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五味子药渣中活性成分多糖的制备方法

阅读:147发布:2023-02-19

专利汇可以提供五味子药渣中活性成分多糖的制备方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种中药提取方法,即五味子药渣中活性成分多糖的制备方法。它包括药渣的干燥;热 水 浸提得多糖提取液;多糖提取液浓缩、醇沉、离心得沉淀;沉淀用水溶解、冻融、离心取清液、 乙醇 分级、离心得沉淀;沉淀用水溶解,用链蛋白酶酶解、Sevag法脱蛋白得多糖液; 冷冻干燥 得产品。本发明提供了一条从五味子药渣中提取活性成分多糖的方法,特别是开辟了一条利用五味子药渣再利用的新途径,节约资源,避免污染,为五味子药渣的再利用提供技术 支撑 。,下面是五味子药渣中活性成分多糖的制备方法专利的具体信息内容。

1.五味子药渣中活性成分多糖的制备方法,其特征在于步骤如下:
(1)原料处理:将五味子药渣常温干燥或40~50℃烘干;
(2)多糖提取:按每公斤五味子药渣加10~30公斤,在60~100℃的温度下浸提
2~6小时;沉淀再用同样方法重复提取1~2次,合并提取液;
(3)醇沉:将提取液于50~60℃浓缩至原体积的1/6~1/5,之后冷却,加入2~3倍体积95%的乙醇,4℃醇沉过夜,离心,沉淀用无水乙醇和乙醚洗涤后干燥;
(4)冻融:将沉淀配成5%的糖液,过夜冻实,常温融化,当为水混合物时,离心,上清重复上述冷冻步骤2~5次;
(5)乙醇分级:在冻融后糖液内加乙醇至终浓度为30%,4℃沉淀2~3天,离心,沉淀干燥;上清加乙醇至终浓度为60%,4℃沉淀2~3天,离心,沉淀干燥;
(6)除蛋白:将沉淀配成5%的糖液,加入链蛋白酶,比例为蛋白∶蛋白酶=200∶1,
37℃酶解45~50小时脱蛋白,取出后浓缩至原体积,再用Sevag法脱蛋白3~6次后得到多糖溶液;
(7)干燥:将多糖溶液冷冻干燥过夜,得到五味子药渣多糖。
2.如权利要求1所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法,其特征在于乙醇分级加入乙醇时将乙醇放入分液漏斗,盛糖液器皿放于磁搅拌器上,使乙醇逐滴加入。
3.如权利要求1所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法,其特征在于五味子药渣为护肝片生产后剩余五味子残渣。
4.如权利要求1所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法,其特征在于所述的水为去离子水、蒸馏水、纯水或含矿物离子水。
5.如权利要求1所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法,其特征在于步骤(3)中离心转速3000r/min,时间10min。
6.如权利要求1所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法,其特征在于步骤(4)中离心转速7000r/min,温度4℃,时间10min。
7.如权利要求1-6任一所述的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法,其特征在于:
(1)原料处理:将五味子药渣常温干燥或45℃烘干;
(2)多糖提取:按每公斤五味子药渣加水30公斤,在100℃的温度下浸提2小时;沉淀再用同样方法重复提取2次,合并提取液;
(3)醇沉:将提取液于60℃浓缩至原体积的1/6,之后冷却,加入3倍体积95%的乙醇,
4℃醇沉过夜,离心,沉淀用无水乙醇和乙醚洗涤后干燥;
(4)冻融:将沉淀配成5%的糖液,过夜冻实,常温融化,当为冰水混合物时,离心,上清重复上述冷冻步骤4次;
(5)乙醇分级:在冻融后糖液内加乙醇至终浓度为30%,4℃沉淀3天,离心,沉淀干燥;
上清加乙醇至终浓度为60%,4℃沉淀2~3天,离心,沉淀干燥;
(6)除蛋白:将沉淀配成5%的糖液,加入链蛋白酶,比例为蛋白∶蛋白酶=200∶1,
37℃酶解48小时脱蛋白,取出后浓缩至原体积,再用Sevag法脱蛋白5次后得到多糖溶液;
(7)干燥:将多糖溶液冷冻干燥过夜,得到五味子药渣多糖。

说明书全文

五味子药渣中活性成分多糖的制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种中药提取方法,即五味子药渣中活性成分多糖的制备方法。

背景技术

[0002] 在现有技术中,随着制药工业的进步,中草药有效成分提取工艺的发展,产生了很多中药药渣。中药渣多被作为燃料焚烧或当作垃圾废弃,这不仅是对资源的极大浪费,同时也对环境造成污染,特别是提取过程中多以乙醇作为溶剂,或者因为入药需求的原因,仅提取了中药的某一成分,剩余物中还有大量的活性成分没有被充分提取出来,残留在药渣中,其仍然具有药用和营养价值。五味子药渣就是其中的一种。五味子,俗称山花椒,为木兰科植物五味子(FructusSchisandraeChinensis)的果实。具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功效。目前的研究发现北五味子多糖具有保肝、抗疲劳、免疫促进、抗化及抗衰老和抗肿瘤的药理作用。制药企业在提取五味子有效成分的过程中大多采用乙醇回流的方式,将五味子中的脂溶性成分提取利用,而溶性多糖大多残留于药渣中被废弃。

发明内容

[0003] 本发明的目的是提供一种以五味子药渣为原料,工艺合理,提取率高的五味子药渣中活性成分多糖的制备方法。
[0004] 本发明的技术解决方案是:五味子药渣中活性成分多糖的制备方法,步骤如下:
[0005] (1)原料处理:将五味子药渣常温干燥或40~50℃烘干。
[0006] (2)多糖提取:按每公斤五味子药渣加水10~30公斤,在60~100℃的温度下浸提2~6小时;沉淀再用同样方法重复提取1~2次,合并提取液;
[0007] (3)醇沉:将提取液于60℃浓缩至原体积的1/6~1/5,之后冷却,加入3倍体积95%的乙醇,4℃醇沉过夜,离心,沉淀用无水乙醇和乙醚洗涤后干燥。
[0008] (4)冻融:将沉淀配成5%的糖液,过夜冻实,常温融化,当为水混合物时,离心,上清重复上述冷冻步骤2~5次;冻融可以除去多糖中的杂质。
[0009] (5)乙醇分级:在冻融后糖液内加乙醇至终浓度为30%,4℃沉淀2~3天,离心,沉淀干燥;上清加乙醇至终浓度为60%,4℃沉淀2~3天,离心,沉淀干燥;
[0010] (6)除蛋白:将沉淀配成5%的糖液,加入链蛋白酶,比例为蛋白∶蛋白酶=200∶1,37℃酶解45~50小时脱蛋白,取出后浓缩至原体积,再用Sevag法(氯仿∶正丁醇=4∶1)脱蛋白3~6次后得到多糖溶液;
[0011] (7)干燥:将多糖溶液冷冻干燥过夜,得到五味子药渣多糖。经红外光谱分析,其具有多糖的特征性吸收峰。
[0012] 五味子药渣中活性成分多糖的制备方法,步骤如下:
[0013] (1)原料处理:将五味子药渣常温干燥或45℃烘干;
[0014] (2)多糖提取:按每公斤五味子药渣加水30公斤,在100℃的温度下浸提2小时;沉淀再用同样方法重复提取2次,合并提取液;
[0015] (3)醇沉:将提取液于60℃浓缩至原体积的1/6,之后冷却,加入3倍体积95%的乙醇,4℃醇沉过夜,离心,沉淀用无水乙醇和乙醚洗涤后干燥;
[0016] (4)冻融:将沉淀配成5%的糖液,过夜冻实,常温融化,当为冰水混合物时,离心,上清重复上述冷冻步骤4次;
[0017] (5)乙醇分级:在冻融后糖液内加乙醇至终浓度为30%,4℃沉淀3天,离心,沉淀干燥;上清加乙醇至终浓度为60%,4℃沉淀2~3天,离心,沉淀干燥;
[0018] (6)除蛋白:将沉淀配成5%的糖液,加入链蛋白酶,比例为蛋白∶蛋白酶=200∶1,37℃酶解48小时脱蛋白,取出后浓缩至原体积,再用Sevag法脱蛋白5次后得到多糖溶液;
[0019] (7)干燥:将多糖溶液冷冻干燥过夜,得到五味子药渣多糖。
[0020] 所述乙醇分级加入乙醇时将乙醇放入分液漏斗,盛糖液器皿放于磁搅拌器上,使乙醇逐滴加入。
[0021] 五味子药渣为护肝片生产后剩余五味子残渣。
[0022] 所述的水为去离子水、蒸馏水、纯水或含矿物离子水。
[0023] 步骤(3)中离心转速3000r/min,时间10min。
[0024] 步骤(4)中离心转速7000r/min,温度4℃,时间10min。
[0025] 本发明的优点是:1、工艺合理,注重合理利用原料,将制药企业的废料五味子药渣充分利用,既避免了浪费又有利于环境保护。2、本发明在提取的过程中,利用的最佳的提取工艺,大大的提高了提取率。3、本发明在乙醇分级过程中,采用边搅拌边滴加乙醇的方法,比普通的醇沉效果好,提高多糖的得率。4、本发明利用了链蛋白酶和Sevag法联合脱蛋白,脱除次数少,操作过程简化。
[0026] 下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。

具体实施方式

[0027] 实施例1
[0028] 五味子药渣中活性成分多糖的制备方法,步骤如下:
[0029] 1、原料处理:五味子药渣常温干燥。
[0030] 2、多糖提取:五味子药渣100克加水3000ml,在100℃的温度下浸提2小时。将提取液于60℃浓缩至500ml,后冷却,加入1500ml 95%的乙醇,4℃醇沉过夜,3000r/min离心10min,沉淀用无水乙醇和乙醚洗涤后干燥。
[0031] 3、冻融:将沉淀配成5%的糖液,于冰箱中过夜冻实,常温融化,当为冰水混合物时,7000r/min、4℃离心10min,上清重复上述冷冻步骤4次
[0032] 4、乙醇分级:在冻融后糖液内加乙醇至终浓度为30%,加入乙醇时将乙醇放入分液漏斗,盛糖液器皿放于磁力搅拌器上,使乙醇逐滴加入。后4℃沉淀2天,离心,沉淀用乙醇、乙醚洗涤2次,放入干燥器中干燥;上清加乙醇(方法同上)至终浓度为60%,4℃沉淀2天,离心,沉淀干燥。
[0033] 5、除蛋白:将沉淀配成5%的糖液,加入链蛋白酶(蛋白∶酶=200∶1),滴加2滴二甲苯防腐,密封,37℃酶解48小时脱蛋白(中途换生理盐水),取出后浓缩至原体积,按糖液1/4加入Sevag试剂充分震荡1.5小时,离心取上清,重复3次,即得多糖溶液。
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