基于适配体的微流控滤纸芯片传感器及其制备方法
阅读：197发布：2023-03-01
专利汇可以提供基于适配体的微流控滤纸芯片传感器及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本公开提供一种基于适配体的微流控 滤纸 芯片 传感器 及其制备方法，所述传感器包括：进样区，包括依次相连的进样孔，微流控通道，以及过滤孔；扩散及反应区，位于所述进样区下，包括一与所述过滤孔对应的扩散滤孔，以及多个反应区，所述多个反应区分别通过扩散微流控通道与所述扩散滤孔相连；所述扩散及反应区用于将经过过滤孔过滤后的待测样品扩散到所述多个反应区；工作 电极 区，位于所述扩散及反应区下，包括多个分别与所述多个反应区对应的 工作电极 ，所述工作电极上设置有纳米 复合材料 以及适配体；以及 对电极 和参比电极区，位于所述扩散及反应区上，包括多组分别与所述多个反应区对应的对电极和参比电极组。，下面是基于适配体的微流控滤纸芯片传感器及其制备方法专利的具体信息内容。
1.一种基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，包括：
进样区，包括依次相连的进样孔，微流控通道，以及过滤孔；待测样品由所述进样孔进入，通过微流控通道进入过滤孔进行过滤；
扩散及反应区，位于所述进样区下，包括一与所述过滤孔对应的扩散滤孔，以及多个反应区，所述多个反应区分别通过扩散微流控通道与所述扩散滤孔相连；所述扩散及反应区用于将经过过滤孔过滤后的待测样品扩散到所述多个反应区；
工作电极区，位于所述扩散及反应区下，包括多个分别与所述多个反应区对应的工作电极，所述工作电极上设置有纳米复合材料以及适配体；以及
对电极和参比电极区，位于所述扩散及反应区上，包括多组分别与所述多个反应区对应的对电极和参比电极组。
2.根据权利要求1所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，所述每组对电极和参比电极组包括一对电极，以及一参比电极。
3.根据权利要求1所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，所述工作电极的制备材料包括：碳浆、纳米复合材料、适配体、以及巯基乙醇溶液。
4.根据权利要求3所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，所述巯基乙醇溶液封闭所述工作电极上多余的活性位点。
5.根据权利要求1所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，所述纳米复合材料包括：导电物质、电活性物质和纳米金。
6.根据权利要求5所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，所述导电物质包括：氨基化单壁碳纳米管、氨基化石墨烯、多壁碳纳米管或聚3，4乙烯二氧噻吩中至少一种。
7.根据权利要求5所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，所述电活性物质包括：
硫堇、新亚甲基蓝、对苯二酚、普鲁士蓝、聚谷氨酸或铁氰化钾中至少一种。
8.根据权利要求1所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，所述待测样品包括：性激素、蛋白质、细胞、病毒、维生素或过敏原。
9.一种基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的制备方法，用于制备权利要求1至8任一项所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，所述制备方法，包括：
步骤S1：根据待检测物特点选取适合的滤纸；
步骤S2：按设计图在所述滤纸上制备疏水区，剩余部分为亲水区；所述亲水区包括进样区、扩散及反应区、工作电极制备区、对电极制备区和参比电极制备区；
步骤S3：在步骤S2所制备的工作电极制备区制备工作电极，完成工作电极区的制备；
步骤S4：在步骤S2所制备的对电极制备区和参比电极制备区制备对电极和参比电极，完成对电极和参比电极区的制备，进而完成了基于适配体的微流控滤纸芯片的制备；以及步骤S5：将所述基于适配体的微流控滤纸芯片按进样区在表面，扩散及反应区位于工作电极区和对电极和参比电极区中间的形式设置，完成基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的制备。
10.根据权利要求9所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的制备方法，所述步骤S3包括：
步骤S31：在工作电极所对应的对工作电极制备区印刷导电碳浆；
步骤S32：在所述导电碳浆上修饰纳米复合材料；以及
步骤S33：在所述纳米复合材料上制备适配体，并使用巯基乙醇溶液进行封闭，完成工作电极的制备。
11.一种基于适配体的微流控滤纸芯片，其通过折叠或堆叠后对待测样品中不同目标靶物质同时进行测试，所述基于适配体的微流控滤纸芯片包括进样区、扩散及反应区、工作电极区、以及对电极及参比电极区。
基于适配体的微流控滤纸芯片传感器及其制备方法
技术领域
背景技术
[0002] 适配体是指一小段利用指数富集的配体进化技术(SELEX)从特定的寡核苷酸库中筛选出能与靶分子特异性结合寡核苷酸(DNA或RNA)。一共有两种类型，分别是反义核苷酸链与随机核苷酸链。反义核苷酸链通常包含15-20个核苷酸，其碱基组成与对应的靶序列互补。然而在实际应用中，反义核苷酸存在诸如容易被核酸酶降解、对特定靶位点识别性较弱以及存在一定毒性等多个问题。在反义核苷酸链基础上发展而来的是随机核苷酸链，相较于反义核苷酸链，随机核苷酸链作用的靶序列不仅包括核酸，还包括了诸如蛋白质，细胞，病毒，维生素和过敏原等。而且它的长度一般为10～100，通过链内一些互补碱基的配对、静电作用或者氢键作用形成稳定的三维结构，与靶分子的结合更加具有特异性且更加稳定。
[0003] 适配体具有很多与抗体相似的性质，并且相较于抗体有其优点如下：1)相较于抗体，适配体更容易获得，通过指数富集的配基系统进化技术可以快速在体外大量合成，成本更加低廉；2)适配体稳定性更高，而且没有免疫原性，在室温下即可保存，这对它的储存提供了极大的便利；3)可以针对不同种类的许多目标，可以筛选出与目标靶对应的适配体，这个性质极大地拓宽了适配体的应用范围；4)适配体对目标靶分子具有与抗体相当甚至更高的亲和性。
[0004] 医院中检测的性激素六项包括雌二醇(E2)、孕酮(P)、卵泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、催乳激素(PRL)。其中FSH的功能主要是促进女性卵巢中卵泡的发育和成熟；E2的功能主要体现在两方面，分别是促使子宫内膜增殖和促进女性第二特征的发育；而LH的功能分别是促使排卵和与FSH协同作用形成黄体并分泌孕激素。但是目前对于性激素的检测存在如下问题：1)性激素在体内含量非常低，因此所制备的传感器很难解决超痕量性激素的定量检测、纳米材料的制备与修饰等科学问题；2)目前采用免标记电化学快速检测方法的纸芯片在使用时都直接滴加样品到电极上，这种方式的用样量太大。尤其是在多参数检测时，需要解决降低所需的样品量，避免不同参数检测时的相互干扰等科学问题。
[0005] 公开内容
[0006] (一)要解决的技术问题
[0007] 基于上述问题，本公开提供了一种基于适配体的微流控滤纸芯片传感器及其制备方法，以缓解现有技术中的检测传感器很难解决超痕量性激素的定量检测、纳米材料的制备与修饰等科学问题，以及检测样品用量大，不同参数检测时相互干扰等技术问题。
[0008] (二)技术方案
[0009] 本公开的一个方面，提供一种基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，包括：进样区，包括依次相连的进样孔，微流控通道，以及过滤孔；待测样品由所述进样孔进入，通过微流控通道进入过滤孔进行过滤；扩散及反应区，位于所述进样区下，包括一与所述过滤孔对应的扩散滤孔，以及多个反应区，所述多个反应区分别通过扩散微流控通道与所述扩散滤孔相连；所述扩散及反应区用于将经过过滤孔过滤后的待测样品扩散到所述多个反应区；工作电极区，位于所述扩散及反应区下，包括多个分别与所述多个反应区对应的工作电极，所述工作电极上设置有纳米复合材料以及适配体；以及对电极和参比电极区，位于所述扩散及反应区上，包括多组分别与所述多个反应区对应的对电极和参比电极组。
[0010] 在本公开实施例中，所述每组对电极和参比电极组包括一对电极，以及一参比电极。
[0012] 在本公开实施例中，所述巯基乙醇溶液封闭所述工作电极上多余的活性位点。
[0013] 在本公开实施例中，所述纳米复合材料包括：导电物质、电活性物质和纳米金。
[0016] 在本公开实施例中，所述待测样品包括：性激素、蛋白质、细胞、病毒、维生素或过敏原。
[0017] 在本公开的另一方面，提供一种基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的制备方法，用于制备以上任一项所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，所述制备方法，包括：
[0018] 步骤S1：根据待检测物特点选取适合的滤纸；
[0019] 步骤S2：按设计图在所述滤纸上制备疏水区，剩余部分为亲水区；所述亲水区包括进样区、扩散及反应区、工作电极制备区、对电极制备区和参比电极制备区；
[0020] 步骤S3：在步骤S2所制备的工作电极制备区制备工作电极，完成工作电极区的制备；
[0021] 步骤S4：在步骤S2所制备的对电极制备区和参比电极制备区制备对电极和参比电极，完成对电极和参比电极区的制备，进而完成了基于适配体的微流控滤纸芯片的制备；以及
[0022] 步骤S5：将所述基于适配体的微流控滤纸芯片按进样区在表面，扩散及反应区位于工作电极区和对电极和参比电极区中间的形式设置，完成基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的制备。
[0023] 在本公开实施例中，所述步骤S3包括：
[0024] 步骤S31：在工作电极所对应的对工作电极制备区印刷导电碳浆；
[0025] 步骤S32：在所述导电碳浆上修饰纳米复合材料；以及
[0026] 步骤S33：在所述纳米复合材料上制备适配体，并使用巯基乙醇溶液进行封闭，完成工作电极的制备。
[0027] 在本公开的又一方面，提供一种基于适配体的微流控滤纸芯片，其通过折叠或堆叠后对待测样品中不同目标靶物质同时进行测试，所述基于适配体的微流控滤纸芯片包括进样区、扩散及反应区、工作电极区、以及对电极及参比电极区。
[0028] (三)有益效果
[0029] 从上述技术方案可以看出，本公开基于适配体的微流控滤纸芯片传感器及其制备方法至少具有以下有益效果其中之一或其中一部分：
[0030] (1)实现进样、过滤、检测等功能于一体，极大地简化了传感器的操作流程，使得传感器器件更加便携；
[0031] (2)提升了器件的灵敏度与检测限，实现了对超痕量的性激素的定量检测；
[0033] 图1为本公开实施例的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的组成示意图；其中图1(a)为平面展开示意图；图1(b)为层次关系示意图。
[0034] 图2为本公开实施例的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的制备方法流程示意图。
[0035] 图3为本公开实施例的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的工作电极的制备流程示意图。
[0036] 图4为本公开实施例的采用折叠方式制备基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的流程示意图。
具体实施方式
[0037] 本公开提供了一种基于适配体的微流控滤纸芯片传感器及其制备方法，具体地说是基于适配体-抗原特异性结合的原理，设计微流控通道与堆叠布局结构，通过合成的纳米复合材料定向修饰微流控滤纸芯片的工作电极，以待测样品(性激素)的检测为切入点，进行靶物质的快速、高灵敏度的即时检测。检测过程花费时间少，所需样品消耗量低，并能够实现三种性激素的同时检测。
[0038] 本公开所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器以滤纸为基底，因此生物兼容性好且易降解、其质地轻便，可以实现便携式使用。另外，微流控技术的应用使得我们能在一个芯片上完成进样、过滤、检测等所有功能。而且微流控滤纸芯片消耗的样品量极少，便于实现多参数的同时检测。所述基于适配体的微流控滤纸芯片传感器利用巧妙的折叠结构，在不影响微流控滤纸芯片特性的同时通过折叠结构简化了操作步骤，本申请将微流控滤纸芯片与免标记电化学快速检测方法结合，这样免标记的样品可以加在芯片上直接开始电化学检测，实现了可控、选择性与重复性优异、检测限低且线性范围宽的即时诊断。纳米材料的使用是为了实现更灵敏的检测。经过纳米材料修饰的电极具有更大的比表面积、更高的催化活性和更快的电子传递能力，从而实现更灵敏的检测，还能实现同时检测雌二醇(E2)、卵泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)。同时微流控滤纸芯片可以和多种不同的检测方法结合形成各种基于不同原理的检测器件。
[0039] 为使本公开的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本公开进一步详细说明。
[0040] 在本公开实施例中，提供一种基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，如图1所示，所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，包括：
[0041] 进样区，包括依次相连的进样孔，微流控通道，以及过滤孔；待测样品由所述进样孔进入，通过微流控通道进入过滤孔进行过滤；
[0042] 扩散及反应区，位于所述进样区下，包括一与所述过滤孔对应的扩散滤孔，以及多个反应区，所述多个反应区分别通过扩散微流控通道与所述扩散滤孔相连；所述扩散及反应区用于将经过过滤孔过滤后的待测样品扩散到所述多个反应区；
[0043] 工作电极区，位于所述扩散及反应区下，包括多个分别与所述多个反应区对应的工作电极，所述工作电极上设置有纳米复合材料以及适配体；以及
[0044] 对电极和参比电极区，位于所述扩散及反应区上，包括多组分别与所述多个反应区对应的对电极和参比电极组；
[0045] 所述进样区可以和所述工作电极区或对电极和参比电极区集成在一起(一层)；也可以单独为位于一层；
[0046] 所述基于适配体的微流控滤纸芯片传感器中进样孔、微流控通道、过滤孔、扩散滤孔、反应区为亲水区；所述工作电极、对电极和参比电极制备的区域也为亲水区；所述亲水区域以外区域为疏水区。
[0047] 所述每组对电极和参比电极组包括一对电极，以及一参比电极；
[0048] 所述工作电极的制备材料包括：碳浆、纳米复合材料、适配体、以及巯基乙醇溶液；
[0049] 所述巯基乙醇溶液封闭所述工作电极上多余的活性位点。
[0050] 所述纳米复合材料为导电物质、电活性物质和纳米金的混合物；
[0052] 所述电活性物质包括：硫堇、新亚甲基蓝、对苯二酚、普鲁士蓝、聚谷氨酸或铁氰化钾中至少一种；
[0053] 所述待测样品包括：性激素(雌二醇(E2)、孕酮(P)、卵泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、催乳激素(PRL))、蛋白质、细胞、病毒、维生素或过敏原中至少一种。
[0054] 所述对电极的制备材料包括：碳浆、石墨烯导电油墨或导电金浆中至少一种；
[0055] 所述参比电极的制备材料包括：导电银浆；
[0056] 所述工作电极、对电极和参比电极共同组成三电极结构。
[0057] 所述适配体种类与待检测物种类对应，本申请可在不同工作电极上设置不同的适配体，从而能同时检测多种不同种类的待检测物。
[0058] 在本公开中，还提供一种基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的制备方法，用于制备以上所述的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，结合图2至图4所示，所述制备方法包括：
[0059] 步骤S1：根据待检测物特点选取适合的滤纸；
[0060] 步骤S2：按设计图在所述滤纸上制备疏水区，剩余部分为亲水区；所述亲水区包括进样区、扩散及反应区、工作电极制备区、对电极制备区和参比电极制备区；
[0061] 步骤S3：在步骤S2所制备的工作电极制备区制备工作电极，完成工作电极区的制备；
[0062] 步骤S4：在步骤S2所制备的对电极制备区和参比电极制备区制备对电极和参比电极，完成对电极和参比电极区的制备，进而完成了基于适配体的微流控滤纸芯片的制备；
[0063] 步骤S5：将所述基于适配体的微流控滤纸芯片按进样区在表面，扩散及反应区位于工作电极区和对电极和参比电极区中间的形式设置，完成基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的制备。
[0064] 所述步骤S1中，根据待检测物的物理或化学特性，选择适合的滤纸类型，通过电脑中的绘图软件设计滤纸芯片布局、结构，包括微流控沟道的布局、结构和三电极(工作电极、对电极、参比电极)的布局、结构。
[0065] 所述步骤S2中，使用喷蜡打印机将设计的图案打印到滤纸上，在60℃的烘箱中烘烤50min。经过烘烤，打印在滤纸表面的蜡融化并渗透进滤纸的内部，将蜡覆盖的区域变为疏水区域，而没有经过喷蜡的滤纸区域依然保持为亲水区；通过多次实验，本发明通过精确控制加热温度与时间，实现了对滤纸芯片亲水区与疏水区大小的精准控制。
[0066] 所述步骤S3，包括：
[0067] 步骤S31：在工作电极所对应的对电极制备区印刷导电碳浆；
[0068] 步骤S32：在所述导电碳浆上修饰纳米复合材料；
[0069] 步骤S33：在所述纳米复合材料上制备适配体，并使用巯基乙醇溶液进行封闭，完成工作电极的制备。
[0070] 通过丝网印刷技术，将导电碳浆印刷在工作电极所对应的工作电极制备区，以及对电极所对应的对电极制备区。将导电银浆印刷在参比电极对应的参比电极制备区。并制备新型纳米复合材料修饰工作电极，将检测物对应的适配体分别固定在对应的工作电极上。并且使用巯基乙醇溶液封闭电极上多余的活性位点。
[0071] 在本公开实施例中，如图1所示，所述基于适配体的微流控滤纸芯片一共有三套电化学三电极体系，因此能够实现对同一个待测样品中的三种检测物同时检测，其中有三个工作电极。三组对电极与参比电极成对印刷。使用时，待检测物通过进样孔进入滤纸芯片，经过微流控通道流入过滤孔，在这里实现待测样品的过滤。经过过滤孔过滤后的待测样品向下到达扩散及反应区，经扩散滤孔流向三个反应区，从而分别与工作电极上固定的适配体发生反应。在反应过程中，对电极与参比电极通过反应区与所述工作电极组成三电极结构。反应完成后，将所述基于适配体的微流控滤纸芯片传感器通过将所述工作电极、对电极和参比电极与外置的电化学工作站连接，采用差分脉冲伏安法对工作电极进行扫描，根据电流峰值的变化量获得待测样品中待检测物(E2，FSH，LH)的浓度。
[0072] 步骤S5中，所述基于适配体的微流控滤纸芯片传感器可以通过折叠或堆叠加工的方式制备而成；在本公开实施例中，结合图1和图4所示，为通过折叠的方式，将制备好的基于适配体的微流控滤纸芯片加工为最终的基于适配体的微流控滤纸芯片传感器。图4中，标示1的部分包括进样区、对电极和参比电极区，标示2的部分为工作电极区，标示3的部分为扩散及反应区，首先将扩散及反应区折叠至所述工作电极区之上，再将标示1的部分折叠至所述扩散及反应区之上，就通过折叠的方式完成了基于适配体的微流控滤纸芯片传感器的制备。也可分别加工好标示1、2、3的部分，然后堆叠加工成基于适配体的微流控滤纸芯片传感器。
[0073] 对多种性激素E2，FSH，LH的同时检测，测得各待检测物的浓度；进而能够确定患者是否患有内分泌方面的疾病。例如，E2浓度较低见于卵巢功能低下、卵巢早衰、席汉氏综合征等病。而若FSH与LH的浓度都高，则可确诊为卵巢功能衰竭。
[0074] 在本公开实施例中，所述基于适配体的微流控滤纸芯片传感器能够对E2，FSH，LH的同时检测，具体如下：
[0075] (1)通过指数富集的配基系统进化技术，分别筛选得到E2，FSH，LH对应的适配体，在适配体的5’端修饰巯基；并制备本发明提出的微流控芯片。
[0076] (2)合成纳米复合材料(氨基化单壁碳纳米管/新亚甲基蓝/纳米金溶液)，对基于适配体的微流控滤纸芯片中的一个工作电极进行修饰，这是为了提升工作电极的导电能力并利于将E2对应的适配体固定到电极表面，具体包括：取2mg氨基化单壁碳纳米管，溶解到1mL水溶液中，取1mL浓度为2mg mL-1的氨基化单壁碳纳米管溶液和1mL浓度为2mg mL-1的新亚甲基蓝溶液混合，在磁力搅拌器中激烈搅拌24h。取20uL上述混合液与100uL粒径为15nm的纳米金溶液混合，激烈搅拌12h后即得到氨基化单壁碳纳米管/新亚甲基蓝/纳米金复合物。取10μL制备得到的氨基化单壁碳纳米管/新亚甲基蓝/纳米金复合物混合液滴涂在工作电极表面，随后取10μL浓度为28μgmL-1的E2的适配体到电极表面，在设置在4℃的冰箱中下放置6h，用于结合适配体，最后，在室温下，在电极表面滴涂10μL浓度为1％的巯基乙醇溶液来封闭剩余的活性位点，至此完成了针对E2的工作电极(检测电极)的修饰；
[0077] (3)合成另一种纳米复合材料(聚醚酰亚胺/多壁碳纳米管/硫堇/纳米金溶液)，对所述滤纸芯片中的另一个工作电极进行修饰，这是为了提升该工作电极的导电能力并利于将FSH对应的适配体固定到此工作电极表面，具体包括：取6mg聚醚酰亚胺，溶解到1mL水溶液中，得到6mg mL-1的聚醚酰亚胺溶液。取2mg多壁碳纳米管，溶解到1mL水溶液中，得到2mg mL-1的多壁碳纳米管溶液。取1mL浓度为6mg mL-1的聚醚酰亚胺溶液和1mL浓度为2mg mL-1的多壁碳纳米管溶液混合，在超声仪中超声1h得到聚醚酰亚胺/多壁碳纳米管的混合溶液。取1mL聚醚酰亚胺/多壁碳纳米管混合溶液与1ml浓度为2mg mL-1硫堇溶液混合，在磁力搅拌器中剧烈搅拌24h，取20uL上述混合液与100uL粒径为15nm的纳米金溶液混合，激烈搅拌12h后即得到聚醚酰亚胺/多壁碳纳米管/硫堇/纳米金溶液。取10μL制备得到的聚醚酰亚胺/多壁碳纳米管/硫堇/纳米金溶液滴涂在一个工作电极表面，随后取10μL FSH的适配体到此工作电极表面，在设置在4℃的冰箱中下放置6h，用于结合适配体，最后，在室温下，在电极表面滴涂10μL浓度为1％的巯基乙醇溶液来封闭剩余的活性位点，至此完成了针对FSH的工作电极的修饰；
[0078] (4)合成又一中纳米复合材料(石墨烯/聚苯二酚/纳米金溶液)，对所述滤纸芯片中的再一个工作电极进行修饰，这是为了提升该工作电极的导电能力并利于将LH对应的适配体固定到该工作电极表面，具体包括：取2mg石墨烯，溶解到1mL水溶液中，取1mL浓度为2mg mL-1的石墨烯溶液和1mL浓度为2mg mL-1的聚苯二酚溶液混合，在磁力搅拌器中激烈搅拌24h。取20uL上述混合液与100uL粒径为15nm的纳米金溶液混合，激烈搅拌12h后即得到石墨烯/聚苯二酚/纳米金复合物。取10μL制备得到的石墨烯/聚苯二酚/纳米金溶液滴涂在该工作电极表面，随后取10μL LH的适配体到电极表面，在设置在4℃的冰箱中下放置6h，用于结合适配体，最后，在室温下，在电极表面滴涂10μL浓度为1％的巯基乙醇溶液来封闭剩余的活性位点，至此完成了针对LH的工作电极(检测电极)的修饰；
[0079] (5)将完成制备的滤纸芯片加工为基于适配体的微流控滤纸芯片传感器，对性激素E2，FSH，LH进行同时检测，具体操作如下：取15μL临床血清溶液，由所述进样孔流入所述传感器中，经过滤后到达扩散及反应区。在室温下静置25min，使待测的性激素与工作电极表面相应的适配体充分结合。随后将传感器通过后端接口与电化学工作站连接，采用差分脉冲伏安法对工作电极进行扫描，根据电流峰值的变化量获得待测样品中E2，FSH，LH的浓度。
[0080] 至此，已经结合附图对本公开实施例进行了详细描述。需要说明的是，在附图或说明书正文中，未绘示或描述的实现方式，均为所属技术领域中普通技术人员所知的形式，并未进行详细说明。此外，上述对各元件和方法的定义并不仅限于实施例中提到的各种具体结构、形状或方式，本领域普通技术人员可对其进行简单地更改或替换。
[0081] 依据以上描述，本领域技术人员应当对本公开基于适配体的微流控滤纸芯片传感器及其制备方法有了清楚的认识。
[0082] 综上所述，本公开提供了一种基于适配体的微流控滤纸芯片传感器及其制备方法，基于适配体-抗原特异性结合的原理，设计微流控通道与堆叠布局结构，通过合成的纳米复合材料定向修饰微流控滤纸芯片的工作电极，以待测样品中的待检测目标物为切入点，进行靶物质的快速、高灵敏度的即时检测。检测过程花费时间少，所需样品消耗量低，并能够实现多种待检测目标靶物质的同时检测。
[0083] 还需要说明的是，实施例中提到的方向用语，例如“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”等，仅是参考附图的方向，并非用来限制本公开的保护范围。贯穿附图，相同的元素由相同或相近的附图标记来表示。在可能导致对本公开的理解造成混淆时，将省略常规结构或构造。
[0085] 除非有所知名为相反之意，本说明书及所附权利要求中的数值参数是近似值，能够根据通过本公开的内容所得的所需特性改变。具体而言，所有使用于说明书及权利要求中表示组成的含量、反应条件等等的数字，应理解为在所有情况中是受到「约」的用语所修饰。一般情况下，其表达的含义是指包含由特定数量在一些实施例中±10％的变化、在一些实施例中±5％的变化、在一些实施例中±1％的变化、在一些实施例中±0.5％的变化。
[0086] 再者，单词“包含”不排除存在未列在权利要求中的元件或步骤。位于元件之前的单词“一”或“一个”不排除存在多个这样的元件。
[0087] 说明书与权利要求中所使用的序数例如“第一”、“第二”、“第三”等的用词，以修饰相应的元件，其本身并不意味着该元件有任何的序数，也不代表某一元件与另一元件的顺序、或是制造方法上的顺序，该些序数的使用仅用来使具有某命名的一元件得以和另一具有相同命名的元件能做出清楚区分。
[0088] 此外，除非特别描述或必须依序发生的步骤，上述步骤的顺序并无限制于以上所列，且可根据所需设计而变化或重新安排。并且上述实施例可基于设计及可靠度的考虑，彼此混合搭配使用或与其他实施例混合搭配使用，即不同实施例中的技术特征可以自由组合形成更多的实施例。
[0089] 本领域那些技术人员可以理解，可以对实施例中的设备中的模块进行自适应性地改变并且把它们设置在与该实施例不同的一个或多个设备中。可以把实施例中的模块或单元或组件组合成一个模块或单元或组件，以及此外可以把它们分成多个子模块或子单元或子组件。除了这样的特征和/或过程或者单元中的至少一些是相互排斥之外，可以采用任何组合对本说明书(包括伴随的权利要求、摘要和附图)中公开的所有特征以及如此公开的任何方法或者设备的所有过程或单元进行组合。除非另外明确陈述，本说明书(包括伴随的权利要求、摘要和附图)中公开的每个特征可以由提供相同、等同或相似目的的替代特征来代替。并且，在列举了若干装置的单元权利要求中，这些装置中的若干个可以是通过同一个硬件项来具体体现。
[0090] 类似地，应当理解，为了精简本公开并帮助理解各个公开方面中的一个或多个，在上面对本公开的示例性实施例的描述中，本公开的各个特征有时被一起分组到单个实施例、图、或者对其的描述中。然而，并不应将该公开的方法解释成反映如下意图：即所要求保护的本公开要求比在每个权利要求中所明确记载的特征更多的特征。更确切地说，如下面的权利要求书所反映的那样，公开方面在于少于前面公开的单个实施例的所有特征。因此，遵循具体实施方式的权利要求书由此明确地并入该具体实施方式，其中每个权利要求本身都作为本公开的单独实施例。
[0091] 以上所述的具体实施例，对本公开的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本公开的具体实施例而已，并不用于限制本公开，凡在本公开的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本公开的保护范围之内。
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