺类、硝基基团、羟基基团、芳基的、杂芳基的 以及杂环的基团。

卤素原子是选自溴、氟、碘、以及氯原子。

在本发明的范围内，在通式(I)中，从原子X2开始对环II的 原子进行编号，原子X2编号为1，从键合至基团A-B的环II的碳 原子开始对该环其他原子进行编号。因此，键合至基团A-B的环II 的碳原子是碳2(或C2)，与C2相邻的碳是碳3(或C3)等。

本发明的一个特别的方面涉及具有通式(I)的化合物，其中A 代表一个羰基基团(CO)。

本发明的另一个特别的方面涉及具有通式(I)的化合物，其中 A代表一个肟基团(C＝N-O-H)或肟醚基团(C＝N-O-R11)，R11 代表一个支链或直链的烷基基团，特别是代表具有1至7个碳原子 的一个烷基基团，该烷基基团由一个环烷基、杂环烷基、芳基或杂 芳基的基团取代或未被取代。优选地，R11代表一个甲基基团。

在一个特定的实施方案中，当A代表一个C＝N-O-R11基团时， R11是具有1至7个碳原子的一个烷基基团，该烷基基团由一个芳 基基团(特别是由一个苯基基团)取代。更优选地，R11是由一个 苯基基团取代的甲基基团，换言之R11是一个苄基基团。

本发明的另一个特别的方面涉及具有通式(I)的化合物，其中A代 表一个-CR9R10基团，R9代表一个氢，并且R10代表一个羟基基 团、一个烷基基团或一个-OR11基团，R11代表一个烷基基团，该 烷基基团由一个环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基的基团取代或未 被取代。所述烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基的基团任选 地被卤化。

特定地，R11代表一个直链或支链的烷基基团，该烷基基团具 有1至7个碳原子，优选1、2、3或4个碳原子，优选1或2个碳 原子，有利的是R11代表甲基或乙基的基团。例如，R11还可以是 一个异丙基。

有利的是，R11由一个环烷基基团(特别是环己基)、一个芳 基基团(特别是苯基)、一个杂环或杂芳基的基团(特别是吡啶基) 取代，所述环烷基、芳基、杂环或杂芳基的基团任选地被卤化。甚 至更选地，R11代表一个烷基基团，该烷基基团优选地包括一个碳 原子，由一个苯基、碘代苯基、环己基、或吡啶基的基团取代。

本发明的一个特别的方面涉及具有通式(I)的化合物，其中A 代表一个-CR9R10基团，R9代表一个氢，并且R10代表一个羟基 基团。

本发明的一个特别的方面涉及具有通式(I)的化合物，其中B 代表一个未取代的、饱和的烷基基团，该烷基基团包括两个碳原子 (CH2-CH2)。

本发明的另一个特别的方面涉及具有通式(I)的化合物，其中 X5代表一个R5、-OR5或-SR5的基团，R5代表一个烷基基团，该 烷基基团由组1的一个取代基取代。

甚至更优选地，X5代表一个-OR5基团，其中R5代表一个烷 基基团，该烷基基团由组1的一个取代基取代。优选地，该取代基 基团1是-COOR12。

优选地，R5代表一个烷基基团，该烷基基团从具有1至4个 碳原子的一个饱和的直链碳链形成，所述链通过它在苯基基团(III) 对面的末端键合至组1的一个取代基。所述链可以是具有至少一个 烷基或链烯基的基团的分支的，该烷基或链烯基的基团具有1至4 个碳原子、或由一个苯基基团取代。

优选地，R12和R13(它们可以是相同的或者是不同的)代表 一个氢或具有1至4个碳原子的一个烷基基团。

优选地，组1的取代基是-COOR12类型，R12如以上被定义并 任选地代表一个氢或一个烷基基团，该烷基基团包括1、2、3、4、 5或6个碳原子，优选包括1、2、3或4个碳原子，特别是一个叔 丁基基团。

在本发明的一个特别的方面，X5选自以下基 团：-OC(CH3)2COOR12、-OCH(CH2CH3)COOR12、-O(CH2)3C(CH 3)2COOR12、-OCH(C6H5)COOR12以及-OCH2COOR12。有利的是， 特别是R12可以选自氢以及-CH3、-C(CH3)3和-CH2CH3基团。 甚至更优选地，X5代表一 个-OC(CH3)2COOH、-OC(CH3)2COOC(CH3)3、-OCH(CH2CH3)COO C(CH3)3、-OCH(CH2CH3)COOH、-OCH2COOH、-OCH2COOC(CH 3)3、-O(CH2)3C(CH3)2COOH、-O(CH2)3C(CH3)2COOCH3、-OCH(C6 H5)COO(C2H5)、或-OCH(C6H5)COOH基团。

本发明的一个特别的方面涉及具有通式(I)的化合物，其中 X8代表一个氢原子。

根据本发明的另一方面，通式(I)的化合物具有X3、X4、X6、 以及X7基团中的至少一个，这些基团代表一个卤素原子或具有1 至4个碳原子的一个烷基基团，优选是一个卤素。

本发明的另一个特别的目的涉及具有通式(I)的化合物，其中 X3和/或X4(它们可以是相同的或者是不同的)代表一个卤素，优 选氯或氟。

优选地，X3与X4是相同的并代表一个卤素，优选一个氯或氟 原子，甚至更优选一个氯原子。

本发明的一个特别的目的涉及具有通式(I)的化合物，其中 X3代表一个氢原子而X4代表一个溴或氟原子。

根据本发明的另一方面，通式(I)的化合物具有X3、X4、X6、以 及X7基团中的至少一个，这些基团代表一个卤素原子或具有1至 4个碳原子的一个烷基基团，并且剩余的一个或多个基团(即一个 或多个选自X3、X4、X6、以及X7的未卤化或未烷基化的基团) 代表一个氢原子或多个氢原子。

本发明的另一个特别的目的涉及具有通式(I)的化合物，其中 X4和/或X6代表一个烷基基团，特别是涉及多种化合物，其中X4 和X6是两个甲基基团，而X3和X7是氢原子。

本发明的另一个特别的目的涉及具有通式(I)的化合物，其中 X6和X7代表一个氢原子。

优选地，X6和X7代表一个氢原子而X3和/或X4(它们可以 是相同的或者是不同的)代表一个卤素，优选氯或氟。

另一个优选的方面涉及具有通式(I)的化合物，其中X1代表 一个基团R1或-OR1，R1代表一个氢或一个烷基基团。优选地， R1代表一个烷基基团，该烷基基团具有1、2或3个碳原子，甚至 更优选的是该烷基基团被卤化。

优选地，X1是选自一个三氟甲基基团、一个溴原子、一个甲 氧基基团、一个甲硫基基团、一个三氟甲氧基基团以及一个氢原子。 任选地，X1代表一个基团-CF3、-OCF3、-SCH3。

另一个优选的方面涉及具有通式(I)的化合物，其中X1代表 一个卤素，优选溴。

本发明的另一个特别的目的涉及具有通式(I)的化合物，其中 X2代表一个硫原子。

本发明的另一个特别的目的涉及具有通式(I)的化合物，其中 环II在位置C4由环I取代。

本发明的另一个特别的目的涉及具有通式(I)的化合物，其中 环II在位置C5由环I取代。

本发明的另一个特别的目的涉及具有通式(I)的化合物，其中 环I在位置C3(或相对于环II的间位)由基团X1取代。

本发明的另一个特别的目的涉及具有通式(I)的化合物，其中 环I在位置C4(或相对于环II的对位)由基团X1取代。

本发明的另一个特别的方面涉及具有通式(I)的化合物，其中 R1代表一个氢或一个烷基基团，该烷基基团具有1至4个碳原子， 可任选地被卤化，并且R3、R4、R6、R7以及R8(它们可以是相 同的或者是不同的)是选自一个氢或具有1至4个碳原子的一个烷 基基团。

甚至更优选地，本发明涉及具有通式(I)的化合物，其中满足 以下条件中的至少一个，优选所有条件：

X6和X7(它们是相同的)代表一个氢；和/或

X3和/或X4(它们可以是相同的或者是不同的)代表一个卤素， 优选氯或氟；和/或

X2代表一个氧或一个硫，优选硫；和/或

X5代表一个R5、-OR5或-SR5基团，R5代表一个烷基基团， 该烷基基团由组1的取代基取代；和/或

环II在位置C4或C5由环I取代；和/或

环I在位置C3或位置C4由X1基团取代；和/或

X1代表一个卤素、一个R1、-SR1或-OR1基团，R1代表一个 氢或一个烷基基团；和/或

A代表：

(i)一个羰基基团(CO)，

(ii)一个肟基团(C＝N-O-H)或肟醚基团(C＝N-O-R11)，

(iii)一个-CR9R10基团(R9和R10是不同的)代表一个氢、一 个烷基基团、或一个-OR11基团，R11是如以下所限定，

R11代表一个氢或一个如以下所限定的芳基、杂环烷基、或杂 芳基基团，或一个烷基基团，该烷基基团由如以上所限定的一个环 烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基基团取代或未被取代；和/或

B代表一个包括两个碳原子的未取代的饱和的烷基基团 (CH2-CH2)。

在一个特别优选的实施方案中，本发明涉及由具有以下通式(I) 的取代的3-苯基-1-(苯基噻吩基)丙-1-酮类以及3-苯基-1-(苯基呋喃 基)丙-1-酮类所衍生的化合物：

其中：

X1代表一种卤素、一个R1、-SR1或-OR1基团；

X2代表一个硫或氧原子；

X3代表一种卤素、一个R3、-SR3或-OR3基团；

X4代表一种卤素、一个R4、-SR4或-OR4基团；

X5代表一个R5、-SR5或-OR5基团；

X6代表一种卤素、一个R6、-SR6或-OR6基团；

X7代表一种卤素、一个R7、-SR7或-OR7基团；

X8代表一个R8基团；

R1代表一个氢或具有1至4个碳原子的一个烷基基团，所述 烷基基团任选地被卤化；

R3、R4、R6、R7以及R8(它们可以是相同的或者是不同的) 选自一个氢或具有1至4个碳原子的一个烷基基团；

R5代表一个烷基基团，该烷基基团从一个饱和的直链碳链形 成，具有1至4个碳原子，优选1个碳原子，所述碳链：

-通过它在苯基基团(III)对面的末端与一个取代基相结合， 该取代基选自-COOR12和-CONR12R13、R12和R13(它们可以相 同或不同)代表一个氢或具有1至4个碳原子的一个烷基基团；

-不分支的或具有1至4个碳原子的至少一个烷基或链烯基 基团分支的，或者由一个苯基基团取代；

A代表：

(i)一个羰基基团(CO)，

(ii)一个肟基团(C＝N-O-H)或肟醚基团(C＝N-O-R11)，其中 R11选自一个氢原子、具有1至7个碳原子的一个烷基(直链或支 链的)、由一个芳基基团(特别是一个苯基基团)取代或未被取代， 所述烷基以及芳基的基团任选地被卤化，或者

(iii)一种-CR9R10基团，R9代表一个氢原子并且R10代表一 个OR11基团，R11选自一个氢原子、一个烷基基团(直链或支链 的)，该烷基基团具有1至7个碳原子，优选具有1、2或3个碳原 子，所述烷基未被取代或由以下基团取代：一个环烷基基团(值得 注意的是环己基)、一个芳基基团(特别是苯基)、或一个杂芳基 基团(值得注意的是吡啶基)，所述烷基、环烷基、芳基或杂芳基 的基团任选地被卤化，

B代表：

(i)具有两个碳原子的一个未取代的饱和的烷基基团 (CH2-CH2)，或者

(ii)具有两个碳原子的一个未取代的烯基团(CH＝CH)。

本发明的特别优选的实施方案的一个变体涉及具有通式(I) 的化合物，其中A代表一个羰基基团(C＝O)。

本发明的特别优选的实施方案的另一个变体涉及具有通式(I) 的化合物，其中A代表一个-CHOR11基团，R11优选是选自一个 氢原子，一个甲基、乙基、异丙基、环己基甲基、苄基、碘代苄基 以及吡啶基甲氧基(pyridinylmethoxyl)的基团。

本发明的特别优选的实施方案的另一个变体涉及具有通式(I) 的化合物，其中A代表一个肟基团或肟醚基团(C＝N-O-R11)，基 团R11优选是选自一个氢原子，一个甲基、乙基、异丙基、环己基 甲基、苄基、碘代苄基、或吡啶基甲基的基团，甚至更优选地是选 自一个氢原子以及一个甲基基团。

在另一个变体中，本发明的特别优选的实施方案涉及具有通式 (I)的化合物，其中X5是一个-OR5基团或-OR5基团的一个生物 异构体(bioisomer)(特别是一个-SR5基团)，其中R5代表一个烷 基基团，其中所述碳链与一个-COOR12取代基相结合。

有利的是，X5是选自以下基 团：-OC(CH3)2COOR12、-OCH(CH2CH3)COOR12、-O(CH2)3C(CH 3)2COOR12、-OCH(C6H5)COOR12以及-OCH2COOR12。

有利的是，R12是选自氢以及-CH3、-C(CH3)3以及-CH2CH3基 团。

根据本发明的特别优选的实施方案的一个变体，X8代表一个 氢原子。

在本发明的特别优选的实施方案中，本发明的一个特别的目的 涉及具有通式(I)的化合物，其中环II在位置C4由环I取代。

在本发明的特别优选的实施方案中，本发明的另一个特别的目 的涉及具有通式(I)的化合物，其中环II在位置C5由环I取代。

该X1基团可以处于环I的任何位置，即在相对于环II的邻位、 间位或对位。在本发明的特别优选的实施方案的一个特别的变体 中，X1处于相对于环II的间位或对位，优选在对位。

在本发明的特别优选的实施方案的一个特别的变体中，X1是 选自一个三氟甲基基团、一个溴原子、一个甲氧基基团、一个甲硫 基基团、一个三氟甲氧基基团以及一个氢原子。

根据本发明的一个特别的方面，在本发明的特别优选的实施方 案中，根据本发明的这些化合物具有X3、X4、X6、以及X7的基 团中的至少一个，这些基团代表一个卤素原子或具有1至4个碳原 子的一个烷基基团。优选地，剩余的一个或多个基团(即，选自 X3、X4、X6、以及X7的一个或多个未卤化或未烷基化的基团)代 表一个或多个氢原子。

作为一个实例，它们还可以是这样的化合物，其中X3与X4 是相同的并且对应于多种卤素原子(氯、氟、溴或碘)，特别是氯 或氟。

它们还可以是这样的化合物，其中X4和/或X6代表一个烷基 基团，特别是这样的化合物，其中X4和X6是两个甲基基团，而 X3和X7是氢原子。

根据本发明的一个特别的方面，在本发明的特别优选的实施方 案中，X4和/或X6代表一个烷基基团，特别地X4和X6是两个甲 基基团，而X3和X7是氢原子。

优选地，根据本发明的这些化合物是选自：

-叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(4-(3-(4-碘代苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻 吩-2-基)丙基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(4-(3-(4-碘代苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基) 丙基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(4-(3-苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)-苯氧基)丁酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)苯氧基)丁酸；

-叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-甲基5-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)苯氧基)-2，2-二甲基戊酸酯；

-5-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)苯氧基)-2，2-二甲基戊酸；

-叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)-苯氧基)乙酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)苯氧基)乙酸；

-乙基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)-丙基)苯氧基)-2-乙酸苯酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)-苯氧基)-2-苯乙酸；

-叔丁基2-(2-氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2-氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基) 苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(3-氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(3-氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)- 苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基) 苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)乙酸酯；

-2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)- 苯氧基)乙酸；

-2-(2-氟-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)-丙 基)-苯氧基)乙酸；

-2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-2-氟苯氧基)乙酸；

-叔丁基2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)丁酸酯；

-2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)- 苯氧基)丁酸；

-2-(2-氟-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)-丙基) 苯氧基)丁酸；

-叔丁基2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)丁酸酯；

-2-(2-溴代-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-苯氧基)丁酸；

-叔丁基2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)乙酸酯；

-2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基) 苯氧基)乙酸；

-叔丁基2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)- 苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃 -2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2-基) 丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-(吡啶-3-基-甲氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)-苯 基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基) 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-乙氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-环己基甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)- 噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻 吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)苯氧基)-2-酸；

-叔丁基2-(2，3-二氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，3-二氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(2，6-二甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻 吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，6-二甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-(肟基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-噻吩-2-基) 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-(甲氧亚氨基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-噻 吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(4-(3-(5-(4-(溴苯基)噻吩-2-基)-3-氧丙基)-2，3-二 氯苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(4-(3-(5-(4-溴苯基)噻吩-2-基)-3-氧丙基)-2，3-二氯-苯氧 基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2-基)-3- 氧丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2-基)-3-氧代-丙 基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-异丙氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-苯基噻吩-2-基)丙基)苯 氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-苯基噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2- 甲基丙酸；

-叔丁基2-甲基-2-(2-甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)丙酸酯；

-2-甲基-2-(2-甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)丙酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(4-(3-(苄氧基)-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(2，3-二氟-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-2，3-二氟苯氧基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-苯氧基)丁酸酯；

-2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧 基)丁酸；

-叔丁基2-甲基-2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)-苯氧基)丙酸酯；

-2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧 基)-2-甲基丙酸；

-叔丁基2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)苯氧基)-乙酸酯；

-2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧 基)乙酸；

-2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-2-氟苯氧基)丁酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2-基)- 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2-基) 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-2，6- 二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-2，6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸；

-乙基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-乙基2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-乙基2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯；

-2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基) 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸；

-2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸。

根据本发明的这些化合物可包含一个或多个不对称中心。本发 明包括纯的或混合的立体异构体(非对映异构体、对映异构体)， 连同消旋混合物以及几何异构体。当希望得到一种对映异构体意义 上纯的(或富集的)混合物时，可通过纯化最终产物或手性中间体、 或通过不对称合成来获得它，所述不对称合成是根据本领域的普通 技术人员已知的方法(例如使用手性试剂以及催化剂)。根据本发 明的一些化合物可具有多种不同的稳定互变异构形式并且所有这 些形式及其混合物被包括在本发明中。

本发明还涉及根据本发明的这些化合物的“药学上可接受的” 盐。总体而言，这个术语表示从碱或从酸(有机或无机的)获得的 低毒性或无毒性的盐。这些盐可在根据本发明的化合物的最后纯化 阶段的过程中获得或通过将该盐掺入到已经纯化的化合物中而获 得。

根据本发明的一些化合物以及它们的盐在几种固体形式中可 以是稳定的。本发明包括根据本发明的这些化合物的所有固体形 式，它们包括无定形的、多形的、单晶以及多晶的形式。

根据本发明的这些化合物可以处于游离的形式或溶剂化的形 式，例如利用药学上可接受的溶剂，如水(水合物)或乙醇。

用一种或多种同位素标记的、根据本发明的这些化合物也包含 在本发明中：这些化合物在结构上是相同的，但不同之处在于该结 构的至少一个原子被一种同位素(放射性的或非放射性的)替换。 可包含在根据本发明的这些化合物中的同位素的实例可选自氢、 碳、氧、硫，对应地如2H、3H、13C、14C、18O、17O、35S。放射性 同位素3H和14C是特别优选的，因为它们在物质的体外生物利用率 的研究中容易进行制备和检测。重同位素(如2H)是特别优选的， 因为它们在分析研究中作为内标物而使用。

本发明还涉及具有通式(I)的化合物的合成方法，该方法包 括：

1.在一种碱性介质或一种酸性介质中，将具有化学式(C)的 至少一种化合物与具有化学式(D)的至少一种化合物进行接触 的一个步骤

其中X1、X2、X3、X4、X6、X7以及X8是如以上所定义，

Y5代表一个R5、-SR5、-OR5、羟基或硫醇基，R5如以上所 定义；

2.任选地减少在步骤(1)中所获得的化合物的一个步骤，

3.以及任选地插入多个官能团的一个步骤。

在酸性或碱性介质中步骤(1)的实施的条件以及步骤(2)的 实施的条件是本领域的普通技术人员已知的并可广泛地进行变化。 合成方案可特别是那些呈现在本发明的“实例”部分中的方案。

有利的是，用化学计算方法进行这两种化合物的接触。优选在 适宜的温度(在大约18℃与100℃之间)下并优选地在大气压下 进行。

在一种碱性介质中，该反应优选在一种强碱(如一种碱金属氢 氧化物(如氢氧化钠))或碱金属醇化物(如乙醇钠)的存在下进 行。

在一种酸性培养基中，该反应优选在一种强酸(如盐酸)的存 在下进行。

如此获得的化合物可通过本领域的普通技术人员已知的常规 方法进行分离。

本发明还涉及如以上所说明的化合物，如药物。

本发明还涉及如以上所说明的一种化合物，用于治疗以下疾 病：代谢性综合征相关的并发症、动脉硬化、脑缺血、自身免疫疾 病、心血管疾病、胰岛素抵抗、肥胖症、高血压、糖尿病、血脂障 碍、炎性疾病(如哮喘)、神经退行性病状(特别是多发性硬化症， 帕金森病、阿耳茨海默氏病、tau蛋白病(额颞痴呆、皮克氏病、 皮质基底节变性(cortical basal degeneration)、进行性核上性麻痹)、 皮质性痴呆(cortical dementia)、脊髓性肌萎缩、轻度认知缺损 (MCI)、共核蛋白病(synucleopathy)、路易体(Lewy body)的病 状、亨廷顿氏舞蹈病、癫痫、肌萎缩性侧索硬化、朊病毒病(克- 雅二氏病)、唐氏综合征、弗里德赖希氏共济失调、脊髓小脑性共 济失调、夏-马-图三氏病、与AIDS相关的神经并发症、慢性痛、 小脑变性(cerebellar degeneration)、小脑缺氧、与糖尿病相关的神 经病变)、癌症等，连同用于降低总体心血管危险。

优选地，本发明涉及如以上说明的一种化合物，用于治疗与脂 类和/或碳水化合物代谢的紊乱(特别是高血脂症以及肥胖症，并且 特别是糖尿病(II型糖尿病))有关的心血管危险因素。

甚至更优选地，本发明涉及如以上说明的一种化合物，用于血 脂障碍的治疗。

本发明还涉及一种药物组合物，该药物组合物包括(在一种药 学上可接受的载体中的)如以上所说明的至少一种化合物，任选地 与一种或多种其他治疗性和/或美容的有效物质进行组合。

有利的是，它是一种用于治疗以下并发症的药物组合物：代谢 性综合征相关的并发症；动脉硬化、脑缺血、自身免疫疾病、心血 管疾病、胰岛素抵抗、肥胖症、高血压、糖尿病、血脂障碍、炎性 疾病(如哮喘)、神经退行性病状(特别是多发性硬化症，帕金森 病，阿耳茨海默氏病，tau蛋白病(额颞痴呆、皮克氏病、皮质基 底节变性、进行性核上性麻痹)、皮质性痴呆、脊髓性肌萎缩、轻 度认知缺损(MCI)、共核蛋白病、路易体的病状、亨廷顿氏舞蹈病、 癫痫、肌萎缩性侧索硬化、朊病毒病(克-雅二氏病)、唐氏综合征、 弗里德赖希氏共济失调、脊髓小脑性共济失调、夏-马-图三氏病、 与AIDS相关的神经并发症、慢性痛、小脑变性、小脑缺氧、与糖 尿病相关的神经病)、癌症等，连同用于降低总体心血管危险。

优选地，它涉及一种药物组合物，用于治疗与脂类和/或碳水化 合物代谢的紊乱(特别是高血脂症以及肥胖症，并特别是糖尿病(II 型糖尿病))有关的心血管危险因素。

甚至更优选地，根据本发明的药物组合物旨在用于治疗血脂障 碍。

本发明的另一个目的涉及一种营养组合物，该营养组合物包括 如以上所说明的至少一种化合物。

本发明还涉及如以上所说明的化合物，如美容产品。

本发明的另一个目的涉及如以上所说明的至少一种化合物用 于制备多种药物组合物的用途，这些药物组合物旨在用于治疗如以 上所定义的不同病状，特别是与脂类和/或碳水化合物代谢的失调有 关，在这些病况中，我们可以提及血脂障碍。更普遍地，本发明涉 及如以上所说明的至少一种化合物用于制备多种药物组合物的用 途，这些药物组合物旨在用于治疗与脂类和/或碳水化合物代谢的紊 乱有关的心血管疾病的危险因素，并且旨在用于如此降低总体的心 血管危险。

作为一个非限制性实例，根据本发明的这些化合物可有利地与 市售的或正在开发的一种或多种其他的治疗剂和/或美容剂进行组 合给药，例如：

-抗糖尿病剂：促胰岛素分泌药(insulin secretor)(硫酰脲 类(格列本脲、格列美脲、格列齐特(glyclazide)，等等)以及格 列奈类(瑞格列奈、纳格列奈，等等))、α-糖苷酶的抑制剂、PPARγ 激动剂(噻唑烷二酮类，如罗格列酮、吡格列酮)、混合的PPARα /PPARγ激动剂(替赛格列他(tesaglitazar)、莫格列他 (muraglitazar))、全-PPAR(同时激活3种PPAR同种型的化合物)、 双胍类(二甲双胍)、二肽基肽酶IV的抑制剂(西他列汀、维格列 汀)、高血糖素样肽1(GLP-1)激动剂(艾塞那肽)，等等。

-胰岛素

-抗血脂和/或降胆固醇剂：贝特类(非诺贝特、吉非贝齐)、 HMG CoA还原酶或羟甲基戊二酰辅酶A还原酶的抑制剂(他汀类， 如阿托伐他汀、辛伐他汀、氟伐他汀)、胆固醇吸收的抑制剂(依 泽麦布、植物甾醇类)、胆固醇酯转移蛋白(CETP)抑制剂(托塞 匹布)、脂酰辅酶A胆固醇酰基转移酶(ACAT)抑制剂(阿伐麦布、 伊鲁麦布)、微粒体甘油三酯转移蛋白(MTP)抑制剂、胆汁酸掩 蔽剂(考来烯胺)、维生素E、多不饱和脂肪酸、ω3脂肪酸、烟酸 类型(烟酸)的衍生物，等等。

-抗高血压剂以及降血压剂：

血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂(卡托普利、依那普利、雷 米普利或喹那普利)、血管紧张素II受体拮抗剂(氯沙坦、缬沙坦、 替米沙坦、依普罗沙坦(eposartan)、厄贝沙坦，等等)、β-阻滞剂 (阿替洛尔、美托洛尔、拉贝洛尔、普萘洛尔)、噻嗪类和非噻嗪 类利尿剂(呋塞米、吲达帕胺、氢氯噻嗪、抗醛甾酮)、血管舒张 剂、钙通道阻滞剂(硝苯地平、非洛地平或氨氯地平、地尔硫卓或 维拉帕米)，等等。

-抗血小板药：阿司匹林、噻氯匹定、双嘧达莫、氯吡格雷、 氟比洛芬，等等。

-减肥剂：西布曲明、脂肪酶抑制剂(奥利司他)、PPARδ激 动剂以及拮抗剂、大麻素CB1受体拮抗剂(利莫纳班)，等等。

-抗炎剂：例如，肾上腺皮质激素类(泼尼松、倍他米松、 地塞米松、泼尼松龙、甲泼尼龙、氢化可的松，等等)、衍生于吲 哚(吲哚美辛、舒林酸)的非甾体抗炎药物(NSAID)、芳基羧酸 基团的NSAID(噻洛芬酸、双氯芬酸、依托度酸、氟比洛芬、布洛 芬、酮洛芬、萘普生、萘丁美酮、阿明洛芬)、衍生自昔康的NSAID (美洛昔康、吡罗昔康、替诺昔康)、芬那酯基团的NSAID、选择 性的COX-2抑制剂(塞来考昔、罗非考昔)，等等。

-抗氧化剂：例如普罗布考，等等。

-在治疗心力衰竭的中所使用的药剂：噻唑类或非噻唑类利 尿剂(呋塞米、吲达帕胺、氢氯噻嗪、抗醛甾酮)、ACE抑制剂(卡 托普利、依那普利、雷米普利或雷米普利)、洋地黄类药物(地高 辛、洋地黄毒苷)、β-阻滞剂(阿替洛尔、美托洛尔、拉贝洛尔、普 萘洛尔)、磷酸二酯酶抑制剂(依诺昔酮、米力农)，等等。

-用于治疗冠状动脉功能不全(coronary insufficiency)的药 剂：β-阻滞剂(阿替洛尔、美托洛尔、拉贝洛尔、普萘洛尔)、钙通 道阻滞剂(硝苯地平、非洛地平或氨氯地平、苄普地尔、地尔硫卓 或维拉帕米)、NO供体(硝酸甘油、硝酸异山梨酯、吗多明)、胺 碘酮、等等。

-抗癌药：细胞毒剂(与DNA相互作用的药剂、烷化剂、 顺铂以及衍生物)、细胞抑制剂(促性腺激素释放激素(GnRH)类 似物、生长抑素类似物、孕激素类、抗雌激素药、芳香酶抑制剂， 等等)、免疫反应的调节剂(干扰素、IL2等)等。

-止喘药，如支气管扩张药(β2受体激动剂)、肾上腺皮质 激素、色甘酸盐、白细胞三烯受体拮抗剂(孟鲁司特)、等等。

-在治疗皮肤病(如牛皮癣以及皮炎(dermatitis))中所使用 的肾上腺皮质激素

-血管舒张剂和/或抗缺血剂(丁咯地尔、银杏的提取物、萘 呋胺、己酮可可碱、吡贝地尔)，等等。

本发明还涉及一种治疗如以上所定义的不同病状(特别是与脂 类和/或碳水化合物代谢的紊乱有关)的方法，，该方法包括对受试 者(特别是人类)给予有效量的如以上所定义的一种化合物或一种 药物组合物。

在本发明的意义上，术语“有效量”指足以产生所希望的生物学 结果的化合物的量。

术语“受试者”表示一种哺乳动物并且更特别地是人类。

术语“治疗”表示治愈性治疗、对症治疗和/或预防性治疗。因此， 本发明的化合物可在具有一种所声称的疾病的受试者(如哺乳动 物，特别是是人类)中使用。本发明的化合物还可用于延迟或减缓 疾病的进展或者阻止疾病的进一步进展，从而改善受试者的病况。 最终，本发明的化合物可给予以下受试者：他们没有生病，但可正 常地形成该病，或他们具有形成该病的相当大的危险。

根据本发明的药物组合物有利地包括一种或多种药学上可接 受的赋形剂或运载体(vehicle)。我们可以提及例如盐水性的、生理 学的、等渗的、缓冲的、等等的溶液，这些溶液与药物的用途相容 并为本领域的普通技术人员所知。这些组合物可包括一种或多种药 剂或运载体，这些药剂或运载体选自分散剂、增溶剂、稳定剂、防 腐剂、等等。可在配制品(液体和/或可注射的和/或固体)中使用 的药剂或运载体特别是甲基纤维素、羟甲基纤维素、羧甲基纤维素、 聚山梨酯80、甘露醇、明胶、乳糖、植物油、阿拉伯胶、脂质体、 等等。可将这些组合物配制成以下形式：可注射的混悬液、凝胶、 油、片剂、栓剂、粉末、硬胶囊、胶囊、气溶胶、等等，任选地通 过提供被延长和/或被延缓的释放的植物制剂的形式或装置。对于这 种类型的配制品，使用一种药剂(如纤维素、碳酸盐或淀粉)是有 利的。

根据本发明的化合物或组合物可用不同的方式以及不同的形 式进行给药。因而，它们可(例如)通过以下途径进行全身给药： 通过口服或胃肠外途径，通过吸入或通过注射，例如通过静脉内、 肌内、皮下、经皮的、动脉内的途径、等等。为了注射，通常可将 这些化合物以液体混悬液的形式进行包装，例如，这些液体混悬液 可通过注射器或作为输注液来进行注射。

应该理解的是，所注射的流速和/或剂量可由本领域的普通技术 人员进行调整，取决于病人、病状、给药方法、等等。典型地，所 给的这些化合物的剂量可在每次给药1μg与2g之间变化，优选每 次给药从0.01mg至1g。给药可每天进行，或者如果必需的话，可 一天重复几次。此外，根据本发明的组合物还可包括其他药剂或有 效物质。

附图说明

附图以及表格中所使用的缩写：

-Cpd＝化合物；

-HDL-胆固醇：高密度脂蛋白胆固醇

-LDL-胆固醇：低密度脂蛋白胆固醇

-VLDL-胆固醇：极低密度脂蛋白胆固醇

-mpk＝mg/kg/day。

图1-1至1-9：通过脂类测定以及测量在脂类和碳水化合物代 谢以及能量的耗散中所涉及的基因的表达，在E2/E2小鼠中体内评 估根据本发明的这些化合物的抗血脂的特性以及HDL-胆固醇合成 刺激的特性

通过分析胆固醇以及甘油三酯在不同的血浆脂蛋白部分中的 分布并通过测量由口服途径处理7天以及13天后的总胆固醇以及 HDL-胆固醇血浆水平，在E2/E2小鼠(对载脂蛋白E的E2同种型 来说是人源化的)中对根据本发明的这些化合物的抗血脂效应进行 了体内评估；将这些水平与那些用对照动物(没有用根据本发明的 化合物进行处理)获得的水平进行比较。测量出的差别提供了根据 本发明的这些化合物的抗血脂效应的证据。

-图1-1：用化合物2以50mpk进行给药在处理7天以及13 天后的血浆总胆固醇水平；

-图1-2：用化合物2以50mpk进行给药在处理7天以及13 天后的血浆HDL-胆固醇水平；

-图1-3：用化合物2以50mpk进行给药在处理13天后在 不同的血浆脂蛋白部分中胆固醇的分布；

-图1-4：用化合物2以50mpk进行给药在处理13天后在 不同的血浆脂蛋白部分中甘油三酯的分布。

还通过在肝组织以及(骨骼的)肌肉组织中测量在脂类以及碳 水化合物代谢、以及能量的耗散中所涉及的基因的表达来评估根据 本发明的这些化合物的功效。相对于肝组织中的参考基因36B4以 及腓肠肌骨骼肌中的18S的表达水平，对每个基因的表达水平进行 标准化。然后计算出诱导因数，即相对信号(由根据本发明的化合 物所诱导)与对照组的这些相对值的平均值的比率。这个因数越高， 该化合物的基因表达激活特征就越显著。最终结果被表示为每个实 验组中的这些诱导值的平均值。

-图1-5：用化合物2(50mpk)处理13天之后(在E2/E2 小鼠中)在肝组织中PDK4(丙酮酸脱氢酶，同种型4)的表达；

-图1-6：用化合物2(50mpk)处理13天之后(在E2/E2 小鼠中)在肝组织中AcoX1的表达；

-图1-7：用化合物2(50mpk)处理13天之后(在E2/E2 小鼠中)在肝组织中ApoCIII的表达；

-图1-8：用化合物2(50mpk)处理13天之后(在E2/E2 小鼠中)在骨骼肌中PDK4(丙酮酸脱氢酶，同种型4)的表达；

-图1-9：用化合物2(50mpk)处理13天之后(在E2/E2 小鼠中)在骨骼肌中UCP2(解偶联蛋白2)的表达。

图2-1至2-6：通过脂类测定以及测量在脂类和碳水化合物代 谢以及能量的耗散中所涉及的基因的表达，在C57B16小鼠中体内 评估根据本发明的这些化合物的抗血脂的特性以及HDL-胆固醇合 成刺激的特性

在C57B16小鼠中通过口服途径处理14天之后，对根据本发明 的化合物2(以剂量效应进行给药)的效应进行了体内评估。在处 理结束时，通过测量总胆固醇、HDL-胆固醇、甘油三酯以及游离脂 肪酸的血浆水平对根据本发明的化合物2的抗血脂效应进行评估。

-图2-1：在C57B16小鼠中，用根据本发明的化合物2以1、 5、10以及50mpk进行给药在处理14天后的血浆总胆固醇水平；

-图2-2：在C57B16小鼠中，用根据本发明的化合物2以1、 5、10以及50mpk进行给药在处理14天后的血浆HDL-胆固醇水 平；

-图2-3：在C57B16小鼠中，用根据本发明的化合物2以1、 5、10以及50mpk进行给药在处理14天后的甘油三酯的血浆水平；

-图2-4：在C57B16小鼠中，用根据本发明的化合物2以1、 5、10以及50mpk进行给药在处理14天后的游离脂肪酸的血浆水 平。

还通过在(骨骼的)肌肉组织中测量在碳水化合物代谢以及能 量的耗散中所涉及的基因的表达来评估根据本发明的这些化合物 的功效。相对于参考基因18S的表达水平，对每种基因的表达水平 进行标准化。然后计算出诱导因数。这个因数越高，这些化合物的 基因表达激活特征就越显著。最终结果被表示为每个实验组中的诱 导值的平均值。

-图2-5：用化合物2(50mpk)通过口服途径处理14天后 (在C57B16小鼠中)骨骼肌中PDK4的表达；

-图2-6：用化合物2(50mpk)通过口服途径处理14天后 (在C57B16小鼠中)骨骼肌中UCP2的表达。

图3-1至3-7：通过脂类测定以及测量在脂类和碳水化合物代 谢以及能量的耗散中所涉及的基因的表达，在C57B16小鼠中体内 评估根据本发明的这些化合物的HDL-胆固醇合成刺激的特性。

在C57B16小鼠中通过口服途径处理14天之后，对根据本发明 的这些化合物的效应进行了体内评估。在处理结束时，确定了在不 同的血浆脂蛋白部分中胆固醇的分布。将它与对照动物(不用根据 本发明的这些化合物进行处理)中得到的性质进行比较。在C57B16 小鼠中通过口服途径处理14天之后，通过测量总胆固醇以及HDL- 胆固醇的血浆水平也对根据本发明的这些化合物的效应进行了体 内评估。将这些水平与对照动物(不用根据本发明的这些化合物进 行处理)中得到的水平进行比较。测量出的差别提供了根据本发明 的这些化合物的抗血脂效应的证据。

-图3-1：用根据本发明的化合物4与7以50mpk进行给药 在处理14天后的血浆总胆固醇水平；

-图3-2：用根据本发明的化合物4与7以50mpk进行给药 在处理14天后的血浆HDL胆固醇水平；

-图3-3：用根据本发明的化合物4与7以50mpk进行给药 在处理14天后在不同的血浆脂蛋白部分中胆固醇的分布。 还通过在(骨骼的)肌肉组织中测量在脂类和碳水化合物代谢以及 能量的耗散中所涉及的基因的表达来评估根据本发明的这些化合 物的功效。相对于参考基因18S的表达水平，对每种基因的表达水 平进行标准化。然后计算出诱导因数。这个因数越高，这些化合物 的基因表达激活特征就越显著。最终结果被表示为每个实验组中的 诱导值的平均值。

-图3-4：用化合物7(50mpk)处理14天之后(在C57B16 小鼠中)肌肉组织中PDK4的表达；

-图3-5：用化合物4与7(50mpk)处理14天之后(在C57B16 小鼠中)肌肉组织中CPT1b的表达；

-图3-6：用化合物4与7(50mpk)处理14天之后(在C57B16 小鼠中)肌肉组织中UCP2的表达；

-图3-7：用化合物4与7(50mpk)处理14天之后(在C57B16 小鼠中)肌肉组织中UCP3的表达。

图4-1至4-7：在db/db小鼠中对根据本发明的这些化合物的抗 血脂以及抗糖尿病特性以及激活PPAR的特性进行体内评估

在db/db小鼠中通过口服途径用化合物2处理28天之后，通过 测量血浆甘油三酯以及血液中的胰岛素(insulinemia)对根据本发 明的这些化合物的效应进行了体内评估。将这些水平与用对照动物 (不用根据本发明的化合物进行处理)得到的水平进行比较。测量 出的差别提供了根据本发明的化合物的抗血脂效应以及对胰岛素 抵抗的效应的证据。

-图4-1：在小鼠db/db中用化合物2以50mpk进行给药在 处理28天后甘油三酯的血浆水平；

-图4-2：在小鼠db/db中用化合物2以50mpk进行给药在 处理28天后的血浆胰岛素水平。

还通过在肝组织以及肌肉组织中测量在碳水化合物和脂类代 谢、以及能量的耗散中所涉及的基因的表达来评估化合物2的功效。 相对于肝脏中的参考基因36B4以及骨骼肌中的参考基因18S的表 达水平，对每个基因的表达水平进行标准化。然后计算出诱导因数， 即相对信号(由根据本发明的化合物所诱导)与对照组的这些相对 值的平均值的比率。这个因数越高，该化合物的基因表达激活特征 就越显著。最终结果被表示为每个实验组中的这些诱导值的平均 值。

-图4-3：用化合物2以50mpk进行给药在处理28天之后 (在db/db小鼠中)肝组织中PDK4的表达；

-图4-4：用化合物2以50mpk进行给药在处理28天之后 (在db/db小鼠中)肝组织中ACOX1的表达；

-图4-5：用化合物2以50mpk进行给药在处理28天之后 (在db/db小鼠中)肝组织中CPT1b的表达；

-图4-6：用化合物2以50mpk进行给药在处理28天之后 (在db/db小鼠中)肌肉组织中PDK4的表达；

-图4-7：用化合物2以50mpk进行给药在处理28天之后 (在db/db小鼠中)肌肉组织中UCP3的表达。

图5：通过测量鼠类肌细胞中脂肪酸的β-氧化对根据本发明的 这些化合物的代谢特性进行体外评估

通过测量鼠类肌细胞(用根据本发明的这些化合物对这些鼠类 肌细胞预处理24小时)中脂肪酸的β-氧化评估了根据本发明的化合 物的刺激效应，。脂肪酸的β-氧化的诱导提高越多，根据本发明的这 些化合物对肌细胞中脂肪酸的降解的刺激效应就越大。

图6-1至6-2：通过测量巨噬细胞中ABCA1基因的表达对根 据本发明的这些化合物作为胆-固醇逆向转运的激活剂的特性进行 了体外评估

通过测量人巨噬细胞中ABCA1基因(ATP-结合盒，亚家族A， 成员1；参与胆固醇外流的膜转运蛋白)的表达评估了根据本发明 的这些化合物对胆固醇逆向转运的效应。ABCA1的表达提高越多， 根据本发明的化合物对胆固醇逆向转运的刺激作用就越大。

-图6-1：用1μM的化合物2处理24小时之后在人巨噬细 胞中ABCA1的表达；

-图6-2：分别用1μM以及300nM的根据本发明的化合物 4与7处理24小时之后在人巨噬细胞中ABCA1的表达。

图7-1至7-4：通过测量由用根据本发明的化合物进行处理的 并用PMA进行刺激的人单核细胞产生的MCP1与MMP9的分泌 和表达对根据本发明的这些化合物的抗炎特性进行了体外评估

通过测量由人单核细胞产生的单核细胞趋化蛋白1(MCP1) 的分泌以及表达连同基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达对根据本 发明的这些化合物的抗炎效应进行了评估，所述人单核细胞用根据 本发明的化合物处理24小时并用PMA(佛波醇12-肉豆蔻酯13- 乙酸酯，它引起细胞的炎症应答)进行刺激。所分泌的MCP1的量 减小越多，根据本发明的化合物对炎症应答的抑制效应就越大。类 似地，MCP1与MMP9的基因的表达被抑制越多，根据本发明的化 合物的抗炎效应就越大。

-图7-1：用1μM的根据本发明的化合物7与11处理的人 单核细胞中MCP1(单核细胞趋化蛋白1)的分泌；

-图7-2：用1μM的根据本发明的化合物7与11处理的人 单核细胞中MCP1(单核细胞趋化蛋白1)的表达；

-图7-3：用1μM的根据本发明的化合物7与11处理的人 单核细胞中MMP9(基质金属蛋白酶9)的表达；

-图7-4：用0.1以及0.3μM的根据本发明的化合物2处理 的人单核细胞中MCP1(单核细胞趋化蛋白1)的表达。

本发明的其他优点以及方面在阅读以下所给出的实例时将变 得清楚，这些实例应当被视为说明性和非限制性的。

统计分析

所进行的统计学分析由Student t检验和/或单因子单变量方差 分析(ANOVA)构成，随后是Tukey检验。这些结果是相对于对 照组根据参数p的值进行比较的：

*：p＜0.05；**：p＜0.01；***：p＜0.001.

实例

通常的试剂以及催化剂是可过商购的(Aldrich、Alfa Aesar、 Acros、Fluka或Lancaster，按照需要)。

在这些实例中，为了鉴定这些化合物进行不同的分析。

熔点(m.p.)以摄氏度给出。

多种产品的纯度通过薄层层析法(TLC)和/或通过HPLC(高 效液相色谱法)得到验证。

通过ESI-MS(Electrospray Ionization-Mass Spectroscopy)、 Q-TOF(Quadrupole-Time of Flight)或MALDI-TOF(Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization-Time of Flight)获得质谱。

在Bruker AC300P分光计上记录质子核磁共振(1H-NMR)谱。 化学位移用ppm(百万分率)表达，并且在每次分析所指明的氘代 溶剂中在300MHz下进行记录：DMSO-d6、MeOD或CDCl3。

以下缩写用于解释这些质谱：s代表单峰，bs代表宽的单峰，d 代表双峰，dd代表双二重峰、ddd代表双二倍二重峰(doublet of doublet of doublets)，t代表三重峰，dt代表双三重峰(doublet of triplets)，q代表四重峰，quint代表五重峰，sext代表六重峰，m代 表多重峰。

实例1：根据本发明的总体合成方案的说明

通用操作A：

在一种惰性气氛下，将溴化的衍生物(0.5至75g，0.05至0.5 mol/mL)、碳酸钾(3当量)、以及水(11当量)溶解于N，N-二甲 基甲酰胺中。加入乙酸钯(0.1当量)，然后逐滴加入N，N-二甲基甲 酰胺(1.5当量，0.25g/mL)。在室温惰性气氛下搅拌该混合物。

通用操作B：

将酮(1当量)与醛(1当量)溶解于气态盐酸的饱和乙醇溶 液中(0.2g至38g，0.2至0.5mol/L)。在室温下搅拌16小时后， 在减压条件下通过蒸发去除溶剂。

通用操作C：

将丙烯酮溶解于氯仿/甲醇2∶1的混合物(0.2至14g，0.01至 0.2mol/L)中，然后加入催化量的钯炭。将整个混合物置于大气压 下的氢气氛围下。

通用操作D：

将苯酚或苯硫酚溶解于N，N-二甲基甲酰胺(0.3至12g，0.06 至0.2mol/L)中，然后加入卤化的衍生物(5当量)以及碳酸钾(5 当量)。在70℃剧烈搅拌反应混合物。

通用操作E：

将叔丁基酯溶解于二氯甲烷(0.2至15g，0.1至1mol/L)中， 然后加入三氟乙酸(10至17当量)。在室温下对其进行搅拌。

通用操作F：

将该酯溶解于乙醇(0.2至0.4g，0.1至0.2mol/L)中，然后 加入2N氢氧化钠溶液。

通用操作G：

将丙烯酮溶解于乙醇(0.2至4g，0.1至0.5mol/L)中。加入 硼氢化钠(3当量)。整个混合物在室温下搅拌3小时。在减压条件 下通过蒸发去除溶剂，在稀释的盐酸水溶液中吸收蒸发残余物，并 用二氯甲烷进行萃取。

通用操作II：

将醇溶解于N，N-二甲基甲酰胺(0.2至3g，0.1至0.5mol/L) 中，将溶液冷却至0℃，然后加入氢化钠。搅拌20分钟后，加入适 当的烷基卤。在室温下将混合物搅拌4小时。在减压条件下通过蒸 发去除溶剂。

通用操作I：

将丙烯酮溶解于吡啶(0.3g，0.1mol/L)中。加入邻烷基羟胺 盐酸盐(5至10当量)。在回流18h后，在减压条件下蒸发混合物， 在乙酸乙酯中进行吸收，并用稀释的盐酸溶液进行洗涤。在减压条 件下对有机相进行浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯 化。＜0}

实例2：合成在根据本发明的这些化合物的合成中所使用的原 料：

2，3-二氯-4-羟基苯甲醛

将碳酸钠(3.5当量)、氢氧化钙(4.5当量)、以及2，3-二氯苯 酚(0.15g/L)加至水中，并将该混悬液在70℃加热4小时。逐滴 加入氯仿(2当量)，并在70℃搅拌整个混合物16小时。

将反应混合物冷却至0℃，并用浓盐酸溶液进行酸化(pH＝2)。 用乙酸乙酯对整个混合物进行萃取；用水洗涤有机相，在硫酸镁上 进行干燥，并在减压条件下进行浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发 残余物进行纯化。将所获得的固体从异丙醇中重结晶。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：梯度9/1至7/3。硅胶(Silica)40-63 μm。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：7.20(d，1H， J＝8.8Hz)；7.70(d，1H，J＝8.8Hz)；10.13(s，1H)。

4-羟基-3，5-二甲基苯甲醛

将2，6-二甲苯酚(0.34g/mL)以及六亚甲基四胺(2当量)溶 解于2∶1的乙酸/水混合物中。整个混合物在100℃加热4小时。将 反应混合物冷却至室温，并将其注入一个水/冰混合物中。将沉淀排 出。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.33(s，6H)；5.90 (s，1H)；7.55(s，2H)；9.81(s，1H)。

1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮

根据通用操作A从5-乙酰基-2-噻吩硼酸以及4-溴三氟甲苯中 制备1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮。

在搅拌2小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂，并通过硅 胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1HNMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.60(s，3H)； 7.40(d，1H，J＝3.8Hz)；7.66-7.70(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.2Hz)。

1-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮

根据通用操作A从(4-溴噻吩-2-基)乙酮以及4-三氟甲基苯硼酸 中制备1-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮。

在搅拌18小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂，并通过 硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.63(s，3H)；7.70 (m，4H)；7.82(d，1H，J＝1.5Hz)；7.97(d，1H，J＝1.5Hz)。

1-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基)乙酮

根据通用操作A从5-乙酰基-2-噻吩硼酸以及1-溴-4-(三氟甲氧 基)苯中制备1-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基)乙酮。

在搅拌1小时后，用水稀释反应混合物，在Celite上过滤，并 接着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在 减压条件下浓缩。将蒸发残余物从环己烷中重结晶。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：2.56(s，3H)； 7.47(d，2H，J＝8.4Hz)；7.71(d，1H，J＝3.9Hz)；7.91(d，2H，J＝8.4Hz)； 7.98(d，1H，J＝3.9Hz)。

1-(5-(4-溴苯基)噻吩-2-基)乙酮

根据通用操作A从5-乙酰基-2-噻吩硼酸以及1-溴-4-碘苯中制 备1-(5-(4-(溴苯基)噻吩-2-基)乙酮。

在搅拌12小时后，用水稀释反应混合物，在Celite上过滤， 并接着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着 在减压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1至8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.57(s，3H)；7.31 (d，1H，J＝3.9Hz)；7.51(d，2H，J＝9.0Hz)；7.55(d，2H，J＝9.0Hz)；7.65 (d，1H，J＝3.9Hz)。

5-溴-2-乙酰基呋喃

将2-乙酰基呋喃溶解于N，N-二甲基甲酰胺(5g，1.1mol/L) 中，并加入N-溴代琥珀酰亚胺(1当量)。

在室温下搅拌5小时后，将反应混合物注入冰水中，并将形成 的沉淀排出。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.47(s，3H)；6.49 (d，1H，J＝3.6Hz)；7.12(d，1H，J＝3.6Hz)。

1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2-基)乙酮

根据通用操作A从4-三氟甲基苯硼酸以及5-溴-2-乙酰基呋喃 中制备1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2-基)乙酮。

在搅拌18小时后，用水稀释反应混合物，并接着用乙酸乙酯 萃取。在硫酸镁上对有机相进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓 缩。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：95/5至8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.55(s，3H)；6.89 (d，1H，J＝3.7Hz)；7.28(d，1H，J＝3.7Hz)；7.68(d，1H，J＝8.1Hz)；7.89 (d，1H，J＝8.1Hz)。

1-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2-基)乙酮

根据通用操作A从5-乙酰基-2-噻吩硼酸以及1-溴-4-(甲硫基) 苯中制备1-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2-基)乙酮。

在100℃搅拌18小时后，用水稀释反应混合物，在Celite上 过滤，并接着用乙酸乙酯萃取。在硫酸镁上对有机相进行干燥，过 滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯 化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1至8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：2.54(s，3H)； 7.34(d，2H，J＝8.7Hz)；7.63(d，1H，J＝3.9Hz)；7.75(d，2H，J＝8.7Hz)； 7.94(d，1H，J＝3.9Hz)。

1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮

根据通用操作A从2-乙酰基-5-溴噻吩酸以及3-三氟甲基苯硼 酸中制备1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮。

在搅拌4小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂，并通过硅 胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.59(s，3H)；7.39 (d，1H，J＝3.9Hz)；7.53-7.65(m，2H)；7.69(d，1H，J＝3.9Hz)；7.83(d，1H， J＝7.6Hz)；7.90(s，1H)。

实例3：合成在根据本发明的这些化合物的合成中所使用的中 间体：

中间体1：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩 -2-基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 2，3-二氯-4-羟基苯甲醛中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟 甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。将蒸发残余物从乙腈中结晶。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：6.02(bs，1H)； 7.06(d，1H，J＝8.8Hz)；7.34(d，1H，J＝15.5Hz)；7.48(d，1H，J＝3.8Hz)； 7.67-7.72(m，3H)；7.81(d，2H，J＝8.2Hz)；7.86(d，1H，J＝3.8Hz)；8.22 (d，1H，J＝15.5Hz)。

中间体2：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩 -2-基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三 氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮。

在42℃搅拌1小时30分后，通过过滤除去催化剂，并在减压 条件下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯 化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：7/3。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.14-3.27(m， 4H)；5.64(bs，1H)；6.92(d，1H，J＝8.5Hz)；7.18(d，1H，J＝8.5Hz)；7.39 (d，1H，J＝3.8Hz)；7.67-7.71(m，3H)；7.77(d，2H，J＝8.2Hz)。

中间体3：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(4-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩 -2-基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 2，3-二氯-4-羟基苯甲醛中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(4-(4-(三氟 甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。通过硅胶层析法对蒸发残余物 进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：7.08(d，1H， J＝8.8Hz)；7.82-8.10(m，7H)；8.58(s，1H)；8.86(s，1H)。

中间体4：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(4-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩 -2-基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(4-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(4-(4-(三 氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮。

在室温下6小时后，通过过滤除去催化剂，并在减压条件下通 过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.15-3.21(m， 2H)；3.25-3.30(m，2H)；5.60(s，1H)；6.91(d，1H，J＝8.5Hz)；7.17(d， 1H，J＝8.5Hz)；7.67(m，4H)；7.81(d，1H，J＝1.3Hz)；7.95(d，1H， J＝1.3Hz)。

中间体5：3-(3-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩-2- 基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 3-氯-4-羟基苯甲醛中制备3-(3-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。 洗脱：环己烷/乙酸乙酯：6/4。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：7.03(d，1H， J＝8.5Hz)；7.62-7.67(m，2H)；7.77-7.84(m，3H)；7.9(d，1H，J＝4.1Hz)； 8.03(m，3H)；8.39(d，1H，J＝4.1Hz)。

中间体6：3-(3-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩-2- 基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(3-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(3-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基) 苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮。

在室温下搅拌3小时后，通过过滤除去催化剂，并在减压条件 下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：二氯甲烷。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.01(t，2H， J＝7.7Hz)；3.21(t，2H，J＝7.7Hz)；5.58(s，1H)；6.95(d，1H，J＝8.2Hz)； 7.07(dd，1H，J＝2.1Hz，J＝8.2Hz)；7.22(d，1H，J＝2.1Hz)；7.38(d，1H， J＝4.2Hz)；7.63-7.68(m，3H)；7.75(d，2H，J＝8.2Hz)。

中间体7：3-(2-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩-2- 基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 2-氯-4-羟基苯甲醛中制备3-(2-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。 洗脱：环己烷/乙酸乙酯：6/4。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：6.86(dd，1H， J＝2.3Hz，J＝8.5Hz)；6.94(d，1H，J＝2.3Hz)；7.78-7.84(m，3H)；7.90(d， 1H，J＝4.1Hz)；7.97-8.05(m，3H)；8.12(d，1H，J＝8.8Hz)；8.37(d，1H， J＝4.1Hz)。

中间体8：3-(2-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩-2- 基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(2-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(2-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基) 苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮。

在室温下搅拌3小时后，通过过滤除去催化剂，并在减压条件 下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：二氯甲烷。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.09-3.15(m，2H)； 3.19-3.25(m，2H)；6.69(dd，1，J＝2.5Hz，J＝8.2Hz)；6.9(d，1H， J＝2.5Hz)；7.16(d，1H)；7.38(d，1H，J＝3.8Hz)；7.66-7.71(m，3H)； 7.76(d，1H，J＝8.5Hz)。

中间体9：3-(3-氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩-2- 基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 3-氟-4-羟基苯甲醛中制备3-(3-氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。将残余物从乙腈中结晶。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：5.51(s，1H)；7.08 (d，1H，J＝8.5Hz)；7.33-7.48(m，3H)；7.71(m，1H)；7.77-7.82(m，3H)； 7.86(d，2H，J＝8.5Hz)。

中间体10：3-(3-氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩-2- 基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(3-氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(3-氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基) 苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮。

在42℃2小时30分后，通过过滤除去催化剂，并在减压条件 下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：7/3。硅胶40-63μm。

1HNMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.02(t，2， J＝7.5Hz)；3.21(t，2，J＝7.5Hz)；5.01(d，1H，J＝3.8Hz)；6.97(m，3H)； 7.39(d，1H，J＝3.9Hz)；7.68(m，3H)；7.75(d，2H，J＝8.2Hz)。

中间体11：3-(3-溴-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩-2- 基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 3-溴-4-羟基苯甲醛中制备3-(3-溴-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。将蒸发残余物从乙醇中结晶。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：7.01(d，1H， J＝8.2Hz)；7.65(d，1H，J＝15.5Hz)；7.71(dd，1H，J＝1.9Hz，J＝8.6Hz)； 7.77-7.84(m，3H)；7.89(d，1H，J＝4.1Hz)；8.03(d，2H，J＝8.2Hz)；8.19 (d，1H，J＝1.7Hz)；8.40(d，1H，J＝4.1Hz)。

中间体12：3-(3-溴-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩-2- 基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(3-溴-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(3-溴-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基) 苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮。

在室温下搅拌4小时后，通过过滤除去催化剂，并在减压条件 下通过蒸发除去溶剂，并通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：85/15。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.99-3.05(m， 2H)；3.18-3.23(m，2H)；6.96(d，1H，J＝8.2Hz)；7.10-7.14(m，1H)； 7.36-7.41(m，2H)；7.66-7.69(m，3H)；7.75(d，2H，J＝8.2Hz)。

中间体13：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2- 基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2-基)乙酮以及 2，3-二氯-4-羟基苯甲醛中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟 甲基)苯基)呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮。用二氯甲烷洗涤蒸发残余物。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：7.07(d，1H， J＝8.8Hz)；7.51(d，1H，J＝3.8Hz)；7.71(d，1H，J＝15.5Hz)；7.88(d，2H， J＝8.3Hz)；7.93(d，1H，J＝3.8Hz)；8.03(d，1H，J＝15.5Hz)；8.06(d，1H， J＝8.8Hz)；8.14(d，2H，J＝8.3Hz)。

中间体14：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃 -2-基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三 氟甲基)苯基)呋喃-2-基)丙-1-酮。

在40℃在5巴氢气压力下搅拌24小时后，通过过滤除去催化 剂，并在减压条件下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发残 余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.19(m，4H)； 6.88(d，1H，J＝4.1Hz)；6.90(d，1H，J＝8.9Hz)；7.17(d，1H，J＝8.9Hz)； 7.29(d，1H，J＝4.1Hz)；7.69(d，2H，J＝8.2Hz)；7.88(d，2H，J＝8.2Hz)。

中间体15：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟-甲氧基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以 及2，3-二氯-4-羟基苯甲醛中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三 氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。将蒸发残余物从乙腈中结 晶。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：7.07(d，1H， J＝9.0Hz)；7.49(d，2H，J＝8.4Hz)；7.80-7.86(m，3H)；7.93-7.98(m， 2H)；8.09(d，1H，J＝9.0Hz)；8.36(d，1H，J＝4.2Hz)。

中间体16：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟-甲氧基)苯基) 噻吩-2-基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲氧基) 苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯 基)-1-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基)-丙-1-酮。

在室温下在10巴氢气压力下搅拌24小时后，通过过滤除去催 化剂，并在减压条件下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发 残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.13-3.23(m， 4H)；5.61(s，1H)；6.90(d，1H，J＝8.6Hz)；7.16(d，1H，J＝8.6Hz)； 7.25-7.29(m，3H)；7.64-7.69(m，3H)。

中间体17：3-(2，3-二氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩 -2-基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 2，3-二氟-4-羟基苯甲醛中制备3-(2，3-二氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟 甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。将蒸发残余物从乙腈中结晶。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：6.88(t，1H， J＝8.3Hz)；7.79(m，5H)；7.88(d，1H，J＝3.5Hz)；8.04(d，2H，J＝7.9Hz)； 8.31(d，1H，J＝3.5Hz)。

中间体18：3-(2，3-二氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻吩 -2-基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(2，3-二氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(2，3-二氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三 氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮。

在45℃搅拌1小时后，通过过滤除去催化剂，并在减压条件 下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：7/3。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：2.89(t，2H， J＝7.3Hz)；3.27(t，2H，J＝7.3Hz)；6.69(t，1H，J＝8.5Hz)；6.93(t，1H， J＝8.5Hz)；7.80(m，3H)；8.01(m，3H)。

中间体19：3-(4-羟基-3，5-二甲基苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 4-羟基-3，5-二甲基苯甲醛中制备3-(4-羟基-3，5-二甲基苯 基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。用二氯甲烷洗 涤蒸发残余物。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.22(s，6H)；7.52 (s，2H)；7.62(d，1H，J＝15.5Hz)；7.71(d，1H，J＝15.5Hz)；7.83(d，2H， J＝8.3Hz)；7.90(d，1H，J＝4.1Hz)；8.03(d，2H，J＝8.3Hz)；8.36(d，1H， J＝4.1Hz)；9.01(s，1H)。

中间体20：3-(4-羟基-3，5-二甲基苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(4-羟基-3，5-二甲基苯基)-1-(5-(4-(三氟甲 基)苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(4-羟基-3，5-二甲基苯 基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)-丙-1-酮。

在室温下在5巴氢气压力下搅拌24小时后，通过过滤除去催 化剂，并在减压条件下通过蒸发除去溶剂。“按原样”使用该蒸发残 余物用于进行下一步骤。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：2.11(s，6H)； 2.71-2.87(m，2H)；3.18-3.27(m，2H)；6.80(s，2H)；7.75-8.12(m，6H)。

中间体21：1-(5-(4-溴苯基)噻吩-2-基)-3-(2，3-二氯-4-羟苯基)丙 -2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(溴苯基)噻吩-2-基)乙酮以及2，3-二 氯-4-羟基苯甲醛中制备1-(5-(4-溴苯基)噻吩-2-基)-3-(2，3-二氯-4-羟 苯基)丙-2-烯-1-酮。用二氯甲烷洗涤蒸发残余物。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：7.08(d，1H， J＝8.7Hz)；7.68(d，2H，J＝8.7Hz)；7.77-7.82(m，4H)；7.99(d，1H， J＝15.5Hz)；8.09(d，1H，J＝9.0Hz)；8.35(d，1H，J＝4.2Hz)；11.42(s， 1H)。

中间体22：1-(5-(4-溴苯基)噻吩-2-基)-3-(2，3-二氯-4-羟苯基)丙 -1-酮

将1-(5-(4-溴苯基)噻吩-2-基)-3-(2，3-二氯-4-羟苯基)丙-2-烯-1- 酮溶解于二氯甲烷(0.7g，1.5mol/L)中。依次逐滴加入三乙基硅 烷(2.1当量)以及三氟乙酸(8当量)。在室温下搅拌16小时后， 用水洗涤该反应物，并接着在减压条件下通过蒸发去除二氯甲烷。 通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1至8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.15-3.20(m， 4H)；6.90(d，1H，J＝8.6Hz)；7.16(d，1H，J＝8.6Hz)；7.29(d，1H， J＝4.2Hz)；7.50(d，2H，J＝9.0Hz)；7.55(d，2H，J＝9.0Hz)；7.65(d，1H， J＝4.2Hz)。

中间体23：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(甲硫基)-苯基)噻吩 -2-基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 2，3-二氯-4-羟基苯甲醛中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(甲硫 基)苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。“按原样”使用该蒸发残余物用于进 行下一步骤。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：2.53(s，3H)； 7.07(d，1H，J＝8.8Hz)；7.35(d，2H，J＝8.7Hz)；7.32-7.78(m，3H)；7.83 (d，1H，J＝15.3Hz)；7.99(d，1H，J＝15.3Hz)；8.09(d，1H，J＝8.8Hz)；8.33 (d，1H，J＝3.9Hz)。

中间体24：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(甲硫基)-苯基)噻吩 -2-基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(甲硫基)苯基) 噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(甲硫 基)苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮。

在50℃在10巴氢气压力下搅拌24小时后，通过过滤除去催 化剂，并在减压条件下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发 残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.52(s，3H)； 3.11-3.24(m，4H)；5.61(bs，1H)；6.91(d，1H，J＝8.6Hz)；7.17(d，1H， J＝8.6Hz)；7.23-7.29(m，3H)；7.56(d，2H，J＝8.5Hz)；7.64(d，1H， J＝4.1Hz)。

中间体25：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-苯基噻吩-2-基)-丙-1-酮

根据通用操作C从1-(5-(4-(溴苯基)噻吩-2-基)-3-(2，3-二氯-4-羟 苯基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-苯基噻吩-2-基) 丙-1-酮。

在40℃在10巴氢气压力下搅拌24小时后，通过过滤除去催 化剂，并在减压条件下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发 残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1至8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.16-3.21(m， 4H)；6.91(d，1H，J＝8.6Hz)；7.17(d，1H，J＝8.6Hz)；7.31(d，1H， J＝3.9Hz)；7.39-7.42(m，3H)；7.64-7.67(m，3H)。

中间体26：3-(4-羟基-3-甲基苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻 吩-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 4-羟基-3-甲基苯甲醛中制备3-(4-羟基-3-甲基苯基)-1-(5-(4-(三氟甲 基)苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮。用二氯甲烷洗涤蒸发残余物。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：2.18(s，3H)； 6.86(d，1，J＝8.3Hz)；7.55(dd，1H，J＝2.4Hz，J＝8.3Hz)；7.65(d，1H， J＝15.6Hz)；7.71(d，1H，J＝15.6Hz)；7.72(d，1H，J＝2.4Hz)；7.84(d，2H， J＝8.2Hz)；7.91(d，1H，J＝4.1Hz)；8.04(d，2H，J＝8.2Hz)；8.35(d，1H， J＝4.1Hz)；10.10(bs，1H)。

中间体27：3-(4-羟基-3-甲基苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻 吩-2-基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(4-羟基-3-甲基苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)- 苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(4-羟基-3-甲基苯 基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)-丙-1-酮。

在40℃在5巴氢气压力下搅拌40小时后，通过过滤除去催化 剂，并在减压条件下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发残 余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1至8/2。硅胶40-63μm。

1HNMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.24(s，3H)； 2.96-3.01(m，2H)；3.17-3.22(m，2H)；4.68(s，1H)；6.71(d，1H， J＝8.1Hz)；6.96(dd，1H，J＝2.3Hz，J＝8.1Hz)；7.01(d，1H，J＝2.3Hz)； 7.38(d，1H，J＝3.9Hz)；7.66-7.68(m，3H)；7.75(d，2H，J＝8.4Hz)。

中间体28：3-(4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-噻吩-2-基)丙 -2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 4-羟基苯甲醛中制备3-(4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙-2-烯-1-酮。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：6/4。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：6.91(d，1H， J＝8.4Hz)；7.32(d，1H，J＝15.4Hz)；7.46(d，1H，J＝4.1Hz)；7.59(d，2H， J＝8.4Hz)；7.79-7.88(m，4H)。

中间体29：3-(4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-噻吩-2-基)丙 -1-酮

根据通用操作C从3-(4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)-丙-1-酮。

在室温搅拌1.5小时后，通过过滤除去催化剂，并在减压条件 下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.01-3.06(m， 2H)；3.19-3.24(m，2H)；4.72(bs，1H)；6.78(d，2H，J＝8.5Hz)；7.13(d， 2H，J＝8.5Hz)；7.38(d，1H，J＝4.1Hz)；7.67-7.68(m，3H)；7.76(d，2H， J＝8.2Hz)。

中间体30：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙-2-烯-1-酮

根据通用操作B从1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)乙酮以及 2，3-二氯-4-羟基苯甲醛中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(3-(三氟 甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮，在50℃持续30小时。通过硅 胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：7/3。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：5.95(s，1H)；7.06 (d，1H，J＝8.8Hz)；7.33(d，1H，J＝15.5Hz)；7.46(d，1H，J＝4.1Hz)； 7.55-7.70(m，3H)；7.85(d，1H，J＝4.1Hz)；7.88-7.93(m，2H)；8.21(d， 1H，J＝15.5Hz)。

中间体31：3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙-1-酮

根据通用操作C从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(3-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮中制备3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(3-(三 氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮。

在40℃搅拌3小时后，通过过滤除去催化剂，并在减压条件 下通过蒸发除去溶剂。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.15-3.25(m， 4H)；5.57(s，1H)；6.92(d，1H，J＝8.4Hz)；7.17(d，1H，J＝8.4Hz)；7.38 (d，1H，J＝4.1Hz)；7.56(m，1H)；7.63(d，1H，J＝7.9Hz)；7.69(d，1H， J＝4.1Hz)；7.82(d，1H，J＝7.9Hz)；7.89(s，1H)。

实例4：合成根据本发明的这些化合物：

化合物1：叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴代异丁酸酯制备叔丁基2-(2，3-二 氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲 基丙酸酯。

在搅拌16小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂，并通过 硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：95/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.46(s，9H)；1.61 (s，6H)；3.16-3.26(m，4H)；6.81(d，1H，J＝8.5Hz)；7.11(d，1H， J＝8.5Hz)；7.39(d，1H，J＝3.8Hz)；7.66-7.69(m，3H)；7.77(d，2H， J＝8.2Hz)。

化合物2：2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2，3-二氯 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基 丙酸酯中制备2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌16小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压 条件下通过蒸发去除二氯甲烷。将蒸发残余物从二氯甲烷中重结 晶。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.64(s，6H)； 3.19-3.28(m，4H)；6.96(d，1H，J＝8.5Hz)；7.21(d，1H，J＝8.5Hz)；7.39 (d，1H，J＝4.1Hz)；7.67-7.69(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.5Hz)。

Mass(ES+)：531/533(M+1)。

M.p.＝153-154℃。

化合物3：叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)-丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作G从叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟 甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯中制备叔丁基 2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧 基)-2-甲基丙酸酯。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.46(s，9H)；1.60 (s，6H)；2.15-2.22(m，2H)；2.79-3.01(m，2H)；4.95(t，1H，J＝6.6Hz)； 6.83(d，1H，J＝8.5Hz)；7.01(d，1H，J＝3.8Hz)；7.05(d，1H，J＝8.5Hz)； 7.28(m，1H)；7.63(d，2H，J＝8.5Hz)；7.69(d，2H，J＝8.5Hz)。

化合物4：2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作G从2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯-4-(3-羟 基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：95/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.65(s，6H)； 2.17-2.24(m，2H)；2.82-3.04(m，2H)；4.98(t，1H，J＝6.6Hz)；6.97(d， 1H，J＝8.5Hz)；7.02(d，1H，J＝3.8Hz)；7.14(d，1H，J＝8.5Hz)；7.28(m， 1H)；7.64(d，2H，J＝8.3Hz)；7.69(d，2H，J＝8.3Hz)。

Mass(ES+)：515/517(M-OH)；550(M+NH4)+；555/557(M+Na)+。

M.p.＝54-56℃。

化合物5：叔丁基2-(4-(3-(4-碘代苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作H使用1.1当量的氢化钠以及1.1当量的4-碘代 苄基溴从叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯中制备叔丁基2-(4-(3-(4-碘代苄氧 基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲 基丙酸酯。

通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：95/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.46(s，9H)；1.58 (s，6H)；2.05-2.31(m，2H)；2.71-2.97(m，2H)；4.33(d，1H，J＝11.7Hz)； 4.53-4.59(m，2H)；6.79(d，1H，J＝8.6Hz)；6.95(d，1H，J＝8.6Hz)；6.99 (d，1H，J＝3.5Hz)；7.11(d，2H，J＝7.9Hz)；7.28(m，1H)；7.64(d，2H， J＝8.5Hz)；7.70(m，4H)。

化合物6：2-(4-(3-(4-碘代苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从叔丁基2-(4-(3-(4- 碘代苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-2，3-二氯苯氧 基)-2-甲基丙酸酯中制备2-(4-(3-(4-碘代苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基) 苯基)噻吩-2-基)丙基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌16小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压 条件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行 纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.61(s，6H)； 2.02-2.25(m，2H)；2.70-2.95(m，2H)；4.32(d，1H，J＝11.9Hz)； 4.52-4.58(m，2H)；6.91(d，1H，J＝8.6Hz)；6.87(d，1H，J＝8.6Hz)；6.98 (d，1H，J＝3.5Hz)；7.09(d，2H，J＝8.2Hz)；7.27(m，1H)；7.61-7.72(m， 6H)。

Mass(ES-)：747/748/749(M-1)。

外观：粘性油

化合物7：2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基) 丙基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用2.2当量的氢化钠以及2.2当量的苄基溴 从2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯 氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸。

在2N氢氧化钠(20当量)存在下将蒸发残余物溶解于乙醇中。 搅拌16小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。用盐酸的稀溶 液对蒸发残余物进行酸化，并接着用二氯甲烷进行萃取。在硫酸镁 上对有机相进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅胶层 析(制备型HPLC，lichrospher(Merck)RP18 12μm 100A，柱：25*250 mm)对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％三氟乙酸：22/78至0/100。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.64(s，6H)； 2.31-2.08(m，2H)；3.01-2.74(m，2H)；4.39(d，1H，J＝11.7Hz)； 4.57-4.66(m，2H)；6.91(d，1H，J＝8.5Hz)；6.99(d，1H，J＝8.5Hz)；7.01 (d，1H，J＝3.5Hz)；7.27-7.38(m，6H)；7.63(d，2H，J＝8.5Hz)；7.70(d，2H， J＝8.5Hz)。

Mass(ES+)：640/642(M+NH4)+，645/647(M+Na)+。

M.p.＝46-48℃。

化合物7a与7b：

在室温下通过手性柱半制备性HPLCAD-H(250*20 mm，5μm，Chiral Technologies Europe)将化合物7的两种对映异构 体分开。用加入了0.1％的三氟乙酸的正庚烷-乙醇(95-5)流动相 进行无梯度洗脱，流速为18ml/min。

通过分析性HPLC(柱AD-H(250*46mm，5μm， Daicel Chemical Industries，Ltd.))在30℃检查如此获得的两种对映 异构体各自的对映异构体纯度；用加入了0.1％三氟乙酸的正庚烷- 乙醇(92-8)流动相进行无梯度洗脱；流速1ml/min；在298nm处 进行UV检测。

化合物7a：tR＝11.85min，ee＝100％

化合物7b：tR＝16.28min，ee＝99.6％

化合物8：叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)丁酸酯

根据通用操作D从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基2-溴代丁酸酯中制备叔丁基2-(2，3- 二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-丁 酸酯。

在搅拌2小时后，使用盐酸的稀溶液对混合物进行酸化，并接 着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在减 压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.11(t，3H， J＝7.6Hz)；1.43(s，9H)；1.97-2.07(m，2H)；3.14-3.26(m，4H)；4.45(t， 1H，J＝5.8Hz)；6.66(d，1H，J＝8.8Hz)；7.13(d，1H，J＝8.8Hz)；7.38(d， 1H，J＝4.1Hz)；7.66-7.69(m，3H)；7.75(d，2H，J＝8.2Hz)。

化合物9：2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)丁酸

根据通用操作E使用17当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2，3-二氯 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)丁酸酯 中制备2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-苯氧基)丁酸。

在室温下搅拌4小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析(制备型HPLC， lichrospher(Merck)RP18 12μm 100A，柱：25*250mm)对蒸发残余 物进行纯化。

洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％三氟乙酸：30/70至10/90。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：1.01(t，3H， J＝7.3Hz)；1.84-1.98(m，2H)；3.03(t，2H，J＝7.5Hz)；3.31(t，2H， J＝7.5Hz)；4.82(t，1H，J＝6.4Hz)；6.92(d，1H，J＝8.8Hz)；7.32(d，1H， J＝8.8Hz)；7.79-7.83(m，3H)；7.99(d，2H，J＝8.2Hz)；8.05(d，1H， J＝4.2Hz)；13.15(s，1H)。

Mass(ES+)：531(M+1)。

M.p.＝169-171℃。

化合物10：叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(4-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(4-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴代异丁酸酯中制备叔丁基2-(2，3- 二氯-4-(3-氧代-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2- 甲基丙酸酯。

在搅拌18小时后，使用盐酸的稀溶液对混合物进行酸化，并 接着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在 减压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.45(s，9H)；1.57 (s，6H)；3.16-3.21(m，2H)；3.25-3.30(m，2H)；6.79(d，1H，J＝8.5Hz)； 7.09(d，1H，J＝8.5Hz)；7.68(m，4H)；7.8(d，1H，J＝1.5)；7.95(d，1H， J＝1.5Hz)。

化合物11：2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用17当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2，3-二氯 -4-(3-氧代-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基 丙酸酯中制备2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌4小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯 化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：1.52(s，6H)； 3.03(t，2H，J＝7.9Hz)；3.38(t，2H，J＝7.9Hz)；6.88(d，1H，J＝8.6Hz)； 7.32(d，1H，J＝8.6Hz)；7.78(d，2H，J＝8.3Hz)；8.03(d，2H，J＝8.3Hz)； 8.51(s，1H)；8.57(s，1H)。

Mass(ES-)：529(M-1)。

M.p.＝99-101℃。

化合物12：甲基5-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2，2-二甲基戊酸酯

根据通用操作D从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-1-酮以及甲基5-碘代2，2-二甲基戊酸酯中制备甲基 5-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧 基)-2，2-二甲基戊酸酯。

在搅拌2小时后，使用盐酸的稀溶液对混合物进行酸化，并接 着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在减 压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.22(s，6H)； 1.72-1.81(m，6H)；3.16-3.25(m，4H)；3.67(s，3H)；6.76(d，1H， J＝8.5Hz)；7.18(d，1H，J＝8.5Hz)；7.39(d，1H，J＝4.1Hz)；7.66-7.69(m， 3H)；7.75(d，2H，J＝8.5Hz)。

化合物13：5-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)-2，2-二甲基戊酸

根据通用操作F使用10当量的2N氢氧化钠溶液从甲基5-(2，3- 二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧 基)-2，2-二甲基戊酸酯中制备5-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲 基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2，2-二甲基戊酸。

在50℃搅拌18小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。在 稀释的盐酸溶液中吸收蒸发残余物，并接着用二氯甲烷进行萃取。 有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过 硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：95/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：1.10(s，6H)； 1.58-1.70(m，4H)；3.03(t，2H，J＝7.6Hz)；3.31(t，2H，J＝5.9Hz)；4.03 (t，2H，J＝5.6Hz)；7.08(d，1H，J＝8.8Hz)；7.33(d，1H，J＝8.8Hz)； 7.79-7.82(m，3H)；7.99(d，2H，J＝8.2Hz)；8.04(d，1H，J＝4.1Hz)；12.12 (s，1H)。

Mass(ES-)：571(M-1)。

M.p.＝167-169℃。

化合物14：叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)乙酸酯

根据通用操作D从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴乙酸酯中制备叔丁基2-(2，3-二氯 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-乙酸酯。

在搅拌2小时后，使用盐酸的稀溶液对混合物进行酸化，并接 着用乙酸乙酯萃取。所结合的有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并 接着在减压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.45(s，9H)； 3.16-3.26(m，4H)；4.60(s，2H)；6.68(d，1H，J＝8.4Hz)；7.18(d，1H， J＝8.4Hz)；7.39(d，1H，J＝3.8Hz)；7.66-7.69(m，3H)；7.76(d，2H， J＝8.2Hz)。

化合物15：2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)乙酸

根据通用操作E使用17当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2，3-二氯 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)乙酸酯 中制备2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-苯氧基)乙酸。

在室温下搅拌4小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析(制备型HPLC， lichrospher(Merck)RP18 12μm 100A，柱：25*250mm)对蒸发残余 物进行纯化。

洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％三氟乙酸：14/86至10/90。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：3.04(t，2H， J＝7.5Hz)；3.31(t，2H，J＝7.5Hz)；4.83(s，2H)；7.01(d，1H，J＝8.6Hz)； 7.33(d，1H，J＝8.6Hz)；7.79-7.83(m，3H)；7.99(d，2H，J＝8.2Hz)；8.06 (d，1H，J＝4.1Hz)；13.13(s，1H)。

Mass(ES-)：501(M-1)。

M.p.＝217-219℃。

化合物16：乙基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2-乙酸苯乙酯

根据通用操作D从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-1-酮以及2-溴代乙酸苯乙酯中制备乙基2-(2，3-二氯 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-乙酸 苯乙酯。

在搅拌16小时后，使用盐酸的稀溶液对混合物进行酸化，并 接着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在 减压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.24(t，3H， J＝7.6Hz)；3.17-3.22(m，4H)；4.15(q，2H，J＝7.6Hz)；5.64(s，1H)； 6.75(d，1H，J＝8.7Hz)；7.13(d，1H，J＝8.7Hz)；7.32-7.46(m，6H)； 7.62-7.67(m，3H)；7.72-7.77(m，2H)。

化合物17：2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)-2-苯乙酸

根据通用操作F使用20当量的2N氢氧化钠溶液从乙基2-(2，3- 二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2- 苯乙酸酯中制备2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)-苯氧基)-2-苯乙酸。

在40℃搅拌16小时后，使用盐酸的稀溶液对混合物进行酸化， 并接着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着 在减压条件下浓缩。通过硅胶层析(制备型HPLC，lichrospher(Merck) RP18 12μm 100A，柱：25*250mm)对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％三氟乙酸：14/86至10/90。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：3.03(t，2H， J＝7.6Hz)；3.31(t，2H，J＝7.6Hz)；6.02(s，1H)；7.07(d，1H，J＝8.8Hz)； 7.35(d，1H，J＝8.8Hz)；7.38-7.47(m，3H)；7.58(d，2H，J＝6.5Hz)； 7.79-7.82(m，3H)；7.99(d，2H，J＝8.2Hz)；8.06(d，1H，J＝4.1Hz)；13.35 (s，1H)。

Mass(ES-)：577(M-1)。

M.p.＝189-191℃。

化合物18：叔丁基2-(2-氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从3-(3-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴代异丁酸酯中制备叔丁基2-(2-氯 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基 丙酸酯。

在搅拌2小时后，使用1N柠檬酸的稀溶液对混合物进行酸化， 并接着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着 在减压条件下浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/二氯甲烷：5/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.46(s，9H)；1.57 (s，6H)；3.01(t，2H，J＝7.3Hz)；3.2(t，2H，J＝7.3Hz)；6.88(d，1H， J＝8.5Hz)；7.01(dd，1H，J＝2.1Hz，J＝8.5Hz)；7.26(m，1H)；7.39(d，1H， J＝3.8Hz)；7.66-7.69(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.2Hz)。

化合物19：2-(2-氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用17当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2-氯-4-(3- 氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯 中制备2-(2-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌1小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。将蒸发残余物从二氯甲烷/庚烷混合物 (5/5)中结晶。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：1.49(s，6H)； 2.87(t，2H，J＝7.7Hz)；3.32(t，2H，J＝7.7Hz)；6.84(d，1H，J＝8.3Hz)； 7.15(dd，1H，J＝2.3Hz，J＝8.3Hz)；7.39(d，1H，J＝2.3Hz)；7.79-7.82(m， 3H)；7.99(d，2H，J＝8.2Hz)；8.05(d，1H，J＝4.1Hz)。

Mass(ES-)：495(M-1)。

M.p.＝136-137℃。

化合物20：叔丁基2-(3-氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从3-(2-氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴代异丁酸酯中制备叔丁基2-(3-氯 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基 丙酸酯。

在搅拌2小时后，使用1N柠檬酸的稀溶液对混合物进行酸化， 并接着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着 在减压条件下浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/二氯甲烷：5/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.50(s，9H)；1.55 (s，6H)；3.09-3.14(m，2H)；3.18-3.24(m，2H)；6.7(dd，1，J＝2.4Hz， J＝8.5Hz)；6.91(d，1H，J＝2.6Hz)；7.15(d，1H，J＝8.5Hz)；7.38(d，1H， J＝3.8Hz)；7.66-7.69(m，3H)；7.75(d，2H，J＝8.2Hz)。

化合物21：2-(3-氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用17当量的三氟乙酸从叔丁基2-(3-氯-4-(3- 氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯 中制备2-(3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌1小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。将蒸发残余物从二氯甲烷/庚烷混合物 (5/5)中结晶。

1H NMR(300MHz，DMSO-d6，δ以ppm为单位)：1.49(s，6H)； 2.97(t，2H，J＝8.2Hz)；3.28(t，2H，J＝8.2Hz)；6.76(dd，1，J＝2.6Hz， J＝8.6Hz)；6.88(d，1H，J＝2.6Hz)；7.32(d，1H，J＝8.6Hz)；7.79-7.83(m， 3H)；7.99(d，2H，J＝8.2Hz)；8.04(d，1H，J＝4.1Hz)。

Mass(ES-)：495(M-1)。

M.p.＝104-106℃。

化合物22：叔丁基2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从3-(3-氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴代异丁酸酯中制备叔丁基2-(2-氟 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基 丙酸酯。

在搅拌16小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂，并在二 氯甲烷中吸收蒸发残余物。有机相用氯化铵的饱和溶液洗涤，在硫 酸镁上干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸 发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：梯度97/3至9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.46(s，9H)；1.54 (s，6H)；3.02(m，2H)；3.21(m，2H)；6.9(m，3H)；7.36(d，1H， J＝4.1Hz)；7.67(m，3H)；7.76(d，2H J＝8.1Hz)。

化合物23：2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用17当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2-氟-4-(3- 氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯 中制备2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)- 苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌4小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯 化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：95/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.57(s，6H)；3.07 (m，2H)；3.24(m，2H)；6.99(m，3H)；7.39(d，1H，J＝4.1Hz)；7.68(m， 3H)；7.76(d，2H，J＝8.2Hz)。

Mass(ES+)：481(M+1)；498(M+NH4)+；503(M+Na)+。

M.p.＝150-151℃。

化合物24：叔丁基2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)乙酸酯

根据通用操作D从3-(3-氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴乙酸酯中制备叔丁基2-(2-氟-4-(3- 氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-乙酸酯。

在搅拌18小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂，并在乙 酸乙酯中吸收蒸发残余物。有机相用氯化铵的饱和溶液洗涤，在硫 酸镁上进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅胶层析法 对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：95/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.46(s，9H)； 3.01-3.06(m，2H)；3.21(m，2H)；4.56(s，2H)；6.79-6.98(m，3H)； 7.39(d，1H，J＝4.1Hz)；7.65-7.69(m，3H)；7.75(m，2H)。

化合物25：2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)苯氧基)乙酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2-氟-4-(3- 氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)乙酸酯中制备 2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基) 乙酸。

在室温下搅拌18小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压 条件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行 纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：梯度95/5至9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.04(t，2H， J＝4.5Hz)；3.22(t，2H，J＝4.5Hz)；4.72(s，2H)；6.89-7.06(m，3H)；7.39 (d，1H，J＝3.8Hz)；7.69(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.2Hz)。

Mass(ES+)：453(M+1)；470(M+NH4)+；475(M+Na)+。

M.p.＝170-171℃。

化合物26：2-(2-氟-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)苯氧基)乙酸

根据通用操作G从2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)苯氧基)乙酸中制备2-(2-氟-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟 甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)乙酸。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：2.11-2.22(m， 2H)；2.67-2.76(m，2H)；4.69(s，2H)；4.91(m，1H)；6.86-6.99(m，4H)； 7.25(d，1H，J＝3.8Hz)；7.62(d，2H，J＝8.5Hz)；7.68(d，2H，J＝8.5Hz)。

化合物27：2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)-2-氟苯氧基)乙酸

根据通用操作H使用2.2当量的氢化钠以及2.2当量的苄基溴 从2-(2-氟-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基) 乙酸中制备2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-2-氟苯氧基)乙酸。

在2N氢氧化钠(20当量)的存在下将蒸发残余物溶解于乙醇 中。搅拌16小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。使用盐酸 的稀溶液对蒸发残余物进行酸化，并接着用二氯甲烷进行萃取。有 机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅 胶层析(制备型HPLC，lichrospher(Merck)RP18 12μm 100A，柱： 25*250mm)对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％三氟乙酸：22/78至10/90。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.99-2.11(m， 1H)；2.23-2.35(m，1H)；2.58-2.80(m，2H)；4.35(d，1H，J＝11.4Hz)； 4.53(m，1H)；4.61(d，1H，J＝11.4Hz)；4.71(s，2H)；6.82-6.93(m，3H)； 6.97(d，1H，J＝3.5Hz)；7.27-7.39(m，6H)；7.63(d，2H，J＝8.5Hz)；7.71 (d，2H，J＝8.5Hz)。

Mass(MALDI-TOF)：566(M+Na)+。

化合物28：叔丁基2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)丁酸酯

根据通用操作D从3-(3-氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基2-溴代丁酸酯中制备叔丁基2-(2-氟 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-丁酸酯。

搅拌16小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。在乙酸乙 酯中吸收蒸发残余物。有机相用氯化铵的饱和溶液洗涤，在硫酸镁 上进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸 发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：梯度95/5至9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.09(t，3H， J＝7.3Hz)；1.43(s，9H)；1.98(m，2H)；3.02(t，2H，J＝4.5Hz)；3.23(t， 2H，J＝4.5Hz)；4.42(t，1H，J＝6.1Hz)；6.81-7.01(m，3H)；7.38(d，1H， J＝4.1Hz)；7.66-7.69(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.2Hz)。

化合物29：2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)苯氧基)丁酸

根据通用操作E使用17当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2-氟-4-(3- 氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)丁酸酯中制备 2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基) 丁酸。

在室温下搅拌6小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯 化。将所获得的油从二氯甲烷中结晶。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.11(t，3H， J＝7.3Hz)；2.03(m，2H)；3.01(t，2H，J＝7.4Hz)；3.19(t，2H，J＝7.4Hz)； 4.58(t，1H，J＝5.7Hz)；6.86-7.01(m，3H)；7.37(d，1H，J＝3.8Hz)；7.66 (m，3H)；7.76(d，2H，J＝7.9Hz)。

Mass(MALDI-TOF)：481(M+1)。

M.p.＝119-120℃。

化合物30：2-(2-氟-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)-丙基)苯氧基)丁酸

根据通用操作G从2-(2-氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)苯氧基)丁酸中制备2-(2-氟-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟 甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)丁酸。

通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：95/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.12(t，3H， J＝7.6Hz)；1.98-2.25(m，4H)；2.69(m，2H)；4.59(t，1H，J＝6.6Hz)； 4.9(t，1H，J＝5.8Hz)；6.83-6.96(m，4H)；7.23(d，1H，J＝3.8Hz)；7.61(d， 2H，J＝8.7Hz)；7.66(d，2H，J＝8.7Hz)。

Mass(ES+)：483(M+1)。

外观：无色粘性油。

化合物31：叔丁基2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)丁酸酯

根据通用操作D从3-(3-溴-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基2-溴代丁酸酯中制备叔丁基2-(2-溴 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-丁酸酯。

在搅拌2小时后，使用1N柠檬酸的稀溶液对混合物进行酸化， 并接着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着 在减压条件下浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：0.95-1.25(m， 3H)；1.45(s，9H)；1.84-2.06(m，2H)；3.01(m，2H)；3.2(t，2H， J＝7.3Hz)；4.45(t，1H，J＝6.1Hz)；6.69(d，1H，J＝8.5Hz)；7.09(dd，1H， J＝2.1Hz，J＝8.5Hz)；7.37-7.39(m，1H)；7.45(d，1H，J＝2.1Hz)； 7.65-7.69(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.5Hz)。

化合物32：2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)苯氧基)丁酸

根据通用操作E使用17当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2-溴-4-(3- 氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)丁酸酯中制备 2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基) 丁酸。

在室温下搅拌1小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析(制备型HPLC， lichrospher(Merck)RP1812μm 100A，柱：25*250mm)对蒸发残余 物进行纯化。

洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％三氟乙酸：30/70至0/100。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.13(t，3H， J＝7.3Hz)；2.11(m，2H)；3.02(t，2H，J＝7.4Hz)；3.21(t，2H，J＝7.4Hz)； 4.68(t，1H，J＝5.6Hz)；6.78(d，1H，J＝8.5Hz)；7.14(dd，1H，J＝2.1Hz， J＝8.5Hz)；7.39(d，1H，J＝4.1Hz)；7.48(d，1H，J＝2.1Hz)；7.67-7.69(m， 3H)；7.76(d，2H，J＝8.5Hz)。

Mass(ES+)：541/543(M+1)。

M.p.＝126-128℃。

化合物33：叔丁基2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)苯氧基)乙酸酯

根据通用操作D从3-(3-溴-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴乙酸酯中制备叔丁基2-(2-溴-4-(3- 氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-乙酸酯。

在搅拌12小时后，使用1N柠檬酸的稀溶液对混合物进行酸化， 并接着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着 在减压条件下浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：85/15。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.48(s，9H)； 2.98-3.05(m，2H)；3.2(t，2H，J＝7.1Hz)；4.57(s，2H)；6.72(d，1H， J＝8.2Hz)；7.12(dd，1H，J＝2.1Hz，J＝8.2Hz)；7.38(d，1H，J＝3.8Hz)； 7.46(d，1H，J＝2.1Hz)；7.64-7.68(m，3H)；7.74(d，2H，J＝8.2Hz)。

化合物34：2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)苯氧基)乙酸

根据通用操作E使用17当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2-溴-4-(3- 氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)乙酸酯中制备 2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基) 乙酸。

在室温下搅拌1小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析(制备型HPLC， lichrospher(Merck)RP18 12μm 100A，柱：25*250mm)对蒸发残余 物进行纯化。

洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％三氟乙酸：30/70至0/100。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.04(t，2H， J＝7.6Hz)；3.22(t，2H，J＝7.6Hz)；4.7(s，2H)；6.82(d，1H，J＝8.2Hz)； 7.19(dd，1，J＝2.1Hz，J＝8.2Hz)；7.39(d，1H，J＝4.1Hz)；7.49(d，1H， J＝2.1Hz)；7.67-7.70(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.5Hz)。

Mass(ES+)：513/515(M+1)。

M.p.＝180-182℃。

化合物35：叔丁基2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从3-(3-溴-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴代异丁酸酯中制备叔丁基2-(2-溴 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基 丙酸酯。

在搅拌2小时后，使用1N柠檬酸的稀溶液对混合物进行酸化， 并接着用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着 在减压条件下浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3.δ以ppm为单位)：1.46(s，9H)；1.58 (s，6H)；2.98-3.05(m，2H)；3.2(t，2H，J＝7.1Hz)；6.86(d，1H，J＝8.5Hz)； 7.05(dd，1H，J＝2.1Hz，J＝8.5Hz)；7.39(d，1H，J＝4.1Hz)；7.44(d，1H， J＝2.1Hz)；7.65-7.69(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.2Hz)。

化合物36：2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用17当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2-溴-4-(3- 氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯 中制备2-(2-溴-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)- 苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌1小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析(制备型HPLC， lichrospher(Merck)RP1812μm 100A，柱：25*250mm)对蒸发残余 物进行纯化。

洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％三氟乙酸：30/70至0/100。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.64(s，6H)；3.05 (t，2H，J＝7.6Hz)；3.23(t，2H，J＝7.6Hz)；7.01(d，1H，J＝8.3Hz)；7.15(dd， 1H，J＝2.1Hz，J＝8.3Hz)；7.39(d，1H，J＝4.1Hz)；7.5(d，1H，J＝2.1Hz)； 7.67-7.70(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.5Hz)。

Mass(ES+)：541/543(M+1)。

M.p.＝102-104℃。

化合物37：叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)呋喃-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)呋喃-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴代异丁酸酯中制备叔丁基2-(2，3- 二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2-基)丙基)苯氧基)-2- 甲基丙酸酯。

搅拌16小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。在乙酸乙 酯中吸收蒸发残余物。有机相用氯化铵的饱和溶液洗涤，在硫酸镁 上进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸 发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：梯度95/5至8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.45(s，9H)；1.57 (s，6H)；3.19(m，4H)；6.79(d，1H，J＝8.6Hz)；6.87(d，1H，J＝3.7Hz)； 7.10(d，1H，J＝8.6Hz)；7.27(d，1H，J＝3.7Hz)；7.69(d，2H，J＝8.5Hz)； 7.88(d，2H，J＝8.5Hz)。

化合物38：2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃 -2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2，3-二氯 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基 丙酸酯中制备2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2- 基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌2小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压条 件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯 化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.63(s，6H)；3.19 (m，4H)；6.86(d，1H，J＝3.7Hz)；6.92(d，1H，J＝8.5Hz)；7.13(d，1H， J＝8.5Hz)；7.29(d，1H，J＝3.7Hz)；7.65(d，2H，J＝8.5Hz)；7.84(d，2H， J＝8.5Hz)；11.07(s，1H)。

Mass(ES-)：513/515(M-1)。

M.p.＝85℃。

化合物39：2-(2，3-二氯-4-(3-(吡啶-3-基-甲氧基)-3-(5-(4-(三氟甲 基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用8当量的氢化钠以及2.1当量的3-(溴甲 基)吡啶(pyriine)氢溴酸盐从2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲 基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯 -4-(3-(吡啶-3-基-甲氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-噻吩-2-基)丙基) 苯氧基)-2-甲基丙酸。

在70℃搅拌12小时后，用水稀释反应混合物，用1N盐酸溶 液进行酸化，并用乙酸乙酯萃取。有机相在减压条件下浓缩，用2N 氢氧化钠溶液处理，并用二氯甲烷萃取。在用1N柠檬酸溶液酸化 后，在减压条件下通过蒸发去除二氯甲烷，并通过硅胶快速层析法 对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：100/0至95/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.73(s，6H)； 2.22-2.35(m，2H)；2.85-2.97(m，2H)；4.35(d，1H，J＝12.5Hz)；4.55(d， 1H，J＝12.5Hz)；4.59-4.67(m，1H)；6.86(d，1H，J＝7.6Hz)；6.96(d，1H， J＝3.5Hz)；7.01(d，1H，J＝7.6Hz)；7.27-7.36(m，1H)；7.61-7.64(m， 3H)；7.68(d，2H，J＝8.4Hz)；8.06(bs，1H)；8.52(d，2H，J＝4.1Hz)。

Mass(ES-)：622/624/623(M-1)。

M.p.＝75-77℃。

化合物39a与39b：

在室温下通过手性柱半制备性HPLCAD-H(250*20 mm，5μm，Chiral Technologies Europe)将化合物39的两种对映异构 体分开。用正庚烷-乙醇(87-13)流动相以12ml/min的流速进行无 梯度洗脱。

通过分析性HPLC(柱AD-H(250*46mm，5μm，Daicel ChemicalIndustrics，Ltd.))在30℃检验如此获得的两种对映异构体 各自的对映异构体纯度；用正庚烷-乙醇(87-13)流动相进行无梯 度洗脱；流速1ml/min；在205nm处进行UV检测。

化合物39a：tR＝16.2min，ee＝96％

化合物39b：tR＝19.3min，ee＝99.1％

化合物40：2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)- 噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用2.2当量的氢化钠以及2.2当量的碘代甲 烷从2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基) 苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲 基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸。

通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化(洗脱：环己烷/乙酸乙 酯：9/1。硅胶40-63μm)。在2N氢氧化钠(20当量)的存在下 将所分离的油溶解于乙醇中。搅拌16小时后，在减压条件下通过 蒸发去除溶剂。使用盐酸的稀溶液对蒸发残余物进行酸化，并接着 用二氯甲烷进行萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在 减压条件下浓缩。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.65(s，6H)； 2.03-2.29(m，2H)；2.75-2.97(m，2H)；3.34(s，3H)；4.38(dd，1H， J＝5.7Hz J＝7.7Hz)；6.95(d，1H，J＝8.6Hz)；6.99(d，1H，J＝3.6Hz)；7.07 (d，1H，J＝8.6Hz)；7.27(d，1H，J＝3.6Hz)；7.62(d，2H，J＝8.5Hz)；7.68 (d，2H，J＝8.5Hz)。

Mass(ES+)：564/566(M+NH4)+，569/571(M+Na)+，585/587 (M+K)+。

M.p.＝46-48℃。

化合物40a与40b：

在室温下通过手性柱半制备性HPLCAD-H(250*20 mm，5μm，Chiral Technologies Europe)将化合物40的两种对映异构 体分开。用加入了0.1％的三氟乙酸的正庚烷-乙醇(93-7)流动相进 行无梯度洗脱，流速为16至18ml/min。

通过分析性HPLC(柱AD-H(250*46mm，5μm，Daicel Chemical Industries，Ltd.))在30℃检验如此获得的两种对映异构体 各自的对映异构体纯度；用加入了0.1％三氟乙酸的正庚烷-乙醇 (93-7)流动相进行无梯度洗脱；流速1ml/min；在292nm处进行 UV检测。

化合物40a：tR＝13.4min，ee＝100％

化合物40b：tR＝18.3min，ee＝99.4％

化合物41：2-(2，3-二氯-4-(3-乙氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻 吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用8当量的氢化钠以及2.1当量的碘乙烷从 2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧 基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯-4-(3-乙氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

在70℃搅拌20分钟后，使反应混合物回到室温，用2N氢氧 化钠处理，并接着用1N盐酸溶液进行酸化，并用乙酸乙酯萃取。 在减压的条件下浓缩有机相，并通过硅胶快速层析法对蒸发残余物 进行纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：100/0至95/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.24(t，3H， J＝7.0Hz)；1.64(s，6H)；2.03-2.28(m，2H)；2.78-2.99(m，2H)；3.37-3.47 (m，1H)；3.53-3.63(m，1H)；4.48(dd，1H，J＝5.5Hz，J＝7.6Hz)；6.92-6.97 (m，2H)；7.10(d，1H，J＝8.5Hz)；7.25(d，1H，J＝3.9Hz)；7.27(d，1H， J＝3.8Hz)；7.62(d，2H，J＝8.3Hz)；7.69(d，2H，J＝8.3Hz)。

Mass(ES-)：559/561(M-1)。

外观：粘性黄色的油。

化合物42：2-(2，3-二氯-4-(3-环己基甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲基) 苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用8当量的氢化钠以及2.5当量的溴甲基环 己烷从2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯-4-(3-(环己基甲氧 基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸。

在70℃搅拌18小时后，用1N盐酸溶液对反应混合物进行酸 化，并用乙酸乙酯萃取。在减压的条件下浓缩有机相，并通过硅胶 快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：100/0至9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：0.89-0.99(m， 3H)；1.14-1.28(m，4H)；1.55-1.84(m，10H)；2.03-2.27(m.2H)； 2.78-3.01(m，2H)；3.14(dd，1H，J＝6.4Hz，J＝9.0Hz)；3.22(dd，1H， J＝6.7Hz，J＝8.7Hz)；4.43(dd，1H，J＝4.9Hz，J＝7.8Hz)；6.94-6.97(m， 2H)；7.11(d，1H，J＝8.4Hz)；7.25(d，1H，J＝3.9Hz)；7.27(d，1H， J＝3.8Hz)；7.62(d，2H，J＝8.3Hz)；7.69(d，2H，J＝8.3Hz)。

Mass(ES-)：627/629(M-1)。

外观：粘性黄色的油。

化合物43：叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲氧基) 苯基)噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从3-(2，3-二氯-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲氧基) 苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴代异丁酸酯中制备叔丁基 2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯 氧基)-2-甲基丙酸酯。

在搅拌6小时后，用氯化铵的饱和溶液稀释该混合物，并接着 用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在减压 条件下浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.44(s，9H)；1.58 (s，6H)；3.14-3.24(m，4H)；6.79(d，1H，J＝8.6Hz)；7.09(d，1H， J＝8.6Hz)；7.25-7.29(m，3H)；7.64-7.68(m，3H)。

化合物44：2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻 吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2，3-二氯 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲 基丙酸酯中制备2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻 吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌48小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。 通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1至0/100。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.63(s，6H)； 3.17-3.26(m，4H)；6.93(d，1H，J＝8.4Hz)；7.18(d，1H，J＝8.4Hz)； 7.17-7.29(m，3H)；7.64-7.68(m，3H)。

Mass(ES-)：545/547(M-1)。

M.p.＝135-136℃。

化合物45：叔丁基2-(2，3-二氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从3-(2，3-二氟-4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴代异丁酸酯中制备叔丁基2-(2，3- 二氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2- 甲基丙酸酯。

在搅拌4小时后，使用1N柠檬酸的稀溶液对混合物进行酸化， 并接着用二氯甲烷萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着 在减压条件下浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：92/8。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.46(s，9H)；1.56 (s，6H)；3.08(t，2H，J＝7.0Hz)；3.22(t，2H，J＝7.0Hz)；6.70(m，1H)； 6.86(m，1H)；7.38(d，1H，J＝4.1Hz)；7.67(m，3H)；7.75(d，2H， J＝8.2Hz)。

化合物46：2-(2，3-二氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用15当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2，3-二氟 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基 丙酸酯中制备2-(2，3-二氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌18小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压 条件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行 纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.59(s，6H)；3.11 (t，2H，J＝7.6Hz)；3.25(t，2H，J＝7.6Hz)；6.80(t，1H，J＝8.2Hz)；6.96(t， 1H，J＝8.2Hz)；7.39(d，1H，J＝3.8Hz)；7.68(m，3H)；7.76(d，2H， J＝8.2Hz)。

Mass(MALDI-TOF)：499(M+1)，516(M+NH4+)，521(M+Na+)。

M.p.＝165-166℃。

化合物47：叔丁基2-(2，6-二甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基) 苯基)噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D使用15当量叔丁基溴代异丁酸酯以及15当量 碳酸钾(在反应过程中以3当量分批加入)从3-(4-羟基-3，5-二甲基 苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮中制备叔丁基 2-(2，6-二甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯 氧基)-2-甲基丙酸酯。

在100℃搅拌4天后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。在乙 酸乙酯中吸收蒸发残余物，并接着用氯化铵的饱和溶液洗涤。通过 硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：95/5至9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.41(s，9H)；1.51 (s，6H)；2.20(s，6H)；2.92-2.97(m，2H)；3.15-3.21(m，2H)；6.83(s， 2H)；7.37(d，1H，J＝3.9Hz)；7.65(d，1H，J＝3.9Hz)；7.67(d，2H， J＝8.4Hz)；7.75(d，2H，J＝8.4Hz)。

化合物48：2-(2，6-二甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻 吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从叔丁基-(2，6-二甲基 -4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基 丙酸酯中制备2-(2，6-二甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌48小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。 通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：97/3至0/100。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.51(s，6H)；2.22 (s，6H)；2.96(t，2H，J＝7.5Hz)；3.19(t，2H，J＝7.5Hz)；6.88(s，2H)； 7.37(d，1H，J＝3.9Hz)；7.65-7.67(m，3H)；7.74(d，2H，J＝8.4Hz)。

Mass(ES-)：489(M-1)。

M.p.＝157-158℃。

化合物49：2-(2，3-二氯-4-(3-(肟基)-3-(5-(4-(三氟甲基)-苯基)噻 吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作I从2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸以及盐酸羟胺中制备2-(2，3- 二氯-4-(3-(肟基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2- 甲基丙酸。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：98/2至95/5。硅胶40-63μm。

主要构象：

1H NMR(300MHz，MeOD，δ以ppm为单位)：1.39(s，6H)； 2.92-2.97(m，4H)；6.7(d，1H，J＝8.4Hz)；6.99(d，1H，J＝8.4Hz)；7.03 (d，1H，J＝3.9Hz)；7.28(d，1H，J＝3.9Hz)；7.57(d，2H，J＝8.4Hz)；7.69 (d，2H，J＝8.4Hz)。

次要构象：

1H NMR(300MHz，MeOD，δ以ppm为单位)：1.47(s，6H)； 2.82-3.01(m，4H)；6.81(d，1H，J＝8.4Hz)；7.03(d，1H，J＝8.4Hz)；7.43 (d，1H，J＝4.2Hz)；7.48(d，1H，J＝4.2Hz)；7.60(d，2H，J＝8.2Hz)；7.78 (d，2H，J＝8.2Hz)。

Mass(ES-)：544/546(M-1)。

M.p.＝135-136℃。

化合物50：2-(2，3-二氯-4-(3-(甲氧亚氨基)-3-(5-(4-(三氟甲基)- 苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作I从2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸以及O-甲基羟胺盐酸盐中制 备2-(2，3-二氯-4-(3-(甲氧亚氨基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基) 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：98/2。硅胶40-63μm。

主要构象：

1H NMR(300MHz，MeOD，δ以ppm为单位)：1.58(s，6H)； 2.91-3.17(m，4H)；3.96(s，3H)；6.91(d，1H，J＝8.4Hz)；7.11(d，1H， J＝8.4Hz)；7.12(d，1H，J＝3.9Hz)；7.24(d，1H，J＝3.9Hz)；7.61(d，2H， J＝8.4Hz)；7.67(d，2H，J＝8.4Hz)。

次要构象：

1H NMR(300MHz，MeOD，δ以ppm为单位)：1.64(s，6H)； 2.95-3.15(m，4H)；4.07(s，3H)；6.94(d，1H，J＝8.4Hz)；7.05(d，1H， J＝8.4Hz)；7.36(d，1H，J＝4.2Hz)；7.51(d，1H，J＝4.2Hz)；7.64(d，2H， J＝8.2Hz)；7.76(d，2H，J＝8.2Hz)。

Mass(ES-)：558/560(M-1)。

M.p.＝68-69℃。

化合物51：叔丁基2-(4-(3-(5-(4-(溴苯基)噻吩-2-基)-3-氧丙 基)-2，3-二氯-苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D使用4当量的叔丁基溴代异丁酸酯以及5当量 的碳酸钾从1-(5-(4-溴苯基)噻吩-2-基)-3-(2，3-二氯-4-羟苯基)丙-1-酮 中制备2-(4-(3-(5-(4-溴苯基)噻吩-2-基)-3-氧丙基)-2，3-二氯苯氧 基)-2-甲基丙酸酯。

在80℃搅拌16小时后，用氯化铵的饱和溶液稀释该混合物， 并用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在减 压条件下浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：95/5。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.44(s，9H)；1.58 (s，6H)；3.12-3.25(m，4H)；6.79(d，1H，J＝8.6Hz)；7.08(d，1H， J＝8.6Hz)；7.28(d，1H，J＝4.1Hz)；7.49(d，2H，J＝9.1Hz)；7.54(d，2H， J＝9.1Hz)；7.64(d，1H，J＝4.2Hz)。

化合物52：2-(4-(3-(5-(4-溴苯基)噻吩-2-基)-3-氧丙基)-2，3-二氯 -苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用38当量的三氟乙酸从叔丁基2-(4-(3-(5-(4- 溴苯基)噻吩-2-基)-3-氧苯基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸酯中制备 2-(4-(3-(5-(4-溴苯基)噻吩-2-基)-3-氧苯基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基 丙酸。

在室温下搅拌1小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。通 过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：97/3至0/100。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，MeOD，δ以ppm为单位)：1.58(s，6H)； 3.11-3.19(m，2H)；3.23-3.30(m，2H)；6.93(d，1H，J＝8.7Hz)；7.21(d， 1H，J＝8.7Hz)；7.49(d，1H，J＝4.1Hz)；7.61(d，2H，J＝8.7Hz)；7.66(d， 2H，J＝8.7Hz)；7.81(d，1H，J＝4.1Hz)。

Mass(ES-)：539/541/542/543(M-1)。

M.p.＝155-157℃。

化合物53：叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2- 基)-3-氧丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从溶解于四氢呋喃的3-(2，3-二氯-4-羟苯 基)-1-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮中制备叔丁基2-(2，3-二 氯-4-(3-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2-基)-3-氧丙基)-苯氧基)-2-甲基丙 酸酯。

在70℃搅拌20小时后，用氯化铵的饱和溶液稀释该混合物， 并用乙酸乙酯萃取。有机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在减 压条件下浓缩。通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.44(s，9H)；1.59 (s，6H)；2.52(s，3H)；3.16-3.23(m，4H)；6.95(d，1H，J＝8.5Hz)；7.21 (d，1H，J＝8.5Hz)；7.27-7.30(m，3H)；7.56(d，2H，J＝8.5Hz)；7.66(d，1H， J＝4.1Hz)。

化合物54：2-(2，3-二氯-4-(3-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2-基)-3- 氧代-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从2-(2，3-二氯 -4-(3-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2-基)-3-氧丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸 酯中制备2-(2，3-二氯-4-(3-(5-(4-(甲硫基)苯基)噻吩-2-基)-3-氧丙基)- 苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌18小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压 条件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行 纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.63(s，6H)；2.53 (s，3H)；3.18-3.25(m，4H)；6.95(d，1H，J＝8.5Hz)；7.20(d，1H， J＝8.5Hz)；7.26-7.29(m，3H)；7.57(d，2H，J＝8.5Hz)；7.65(d，1H， J＝4.1Hz)。

Mass(ES-)：507/508(M-1)。

M.p.＝171-172℃。

化合物55：2-(2，3-二氯-4-(3-异丙氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用5当量的氢化钠以及4当量的2-溴丙烷从 2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧 基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯-4-(3-异丙氧基-3-(5-(4-(三氟甲基) 苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸。

在70℃搅拌12小时后，用水稀释反应混合物，用0.5N盐酸 溶液进行酸化，并用乙酸乙酯萃取。在减压的条件下浓缩有机相。 通过硅胶快速层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.24(d，6H， J＝6.3Hz)；1.59(s，6H)；2.12-2.23(m，2H)；2.76-2.97(m，2H)；4.91-4.95 (m，1H)；5.09(sep，1H，J＝6.3)；6.78(d，1H，J＝8.6Hz)；6.98(d，1H， J＝3.7Hz)；7.02(d，1H，J＝8.6Hz)；7.24(d，1H，J＝3.7Hz)；7.61(d，2H， J＝8.6Hz)；7.66(d，2H，J＝8.6Hz)。

Mass(ES+)：557/559(M+1)，592/594(NH4)+，597/599(M+Na)+。

M.p.＝88-90℃。

化合物56：叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-苯基噻吩-2-基) 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从溶解于四氢呋喃的3-(2，3-二氯-4-羟苯 基)-1-(5-苯基噻吩-2-基)丙-1-酮中制备叔丁基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代 -3-(5-苯基噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯。

在80℃搅拌12小时后，用氯化铵的饱和溶液稀释该混合物， 并用乙酸乙酯萃取。在减压的条件下浓缩有机相。用环己烷对蒸发 残余物进行洗涤。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.44(s，9H)；1.57 (s，6H)；3.11-3.25(m，4H)；6.79(d，1H，J＝8.4Hz)；7.09(d，1H， J＝8.4Hz)；7.31(d，1H，J＝3.9Hz)；7.34-7.44(m，3H)；7.63-7.66(m， 3H)。

化合物57：2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-苯基噻吩-2-基)丙基)苯 氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用12当量的三氟乙酸从叔丁基2-(2，3-二氯 -4-(3-氧代-3-(5-苯基噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯中制备 2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-苯基噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙 酸。

在室温下搅拌12小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压 条件下通过蒸发去除二氯甲烷。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.63(s，6H)； 3.13-3.28(m，4H)；6.94(d，1H，J＝8.6Hz)；7.18(d，1H，J＝8.6Hz)；7.31 (d，1H，J＝4.2Hz)；7.35-7.46(m，3H)；7.61-7.67(m，3H)。

Mass(ES-)：461/463(M-1)。

M.p.＝179-180℃。

化合物58：叔丁基2-甲基-2-(2-甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲 基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)丙酸酯

根据通用操作D从溶解于四氢呋喃的3-(4-羟苯基-3-甲基苯 基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮中制备叔丁基2-甲基 -2-(2-甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧 基)丙酸酯。

在70℃搅拌12小时后，用氯化铵的饱和溶液稀释该混合物， 并用乙酸乙酯萃取。在减压的条件下浓缩有机相。通过硅胶快速层 析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：8/2。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.45(s，9H)；1.55 (s，6H)；2.23(s，3H)；2.93-2.98(m，2H)；3.17-3.22(m，2H)；6.79(d， 1H，J＝8.4Hz)；6.98-7.01(m，1H)；7.08(m，1H)；7.39(d，1H，J＝3.9Hz)； 7.66-7.72(m，3H)；7.75(d，2H，J＝8.4Hz)。

化合物59：2-甲基-2-(2-甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)丙酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从叔丁基2-甲基-2-(2- 甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)丙 酸酯中制备2-甲基-2-(2-甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻 吩-2-基)丙基)苯氧基)丙酸。

在室温下搅拌25小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压 条件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行 纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.60(s，6H)；2.24 (s，3H)；3.02(t，2H，J＝8.2Hz)；3.21(t，2H，J＝8.2Hz)；6.79(d，1H， J＝8.4Hz)；6.98-7.01(m，1H)；7.08(s，1H)；7.39(d，1H，J＝4.0Hz)； 7.67-7.70(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.4Hz)。

Mass(ES-)：475(M-1)。

M.p.＝130-131℃。

化合物60：2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作G从2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(4-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯-4-(3-羟基 -3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。“按 原样”使用该蒸发残余物用于进行下一步骤。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.64(s，6H)； 2.14-2.22(m，2H)；3.01-2.78(m，2H)；4.99(t，1H，J＝6.5Hz)；6.92(d， 1H，J＝8.6Hz)；7.07(d，1H，J＝8.6Hz)；7.29(d，1H，J＝1.2Hz)；7.45(d， 1H，J＝1.2Hz)；7.61-7.67(m，4H)。

化合物61：2-(4-(3-(苄氧基)-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基) 丙基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用2.2当量的氢化钠以及2.2当量的苄基溴 从2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯 氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(4-(3-(苄氧基)-3-(4-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-2，3-二氯苯氧基)-2-甲基丙酸。

在2N氢氧化钠(20当量)的存在下将蒸发残余物溶解于乙醇 中。搅拌16小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。使用盐酸 的稀溶液对蒸发残余物进行酸化，并接着用二氯甲烷进行萃取。有 机相在硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅 胶层析法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯7/3，接着二氯甲烷/甲醇9/1。硅胶40-63 μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.62(s，6H)； 2.08-2.18(m，1H)；2.21-2.29(m，1H)；2.75-2.85(m，1H)；3.01-2.92(m， 1H)；4.40(t，1H，J＝11.7Hz)；4.62-4.65(m，2H)；6.90(d，1H，J＝8.5Hz)； 7.01(d，1H，J＝8.5Hz)；7.29-7.37(m，6H)；7.51(d，1H，J＝1.2Hz)； 7.67-7.70(m，4H)。

Mass(ES-)：621/623(M-1)。

M.p.＝58-59℃。

化合物62：2-(2，3-二氟-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作G从2-(2，3-二氟-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氟-4-(3-羟基 -3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。“按 原样”使用该蒸发残余物用于进行下一步骤。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.56(s，6H)； 2.14-2.23(m，2H)；2.74-2.87(m，2H)；4.95(t，1H，J＝7.4Hz)；6.79(m， 2H)；6.99(d，1H，J＝3.8Hz)；7.25(d，1H，J＝3.7Hz)；7.62(d，2H， J＝8.6Hz)；7.64(d，2H，J＝8.6Hz)。

化合物63：2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)- 丙基)-2，3-二氟苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用2.2当量的氢化钠以及2.2当量的苄基溴 从2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-2，3-二 氟苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙基)-2，3-二氟苯氧基)-2-甲基丙酸。

通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化(洗脱：环己烷/乙酸乙 酯：9/1。硅胶40-63μm)。在2N氢氧化钠(20当量)的存在下 将所分离的油溶解于乙醇中。搅拌16小时后，在减压条件下通过 蒸发去除溶剂。使用盐酸的稀溶液对蒸发残余物进行酸化，并接着 用二氯甲烷进行萃取。在减压的条件下浓缩有机相。通过硅胶层析 法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯7/3，接着二氯甲烷/甲醇9/1。硅胶40-63 μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.59(s，6H)； 2.03-2.33(m，2H)；2.63-2.82(m，2H)；4.37(d，1H，J＝11.7Hz)；4.58(m， 2H)；6.77(m，2H)；6.98(d，1H，J＝3.5Hz)；7.30(m，6H)；7.63(d，2H， J＝8.5Hz)；7.70(d，2H，J＝8.5Hz)。

Mass(ES-)：589(M-1)。

外观：粘性油。

化合物64：叔丁基2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)苯氧基)-丁酸酯

根据通用操作D从3-(4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙-1-酮以及叔丁基2-溴代丁酸酯中制备叔丁基2-(4-(3-氧代 -3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)丁酸酯。

搅拌16小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。在乙酸乙 酯中吸收蒸发残余物。有机相用氯化铵的饱和溶液洗涤，在硫酸镁 上进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。“按原样”使用该蒸发 残余物用于进行下一步骤。

化合物65：2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-苯氧基)丁酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从叔丁基2-(4-(3-氧代 -3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)丁酸酯中制备 2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-丁酸。

在室温下搅拌12小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压 条件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析(制备型HPLC， lichrospher (Merck)RP1812μm 100A，柱：25*250mm)对蒸发残余 物进行纯化。

洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％三氟乙酸：30/70至0/100。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.10(t，3H， J＝7.3Hz)；1.98-2.08(m，2H)；3.03(t，2H，J＝7.5Hz)；3.18-3.24(m，2H)； 4.61(t，1H，J＝6.0Hz)；6.86(d，2H，J＝8.8Hz)；7.18(d，2H，J＝8.8Hz)； 7.38(d，1H，J＝3.8Hz)；7.65-7.69(m，3H)；7.76(d，2H，J＝8.5Hz)。

Mass(ES+)：461(M+1)。

M.p.＝116-117℃。

化合物66：叔丁基2-甲基-2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)丙酸酯

根据通用操作D从3-(4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙-1-酮以及2-叔丁基溴代异丁酸酯中制备叔丁基2-甲基 -2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)丁酸 酯。

搅拌16小时后，在减压条件下通过蒸发去除溶剂。在乙酸乙 酯中吸收蒸发残余物。有机相用氯化铵的饱和溶液洗涤，在硫酸镁 上进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。“按原样”使用该蒸发 残余物用于进行下一步骤。

化合物67：2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从叔丁基2-甲基 -2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)丙酸 酯中制备2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧 基)-2-甲基丙酸。

在室温下搅拌12小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压 条件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析(制备型HPLC， lichrospher(Merck)RP1812μm 100A，柱：25*250mm)对蒸发残余 物进行纯化。

洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％三氟乙酸：30/70至0/100。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.57(s，6H)；3.06 (t，2H，J＝7.9Hz)；3.23(t，2H，J＝6.7Hz)；6.89(d，2H，J＝8.5Hz)；7.18(d， 2H，J＝8.5Hz)；7.38(d，1H，J＝4.1Hz)；7.66-7.69(m，3H)；7.75(d，2H， J＝8.2Hz)。

Mass(ES+)：463(M+1)。

M.p.＝154-155℃。

化合物68：叔丁基2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2- 基)丙基)苯氧基)-乙酸酯

根据通用操作D从3-(4-羟苯基)-1-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙-1-酮以及叔丁基溴乙酸酯中制备叔丁基2-甲基-2-(4-(3-氧 代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-丙酸酯。

在搅拌18小时后，用柠檬酸溶液对混合物进行酸化，并用乙 酸乙酯萃取。有机相用氯化铵的饱和溶液洗涤，在硫酸镁上进行干 燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸发残余物 进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：85/15。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.49(s，9H)； 3.01-3.06(m，2H)；3.18-3.23(m，2H)；4.50(s，2H)；6.85(d，2H， J＝8.5Hz)；7.17(d，2H，J＝8.5Hz)；7.39(d，1H，J＝4.1Hz)；7.65-7.69(m， 3H)；7.76(d，2H，J＝8.4Hz)。

化合物69：2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-苯氧基)乙酸

根据通用操作E使用10当量的三氟乙酸从叔丁基2-(4-(3-氧代 -3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)乙酸酯中制备 2-(4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-乙酸。

在室温下搅拌12小时后，用水洗涤该反应物，并接着在减压 条件下通过蒸发去除二氯甲烷。通过硅胶层析法对蒸发残余物进行 纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：3.03-3.08(m， 2H)；3.19-3.24(m，2H)；4.66(s，2H)；6.89(d，2H，J＝8.8Hz)；7.22(d， 2H，J＝8.8Hz)；7.38(d，1H，J＝4.1Hz)；7.66-7.69(m，3H)；7.76(d，2H， J＝8.5Hz)。

Mass(ES+)：435(M+1)。

M.p.＝182-183℃。

化合物70：2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基) 丙基)-2-氟苯氧基)丁酸

根据通用操作H使用2.1当量的氢化钠以及2.1当量的苄基溴 从2-(2-氟-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基) 丁酸中制备2-(4-(3-(苄氧基)-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-2-氟苯氧基)丁酸。

通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化(洗脱：环己烷/乙酸乙 酯：95/5至8/2。硅胶40-63μm)。在2N氢氧化钠(20当量)的 存在下将所分离的油溶解于乙醇中。搅拌18小时后，在减压条件 下通过蒸发去除溶剂。使用盐酸的稀溶液对蒸发残余物进行酸化， 并接着用二氯甲烷进行萃取。在减压的条件下浓缩有机相。通过硅 胶层析(制备型HPLC，lichrospher(Merck)RP1812μm 100A，柱： 25*250mm)对蒸发残余物进行纯化。洗脱：梯度为水、甲醇+0.1％ 三氟乙酸：28/72至10/90。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.13(t，3H， J＝7.3Hz)；2.01-2.11(m，3H)；2.23-2.34(m，1H)；2.58-2.98(m，2H)； 4.32(d，1H，J＝11.7Hz)；4.52(dd，1H，J＝5.6Hz，J＝7.6Hz)；4.59-4.63(m， 2H)；6.79-6.92(m，3H)；6.97(d，1H，J＝3.5Hz)；7.26-7.27(m，1H)； 7.29-7.39(m，5H)；7.62(d，2H，J＝8.5Hz)；7.70(d，2H，J＝8.5Hz)。

Mass(ES+)：573(M+1)。

外观：粘性油。

化合物71：2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃 -2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作G从2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基)苯 基)呋喃-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯-4-(3-羟基 -3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。“按 原样”使用该蒸发残余物用于进行下一步骤。

化合物72：2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋 喃-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用2.1当量的氢化钠以及2.1当量的碘代甲 烷从2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)呋喃-2-基)丙基) 苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲 基)苯基)呋喃-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化(洗脱：环己烷/乙酸乙 酯：9/1。硅胶40-63μm)。在2N氢氧化钠(5当量)的存在下将 所分离的油溶解于乙醇中。搅拌18小时后，在减压条件下通过蒸 发去除溶剂。使用盐酸的稀溶液对蒸发残余物进行酸化，并接着用 乙酸乙酯进行萃取。在减压的条件下浓缩有机相。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.63(s，6H)； 2.11-2.32(m，2H)；2.75-2.97(m，2H)；3.34(s，3H)；4.25(dd，1H， J＝5.8Hz J＝7.6Hz)；6.42(d，1H，J＝3.4Hz)；6.73(d，1H，J＝3.4Hz)；6.93 (d，1H，J＝8.5Hz)；7.05(d，1H，J＝8.5Hz)；7.62(d，2H，J＝8.3Hz)；7.75 (d，2H，J＝8.3Hz)。

Mass(ES-)：529/531(M-1)。

外观：粘性油。

化合物73：2-(4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)-丙 基)-2，6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作G从2-(2，6-二甲基-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲基) 苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(4-(3-羟基 -3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-2，6-二甲基-苯氧基)-2-甲 基丙酸。“按原样”使用该蒸发残余物用于进行下一步骤。

1HNMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.51(s，6H)； 2.07-2.28(m，8H)；2.56-2.76(m，2H)；4.90-4.95(m，1H)；6.84(s，2H)； 6.97(d，1H，J＝3.7Hz)；7.25(d，1H，J＝3.7Hz)；7.61(d，2H，J＝8.6Hz)； 7.66(d，2H，J＝8.6Hz)。

化合物74：2-(4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基) 丙基)-2，6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用2.1当量的氢化钠以及2.1当量的碘代甲 烷从2-(4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-2，6-二甲 基苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)丙基)-2，6-二甲基苯氧基)-2-甲基丙酸。

通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化(洗脱：环己烷/乙酸乙 酯：9/1。硅胶40-63μm)。在2N氢氧化钠(5当量)的存在下将 所分离的油溶解于乙醇中。搅拌18小时后，在减压条件下通过蒸 发去除溶剂。使用盐酸的稀溶液对蒸发残余物进行酸化，并接着用 乙酸乙酯进行萃取。在减压的条件下浓缩有机相。

1H NMR(300MHz，MeOD，δ以ppm为单位)：1.43(s，6H)； 1.91-2.06(m，1H)；2.11-2.23(m，7H)；2.48-2.68(m，2H)；3.28(s，3H)； 4.37(t，1H，J＝6.7Hz)；6.81(s，2H)；7.01(d，1H，J＝3.8Hz)；7.41(d，1H， J＝3.8Hz)；7.67(d，2H，J＝8.2Hz)；7.80(d，2H，J＝8.2Hz)。

Mass(ES+)：524(M+NH4+)，530(M+Na+)，545(M+K+)。

外观：粘性油。

化合物75：乙基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作D从3-(2，3-二氯-4-羟基-苯基)-1-(5-(3-(三氟甲基) 苯基)噻吩-2-基)丙-1-酮以及乙基溴代异丁酸酯中制备乙基2-(2，3-二 氯-4-(3-氧代-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)-丙基)-苯氧基)-2-甲 基丙酸酯。

在搅拌16小时后，用柠檬酸溶液对混合物进行酸化，并用乙 酸乙酯萃取。有机相用氯化铵的饱和溶液洗涤，在硫酸镁上进行干 燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅胶层析法对蒸发残余物 进行纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：100/0至8/2。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.27(t，3H， J＝7.0Hz)；1.61(s，6H)；3.18-3.24(m，4H)；4.25(q，2H，J＝7.0Hz)； 6.77(d，1H，J＝8.4Hz)；7.11(d，1H，J＝8.4Hz)；7.38(d，1H，J＝3.9Hz)； 7.56(m，1H)；7.63(d，1H，J＝8.2Hz)；7.68(d，1H，J＝3.9Hz)；7.82(d，1H， J＝7.6Hz)；7.88(s，1H)。

化合物76：2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩 -2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作F使用10当量的2N氢氧化钠溶液从乙基2-(2，3- 二氯-4-(3-氧代-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2- 甲基丙酸酯中制备2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻 吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸。

在室温下16小时后，在减压条件下对反应混合物进行浓缩， 用盐酸的稀溶液进行酸化，并接着用二氯甲烷进行萃取。有机相在 硫酸镁上进行干燥，过滤并接着在减压条件下浓缩。通过硅胶层析 法对蒸发残余物进行纯化。

洗脱：二氯甲烷/甲醇：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.64(s，6H)； 3.18-3.28(m，4H)；6.95(d，1H，J＝8.4Hz)；7.19(d，1H，J＝8.4Hz)；7.37 (d，1H，J＝3.9Hz)；7.56(m，1H)；7.63(d，1H，J＝7.6Hz)；7.69(d，1H， J＝3.9Hz)；7.82(d，1H，J＝7.6Hz)；7.88(s，1H)。

化合物77：乙基2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基) 噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作G从乙基2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(3-(三氟甲 基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯中制备乙基2-(2，3-二 氯-4-(3-羟基-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲 基丙酸酯。“按原样”使用该蒸发残余物用于进行下一步骤。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.28(t，3H， J＝7.1Hz)；1.62(s，6H)；2.14-2.22(m，2H)；2.81-2.97(m，2H)；4.27(q， 2H，J＝7.1Hz)；4.95(t，1H，J＝6.4Hz)；6.78(d，1H，J＝8.6Hz)；7.00(d，1H， J＝3.5Hz)；7.05(d，1H，J＝8.6Hz)；7.24(d，1H，J＝3.5Hz)；7.47-7.55(m， 2H)；7.75(d，1H，J＝7.1Hz)；7.82(s，1H)。

化合物78：乙基2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(3-(三氟甲基)苯 基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯

根据通用操作H使用1.1当量的氢化钠以及1.1当量的碘代甲 烷从乙基2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基) 丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸酯中制备乙基2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基 -3-(5-(3-(三氟甲基)苯基)噻吩-2-基)丙基)-苯氧基)-2-甲基丙酸酯。

在室温下搅拌1小时后，将混合物水解，并用乙酸乙酯萃取。 在减压的条件下浓缩有机相，并通过硅胶层析法对蒸发残余物进行 纯化。

洗脱：环己烷/乙酸乙酯：9/1。硅胶40-63μm。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.28(t，3H， J＝7.1Hz)；1.61(s，6H)；2.02-2.23(m，2H)；2.71-2.94(m，2H)；4.25(q， 2H，J＝7.1Hz)；3.32(s，3H)；4.32-4.36(m，1H)；6.73(d，1H，J＝8.5Hz)； 6.96(d，1H，J＝3.5Hz)；7.01(d，1H，J＝8.5Hz)；7.24(d，1H，J＝3.5Hz)； 7.48-7.50(m，2H)；7.74(d，1H，J＝7.3Hz)；7.81(s，1H)。

化合物79：2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)- 噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作G从2-(2，3-二氯-4-(3-氧代-3-(5-(4-(三氟甲氧基) 苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯-4-(3-羟 基-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸。 “按原样”使用该蒸发残余物用于进行下一步骤。

化合物80：2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)- 噻吩-2-基)丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸

根据通用操作H使用2.1当量的氢化钠以及2.1当量的碘代甲 烷从2-(2，3-二氯-4-(3-羟基-3-(5-(4-(三氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基)丙 基)-苯氧基)-2-甲基丙酸中制备2-(2，3-二氯-4-(3-甲氧基-3-(5-(4-(三 氟甲氧基)苯基)噻吩-2-基)-丙基)苯氧基)-2-甲基丙酸。

通过硅胶层析法对蒸发残余物进行纯化(洗脱：环己烷/乙酸乙 酯：9/1。硅胶40-63μm)。在2N氢氧化钠(6当量)的存在下将 所分离的油溶解于乙醇中。搅拌18小时后，在减压条件下通过蒸 发去除溶剂。使用盐酸的稀溶液对蒸发残余物进行酸化，并接着用 乙酸乙酯进行萃取。在减压的条件下浓缩有机相。

1H NMR(300MHz，CDCl3，δ以ppm为单位)：1.60(s，6H)； 1.98-2.29(m，2H )；2.72-2.97(m，2H)；3.32(s，3H)；4.35(t，1H， J＝6.5Hz)；6.89-6.97(m，2H)；7.01-7.08(m，1H)；7.16(d，1H， J＝3.5Hz)；7.22(d，2H，J＝8.6Hz)；7.59(d，2H，J＝8.6Hz)。

Mass(ES+)：563/565(M+1)。

外观：粘性油。

实例5：根据本发明-方法1的多种化合物的激活PPAR的特性 的体外评估

原理

在一个猴肾成纤维细胞(COS-7)系上通过测量嵌合体的转录 活性在体外评估了PPARs的激活，该嵌合体是由酵母的Gal4转录 因子的DNA结合结构域以及各种PPAR的配体结合结构域构成的。 在嵌合体Gal4-PPARα、γ或δ上对这些化合物进行了测试(剂量在 10-5与100μM之间)，并且确定了相应的EC50值。

方案

细胞培养

COS-7细胞从ATCC获得并培养于补充了10％(v/v)胎牛血 清、100U/ml的青霉素(Gibco，Paisley，UK)、以及2mM的L-谷氨 酰胺(Gibco，Paisley，UK)的DMEM培养基中。将这些细胞在包含 5％CO2的潮湿气氛中在37℃下进行孵育。

在转染中使用的质粒的说明

质粒Gal4(RE)_TkpGL3、pGal4-hPPARα、pGal4-hPPARγ、 pGal4-hPPARδ以及pGal4-φ说明于文献中(Raspe E et al.，1999)。通 过在pGal4-φ载体中克隆由PCR所扩增的、对应于人核受体PPARα、 PPARγ以及PPARδ的DEF结构域的DNA片段获得构建体 pGal4-hPPARα、pGal4-hPPARγ以及pGal4-hPPARδ。

转染

在10％胎牛血清的存在下，用每孔150ng DNA (pGal4-PPAR/Gal4(RE)_TkpGL3的比率为1/10)对混悬液中的 COS-7细胞进行转染。将这些细胞接种于96孔板中(4X104个细胞 /孔)，并接着在37℃孵育24小时。在不含血清的培养基中进行这 些测试的化合物的激活，在37℃持续24小时。在实验结束时细胞 溶解，并使用Steady-LiteTM HTS(Perkin Elmer)遵照供应商的建议 测定了荧光素酶活性。

结果

出人意料地，诸位发明人证明了在用pGal4-hPPAR质粒转染并 用根据本发明的这些化合物处理的细胞中的荧光素酶的活性呈现 显著的剂量依赖性增加。实验数据总结于以下表1中，该表显示每 种PPAR同种型测得的EC50、连同通过相对于参考物(对于PPARα 是非诺贝酸(phenofibric acid)，对于PPARγ是罗格列酮，对于PPARδ 是GW501516)的每种化合物获得的最大百分数反应。

所测量的活性依赖于测试的化合物而不同，并且就PPAR的多 个同种型而言在本发明的这些化合物之中还观察到了或多或少的 选择性：

-就PPAR的一个亚型而言，根据本发明的某些化合物是选 择性的，

-根据本发明的其他化合物同时是两种或三种亚型的激活 剂。

表1

结论：

这些结果显示根据本发明的这些化合物显著地结合并激活 hPPARα、hPPARγ、和/或hPPARδ受体。根据本发明的这些化合物 的活性依赖所测试的化合物的化学结构并根据所调查的PPAR的亚 型而变化。

实例6：根据本发明-方法2的多种化合物的激活PPAR的特性的 体外评估

在这个实例中也采用了实例5所使用的原理、细胞以及质粒。 只是转染步骤的应用略有不同。这些细节在以下呈现。

在10％胎牛血清的存在下，用每个225cm2盘40μg DNA (pGal4-PPAR/Gal4(RE)_TkpGL3的比率为1/10)对附着的COS-7细 胞进行转染。然后将这些细胞分离，并在没有血清的情况下将细胞 接种于384孔板中(2×104个细胞/孔)，并在37℃孵育4小时。然后在 一个96孔板中将这些化合物稀释并转移至384孔板中。在1％的 UltroserTM无脂类的合成血清(Biosepra)的存在下进行这些测试的 化合物的激活，在37℃再持续24h。使用Genesis Freedom 200TM操作 台(Tecan)使最后2个步骤自动化。在实验结束时细胞溶解，并使 用Steady-LiteTM HTS(Perkin Elmer)遵照供应商的建议测定了荧 光素酶活性。

结果

出人意料地，诸位发明人证明了在用pGal4-hPPAR质粒转染并 用根据本发明的这些化合物处理的细胞中的荧光素酶的活性呈现 显著的剂量依赖性增加。实验数据总结于以下表2中，该表显示每 种PPAR同种型测得的EC50、连同通过相对于参考物(对于PPARα 是非诺贝酸，对于PPARγ是罗格列酮，对于PPARδ是GW501516) 的每种化合物获得的最大百分数反应。

所测量的活性取决于测试的化合物而不同，并且就PPAR的多 个同种型而言在本发明的这些化合物之中还观察到了或多或少的 选择性：

-就PPAR的一个亚型而言，根据本发明的某些化合物是选 择性的，

-根据本发明的其他化合物同时是两种或三种亚型的激活 剂。

表2

结论：

这些结果显示根据本发明的这些化合物显著地结合并激活 hPPARα、hPPARγ、和/或hPPARδ受体。根据本发明的这些化合物 的活性依赖所测试的化合物的化学结构并根据所调查的PPAR的亚 型而变化，

实例7：通过测量鼠类肌细胞中PPARδ的这些靶基因的表达对 根据本发明的这些化合物的激活PPARδ的特性进行体外评估

原理

通过测量由根据本发明的这些化合物处理24小时的鼠类肌细 胞产生的丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)、肉毒碱棕榈酰转移酶1b (CPT1b)、解偶联蛋白2(UCP2)以及解偶联蛋白3(UCP3)的 表达评估了根据本发明的这些化合物对脂类和碳水化合物代谢、以 及对能量消耗的刺激作用。确定的是在这个细胞类型中这些基因的 表达的调节直接受PPARδ控制。这些基因的表达提高越多，根据本 发明的化合物对肌细胞中的代谢的刺激作用就越大。

方案

C2C12细胞分化成肌几细胞

将来自鼠类细胞系C2C12(获自ECACC)的细胞培养于DMEM 培养基(Gibco；41965-039)中，该DMEM培养基加入了1％的L- 谷氨酰胺(Gibco；25030)、1％的青霉素/链霉素(VWR； BWSTL0022/100)、以及10％的去补体的胎牛血清(FCS.Gibco； 10270-106)。

将这些细胞以50.103个细胞/孔的密度接种在24孔板上。当细 胞会合时，培养基用一种分化培养基(加入2％马血清的基础培养 基(Gibco；26050-088))替换，然后在37℃以及5％CO2的条件下 孵育4天以便将细胞分化为肌肉细胞。

处理

在分化5天后，将这些细胞放入剥夺培养基(deprivation medium)(没有血清的基础培养基)6小时。然后在该剥夺培养基 中用根据本发明的这些化合物对这些细胞进行处理。化合物2、4、 7、11、39、40、46、49以及72处于剂量效应，对应于1x、10x以 及100x它们的EC50PPARδ。将根据本发明的这些化合物溶解于二 甲亚砜(DMSO，Sigma；D5879)中。在37℃、5％CO2的条件下 处理细胞24h。将根据本发明的这些化合物的效应与单独的DMSO 的效应进行比较。

RNA的提取、逆转录以及定量PCR

在处理后，使用96RNA kit(Macherey Nagel， Hoerdt，France)按照制造商的说明书从这些细胞中提取总RNA。

然后通过在37℃下以30μl的总体积反应1小时而将1μg的 总RNA(基于紫外分光光度计读数进行定量)逆转录为互补DNA， 该30μl总体积包含缓冲液1X(Invitrogen)、1.5mM的DTT、0.18 mM的dNTP(Promega)、200ng的pdN6(Amersham)、30U的 RNA酶抑制剂(Promega)以及1μl的MMLV-RT  (Invitrogen)。

使用MyiQ单色实时PCR监测系统(Biorad，Marnes-la-Coquette， France)进行了多个定量PCR实验，并使用iQ SYBR Green Supermix kit按照供应厂商的建议、在96孔板中、在5μl经稀释的多种逆转 录反应混合物上进行，其中杂交温度为60℃。使用处于调查之下的 对PDK4、CPT1b、UCP2以及UCP3基因特异的多个引物对：

●mPDK4：正义引物：5’-TACTCCACTGCTCCAACACCTG-3’ (SEQ ID No.11)以及反义引物5’-GTTCTTCGGTTCCCTGCTTG-3’ (SEQ ID No.12)

●mCPT1b：正义引物：5’-GGACTGAGACTGTGCGTTCCTG-3’ (SEQ ID No.7)以及反义引物5’-AGTGCTTGGCGGATGTGGTT-3’ (SEQ ID No.8)

●mUCP2：正义引物： 5’-GTCGGAGATACCAGAGCACTGTCG-3’(SEQ ID No.13)以及反 义引物5’-CACATCAACAGGGGAGGCGA-3’(SEQ ID No.14)

●mUCP3：正义引物：5’-GCACCGCCAGATGAGTTTTG-3’ (SEQ ID No.15)以及反义引物5’-GACGCTGGAGTGGTCCGCTC-3’ (SEQ ID No.16)

发出的荧光的量与在反应开始时存在的以及在PCR过程中扩 增的互补DNA的量成正比。对于所调查的每种靶标，通过对由几 微升不同的逆转录反应混合物构成的一个库逐次进行稀释而产生 一个范围。因此，使用该范围中的多个点而获得的功效曲线确定了 每种靶标的相对表达水平。

然后相对于参考基因36B4(其特异性引物为：正义引物： 5’-CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC-3’(SEQ ID No.19)以及反 义引物：5’-GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG-3’(SEQ ID No. 20)的表达水平，对感兴趣的这些基因的表达水平进行标准化。然后 计算出诱导因数，即相对信号(由根据本发明的化合物诱导)与对 照组的这些相对值的平均值的比率。这一因数越高，根据本发明的 这些化合物关于基因表达的激活特征就越显著。最终结果表示为每 个实验组中的这些诱导值的平均值。

结果

诸位发明人还在鼠类肌细胞上体外证明化合物2、4、7、11、 39、40、46、48、63以及72对参与碳水化合物和脂类代谢以及参 与体温调节的这些基因的表达具有刺激效应。得到的结果呈现在以 下表3中。这些结果显示根据本发明的这些化合物(起始于1x EC50 PPARδ)诱导肌细胞中PDK4、CPT1b、UCP2以及UCP3表达的显 著的、剂量依赖性增加。

表3

结论

出人意料地，所呈现的实验数据显示根据本发明的这些化合物 通过激活PPARδ在鼠类细胞中具有代谢作用。

实例8：通过脂类测定以及测量在脂类和碳水化合物代谢以及 能量耗散中所涉及的基因的表达在E2/E2小鼠中对根据本发明的 这些化合物的抗血脂的特性以及HDL-胆固醇合成刺激的特性进行 体内评估

原理

通过血脂的测定、分析不同血浆脂蛋白部分中胆固醇与甘油三 酯的分布、以及在用化合物2处理血脂障碍的E2/E2小鼠后在肝脏 以及骨骼肌中测量PPAR的这些靶基因的表达对根据本发明的这些 化合物的抗血脂的特性以及HDL-胆固醇合成刺激的特性进行了体 内评估。

所使用的鼠类模型是ApoE2/E2型小鼠，它是一种人载脂蛋白 E的E2同种型的转基因小鼠(Sullivan PM et al.，1998)。在人类 中，这种载脂蛋白(低密度脂蛋白以及极低密度脂蛋白 (LDL-VLDL)的一个组分)以三种同种型E2、E3以及E4存在。 E2形式在位置158处的一个氨基酸上有一个突变，这大大减弱了这 个蛋白对LDL受体的亲和力。因此VLDL的清除几乎为零。然后 存在低密度脂蛋白以及被称为III型的混合型高血脂症(高胆固醇 以及甘油三酯)的积累。

PPARα对参与脂类运输(多种载脂蛋白如Apo AI、Apo AII以 及Apo CIII，多种膜转运蛋白如FAT)或脂类的分解代谢(ACOX1、 CPT-I或CPT-II、脂肪酸的β氧化的酶类)的这些基因的表达进行调 节。因此，在人类与啮齿动物中用多种PPARα激活剂处理被转换 为甘油三酯以及游离脂肪酸的循环水平的降低。因此，在用根据本 发明的这些化合物处理后，对血脂以及游离脂肪酸的测量是PPAR 的对抗特征的一个指标并且因此是根据本发明的这些化合物的抗 血脂特征的一个指标。

之前在体外测量的根据本发明的这些分子的PPARα对抗特性 在肝水平上一定反映在直接处于PPARα受体的控制下的这些靶基 因的表达的调控中。在这个实验中所调查的这些基因是以下基因， 它们编码了PDK4(丙酮酸脱氢酶激酶同种型4，碳水化合物代谢 的酶)、AcoX1(在小鼠中出现的AcoX1与人的ACO基因(酰基辅 酶A氧化酶，一种在脂肪酸的β氧化的机制中关键的酶)相对应)、 以及Apo CIII(一种参与脂类代谢的载脂蛋白)。

在人类以及啮齿动物中，用多种PPARδ激活剂的处理反映在 血浆HDL-胆固醇水平的提高中。

因此，在用根据本发明的这些化合物处理后，胆固醇的分布的 分析可证明根据本发明的这些化合物的HDL-胆固醇合成刺激的特 征。

之前在体外测量的根据本发明的这些分子的PPARδ的对抗特 性在骨骼肌水平上还应该反映在直接处于PPARδ受体的控制下的 这些靶基因的过量表达中。在这个实验中所调查的这些基因是以下 基因，它们编码了PDK4(丙酮酸脱氢酶激酶同种型4，碳水化合 物代谢的酶)以及UCP2(解偶联蛋白2，参与体温调节的线粒体 转运蛋白)。

因此，在用根据本发明的这些化合物处理后，对PPAR的这些 靶基因的转录活性的测量也是根据本发明的这些化合物的抗血脂 特征的一个指标。

方案

动物的处理

将Apo E2/E2转基因小鼠饲养在恒温20±3℃的12/12小时的 光暗循环下。在驯化一周后，对这些小鼠称重并将它们分成6只一 组的多个组，其选择方式使得在实验前第一次确定的它们的体重以 及血脂水平的分布是均匀的。将这些测试的化合物悬浮于羧甲基纤 维素(Sigma C4888)中，并通过胃内强制喂食以所选择的剂量进 行给药，频率为每天一次持续13天。这些动物可自由获取水及食 物(标准的饮食)。在实验结束时，对这些动物禁食4小时后将其 麻醉，使用抗凝剂(EDTA)采集一份血液样本，然后对小鼠称重 并实施安乐死。通过在3000转/分进行20分钟的离心将血浆分开， 并将这些样本保存在+4℃。

采集肝的样本以及骨骼肌组织的样本，并立即在液氮中冷冻， 并接着保存在-80℃用于后续分析。

分析多个血浆脂蛋白部分中胆固醇的分布

通过凝胶过滤层析法将血浆的不同的脂类部分(VLDL、LDL、 HDL)分开。然后通过酶的测定(bioMérieux-Lyon-France)按照供 应商的建议测量每种部分中胆固醇以及甘油三酯的浓度。

测量血浆总胆固醇

通过酶的测定(bioMérieux-Lyon-France)按照供应商的建议测 量总胆固醇的血浆浓度。

测量HDL-胆固醇

用磷钨酸盐将低密度脂蛋白(VLDL以及LDL)沉淀。通过离 心去除沉淀。通过酶的测定(bioMérieux-Lyon-France)按照供应商 的建议对上清液中存在的HDL-胆固醇进行定量。

通过定量RT-PCR分析基因表达

肝组织

使用96RNA kit(Macherey Nagel，Hoerdt，France) 按照制造商的说明书从肝的碎片中提取总RNA。

骨骼组织

使用Fibrous Tissue kit(Qiagen)按照制造商的说明书 从腓肠肌的骨骼肌碎片中提取总RNA。

然后通过在37℃下以30μl总体积反应1小时而将1μg的总 RNA(通过分光光度计法进行定量)逆转录为互补DNA，该30μl 总体积包含缓冲液1X(Invitrogen)、1.5mM的DTT、0.18mM的 dNTP(Promega)、200ng的pdN6(Amersham)、30U的RNA酶抑 制剂(Promega)以及1μl的MMLV-RT(Invitrogen)。

使用MyiQ单色实时PCR监测系统(Biorad，Marnes-la-Coquette， France)进行了多个定量PCR实验，并使用iQ SYBR Green Supermix kit按照供应商的建议、在96孔板中、在5μl经稀释的逆转录反应 混合物上进行，其中杂交温度为60℃。使用处于调查下的对PDK4、 AcoX1、ApoCIII以及UCP2基因特异的多个引物对：

●mPDK4：正义引物：5’-TACTCCACTGCTCCAACACCTG-3’ (SEQ ID No.11)以及反义引物5’-GTTCTTCGGTTCCCTGCTTG-3’ (SEQ ID No.12)

●mACOX1：正义引物：5’-GAAGCCAGCGTTACGAGGTG-3’ (SEQ ID No.3)以及反义引物5’-TGGAGTTCTTGGGACGGGTG-3’ (SEQ ID No.4)

●mApoCIII：正义引物：5’-CTCTTGGCTCTCCTGGCATC-3’ (SEQ ID No.5)以及反义引物5’-GCATCCTGGACCGTCTTGGA-3’ (SEQ ID No.6)

●mUCP2：正义引物： 5’-GTCGGAGATACCAGAGCACTGTCG-3’(SEQ ID No.13)以及反 义引物5’-CACATCAACAGGGGAGGCGA-3’(SEQ ID No.14)

在两种情况下(肝组织以及骨骼肌组织)，发出的荧光的量与 在反应开始时存在的以及在PCR过程中扩增的互补DNA的量成正 比。对于所调查的每种靶标，通过对由几微升不同的逆转录反应混 合物构成的一个库逐次进行稀释而产生一个范围。因此，使用该范 围中的多个点而获得的功效曲线确定了每种靶标的相对表达水平。

然后在肝组织中相对于参考基因36B4(其特异性引物为：正 义引物：5’-CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC-3’(SEQ ID No.19) 以及反义引物：5’-GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG-3’(SEQ ID No.20))的表达水平，对感兴趣的这些基因的表达水平进行标准 化；并在骨骼肌组织中相对于参考基因18S(其特异性引物为：正 义引物：5′-CGGACACGGACAGGATTGACAG-3′(SEQ ID No.21) 以及反义引物：5′-AATCTCGGGTGGCTGAACGC-3′(SEQ ID No. 22))的表达水平，对感兴趣的这些基因的表达水平进行标准化。

然后为每份样本计算出诱导因数，即相对信号(由根据本发明 的化合物诱导)与对照组的这些相对值的平均值的比率。这个因数 越高，该化合物的基因表达激活特征就越显著。最终结果表示为每 个实验组中的这些诱导值的平均值。

结果

图1-1将用50mpk的化合物2处理7天以及13天之后血浆总 胆固醇的水平与用对照动物所获得的水平进行比较。出人意料地， 通过这种处理从7天开始血浆总胆固醇的水平显著降低。

图1-2将用50mpk的化合物2处理7天以及13天之后血浆的 HDL-胆固醇的水平与用对照动物所获得的水平进行比较。出人意料 地，通过这种处理从7天开始血浆HDL-胆固醇的水平得到显著提 高。

图1-3呈现了在E2/E2小鼠(对照或用50mpk的化合物2处理 13天)的不同血浆脂蛋白部分中胆固醇的分布。出人意料地，通过 用化合物2进行处理(给予的剂量为50mpk)血浆HDL-胆固醇的 水平得到提高。我们还观察到通过用化合物2进行处理(给予的剂 量为50mpk)LDL以及VLDL的血浆水平显著降低。

图1-4呈现了在E2/E2小鼠(对照或用50mpk的化合物2处理 13天)的不同血浆脂蛋白部分中甘油三酯的分布。出人意料地，通 过用化合物2进行处理(给予的剂量为50mpk)VLDL中存在的甘 油三酯水平降低。

通过定量RT-PCR分析基因表达

诸位发明人还在体内证明根据本发明的这些化合物是PPAR的 这些靶基因的表达的调节剂。图1-5至1-9中所呈现的结果显示对 E2/E2小鼠给予50mpk的化合物2，持续13天，诱导了对PDK4 (图1-5)、AcoX1(图1-6)进行编码的这些基因的肝表达的显著 提高，对ApoCIII(图1-7)进行编码的基因的肝表达的降低，连同 在骨骼肌中对PDK4(图1-8)以及UCP2(图1-9)进行编码的这 些基因的显著提高。对这些酶进行编码的这些基因参与脂类和碳水 化合物代谢连同能量耗散，并且它们的表达由根据本发明的这些化 合物调控这一事实强化了这样的观念：这些化合物在代谢性病状的 范围内具有较大的重要性。

结论

所呈现的实验数据显示根据本发明的这些化合物当具有抗血 脂的效应时(降低胆固醇以及甘油三酯的血浆水平)在体内刺激 HDL-胆固醇的合成。另外，所呈现的实验数据显示根据本发明的这 些化合物调控由PPAR的激活所调节的这些基因的表达，这些基因 对参与脂类和碳水化合物代谢以及参与能量的耗散的酶类进行编 码。

实例9：在C57B16小鼠中对根据本发明的这些化合物的抗血 脂的特性以及HDL胆固醇合成刺激的特性进行体内评估

原理

在C57B16小鼠中通过口服途径处理14天之后，对化合物2(以 剂量效应进行给药)的效应进行了体内评估。在处理结束时，通过 测量总胆固醇、HDL-胆固醇、甘油三酯以及游离脂肪酸的血浆水平 对化合物2的抗血脂效应进行评估。

已显示，在人类以及啮齿动物中，用多种PPARδ激活剂的处 理反映在血浆HDL-胆固醇的水平的提高中。

之前在体外测量的根据本发明的这些分子的PPARδ对抗特性 在骨骼肌水平上应该反映在直接处于PPARδ受体的控制下的这些 靶基因的过量表达中：在这个实验中所调查的这些基因是以下基 因，它们编码了UCP2(解偶联蛋白2，参与体温调节的线粒体转 运蛋白)以及PDK4(丙酮酸脱氢酶激酶4，碳水化合物代谢的酶)。

因此，在用根据本发明的这些化合物处理之后，PPAR的这些 靶基因的转录活性的测量也是根据本发明的这些化合物的抗血脂 特征的一个指标。

方案

动物的处理

将雌性C57B16小鼠饲养在恒温20±3℃的12/12小时的光暗 循环下。在驯化一周之后，对小鼠称重并将它们分成6只一组的多 个组，其选择方式使得在实验前第一次确定的它们的体重、它们的 血脂水平以及总胆固醇的分布是均匀的。将这些测试的化合物悬浮 于羧甲基纤维素(Sigma C4888)中，并通过胃内强制喂食以所选 择的剂量进行给药，频率为每天一次持续14天。这些动物可自由 获取水以及食物(标准的饮食)。在实验结束时，对这些动物禁食4 小时之后将其麻醉。使用抗凝剂(EDTA)采集一份血液样本，然 后对小鼠称重并实施安乐死。通过在3000转/分进行20分钟的离心 将血浆分开，并将这些样本保存在+4℃。

采集骨骼肌组织的样本，并立即在液氮中冷冻，并接着保存在 -80℃用于后续分析。

测量血桨总胆固醇以及甘油三酯

通过酶的测定(bioMérieux-Lyon-France)按照供应商的建议测 量总胆固醇以及甘油三酯的血浆浓度。

测量HDL-胆固醇

用磷钨酸盐将低密度脂蛋白(VLDL以及LDL)沉淀。通过离 心去除沉淀。通过酶的测定(bioMérieux-Lyon-France)按照供应商 的建议对上清液中存在的HDL-胆固醇进行定量。

测量血浆游离脂肪酸

通过酶的测定(WACO化学品)按照供应商的建议测量游离脂 肪酸的血浆浓度。

通过定量RT-PCR分析基因表达

骨骼组织

使用Fibrous Tissue kit(Qiagen)按照制造商的说明书 从腓肠肌的骨骼肌碎片中提取总RNA。

然后通过在37℃下以30μl总体积反应1小时而将1μg的总 RNA(基于分光光度计读数进行定量)逆转录为互补DNA，该30μl 总体积包含缓冲液1X(Invitrogen)、1.5mM的DTT、0.18mM的 dNTP(Promega)、200ng的pdN6(Amersham)、30U的RNA酶抑 制剂(Promega)以及1μl的MMLV-RT(Invitrogen)。

使用MyiQ单色实时PCR监测系统(Biorad，Marnes-la-Coquette， France)进行了多个定量PCR实验，并使用iQ SYBR Green Supermix kit按照供应商的建议、在96孔板中、在5μl经稀释的逆转录反应 混合物上进行，其中杂交温度为60℃。使用处于调查之下的对这些 基因特异的多个引物对：

●mPDK4：正义引物：5’-TACTCCACTGCTCCAACACCTG-3’ (SEQ ID No.11)以及反义引物5’-GTTCTTCGGTTCCCTGCTTG-3’ (SEQ ID No.12)

●mUCP2：正义引物： 5’-GTCGGAGATACCAGAGCACTGTCG-3’(SEQ ID No.13)以及 反义引物5’-CACATCAACAGGGGAGGCGA-3’(SEQ ID No.14)

发出的荧光的量与在反应开始时存在的以及在PCR过程中扩 增的互补DNA的量成正比。对于所调查的每种靶标，通过对由几 微升不同的逆转录反应混合物构成的一个库逐次进行稀释而产生 一个范围。因此，使用该范围中的多个点而获得的功效曲线确定了 每种靶标的相对表达水平。

然后相对于参考基因18S(其特异性引物为：正义引物： 5′-CGGACACGGACAGGATTGACAG-3′(SEQ ID No.21)以及反义 引物：5′-AATCTCGGGTGGCTGAACGC-3′(SEQ ID No.22))的表 达水平，对感兴趣的这些基因的表达水平进行标准化。

然后为每份样本计算出诱导因子，即相对信号(由根据本发明 的化合物诱导)与对照组的这些相对值的平均值的比率。这个因数 越高，该化合物的基因表达激活特征就越显著。最终结果表示为每 个实验组中的这些诱导值的平均值。

结果

总体而言，所得到的结果显示化合物2改善了处理了14天的 C57B16小鼠的脂类性质。

图2-1将用化合物2(以1、5、10以及50mpk进行给药)处 理14天之后血浆总胆固醇的水平与用对照动物所获得的水平进行 比较。出人意料地，在5mpk以及50mpk时血浆总胆固醇的水平 得到显著提高。

图2-2将用化合物2(以1、5、10以及50mpk进行给药)处 理14天之后血浆HDL-胆固醇的水平与用对照动物所获得的水平进 行比较。出人意料地，通过从1mpk开始以剂量依赖性方式的处理 血浆HDL-胆固醇的水平得到显著增高。

图2-3将用化合物2(以1、5、10以及50mpk进行给药)处 理14天之后血浆甘油三酯的水平与用对照动物所获得的水平进行 比较。出人意料地，血浆甘油三酯的水平显示了一种剂量依赖性降 低，在50mpk时具有显著效应。

图2-4将用化合物2(以1、5、10以及50mpk进行给药)处 理14天之后游离脂肪酸的血浆水平与用对照动物所获得的水平进 行比较。出人意料地，从10mpk开始游离脂肪酸的血浆水平显著 降低。

通过定量RT-PCR分析基因表达

诸位发明人还证明根据本发明的这些化合物在体内是PPAR的 这些靶基因表达的调节剂。图2-5至2-6中所呈现的结果显示对 C57B16小鼠给予50mpk的化合物2，持续14天，诱导了在骨骼肌 中对PDK4(图2-5)以及UCP2(图2-6)进行编码的这些基因的 表达的显著提高对这些蛋白进行编码的这些基因参与碳水化合物 代谢以及能量的耗散，并且它们的表达由根据本发明的这些化合物 进行调控这一事实强化了这样的观念：这些化合物在代谢性病状的 范围内具有较大的重要性。

结论

出人意料地，这些实验数据显示根据本发明的这些化合物当具 有抗血脂效应时(降低血浆甘油三酯的水平以及游离脂肪酸的水 平)在体内刺激HDL-胆固醇的合成。另外，这些实验数据显示根 据本发明的这些化合物调控骨骼肌中由PPAR的激活所调节的这些 基因的表达，所述基因对参与碳水化合物代谢以及能量耗散的酶类 进行编码。

实例10：通过脂类测定以及测量在脂类和碳水化合物代谢以及 能量耗散中涉及的基因的表达，在C57B16小鼠中体内评估了根据 本发明的这些化合物的HDL-胆固醇合成刺激的特性

原理

在C57B16小鼠中通过口服途径处理14天之后，对根据本发明 的这些化合物的效应进行了体内评估。在处理结束时，确定了在不 同的血浆脂蛋白部分中胆固醇的分布。这与对照动物(不用根据本 发明的这些化合物进行处理)中得到的性质进行比较。在C57B16 小鼠中通过口服途径处理14天之后，通过测量总胆固醇以及HDL- 胆固醇的血浆水平评估了根据本发明的这些化合物的效应。这些水 平与用对照动物(不用根据本发明的这些化合物进行处理)得到的 水平进行比较。测量出的差别提供了根据本发明的这些化合物的抗 血脂效应的证据。

已显示，在人类并且在啮齿动物中，用多种PPARδ激活剂的 处理反映在血浆HDL-胆固醇水平的提高中。

之前在体外测量的根据本发明的这些分子的PPARδ对抗的特 性在骨骼肌水平上应该反映在直接处于PPARδ受体的控制下的这 些靶基因的过量表达中：在这个实验中调查的多个基因是以下基 因，它们编码了PDK4(碳水化合物代谢的酶)、CPT1b(脂类代谢 的酶)、UCP2以及UCP3(参与体温调节的线粒体转运蛋白)。

因此，在用根据本发明的这些化合物处理之后，PPAR的这些 靶基因的转录活性的测量也是根据本发明的这些化合物的抗血脂 特征的一个指标。

方案

动物的处理

将雌性C57B16小鼠饲养在恒温20±3℃的12/12小时的光暗 循环下。在驯化一周之后，对小鼠称重并将它们分成6只一组的多 个组，其选择方式使得在实验前第一次确定的它们的体重、它们的 血脂水平以及总胆固醇的分布是均匀的。将这些测试的化合物悬浮 于羧甲基纤维素(Sigma C4888)中，并通过胃内强制喂食以所选 择的剂量进行给药，频率为每天一次持续14天。这些动物可自由 获取水以及食物(标准的饮食)。在实验结束时，对这些动物禁食4 小时之后将其麻醉，使用抗凝剂(EDTA)采集一个血液样本，然 后对小鼠称重并实施安乐死。通过在3000转/分进行20分钟的离心 将血浆分开，并将这些样本保存在+4℃。

采集骨骼肌组织的样本，并立即在液氮中冷冻，并接着保存在 -80℃用于后续分析。

测量血浆总胆固醇

通过酶的测定(bioMérieux-Lyon-France)按照供应商的建议测 量总胆固醇的血浆浓度。

测量HDL-胆固醇

用磷钨酸盐将低密度脂蛋白(VLDL以及LDL)沉淀。通过离 心去除沉淀。通过酶的测定(bioMérieux-Lyon-France)按照供应商 的建议对上清液中存在的HDL-胆固醇进行定量。

分析血浆脂蛋白部分中胆固醇的分布

通过凝胶过滤层析法将血浆的不同的脂类部分(VLDL、LDL、 HDL)分开。然后通过酶的测定(bioMérieux-Lyon-France)按照供 应商的建议测量每种部分中胆固醇的浓度。

通过定量RT-PCR分析基因表达

使用Fibrous Tissue kit(Qiagen)按照制造商的说明书 从腓肠肌的骨骼肌碎片中提取总RNA。

然后通过在37℃下以30μl总体积反应1小时而将1μg的总 RNA(基于分光光度计读数进行定量)逆转录为互补DNA，该30μl 总体积包含缓冲液1X(nvitrogen)、1.5mM的DTT、0.18mM的 dNTP(Promega)、200ng的pdN6(Amersham)、30U的RNA酶抑 制剂(Promega)以及1μl的MMLV-RT(Invitrogen)。

使用MyiQ单色实时PCR监测系统(Biorad，Marnes-la-Coquette， France)进行了多个定量PCR实验，并使用iQ SYBR Green Supermix kit按照供应商的建议、在96孔板中、在5μl经稀释的逆转录反应 混合物上进行，其中杂交温度为60℃。使用处于调查之下的对这些 基因特异的多个引物对：

●mPDK4：正义引物：5’-TACTCCACTGCTCCAACACCTG-3’ (SEQ ID No.11)以及反义引物5’-GTTCTTCGGTTCCCTGCTTG-3’ (SEQ ID No.12)

●mCPT1b：正义引物： 5’-GGACTGAGACTGTGCGTTCCTG-3’(SEQ ID No.7)以及反义 引物5’-AGTGCTTGGCGGATGTGGTT-3’(SEQ ID No.8)

●mUCP2：正义引物： 5’-GTCGGAGATACCAGAGCACTGTCG-3’(SEQ ID No.13)以及 反义引物5’-CACATCAACAGGGGAGGCGA-3’(SEQ ID No.14)

●mUCP3：正义引物：5’-GCACCGCCAGATGAGTTTTG-3’ (SEQ ID No.15)以及反义引物5’-GACGCTGGAGTGGTCCGCTC-3’ (SEQ ID No.16)

发出的荧光的量与在反应开始时存在的以及在PCR过程中扩 增的互补DNA的量成正比。对于所调查的每种靶标，通过对由几 微升不同的逆转录反应混合物构成的一个库逐次进行稀释而产生 一个范围。因此，使用该范围中的多个点而获得的功效曲线确定了 每种靶标的相对表达水平。

然后相对于参考基因18S(其特异性引物为：正义引物： 5′-CGGACACGGACAGGATTGACAG-3′(SEQ ID No.21)以及反义 引物：5′-AATCTCGGGTGGCTGAACGC-3′(SEQ ID No.22))的表 达水平，对感兴趣的多个基因的表达水平进行标准化。

然后为每份样本计算出诱导因子，即相对信号(由根据本发明 的化合物诱导)与对照组的这些相对值的平均值的比率。这个因数 越高，该化合物的基因表达激活特征就越显著。最终结果表示为每 个实验组中的这些诱导值的平均值。

结果

总体而言，所得到的结果显示根据本发明的化合物4与7改善 了被处理14天的C57B16小鼠的脂类性质。

图3-1将用根据本发明的化合物4与7(给予50mpk)处理14 天之后血浆总胆固醇的水平与用对照动物所获得的水平进行比较。 出人意料地，通过用50mpk的化合物4与7进行处理血浆总胆固 醇的水平得到显著提高。

图3-2将用根据本发明的化合物4与7(给予50mpk)处理14 天之后血浆HDL-胆固醇的水平与用对照动物所获得的水平进行比 较。出人意料地，通过用50mpk的化合物4进行处理血浆HDL- 胆固醇的水平得到显著提高。用50mpk的根据本发明的化合物7 进行处理还诱导了HDL-胆固醇水平的非显著提高。

图3-3呈现了在C57B16小鼠(对照或用50mpk的化合物4与 7处理14天)的血浆脂蛋白部分中胆固醇的分布，。出人意料地， 通过用化合物4与7进行处理血浆HDL-胆固醇的水平得到提高。

通过定量RT-PCR分析基因表达

诸位发明人还证明根据本发明的这些化合物在体内是PPAR的 这些靶基因的表达的调节剂。图3-4至3-7中所呈现的结果显示对 C57B16小鼠给予50mpk的根据本发明的化合物4与7，持续14天， 诱导了在骨骼肌中对PDK4(图3-4)、CPT1b(图3-5)、UCP2(图 3-6)以及UCP3(图3-7)进行编码的多个基因的显著提高。对酶 类进行编码的这些基因强力地参与脂类和碳水化合物代谢以及能 量的耗散，并且它们的表达由根据本发明的这些化合物进行调控这 一事实强化了这样的观念：这些化合物在代谢性病状的范围内潜在 地具有较大的重要性。

结论

出人意料地，所呈现的实验数据显示根据本发明的这些化合物 在体内刺激HDL-胆固醇的合成。另外，所呈现的实验数据显示在 骨骼肌中根据本发明的这些化合物调控由PPAR的激活所调节的多 个基因的表达，这些基因对强力参与碳水化合物代谢以及能量耗散 的酶类进行编码。

实例11：在db/db小鼠中对根据本发明的这些化合物的抗血 脂、抗糖尿病以及激活PPAR的特性进行体内评估

原理

在db/db小鼠中通过口服途径用化合物2处理28天之后，通过 测量血浆甘油三酯以及血液中的胰岛素对根据本发明的这些化合 物的效应进行了体内评估。这些水平与用对照动物(不用根据本发 明的化合物进行处理)得到的水平进行比较。测量出的差别提供了 根据本发明的化合物的抗血脂的效应以及对胰岛素抵抗的效应的 证据。

还通过在肝组织以及肌肉组织中测量参与碳水化合物和脂类 代谢、以及能量的耗散的多个基因的表达来评估根据本发明的化合 物的功效。相对于肝脏中的参考基因36B4以及骨骼肌中的参考基 因18S的表达水平，对每个基因的表达水平进行标准化。然后计算 出诱导因数，即相对信号(由根据本发明的化合物诱导)与对照组 的这些相对值的平均值的比率。这个因数越高，该化合物的基因表 达激活特征就越显著。最终结果表示为每个实验组中的这些诱导值 的平均值。

方案

动物的处理

将雌性db/db小鼠饲养在恒温20±3℃的12/12小时的光暗循 环下。在驯化一周之后，对小鼠称重并将它们分成8只一组的多个 组，其选择方式使得在实验前第一次确定的它们的体重以及血脂水 平的分布是均匀的。将这些测试的化合物悬浮于羧甲基纤维素 (Sigma C4888)中，并通过胃内强制喂食以所选择的剂量进行给 药，频率为每天一次持续28天。这些动物可自由获取水以及食物 (标准的饮食)。在整个实验过程中记录食物摄取以及体重增加。 在实验结束时，对这些动物禁食4小时之后将其麻醉，使用抗凝剂 (EDTA)采集一份血液样本，然后对小鼠称重并实施安乐死。通 过在3000转/分进行20分钟的离心将血浆分开，并将这些样本保存 在+4℃。

采集肝组织以及骨骼肌组织的样本，并立即在液氮中冷冻，并 接着保存在-80℃用于后续分析。

测量甘油三酯的血浆水平

通过酶的测定(bioMérieux-Lyon-France)按照供应商的建议测 量甘油三酯的血浆浓度。

测量血浆中的血胰岛素

通过ELISA方法(使用来自供应商Crystal chem的INSCR020 试剂盒)测定鼠类胰岛素。将一种小鼠抗胰岛素抗体固定在一个微 板上。然后将欲进行胰岛素测定的血清沉积这个板上。一种豚鼠抗 胰岛素抗体将识别胰岛素/小鼠抗胰岛素单克隆抗体复合物并与其 相附联。最后加入一种经过氧化物酶标记的抗豚鼠抗体并且该抗豚 鼠抗体附联至豚鼠抗胰岛素抗体上。通过向底物加入酶OPD(邻苯 基二胺)进行比色反应。染色强度与样本中存在的胰岛素的量成比 例。

通过定量RT-PCR分析基因表达

肝组织

使用96RNA kit(Macherey Nagel，Hoerdt，France) 按照制造商的说明书从肝的碎片中提取总RNA。

肌肉组织

使用Fibrous Tissue kit(Qiagen)按照制造商的说明书 从肌肉的碎片中提取总RNA。

然后通过在37℃下以30μl总体积反应1小时而将1μg的总 RNA(通过紫外分光光度计法进行定量)逆转录为互补DNA，该 30μl总体积包含缓冲液1X(Invitrogen)、1.5mM的DTT、0.18mM 的dNTP(Promega)、200ng的pdN6(Amersham)、30U的RNA 酶抑制剂(Promega)以及1μl的MMLV-RT(Invitrogen)。

使用MyiQ单色实时PCR监测系统(Biorad，Marnes-la-Coquette， France)进行了多个定量PCR实验，并使用iQ SYBR Green Supermix kit按照供应商的建议、在96孔板中、在5μL经稀释的逆转录反应 混合物上进行，其中杂交温度为60℃。处于调查之下的对这些基因 特异的多个引物对如下：

●mPDK4：正义引物：5’-TACTCCACTGCTCCAACACCTG-3’ (SEQ ID No.11)以及反义引物5’-GTTCTTCGGTTCCCTGCTTG-3’ (SEQ ID No.12)

●mACOX1：正义引物：5’-GAAGCCAGCGTTACGAGGTG-3’ (SEQ ID No.3)以及反义引物5’-TGGAGTTCTTGGGACGGGTG-3’ (SEQ ID No.4)

●mCPT1b：正义引物： 5’-GGACTGAGACTGTGCGTTCCTG-3’(SEQ ID No.7)以及反义 引物5’-AGTGCTTGGCGGATGTGGTT-3’(SEQ ID No.8)

●mUCP3：正义引物：5’-GCACCGCCAGATGAGTTTTG-3’ (SEQ ID No.15)以及反义引物5’-GACGCTGGAGTGGTCCGCTC-3’ (SEQ ID No.16)

发出的荧光的量与在反应开始时存在的以及在PCR过程中扩 增的互补DNA的量成正比。对于所调查的每种靶标，通过对由几 微升不同的逆转录反应混合物构成的一个库逐次进行稀释而产生 一个范围。因此，使用该范围中的多个点而获得的功效曲线确定了 每种靶标的相对表达水平。

然后在肝组织中相对于参考基因36B4(其特异性引物为：正 义引物：5’-CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC-3’(SEQ ID No.19) 以及反义引物：5’-GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG-3’(SEQ ID No.20))的表达水平，对感兴趣的多个基因的表达水平进行标准 化；并在肌肉组织中相对于参考基因18S(其特异性引物为：正义 引物：5′-CGGACACGGACAGGATTGACAG-3′(SEQ ID No.21)以及 反义引物：5′-AATCTCGGGTGGCTGAACGC-3′(SEQ ID No.22)) 的表达水平，对感兴趣的多个基因的表达水平进行标准化。计算出 每份样本的诱导因数。这个因数越高，该化合物的基因表达激活特 征就越显著。最终结果表示为每个实验组中的这些诱导值的平均 值。

结果

测量血浆甘油三酯水平

图4-1将用化合物2(给予50mpk)处理28天之后血浆甘油三 酯的水平与用对照动物所获得的水平进行比较。出人意料地，通过 用根据本发明的化合物进行处理甘油三酯的水平显著降低。

血液中胰岛素的测量

图4-2将用化合物2(给予50mpk)处理28天之后胰岛素的血 浆水平与用对照动物所获得的水平进行比较。出人意料地，用化合 物2处理动物28天之后血液中的胰岛素显著降低。

通过定量RT-PCR分析基因表达

诸位发明人还在体内证明根据本发明的这些化合物是PPAR的 这些靶基因表达的调节剂。图4-3至4-4中所呈现的结果显示以在 db/db小鼠中给予50mpk的化合物2，持续28天，诱导了在肝脏中 对PDK4(图4-3)以及ACOX1(图4-4)进行编码的多个基因的 表达的显著提高。

这些基因对参与脂类和碳水化合物代谢的酶类进行编码，并被 识别为是肝脏中PPARα的这些靶基因。它们的表达由化合物2进行 调控这一事实强化了这样的观念：这种化合物具有与代谢性病状有 关的较大的重要性。

此外，诸位发明人还在体内证明化合物2是骨骼肌中PPARδ 的这些靶基因的表达的调节剂。图4-5至4-7中所呈现的结果显示 在db/db小鼠中给予50mpk的化合物2，持续28天，诱导了在骨 骼肌中对CPT1b(图4-5)、PDK4(图4-6)以及UCP2(图4-7) 进行编码的多个基因的表达的显著提高。

这些基因对参与脂类和碳水化合物代谢以及体温调节的多种 蛋白质进行编码，并已知是肌肉中PPARδ的这些靶基因。它们的表 达由化合物2进行调控这一事实强化了这样的观念：这种化合物具 有与代谢性病状有关的较大的重要性。

结论

出人意料地，所呈现的实验数据显示化合物2在db/db小鼠中 具有抗血脂以及抗糖尿病的特性。另外，这些实验数据显示根据本 发明的这些化合物调控由PPAR的激活所调节的多个基因的表达， 这些基因对参与脂类和碳水化合物代谢以及体温调节的酶类进行 编码。

实例12：在一个鼠类肌细胞模型中对根据本发明的这些化合物 的代谢特性进行体外评估

原理

通过测量鼠类肌细胞的脂肪酸的β-氧化评估了根据本发明的 这些化合物的刺激效应，用根据本发明的这些化合物对这些鼠类肌 细胞预处理24小时。脂肪酸的β-氧化的诱导提高越多，根据本发明 的化合物对肌细胞中的代谢的刺激作用就越大。

●目的是测量在3H-标记的脂肪酸的线粒体氧化过程中所形成 的氚化水的量。

方案

C2C12细胞分化成肌细胞

将C2C12鼠类细胞系(获自ECACC)培养于DMEM培养基 (Gibco；41965-039)中，该DMEM培养基加入了1％的L-谷氨酰 胺(Gibco；25030)、1％的青霉素/链霉素(VWR；BWSTL0022/100)、 以及10％的去补体的胎牛血清(FCS.Gibco；10270-106)。

将这些细胞以25.103个细胞/孔的密度接种在48孔板上。当细 胞会合时，培养基用一种分化培养基(加入2％马血清的基础培养 基(Gibco；26050-088))替换，然后在37℃以及5％CO2的条件下 孵育4天以便将这些细胞分化为肌肉细胞。

处理

在细胞分化4天之后，用已加入至用于分化的培养基中的根据 本发明的这些化合物处理这些细胞。通过剂量效应从0.01至1μM 对化合物2进行测试，而以1μM的剂量对其他化合物进行测试。 将根据本发明的这些化合物溶解于二甲亚砜(DMSO，Sigma； D5879)中。在37℃、5％CO2的条件下处理细胞24h。将根据本发 明的这些化合物的效应与单独的DMSO的效应进行比较。

测量β-氧化

在处理24小时之后，该培养基用一种DMEM培养基1g/L葡 萄糖(Gibco；21885-025)替换，该培养基加入了1％的L-谷氨酰胺 (Gibco；25030)、1％的青霉素/链霉素(VWR；BWSTL0022/100) 以及1mM L-肉毒碱(Alfa Aefar；A 17618)。然后在37℃在5％CO2 的存在下，将这些细胞与氚化的棕榈酸酯/BSA复合物(0.1mM) 一起孵育。在1、2、以及3小时之后停止该反应，并用10％的TCA 分配对蛋白进行沉淀。

第一，对100μL已沉淀的培养上清液进行氚计数。

第二，将50μL已沉淀的上清液蒸发2天，然后测量残留的氚 以便评估没有转换为水的氚化的棕榈酸酯的量。

通过对氚化的棕榈酸酯/BSA复合物逐次进行稀释而制备一个 标准的范围，以便确定转换为水的棕榈酸酯的量。

对于每个动力学时间(1h、2h以及3h)，通过直链回归计算 出被氧化的棕榈酸酯的量，单位为纳摩尔。确定每组条件的曲线下 面积，并用DMSO对这些结果进行标准化。

最终结果表示为每个实验组中的这些诱导值的平均值。

结果

诸位发明人还在体外在肌细胞上证明根据本发明的这些化合 物对脂肪酸的β-氧化具有刺激效应。在图5中所呈现的结果显示根 据本发明的化合物2(处于剂量效应从0.01μM开始)以及化合物 4与11(以1μM)诱导了鼠类肌细胞中脂肪酸的β-氧化的显著提高。

结论

出人意料地，呈现的实验数据显示根据本发明的这些化合物在 鼠类肌细胞中具有代谢的作用，诱导了脂肪酸的分解代谢。

实例13：根据本发明的这些化合物的激活胆固醇逆向转运的特 性的体外评估

原理

通过测量人巨噬细胞中ABCA1基因(ATP-结合盒，亚家族A， 成员1；参与胆固醇的外流的膜转运蛋白)的表达评估了根据本发 明的这些化合物对胆固醇逆向转运的效应。ABCA1的表达提高越 多，根据本发明的化合物对胆固醇逆向转运的刺激作用就越大。

方案

THP-1细胞分化成巨噬细胞

将THP1人单核细胞系(获自ATCC)培养于RPMI1640培养 基中，该培养基加入了25mM Hepes(Gibco；42401-018)、1％谷氨 酰胺(Gibco；25030-24)、1％的青霉素/链霉素(Biochrom AG；A 2213)、以及10％的去补体的胎牛血清(FCS.Gibco；26050-088)。

将这些细胞以3.105个细胞/孔的密度接种在24孔板(Primaria BD Falcon)上，并在30ng/ml的佛波醇12-肉豆蔻酯13-乙酸酯 (PMA)的存在37℃以及5％CO2的条件下孵育72h，以便使它们 分化为巨噬细胞。

处理

将分化培养基取出并用处理培养基(与该培养基的组成相同但 没有胎牛血清而具有1％的ultroser(Pall Life Science；P/N267051)) 替换。

将根据本发明的这些化合物溶解于二甲亚砜(DMSO，Fluka； 41640)中。以1μM的剂量对化合物2进行测试。在37℃、5％CO2 的条件下处理细胞24h。将根据本发明的这些化合物的效应与单独 的DMSO的效应进行比较。

RNA的提取、逆转录以及定量PCR

在处理之后，使用96 RNA kit(Macherey Nagel， Hoerdt，France)按照制造商的说明书从这些细胞中提取总RNA。

然后通过在37℃下以30μl总体积反应1小时而将1μg的总 RNA(基于分光光度计读数进行定量)逆转录为互补DNA，该30μl 总体积包含缓冲液1X(Invitrogen)、1.5mM的DTT、0.18mM的 dNTP(Promega)、200ng的pdN6(Amersham)、30U的RNA酶抑 制剂(Promega)以及1μl的MMLV-RT(Invitrogen)。

使用MyiQ单色实时PCR监测系统(Biorad，Marnes-la-Coquette， France)进行了多个定量PCR实验，并使用iQ SYBR Green Supermix kit按照供应商的建议、在96孔板中、在5μl经稀释的多种逆转录 反应混合物上进行，其中杂交温度为60℃。使用处于调查之下的对 该基因特异的多个引物对：

●hABCA1：正义引物：5’-CTGAGGTTGCTGCTGTGGAAG-3’ (SEQ ID No.1)以及反义引物5’-CATCTGAGAACAGGCGAGCC-3’ (SEQ ID No.2)

发出的荧光的量与在反应开始时存在的以及在PCR过程中扩 增的互补DNA的量成正比。对于所调查的每种靶标，通过对由几 微升不同的逆转录反应混合物构成的一个库逐次进行稀释而产生 了一个范围。因此，使用该范围中的多个点而获得的功效曲线确定 了每种靶标的相对表达水平。

然后相对于参考基因36B4(其特异性引物为：正义引物： 5’-CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC-3’(SEQ ID No.19)以及反 义引物：5’-GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG-3’(SEQ ID No. 20))的表达水平，对感兴趣的多个基因的表达水平进行标准化。

然后计算出诱导因数，即相对信号(由根据本发明的化合物诱 导)与对照组的这些相对值的平均值的比率。这个因数越高，该化 合物的基因表达激活特征就越明显。最终结果表示为每个实验组中 的这些诱导值的平均值。

结果

诸位发明人证明了在体外人巨噬细胞中，根据本发明的这些化 合物对胆固醇的逆行转运具有刺激作用。图6-1中呈现的结果显示 化合物2在1μM时诱导人巨噬细胞中编码ABCA1的基因的表达 的显著提高。图6-2中呈现的结果显示根据本发明的化合物4与7 在1μM以及300nM时分别诱导人巨噬细胞中编码ABCA1的基因 的表达的显著提高。

结论

出人意料地，所呈现的实验数据显示根据本发明的这些化合物 刺激胆固醇的逆行转运。

实例14：在一个人类肌细胞模型中对根据本发明的这些化合物 的抗炎特性进行体外评估

原理

通过测量由单核细胞产生的单核细胞趋化蛋白(MCP1)以及 基质金属蛋白酶9(MMP9)的分泌与表达对根据本发明的这些化 合物的抗炎效应进行了评估，这些单核细胞用根据本发明的这些化 合物处理24小时并用PMA(佛波醇12-肉豆蔻酯13-乙酸酯，它引 起细胞的炎症应答)进行刺激。所分泌的MCP1的量减少越多，根据本 发明的这些化合物对炎症反应的抑制作用就越大。类似地，对MCP1 以及MMP9进行编码的多个基因的表达抑制越大，根据本发明的这 些化合物的抗炎效应就越大。

方案

培养THP-1细胞

将THP 1人单核细胞系(获自ATCC)培养于RPMI1640培养 基中，该培养基加入了25mM Hepes(Gibco；42401-018)、1％谷氨 酰胺(Gibco；25030-24)、1％的青霉素/链霉素(Biochrom AG；A 2213)、以及10％的去补体的胎牛血清(FCS.Gibco；10270-106)。

处理

在处理培养基(与该培养基的组成相同但具有0.2％的去补体的 胎牛血清)中并且在5ng/mL用于诱导炎症应答的佛波醇12-肉豆 蔻酯13-乙酸酯(PMA)的存在下将这些细胞以8.70.105个细胞/孔 的密度接种在24孔板(Primaria BD Falcon)上。

对根据本发明的这些化合物以0.1、0.3和/或1μM进行测试， 并将其溶解于二甲亚砜(DMSO，Fluka；41640)中。在37℃、5％ CO2的条件下处理细胞24h。将根据本发明的化合物的效应与单独 的DMSO的效应进行比较。

测量MCP1的分泌

回收该处理培养基并使用ELISA试剂盒“Human MCP1 Elisa set”(BD OptEIA；555179)按照制造商的建议对MCP1的浓度进 行测量。

将一种人的抗MCP1单克隆抗体固定在一个板上，然后分配包 含由这些细胞所分泌的MCP1的上清液。然后一种生物素酰化的抗 MCP1抗体将附联至该复合物上。与一种过氧化物酶偶联并连接的 一种第三抗体使之有可能在底物的存在下启动一个酶反应，其结果 是与所固定的MCP1的量成比例并可通过分光光度计法进行测量的 一种染色。产生从一个已知的浓度点开始的一个范围，使之有可能 计算出每份样本中MCP1的浓度。

然后计算出诱导因数，即由根据本发明的化合物所诱导的信号 与对照组的信号的比率。这个因数越低，该化合物对MCP1分泌的 抑制效应就越大。最终结果表示为每个实验组的这些诱导值的平均 值。

RNA的提取、逆转录以及定量PCR

在处理之后，使用96 RNA kit(Macherey Nagel， Hoerdt，France)按照制造商的说明书从这些细胞中提取总RNA。

然后通过在37C下以30μl总体积反应1小时而将1μg的总 RNA(基于紫外分光光度计的读数进行定量)逆转录为互补DNA， 该30μl总体积包含缓冲液1X(Invitrogen)、1.5mM的DTT、0.18 mM的dNTP(Promega)、200ng的pdN6(Amersham)、30U的RNA 酶抑制剂(Promega)以及1μl的MMLV-RT(Invitrogen)。

使用MyiQ单色实时PCR监测系统(Biorad，Marnes-la-Coquette， France)进行了多个定量PCR实验，并使用iQ SYBR Green Supermix kit按照供应商的建议、在96孔板中、在5μl经稀释的逆转录反应 混合物上进行，其中杂交温度为60℃。使用处于调查之下的对 MCP1以及MMP9基因特异的多个引物对：

●hMCP1：正义引物：5’-AGGAAGATCTCAGTGCAGAGG-3’ (SEQ ID No.9)以及反义引物5’-AGTCTTCGGAGTTTGGGTTTG-3’ (SEQ ID No.10)

●hMMP9：正义引物：5’-TGGCACCACCACAACATCAC-3’ (SEQ ID No.17)以及反义引物5’-ACCACAACTCGTCATCGTCG-3’ (SEQ ID No.18)

发出的荧光的量与在反应开始时存在的以及在PCR过程中扩 增的互补DNA的量成正比。对于所调查的每种靶标，通过对由几 微升不同的逆转录反应混合物构成的一个库逐次进行稀释而产生 了一个范围。因此，使用该范围中的多个点而获得的功效曲线确定 了每种靶标的相对表达水平。

接着在肝组织中相对于参考基因36B4(其特异性引物为：正 义引物：5’-CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC-3’(SEQ ID No.19) 以及反义引物：5’-GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG-3’(SEQ ID No.20))的表达水平，对感兴趣的多个基因的表达水平进行标准 化。接着计算出诱导因数，即相对信号(由根据本发明的化合物诱 导)与对照组的这些相对值的平均值的比率。这个因数越低，该化 合物对基因表达的抑制效应就越大。最终结果表示为每个实验组中 的这些诱导值的平均值。

结果

诸位发明人还在单核细胞中体外证明根据本发明的这些化合 物具有抗炎效应。在图7-1中呈现的结果显示根据本发明的化合物 7与11在1μM时诱导人单核细胞中MCP1的分泌的显著提高。在 图7-2以及7-3中呈现的结果显示根据本发明的化合物7与11在1 μM时诱导人单核细胞中MCP1与MMP9的表达的显著降低。图 7-4中呈现的结果显示化合物2在0.1以及0.3μM时诱导人单核细 胞中MCP1的表达的显著降低。

结论

出人意料地，所呈现的实验数据显示根据本发明的这些化合物 在用PMA刺激的单核细胞中具有一种抗炎作用。

总体结论

诸位发明人已经证明根据本发明的这些化合物具有HDL-胆固 醇合成刺激的特性、抗血脂的特性(降低血浆甘油三酯以及游离脂 肪酸水平)、连同抗糖尿病的特性。另外，诸位发明人证明根据本 发明的这些化合物是对参与脂类和碳水化合物代谢以及能量耗散 的酶类进行编码的多个基因的表达的调节剂。这些在体内获得的结 果提供了根据本发明的这些化合物关于一些病状的治疗潜力的证 据，这些病状是与代谢性综合征有关的病状，如血脂障碍、肥胖症、 动脉硬化等等。

此外，诸位发明人已经在不同的细胞模型中证明了激活PPAR 的特征，特别是反映在对参与脂类和碳水化合物的代谢、以及体温 调节的酶类进行编码的多个基因的表达的调节中，并且反映在脂肪 酸的分解代谢、连同抗炎作用的提高中。

参考文献

de la Monte SM，et al.，Therapeutic rescue of neurodegeneration in experimental type 3 diabetes：Relevance to Alzheimer′s disease，J Alzheimers Dis，2006，10(1)，89-109

Fox-Tucker J，The Cardiovasular Market Outlook to 2010，BUSINESS INSIGHTS REPORTS，2005，1-174

Gross B，et al.，Peroxisome Proliferator-Activated Receptor b/d：A novel target for the reduction of atherosclerosis，DRUG DISCOVERY TODAY：THERAPEUTIC STRATEGIES，2005，2(3)，237-243

International Atherosclerosis Society，Harmonized Clinical.Guidelines on

Prevention of Atherosclerotic Vascular Disease，2003，

Kota BP，et al.，An overview on biological mechanisms of PPARs， Pharmacol Res，2005，51(2)，85-94

Lefebvre P，et al.，Sorting out the roles of PPARalpha in energy metabolism and vascular homeostasis，J Clin Invest，2006，116(3)， 571-580

Lehrke M and Lazar MA，The many faces of PPARgamma，Cell，2005， 123(6)，993-9

Liu Y and Miller A，Ligands to peroxisome proliferator-activated receptors as therapeutic options for metabolic syndrome，DRUG DISCOVERY TODAY：THERAPEUTIC STRATEGIES，2005，2(3)， 165-169

Mensah M，The Atlas of Heart Disease and Stroke，2004，

Polak，Oral administration of the selective PPARd agonist GW0742 reduced clinical symptoms and reduces astroglial and microglial inflammatory activation in a model of EAE，J Neuroimmunol，2005，

Raspe E，et al.，Modulation of rat liver apolipoprotein gene expression and serum lipid levels by tetradecylthioacetic acid (TTA)via PPARalpha activation，J Lipid Res，1999，40(11)，2099-110

序列表

<110>基恩菲特公司(GENFIT)

<120>取代的3-苯基-1(苯基噻吩基)丙-1酮以及3-苯基-1(苯基噻吩基)丙-1酮的衍生物、制备以及用途

<130>P27274RWS2

<150>FR0656067

<151>2006-12-29

<160>22

<170>PatentIn version 3.3

<210>1

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物hABCA1

<400>1

ctgaggttgc tgctgtggaa g                                                              21

<210>2

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物hABCA1

<400>2

catctgagaa caggcgagcc                                                                20

<210>3

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物mACOX1

<400>3

gaagccagcg ttacgaggtg                                                                20

<210>4

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物mACOX1

<400>4

tggagttctt gggacgggtg                                                                20

<210>5

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物mApoCIII

<400>5

ctcttggctc tcctggcatc                                                                20

<210>6

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物mApoCIII

<400>6

gcatcctgga ccgtcttgga                        20

<210>7

<211>22

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物mCPT1b

<400>7

ggactgagac tgtgcgttcc tg                     22

<210>8

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物mCPT1b

<400>8

agtgcttggc ggatgtggtt                        20

<210>9

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物hMCP1

<400>9

aggaagatct cagtgcagag g                      21

<210>10

<211>21

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物hMCP1

<400>10

agtcttcgga gtttgggttt g                      21

<210>11

<211>22

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物mPDK4

<400>11

tactccactg ctccaacacc tg                     22

<210>12

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物mPDK4

<400>12

gttcttcggt tccctgcttg                        20

<210>13

<211>24

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物mUCP2

<400>13

gtcggagata ccagagcact gtcg                   24

<210>14

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物mUCP2

<400>14

cacatcaaca ggggaggcga                        20

<210>15

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物mUCP3

<400>15

gcaccgccag atgagttttg                        20

<210>16

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物mUCP3

<400>16

gacgctggag tggtccgctc                        20

<210>17

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物hMMP9

<400>17

tggcaccacc acaacatcac                        20

<210>18

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物hMMP9

<400>18

accacaactc gtcatcgtcg                        20

<210>19

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物36B4

<400>19

catgctcaac atctccccct tctcc                  25

<210>20

<211>25

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物36B4

<400>20

gggaaggtgt aatccgtctc cacag                  25

<210>21

<211>22

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>正义引物18S

<400>21

cggacacgga caggattgac ag                     22

<210>22

<211>20

<212>DNA

<213>人工序列

<220>

<223>反义引物18S

<400>22

aatctcgggt ggctgaacgc                        20