专利汇可以提供一种检测电离辐射剂量的生物学方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 属于 生物 检测技术领域,具体为一种检测 电离 辐射 剂量的生物学方法。根据 电离辐射 可以干扰细胞周期以及松胞素B可以阻滞细胞分裂而不阻滞细胞核分裂的原理,以不同剂量的r-射线对淋巴细胞照射后,加入一定量松胞素B处理,检测不同剂量照射后淋巴细胞的四核率和双核率。实验结果显示,在0—6.4cGy的低剂量范围内,受照淋巴细胞的四核率与受照剂量呈线性剂量-效应关系,相关系数为0.957,表现出辐射兴奋性效应;在0.4—20Gy的高剂量范围内,受照细胞的双核率与受照剂量之间呈指数方程剂量-效应关系,相关系数为0.978,能很好的反映辐射损伤效应。本发明方法检测指标直观、操作简单、快速、经济,检测结果准确。,下面是一种检测电离辐射剂量的生物学方法专利的具体信息内容。
1.一种检测电离辐射剂量的生物学方法,其特征在于具体步骤如下:
(1)、取辐射敏感性细胞株,分为低剂量和高剂量照射组,照射剂量小于10cGy的为低剂量照射组,照射剂量大于40cGy为高剂量照射组;
(2)、松胞素B处理:照射后,立即向细胞培养液内加入松胞素B,终浓度为2-6μg/ml,
37℃温箱继续培养24-36h;
(3)、低渗处理:细胞离心弃上清后,每管细胞加入5-10ml 0.075M KCl混匀,室温低渗
10-20min;
(4)、固定液固定:采用两步固定法,低渗后加入固定液,按质量比,固定液:低渗液=1:
5-8,滴管混匀后立即离心,弃上清每管加入5-8ml固定液固定20-30min;所述固定液为甲醇和冰醋酸混合溶液,按质量比为甲醇:冰醋酸=7-9:1;
(5)、双核和四核细胞的判断:除产生正常的双核细胞外,对于一大一小的两个细胞核,如果小核的大小超过细胞核的1/3,将此类细胞也记为双核细胞;对于四核细胞的判断标准为,所有大于3个核的细胞均记为四核细胞;每个样品,统计细胞数不少于1000;
(6)、通过统计细胞四核率,对低剂量辐射进行定量,通过统计细胞双核率,对高剂量辐射进行定量;双核率=双核细胞数/N,四核率=四核细胞数/N,N为统计细胞数,N不少于
1000。
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