一种牛膝多糖的提取与纯化方法
专利汇可以提供一种牛膝多糖的提取与纯化方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了 牛 膝多糖的提取与纯化方法，包括以下步骤：A1牛膝多糖的粗提；A2牛膝多糖的纯化：A21 DEAE-Sepharose fast-flow柱色谱：ABP粗品溶于10mmol/L 磷酸 盐 缓冲液，pH 6.8，使其浓度约为30％，每次上样量60L；DEAE-Sepharose fast-flow柱预先用上述缓冲液平衡，上样后，用同样缓冲液洗脱，流速约300ml/min，按旋光检测收集多糖组份，然后减压浓缩；A22 Sephadex G-150柱色谱：浓缩液上Sephadex G-150柱，用0.2mol/L NaCl洗脱，按旋光检测收集多糖组分；经中空 纤维 透析 器 对蒸馏 水 透析脱盐，减压浓缩， 冷冻干燥 ，得白色冻干粉ABP。采用本发明的方法提高了总多糖的含量及其纯度。，下面是一种牛膝多糖的提取与纯化方法专利的具体信息内容。
1.一种牛膝多糖的提取与纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
A1牛膝多糖的粗提：
将新鲜牛膝根晒至干皱，含水份＜7％，用粉碎机粉碎并过筛；称取约60目牛膝根粉，装入多功能提取罐，加工业乙醇，加热80℃回流4h；滤除乙醇，残渣减压蒸发至干，再装入提取罐；每次加蒸馏水，在100℃下搅拌提取3次，每次时间分别为5h、4h、3h；3次提取液合并，加热至沸，在搅拌下缓缓加入1％鞣酸溶液，待反应完全，继续煮沸15min，加入三次合并的提取液重量的2％活性炭，搅拌10min，抽滤除去沉淀及活性炭，得无色澄清滤液；滤液经中空纤维透析器对蒸馏水透析至无鞣酸为止；然后真空浓缩至约为三次合并的提取液原体积的1/10；浓缩液内加入3倍重量的80％乙醇，调PH至10，得白色沉淀；沉淀用80％乙醇洗涤几次，然后依次用90％、95％和无水乙醇脱水，60℃真空干燥，得粗品ABP；
A2牛膝多糖的纯化：
A21 DEAE-Sepharose fast-flow柱色谱：
ABP粗品溶于10mmol/L磷酸盐缓冲液，pH 6.8，使其浓度约为30％，每次上样量60L；
DEAE-Sepharose fast-flow柱预先用上述缓冲液平衡，上样后，用同样缓冲液洗脱，流速约
300ml/min，按旋光检测收集多糖组份，然后减压浓缩；
A22 Sephadex G-150柱色谱：
浓缩液上Sephadex G-150柱，用0.2mol/L NaCl洗脱，按旋光检测收集多糖组分；经中空纤维透析器对蒸馏水透析脱盐，减压浓缩，冷冻干燥，得白色冻干粉ABP。
一种牛膝多糖的提取与纯化方法
技术领域
背景技术
发明内容
具体实施方式
60℃真空干燥，得粗品ABP约48kg。
精确吸取标准溶液10，20，40，60，80，100μl，分别置于有塞的试管中，各加蒸馏水使体积为
1ml，再各加苯酚试液1.0ml，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0ml，摇匀后置沸水浴中加热15min，取出冷却至室温；另取蒸馏水1ml，加苯酚和硫酸，同上操作为空白对照。用721型分光光度计于490nm处测定吸收度，以吸收度(A)为横坐标，浓度(C)为纵坐标，绘制标准曲线(图
2
1)，得到回归方程：C＝138.07A-1.4216，R ＝0.9993。
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