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浮游病毒感染对策方法

阅读:833发布:2020-05-11

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1.一种呼吸道病毒感染对策方法,其特征在于,在呼吸道病毒能够存在的且可形成封闭或开放状态的空间中供给二化氯气体,使所述空间中的二氧化氯气体的浓度在动物能够生存而所述浮游病毒失活的0.0001ppm~0.1ppm的浓度范围内。
2.一种呼吸道病毒感染对策方法,其特征在于,在呼吸道病毒能够存在的且可形成封闭或开放状态的空间中供给二氧化氯气体,使所述空间中的二氧化氯气体的浓度在动物能够生存而能够防止所述浮游病毒对所述动物感染的0.0001ppm~0.1ppm的浓度范围内。
3.根据权利要求1或2所记载的呼吸道病毒感染对策方法,其特征在于,所述呼吸道病毒为流感病毒。

说明书全文

浮游病毒感染对策方法

技术领域

[0001] 本发明涉及浮游病毒的感染对策方法。

背景技术

[0002] 例如,在工作场所等处,存在受到某些种类的呼吸道病毒感染的从业人员时,有在该工作场所内工作的其它从业人员被相同的呼吸道病毒感染的可能性。此时,存在着呼吸道病毒疾病发病,身体状况失调,而使职场的业务效率大幅下降的情况。
[0003] 所谓呼吸道病毒是在动物中引起炎等呼吸器官疾病的病毒的总称。其中,包括流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、禽流感病毒、SARS病毒、冠状病毒等。而且,一旦被这些呼吸道病毒感染,呼吸道病毒疾病发病,则极为严重时有导致死亡的情况。
[0004] 这种呼吸道病毒还存在于由其感染者的呼吸器官排出的飞沫中。由于这种飞沫可以浮游于空气中,因此通过未感染者吸入被含有呼吸道病毒的飞沫污染的空气,而扩散感染,蔓延呼吸道病毒。
[0005] 而且,麻疹病毒和疹病毒中,未感染者吸入由该病毒的感染者的呼吸器官排出的飞沫污染的空气,通过呼吸道二次感染,因此虽一般并不称为“呼吸道病毒”,但属于相同范畴。
[0006] 为了防止呼吸道病毒的蔓延,除去浮游于室内(空气中)的呼吸道病毒或使之失活是一种有效的方法。作为可以使浮游于室内的呼吸道病毒失火的方法,可以列举,例如称之为熏蒸的方法(参照非专利文献1)。
[0007] 非专利文献1:“杀菌·消毒手册”医齿药出版,1991年,杀菌·消毒手册编集委员会

发明内容

[0008] 所谓熏蒸,是一种使将药剂气化形成的气体充满于密闭的室内,杀死存在于该室内的虫、螨、霉菌等的方法。可以在熏蒸中使用的药剂,可以列举,例如甲、溴化甲基、磷化、氰酸气体等。
[0009] 不过,可在熏蒸中使用的药剂对生物体毒性很大,熏蒸时,需要从业人员中断其业务,退出室内,业务效率降低。
[0010] 本发明鉴于上述实际情况而完成,提供了一种浮游病毒感染对策方法,该方法在存在动物且病毒浮游的空间中,在动物安全生存于其空间中的原本状态下,可以防止对动物的病毒感染等。
[0011] 用于实现上述目的的本发明的浮游病毒感染对策方法的第一特征构成在于:在浮游病毒可以存在的空间中供给二化氯气体,使前述空间中二氧化氯气体的浓度为动物可以生存而前述浮游病毒失活的浓度。
[0012] 二氧化氯气体具有强氧化和杀菌力,以及强杀病毒效果。因此,通过使二氧化氯气体与浮游病毒接触,可以使浮游病毒失活。
[0013] 本说明书中所谓“失活”是指,例如浮游病毒死亡,在宿主中无法增殖的状态,或浮游病毒虽生存但在宿主中几乎无法增殖的状态。
[0014] 因此,如本构成那样,在某种空间中供给二氧化氯气体,如果将该空间中二氧化氯气体的浓度维持在浮游病毒失活的浓度,则即使浮游病毒由外部带入该空间,该浮游病毒也可立即失活。因此,可以防止对存在于该空间中的动物的病毒感染。
[0015] 而且,由于前述空间中的二氧化氯气体的浓度是动物可以生存而浮游病毒失活的浓度,因此在该空间中动物可以进行正常的生活。因此,例如,在工作场所等处,从业人员就可以照原样工作,该工作场所中的空气可维持在浮游病毒失活的状态。于是,通过防止病毒的二次感染,可以试图维持从业人员的健康,并且不需要中断在通过熏蒸等进行空气净化时的业务,因此没有业务效率降低的顾虑。
[0016] 而且,所谓“动物”是指,例如人、家畜等哺乳类、类、爬行动物等在前述空间中生存、具有被浮游病毒感染的可能性的动物。
[0017] 本发明的第二特征构成在于:在浮游病毒可以存在的空间中供给二氧化氯气体,使前述空间中二氧化氯气体的浓度为动物可以生存而可以防止前述浮游病毒向前述动物感染的浓度。
[0018] 根据该构成,例如浮游病毒成为丧失感染能力而无法在宿主间感染的状态。所谓“丧失感染能力”是指例如,使浮游病毒用于感染宿主所必需的表面蛋白质变性,而无法感染该宿主的状态。
[0019] 因此,可以防止宿主间的感染,动物由于感染浮游病毒而致病毒性疾病发病的可能性变得非常低。
[0020] 本发明的第3个特征构成在于:在浮游病毒可以存在的空间中供给二氧化氯气体,使前述空间中二氧化氯气体的浓度为动物可以生存而可以抑制前述浮游病毒感染的动物的发病的浓度。
[0021] 根据该构成,动物即使被浮游病毒感染,也可以减少病毒性疾病发病的可能性。
[0022] 本发明的第4个特征构成在于:在浮游病毒可以存在的空间中供给二氧化氯气体,使前述空间中二氧化氯气体的浓度为动物可以生存而可以治疗由于前述浮游病毒感染而发病的动物的浓度。
[0023] 根据该构成,即使动物被浮游病毒感染,病毒性疾病发病,也可以减轻症状。而且,可以缩短其发病期。
[0024] 本发明的第5特征构成在于:前述空间中的二氧化氯气体的浓度为0.0001ppm-0.1ppm。
[0025] 根据该构成,空间中的二氧化氯气体的浓度不到0.0001pm时难以使浮游病毒失活,而且,二氧化氯气体的作业环境基准值为0.1ppm,因此浓度比0.1ppm大时,对动物有害。因此,空间中的二氧化氯气体的浓度为0.0001ppm-0.1ppm的极低浓度时,使浮游病毒失活,而且,动物可以在该空间中更安全地生存。
[0026] 本发明的第6个特征构成在于,前述浮游病毒为呼吸道病毒。
[0027] 根据本构成,可以有效实施对呼吸道病毒的感染预防,或对于可感染后发病的各种呼吸器官疾病(例如,肺炎等)的预防或治疗。
[0028] 本发明的第7特征构成在于,前述呼吸道病毒为流感病毒。
[0029] 根据本构成,可以有效实施对流感病毒的感染预防,或对于可感染后发病的各种症状(例如,发热、鼻涕、咽喉疼痛等)的预防或治疗。附图说明
[0030] [图1]测定与二氧化氯反应的G6PD的酶活性的图

具体实施方式

[0031] [实施方式]
[0032] 本发明可以使用例如适当的二氧化氯气体产生装置来实施。
[0033] 作为本发明中可以使用的二氧化氯气体产生装置,可以列举大型的搁置型的装置、小型的设置式的装置、小型携带式装置,或在凝胶中填充发生用药剂或混合干燥药剂,半自动地长期产生低浓度的二氧化氯气体的器具。但是,并不限于这些例子,例如,还可以随时使用就像在口腔中吸入低浓度的二氧化氯气体来使用那样的装置。
[0034] 该二氧化氯气体发生装置配备反应槽,可以储存药液的药液罐、液体、空气泵、稀释器等而构成。
[0035] 药液罐存在两种,各药液罐中分别容纳亚氯酸盐溶液和酸。作为可以使用的亚氯酸盐,可以列举亚氯酸金属盐(亚氯酸钠、亚氯酸、亚氯酸锂等),或亚氯酸碱土类金属盐(亚氯酸、亚氯酸镁、亚氯酸钡等),但不限于这些物质。
[0036] 而且,作为可以使用的酸,可以列举盐酸硫酸硝酸磷酸无机酸,但不限于这些物质。
[0037] 液体泵附随药液罐而配备,根据时间可以精确控制送液。
[0038] 通过液体泵,由两个药液罐分别定期向反应槽输送规定量的亚氯酸盐水溶液和酸,混合进行反应,从而产生二氧化氯气体。将产生的二氧化氯气体通过稀释器与由空气泵输送的一定流速的空气混和,稀释至规定浓度(优选0.8ppm)。
[0039] 在浮游病毒可以存在的所希望的空间中供给稀释的二氧化氯气体,将在该空间中的二氧化氯气体的浓度维持在动物可以生存而浮游病毒失活的浓度。
[0040] 该浓度可以是可防止浮游病毒对动物的感染的浓度,或可以控制感染了浮游病毒的动物的发病的浓度,或可以治疗由于浮游病毒感染而发病的动物的浓度。
[0041] 具体地,根据后述的小鼠的流感感染实验的结果,该浓度维持在0.05ppm-0.1ppm。
[0042] 而且,二氧化氯气体的浓度可以例如按如下方式设定。
[0043] 后述的小鼠的流感感染实验中,施予10LD50以上的高浓度的病毒,使其感染小鼠。一般而言,在如剧场那样的大型设施内发生流感等呼吸道病毒感染病时,极低浓度的病毒就成为问题。例如,即使是0.02LD50这样的浓度也可引起感染。
[0044] 此时的空气中的病毒浓度是上述浓度的约500分之一(10LD50/0.02LD50)。因此,为了预防流感病毒的感染所必需的二氧化氯气体浓度为0.0001ppm(0.05/500)。
[0045] 换言之,根据本发明,用前述二氧化氯气体发生装置,将空间中的二氧化氯气体浓度维持在极低浓度(0.0001-0.1ppm)。此时,二氧化氯气体的浓度为对动物通常安全的浓度,而且,对于浮游病毒,可以维持通常使其活性失活或丧失感染能力的浓度。
[0046] (空间)
[0047] 所谓可以适用于本发明的空间,可以列举例如剧场、机场的大厅、事务所、教室等人出入的空间,或鼠笼、塑料大棚等饲养动物或栽培植物的空间,或人的口腔内等空间。但是,不限于这些空间,只要是随时可以形成封闭状态或开放状态的空间,就可以适用于任意空间。
[0048] (浮游病毒)
[0049] 所谓本发明中的浮游病毒是指可以浮游于上述空间中的病毒,可以例举,例如流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、禽流感病毒、SARS病毒、冠状病毒、RS病毒等呼吸道病毒等,但不限于此。例如,尽管一般不称为“呼吸道病毒”,但由于可考虑用本发明进行预防和治疗,因而通过飞沫经由呼吸道二次感染的麻疹病毒和风疹病毒也是本发明的对象。
[0050] (动物)
[0051] 本发明中作为对象的生物是指,例如,人、家畜等哺乳类、鸟类、爬行动物等,在前述空间中生存,具有被浮游病毒感染的可能性的动物。
[0052] 实施例
[0053] 以下,对于本发明,通过实施例进行具体说明,但本发明不限于这些实施例。
[0054] (二氧化氯气体生成)
[0055] 在各药液罐中分别预先填充0.25%的亚氯酸钠(NaClO2)和0.9%的盐酸。将它们通过附随于各个罐的液体泵定期送到反应槽中。
[0056] 通过在混合亚氯酸钠和盐酸使之反应后生成的二氧化氯中吹入空气,作为气体被放出。此时放出的二氧化氯气体的浓度为约50ppm。放出的二氧化氯气体通过稀释器与一定流速的空气混合,稀释至低浓度。
[0057] 本实验中,稀释后放出的二氧化氯气体的浓度为0.8ppm。如下所述,在小鼠的笼中进一步稀释,浓度达到0.08ppm或其之下。通常用二氧化氯测定器(4330-SP,美国Interscan公司制)测定二氧化氯气体的浓度。
[0058] (流感病毒的制备)
[0059] 使用如下的流感病毒:以作为犬肾细胞的MDCK细胞(ATCC CCL34)作为宿主,预先在含有2%胎血清的培养基中使A型流感病毒株A/PR8(H1N1)增殖而得的流感病毒。
[0060] 以这种方式增殖的病毒暂时悬浮于磷酸缓冲液(PBS),烟雾化,然后使用。此时,悬浮的病毒的浓度,作为烟雾装入鼠笼时,分别调制成50%的小鼠死亡的浓度(LD50)的10、100、1000倍的浓度。
[0061] (动物实验)
[0062] 使用8周龄的雄CD-1小鼠进行动物实验。将15只小鼠作为一组,将这样一组小鼠装入大小为25.5cm×36.8cm×8.0cm的鼠笼中。在其中以每分钟12.5升的流速输送A型流感病毒的烟雾。
[0063] 此时,按0.6-1.8升/分钟左右的流速同时输送0.8ppm浓度的二氧化氯气体。鼠笼内的二氧化氯气体由于烟雾的存在而被稀释。
[0064] 本实验中,鼠笼中的实测的二氧化氯气体浓度可以设定为0ppm,0.03ppm,0.05ppm,0.08ppm,获得这四种浓度中的数据。
[0065] 病毒的烟雾对小鼠暴露的时间为15分钟。
[0066] 作为原则,在导入含有病毒的烟雾的同时导入二氧化氯气体,但在一部分实验中,比烟雾导入时更晚些导入二氧化氯气体。这是为了确认,如下所述,二氧化氯气体对于已经进入肺部的病毒是否防止发病。
[0067] 作为对照实验,使用不含病毒的磷酸盐缓冲液,在鼠笼中导入该磷酸盐缓冲液的烟雾。
[0068] 病毒暴露后的小鼠,一次一只装入到各个鼠笼中,分别隔离饲养两周。这期间,为了确认病毒感染的有无及其程度(病毒数),在病毒暴露第3-4天时从15只中的5只中摘出其肺组织。
[0069] 将摘出的肺捣碎后,分离病毒,测定其量。
[0070] 肺内的病毒的定量通过以下方式进行:悬浮肺的粉碎物,制作出其稀释系列,使其感染培养细胞,求出TCID50值(50%组织培养感染量)。
[0071] 另一方面,对于剩下的10只小鼠,观察其生死直至第14天。这期间,死亡的情况下,在死亡的那一时刻,不死亡的情况下,在第14天,摘出肺组织,用甲醛固定,按照常规方法进行其病理组织检查。
[0072] (同时施予二氧化氯气体0.08ppm)
[0073] 表示了对小鼠暴露15分钟1000LD50量的病毒的烟雾,以0.08ppm(鼠笼内的最终浓度)的浓度同时对其施予二氧化氯气体时的小鼠的生死(表1)。
[0074] [表1]
[0075] 病毒暴露后的死亡小鼠数(与各组10只相关的数据)
[0076]暴露后的天数 3 4 5 8 9 10 14
0ppm组 0 8 10 10 10 10 10
0.08ppm组 0 0 0 0 6 10 10
[0077] 根据表1,清楚了在施予0.08ppm的二氧化氯气体的小鼠组中,小鼠的死亡明显推迟。这种差异可以进行统计学的显著差异检验,其显著水平(危险率)为0.0001以下(P<0.0001)。即,可以确认差异为“统计学上存在显著差异”。
[0078] 然后,对于相同实验,从病毒暴露后第3天的各组15只小鼠中取出各组5只小鼠,摘出其肺组织,捣碎,测定其中的病毒量(表2)。
[0079] [表2]
[0080] 病毒暴露后第3天的肺组织中的总病毒量(TCID50值)
[0081]小鼠编号 1 2 3 4 5
0ppm组 107.8 107.8 107.3 107.8 107.8
小鼠编号 6 7 8 9 10
0.08ppm组 106.5 106.3 106.8 105.8 106.8
[0082] 如表2所示,所有肺组织中的病毒数用TCID50值表示时,0ppm施予组的平均值为7.7 6.4
10 ,0.08ppm施予组的平均值为10 。换言之,在施予0.08ppm的二氧化氯气体的组中的值,仅为对照组(0ppm组)的5%(注意的是值为指数表示)。
[0083] 由此,认为这是在二氧化氯气体的存在下抑制病毒增殖,或感染时具有活性的病毒量少这两种情况中的任一种。
[0084] 这些可被认为分别形成了由于浮游病毒失活而在小鼠体内大部分无法增殖的状态,或由于浮游病毒的感染能力丧失而可以防止对小鼠的感染的状态。
[0085] 由此,清楚了,流感病毒以1000LD50量的浓度存在时,通过施予0.08ppm的二氧化氯气体显示出与流感的发病相关的充分的抑制效果。
[0086] 然后,改变对小鼠暴露的病毒的浓度进行相同的实验。
[0087] 该实验中,在鼠笼中施予病毒浓度为10LD50(LD50的10倍浓度)和100LD50(LD50的100倍浓度)的病毒的烟雾15分钟。同时,在鼠笼中施予0.08ppm(鼠笼中的最终浓度)的二氧化氯气体。
[0088] 其结果是,在病毒浓度为10LD50的病毒施予组中,0.08ppm的二氧化氯气体施予组中,14天中没发现流感的发病(表3)。
[0089] [表3]
[0090] 10LD50病毒暴露后的死亡小鼠数(与各组10只相关的数据)
[0091]暴露后的天数 3 4 5 8 9 10 14
0ppm组 0 0 0 5 7 10 10
0.08ppm组 0 0 0 0 0 0 0
[0092] 而且,病毒暴露第3天时小鼠肺内的病毒量,在二氧化氯气体施予组中明显减少(表4)。
[0093] [表4]
[0094] 10LD50病毒暴露后第3天的肺组织中的总病毒量(TCID50值)
[0095]小鼠编号 21 22 23 24 25
0ppm组 105 105 105.3 105.1 105
小鼠编号 26 27 28 29 210
0.08ppm组 103 103.2 103.3 103 103.1
[0096] 而且,病毒浓度为100LD50的病毒施予组中,病毒暴露后也没发现流感发病(表5),肺内的病毒量(表6)在二氧化氯气体施予组中减少。
[0097] [表5]
[0098] 100LD50病毒暴露后的死亡小鼠数(与各组10只相关的数据)
[0099]暴露后的天数 3 4 5 8 9 10 14
0ppm组 0 0 3 6 8 10 10
0.08ppm组 0 0 0 0 0 0 0
[0100] [表6]
[0101] 100LD50病毒暴露后第3天的肺组织中的总病毒量(TCID50值)
[0102]小鼠编号 31 32 33 34 35
6.3 6.2 6.1 6.1 6.6
0ppm组 10 10 10 10 10
小鼠编号 36 37 38 39 310
0.08ppm组 105.5 105.8 105.6 105.7 106.9
[0103] 由此清楚了,流感病毒以10LD50和100LD50的浓度存在时,通过施予0.08ppm的二氧化氯气体显示出了与流感的发病相关的充分的抑制效果。
[0104] (同时施予二氧化氯气体0.05ppm)
[0105] 然后,对于施予10LD50浓度的病毒的情况,研究了再同时施予低浓度(0.05ppm)的二氧化氯时的效果。其结果是,二氧化氯气体施予组中,没有发现流感发病(表7),肺内的病毒量(表8)减少。
[0106] 由此清楚了,流感病毒以10LD50浓度存在时,由于同时施予0.05ppm的二氧化氯气体抑制了流感的发病。
[0107] [表7]
[0108] 同时施予0.05ppm二氧化氯时,10LD50病毒暴露后的死亡小鼠数(与各组10只相关的数据)
[0109]暴露后的天数 3 4 5 8 9 10 14
0ppm组 0 0 4 5 8 10 10
0.05ppm组 0 0 0 0 0 0 0
[0110] [表8]
[0111] 同时施予0.05ppm二氧化氯时,10LD50病毒暴露后第3天的肺组织中的总病毒重TCID50值)
[0112]小鼠编号 41 42 43 44 45
0ppm值 106.2 105.5 105.2 106.2 105.4
小鼠编号 46 47 48 49 410
0.05ppm组 105.4 105.8 105.2 105.7 105.8
[0113] (同时施予0.03ppm二氧化氯气体)
[0114] 进而,在施予10LD50浓度的病毒时,将同时施予的二氧化氯气体的浓度下降到0.03ppm,观察其效果。其结果是,二氧化氯气体施予组(0.03ppm)和对照组(0ppm)中,流感发病数(表9)和肺内病毒量(表10)中没有发现大的差异。
[0115] [表9]
[0116] 同时施予0.03ppm二氧化氯时,10LD50病毒暴露后的死亡小鼠数(与各组10只相关的数据)
[0117]暴露后的天数 3 4 5 8 9 10 14
0ppm组 0 0 3 7 7 10 10
0.03ppm组 0 0 3 8 9 10 10
[0118] [表10]
[0119] 同时施予0.03ppm二氧化氯时,10LD50病毒暴露后第3天的肺组织中的总病毒量(TCID50值)
[0120]小鼠编号 51 52 53 54 55
0ppm 106.1 106.4 106.0 106.1 106.2
小鼠编号 56 57 58 59 510
0.03ppm 106.3 106.3 106.1 106.9 106.3
[0121] 由此清楚了,流感病毒以10LD50浓度存在时,同时施予0.03ppm的二氧化氯气体时,对于小鼠中的流感的抑制没有效果。
[0122] 因此确认了,作为同时施予二氧化氯气体时的流感发病抑制效果,病毒浓度为10LD50量时,二氧化氯气体的浓度至少在0.05ppm以上才有效。
[0123] 根据以上实验,空间中维持的二氧化氯气体浓度可以按例如以下方式设定。
[0124] 一般的像剧场这样的大型设施内的如流感等呼吸道病毒感染病发生时,极低浓度的病毒就成为问题。例如,像0.02LD50这样的浓度也会引发感染。
[0125] 此时空气中的病毒浓度为上述实验的约500分之一(10LD50/0.02LD50)。因此,为了预防流感病毒的感染所必需的二氧化氯浓度为0.0001ppm(0.05/500)。因此,设定成这种极低浓度的二氧化氯浓度时,可以预期使流感病毒失活,抑制感染的效果。
[0126] (延迟施予0.08ppm二氧化氯气体)
[0127] 然后,对10LD50浓度的病毒施予组,将施予0.08ppm二氧化氯气体的时机设为病毒暴露开始时起延迟5分钟、10分钟、15分钟,分别研究了二氧化氯气体的效果。而且此时,各种情况下二氧化氯气体的暴露时间为15分钟。
[0128] 本实验的目的在于,对于一旦到达肺并附着于其上进行增殖的病毒,确认延迟施予的二氧化氯气体是否能有效防止流感发病。也就是说,观察是否存在对于流感的“治疗”效果。结果示于表11和表12。
[0129] [表11]
[0130] 延迟施予0.08ppm二氧化氯气体时,10LD50病毒暴露后的死亡小鼠数(与各组10只相关的数据)
[0131]暴露后的天数 3 4 5 8 9 10 14
延迟5分钟施予组 0 0 3 7 7 10 10
延迟10分钟施予组 0 0 4 9 10 10 10
延迟15分钟施予组 0 2 6 10 10 10 10
[0132] [表12]
[0133] 延迟施予0.08ppm二氧化氯气体时,10LD50病毒暴露后第3天的肺组织中的总病毒量(TCID50值)
[0134]小鼠编号 61 62 63 64 65
延迟5分钟施予组 106.1 106.4 105.0 105.1 105.2
小鼠编号 71 72 73 74 75
延迟10分钟施予组 106.3 106.3 105.1 106.9 106.3
小鼠编号 81 82 83 84 85
延迟15分钟施予组 105.8 105.7 107.3 107.7 107.7
[0135] 总病毒量的定量结果是,尽管病毒暴露后经过15分钟后施予二氧化氯气体,病毒量也比预测量少。由此认为,通过延迟施予二氧化氯气体可以减轻流感的症状。
[0136] 该结果表明,即使流感病毒已附着于呼吸系统的组织中进行增殖时,也可以通过延迟的二氧化氯气体施予,来抑制流感症状。即,提示出二氧化氯气体可发挥对患流感动物的治疗效果的可能性。
[0137] (低浓度的二氧化氯产生的蛋白质变性实验)
[0138] 本实施方式中,基于小鼠的流感病毒感染实验说明了,例如,通过如0.05-0.1ppm这种极低浓度的二氧化氯气体,病毒可以失活,或丧失感染能力。
[0139] 这种二氧化氯的抗病毒效果,可以通过以下实验说明。
[0140] 该实验中,使低浓度的二氧化氯对作为酵母的酶的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(以下称为G6PD)反应,研究G6PD的酶活性如何变化。
[0141] 用PBS缓冲液(20mM磷酸钠缓冲液,pH7,130mM NaCl)使二氧化氯以0.1,1,10,100,1000μM(换算成ppm浓度时,为0.007,0.07,0.7,7,70ppm)的终浓度溶解(以下,称为二氧化氯溶液)。使G6PD以80μg/mL的终浓度溶解于各个二氧化氯溶液中。然后,于
25℃反应2分钟。
[0142] G6PD的酶活性通过以下方式测定:以NADP和葡萄糖-6-磷酸作为底物,用分光光度计观察NADPH的吸收。具体的反应条件按照制造者(Sigma公司)的指示。
[0143] 酶活性的测定结果示于图1。横轴的浓度按ppm换算表示。纵轴的“比活性”表示每1mg蛋白质的酶活性(unit/mg)。
[0144] 该结果是,二氧化氯浓度为0.07ppm时,与二氧化氯浓度为0ppm时相比,酶活性降低到6成左右(45/71)。
[0145] 因此,即使是0.07ppm左右的浓度极低的二氧化氯,也发现了抑制酶活性。由此提示,即使在本发明这样的极低浓度的二氧化氯的浓度范围,也起抑制酶活性的抗病毒效果。
[0146] (二氧化氯对流感病毒的有效性的确认实验)
[0147] 为了确认二氧化氯对流感的有效性,以下,对研究二氧化氯导致的存在于流感病毒表面蛋白质的变性效果的实验进行说明。
[0148] 流感病毒颗粒的表面存在两种蛋白质:血凝素(hemagglutinin,以下称为HA),和神经酸酶(neuraminidase,以下称为NA)。
[0149] HA是病毒感染的最初步骤,即病毒为了结合于宿主细胞表面所必需的蛋白质,其具有使病毒感染进展的作用。另一方面,NA具有切断宿主细胞中增殖的后代病毒和宿主细胞表面的结合,使病毒从宿主细胞表面游离的作用。因此,后代病毒容易扩散,可以使病毒感染扩大。
[0150] 因此,相反如果HA的功能缺损,则病毒就无法感染,或者,如果NA的功能缺损,则可以将通过感染而死亡的宿主细胞抑制到最小限度。因此认为,这两种蛋白质中的至少一个如果丧失功能,病毒的感染能力就降低。
[0151] 因此,使二氧化氯与流感病毒反应,研究这两种蛋白质的功能如何变化。
[0152] 如下进行实验,为了明确研究二氧化氯对这两种蛋白质的变性效果,设定成二氧化氯的浓度范围为2.7-21.4ppm。
[0153] 用PBS缓冲液使二氧化氯以40,80,160,240,320μM(换算成ppm浓度时,为2.7,5.4,10.7,16.1,21.4ppm)的终浓度溶解。使流感病毒以77μg/mL的终浓度溶解于各个二氧化氯溶液中。然后,于上反应2分钟。
[0154] 反应后,通过公知的血液凝集反应试样,测定HA的效价。测定结果示于表13中。
[0155] [表13]
[0156]反应的二氧
化氯浓度 0 2.7 5.4 10.7 16.1 21.4
(ppm)
HA效价 512 256 32 32 16 4
[0157] 而且,二氧化氯浓度在5.4ppm时,研究效价随反应时间的变化。测定结果示于表14。
[0158] [表14]
[0159]反应时间(秒) 0 5 10 20 30 40 60 120
HA效价 256 16 16 16 16 16 16 16
[0160] 由此提示,使二氧化氯与流感病毒反应时,HA立即变性,其功能失活。
[0161] NA的效价的测定结果示于表15。
[0162] [表15]
[0163]反应的二氧
化氯浓度 0 2.7 5.4 10.7 16.1 21.4
(ppm)
NA效价 39.8548 37.3824 32.7322 18.7712 10.4366 7.2408
标准差 0.698112 1.59382 1.095355 0.677734 0.265636 0.118774[0164] 由此提示,使二氧化氯与流感病毒反应时,NA立即变性,其功能失活。
[0165] 根据以上内容,发现二氧化氯使流感病毒的感染能力降低。
[0166] [其它实施方式]
[0167] 在上述实施方式中,以病毒存在的场所作为“空间”,可以列举例如剧场等人出入的场所。但是,并不限于这些场所,人出入的场所可以为泳池、浴场等液体环境中。
[0168] 而且,作为对象的生物,可以列举动物,但不限于此,具有被浮游病毒感染的可能性的植物也可作为对象。
[0169] 产业上利用的可能性
[0170] 本发明可以应用于浮游病毒的感染对策方法。
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