本发明涉及带有侧链的三尖杉烷(cephalotaxane)衍生物的制备 方法。

术语“三尖杉烷”是指具有下式基本骨架的化合物或其盐 其中p等于1或2(可以是通过单键或氧原子相连的两个相同或不同的 单元)，它可含有各种氧合取代基(脂族或芳族醚、游离的或酯化的醇、 取代的或游离的烯醇和/或酚、桥连的醚，在这类化合物上更经常地带 有天然状态存在的任何取代基)。

三尖杉酯碱是生物碱，在抗癌化疗，尤其在对现有疗法具有多药 抗性的某些血性肉瘤疗法中，它们特别有意义。基于新的与蛋白合成 有关的作用机理的三尖杉酯碱的选择性是该系列化合物在抗癌治疗中 的一大优点。

某些文献汇编似乎详尽地综述了所有有关三尖杉烷的知识，这些 汇编按年代排列有：[C.R Smith,Jr,R.G.Powell和K.L. Mikolajczack,Cancer Treat.Rep.,Vol.60,1157(1976)；C.R. Smith,Jr,L.Kenneth,K.L.Mikolajczack和R.G.Powell在“基 于天然产物抗癌剂模型(Anticancer Agent Based on Natural Product Model)”,391(1980)；Liang Huang和Zhi Xue,“生物碱(The alkaloids)”,Vol XXⅢ(A.Brossi编),157(1984)；M.Suffness 和G.A.Cordell，“生物碱，化学和药理学(The alkaloids,Chemistry and Pharmacology)”(Z.Brossi编),Vol.25,57-69,295-298(1987)； P.J.O’Dwyer,S.A.King,D.F.Hoth,M.Suffness和B. Leyland-Jones,"临床肿瘤学杂志(Journal of Clinical Oncology)", 1563(1986)；T.Hudicky,L.D.Kwart和J.W.Reed,“生物碱：化 学和生物学透视(Alkaloid:Chemical and Biological Perspectives)”(S.W.Pelletier编),Vol.5,639(1987)；M.A.Miah, T.Hudlicky和J.Reed,"生物碱(The Alkaloids)",Vol.51, 199(1988)]。

人们已经知道了三尖杉烷的抗寄生虫活性，尤其是抗疟疾血原虫 的活性[J.M.Whaun和N.D.Brown,Ann.Trop.Med.Par.,Vol.84, 229(1990)]。

该系列中最具活性的成员高三尖杉酯碱(HHT)在每24小时的日 剂量为2.5mg/m2体表面积或2.5mg/m2体表面积以上时具有活性，即， 原则上，该剂量较紫杉酚低20倍。HHT已进行了十四次Ⅰ期和Ⅱ期 临床试验，它是唯一已知能够重新诱导对α-干扰素耐药的慢性骨髓性 白血病患者的全血液学指标降低70％的产品[S.O’Brien,H. Kantarjian,M.Keating,M.Beran,B Koler,L.E.Robertson,J. Hester,M.Rios,M.Andreeff和M.Talpaz,Blood,332(1995)； Leukemia Insights,Vol.3,No.1(1998)]。 早在35年前，就从称为日本粗榧(Cephalotaxus Harringtonia) 的唯一的亚洲粗榧(Asiatic Cephalotaxacea)中提取出三尖杉酯碱， 接下来国立癌症研究所(the National Cancer Institute)对植物 界发起了新抗癌药物的研究。事实上，粗榧属生物碱主要(至少50％) 由三尖杉碱组成，三尖杉碱是三尖杉酯碱的生物合成前体，后者本身 仅占总生物碱的一小部分。

除了它们天然以低浓度存在于植物原料中以外，三尖杉酯碱还与 许多化学结构非常相似的同类物质相混合。因此，以高分辨率高压液 相(HPLC)色谱分离半纯化的生物碱提取物，要分离不少于数十种的 三尖杉碱酯。

我们考虑到：

-一方面，三尖杉酯碱相对通常不形成晶体，认为这是由于它们 侧链的柔性所致，它们的侧链通常是支链的和脂族的，

-另一方面，这些酯，尤其是三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱与本身 具有生物活性的同类物质相混，即使通过高分辨率的HPLC，也很难分 离出来，

本领域目前的状况无法以工业规模生产药物活性成分所需纯度的 这些化合物。

虽然在生物合成上类似于刺桐属生物碱，但三尖杉烷是自然界具 有独特结构的生物碱，它们仅存在于粗榧属中，而粗榧属是粗榧科中 的唯一属。另一方面，各种三尖杉酯碱同类物的侧链都由(2R)柠苹 酸3a(参见附图表1)的伯羧基的半甲酯，通过用自身未取代或被叔羟 基取代的烷基或芳烷基取代叔甲基衍生，而后，后者可与叔醇形成环 醚(脱水衍生物)。

附图表1表示三尖杉酯碱同类物的主要实例，它们不同程度地具 有明显的细胞抑制活性。迄今为止，文献中人工合成的三尖杉碱酯类 似物还没有一种具有3b亚结构(见表1)，并且也都不具有明显的细 胞抑制活性。

值得指出的是，虽然植物学上与粗榧科非常类似，紫杉科含有三 萜烯生物碱(紫杉醇)(伴有非生物碱类的三萜烯)、紫杉烷，它们 也具有天然独特的结构。虽然三尖杉酯碱在化学结构和抗癌活性的机 理上与紫杉烷完全不同，但它们在不止一个方面与紫杉烷具有类似 性：

-它们具有细胞抑制特性，

-它们由全结构的一个没有活性的生物合成前体的多环骨架构 成，该骨架上接有包含相似亲水性和疏水性取代基结合的侧链，

-紫杉烷的多环部分(广义上是浆果赤霉素)和三尖杉酯碱的多 环部分(三尖杉碱)相对地富集在植物的可再生部位，但活性分子(三 尖杉酯碱和紫杉烷)在这些部位的浓度要低十至一百倍，

-紫杉李(粗榧属)是一种稀有树种，甚至比短叶红豆杉(紫杉 属)还稀有，其存在的普遍性较后者低得多。

由上述事实可以看出，在半合成紫杉烷之后，在提取来源的10- 脱乙酰浆果赤霉素Ⅲ上加上侧链，通过酯化天然来源的三尖杉碱非 对称地半合成三尖杉酯碱具有医学价值和经济价值。并且，目前粗榧 属植物的数量相对减少了，甚至在它们的原始生长地。上个世纪，日 本粗榧(Cephalotaxus harringtonia)作为观赏植物进口欧洲期间， 它就不再自生于中国东部和日本北部了。使用该树的可再生部位(叶) 中存在的前体来半合成高三尖杉酯碱被认为是对环境有益的，并且还 由于尽管在该方面进行了广泛的合成研究，但迄今为止还未全合成出 光学活性的三尖杉碱的原因，因此所述半合成更具意义(已有一些包 括10-15步的外消旋三尖杉碱的艰苦合成方法，参见上面综述的书 目)。

据认为，每年需要数百吨这种稀有并且生长非常缓慢(甚至比紫 杉属种类的生长还慢)的树以满足目前对高三尖杉酯碱(每年数公斤) 的市场需求，但半合成将仅消耗数吨树的可再生部分(叶)。再者， 目前原料药市场上可得到的天然来源的高三尖杉酯碱(HHT)混有其同 类物，这些同类物由于它们的结构类似性而非常难于分离，即使采用 “制备性”高压液相色谱也很难分离。

首先，应指出的是由于使用三尖杉碱本身作为半合成的原料还未 被证明是经济的，迄今为止也没有关于选择性提取该物质的方法的描 述。并且，这些活性化合物中，仅有三尖杉酯碱和异三尖杉酯碱是采 用提取制备它们的美国专利申请的主题[R.G.Powell等,US 3793454 和US 3870727]。三尖杉酯碱是日本专利[JP 58-032880]的主题，脱 氧三尖杉酯碱是美国专利US 3959312的主题。高三尖杉酯碱本身的制 备方法仅是几项半合成研究的主题[T.Hudlick,L.D.Kwart和J.W. Reed在“生物碱：化学和生物学透视”(S.W.Pelletier编)]，Vol. 5,639(1987)；M.A.Miah,T.Hudlicky和J.Reed在“生物碱”，Vol. 51,199(1998)]，但还没有一个专利申请是关于半合成方法或是提取 方法的。

使本发明具有更大优点的另一方面是三尖杉碱可用作类三尖杉碱 和类三尖杉酯碱的合成原料，这些产物可用于抗肿瘤(恶性和非恶性 肿瘤)、抗寄生虫、抗真菌、抗病毒和抗菌化疗。

三尖杉酯碱类包括一个复杂的生物碱多环醇(三尖杉碱)，用侧 链酯化后，分离物的生物活性低于三尖杉碱，但该酯化侧链对于整个 分子的生物活性是必需的。在剧烈条件下皂化该侧链得到三尖杉碱游 离碱和三尖杉酯碱酸(三尖杉酯碱酸)。侧链的连接在生物合成的最 后进行。据证明，在环境影响或施加于植物的生理压力下，在体内引 发导致该反应的分解代谢。

三尖杉碱，包括5个稠合环的多环部分，具有天然独特的新颖排 列，即苯并二氧杂吖庚因上稠合一个螺吡咯烷并戊烯二醇系统。三尖 杉烷含有四个不对称中心：三个“不对称碳原子”和一个杂环叔胺氮 原子。唯一的反应性官能团是位于3位的仲醇，2位的甲基烯醇醚对 质子进攻具有潜在的敏感性。该整个结构形成一个假螺旋状结构，将 羟基禁闭在四氢吖庚因形成的管状结构中。三尖杉碱很容易形成高结 晶性的稳定盐(例如盐酸盐和全盐酸盐)。

该生物碱对碱性介质的敏感性相对较差。另一方面，有数位学者 描述了这些生物碱在一定程度上对酸和与碘甲烷形成季铵化氮具有敏 感性，通过同时转化3个不对称中心和氮原子可导致外消旋化[D.J. Abraham,R.D.Rosensten和E.L.McGandy，四面体通讯(Tetrahedron Letters),4085(1969)]。但是，在20℃下在pH1-4的溶液中经过 数天，将导致该结构失去完整性(个人观察)。

该化合物和其3位非0-乙酰化的同类物是没有生物活性的。

有明显生物活性的三尖杉酯碱的所有侧链都包含2-烷基-2-甲酯 基甲基-2-羟基乙酰基单元。长度可变的烷基侧链在其末端或带有含叔 醇的异丙基分支结构(三尖杉酯碱HT和高三尖杉酯碱HHT)或不带叔 醇的异丙基分支结构(去氧高三尖杉酯碱DHT)，或者带有苯基(例 如最近刚分离的新三尖杉酯碱)。在脱水三尖杉酯碱的情况下，该侧 链可通过在其两个叔醇间脱水闭合，例如形成取代的四氢吡喃环。该 复杂二酯的叔羧基是由三尖杉碱的单羟基带来的。该侧链上唯一的手 性中心位于酯连接处。除第一、第二侧链外，它所含羟基由于是叔羟 基，没有差向异构化的可能性。

附表2表示制备三尖杉酯碱的已知合成方法。

此前，已有人描述过数种半合成的天然三尖杉碱酯和一些类似 物，它们具有简单的侧链，但这些类似物，尤其是去氧三尖杉酯碱或 异三尖杉酯碱的类似物的细胞毒性活性却降低了。与HT和HHT的组成 相比，它们大多涉及较简单和较少功能化的酯，然而这些酯对于化疗 是最有用的[例如，去氧三尖杉酯碱，异三尖杉酯碱，T.Hudlicyk,L.D. Kwart和J.W.Reed在“生物碱：化学和生物学透视”(S.W.Pelletier 编)，Vol.5,639(1987)]。

1972年至今的所有文献[Mikolajczack等，四面体，1995(1972)； T.Hudlicky,L.D.Kwart和J.W.Reed“生物碱：化学和生物学透 视”(S.W.Pelletier编)，Vol.5,639(1987)；M.A.Miah,T. Hudlicky和J.Reed“生物碱”，Vol.51,p236(1998)]都提及了至 今还不可能用三尖杉酯碱酸3e烷酰基侧链的叔羧基酯化三尖杉烷2a 的高度立体位阻的仲羟基得到三尖杉酯碱4b，即2a+3e的转化(4b 如下反应路线中所示)

迄今为止描述的大多数合成方法都包括第二侧链-CH2CO2Me的连 接，即：

第一，在锌的存在下，通过溴乙酸甲酯和准备连接到三尖杉碱上 的侧链上的羰基(真的和潜在的)之间的Reformatsky反应，或者

第二，预先形成有机锂试剂。

这些描述的所有合成方法都包括用没有末端羟基并且没有位于叔 羧基(位的第二侧链也不具有该羧基(位的叔羟基的(-酮基链烷酰氯 7酯化三尖杉碱，得到8，然后将8转化为三尖杉酯碱4a，如下面的 反应式所述。 在式8中，CTX-表示下式的三尖杉碱基(cephalotaxyl)基团：

应该指出的是该(-羟烷基化同时在侧链上产生手性中性，但从未 获得不对称反应。

少数合成路线包括用取代的半琥珀酰氯酯化三尖杉碱，之后可任 选地引入一个或多个叔羟基。

迄今为止使用预先合成好的和功能化的手性链前体(叔羧基 (位)，还未得到过O-酰化的三尖杉碱[T.Hudlicky,L.D.Kwart和 J.W.Reed在“生物碱：化学和生物学透视”(S.W.Pelletier Ed.)], Vol.5,661-675(1987)；M.A.Miah,T.Hudlicky和J.Reed在“生 物碱”，Vol.51,224-236(1998)]。

所以，迄今的现有技术中描述的通过半合成制备三尖杉酯碱的方 法具有下列缺点：

-缺乏立体选择性，

-收敛性差，

-收率低，

-在稀有和昂贵的底物上进行功能化和构建侧链，

-至今未得到手性高三尖杉酯碱。

由于三尖杉碱是以部分外消旋的形式天然存在的[个人观察； Huang等，Scientia Sinica,Vol.XXⅢ,835(1980)]，使用天然三 尖杉碱作为原料的现有技术方法仅在理论上可以得到部分外消旋化的 三尖杉酯碱。因此，本发明具有甚至由外消旋的三尖杉碱也可获得对 映体纯的三尖杉酯碱的优点，因为：

第一，侧链上的不对称中心在酯化步骤之前就产生了，即在连接 前，侧链前体可以对映体纯形式获得，

第二，在外消旋三尖杉碱情况下获得的非对映异构体可通过色谱 分离。

本发明包括：

-使用适宜取代的叔羧基型氧杂环烷酸酯化三尖杉碱的具有位阻 的游离醇或者相应的金属醇盐，所述氧杂环烷酸的骨架和功能化是预 先合成好的，以通过半合成制备脱水高三尖杉酯碱酸。

-打开如此形成的环状侧链，以获得相应的二醇，即三尖杉酯碱 (上面定义的)。

-描述一种新的制备方法，用于制备三尖杉酯碱的脱水环形二羟 基化侧链(脱水三尖杉酯碱酸)的所有非对映异构体，或其中的两个 羟基通过二官能团保护基形成环一起被保护。

-拆分所有的三尖杉酯碱酸和脱水三尖杉酯碱酸，以使它们分别 与三尖杉碱偶联。

因此，本发明一方面包括合成，尤其是脱水三尖杉酯碱、三尖杉 酯碱、脱水高三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱。

本发明还涉及用N-烷基-和N-氨基甲酰基-2-烷基异丝氨酸酯化三 尖杉碱或其金属醇盐。

对紫杉烷进行了观察和比较研究后，发现尽管对于三尖杉碱的羟 基的立体位阻更大，但位于紫杉烷13位的羟基仍能被体积相对较大的 侧链，例如2’位被保护的N-苯甲酰苯乙异丝氨酸酰化(虽试图用带被 苯甲酰基保护的(位羟基的链对被保护的浆果赤霉素进行酰化都失败 了)。

用体积很大的链，例如新戊酸进行酰化的实验研究表明通过二烷 基碳二亚胺方法对被保护的浆果赤霉素的13位羟基进行酰化是不可 能的，但当对三尖杉碱进行该相同反应时，则表现出易于偶联新戊酰 链。

研究还表明，在紫杉烷系列化合物中，通过二官能团的环状保护 改善链烷酰或芳链烷酰的动态压缩性，大大有助于偶联。因此，例如 法国专利申请[J.P.Robing等，FR 95/12739和FR 95/15557]表明与 适宜保护的线性N-苯甲酰苯基异丝氨酸在80℃反应数小时，形成差向 异构化产物，但与噁唑啉或噁唑烷环状前体的反应则只需在25℃进行 不足一小时。

使用与上面相同的条件，用预先进行了脱水环合的链，在室温下 数小时就可对三尖杉碱或其醇盐进行酰化。

该酰化反应的容易性特别出人意料，因为基于无法进行酰化的研 究(解释为两个位置的立体位阻：三尖杉碱的羟基和侧链前体的叔羧 基)，许多著者设计了具有上述缺点的合成路线[Mikolajczack等，四 面体，1995(1972)]。

根据本发明的优选方案或方法，用2-羧基-2-烷基-1-氧杂环烷衍 生物酯化三尖杉碱的羟基。

按照下面的反应，使用相应于通式3k类型的取代环醚的叔羧酸官 能团，或者，优选使用其相应于通式31的活化形式(就地分离或形成 的)，酯化骨架相应于通式1的三尖杉烷的羟基，尤其是分别相应于 通式CTX-O-H和CTX-O-M(M是金属并且CTX是上面定义的三尖杉碱 基)的三尖杉碱或其金属醇盐3位的仲醇羟基，得到4c： R5、R6和R8彼此独立地是 -氢， -直链或支链的和/或环状的、饱和的、不饱和的或芳族的烃基，尤其 是烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂环烷基，所述烃 基带或不带一个或多个杂原子，R5和R8还可连在一起形成一个环， -带有上述基团之一的氧合醚。 n是0-8。 A是能够离开后形成碳阳离子的离去基团，因此31尤其可以是：酰卤、 酸酐、混合羧酸或环状酸酐(当R5=-CH2CO-)。

3k类的游离酸或31类的酸的活化形式可用于酯化相应于通式1 的三尖杉烷，例如CTX-OH类的三尖杉碱。或者，31的酸酐可单独制 备并分离，然后与醇混合。对于3p类的环状酸酐也是同样 其中，n、R6和R8具有如上相同含义， 该类环状酸酐可容易地从相应的二酸制备，为了通过甲醇的酯化再得 到3k或如上连接到式2的三尖杉碱的醇功能基上(收率低于上面的方 法)，然后在质子酸或路易斯酸的存在下用甲醇或者用三氟化硼乙醚化 物/甲醇复合物或叠氮甲烷常规地将伯酸功能基甲基化。

虽然效率低且更费力，但使用酰氯3k的方法还是得到了所需的酯4c。

式3K、31和2的所有试剂以及所得的4c酯可以以对映体纯形式 单独使用，或者以外消旋混合物形式使用，或者以非对映异构体混合 物形式使用。在某些情况下，中间体可不分离或就地快速形成。

反应可在0-140℃之间进行，可用或不用有机溶剂，这些溶剂可 以单独使用一种或使用溶剂的混合物。

使用2-羧基-2-烷基-1-氧杂环烷衍生物酯化三尖杉烷的反应可通 过酰基转移到醇上或通过碳化二亚胺方法进行。

通过酰基转移到醇上的酯化反应有益的是按照六种模式进行： (a)用酸催化，用醇酯化游离酸， (b)通过酸酐或酰卤经酰基转移酯化， (c)用活化酯通过酰基转移酯化， (d)用三氟甲磺酸钪酯化， (e)用三氟化硼乙醚化物酯化， (f)通过硫代酯方法酯化。

酯化反应(a)在酸催化剂的存在下，通过将式3k的酸和式2的醇 放入共溶剂中接触进行。通过加入脱水剂或共沸夹带或通过分配到两 种不相混溶的溶剂中(其中一种与形成的酯相混溶，另一种与水相混 溶)促进平衡的移动。这些不同的方法可结合使用。

酸催化剂可以是质子酸，例如硫酸、盐酸、硼酸，优选是对甲苯 磺酸，或者路易斯酸(可以有或没有聚合物支持物)，例如氯化铝、氯 三甲基甲硅烷或优选三氟化硼乙醚化物。有益的是，也可使用，例如 离子交换树脂或石墨上的硫酸氢盐。

脱水制可包括，例如是含水少并且对反应物惰性的无机盐，如硫 酸镁、硫酸钠、氯化钙或优选分子筛。

酯化反应(a)使用如上的反应条件。但是，为了形成该方法的酰基 离子特性，用例如无水硫酸或过酸，如氢氟酸和其衍生物或五氟化锑 代替普通的酸催化剂。

酯化反应(b)包括使用与上面相同的物理条件，不同的是使用31， 其中A表示卤素(酰氯)、另一种相同(酸酐)或不同(混合酸酐)的链烷 酰分子，例如三氟乙酰基、2,4,6-三氯苯甲酰基、甲酰基、甲氧基甲 酰基、磺酸、磷酸或氯代磷酸。

在上述方法的一种方案中，在其中R5=CH2CO2H的具体情况下，可 使用式3p的环状酸酐 其中，n、R6和R8具有如上相同含义， 该化合物可，例如在用于制备混合酸酐的下述常规条件下，非常简单 地通过用乙酸酐处理相应的二酸来制备。

催化可以是如上面方法所示的酸催化，或者优选，是碱催化，例 如用叔碱，如吡啶和/或二甲氨基吡啶(DMAP)、吡咯烷并吡啶(PPY)、 三乙胺或强碱如氢化物(如，氢化钙)。溶剂优选是非质子溶剂，例如 己烷、甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃和/或吡啶。

酯化反应(c)是一种类似于酯化反应(b)的方法。可有利地使用这 些酯的制备方法，这些方法涉及例如，1-酰氧基-1,2,3-三唑、甲脒、 甲硅烷基酯或2-酰氧基吡啶中间体。

也可使用羰基二咪唑方法，其中涉及N-酰基咪唑中间体。

碳二亚胺方法使用脱水偶联剂，例如碳二亚胺，例如二环己基碳 二亚胺(DCC)、1,3-二异丙基碳二亚胺(DIC)或1-(3-二甲氨基丙 基)-3-乙基碳二亚胺。

该反应可用叔碱催化，叔碱是如吡啶和/或二甲氨基吡啶(DMAP)、 吡咯烷并吡啶(PPY)、三乙胺、4-吗啉代吡啶或任何其它的取代碱。 也可使用，例如N-羟基苯并三唑(HOBt)或N-羟基琥珀酰亚胺(HO- Su)。

31与2的摩尔比可以在1/1～4/1之间。

该反应优选在惰性气氛下在接近大气压的条件下进行，优选在0 ℃～110℃的温度下进行。

优选使用的溶剂是有机溶剂，例如甲苯和/或二氯甲烷和/或氯仿 和/或四氢呋喃和/或吡啶和/或二甲基甲酰胺。

上述方法应用于取代的氧杂环烷羧酸的合成前体的偶联，即(线 性)1-羟基-1-甲氧羰基甲基链烷羧酸进行偶联，可由式3f的乙烯叔 (-羟基酸一步合成式4c的酯(代替3f(3k(31(4c的顺序)。 其中m是0-3， 式4c中，n、R5、R6、R8和CTX-具有如上相同的含义。

的确，在类似于上面的条件下处理乙烯叔(-羟基酸3f，无需分离 中间体直接得到式4c的三尖杉碱环酯。在涉及混合酸酐31的方法下， 由于在1840cm-1处存在红外吸收，因此推定是就地形成了相应的(- 内酯。

仅在上面描述的活化条件下使用3f，即，例如在2,4,6-三氯苯甲 酰基或者例如在上述所谓的DCC方法下形成混合酸酐，由于形成并分 离出了31，因而证实了这些假定。

式3k的取代的环醚羧酸、式3f的乙烯(-叔羟基酸、它们的活化 中间体和式3p的环状酸酐可与三尖杉碱(外消旋形式或更优选是旋光 活性形式的)偶联。

在上述任一种外消旋形式的酸与一种三尖杉碱对映体单体偶联的 情况下，由于手性和反应位点的较大立体位阻，因此存在立体选择性 (在这个意义上，两种非对映异构体间的比例通常不是1)。

形成的式4c(R5=CH2CO2Me)的两种非对映异构体(已知称为“脱 水三尖杉酯碱”) 其中n、R6、R8和CTX-具有如上的相同含义， 的分离可通过所谓正常相(例如，以天然硅胶为固定相，混合有机溶 剂为流动相)或优选反相(例如接枝有极性基团，如有机硅烷基、氰 基烷基、苯基烷基，优选十八烷基烷基甲硅烷链的惰性二氧化硅为固 定相，混合水性溶剂作为流动相)的制备性色谱进行。

在镜像特异性偶联的情况下，异构对原料部分未观察到丝毫的差 向异构化，获得的唯一非对映异构体可进行结晶。当该非对映异构体 不是结晶时，通过快速色谱纯化以除去残留的试剂，然后通过加入非 溶剂进行沉淀，以分离无定形粉末。

以下反应路线表示打开式4c的三尖杉碱羧酸酯环醚得到卤代醇 4d。 在这些式中，n、R5、R6、R8和CTX-具有如上相同的含义，X为杂原子， 如卤素。

在某些实例中，式4c的环醚有同时含有甲基烯醇醚的特性，例如 在三尖杉碱的2位。尽管真正的环醚(即，非半缩醛醚)通常是惰性 的，但将4c的有机溶剂溶液在控制条件下，即，在低温下与例如稀盐 酸，优选氢溴酸的乙酸溶液，或者在低温下与卤代三烷基甲硅烷或三 卤化硼，例如三溴化硼，在有机溶剂，优选氯代溶剂，例如二氯甲烷、 二氯乙烷或氯仿中进行接触，可使其选择性地开环，可定量地得到式 4d的卤代醇(其中X=卤素)，即使是在带有一个或多个烯醇醚或其它 对醚-裂解反应敏感的功能基的三尖杉碱的情况下，也没有任何可检测 的O-去甲基化产物形成。在所有情况下，在偶然脱甲基化的情况下， 烯醇可容易地选择性再甲基化(如文献记载的那样)(例如通过在对甲 苯磺酸的存在下，将烯醇溶于甲醇)。

其中X=卤素的式4d的卤代醇作为必然得到杂原子类似物的底物 是很有用的，这是由于它们带有的卤素取代基具有非常良好的反应 性。

另一种变化的方法包括将式4c产物与水性酸(任选地在相混溶或 不相混溶的共溶剂中)接触。该酸可以是，例如质子酸，在此为有机 或无机酸，优选是盐酸、四氟硼酸或甲酸。在此，式4b的二醇可直接 被分离，而无需通过上述的卤代醇步骤。

式4d的卤代醇(其中X=卤素)按照下面的反应式水解： 其中，n、R6、R8、R5、X和CTX-具有如上相同含义。

式4d的卤代醇尤其适于通过在0-30℃下，与水性无机碱，例如 稀氢氧化钠、碳酸钠或优选碳酸钡搅拌进行控制水解，得到式4b的二 醇。

一种变化的方法包括在反应结束时，就地水解中间体式4d的卤代 醇，优选通过在二氯甲烷中在氢溴酸的乙酸溶液的存在下处理式4c的 环醚，和在冷却和剧烈搅拌下将水或水解溶液直接加到反应介质中进 行。

本发明的方法特别适于制备氮杂三尖杉酯碱、三尖杉酯碱的含氮 类似物。

为证明，例如使用式4c的卤代醇作为反应物的适应性，通过用例 如碱性叠氮化物在溶剂，如乙醇、甲醇或二甲基甲酰胺中处理对这些 物质进行叠氮解作用，通过在有机溶剂，例如链烷醇或低级酯中的溶 液中氢解得到相应于式4f的氨基醇(氨基脱氧三尖杉酯碱)。然后可 在Schotten-Baumann条件下，即在水性溶媒中在作为催化剂的无机碱 存在下使所得的胺酰胺化，得到式4e的酰胺醇 其中Z=NHCOR或NHCOAr，R和Ar如上所定义，更优选分别是取代的 或未取代的烷基或芳基。胺4f也可被仲烷基化，得到烷基氨基脱氧三 尖杉酯碱(Z=NHR或Z=NHAr或Z=NR2或Z=NHAr2，两个R和Ar基 团可以相同或不同)；或者被酰化，得到酰胺(Z=NHCOR或Z= NHCOAr)；或者由相应的氨基脱氧三尖杉酯碱4f衍生得到氨基甲酸酯 (Z=NHCOOR)，n、R5、R6、R8、R9、X和CTX-如上所定义。

或者，在一种腈(可用作溶剂)的存在下，在-100℃～+30℃的低 温下，在酸，如硫酸、高氯酸或优选四氟硼酸的存在下，式4c的环醚 适于进行Ritter反应，得到由相应的氨基脱氧三尖杉酯碱4f衍生的 酰氨基脱氧三尖杉酯碱(Z=NHCOR或Z=NHCOAr)。

按照下面描述的方法提取式2的三尖杉碱。

式2的三尖杉碱可按照文献的描述以合成或提取方法制备。在后 一种情况下，由于没有一种方法是将植物原料直接与水性酸混合，因 此本发明中描述的方法是有利的。将新鲜的或干的植物原料与用无机 酸或弱有机酸酸化(使pH为1-4，优选3)的水-有机混合溶剂接触 24小时。无机酸可以是，例如硫酸或盐酸，有机酸可以是柠檬酸、乳 酸或酒石酸；有机溶剂可以是，例如低级链烷醇、酮、四氢呋喃或本 领域技术人员提取用的任何其它水混溶性溶剂。水的含量为20-80 ％，优选50％。如此获得的溶液可直接进行色谱或碱化以进行反萃取， 因为与文献描述的方法形成对照，该溶液不合有叶绿素和/或植物脂 肪。使用水不相混溶的有机溶剂，如低级酯或优选低级卤代烃，更优 选二氯甲烷进行反萃取，得到以白色粉末形式分离的总生物碱。已有 数种纯化粗榧属生物碱的方法，但还没有一种是反相的、特别适合于 纯化三尖杉碱，尤其是式2a的三尖杉碱的。

本发明的纯化三尖杉碱的方法构成了半合成三尖杉酯碱的新方法 整体的一部分，该方法包括反相色谱法，反相色谱法以前从未用于这 一目的。该反相色谱法使用，例如接枝极性基团，如有机甲硅烷基、 氰基烷基、苯基烷基或优选十八碳烷基烷基甲硅烷链的惰性二氧化硅 (如市售的那些)作为固定相；混合的水性溶剂，优选水本身(不含 有机溶剂)作为流动相；用无机酸，如盐酸或磷酸或硫酸调至pH到2 -4。还优选加入添加剂，例如氨水或三乙胺。按照该方法，在经济上 特别有利，因为它避免了使用有机溶剂并且固定相可以重复使用数百 次，三尖杉碱的回收率为定量性的并且纯度高于95％。

上面的方法不仅可以获得植物原料中天然存在的左旋三尖杉碱， 还可以获得以天然态存在的外消旋形式的三尖杉碱。

相应于式1b的金属醇盐(n=1-12)，其中M是金属，更优选是 碱金属，如钠、钾或锂，或者过渡金属，如锆、钛或锌，可通过相应 于通式1a(X=1-12)的一羟基三尖杉烷或多羟基三尖杉烷中的一个或 多个羟基金属化获得，其中M更优选是碱金属或碱土金属或者可通常 形成醇盐的任何其它金属。

醇盐的形成对于更方便地酰化三尖杉烷的位阻羟基和尤其是三尖 杉烷与侧链前体的酰化偶联，自动得到本发明的主题物质三尖杉酯碱 具有重要意义。

可采用数种方法对三尖杉烷的一个或多个羟基金属化。例如，可 使用金属氢化物、烷基金属、氨基化物或更通常地是使用可交换或放 弃金属原子的试剂。

优选在惰性气氛下，简单地将羟基化的三尖杉烷在有机溶剂中的 溶液与金属氢化物，例如氢化钾、氢化锂或更优选氢化钠混合，得到 三尖杉烷的金属醇盐，该产物可例如就地用作反应物以附加上例如适 宜取代的烷基、酰基或烷基甲硅烷基。有机溶剂可以是适宜的非质子 溶剂，例如醚，更优选四氢呋喃；液体芳烃，优选甲苯；或者更广义 地，是在使用的温度和压力条件下是液体并且对试剂没有可感知反应 性的任何有机溶剂。反应溶媒的温度可以在-90℃～+30℃。

优选的惰性气氛下，简单地将羟基化的三尖杉烷在有机溶剂中的 溶液与金属化的烃，例如锂化烃，优选丁基锂混合，得到如上的相同 金属醇盐。可使用如上的相同溶剂，不同的是由于金属化烃的反应性 通常高于金属氢化物，因此反应温度在-100℃～-20℃，优选在-60℃～ -80℃。

优选的惰性气氛下，简单地将羟基化的三尖杉烷在有机溶剂中的 溶液与氨基化物，优选碱金属氨基化物，例如碱金属二烷基氨基化物， 如二环己基氨基化锂或二异丙基氨基化锂或碱金属(锂、钾或钠)二 (三烷基甲硅烷基)氨基化物混合，得到如上的相同金属醇盐。可使 用如上的相同溶剂。

仅作为实例，而非限制本发明的范围，在-70C下，将三尖杉碱2a 在四氢呋喃中的溶液用一当量丁基锂或二(三甲甲硅烷基)氨基锂处 理数小时，得到醇的锂盐2h，该产物就地与乙酸酐接触时，得到3-0- 乙酰基三尖杉碱2b。

下面详细描述式3k的外消旋形式的取代环醚羧酸的制备。

根据第一种方案，这些环醚羧酸可按照下面的反应式，通过环合 式3f的取代的乙烯型(-叔羟基酸进行制备： m、R、R5、R6、R8和A的定义如上。

式3k的取代的环醚羧酸，例如下式的A或B： 可由式3f的取代的乙烯型(-叔羟基酸通过在一种酸的存在下简单地 溶解在一种有机溶剂中来制备。

根据第二种方案，这些环醚羧酸可通过伴随酰化物形成的环合反 应进行制备。如上所述，其叔醇是游离的酸，如3f通过脱水剂(上述 酰化三尖杉碱醇的一些方法所需的)的作用自发地环合，然后酯化， 得到4c。

在没有接受它的醇类反应物存在的情况下，在无水操作条件下， 从式3f的乙烯型叔醇得到分离的酰化中间体31，或者通过水解，得 到分离的式3k的酸。

在这种情况下，该方法与所述就地形成酰化物但不存在三尖杉碱 类反应物的偶联方法严格一致。

根据第三种方案，这些式3k的取代的环醚羧酸可通过脱去适宜取 代的前体3h的叔羧基的保护来制备， R5、R8、R6和n定义如上，GP表示酸的保护基，在特定的情况下，GP =R。

根据第四种方案，在R5=CH2CO2R的特定情况下，式3k的适宜取 代的环醚羧酸，例如下式中R5=CH2CO2R的情况， R8、R6和n定义如上， 可如下制备：完全皂化相应的二酯3j(其中R5=CH2CO2R)，然后对中 间体二酸3r(R5=CH2CO2H)进行温和的选择性甲基化。

顺便说明，在室温下进行该方法，通过对反应动力学的严格监测， 导致对上述伯酯的选择性皂化；如此，得到了例如下式R=GP的式3t 的衍生物， R8、R6、GP和n定义如上， 可使用上面描述的方法将式3t与三尖杉碱偶联，以确保在形成本发明 主题物质的叔酸的偶联反应期间没有转酯反应发生。

根据第五种方案，这些环醚羧酸可通过区域选择性甲醇解相应的 环酐进行制备。

如上所述，二酸3r通过自身脱水得到环酐3p,3p是一种良好的 醇酰化试剂，例如通过甲醇解，还可优选获得3k，其中R5=CH2CO2Me， 这构成了另一种制备方法。

下面详细描述式3f的取代的乙烯型(-叔羟基酸的制备。

取代的乙烯型(-叔羟基二酸是式3f的单酸的前体，它们可与式 3k的其环状类似物一样获得： -通过选择性脱去其前体-式3i的保护基制备 -或者，例如在R5=CH2CO2H的式3s的二酸的情况下， 通过选择性甲基化伯羧基，尤其是通过使该反应物室温下长时间地与 甲醇溶液接触或者使用三氟化硼/甲醇复合物制备。

其中R5=CH2CO2H的式3s的二酸可如下得到：通过在水性或水-醇 性溶剂中，将其中R5=CH2CO2Me的式3q的相应二酯与过量的碱接触进 m、R、R8和R6定义如上。

所述醇可以是低级醇，例如甲醇、乙醇或优选是异丙醇；所述碱 可以是，例如碱金属或碱土金属碱或者稀土金属氢氧化物或者氨水。 当反应在0-30℃进行15分钟至1小时时，可毫不费力地对伯酯进行 区域选择性的皂化。通过将温度提高至溶剂混合物的沸点和/或通过延 长反应时间，可以良好的收率获得二酸并且没有副产物形成。

由于它们的结晶生成特性，其中R5=CH2CO2H的式3s的二酸通常通 过连续结晶富含对映体的混合物直至得到恒定的旋光，从而获得其对 映体纯形式。

而后，可在质子酸或路易斯酸的存在下，或者使用三氟化硼乙醚 化物/甲醇复合物或重氮甲烷，使如上获得的二酸通过选择性单酯化其 伯羧基转化为其中R5=CH2CO2Me的式3f的取代的乙烯型(-叔羟基酸。

顺便说明，对于其中R5=CH2CO2H的式3t的环状类似物的情况， 该方法在室温下进行，通过对反应动力学的严格监测，导致对上述伯 酯的选择性皂化；如此，得到了其中R5=CH2CO2H的式3u的衍生物， 可使用上面描述的方法将式3u与三尖杉碱偶联，以确保在形成本发明 主题物质的叔酸的偶联反应期间没有转酯反应发生。

式3q的取代的乙烯型(-叔羟基酯可按照下面概括的反应式进行 制备： R6、R8、m和R5具有如上的相同含义。

式3q的乙烯型酯可按照文献中对类似情况描述的多种方法进行制 备，例如相应的式9的1-烷基-或1-链烯基-1-酮基酯的α-羟烷基化。

仅作为实例，而非缩小本发明的范围，用甲氧羰基甲基烯醇锂(R5M =MeOCOCH2Li)或相应的有机锌试剂(Reformatsky反应，其中R5MX =MeOCOCH2ZnBr)对式9的1-链烯基-1-酮基酯进行羟烷基化得到其中 R5=CH2CO2Me的二酯3q。

该相同的反应用于手性酯(R=R*)，可得到可分离的非对映异构 体的混合物，脱去叔酸功能基的保护基后，分别得到一对非对映异构 体。

此外，在手性诱导试剂，例如鹰爪豆碱或奎宁的存在下，式9的 1-烷基-或1-链烯基-1-酮基酯的α-羟烷基化反应可产生明显富含对 映体的产物，该产物可通过进一步的分级结晶提高对映体纯度。

式9的酮基酯本身可按照常规方法用草酸二烷基酯通过对相应的 式10的烷基或链烯基卤化物的负碳离子进行C-半酰化获得。

构成本发明主题的合成方法与现有技术相比的一个优点在于可将 一个预先合成的链与三尖杉碱进行偶合。因此，上述对映体纯形式的 脱水三尖杉酯碱酸3k的制备相当令人感兴趣，因为如现有技术中所 述，在连接第二链期间，偶联后在三尖杉酯碱的2’位上制造手性中心 导致产生差向异构体混合物，一方面，该混合物很难分离，另一方面， 损失约50％非常珍贵的三尖杉碱(以Good Manufacturing Practice 在制药方法中是无法循环再利用的)。

为达到该目的，已采用了数种方法。它们都是用于式3k的环状单 羧酸或其式3r的二酸前体，和其式3f的乙烯型线性前体；也可对前 体施用手性色谱，这些前体化合物没有能够与手性物质进行可逆性化 学结合的功能基(例如，游离的酸功能基)。

根据这些酸的对映特异性制备方法的第一步，通过与手性醇或胺 结合形成差向异构体混合物。

用上述式3k的氧杂环烷羧酸(包括由式3f的乙烯型(-叔羟基酸 就地形成的那些)酯化三尖杉碱的有位阻的仲醇功能基的反应还可用 于酯化另一种手性醇，以将式3k酸的外消旋混合物或者含富含部分对 映体的混合物转化为非对映异构体混合物，可对后者应用所有的非手 性分离方法。上面的方法无需进行改变，即可用于手性伯胺或仲胺的 酰胺化。

因此，当式3k的氧杂环烷羧酸或其乙烯型线性前体与由R*OH表 示的手性醇或酰胺R’*R*NH(R’*可被氢代替)反应时，获得物理化学 性质不同的(例如NMR、熔点、溶解性、色谱特性、对酶或微生物的 进攻性等)两种物质。所述醇或酰胺优选须是有位阻的并在其与式3k 的叔羧基结合的位置上带有手性中心。所述醇可以是，例如_醇、冰 片、valinol或优选是奎宁。所述胺可以是，例如麻黄碱；更广义地 说，可使用任何市售的手性醇或酰胺。 n、R5、R6、R8和A具有如上相同含义，R*与R含义相同，但它是手性 的。

仅作为实例，而非限制本发明的整个范围，奎宁，与三尖杉碱一 样，也是一种带有立体位阻的仲醇功能基的生物碱，它与式3k的氧杂 环烷羧酸的外消旋混合物反应得到两种相应的差向异构体3v(其中R5 =CH2CO2Me)和3w(其中R5=CH2CO2Me)的混合物：

通过与手性化合物结合获得的二元化合物可，例如通过分级结 晶、通过蒸馏、通过逆流液-液分配分离，以及通过任何普通的制备性 色谱技术，例如正常相色谱、排阻色谱，优选通过反相色谱或正常接 枝相色谱得到高附加值的中间体。由于这些方法具有协同性，因此优 选将它们结合使用以提高非对映立体异构体的纯度。

仅作为实例，而非限制本发明的范围，使用接枝的十八碳烷基甲 硅烷基相和甲醇/水流动相可毫不费力地和以定量收率分离上面实例 中的两种差向异构体3v(其中n=3；R5=R8=Me；R5=CH2CO2Me)和3w (其中n=3；R6=R8=Me；R5=CH2CO2Me)的混合物。

式3k的对映体纯形式的氧杂环烷羧酸的再生可通过全水解，然后 对适当选择的非对映异构体的伯羧基进行选择性再甲基化(见上面的 程序3j(3k))进行；或者当其是与苄基位的氧结合的酯(见，例如上 面的奎宁)时，通过简单的氢解进行。在后一种情况下，氢解的缺点 被昂贵产物的经济步骤大大地抵销了。

仅作为实例，而非限制本发明的范围，从(-)-奎宁(2’R)-脱水三 尖杉酯碱酸酯3v(n=3；R5=R8=Me；R=CH2CO2Me)得到式3k的(2R)- 脱水三尖杉酯碱酸和二氢脱氧奎宁，因此不能再循环，但基于该生物 碱的低成本，这只是一个小缺点。此外。对3v进行双皂化，然后选择 性地再甲基化，得到与上式3k的(2R)-脱水三尖杉酯碱酸完全相同的 产物。

与其(2R)对映体一样进行相同的转化后，非天然构型(2S)对 映体可用于结构-活性关系研究目的。

根据这些酸的对映特异性制备方法的第一步，通过与手性碱形成 盐拆分外消旋混合物。

式3k的氧杂环烷羧酸的外消旋混合物(包括由式3f的乙烯型(- 叔羟基酸就地形成的那些)可与手性胺通过简单地在有机溶剂中混合 形成盐。虽然可使用大多数上述用于分离与3k形成的酯和酰胺的方法 (如色谱法)，但由于所形成的盐通常具有高结晶形成性，因此优选 进行分级结晶来拆分式3k的酸。溶剂可单独使用一种或作为混合物形 式，溶剂优选是极性有机溶剂(可任选地与水混合)，例如酮类、醇 类和低级酯类。形成所述盐的反应优选在0-100℃下进行。可通过将 盐再溶于混合溶剂中，按照本领域技术人员使用的常规技术，通过结 合使用上述溶剂和改变温度精确地调整溶剂的溶解力进行重结晶。当 认为富集了足够的非对映异构体时，在稀酸，例如盐酸或硫酸水溶液 的存在下将盐分解。可使用水不相混溶的有机溶剂，例如低级酯对再 生酸的对映体进行萃取。

仅作为实例，而非限制本发明的范围，式3k的(2R或2S)-脱水三 尖杉酯碱酸的外消旋混合物可，例如通过使它们与(-)-麻黄碱接触， 然后在乙酸乙酯/甲醇混合溶剂中分级重结晶来拆分。

而后，通过使纯化的盐与2N盐酸接触并用乙酸乙酯连续地萃取酸 性水相来再生式3k的2R-脱水三尖杉酯碱酸。

随后，对上述式3k的氧杂环烷羧酸进行制备性手性色谱。

终产物经HPLC纯化，得到药用终产物。

尽管半合成和天然产物的分离采用的是现代合成方法，工业化国 家的卫生部门颁布的标准明确了：药物中的杂质含量高于千分之一 (0.1％m/m)就可能对患者产生危害。

为获得药品上市许可证书，在鉴定后对未知毒性的物质进行毒理 学研究，确认其是否超过了系统要求的阈值。

此外，非对映异构体的纯度(在特定情况下，是对映体的纯度) 可导致治疗偏差；例如，公知奎宁(见上式)是一种抗疟剂，但其一 种非对映立体异构体却是抗心肌纤维化剂(cardiac antifibrillant)。

构成本发明主题之物质的治疗领域中，经常会看到由于分子结构 的小变化致使活性或副作用(这里不希望)10-100倍扩增。

在获得这种纯度水平的方法中，工业高分辨拆分色谱法是一种选 择，其高成本为人们所争议，但比之非常高附加值的复杂的活性成分， 它给工艺带来的稳定性和对使用者提供的安全性，这是无足轻重的。

仅作为实例，而非限制本发明的范围，高三尖杉酯碱4b，其中n =3；R6=R8=Me；R5=CH2CO2Me,CTX-=三尖杉碱基， (2’R)-高三尖杉酯碱4b(2’S)-表高三尖杉酯碱 R6、R8、R5、n和CTX-定义如上，在使用接枝的十八碳烷基甲硅烷型反 相作为固定相并使用适当调整的甲醇/水混合物作为流动相通过制备 性反相色谱除去其它相关杂质的同时还可除去其差向异构体。

该方法得到了相关杂质总含量低于0.5％的产物，这些杂质中没有 一种杂质的含量超过0.1％。

本发明涉及一种下式的带有侧链的三尖杉烷和/或其盐的制备方 法

Ω-CO-O-CTX 其中

Ω是表示链末端部分的基团，-CO-与三尖杉烷相连的酯基的羰 基；

Ω-CO-基是相应于：

-下式的取代的杂环烷： 其中n是0-8的数； Z是氧、氮或硫杂原子； R5、R6和R8独立地是 氢；饱和的、不饱和的、芳族的、线性的或分支的和/或环状的烃基， 尤其是烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、芳基、杂环烷基， 所述烃基包括或不包括一个或多个杂原子；R6和R8可以被包括在一 个环中；带有一个前述基团的氧醚； -或下式的线性链烯： 其中m是1-8的数；R5、R6和R8定义如上， -或下式的基团： 其中n、R5、R6和R8定义如上； Z和Q2独立地是氧、氮或硫杂原子； Q1是碳、硅或磷原子； R9和R10独立地是氢、烷氧基、烃基，所述烃基包括或不包括一个或 多个杂原子，可以是饱和的、不饱和的或芳族的、线性的或分支的 和/或环状的烃基，尤其是烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、 芳基、杂环烷基； R9和/或R10可以不存在或者一起构成一个杂原子或与Q1构成一个多 价键，R9和R11可以不存在或者在带有它们的两个碳原子之间构成一 个多价键；并且 R11是氢、芳基羰基、烷氧羰基、芳氧羰基或烷基羰基； 其中 -O-CTX是下式的三尖杉碱残基或其盐： 其中p等于1或2；

上述的两个基团-Ω和-CTX通过酯键-CO-O-结合 所述方法包括下列反应：

-通式Ω-CO-OH的羧酸或其盐；

-或通式-CO-A的活化形式的酸或其盐，其中Ω-CO具有下式结 构： 其中n、Z、R5、R6和R8定义如上； 其中Ω-CO具有下式结构： m是1-8的数，Z、R5、R6和R8定义如上； 其中Ω-CO具有下式的结构：

其中n、Z、Q1、Q2、R5、R6、R8、R9、R10和R11定义如上； A表示： -下式的环状酸酐： 其中n、R6和R8定义如上； 所述反应通过用下列物质甲基化如此形成的伯羧基完成： -带有至少一个游离羟基的式H-O-CTX的三尖杉烷或其盐，其中CTX 定义如上； -式M-O-CTX的金属醇盐，其中CTX定义如上并且M是一种金属； -其羟基是活化形式的式Y-O-CTX，其中-O-CTX定义如上并且Y是一 种通过Y-和-O-CTX之间的裂解可使氧原子上产生负电荷或通过Y-O- 和-CTX之间的裂解产生碳阳离子的离去基团； 可存在有一种或多种反应添加剂以形成所述带侧链的三尖杉烷和/或 其盐。

Z更优选是氧原子并且三尖杉烷H-O-CTX是下式的三尖杉碱或其 盐： 其中R1、R2、R3和R4独立地是氢、羟基或醇盐。

如上定义的三尖杉烷H-O-CTX是三尖杉碱或其盐，其中R1是羟 基，R2是甲氧基，R3和R4是氢。 R5优选是氢或-CH2-CO-O-Me。

Ω-CO基团优选是，例如n=1-4，R6和R8是甲基。

Ω-CO基团也可以是例如n=1或2,R6是苯基并且R8是氢。

当R5是-CH2-CO-O-Me时，R1=OH,R2=OMe,R3=R4=H，三尖杉烷 优选是，例如n=O,Z是氮原子并且R8是氢。

A可以是Ω-CO-CO，其中Ω定义如上，或者是卤原子。

A也可以是能够在羰基和取代基A之间产生裂解得到Ω-CO+和A-的 化合物Ω-CO-A的基团。

此外，A是选自下列取代基的基团：

式MeOCOO-的甲氧甲酰氧基，

式CF3COO-的三氟乙酰氧基，

式RSO3-的烷基磺酰氧基，

式(RO)2PO-的膦氧基，

式ROP(Cl)O-的卤代膦氧基，

式R3SiO-的三烷基甲硅烷氧基，

式中R是烷基，

下式的氯化二甲基甲脒

或下式的酰氧基-溴化吡啶鎓

A也可以是2,4,6-三氯苯甲酰氧基或相应于下式的基团：

在A是羰基二咪唑，A是2,4,6-三氯苯甲酰氧基的情况下，如 下获得式-CO-A的试剂：在强碱，如醇盐的存在下，将如上定义的酸 Ω-CO-OH与2,4,6-三氯苯甲酰氧基或羰基二咪唑接触。

根据碳二亚胺的方法，偶联添加剂是取代的碳二亚胺和/或一种碱 性添加剂，例如叔胺。

例如，取代的碳二亚胺选自环己基碳二亚胺(DCC)、1,3-二异丙 基碳二亚胺(DIC)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺的盐酸 盐。

相应于式M-O-CTX(其中M和CTX定义如上)的三尖杉碱醇盐可 通过将式H-O-CTX的三尖杉碱与金属本身、氨基化物或金属氢化物或 烷基金属反应获得。

M可以是碱金属，例如锂、钾或钠。

本发明的目的还在于制备新的化合物，例如

-相应于下式的三尖杉碱的醇锂：

-相应于下式的三尖杉碱的醇钠：

-相应于下式的带侧链的三尖杉烷和/或其盐： 其中

n是0-8的数；

Z是氧、氮或硫原子；

R5、R6和R8独立地是 氢；饱和的、不饱和的、芳族的、线性的或分支的和/或环 状的烃基，尤其是烷基、链烯基、炔基、环烷基、环烯基、 芳基、杂环烷基，所述烃基包括或不包括一个或多个杂原 子；带有一个前述基团的氧醚；

CTX定义如上； 其中Z是氧并且符合下列条件的化合物除外：

1)n=2或3，同时R6=R8=甲基并且R5=OMe或羟基，

2)n=2，同时R6=R8=甲基并且R5=OMe或羟基，

3)n=3，同时R6是羟基，R8=甲基，R5是-CH2CO2CH3。 -相应于下式的带侧链的三尖杉烷和/或其盐： 其中

m、R5、R6、R8和CTX定义如上；

其中m=2,R5=CH2CO2CH3,R6=R8=甲基并且CTX定义如上的化合 物除外。

R5优选是-CH2-CO2-CH3基团。

-相应于下式的带侧链的三尖杉烷和/或其盐：

其中n、Z、Q1、Q2、R5、R6、R8、R9、R10、R11和CTX定义如上。 优选地，Q2是氧原子和/或Z是氮原子，和n=0的三尖杉烷。 -相应于下式的带侧链的三尖杉烷： -相应于下式的带侧链的三尖杉烷： -相应于下式的带侧链的三尖杉烷： 当带侧链的三尖杉烷和/或其盐的环状侧链以下式表示时： 其中n、R5、R6、R8、CTX和Z定义如上，在水性或非水性溶媒中， 用一种试剂和/或一种质子或非质子亲电基团E将所述链开环得 到下式的中间体化合物：

其中n、CTX、R5、R6和R8定义如上，E是氢或者是暂时或最终结

合的亲电基团； 可用有意加入的或溶媒中可能存在的试剂或亲核基团Z’攻击前述的中 间体化合物， 并且 当带侧链的三尖杉烷和/或其盐的环状侧链以下式表示时， 其中n、R5、R6、R8、R9、R10和R11定义如上，并且Z’是杂原子； 所述侧链在可能有活化和/或开环添加剂存在下通过水解或谨慎地进 行溶剂解开环。 另外，提供了一种下式的带开环侧链的三尖杉烷： 其中n、CTX、R5、R6和R8定义如上； Z’是： -卤素或者带有氢或如上定义的基团R11的杂原子； -氢，烃基，所述烃基不带或带有一个或多个杂原子，它们是饱和的、 不饱和的或芳族的、线性的或分支的和/或环状的，尤其是烷基、链烯 基、炔基、环烷基、环烯基、芳基或杂环烷基。 例如，下式的三尖杉碱酯： 其中R5、R6、R8、Z’、X和CTX定义如上。 -溴代脱氧三尖杉酯碱(n=2)和溴代脱氧高三尖杉酯碱(n=3) 其中CTX定义如上； -氨基脱氧三尖杉酯碱(n=2)和氨基脱氧高三尖杉酯碱(n=3) 其中CTX定义如上；

另外，当带侧链的三尖杉烷和/或其盐的环状侧链用下式表示时：

其中n、R5、R6、R8、CTX和Z定义如上， 在卤代溶剂，优选二氯甲烷中通过用氢溴酸的乙酸溶液处理使所述侧 链开环，然后就地水解而无需分离中间体，得到下式的带侧链的三尖 杉烷： 其中n、CTX、R5、R6和R8定义如上。 相应于下式的酸：

Ω-CO-OH 其中Ω基团定义如上；

所述分子式相当于含式(+)-Ω-CO-OH化合物和式(-)-Ω-CO-OH的 化合物的外消旋混合物，(+)-Ω-CO-OH表示其右旋对映体，而(-)- Ω-CO-OH表示其左旋对映体，它们可如下得到：    、 a)通过将所述外消旋混合物或其下式的活化形式(定义如上)：

Ω-CO-A 所述外消旋化合物或所述活化形式分别生成：

-相应于式(Ω-CO-O)-的阴离子；

-或相应于式(Ω-CO)+的阳离子； 与对映体纯形式的手性物质接触，以Δ*符号表示的所述“拆分试剂” 可形成：

-通过共价键合的稳定结合；

-或者通过氢键或疏水相互作用的容易逆转的不稳定结合；

-或者通过静电相互作用的中等不稳定结合； 得到Ω-CO-O-Δ*和Ω-CO-Δ*的非对映异构体混合物； b)然后通过物理方法分离两种非对映异构体或两种复合物或者更广 义地物理和/或化学性质不同的两种新物质的混合物； c)然后通过再生并最终分离通式Ω*-CO-OH的各种对映体，其中Ω*表 示相应于式(+)-Ω-CO-OH和(-)-Ω-CO-OH的一种或另一种对映体纯形 式中相同手性基团的通用符号。 Ω-CO-优选是： -相应于下式的基团： 其中n、Z、R6、R8和R5定义如上； -或者相应于下式的基团： 其中m、Z、R6、R8和R5定义如上； -或者相应于下式的基团： 其中n、R5、R6、R8、Z、Q2、Q1、R9、R10和R11定义如上。

稳定结合可用式Ω-CO-Δ*(其中Ω和Δ*定义如上)的酯表示，按 照本发明的方法，通过将酸与相应于式HO-Δ*(其中Δ*定义如上)的手 性醇接触获得所述稳定结合。

稳定结合可用相应于式Ω-CO-NH-Δ*或Ω-CO-N-Δ*(其中Ω和Δ*定 义如上)的酰胺表示，按照本发明的方法，通过将酸与相应于式H2N- Δ*或NN=Δ*(其中Δ*定义如上)的手性伯胺或仲胺接触获得所述稳定结 合。

稳定结合可用式Ω-CO-S-Δ*(其中Ω和Δ*定义如上)的硫酯表示， 按照本发明的方法，通过将酸与相应于式HS-Δ*(其中Δ*定义如上)的 手性硫醇接触获得所述稳定结合。

最后，离子性结合用通过将酸与相应于下列三种分子式之一的手 性胺接触获得的盐表示： Ω-CO-O-[NH-Δ*]+ Ω-CO-O-[NH2-Δ*]+ Ω-CO-O-[NH3-Δ*]+

其中Ω和Δ*定义如上。

借助手性固定相以色谱形式获得基于不稳定键的结合。

通过手性前体引发的分级结晶获得基于晶格内的原子或分子间的 基于不稳定键的结合。

手性醇HO-Δ*是：

-相应于下式的(-)-奎宁： -或者相应于下式的(-)-或(+)-扁桃酸甲酯： -或者相应于下式的(-)-或(+)-_醇： 手性胺HN-Δ*是相应于下式的(-)-或(+)-麻黄碱：

本发明涉及下列新化合物： -分别相应于下列两个结构式的(-)-奎尼定基(quinidyl)(2’R)- (-)-脱水高三尖杉酯碱酸酯和(-)-奎尼定基(2’S)-(-)-脱水高三尖杉 酯碱酸酯： -分别相应于下列两个结构式的(-)-_基(2’R)-(-)-脱水高三尖杉酯 碱酸酯和(-)-_基(2’S)-(-)-脱水高三尖杉酯碱酸酯： -分别相应于下列两个结构式酸的(-)-甲基扁桃酸基(mandelyl) (2’R)-(-)-脱水高三尖杉酯碱酸酯和(-)-甲基扁桃酸基(2’S)-(-)- 脱水高三尖杉酯碱酸酯： -分别相应于下列两个结构式的(-)-麻黄碱(2’R)-(-)-脱水高三尖杉 酯碱酸盐和(-)-麻黄碱(2’S)-(-)-脱水高三尖杉酯碱酸盐： 按照本发明的方法，当羧酸是相应于下式的杂环烷叔羧酸时： 其中n、Z、R5、R6和R8定义如上，所述酸通过在非质子或质子溶剂中， 必要时在环合添加剂和/或脱水剂的存在下处理获得，必要时以物理方 法带走所形成的水支持所述处理。 -或者开环的相应于下式的乙烯型叔羧酸： 其中m、Z、R5、R6和R8定义如上。 -或者开环的相应于下式的乙烯型叔羧酸： 其中m是1-8的数，Z、R5、R6和R8定义如上，R12不是如上定义的CTX， 它表示R5和/或酸的保护基和/或手性基团； 随后通过皂化或通过氢解除去R12，或者更经常地是通过本领域已知的 方法除去羧酸的保护基。

在不存在环合添加剂的情况下，环合反应通过加热进行。

环合添加剂优选是质子酸，例如磺酸或甲酸，或者非质子酸，包 括其固定化形式。

在上述酸的制备步骤中，Z是氧原子。

本发明的目的还在于制备下列新化合物： -相应于下式的杂环烷叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或外 消旋混合物或其可变化的组成形式：

其中n、Z、R5、R6和R8定义如上，并且R5不是氢； 其中Z是氧原子并且符合下列条件的化合物除外：

1)n=0但R5不是-CH2CO2H或-CH2CO2CH3基；

2)n=0且R5是-CH2CO2H或-CH2CO2CH3基，并且R6=R8=甲基或者 -CH2CO2H或-CH2CO2CH3基；

3)n=2，同时R6=R8=甲基并且R5=OMe或羟基，

4)n=2，同时R6=R8=甲基，并且R5是-CH2CO2H或-CH2CO2CH3基 或甲基；

5)n=3，同时R6是羟基，R6是甲基，并且R8是-CH2CO2CH3基；

6)n=3，同时R5=R8=甲基，并且R5=OH、甲基或乙基； -相应于下式的氧杂环烷叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或 外消旋混合物或其可变化的组成形式：

其中n是0-8的数，R5、R6和R8定义如上，但不同时是氢， 相应于上面定义的1-6的例外化合物除外。 -相应于下式的杂环烷叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或外 消旋混合物或其可变化的组成形式： 其中n是0-8的数，Z、R5、R6和R8定义如上，R5不是氢，并且R12 不是上面定义的CTX； 其中Z是氧原子的化合物和相应于上面定义的1-6的例外化合物除 外。 -相应于下式的氧杂环烷叔羧酸半酯，包括其盐和其各种对映体纯形 式或外消旋混合物或其可变化的组成形式：

其中n是0-8的数，并且R6和R8定义如上， 相应于上面定义的1-6的例外化合物除外。 -相应于下式的氧杂环烷叔羧酸半酯，包括其盐和其各种对映体纯形 式或外消旋混合物或其可变化的组成形式： 其中n是0-8的数，R6和R8定义如上，R12是不同于如上定义的

CTX的烃基， 相应于上面定义的1-6的例外化合物除外。 -相应于下式的氧杂环烷叔羧酸半酯或脱水高三尖杉酯碱酸，包括其 盐和其各种对映体纯形式或外消旋混合物或其可变化的组成形式： -相应于下式的氧杂环烷叔羧酸半酯或脱水三尖杉酯碱酸，包括其盐 和其各种对映体纯形式或外消旋混合物或其可变化的组成形式： -相应于下式的氧杂环烷叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或 外消旋混合物或其可变化的组成形式： 其中n和R5定义如上， 相应于上面定义的1-6的例外化合物除外。 -相应于下式的氧杂环烷叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或 外消旋混合物或其可变化的组成形式： 其中n是1-8的数。 -相应于下式的氧杂环烷叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或 外消旋混合物或其可变化的组成形式： 其中n是0-8的数。 -相应于下式的氧杂环烷叔羧酸或氧杂脱水新高三尖杉酯碱酸，包括 其盐和其各种对映体纯形式或外消旋混合物或其可变化的组成形式： -相应于下式的氧杂环烷叔羧酸或氧杂脱水新高三尖杉酯碱酸，包括 其盐和其各种对映体纯形式或外消旋混合物或其可变化的组成形式： -相应于下式的氧杂环烯叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或 外消旋混合物或其可变化的组成形式： -相应于下式的链烯叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或外消 旋混合物或其可变化的组成

其中m是1-8的数，R6和R8定义如上，但不同时是氢，并且R5 不是氢或杂原子。 -相应于下式的链烯叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或外消 旋混合物或其可变化的组成形 其中m、R6、R8和R12定义如上，并且m’是1-8的数。 -相应于下式的链烯叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或外消 旋混合物或其可变化的组成形式： 其中m是1-8的数，R6和R8定义如上，但不是氢。 -相应于下式的链烯叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或外消 旋混合物或其可变化的组成形式： -相应于下式的链烯叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或外消 旋混合物或其可变化的组成形式： -相应于下式的链烯叔羧酸，包括其盐和其各种对映体纯形式或外消 旋混合物或其可变化的组成形式： 其中m是1-8的数，优选m=1。 -通式Ω-CO-O-CO-Ω的酸酐，其中Ω定义如上。 -通式Ω-CO-A的混合酸酐，其中A是选自下列的基团： 式

MeOCOO-的甲氧甲酰氧基， 式CF3COO-的三氟乙酰氧基， 式RSO3-的烷基磺酰氧基， 式(RO)2PO-的膦氧基， 式ROP(Cl)O-的卤代膦氧基， 式R3SiO-的三烷基甲硅烷氧基， 式中R是烷基。 下式的氯化二甲基甲脒 下式的酰氧基-溴化吡啶鎓 和2,4,6-三氯苯甲酰氧基。 -相应于下式的混 -上面定义的相应于通式Ω-CO-X的酰氯，其中X是卤素。 -相应于下式的环状酸 其中n、R6和R8定义如上。 -相应于下式的环状酸酐：

在本发明的方法中，带侧链的三尖杉烷作为盐，用疏水性反相作 为固定相和不含有机溶剂的流动相通过色谱纯化，所述流动相例如是 用由一种酸和一种碱或铵盐和一种或多种添加剂如具有弱化剂作用的 硅烷醇制备的缓冲剂将pH调至2～4.5的溶液，所述三尖杉碱盐由无 机酸形成并为盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、高氯酸盐或由有机 酸盐形成并为酒石酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐或乳酸盐形式。

在本发明的方法中，带侧链的三尖杉烷通过色谱纯化药用的相应 于下式的天然的或半合成的或合成的高三尖杉酯碱： 以除去不需要的相关杂质，即2’-表-高三尖杉酯碱，后者来自： a)引入对映体纯度不够高的合成高三尖杉酯碱酸的半合成方法，生成 的杂质表现出相应于下式绝对构型： b)植物中的生物合成过程，其中引入对映体纯度不够高的三尖杉碱或 通过部分外消旋化三尖杉碱的人工形式，形成的杂质表现出与非手性 系统完全相同的色谱特性和与上面的(对映体)相反的相应于下式的 绝对构型： 尤其是使用下列色谱系统之一：

A)固定相：烷基-或苯基-或烷基苯基-或苯基烷基-硅烷，优选正 十八烷基甲硅烷，

B)流动相：水-四氢呋喃、水-甲醇、水-乙腈或pH 2～6.5的缓 冲液代替水，或者具有相同选择性的所有其它流动相。

天然的或半合成的或合成的高三尖杉酯碱的纯化和色谱监测方法 补偿了侧链前体(所述高三尖杉酯碱酸)和三尖杉碱前体(semi- precursors)的对映体纯度的双重不足，所述的两种前体各自独立地 通过全合成或半合成或植物中的天然方法(生物合成方法)生成，事 实上，在制备性色谱中通过使用手性固定相，除去了表现出相反绝对 构型的非天然对映体形式的高三尖杉酯碱。

下式附图表用于说明本发明，而不意味着对本发明构成限制。

附图表1给出了主要的三尖杉酯碱的定义和结构式。

附图表2概括了现有技术的制备三尖杉酯碱的方法。

附图表3给出了相应于实施例25的合成高三尖杉酯碱的顺序，其 中A代表2,4,6-三氯苯基，R代表甲基并且R’代表三尖杉碱基。

附图表4表示本发明方法的一种方案，更具体地说是通过氧杂环 烷羧酸半合成三尖杉酯碱的方法。该附图表中有关的取代基R6、R7、R8、 R、A、CTX、X以及字母n和m如说明书中所定义。

下面的定义适用于整个的申请文件。

生物碱：植物界中存在的天然物质，含至少一个环中的或非环的 碱性氮原子(许可的扩大：动物界，伯胺；不许可的扩大：酰胺氮， 因为它是非碱性的，如紫杉烷)，通常表现出显著的药理性质。

基本或游离生物碱：表现为非离子化形式的叔胺生物碱，通常在 碱性pH下存在并溶于非质子有机溶剂。

生物碱盐或“盐”：带有显示正电荷的胺功能基和负性配对离子的 离子化形式的生物碱，实际上更易溶水和质子溶剂，而较少溶于非质 子溶剂。

三尖杉烷1(见附图表1)：该通用术语表示带有不同氧合取代基 (脂族或芳族醚、游离或酯化醇、烯醇和/或取代的苯酚，桥连醚、更 广义地是指这类化合物中常见的以天然态存在的所有取代基)的碱性 骨架。

三尖杉碱(类名)2：该通用术语表示可带有至少一个上述取代 基(不包括侧链)的三尖杉烷。

三尖杉碱2：指粗榧属中存在的主要三尖杉碱。

类三尖杉碱：该通用术语表示非天然的三尖杉碱。

三尖杉酯碱(类名)：该通用术语表示带有通过侧链酯化的至少一 个醇基、酚或烯醇的三尖杉烷，并可带有一个上述的取代基。

三尖杉酯碱：在3位带有侧链的主要生物碱之一。

类三尖杉酯碱：该通用术语表示非天然的三尖杉酯碱，其中侧链是 具有至少3个碳原子的酯基。

类三尖杉酯碱的侧链：该通用术语表示一个羟基和含至少3个碳 原子的羧酸之间形成的酯，通常在相对于羧基的α位具有叔醇，ω位具 有疏水性取代基。

对添加剂和反应物采用适于三尖杉烷的实验式命名。

普通命名的前缀常用于文献中以表示三尖杉酯碱侧链的结构变化 (参见附图表1的表中的实例)。对侧链的描述参见式3b形式的三尖 杉酯碱的侧链，其中n=2,R=H,R7=H,R6=2-羟基异丙基。

高(Homo)：多一个碳。

双高(Bishomo)：多两个碳。

去(Nor)：侧链少一个碳。

异(Iso)：具有在相邻的(juxtaterminal)碳上带有羟基的亚甲 基的侧链。

脱氧(Deoxy)：相邻碳上的羟基被氢置换。

脱水(Anhydro)：两个叔羟基失去一分子水形成相应饱和的氧合杂 环。

新(neo)：2-羟基异丙基位上的R6是苯基。

HPLC：高压液相色谱。

NMR：核磁共振。

下列实施例不意味着对本发明构成限制，而是用于说明本发明。 实施例1 2-甲氧羰基甲基-2-羟基-6-甲基庚-5-烯酸乙酯或6-脱氧-5,6-脱氢 高三尖杉酯碱酸乙酯的制备 1)中间体草酸酯的制备

将5-溴-2-甲基戊-2-烯(15.6g,95.6mmol)滴加到搅拌的镁 (2.32g,95.5mmol)(进一步用结晶碘活化的)在无水四氢呋喃(75ml) 中的混合物中。在剧烈加热下，反应开始，并使反应混合物回流。保 持回流直至大多数镁已经反应，用无水四氢呋喃(150ml)稀释该反应混 合物。在-78℃下，20分钟内往搅拌的草酸二乙酯(10.8ml,80mmol) 在无水四氢呋喃(75ml)中的混合液中加入所得的格氏试剂。使搅拌在 -78±5℃下保持30分钟，然后经过1.5小时使温度升至-10℃。该混合 物用15％氯化铵溶液(300ml)灭活。分离的有机层用15％氯化铵 (300ml)洗涤并蒸发至干。水层用乙醚萃取(2×300ml)。有机层与 浓缩物合并并用盐水(300ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发至干。该粗产 物经多球茎型蒸馏器纯化后，得到无色油状物(10.3g,70％)。中间体 α-酮酯表现出下列特征： IR(ATR)(cm-1):2790；2916；1725；1068. 1H NMR400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 5.08(1H,t,J=7.2,HC=)；4.32 (2H,q,J=7.1,OCH2)； 2.86(2H,t,J=7.2, CH2CO)；2.32(2H,q,J=7.2,CH2-C=)；1.68 (3H,s,CH3)；1.62(3H,s,CH3)； 1.37(3H,t,J=7.1,OCH2CH3). 2)标题产物的制备

在-78℃下，用1分钟将无水乙酸甲酯(0.6ml,7.5mmol)加到搅拌 的市售1M二-(三甲基甲硅烷基氨基)锂的四氢呋喃溶液(7.5ml, 7.5mmol)中并使反应在-78±5℃下进行20分钟。在-78℃下，用5分 钟往搅拌下的上面制备的2-氧代-6-甲基庚-5-烯酸乙酯(480mg, 2.6mmol)在无水四氢呋喃(10ml)中的混合物中加入烯醇锂，并将所得 混合物在-78±5℃搅拌30分钟。以TLC检测后，移走冷却浴，用15％ 氯化铵溶液(10ml)使混合物失活。分离的有机层用15％氯化铵溶液 (10ml)洗涤并蒸发至干。有机层用乙醚萃取(2×10ml)。将有机层与 浓缩物合并并用盐水(10ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发至干。所得的 粗产物(1.13g)经柱色谱纯化(环己烷/乙酸乙酯(95∶5)，二氧化硅 (15-40μm),38g)，得到无色油状物(482mg,72％)。如此得到的产物 表现出下列特征： lR(ATR)(cm-1):3508；2969；2919；1732；1438；1193. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 5.05(1H,t,J=7.1,HC=)；4.27(2H,q,J=7.1,OCH2)；3.70(1H,s,OH)；3.68 (3H,s,OCH3)；2.92 and 2.70(2H,2d,JAB=16.1,CH2CO2)；2.12(1H,m)；1.88 (1H,m)；1.72(2H,m)；1.67(3H,s,CH3)；1.58(3H,s,CH3)；1.31(CH,t,J=7.1, OCH2CH3). 实施例2 2-甲氧羰基甲基-2-羟基-6,6--二甲基-2-四氢吡喃甲酸乙酯或脱水高 三尖杉酯碱酸乙酯的制备 1)方法A

将对甲苯磺酸(2.06g,10.8mmol)加到搅拌下的实施例1得到的乙 烯酯(2.8g,10.8mmol)的甲苯(30ml)溶液中，将所得混合物在65℃搅 拌5小时。冷却到室温后，该混合物用饱和碳酸氢钠溶液水解。水层 用乙醚萃取(3×50ml)，有机层合并并用盐水(100ml)洗涤，经硫酸镁 干燥并蒸发至干。所得粗产物(2.8g)经柱色谱纯化(环己烷/乙醚(95∶5) 二氧化硅(15-40μm),110g)，得到无色油状物(1.94g,69％)。如此得 到的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 4.21(2H,m,OCH2CH3)；3.64(3H,s,OCH3)；2.85 and 2.60(2H,2d,JAB=14.0, CH2CO2)；2.30(1H,dt,J=13.3 and 3.7)；1.87(1H,qt,J=13.8 and 3.6)；1.62 (1H,m)；1.51(2H,m)；1.43(1H,m)；1.31(3H,t,J=7.1,OCH2CH3)；1.22(3H, s,CH3)；1.13(3H,s,CH3). 2)方法B

往搅拌下的实施例1得到的乙烯酯(50mg,0.19mmol)的甲醇(30m) 溶液中加入1N盐酸(0.5ml)并将所得混合物在65℃下搅拌15小时。 用二氯甲烷稀释后，有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干。所得粗产物 (32mg)经柱色谱纯化(二氯甲烷，然后是二氯甲烷/甲醇(9∶1)，二氧化 硅(15-40μm),2.2g)，得到预期的中间体二醇(20mg,37％)。如此获 得的产物表现出下列特征： IR(ATR)(cm-1):3490；2966；1731；1193；1177；1152. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δ ppm,J Hz): 4.28(2H,q,J=7.2,OCH2)；3.75(1H,s,OH)；3.68(3H,s,OCH3)；2.93 and 2.69(2H,2d,JAB=16.2,CH2CO2)；1.70(2H,m)；1.53(1H,m)；1.44(1H,m)； 1.30(3H,t,J=7.1,OCH2CH3)；1.20(3H,s,CH3)；1.19(3H,s,CH3).

往搅拌的上面制备的二醇(19mg,0.069mmol)的1,2-二氯乙烷 (1.4ml)溶液中加入无水氯化锌(10,g,0.069mmol)，将所得混合物在 80℃搅拌1.5小时。在室温冷却后，该混合物用水洗涤，然后用盐水 洗涤，水层用二氯甲烷萃取三次。合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发 至干，得到环状二酯(7mg,40％)。如此获得的产物与方法A获得的产 物表现出相同的特征。 3)方法C

将实施例1得到的乙烯酯(400mg,1.55mmol)在混合的甲酸(4ml) 和水(4ml)中的溶液在50℃搅拌15小时。真空除去甲酸后，残余物用 5％碳酸氢钠溶液处理。水层用二氯甲烷萃取三次，合并的有机层用硫 酸镁干燥并蒸发至干。所得的粗产物(375mg)经柱色谱纯化(二氯甲 烷，然后是二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15-40μm)16g)，得到 无色油状物(235mg,55％)。如此获得的产物表现出与方法A获得的产 物相同的特征。如上面的实施例2方法B，将如此获得的二醇用氯化 锌环合，得到特征与方法A获得的产物相同的环状二酯。

实施例3 2-羧甲基-2-羟基-6-甲基庚-5-烯酸或0-去甲基-6-脱氧-5,6-脱氢高 三尖杉酯碱酸的制备：

将氢氧化钾(14.2g,252mmol)在水(170ml)中的混合物加到搅拌 下的实施例1得到的乙烯酯(10.95g,42mmol)的甲醇(300ml)溶液中， 将所得的混合物回流1.5小时。在室温下冷却后，真空除去甲醇，残 余物用水(10ml)处理，所得的水层用乙醚(250ml)萃取。用10％盐酸 酸化(pH1)后，水层用乙醚萃取(3×250ml)。合并的有机层经硫酸镁 干燥并蒸发至干，得到白色固体(8.66g,95％)。如此获得的粗产物表 现出下列特征： IR(ATR)(cm-1):3500；3019；2966；2931；1716；1691；1656；1219；1199；1111. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 5.06(1H,t,J=6.9,HC=)；3.04 and 2.78(2H,2d,JAB=17.1,CH2CO2)；2.25- 1.20(4H,m,2×CH2)；1.67(3H,s,CH3)；1.60(3H,s,CH3). 实施例4 2-羧甲基-6,6-二甲基-2-四氢吡喃羧酸或0-去甲基脱水高三尖杉酯 碱酸的制备： 1)方法A

将氢氧化钾(4.2g,75mmol)在水(45ml)中的混合物加到搅拌的实 施例2得到的环状二酯(1.94g,7.5mmol)在乙醇(75ml)中的溶液中， 将所得混合物回流搅拌5小时。在室温冷却后，真空除去乙醇，残余 物用水(10ml)处理，所得水层用乙醚萃取(2×50ml)。用2N盐酸(35ml) 酸化后，水层用氯化钠饱和，然后用乙醚萃取(3×50ml)。合并的有 机层用盐水洗涤(2×100ml)，经硫酸镁干燥并蒸发至干，得到浅黄色 油状物(1.66g,98％)。如此获得的粗产物表现出下列特征： IR(ATR)(cm-1):2974；2941；1709；1215. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 3.01 and 2.95(2H,2d,JAB=16.1,CH2CO2)；1.89(1H,m)；1.75(2H,m,CH2)； 1.58(3H,m)；1.31(6H,s,2×CH3). 2)方法B

往搅拌下的实施例3得到的乙烯二酸(50mg,23mmol)在无水甲苯 (500μl)中的溶液中加入氯化锌(6mg,0.04mmol)，将所得混合物在80 ℃搅拌15小时。在室温冷却后，该混合物用10％盐酸水解，所得水 层用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干，得 到浅黄色固体(38mg,76％)。如此获得的粗产物表现出与方法A获得的 产物相同的特征。 3)方法C

将实施例3得到的乙烯二酸(50mg,0.23mmol)在混合的甲酸 (500μl)和水(500μL)中的溶液在60℃搅拌3小时。在室温冷却后，真 空除去甲酸，残余物用乙酸乙酯处理。所得的有机层用10％盐水洗涤， 水层用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干， 得到浅黄色固体(50mg,100％)。如此获得的粗产物与方法A获得的产 物具有相同的特征。 实施例5 2-甲氧羰基甲基-2-羟基-6-甲基庚-5-烯酸或6-脱氧-5,6-脱氢高三 尖杉酯碱酸的制备：

将实施例3得到的乙烯二酸(500mg,2.3mmol)和市售三氟化硼- 甲醇复合物在甲醇中的溶液(4.5ml,BF3 12％w/w)的混合物在18±5℃ 搅拌16小时。将该反应混合物小心地加到饱和碳酸氢钠溶液(50ml) 中后，所得水层用乙醚(50ml)洗涤，用2N盐酸(0.5ml)酸化(pH1)并 用乙醚萃取(3×50ml)。合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干，得 到粘稠的黄色油状物(310mg,58％)。如此获得的粗产物具有下列特 征：IR(ATR)(cm-1):3483；2954；1731；1197；1173. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 5.06(1H,m,HC=)；4.12(2H,br.s,CO2H+OH)；3.73(3H,s,OCH3)；2.99 and 2.74(2H,2d,JAB=16.7,CH2CO2)；2.16(1H,m)；1.98(1H,m)；1.85-1.60(4H, m)；1.67(3H,s,CH3)；1.60(3H,s,CH3). 实施例6 2-甲氧羰基甲基-6,6-二甲基-2-四氢吡喃羧酸或脱水高三尖杉酯碱酸 的制备： 1)环状二酸的制备

将实施例4得到的环状二酸(1.6mg,7.4mmol)和市售三氟化硼- 甲醇复合物在甲醇中的溶液(15.5ml,BF3 12％w/w)的混合物在18±5 ℃搅拌15小时。将该反应混合物小心地加到饱和碳酸氢钠溶液(50ml) 中后，所得水层用乙醚(2×50ml)洗涤(见下面的附加制备例)，用2N 盐酸(15ml)酸化(pH1)并用乙醚萃取(3×75ml)。合并的有机层经硫 酸镁干燥并蒸发至干，得到黄色油状物(1.17g,69％)。如此获得的粗 产物具有下列特征：IR(ATR)(cm-1):2974；2951；1740；1718；1437. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 3.70(3H,s,OCH3)；3.03 and 2.98(2H,2d, JAB=16.1,CH2CO2)；1.82(1H,m)； 1.74(3H,m)；1.62(1H,m)；1.48(1H,m)；1.31 (3H,s,CH3)；1.26(3H,s,CH3). 附加制备例： a)二酯的获得

将上述合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干，得到二酯与一酯 的混合物(369mg)。该混合物用饱和碳酸氢钠溶液处理后，水层用乙醚 萃取，所得的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干，得到油状物(292mg, 17％)。如此获得的粗产物具有下列特征： 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 3.75(3H,s,OCH3)；3.65(3H,s,OCH3)；2.85 and 2.61(2H,2d,JAB=14.1, CH2CO2)；1.85(1H,m)；1.62(1H,m)；1.50(2H,m)；1.43(1H,m)；1.21(3H,s, CH3)；1.11(3H,s,CH3). b)通过上述二酯的单皂化获得区域选择性半酯

往搅拌下的上述环状二酯(285mg,1.17mmol)的甲醇(11ml)溶液 中加入氢氧化钾(654mg,11.7mmol)在水(7ml)中的混合物，将所得混 合物在室温搅拌30分钟。真空除去甲醇后，残余物用水(7ml)处理， 所得水层用乙醚萃取三次。用10％盐酸溶液酸化(pH1)后，水层用乙 醚萃取。合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干。所得的粗产物(236mg) 经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(95∶5)，二氧化硅(15-40μm)6.5g)， 得到浅黄色固体(220mg,82％)。如此获得的粗产物具有下列特征： IR (KBR) (cm-1): 3421；2960；2929；1744；1705；1209. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 3.76(3H,s,OCH3)；2.76 and 2.67(2H,2d,JAB=15.3,CH2CO2)；2.36(1H,m, JAB=13.7,J3-4=3.5,J3-5=1.2,H-3oq)；1.85(1H,m,JAB～Jax-ax=14.0,Jax-oq= 3.7,H-4ax)；1.67(1H,m,JAB=14.1,J4-3.5=3.9,H-4oq)；1.59(1H,m,JAB=13.4, J5-4=3.6,J5-3=1.0,H-5oq)；1.49(1H,m,JAB～Jax-ax=13.2,Jax-oq=4.0,H-3ax)； 1.42(1H,m,JAB～Jax-ax=13.2,Jax-oq=4.5,H-5ax)；1.33(3H,s,CH3)；1.16(3H, s,CH3). 2)乙烯型半酯的制备

往搅拌下的实施例5得到的乙烯型半酯(4.6g,20mmol)在甲苯中 的(125ml)溶液中加入对甲苯磺酸(3.8g,20mmol)，将所得混合物在 65℃搅拌5小时。在室温冷却后，该混合物用饱和碳酸氢钠水溶液 (100ml)水解。水层用乙醚洗涤(2×100ml)，弃去有机层(除去该反应 得到的二酯)。用1N盐酸(35ml)酸化(pH1)后，水层用氯化钠饱和， 然后用乙醚萃取(3×100ml)。合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经 硫酸镁干燥并蒸发至干。

所得粗产物(3.9g)经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(99∶1)，二氧化 硅(15-40μm)160g)，得到黄色油状物(3.1g,67％)。如此获得的粗产 物表现出与上面获得的产物相同的特征。

实施例7 2-羧甲基-2-羟基-6-甲基庚-5-烯酸的制备

将实施例4得到的环状二酸(245mg,1.1mmol)和乙酸酐(4ml)的混 合物在回流下搅拌16小时。真空蒸发反应混合物后，残余物用甲苯处 理并再次在高真空下蒸发，得到粘稠的黄色油状物(189mg,84％)。如 此获得的产物具有下列特征： IR(ATR)(cm-1):2976；2951；1732；1188；1170 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 3.02(2H,s,CH2CO2)；1.98(2H,m,CH2)；1.8-1.5(4H,m,CH2)；1.31(3H,s, CH3)；1.22(3H,s,CH3). 实施例8 (-)-三尖杉碱基新戊酸酯的制备： 1)通过混合酸酐的方法

在室温下，往搅拌的新戊酸(100mg,0.98mmol)在无水甲苯(2m1) 中的混合物加入三乙胺(经氢氧化钾干燥的)(138μl,0.98mmol)和 2,4,6-三氯苯甲酰氯(153μ,0.98mmol)。在18±5℃搅拌1.5小时后(以 红外检测原料酸的消失)，将4-二甲氨基吡啶(139mg,1.14mmol)加到 该反应混合物中，使其反应5分钟后，加入三尖杉碱(103mg, 0.33mmol)。在18±5℃搅拌15小时后，将反应混合物滤过滤纸，用乙 醚(5ml)稀释。所得有机层顺序用水(5ml)、饱和碳酸氢钠溶液(5ml) 和水(5ml)洗涤，然后经硫酸镁干燥并真空蒸发。所得粗产物经柱色谱 纯化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15-40μm))，得到固体(130mg, 93％)。如此获得的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 6.60(1H,s,H-17*)；6.58(1H,s,H-14*)；5.84 et 5.83(2H,2d,JAB=1.5, OCH2O)；5.83(1H,d,H-3)；5.02(1H,s,H-l)；3.77(1H,d,J4-3=9.6,H-4)；3.69 (3H,s,OCH3)；3.21(1H,m,JAB=14.0,J=12.5,7.8,H-11b)；3.09(1H,m,H- 8a)；2.94(1H,rd,J=11.5,7.1,H-10a)；2.57(2H,m,H-8b+H-10b)；2.35(1H, dd,JAB=14.5,J=6.9,H-11a)；2.03(1H,td,JAB=12.1,J=9.7,H-6A)；1.89(1H, m,JAB=12.1,J=7.9,4.0,H-6B)；1.75(2H,m,CH2-7)；0.83(9H,s,C(CH3)3). 2)使用DCC的方法

在惰性气氛下，往搅拌的新戊酸(50mg,0.49mmol)在无水甲苯 (2ml)中的混合物中加入1,3-二环己基碳二亚胺(130mg,0.63mmol)。 在室温搅拌10分钟后，加入三尖杉碱(50mg,0.16mmol)和吡咯烷并吡 啶(24mg,0.16mmol)。在18±5℃搅拌2小时后，在50℃搅拌15小时 (以TLC检测反应，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇；9∶1)，将该反应混合物 滤过磨砂玻璃滤器，滤饼用甲苯(5ml)洗涤，将滤液真空蒸发。所得的 产物(130mg)经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(9∶1)，二氧化硅(15-40μm) 3g)，得到白色固体(36mg,57％)。如此获得的粗产物与通过混合酸酐 获得的产物具有相同的特征。 实施例9 由实施例7得到的环状酸酐制备(-)-三尖杉碱基2-甲氧羰基甲基- 6,6-二甲基-2-四氢吡喃羧酸酯或脱水高三尖杉酯碱和2-三尖杉碱氧 基-羰基甲基-6,6-二甲基-2-四氢吡喃羧酸甲酯：

在室温下，往搅拌的实施例7得到的酸酐(50mg,0.24mmol)在无 水二氯甲烷(0.5ml)中的混合物中顺序加入吡啶(250μl,3.1mmol)、 吡咯烷并吡啶(10mg,0.07mmol)和三尖杉碱(76.4mg,0.24mmol)。在 18±5℃搅拌48小时后，顺序加入1,3-二环己基碳二亚胺(100mg, 0.48mmol)、甲醇(60μl,1.5mmol)、吡咯烷并吡啶(10mg,0.07mmol) 和甲苯(1ml)。在18±5℃搅拌24小时后(以TLC检测反应)，将反应混 合物过滤，滤液真空蒸发。所得的粗产物经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲 醇(99∶1)，二氧化硅(15-40μm))，得到含由酸酐开环得到的区域异构 体*(两种非对映异构体)的预期产物(12mg，两种非对映异构体)。如此 获得的预期产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz): 6.61(1H,s,H-17*)；6.57(1H,s,H-14*)；5.91(J3-4=9.8)and 5.84(2H,2d,H-3)； 5.84 et 5.79(2d,JAB=1.4,OCH2O)；5.84 and 5.82(2d,JAB=1.4,OCH2O)；5.04  and 5.01(1H,2s,H-1)；3.79 and 3.78(1H,2d,J4-3=9.6,H-4)；3.70 and 3.65 (3H,2s,OCH3)；3.59(3H,s,OCH3)；3.15(1H,m,H-11β)；3.09(1H,m,H-8α)； 2.94(1H,m,H-10α)；2.58(2H,m,H-8β+H-10β)；2.37(1H,m,H-11α)；2.16 and 1.81(2d,JAB=14.4,CH2CO2)；2.13 and 1.66(2d,JAB=14.3,CH2CO2)； 2.02(1H,m,H-6A)；1.88(1H,m,H-6B)；1.75(2H,m,CH2-7)；1.8-1.2(6H,m, 3×CH2)；1.11 and 1.02(2s,2×CH3)；1.10 and 1.04(2s,2×CH3). *上述的区域异构体由下列条件获得：

在惰性气氛和室温下，往搅拌的实施例6方法C得到的半酯(100mg, 0.43mmol)在无水甲苯(1ml)中的混合物中加入1,3-二环己基碳二亚 胺(120mg,0.58mmol)。搅拌5分钟后，加入三尖杉碱(45mg,0.15mmol) 和吡咯烷并吡啶(21mg,0.14mmol)。在35℃搅拌45分钟后，再在8 ℃搅拌15小时(以TLC检测反应，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇；9∶1)，将 反应混合物过滤，滤饼用甲苯(5ml)洗涤，将滤液真空蒸发。所得粗产 物经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15-40μm)4g)， 得到预期产物(23mg,30％，两种非对异构映体)。如此获得的产物表现 出下列特征： 1H NNR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 6.61 and 6.58(1H,2s,H-17*)；6.57 and 6.53(1H,2s,H-14*)；5.89 and 5.86 (2d,JAB=1.5,OCH2O)；5.87 and 5.85(2d,JAB=1.5,OCH2O)；5.76(1H,d,J3-4 =9.4,H-3)；5.02(1H,2s,H-1)；3.73 and 3.72(1H,2d,J4-3=9.4,H-4)；3.70 and 3.68(3H,2s,OCH3)；3.69 and 3.65(3H,2s,OCH3)；3.15(1H,m,H-11α)；3.07 (1H,m,H-8α)；2.90(1H,m,H-10α)；2.74 and 1.95(2d,JAB=15.3,CH2CO2)； 2.56(2H,m,H-8β+H-10β)；2.33(1H,m,H-11α)；2.28 and 2.23(2d,JAB=15.4, CH2CO2)；2.16(m,H-3′4q)；1.97(1H,m,H-6A)；1.9-1.1(5H,m,CH2)；1.86(1H, m,H-6B)；1.73(2H,m,CH2-7)；1.14(3H,s,CH3)；1.03(3H,s,CH3).

实施例10 由实施例6获得的四氢吡喃羧酸制备(-)-三尖杉碱基2-甲氧羰基甲基 -6,6-二甲基-2-四氢吡喃羧酸酯或脱水高三尖杉酯碱： 实施例9的分子式 1)通过混合酸酐方法

在室温下，往搅拌的实施例6得到的半酯(50mg,0.22mmol)在无 水甲苯(1ml)中的混合物加入三乙胺(经氢氧化钾干燥的)(29.4μl, 0.22mmol)和2,4,6-三氯苯甲酰氯(32.7μ,0.22mmol)。在25℃搅拌 20小时后(以红外检测原料酸的消失)，将4-二甲氨基吡啶(29mg, 0.24mmol)加到该反应混合物中，使其反应5分钟后，加入三尖杉碱 (16.5mg,0.05mmol)。在25℃搅拌24小时后，将反应混合物滤过滤 纸，用乙醚(5ml)稀释。所得有机层顺序用水(5ml)、饱和碳酸氢钠溶 液(5ml)和水(5ml)洗涤，然后经硫酸镁干燥并真空蒸发。所得粗产物 经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15-40μm))，得到预 期产物(16mg,56％，两种非对映异构体)。如此获得的产物与实施例9 中获得的产物具有相同的特征。 2)使用DCC的方法

在惰性气氛和室温下，往搅拌的实施例6得到的半酯(100mg, 0.43mmol)在无水甲苯(1ml)中的混合物中加入1,3-二环己基碳二亚 胺(180mg,0.87mmol)。搅拌10分钟后，加入三尖杉碱(165mg, 0.52mmol)和吡咯烷并吡啶(77mg,0.52mmol)。在18±5℃搅拌18小时 后，加入乙醚，将该反应混合物滤过磨砂玻璃滤器，滤饼用乙醚洗涤。 所得的有机层顺序用10％碳酸氢钠溶液和水洗涤，然后经硫酸镁干燥 并真空蒸发。所得的粗产物经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二 氧化硅(15-40μm)9g)，得到固体(110mg,48％)。如此获得的粗产物 与实施例9中获得的产物具有相同的特征。

实施例11 由实施例6获得的乙烯型酸制备(-)-三尖杉碱基(2’RS)2-甲氧羰基甲 基-6,6-二甲基-2-四氢吡喃羧酸酯或脱水高三尖杉酯碱：

实施例9的分子式 1)方法A：通过混合酸酐，环合偶联

在室温下，往搅拌的实施例5得到的乙烯型酯(50mg,0.22mmol) 在无水甲苯(1ml)中的混合物加入三乙胺(经氢氧化钾干燥的)(29μl, 0.22mmol)和2,4,6-三氯苯甲酰氯(32.7μl,0.22mmol)。搅拌30分钟 后(以红外检测原料酸的消失)，将4-二甲氨基吡啶(30mg,0.25mmol) 加到该反应混合物中，使其反应5分钟后，加入三尖杉碱(31mg, 0.1mmol)。在18±5℃搅拌65小时后，将反应混合物滤过滤纸，用乙 醚(5ml)稀释。所得有机层顺序用水(5ml)、饱和碳酸氢钠溶液(5ml) 和水(5ml)洗涤，然后经硫酸镁干燥并真空蒸发。所得粗产物经柱色谱 纯化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15-40μm))，得到预期产物 (46mg,96％，两种非对映异构体40/60)。如此获得的产物与实施例9 中获得的产物具有相同的特征。 2)方法B：使用DCC，环合偶联

在惰性气氛和室温下，往搅拌的实施例5得到的乙烯型酸(50mg, 0.22mmol)在无水甲苯(2ml)中的混合物中加入1,3-二环己基碳二亚 胺(270mg,1.31mmol)。搅拌5分钟后，加入三尖杉碱(70mg,0.22mmol) 和吡咯烷并吡啶(32mg,0.22mmol)。在18±5℃搅拌65小时后(以TLC 检测反应，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇；9∶1)，将该反应混合物滤过磨砂 玻璃滤器，滤饼用甲苯(5ml)洗涤，滤液真空蒸发。所得的粗产物经柱 色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15-40μm)9g)，得到固 体(40mg,35％)。如此获得的产物与实施例9中获得的产物具有相同的 特征。

实施例12 由粗榧属的总生物碱提取物制备纯化的(-)-三尖杉碱 1)总生物碱提取物的

在30升的灌中，将粗榧属的碎叶(新鲜的或干的)(10kg)与甲醇 (20L)混合并放置(steed)65小时，然后渗漉(50L)。将渗漉液过滤并 真空浓缩至5L。该浓缩的溶液用6％酒石酸水溶液酸化。然后该水- 醇溶液用二氯甲烷洗涤(5×5L)以除去脂类物质和色素。该水溶液用 氨水(2.5％)碱化至pH9，然后用二氯甲烷萃取(5×5L)。减压浓缩后， 回收得到白色结晶固体的生物碱粗提物(24.5g)。三尖杉碱的含量为 71％(HPLC)。 2)从生物碱粗提物中分离和色谱纯化(-)-三尖杉碱：

将上述粗提物溶于流动相(三乙胺/去离子水(1.55/1000)，并用磷 酸将pH调至3)。该溶液过滤后，注射到安装有轴流式压缩机和高压 泵的制备性高压液相色谱(固定相：正十八烷基甲硅烷，15μm，孔隙率 100,1kg)上。以0.2L/分的流速进行洗脱。通过紫外检测器和TLC检 测含有三尖杉碱的馏分。最终通过HPLC检测保留的馏分，然后合并， 用2.5％氨水碱化并用二氯甲烷萃取(4×400ml)。减压浓缩后，得到 树脂状的物质，用甲醇研制后，得到白色结晶状固体(-)-三尖杉碱 (18g)(HPLC纯度=99.8％)。该产物具有下列特征： [α]D20:-174,1(c=0,20；CHCl3) 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 6.68(1H,s,H-17*)；6.65(1H,s,H-14*)；5.91 and 5.90(2H,2d,JAB=1.5, OCH2O)；4.93(1H,s,H-1)；4.77(1H,dd,J3-4=9.4,J3-oH=3.4,H-3)；3.73(3H, s,OCH3)；3.68(1H,d,J4-3=9.4,H-4)；3.35(1H,m,JAB=14.3,J=12.2 and 7.9, H-11β)；3.08(1H,m,J=9.1 and 4.9, H-8α)；2.92(1H,td,J=11.6 and 7.1,H- 10α)；2.59(2H,m,H-8α+H-10α)；2.35(1H,dd,JAB=14.4,J=6.9,H-11α)； 2.02 (1H,td,JAB=12.1,J=9.7,H-6A)；1.87(1H,m,JAB=12.1,J=7.9 and 4.4, H-6B)；1.74(2H,m,CH2-7)；1.62(1H,d,J3-OH=3.5,3-OH).

实施例13 (-)-三尖杉碱的醇锂的制备(捕获，如3-O-乙酰基衍生物) 1)丁基锂方法

将市售的丁基锂的己烷溶液(0.44ml,1.6M己烷溶液，0.70mmol) 加到搅拌的(-)-三尖杉碱(200mg,0.63mmol)在无水四氢呋喃(6.8ml) 中的混合物中。使该反应混合物在-60℃保持20分钟，然后在-48℃保 持30分钟后，用8分钟时间加入乙酸酐(90μl,0.095mmol)后，在- 48℃搅拌20分钟，然后在0℃搅拌1小时。用饱和氯化铵溶液(5ml) 使该混合物失活，然后用乙酸乙酯萃取(3×8ml)。合并的有机层用盐 水洗涤(15ml)，经硫酸镁干燥并蒸发至干。所得的粗产物经柱色谱纯 化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15-40μm)6g)，得到白色固体 (60mg,26％)。如此获得的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 6.60(1H,s,H-17*)；6.57(1H,s,H-14*)；5.89 and 5.86(2H,2d,JAB=1.4, OCH2O)；5.80(1H,d,J3-4=9.3,H-3)；5.05(1H,s,H-1)；3.77(1H,d,J4-3=9.4, H-4)；3.72(3H,s,OCH3)；3.23(1H,m,JAB=14.3,J=12.3 and 7.9,H-11β)； 3.08(1H,m,H-8α)；2.92(1H,td,J=11.5 and 7.1,H-10α)；2.57(2H,m,H-8β +H-10β)；2.36(1H,dd,JAB=14.4,J=7.0,H-11α)；2.02(1H,td,JAB=12.1,J =9.7,H-6A)；1.88(1H,m,JAB=12.1,J=8.0 and 4.0,H-6B)；1.74(2H,m,CH2- 7)；1.57(3H,s,OAc). 2)二-(三甲基甲硅烷基)氨基锂(LHDS)方法

在-40℃下，将市售的1M二-(三甲基甲硅烷基氨基)锂(0.95ml, 0.95mmol)的四氢呋喃溶液加到搅拌的(-)-三尖杉碱(200mg, 0.63mmol)的无水四氢呋喃溶液中。搅拌5分钟后，加入乙酸酐(90μl, 0.95mmol)，然后如上述1)中的相同方法处理该混合物。如此获得的 产物与上面丁基锂方法中获得的产物具有同样的特征。 3)二异丙基氨基锂(LDA)方法

在60℃下，用20分钟时间将市售的2M二异丙基氨基锂的四氢呋 喃溶液(0.35ml,0.70mmol)加到搅拌的(-)-三尖杉碱(200mg, 0.63mmol)在无水四氢呋喃(6.8ml)中的溶液中。将该反应混合物在-60 ℃搅拌20分钟，然后在-48℃搅拌30分钟后，加入乙酸酐(90μl, 0.095mmol)。使该溶液在-48℃搅拌20分钟，然后在0℃搅拌1小时。 然后如上述1)中的相同方法处理该混合物。如此获得的产物与上面丁 基锂方法中获得的产物具有同样的特征。 4)氢化钠方法

在-60℃下，往搅拌的氢化钠(1.5g)在新鲜蒸馏的二甲基甲酰胺 (3ml)中的混合物中加入三尖杉碱(200mg,0.63mmol)的二甲基甲酰胺 (3ml)溶液和乙酸酐(90μl,0.95mmol)。在室温搅拌24小时后，在0 ℃下，反应混合物用水(3ml)处理后，用乙醚(3×5ml)萃取。合并的 有机层经硫酸镁干燥并真空蒸发。如此获得的产物与上面丁基锂方法 中获得的产物具有同样的特征。

实施例14 通过三尖杉碱的醇锂制备(-)-三尖杉碱基2-甲氧羰基甲基-6,6-二甲 基-2-四氢吡喃羧酸酯或脱水高三尖杉酯碱：

实施例9的分子式

在-50℃下，用10分钟时间往搅拌的实施例13制备的(-)-三尖杉 碱的醇锂(158mg,0.5mmol)的无水四氢呋喃溶液中加入实施例10得 到的混合酸酐(0.75mmol)。在-50℃搅拌30分钟后，在0℃搅拌2小 时，用饱和氯化铵溶液使该混合物(5ml)失活并用乙酸乙酯萃取(3× 10ml)。合并的有机层用盐水(15ml)洗涤，经硫酸镁干燥并真空蒸发。 所得的粗产物经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15- 40μm)7g)，得到白色固体(48mg)。如此获得的产物表现出与实施例9 中获得的产物相同的特征。

实施例15 由实施例6得到的四氢吡喃羧酸制备(-)-奎尼定基(quinidyl)2-甲氧 羰基甲基-6,6-二甲基-2-四氢吡喃羧酸酯的非对映异构体混合物： 1)方法A：通过混合酸酐

在室温下，往搅拌的实施例6得到的酸(458mg,1.99mmol)在无水 甲苯(8ml)中的混合物加入三乙胺(经氢氧化钾干燥的)(270μl, 1.92mmol)和2,4,6-三氯苯甲酰氯(300μl,1.91mmol)。搅拌3小时后 (以红外检测原料酸的消失)，加入4-二甲氨基吡啶(352mg, 2.88mmol)，使反应混合物反应5分钟后，加入奎宁(936mg, 2.88mmol)。在18±5℃搅拌65小时后，将反应混合物滤过滤纸，用乙 醚(15ml)稀释。所得有机层顺序用水(15ml)、饱和碳酸氢钠溶液(15ml) 和水(15ml)洗涤，然后经硫酸镁干燥并真空蒸发。所得粗产物经柱色 谱纯化(二氯甲烷/甲醇(99∶1)，二氧化硅(15-40μm)32g)，得到预期 产物(930mg,84％，两种非对映异构体50/50)。如此获得的产物具有 下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 8.73(1H,m,H-2qn),8.0 and 7.98(1H,2d,J=9.2,H-8qn)；7.63 and 7.50(1H, 2br.s)；7.45(br.s) and 7.39(d,J=4.5)(1H,H-3qn)；7.36(1H,dd,J=9.1 and 2.6,H-7qn)；6.50(1H,br.s)；5.89(1H,m,=CHqn)；5.03(2H,m,=CH2qn)；3.99 and 3.97(3H,2s,OCH3)；3.54 and 3.33(3H,2br.s,OCH3)；3.2-1.0(m,7×CH2+ 3CH)；2.92 and 2.67(2d,JAB=14.9,CH2CO2)；2.87(d,JAB=14.8,CH2CO2)； 1.17 and 0.99(2s,2×CH3)；1.03 and 0.42(2br.s,2×CH3). 2)方法B：DCC

在惰性气氛和室温下，往搅拌的实施例6得到的四氢羧酸(200mg, 0.87mmol)在无水甲苯(4ml)中的混合物中加入1,3-二环己基碳二亚 胺(239mg,1.16mmol)。搅拌5分钟后，加入奎宁(94mg,0.29mmol) 和吡咯烷并吡啶(43mg,0.29mmol)。在18±5℃搅拌65小时后(以TLC 检测反应，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇；9∶1)，将该反应混合物滤过磨砂 玻璃滤器，滤饼用甲苯(5ml)洗涤，将滤液真空蒸发。所得的粗产物经 柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(9∶1)，二氧化硅(15-40μm))，得到预期 产物(96mg,60％，两种非对映异构体50/50)。如此获得的产物与上面 方法获得的产物具有相同的特征。 实施例16 由实施例6得到的四氢吡喃羧酸制备(-)-_基2-甲氧羰基甲基-6,6- 二甲基-2-四氢吡喃羧酸酯：

在惰性气氛和室温下，往搅拌的实施例6得到的酸(50mg, 0.22mmol)在无水甲苯(1ml)中的混合物中加入1,3-二环己基碳二亚 胺(90mg,0.44mmol)。搅拌5分钟后，加入(-)-_醇(68mg,0.44mmol) 和吡咯烷并吡啶(64mg,0.44mmol)。在30℃搅拌1小时后在8℃搅拌 15小时(以TLC检测反应，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇；9∶1)，将该反应 混合物滤过磨砂玻璃滤器，滤饼用甲苯(5ml)洗涤，滤液真空蒸发。所 得的粗产物经柱色谱纯化(环己烷/乙酸乙酯(95∶5，然后是90∶10)，二 氧化硅(15-40μm)4g)，得到预期产物(40mg,50％，两种非对映异构 体60/40)。如此获得的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 4.68(1H,m,H-1mon)；3.64(3H,s,OCH3)；2.84 and 2.64(2d,JAB=14.6, CH2CO2)；2.83 and 2.63(2d,JAB=14.3,CH2CO2)；2.29(1H,m,H-3oq)；2.1-0.8 (m,CH and CH2)；1.21(3H,2s,CH3)；1.17 and 1.16(3H,2s,CH3)；0.9 and 0.88 (6H,2d,J=6.4,2×CH3mon)；0.74 and 0.72(3H,2d,J=6.8,CH3mon). 实施例17 由实施例6得到的四氢吡喃羧酸制备(-)-甲基扁桃酸2-甲氧羰基甲 基-6,6-二甲基-2-四氢吡喃羧酸酯：

在惰性气氛和室温下，往搅拌的实施例6得到的四氢吡喃羧酸 (226mg,0.98mmol)在无水甲苯(4ml)中的混合物中加入1,3-二环己基 碳二亚胺(261mg,1.2mmol)。搅拌5分钟后，加入扁桃酸甲酯(53mg, 0.32mmol)和吡咯烷并吡啶(47mg,0.32mmol)。在18±5℃搅拌12小时 后，将该反应混合物滤过磨砂玻璃滤器，滤饼用甲苯(5ml)洗涤，将滤 液真空蒸发。所得的粗产物经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(9∶1)，二氧 化硅(15-40μm))，得到无色油状物(64mg,17％，两种非对映异构体)。 如此获得的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (COCl3)(δppm,J Hz): 7.47(2H,m,Ph)；7.38(3H,m,Ph)；5.96(1H,s,CH)；3.73 and 3.72(3H,2s, OCH3)；3.54(3H,2s,OCH3)；2.88 and 2.72(2d,JAB=14.4,CH2CO2)；2.85 and 2.65(2d,JAB=14.2,CH2CO2)；2.35(1H,m,H-3oq)；2.0-1.15(5H,m,CH2)；1.23 and 1.22(3H,2s,CH3)；1.19 and 1.07(3H,2s,CH3).

实施例18 从实施例15得到的非对映异构体混合物分离(-)-奎宁基(quinyl) (2’R)-脱水高三尖杉酯碱酸酯和(-)-奎宁基(2’S)-脱水高三尖杉酯 碱酸酯：

将(-)-奎宁基(2’R)-脱水高三尖杉酯碱酸酯和(-)-奎宁基 (2’S)-脱水高三尖杉酯碱酸酯的非对映体混合物(5g)进行制备性 HPLC。将上述混合物溶于缓冲液(三乙胺/去离子水(1.55/1000)，并用 磷酸调至pH3)中。该溶液过滤后，注射到安装有轴流式压缩机和高 压泵的制备性高压液相色谱(固定相：正十八烷基甲硅烷，15μm，孔隙 率100,1kg；流动相：缓冲液/乙腈70/30)上。以0.2L/分的流速进 行洗脱。通过紫外检测器和TLC检测含有三尖杉碱的馏分。最终通过 HPLC检测保留的馏分，然后合并，用2.5％氨水碱化并用二氯甲烷萃取 (4×400ml)。减压浓缩后，得到相应于(-)-奎宁基(2’R)-脱水高三 尖杉酯碱酸酯和(-)-奎宁基(2’S)-脱水高三尖杉酯碱酸酯的白色结 晶固体的两种分离的异构体。如此获得的产物具有下列特征： 1)非对映异构体2’R 1R (film NaCl)(cm-1):2947；2871；1743；1626；1509. 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 8.73(1H,d,J=4.4,H-2qn),8.0(1H,d,J=9.2,H-8qn)；7.50(1H,br.s)；7.39(1H, d,J=4.5,H-3qn)；7.36(1H,dd,H-7qn)；6.39(1H,br.s)；5.88(1H,m,=CHqn)； 5.03(2H,m,=CH2qn)；3.97(3H,s,OCH3)；3.31(3H,br.s,OCH3)；3.5-1.2(m, 7×CH2+3CH)；2.86 and 2.64 (2H,2d,JAB=15.0,CH2CO2)；1.17(3H,s,CH3)； 0.99(3H,s,CH3). 2)非对映异构体2’S 1R (film NaCl)(cm-1): 2947；2871；1743；1626；1509. 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 8.74(1H,d,J=4.4,H-2qn),7.99(1H,d,J=9.2,H-8qn)；7.65(1H,br.s,H-3qn)； 7.44(1H,br.s,H-5qn)；7.36(1H,dd,J=9.2 and 2.7,H-7qn)；6.55(1H, br.s)；5.89 (1H,m,=CHqn)；5.05(2H,m,=CH2qn)；3.99(3H,s,OCH3)；3.54(3H,s,OCH3)； 3.1-1.0(m,7×CH2+3CH)；2.91 and 2.67(2H,2d,JAB=15.0,CH2CO2)；1.03 (3H,br.s,CH3)；0.44(3H,br.s,CH3). 实施例19 由实施例18得到的(-)-奎宁基(2’R)-脱水高三尖杉酯碱酸酯制备 (2R)-脱水高三尖杉酯碱酸： 1)通过氢解获得

往搅拌的(2’R)-脱水三尖杉酯碱酸奎宁基酯(100mg,0.19mmol) 的乙酸乙酯(11ml)溶液中加入10％载钯碳(40mg)。将所得混合物在室 温和氢气压下(50p.s.i.)搅拌20小时，经TLC检测后，将反应混合物 过滤，所得的有机层用饱和碳酸氢钠溶液处理。水层用乙酸乙酯洗涤， 用1N盐酸酸化后，再用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经 硫酸镁干燥并蒸发至干，得到黄色固体(20mg,50％)。如此获得的产物 表现出下列特征： [α]D20：-23(c=0.38；CHCl3). IR(NaCl膜)(cm-1)：2974；2951；1740；1718；1437. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz)：所得产物的1H NMR谱与实 施例6-1中所述相同。 2)通过全皂化，然后选择性甲基化获得

将氢氧化钾(396mg,7.1mmol)在水(8ml)中的混合物加到搅拌的 (2’R)-脱水三尖杉酯碱酸奎宁基酯(396g,0.72mmol)的乙醇(15ml)溶 液中，所得混合物在回流下搅拌24小时。在室温冷却后，真空除去乙 醇，残余物用水(10ml)处理，所得水层用乙醚萃取(4×15ml)。用2N 盐酸酸化(pH1)后，用氯化钠饱和，水层再用乙酸乙酯萃取(3× 15ml)。合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干，得到黄色固体(110mg, 72％)。如此获得的中间体二酸表现出下列特征： [α]D20：-14(c=0.54；CHCl3). IR(NaCl膜)(cm-1)：2975；2941；1716；1217. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz)：所得产物的1H NMR谱与实 施例4中所述相同。

将上述的(2R)-环状二酸(110mg,0.5mmol)和市售的三氟化硼-甲 醇复合物在甲醇中的溶液(1.1ml,BF312％w/w)的混合物在18±5℃下 搅拌15小时。将该反应混合物小心地加到饱和碳酸氢钠溶液(20ml) 中后，所得的水层用乙醚洗涤(3×15ml)，用2N盐酸酸化(pH1)，并 用乙醚萃取(3×15ml)。合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干，得 到粘稠的黄色油状物(69mg,59％)。如此获得的产物与上面的方法1) 得到的产物具有相同的特征。

实施例20 由实施例18得到的(-)-奎宁基(2’R)-脱水高三尖杉酯碱酸酯制备 (2S)-脱水高三尖杉酯碱酸： 1)通过氢解获得

往搅拌的(2’S)-脱水三尖杉酯碱酸奎宁基酯(100mg,0.19mmol) 的乙酸乙酯(11ml)溶液中加入10％载钯碳(40mg)。将所得混合物在室 温和氢气压下(50p.s.i.)搅拌20小时，经TLC检测后，将反应混合物 过滤，所得的有机层用饱和碳酸氢钠溶液处理。水层用乙酸乙酯洗涤， 用1N盐酸酸化后，再用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经 硫酸镁干燥并蒸发至干，得到黄色固体(23mg,53％)。如此获得的产物 表现出下列特征： [α]D20：+30(c=0.36；CHCl3). IR(NaCl膜)(cm-1)：2975；2951；1740；1718；1439. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz)：所得产物的1H NMR谱与实 施例6-1中所述相同。 2)通过全皂化，然后选择性甲基化获得

将氢氧化钾(430mg,7.7mmol)在水(9ml)中的混合物加到搅拌的 (2’S)-脱水三尖杉酯碱酸奎宁基酯(447g,0.81mmol)的乙醇(16ml)溶 液中，所得混合物在回流下搅拌24小时。在室温冷却后，真空除去乙 醇，残余物用水(10ml)处理，所得从水层用乙醚萃取(4×15ml)。用 2N盐酸酸化(pH1)后，用氯化钠饱和，水层再用乙酸乙酯萃取(3× 15ml)。合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干，得到黄色固体(140mg, 80％)。如此获得的环状二酸表现出下列特征： [α]D20：+8(c=0.19；CHCl3). IR(NaCl膜)(cm-1)：2975；2945；1717. 1H NMR 400 MHz(CDCl3)(δppm,J Hz)：所得产物的1H NMR谱与实 施例4中所述相同。

将上述的(2S)-环状二酸(136mg,0.62mmol)和市售的三氟化硼- 甲醇复合物在甲醇中的溶液(1.3ml,BF312％w/w)的混合物在18±5℃ 下搅拌15小时。将该反应混合物小心地加到饱和碳酸氢钠溶液(20ml) 中后，所得的水层用乙醚洗涤(3×15ml)，用2N盐酸酸化(pH1)，并 用乙醚萃取(3×15ml)。合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干，得 到粘稠的黄色油状物(81mg,63％)。如此获得的产物与上面的方法1) 得到的产物具有相同的特征。 实施例21 通过用(2R)-(+)-脱水高三尖杉酯碱酸酯化三尖杉碱制备脱水高三尖 杉酯碱：

在室温下，往搅拌的实施例19得到的半酯(R)(65mg,0.28mmol) 在无水甲苯(1ml)中的混合物中加入三乙胺(经氢氧化钾干燥的)(38μl, 0.28mmol)和2,4,6-三氯苯甲酰氯(43μl,0.28mmol)。在30℃搅拌1.5 小时后(以红外检测原料酸的消失)，加入4-二甲氨基吡啶(50mg, 0.41mmol)，使反应混合物反应5分钟，加入三尖杉碱(129mg, 0.41mmol)。在30℃搅拌18小时后，将反应混合物滤过滤纸并用乙醚 (5ml)稀释。所得的有机层顺序用水(5ml)、饱和碳酸氢钠溶液(5ml) 和水(5ml)洗涤，然后经硫酸镁干燥并真空蒸发。所得粗产物经柱色谱 纯化(二氯甲烷/甲醇(99∶1)，二氧化硅(15-40μm))，得到预期产物 (65mg,43％)。如此获得的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 6.61(1H,s,H-17*)；6.58(1H,s,H-14*)；5.92(1H,d,J3-4=9.6,H-3)；5.87 and 5.79(2H,2s,OCH2O)；5.04(1H,br.s,H-1)；3.80(1H,d,J4-3=9.2,H-4)；3.70 (3H,s,OCH3)；3.59(3H,s,OCH3)；3.12(2H,m,H-11β+H-8α)；2.95(1H,m, H-10α)；2.60(2H,m,H-8β+H-10β)；2.38(1H,m,H-11α)；2.13 and 1.66(2H, 2d,JAB=14.3,CH2CO2)；2.02(1H,m,H-6A)；1.90(1H,m,H-68)；1.76(2H,m, CH2-7)；1.8-1.2(6H,m,3×CH2)；1.10(3H,s,CH3)；1.04(3H,s,CH3). 实施例22 通过用(2S)-(+)-脱水高三尖杉酯碱酸酯化三尖杉碱制备脱水表高三 尖杉酯碱：

在室温下，往搅拌的实施例20得到的半酯(S)(87mg,0.38mmol) 在无水甲苯(1.7ml)中的混合物中加入三乙胺(经氢氧化钾干燥 的)(52μl,0.38mmol)和2,4,6-三氯苯甲酰氯(57μl,0.38mmol)。在 30℃搅拌1.5小时后(以红外检测原料酸的消失)，加入4-二甲氨基吡 啶(70mg,0.57mmol)，使反应混合物反应5分钟，加入三尖杉碱(180mg, 0.57mmol)。在30℃搅拌18小时后，将反应混合物滤过滤纸并用乙醚 (5ml)稀释。所得的有机层顺序用水(5ml)、饱和碳酸氢钠溶液(5ml) 和水(5ml)洗涤，然后经硫酸镁干燥并真空蒸发。所得从粗产物经柱色 谱纯化(二氯甲烷/甲醇(99∶1)，二氧化硅(15-40μm))，得到预期产物 (101mg,50％)。如此获得的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 6.61(1H,s,H-17*)；6.57(1H,s,H-14*)；5.84(3H,m,H-3)+OCH2O)；5.04(1H, s,H-1)；3.78(1H,d,J4-3= 9.7,H-4)；3.65(3H,s,OCH3)；3.59(3H,s,OCH3)； 3.23(1H,m,H-11β)；3.09(1H,m,H-8α)；2.93(1H,m,H-10α)；2.58(2H,m,H- 8β+H-10β)；2.39(1H,dd,JAB=14.4,J=7.0,H-11α)；2.16 and 1.83(2H,2d, JAB=14.5,CH2CO2)；2.06(1H,m,H-6A)；1.88(1H,m,H-6B)；1.74(2H,m,CH2- 7)；1.5-1.2(6H,m,3×CH2)；1.11(3H,s,CH3)；1.02(3H,s,CH3). 实施例23 由实施例21得到的脱水高三尖杉酯碱制备6’-溴-6’-脱氧-高三尖杉 酯碱：

在-10℃下，往搅拌的实施例21所得产物(60mg,0.114mmol)在无 水二氯甲烷(300μl)中的溶液中加入市售的氢溴酸的乙酸溶液(205μl, 1.02mmol,HBr 30％w/w)。在-10℃搅拌3小时后，加入饱和碳酸氢 钠溶液至pH8。所得的水层用二氯甲烷萃取三次，合并的有机层经硫 酸镁干燥并蒸发至干，得到黄色油状物(60mg,87％)。如此获得的产物 表现出下列特征： IR (ATR)(cm-1):2957；1744；1653；1487；1223. 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 6.63(1H,s,H-17*)；6.54(1H,s,H-14*)；5.99(1H,d,J3-4=9.8,H-3)；5.87(2H, m,OCH2O)；5.05(1H,s,H-1)；3.78(1H,d,J4-3=9.8,H-4)；3.69(3H,s,OCH3)； 3.58(3H,s,OCH3)；3.54(1H,s,2′-OH)；3.10(2H,m,H-11β+H-8α)；2.94(1H, m,H-10α)；2.60(2H,m,H-8β+H-10β)；2.39(1H,dd,JAB=14.0,J=6.8,H- 11α)；2.26 and 1.89(2H,2d,JAB=16.5,CH2CO2)；2.03(1H,m,H-6A)；1.91(1H, m,H-6B)；1.75(2H,m,CH2-7)；1.74(3H,s,CH3)；1.72(3H,s,CH3)；1.6-1.2 (6H,m,3×CH2). 实施例24 由实施例22得到的脱水表高三尖杉酯碱制备6’-溴-6’-脱氧-表高三 尖杉酯碱：

在-10℃下，将市售的氢溴酸的乙酸溶液(205μl,1.02mmol,HBr 30％w/w)加到搅拌的实施例22所得产物(60mg,0.114mmol)在无水二 氯甲烷(300μl)中的溶液中。在-10℃搅拌3小时后，加入饱和碳酸氢 钠溶液至pH 8。所得的水层用二氯甲烷萃取三次，合并的有机层经硫 酸镁干燥并蒸发至于，得到黄色油状物(63mg,91％)。如此获得的产物 表现出下列特征： IR (ATR)(cm-1):2957；1744；1653；1487；1223. 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 6.64(1H,s,H-17*)；6.59(1H,s,H-14*)；5.97 and 5.87(2H,2d,JAB=1.1, OCH2O)；5.95(1H,d,J3-4=9.7,H-3)；5.04(1H,s,H-1)；3.78(1H,d,J4-3=9.7, H-4)；3.67(3H,s,OCH3)；3.66(3H,s,OCH3)；3.49(1H,s,2′-OH)；3.10(2H,m, H-11β+H-8α)；2.93(1H,m,H-10α)；2.62 and 2.54(2H,2d,JAB=16.5, CH2CO2)；2.60(2H,m,H-8β+H-10β)；2.40(1H,m,H-11α)；2.03(1H,m,H-6A)； 1.89(1H,m,H-6B)；1.74(2H,m,CH2-7)；1.72(3H,s,CH3)；1.70(3H,s,CH3)； 1.6-0.7(6H,m,3×CH2). 实施例25 由实施例23得到的6’-溴-6’-脱氧-高三尖杉酯碱制备高三尖杉酯 碱： 1)方法A：

将5％碳酸氢钠溶液(3ml)加到搅拌的实施例23得到的产物(60mg, 0.099mmol)在丙酮(1.5ml)中的溶液中。在室温搅拌2小时后，真空蒸 发反应混合物，残余的水层用二氯甲烷萃取三次。合并的有机层经硫 酸镁干燥并蒸发至干。所得的粗产物(55mg)经柱色谱纯化(二氯甲烷/ 甲醇(99∶1，然后是95∶5)，二氧化硅(15-40μm)2.75g)，得到高三尖 杉酯碱(29mg,47％)。如此获得的产物表现出下列特征： [α]D20:-110(c=0,24；CHCl3) IR(film NaCl)(cm-1):3468；2961；1745；1656；1487；1224；1033. 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 6.63(1H,s,H-17*)；6.55(1H,s,H-14*)；6.01(1H,d,J3-4=9.8,H-3)；5.87(2H, m,OCH2O)；5.05(1H,s,H-1)；3.78(1H,d,J4-3=9.8,H-4)；3.68(3H,s,OCH3)； 3.58(3H,s,OCH3)；3.54(1H,s,2′-OH)；3.10(2H,m,H-11β+H-8α)；2.95(1H, m,H-10α)；2.59(2H,m,H-8β+H-10β)；2.38(1H,dd,JAB=14.0,J=6.7,H- 11α)；2.27 and 1.90(2H,2d,JAB=16.5,CH2CO2)；2.02(1H,m,H-6A)；1.90(1H, m,H-6B)；1.76(2H,m,CH2-7)；1.5-1.15(6H,m,3×CH2)；1.30(1H,s,6′-OH)； 1.19(6H,2s,2×CH3). 2)方法B：

将饱和碳酸钙溶液(3ml)加到搅拌的实施例23得到的产物(60mg, 0.099mmol)在丙酮(3ml)中的溶液中。在室温搅拌2小时后，经TLC 检测得到了方法A的产物。 3)方法C：

将饱和碳酸钡溶液(9ml)加到搅拌的实施例23得到的产物(60mg, 0.099mmol)在丙酮(3ml)中的溶液中。在室温搅拌2小时后，经TLC 检测得到了方法A的产物。 4)方法D：

往搅拌的实施例23得到的产物(60mg,0.099mmol)在丙酮/水混合 物(3/2,2.15ml)中的溶液中加入硝酸银(25mg,0.149mmol)。在室温 搅拌2小时后，经TLC检测得到了方法A的产物。 实施例26 表高三尖杉酯碱的制备： 1)由实施例24得到的6’-溴-6’-脱氧-表高三尖杉酯碱制备： a)方法A：

将5％碳酸氢钠溶液(3ml)加到搅拌的实施例24得到的产物(60mg, 0.099mmol)在丙酮(1.75mmol)中的溶液中。在室温搅拌2小时后，将 反应混合物真空蒸发，残留的水层用二氯甲烷萃取三次。合并的有机 层经硫酸镁干燥并蒸发至干。所得粗产物(60mg)经柱色谱纯化(二氯甲 烷，然后是二氯甲烷/甲醇(99∶1，然后是97∶3)，二氧化硅(15-40μm) 3g)，得到表高三尖杉酯碱(29mg,47％)。如此获得的产物表现出下列 特性： [α]D20：-92(c=0.29；CHCl3). IR(NaCl膜)(cm-1)：3514；2961；1744；1655；1488；1223；1035. 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 6.65(1H,s,H-17*)；6.60(1H,s,H-14*)；5.95(1H,d,H-3)；5.95 and 5.86(2H, 2d,OCH2O)；5.05(1H,s,H-1)；3.78(1H,d,J4-3=9.7,H-4)；3.68(3H,s,OCH3)； 3.66(3H,s,OCH3)；3.52(1H,br.s,2′-OH)；3.13(2H,m,H-11β+H-8α)；2.97 (1H,m,H-10α)；2.63(2H,m,H-8β+H-10β)；2.61 and 2.52(2H,2d,JAB=16.5, CH2CO2)；2.40(1H,dd,JAB=13.8,J=6.3,H-11α)；2.04(1H,m,H-6A)；1.94 (1H,m,H-6B)；1.78(2H,m,CH2-7)；1.45-0.7(6H,m,3×CH2)；1.16(3H,s, CH3)；1.15(3H,s,CH3). b)方法B：

将饱和碳酸钙溶液(3ml)加到搅拌的实施例24得到的产物(60mg, 0.099mmol)在丙酮(1.75mmol)中的溶液中。在室温搅拌2小时后，经 TLC检测所得的产物是方法A得到的产物。 c)方法C：

将饱和碳酸钡溶液(9ml)加到搅拌的实施例24得到的产物(60mg, 0.099mmol)在丙酮(1.75mmol)中的溶液中。在室温搅拌2小时后，经 TLC检测所得的产物是方法A得到的产物。 d)方法D：

往搅拌的实施例24得到的产物(60mg,0.099mmol)在丙酮/水混合 物(3/2,2.15mmol)中的溶液中加入硝酸银(25mg,0.149mmol)。在室 温搅拌2小时后，经TLC检测所得的产物是方法A得到的产物。 2)由实施例22得到的脱水表高三尖杉酯碱制备： 在-10℃下，往搅拌的实施例22得到的脱水表高三尖杉酯碱(58mg, 0.109mmol)在无水二氯甲烷(0.3ml)中的溶液中加入市售的氢溴酸的 乙酸溶液(0.195ml,0.98mmol,HBr 30％w/w)。在-10℃搅拌3小时后， 加入水(2.8ml)，然后使温度升至20℃。在20℃搅拌3小时后，加入 碳酸钠溶液(0.76M；6ml)直至pH8。所得的水层，用氯化钠饱和后， 用二氯甲烷萃取(3×100ml)，合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至 干，得到表高三尖杉酯碱(45mg粗品，75％)。如此获得的粗产物表现 出的特性与方法A获得的产物相同。

实施例27 通过制备性高压液相色谱由实施例25得到的高三尖杉酯碱半合成粗 品制备药用高三尖杉酯碱： 高三尖杉酯碱    表-高三尖杉酯碱 1)方法A

将高三尖杉酯碱粗品(35g)溶于缓冲液(三乙胺/去离子水 (1.55/1000)，用磷酸调至pH3)。该溶液过滤后，注射到安装有轴流 式压缩机和高压泵的制备性高压液相色谱(固定相：正十八烷基甲硅 烷，15μm，孔隙率100,1kg；流动相：缓冲液/四氢呋喃85/15)上。 以0.2L/分的流速进行洗脱。通过紫外检测器和TLC检测馏分。最终 通过HPLC检测保留的馏分，然后合并，用2.5％氨水碱化并用二氯甲 烷萃取(4×400ml)。减压浓缩后，得到浅黄色树脂状的高三尖杉酯碱， 用8/2水-甲醇混合物研制后，得到白色结晶状固体高三尖杉碱(熔 点：127℃)。HPLC纯度高于99.8％。 2)方法B

采用与方法A相同的纯化方法，但用缓冲液/甲醇(68/32)流动相 代替缓冲液/四氢呋喃。 3)方法C

采用与方法A相同的纯化方法，但用缓冲液/乙腈(85/15)流动相 代替缓冲液/四氢呋喃。

实施例28 由半纯化的天然三尖杉碱制备药用高三尖杉酯碱：

按照实施例25，由部分外消旋化的天然三尖杉碱制备高三尖杉酯 碱粗品，按照实施例27的方法A进行色谱纯化和结晶，得到非天然表 -高三尖杉酯碱对映体含量小于0.05％的高三尖杉酯碱。

实施例29 通过用苯基缩水甘油酸酯化三尖杉碱制备2’-去-(甲氧羰基甲基)- (2-0-3’)-脱氢新三尖杉酯碱或苯基缩水甘油酸三尖杉碱基酯：

往搅拌的(2R,3R)-顺-苯基缩水甘油酸(78mg,0.48mmol)在无水 甲苯(2ml)中的混合物中加入1,3-二环己基碳二亚胺(130mg, 0.63mmol)。在室温搅拌10分钟后，加入三尖杉碱(50mg,0.16mmol) 和吡咯烷并吡啶(24mg,0.16mmol)。在18±5℃搅拌15小时后(以TLC 检测反应，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇；8∶2)，将反应混合物滤过磨砂玻 璃滤器，滤饼用甲苯(5ml)洗涤，将滤液真空蒸发。所得粗产物(200mg) 经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15-40μm)4g)，得 到预期产物(19mg,27％)。如此获得的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 7.27(3H,m,Ph)；7.18(2H,m,Ph)；6.63(1H,s,H-17*)；6.40(1H,s,H-14*)； 5.96 and 5.85(2H,2d,JAB=1.5,OCH2O)；5.73(1H,d,J3-4=9.4,H-3)；5.01 (1H,s,H-1)；4.01(1H,d,J3-2=4.6,H-3′)；3.65(3H,s,OCH3)；3.62(1H,d,J4-3 =9.3,H-4)；3.40(1H,d,J2-3=4.5,H-2′)；3.27(1H,m,JAB=14.3,J=12.1 and 7.8,H-11β)；3.05(1H,m,H-8α)；2.91(1H,td,J=11.7 and 7.4,H-10α)；2.57 (2H,m,H-8β+H-10β)；2.43(1H,dd,JAB=14.5,J=7.0,H-11α)；1.93(1H,m, H-6A)；1.84(1H,m,H-6B)；1.68(2H,m,CH2-7). 实施例30 通过氢解实施例29获得的苯基缩水甘油酸三尖杉碱基酯制备2’-去- (甲氧羰基甲基)-新三尖杉酯碱：

往搅拌的实施例29得到的苯基缩水甘油酸三尖杉碱基酯(200mg, 0.433mmol)的甲醇(10ml)溶液加入10％载钯碳(100mg)。在室温下， 将所得混合物在氢气压下(50p.s.i.)搅拌4小时，将该反应混合物过 滤并蒸发至干。所得粗产物(175mg)经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇 (99∶1，然后是98∶2)，二氧化硅(15-40μm)5.5g)，得到琥珀色固体 (86mg,43％)。如此获得的产物表现出下列性质： IR(KBr片)(cm-1)：3436；2937；1747；1655；1487；1224和1035. 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 7.25(3H,m, m,p-Ph)；7.0(2H,m,o-Ph)；6.65(1H,s,H-17*)；6.63(1H,s,H- 14*)；5.98(1H,d,J3-4=9.3,H-3)；5.85(2H,2d,JAB=1.2,OCH2O)；5.09(1H,s, H-1)；4.17(1H,m,H-2′)；3.85(1H,d,J4-3=9.6,H-4)；3.71(3H,s,OCH3)；3.20 (1H,m,H-11β)；3.10(1H,m,H-8α)；2.95(1H,m,H-10α)；2.60(2H,m,H-8β+ H-10β)；2.39(2H,m,H-11α+H-3′A)；2.04(1H,m,H-6A)；2.0(1H,dd,JAB=14.3, J3B-2=9.5,H-3′B)；1.91(1H,m,H-6B)；1.77(2H,m,CH2-7).

实施例31 由实施例29获得的苯基缩水甘油酸三尖杉碱基酯制备2’R-去-(甲氧 羰基甲基)-3’S-叠氮基新三尖杉酯碱：

向搅拌的实施例29得到的苯基缩水甘油酸三尖杉碱基酯(100mg, 0.217mmol)在甲醇/水(8/1,1.27ml)中的溶液加入叠氮化钠(70mg, 1.08mmol)和甲酸甲酯(174μl,2.82mmol)。在50℃搅拌68小时后， 在室温冷却后，加入5％碳酸氢钠溶液直至pH8。将所得的水层用二 氯甲烷萃取三次，合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干。所得粗产 物(120mg)经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(99∶1)，二氧化硅(15-40μm) 3.5g)，得到粘稠黄色油状物(84mg,76％)。如此获得的产物表现出下 列特性： lR (ATR)(cm-1):3488；2935；2105；1748；1654；1486；1223；1034. 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 7.38(3H,m,m,p-Ph)；7.29(2H,m,o-Ph)；6.74(1H,s,H-17*)；6.67(1H,s,H- 14*)；6.08(1H,d,J3-4=9.8,H-3)；5.90(2H,2d,JAB=1.4,OCH2O)；5.08(1H,s, H-1)；4.07(1H,dlarge,H-2′)；3.85(1H,d,J4-3=9.7,H-4)；3.78(1H,br.s,H-3′)； 3.69(3H,s,OCH3 )；3.23(1H,m,H-11β)；3.11(1H,m,H-8α)；2.98(1H,m,H- 10α)；2.90(1H,d,J2-oH=8.2,2′-OH)；2.63(2H,m,H-8β+H-1Oβ)；2.47(1H,dd, JAB=14.2,J=6.9,H-11α)；2.05(1H,m,H-6A)；1.92(1H,m,H-6B)；1.78(2H,m, CH2-7). 实施例32 通过氢解实施例31得到的叠氮化物制备2’R-去-(甲氧羰基甲基)- 3’S-氨基-新三尖杉酯

往搅拌的实施例29得到的产物(80mg,0.158mmol)在混合的乙酸 乙酯-甲醇(9/1,10ml)中的溶液中加入10％载钯碳(40mg)。所得混合 物在室温下、氢气氛下(50p.s.i.)搅拌15小时，经TLC检测后，将反 应混合物过滤并蒸发至干，得到白色固体(67mg,88％)。如此获得的粗 产物表现出下列特性： IR (ATR) (cm-1):3299；2935；1740；1654；1486；1222 et 1034. 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 7.27(5H,m,Ph)；6.69(1H,s,H-17*)；6.67(1H,s,H-14*)；6.0(1H,d,J3-4=9.7, H-3)；5.85(2H,m,OCH2O)；5.09(1H,br.s,H-1)；4.06(1H,d,J=1.2,H-2′)； 3.86(1H,d,J4-3=9.5,H-4)；3.72(3H,s,OCH3)；3.38(1H,br.s)；3.25(1H,m, H-11β)；3.14(1H,m,H-8α)；2.99(1H,m,H-10α)；2.64(2H,m,H-8β+H-10β)； 2.49(1H,m,H-11α)；2.05(1H,m,H-6A)；1.94(1H,m,H-6B)；1.79(2H,m,CH2- 7).

实施例33 通过酯化三尖杉碱制备2’-去-(甲氧羰基甲基)-3’-羟基-新三尖杉酯 碱的缩丙酮化物：

往搅拌的亚异丙基-2,3-二羟基-3-苯基丙酸(17.5mg,0.078mmol) 在无水甲苯(1ml)中的混合物中加入1,3-二环己基碳二亚胺(25mg, 0.12mmol)。在室温搅拌10分钟后，加入三尖杉碱(75mg,0.24mmol) 和吡咯烷并吡啶(12mg,0.08mmol)。在18±5℃搅拌15小时(以TLC检 测反应，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇；8∶2)，将反应混合物滤过磨砂滤 器，滤饼用甲苯(5ml)洗涤，将滤液真空蒸发。所得粗产物经柱色谱纯 化(二氯甲烷，然后二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15-40μm))，得 到预期产物(22mg,53％)。如此获得的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 7.27(5H,Ph)；6.63,6.62,6.60 and 6.57(1H,4s,H-14*)；6.51,6.49,6.42 and 6.41(1H,4s,H-17*)；5.93(J3-4=9.6),5.89,5.43(J3-4=9.5)and 5.31(J3-4= 9.3)(1H,4d,H-3)；5.89(s),5.87+5.84(2d,JAB=1.5),5.85+5.80(2d)and 5.84+5.77(2d,JAB=1.5)(2H,OCH2O)；5.23(J5′-4′=7.3),5.20(J5′-4′=7.4), 4.58(J5′-4′=8.0) and 4.49(J5′-4′=6.2)(1H,4d,H-5′)；5.07,5.03 and 4.83(1H, 3s,H-1)；4.32(J4′-5′=7.4),4.21(J4′-5′=6.2),4.18(J4′-5′=7.4) and 3.75(1H,4d, H-4′)；3.86(J4-3=9.6),3.76 and 3.60(J4-3=9.5)(1H,4d,H-4)；3.76,3.75,3.70 and 3.43(3H,4s,OCH3)；3.3-1.6(10H,m)；1.66+1.41,1.65+1.37,1.51+ 1.44 and 1.47+1.22(6H,8s,2×CH3).

实施例34 通过酯化三尖杉碱制备N-苄基-3-苯基-氮丙啶-1-甲酸三尖杉碱基 酯：

往搅拌的(2S,3S)-顺-N-苄基-3-苯基氮丙啶-1-甲酸(360mg, 1.42mmol)在无水甲苯(5ml)中的混合物中加入1,3-二环己基碳二亚 胺(390mg,1.9mmol)。在室温搅拌5分钟后，加入三尖杉碱(150mg, 0.47mmol)和吡咯烷并吡啶(70mg,0.47mmol)。在18±5℃搅拌2小时 (以TLC检测反应，展开剂为二氯甲烷/甲醇；8∶2)，将反应混合物滤 过磨砂滤器，滤饼用甲苯(15ml)洗涤，将滤液真空蒸发。所得粗产物 (785mg)经柱色谱纯化(二氯甲烷，然后是二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧 化硅(15-40μm)23g)，得到固体(240mg,92％)。如此获得的产物表现 出下列特征： 1H NR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 7.24(10H,m,2×Ph)；6.63(1H,s,H-17*)；6.60(1H,s,H-14*)；5.85 and 5.80 (2H,2d,JAB=1.4,OCH2O)；5.64(1H,d,J3-4=9.3,H-3)；4.97(1H,s,H-1)；3.92 and 3.20(2H,2d,JAB=13.7,CH2Ph)；3.71(1H,d,J4-3=9.4,H-4)；3.56(3H,s, OCH3)；3.25(1H,m,H-11β)；3.07(1H,m,H-8α)；2.93(1H,m,H-10α)；2.86(1H, d,J3′-2′=6.8, H-3′)；2.57(2H,m,H-8β+H-10β)；2.38(1H,dd,JAB=14.4,J=7.0, H-11α)；2.07(1H,d,J2′-3′=6.8,H-2′)；1.96(1H,m,H-6A)；1.82(1H,m,H-6B)； -1.70(2H,m,CH2-7).

实施例35 通过酯化三尖杉碱制备N,O-脱水-2’-去-(甲氧羰基甲基)-3’-苯甲酰 氨基新三尖杉酯碱或N,O-脱水-N-苯甲酰基-苯基异丝氨酸三尖杉碱 基酯： 往搅拌的(4S,5R)-2,4-二苯基-4,5-二氢噁唑-5-甲酸(510mg, 1.91mmol)在无水甲苯(7ml)中的混合物中加入1,3-二环己基碳二亚 胺(525mg,2.54mmol)。在室温搅拌15分钟后，加入三尖杉碱(200mg, 0.64mmol)和吡咯烷并吡啶(95mg,0.64mmol)。在18±5℃搅拌3.5小 时(以TLC检测反应，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇；9∶1)，将反应混合物 滤过磨砂滤器，滤饼用甲苯(15ml)洗涤，将滤液真空蒸发。所得粗产 物(1g)经柱色谱纯化(二氯甲烷，然后是二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧 化硅(15-40μm))，得到黄色固体(330mg,91％)。如此获得的产物表现 出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 8.0(2H,d,J=7.3,o-PhC=N)；7.52(1H,t,J=7.4,p-PhC=N)；7.44(2H,t,J= 7.5,m-PhC=N)；7.32(2H,t,J=7.2,m-Ph)；7.26(1H,m,p-Ph)；7.15(2H,d,J =7.1,o-Ph)；6.58(1H,s,H-17*)；6.51(1H,s,H-14*)；5.98(1H,d,J3-4=9.5,H- 3)；5.85 and 5.76(2H,2d,JAB=1.3,OCH2O)；5.08(1H,s,H-1)；4.67(1H,d,J4′- 5′=5.6, H-4′)；4.52(1H,d,J5′-4′=5.6,H-5′)；3.85(1H,d,J4-3=9.6,H-4)；3.70 (3H,s,OCH3)；3.17(1H,m,H-11β)；3.08(1H,m,H-8α)；2.93(1H,m,H-10α)； 2.59(2H,m,H-8β+H-10β)；2.31(1H,dd,JAB=14.2,J=6.8,H-11α)；2.04(1H, m,H-6A)；1.91(1H,m,H-6B)；1.75(2H,m,CH2-7) 实施例36 通过酯化三尖杉碱制备N,O-甲氧基亚甲基-2’-去-(甲氧羰基甲基)- 3’-苯甲酰氨基新三尖杉酯碱或N,O-甲氧基亚甲基-N-苯甲酰基-苯基 异丝氨酸三尖杉碱基酯： 往搅拌的(4S,5R)-3-N-苯甲酰基-2-对甲氧基苯基-4-苯基噁唑烷 -5-甲酸(165mg,0.5mmol)在无水甲苯(2ml)中的混合物中加入1,3- 二环己基碳二亚胺(140mg,0.68mmol)。在室温搅拌5分钟后，加入三 尖杉碱(53mg,0.17mmol)和吡咯烷并吡啶(25mg,0.17mmol)。在18±5 ℃搅拌15小时(以TLC检测反应，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇；9∶1)，将 反应混合物滤过磨砂滤器，滤饼用甲苯(5ml)洗涤，将滤液真空蒸发。 所得粗产物(230mg)经柱色谱纯化(二氯甲烷，然后是二氯甲烷/甲醇 (98∶2)，二氧化硅(15-40μm)7g)，得到预期产物(90mg,86％)。如此 获得的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 7.66(2H,br.s,o-BzN)；7.41(4H,m,BzN+Ph)；7.32(2H,m,Ph)；7.26(2H,m, Ph)；6.56(1H,s,H-17*)；6.54(1H,s,H-14*)；5.89(1H,d,J3-4=9.5,H-3)；5.83 and 5.80(2H,2m,OCH2O)；5.76(1H,br.s,H-2′)；5.10(1H,s,H-1)；4.85(1H, br.s,H-4′)；4.42(1H,br.s, H-5′)；3.84 (1H；d,J4-3=9.5,H-4)；3.72(3H,s, OCH3)；3.28(3H,br.s, 2′-OCH3)；3.19(1H,m,H-11β)；3.09(1H,m,H-8α)；2.93 (1H,m,H-10α)；2.60(2H,m,H-8β+H-10β)；2.37(1H,dd,JAB=14.4,J=6.6, H-11α)；2.03(1H,m,H-6A)；1.90(1H,m,JAB=12.2,J=7.8 and 4.4,H-6B)；1.76 (2H,m,CH2-7). 实施例37 2’-去-(甲氧羰基甲基)-3’-苯甲酰氨基新三尖杉酯碱或N-苯甲酰基- 苯基异丝氨酸三尖杉碱基酯的制备： 1)通过酸水解实施例35得到产物制备：

在室温下，往搅拌的实施例35得到的(4S,5R)-2,4-二苯基-4,5- 二氢噁唑-5-甲酸三尖杉碱基酯(300mg,0.53mmol)在混合的甲醇/四 氢呋喃50/50(10ml)中的溶液中加入1N盐酸(3.2ml)。在18±5℃搅拌 3小时后(以TLC检测反应)，加入饱和碳酸氢钠溶液(19ml)和混合的 甲醇/四氢呋喃50/50(50ml)。在18±5℃搅拌20小时后(以TLC检测 反应)，将反应混合物用乙酸乙酯和水处理。所得的水层用乙酸乙酯萃 取，合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干。所得的粗产物(170mg) 经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，(15-40μm)8g)，得到白色固 体(180mg,58％；HPLC纯度为92.3％)。如此获得的产物表现出下列特 征：[α]D20:-119,2(c=0,141；CHCl3) 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(δppm,J Hz): 7.75(2H,d,J=7.3,o-BzN)；7.51(1H,t,J=7.3,p-BzN)；7.13(2H,t,J=7.3, m-BzN)；Ph)；7.27(5H,m,Ph)；6.88(1H,d,J3′-NH=7.9,3′-NH)；6.59(1H,s,H- 17*)；6.57(1H,s,H-14*)；5.93(1H,d,J3-4=9.7,H-3)；5.78 and 5.69(2H,2d, JAB=1.5,OCH2O)；5.06(1H,s,H-1)；4.98(1H,dd,J3′-NH=7.9,H-3′)；4.22(1H, br.s,H-2′)；3.81(1H,d,J4-3=9.6,H-4)；3.58(3H,s,OCH3)；3.19(1H,m,J= 12.8,7.9,H-11b)；3.07(1H,m,H-8a)；2.93(1H,m,H-10a)；2.72(1H,br.s,2′- OH),2.58(2H,m,H-8b+H-10b)；2.43(1H,dd,JAB=14.2,J=7.0,H-11a)；2.01 (1H,m,H-6A)；1.88(1H,m,JAB=12.0,J=7.8,3.8,H-68)；1.75(2H,m,CH2-7). 2)通过实施例32所得产物的酰胺化制备

往搅拌的实施例32得到的产物(60mg,0.125mmol)在乙酸乙酯 (850μl)中的溶液中加入饱和碳酸氢钠溶液(850μl)和苯甲酰氯(19μl, 0.163mmol)。在反应期间形成白色沉淀。在室温搅拌1小时后，反应 混合物用乙酸乙酯稀释，有机层用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。所得的水 层用乙酸乙酯萃取三次，合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干。所 得的粗产物(65mg)经柱色谱纯化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅 (15-40μm)2.5g)，得到白色固体(4mg,56％)。如此获得的产物表现 出与上述方法获得的产物相同的特性。 实施例38

通过实施例32所得产物的酰胺化制备N-叔丁氧基氨基甲酰基- 2’-去-(甲氧羰基甲基)-3’-氨基新三尖杉酯碱或N-叔丁氧基氨基甲 酰基-苯基异丝氨酸三尖杉碱基酯：

往搅拌的实施例32得到的产物(60mg,0.125mmol)在乙酸乙酯 (850μl)中的溶液中加入饱和碳酸氢钠溶液(850μl)和二叔丁基二碳 酸酯(27ml,0.125mmol)。在室温搅拌1小时后，反应混合物用二氯甲 烷稀释，有机层用盐水洗涤。所得的水层用二氯甲烷萃取三次，合并 的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干。所得的粗产物(70mg)经柱色谱纯 化(二氯甲烷/甲醇(98∶2)，二氧化硅(15-40μm)3g)，得到白色固体 (40mg,55％)。如此获得的产物表现出与上述方法获得的产物相同的特 性。 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(ppm,J Hz): 7.27(3H,m,m,p-Ph)；6.94(2H,d,J=6.6,o-Ph)；6.71(1H,s,H-17*)；6.66(1H, s,H-14*)；6.01(1H,d,J3-4=9.7,H-3)；5.90(2H,s,OCH2O)；5.06(1H,s,H-1)； 5.05(1H,m,NH)；4.56(1H,m,H-3′)；4.15(1H,m,H-2′)；3.81(1H,d,J4-3=9.7, H-4)；3.69(3H,s,OCH3)；3.19(1H,m,H-11β)；3.10(1H,m,H-8α)；2.93(1H, m,H-10α)；2.61(2H,m,H-8β+H-1Oβ)；2.51(1H,m,H-11α)；2.05(1H,m,H- 6A)；1.89(1H,m,H-6B)；1.77(2H,m,CH2-7)；1.44(9H,s,OC(CH3)3). 实施例39 2-甲氧羰基甲基-2-羟基-6-甲基庚-5-烯酸叔丁酯的制备： 1)中间体草酸酯的制备

将5-溴-2-甲基戊-2-烯(1.34g,8.2mmol)滴加到搅拌的镁(240mg, 10mmol)(进一步用结晶碘活化的)在无水四氢呋喃(8ml)中的混合物 中。在剧烈加热下，反应开始，并使反应混合物回流。保持回流直至 大多数镁已经反应，用无水四氢呋喃(16ml)稀释该反应混合物。在-78 ℃下，20分钟内往搅拌的草酸叔丁基乙基酯(1.4g,8mmol)在无水四 氢呋喃(8ml)中的搅拌混合液中加入所得的格氏试剂。在2小时内使温 度升至-15℃，用1N盐酸溶液使该混合物中止反应。分离的有机层用 盐水洗涤三次，经硫酸镁干燥并蒸发至干。所得粗产物(2g)经柱色谱 纯化(环己烷/乙酸乙酯(98∶2),(15-40μm)80g)，得到油状物(660mg, 39％)。中间体α-酮酯表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(ppm,J Hz): 5.08(1H,m,H-5)；2.80(2H,t,J=7.3,CH2-3)；2.28(2H,m,CH2-4)；1.68(3H s,CH3)；1.62(3H,s,CH3)；1.54(9H,s,O-tertBu). 2)标题化合物的制备

在-78℃下，用1分钟将无水乙酸甲酯(0.7ml,8.75mmol)加到搅 拌的1M二-(三甲基甲硅烷基氨基)锂的四氢呋喃溶液(9ml,9mmol)中 并使反应在-78±5℃下反应20分钟。在-78℃下，用5分钟往搅拌下的 上面制备的2-氧代-6-甲基庚-5-烯酸叔丁酯(640mg,3mmol)在无水四 氢呋喃(10ml)中的混合物中加入烯醇锂，并将所得混合物在-78±5℃搅 拌30分钟。以TLC检测后，移走冷却浴，用15％氯化铵溶液(10ml) 使混合物失活。分离的有机层用15％氯化铵溶液(10ml)洗涤并蒸发至 干。水层用乙醚萃取(2×10ml)。将有机层与浓缩物合并并用盐水(10ml) 洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发至干。所得的粗产物(1.3g)经柱色谱纯化 (环己烷/乙酸乙酯(95∶5)，二氧化硅(15-40μm),60g)，得到油状物 (222mg,26％)。如此得到的产物表现出下列特征： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(ppm,J Hz): 5.07(1H,m,HC=)；3.67(3H,s,OCH,)；3.66(1H,s,OH)；2.86 et 2.67(2H,2d, JAB=15.8 CH2CO2)；2.13(1H,m,CH,)；1.85(1H,m,CH,)；1.67(3H,s,CH3,)et (2H,m,CH,)；1.59(3H,s,CH3)；1.51(9H.s,tert-BuO). 实施例40 2-N-[(4’S)-异丙基-2’-噁唑烷-1-基]羰基甲基-2-羟基-6-甲基庚- 5-烯酸乙酯的制备：

在-78℃下，将市售的1M二-(三甲基甲硅烷基氨基)锂的四氢呋喃 溶液(1.28ml,1.28mmol)加到(4S)-3-乙酰基-4-异丙基-2-噁唑烷酮 (200mg,1.17mmol)的无水四氢呋喃溶液中，使该反应在-78℃进行30 分钟。然后加入2-氧代-6-甲基庚-5-烯酸乙酯(323mg,1.75mmol)的 无水四氢呋喃(5ml)溶液并将所得混合物在-78℃下搅拌1小时。经TLC 检测后，反应混合物用15％氯化铵溶液(5ml)灭活。分离的有机层用 15％氯化铵溶液(10ml)洗涤，然后用盐水(10ml)洗涤，经硫酸镁干燥 并蒸发至干。该粗产物的1H NMR谱显示为非对映异构体混合物(约 2.5/1)。所得的粗产物(516mg)经柱色谱纯化(环己烷/乙酸乙酯(90∶10 到80∶20)，二氧化硅(15-40μm)25g)，得到黄色油状的低含量非对映 异构体(55mg.13.7％)，表现出下列特性： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(ppm,J Hz): 5.06(1H,m,H-3′)；4.41(1H,m,H-4″)；4.25(4H,m,CH2-5″and OCH2CH3)；3.72 (1H,s,OH)；3.52 and 3.41(2H,2d,JAB=17.9,CH2-3)；2.36(1H,m,H-6″)；2.16 (1H,m,CH2′)；1.92(1H,m,CH2′)；1.75(2H,m,CH2′)；1.67(3H,s,CH3′)；1.59 (3H,s,CH3′)；1.30(3H,t,J=7.1,OCH2CH3)；0.89(3H,d,J=7.0,CH3″)；0.87 (3H,d,J=6.9,CH3″). 高含量的非对映异构体为浅黄色油状物(93mg,23.2％)，表现出下列特 性： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(ppm,J Hz): 5.06(1H,m,H-3′)；4.40(1H,m,H-4″)；4.23(4H,m,CH2-5″and OCH2CH3)； 3.68 (1H,s,OH)；3.46(2H,s,CH2-3)；2.33(1H,m,H-6″)；2.16(1H,m,CH2′)；1.91 (1H,m,

CH2′)；1.75(2H,m,CH2′)；1.67(3H,s,CH3′)；1.59(3H,s,CH3)；1.28 (3H,t,J=7.1 OCH2CH3)；0.90(3H,d,J=7.0,CH3″)；0.87(3H,d,J=6.9, CH3″). 实施例41 2-(1’R,2’S,5’R)-_氧基羰基甲基-2-羟基-6-甲基庚-5-烯酸乙酯 的制备：

在-78℃下,往市售的1M二-(三甲基甲硅烷基氨基)锂的四氢呋喃 溶液(14ml,14mmol)加入(1R,2S,5R)-(-)-乙酸_基酯(2.8g, 14.1mmol)中，使该反应在-78℃进行30分钟。在-78℃下，用15分钟 往搅拌的上面制备的2-氧代-6-甲基庚-5-烯酸乙酯(867mg,4.7mmol) 在无水四氢呋喃(12ml)中的混合物中加入烯醇锂并将所得混合物在- 78℃下搅拌3分钟(TLC检测)。该反应混合物用1N盐酸(30ml)灭活。 分离的水层用叔丁基甲基醚萃取(2×15ml)，合并的有机层用盐水(3× 15ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发至干。该粗产物的1H NMR谱显示出 为非对映异构体混合物(约6/4)。所得的粗产物经柱色谱纯化(环己烷 /乙酸乙酯(98∶2)，二氧化硅(15-40μm)70g)，得到预期产物(1g, 57％)。如此获得的分离的非对映异构体表现出下列特性： 高含量非对映异构体： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(ppm,J Hz): 5.03(1H,t,J=7.0,H-3′)；4.69(1H,td,J=10.9 and 4.3,H-1Men)；4.24(2H,q, J=7.0,OCH2CH3)；3.77(1H,s,2-OH)；2.91 and 2.67(2H,2d,JAB=16.4, CH2CO2)；2.13(1H,m,CH′)；1.97(1H,m,H-6eqMen)；1.85(2H,m,CH′and H- 7Men)；1.75-1.6(4H,m,CH2′and H-3eq,4eqMen)；1.67(3H,s,CH3′)；1.58(3H,s, CH3′)；1.45(1H,m,H-5Men)；1.35(1H,m,H-2axMen)；1.30(3H,t,J=6.9, OCH2CH3)；1.03(1H,m,H-3axMen)；0.93(1H,m,H-6axMen)；0.89(6H,d,J=6.8, 2×CH3(Men))；0.87(1H,m,H-4axMen)；0.73(3H,d,J=6.9,CH3(Men)). 低含量非对映体： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(ppm,J Hz): 5.05(1H,t,J=7.0,H-3′)；4.67(1H,td,J=10.7 and 4.7,H-1Men)；4.25(2H,m, OCH2CH3)；3.74(1H,s,2-OH)；2.92 and 2.65(2H,2d,JAB=15.9,CH2CO2)； 2.12(1H,m,CH′)；1.97(1H,m,H-6eqMen)；1.86(2H,m,CH′and H-7Men)；1.75- 1.6(4H,m,CH2′and H-3eq,4eqMen)；1.67(3H,s,CH3′)；1.58(3H,s,CH3′)；1.48 (1H,m,H-5Men)；1.36(1H,m,H-2axMen)；1.31(3H,t,J=7.0,OCH2CH3)；1.15 -0.8(3H,m,H-3ax,6ax,4axMen)；0.89(6H,d,J=6.9,2×CH3(Men))；0.76(3H,d, J=7.0,CH3(Men)). 实施例42 2-[(R)-1’,2’,2’-三苯基-乙-2’-醇]乙氧羰基甲基-2-羟基-6-甲基 庚-5-烯酸乙酯的制备：

在-78℃下，将市售的1M二-(三甲基甲硅烷基氨基)锂的四氢呋喃 溶液(6ml,6mmol)加到搅拌的R-(+)-1,1,2-三苯基-1,2-乙二醇2-乙 酸酯(665mg,2mmol)的无水四氢呋喃(6ml)溶液中。用3小时时间，使 温度升至0℃，然后加入无水庚烷(10ml)。在-78℃下，往该反应混合 物中加入2-氧代-6-甲基庚-5-烯酸乙酯(368mg,2mmol)的无水四氢呋 喃(2ml)溶液并用1小时时间使温度升至-40℃。以TLC检测后，移走 冷却浴，用15％氯化铵溶液(10ml)使该混合物失活。分离的有机层用 15％氯化铵溶液(10ml)洗涤并蒸发至干。水层用二氯甲烷萃取(2x l0ml)。将有机层与浓缩物合并并用盐水(10ml)洗涤，经硫酸镁干燥并 蒸发至干。1H NMR谱显示该粗产物为非对映异构体混合物(约60/40)。 所得的粗产物(820mg)经柱色谱纯化(环己烷/乙酸乙酯(97∶3- 95∶5)，二氧化硅(15-40μm)80g)，得到预期产物(36lmg,35％)。如 此获得的分离的非对映异构体表现出下列特性： 低含量非对映异构体： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(ppm,J Hz): 7.66(2H,d,J=7.5,o-Ph)；7.43(2H,t,J=7.7,m-Ph)；7.35-7.0(11H,m,Ph)； 6.72(1H,s,H-1′)；4.95(1H,m,H-3′)；4.41(2H,m,OCH2CH3)；3.42(1H,s,2- OH)；2.90 and 2.67(2H,2d,JAB=16.5,CH2-3)；2.53(1H,s,2″-OH)；1.98(1H, m,CH2)；1.8-1.5(3H,m,CH2)；1.63(3H,s,CH3)；1.52(3H,s,CH3)；1.38(3H, t,J=7.1,OCH2CH3). 高含量非对映体： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(ppm,J Hz): 7.52(2H,d,J=7.5,o-Ph)；7.36(2H,t,J=7.6,m-Ph)；7.27(1H,t,J=7.3,p- Ph)；7.2-7.0(10H,m,Ph)；6.59(1H,s,H-1″)；4.98(1H,m,H-3′)；3.90  and 3.34 (2H,2m,OCH2CH3)；3.56(1H,s,2-OH)；3.22(1H,s,2″-OH)；2.88 and 2.69 (2H,2d,JAB=16.7,CH2-3)；2.06 and 1.79(2H,2m,CH2)；1.7-1.5(2H,m,CH2)； 1.64(3H,s,CH3)；1.54(3H,s,CH3)；0.99(3H,t,J=7.1,OCH2CH3). 实施例43 2-[(R)-1’,2’,2’-三苯基-乙-2’-醇]乙氧羰基甲基-2-羟基-6-甲基 庚-5-烯酸叔丁酯的制备：

在-78℃下，将市售的1M二-(三甲基甲硅烷基氨基)锂的四氢呋喃 溶液(3ml,3mmol)加到搅拌的R-(+)-1,1,2-三苯基-1,2-乙二醇2-乙 酸酯(330mg,1mmol)的无水四氢呋喃(3.5ml)溶液中。用3小时时间， 使温度升至-10℃，然后加入无水庚烷(5ml)。在-78℃下，往该反应混 合物中加入2-氧代-6-甲基庚-5-烯酸叔丁基(276mg,1.5mmol)的无水 四氢呋喃(2ml)溶液并用1小时时间使温度升至-40℃。以TLC检测后， 移走冷却浴，用15％氯化铵溶液(5ml)使该混合物失活。分离的有机 层用15％氯化铵溶液(5ml)洗涤并蒸发至干。水层用二氯甲烷萃取(2x 10ml)。将有机层与浓缩物合并并用盐水(10ml)洗涤，经硫酸镁干燥并 蒸发至干。1H NMR谱显示该粗产物为非对映异构体混合物(约75/25)。 所得的粗产物(550mg)经柱色谱纯化(环己烷/乙酸乙酯(96∶4,95∶5, 然后是90∶10)，二氧化硅(15-40μm)60g)，得到预期产物(217mg, 40％)。如此获得的白色结晶的高含量非对映异构体表现出下列特性： 1H NMR 400 MHz (CDCl3)(ppm,J Hz): 7.53(2H,d,J=7.4,o-Ph)；7.36(2H,t,J=7.6,m-Ph)；7.28(1H,t,J=7.3,p- Ph)；7.2-7.0(10H,m,Ph)；6.66(1H,s,H-1″)；5.00(1H,m,H-3′)；3.50(1H,s, 2-OH)；2.94(1H,s,2″-OH)；2.76 and 2.61(2H,2d,JAB=16.3,CH2-CO2)；2.06 and 1.78(2H,2m,CH2)；1.65(3H,s,CH3)；1.55(3H,s,CH3 and 2H,m, CH2)；1.23(9H,s,tert-BuO). 实施例44 2-羧甲基-6,6-二甲基-2-四氢吡喃羧酸或O-去甲基脱水高三尖杉酯 碱酸的制备： (方法D)

将实施例3得到的乙烯型二酸(1.5g,6.94mmol)的甲酸(2.6ml) 溶液在60℃下搅拌16小时。温度回至室温后，真空除去甲酸，在40 ℃将所得粗产物真空干燥20小时(1.5g,100％)。 实施例45 由实施例39得到的产物制备2-甲氧羰基甲基-6,6-二甲基-2-四氢吡 喃羧酸或脱水高三尖杉酯碱酸：

将实施例39得到的2-甲氧羰基甲基-2-羟基-6-甲基庚烯酸叔丁 酯(50mg,0.175mmol)的甲酸(0.5ml)溶液在室温搅拌9天。真空除去 甲酸后，残余物用5％碳酸氢钠溶液处理直至pH 8。水层用乙酸乙酯 洗涤后，用1N盐酸酸化(pH1)，再用乙酸乙酯萃取。有机层经硫酸镁 干燥并蒸发至干，得到脱水高三尖杉酯碱酸(20mg,50％)。 实施例46 由粗榧属的总生物碱提取物制备纯净(-)三尖杉碱

部分外消旋的三尖杉碱[H Wenkui；L.Yulin；P.Xinfu, Scientia Sinica,；23；7；835(1980)]

两批三尖杉碱(在如上的相同条件下提取的)的1H NMR(用旋光活性 的NMR位移试剂三-[3-(七氟丙基羟基亚甲基)-(+)-樟脑酸铕(Ⅲ)(1 当量))结果如下： A批：1H NMR 400MHz(CDCl3)(δppm)：6.06(1H,OCH2O(+)-三尖杉 碱)和5.82(1H,OCH2O(+)-三尖杉碱)；5.99(1H,OCH2O(-)-三尖杉 碱)和5.76(1H,OCH2O(-)-三尖杉碱)。 含11±5％的(+)-三尖杉碱。 [α]22=-134.0°(c=0.214；CHCl3)：计算比率25±5％ B批：略微外消旋化(1％) [α]19=-173.3°(c=0.208；CHCl3) 天然三尖杉碱的对映体富集：

在55℃下，将色谱粗分的三尖杉碱(20g)溶于干燥的甲醇(100ml) 中。通过用旋转蒸发仪冷却产生结晶，过滤后得到产物，经HPLC分析 纯度为99.9％，[α]22D=-130°(C1；CHD3)(相应于10％的外消旋化)。 将如此获得的结晶产物(20g)再次溶于热的甲醇(100ml)中。

将该溶液缓慢地冷却，产生纯对映体(-)-三尖杉碱构成的透明棱 晶，[α]20D=-185°(C1；CHCl3)。过滤后，在室温缓慢地蒸发母液， 获得仅由外消旋三尖杉碱构成的双针晶，[α]20D=0.5°(C1；CHCl3)。 过滤后，由第二次母液得到了(-)-三尖杉碱构成的棱晶(与第一次结晶 时得到的相同)。过滤后，第三次母液仍能得含(±)-三尖杉碱的双针晶 (urchins)。

将该循环过程重复三次。合并的棱晶进行一次重结晶，得到对映 体纯的(-)-三尖杉碱，合并的双针晶以相同方式处理得到100％外消 旋的三尖杉碱。 对映体纯形式的天然三尖杉碱的化学评价：

通过使用实施例19得到的纯的(2R)-高三尖杉酯碱酸，将部分外 消旋的天然三尖杉碱样品用于下述方法中，其反应顺序描述于实施例 1、2、3、4、5、6、15、19和21中。如此获得的脱水高三尖杉酯碱 的非对映异构体混合物的HPLC分析显示出有明显量的对映表-高三尖 杉酯碱(11％±3％)(对应于外消旋混合物原料中含有的(+)-三尖杉碱) 存在(已证实高三尖杉酯碱酸的两种对映体是以化学计量方式进行反 应的(可与对映体纯形式的三尖杉碱相比))。

实施例47 由脱水高三尖杉酯碱制备高三尖杉酯碱： 1)方法A

在-10℃下，将市售的氢溴酸的乙酸溶液(17.4ml,86.6mmol,HBr 30％w/w)加到搅拌的实施例21得到的脱水高三尖杉酯碱(50.8g, 9.63mmol)的无水二氯甲烷(25.6ml)溶液中。在-10℃搅拌3小时后， 加入水(240ml)。该反应混合物变得粘稠。使温度升至室温并搅拌2.5 小时后，加入0.76 M碳酸钠(406ml)直至pH8。所得水层用氯化钠饱 和，然后用二氯甲烷萃取(3×230ml)，合并的有机层经硫酸镁干燥并 蒸发至干，得到泡沫物。经下述的反相色谱纯化后，得到4.03g高三 尖杉酯碱(77％)。如此获得的产物与实施例25获得的产物表现出相同 的特性。 2)方法B

在-10℃下，往搅拌的实施例21得到的脱水高三尖杉酯碱(214mg, 0.406mmol)的无水二氯甲烷(1.1ml)溶液中加入市售的氢溴酸的乙酸 溶液(0.728ml,3.6mmol,HBr 30％w/w)。在-10℃搅拌3小时后，加 入水(13ml)，然后使反应升至20℃。在20℃搅拌3小时后，加入碳酸 钠溶液(0.76M；31.5ml)直至pH8。所得的水层用氯化钠饱和后，用 二氯甲烷萃取(3×20ml)，合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发至干。 所得粗产物经下述反相色谱纯化后，得到高三尖杉酯碱(166mg, 75％)。如此获得的产物与实施例25得到的产物表现出相同特性。