一种利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法
专利汇可以提供一种利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白 聚合物 的的方法，包括如下步骤：（1）高压浸提，（2）加压过滤，（3）离心分离，（4） 真空 浓缩，（5）酶解，（6）柱层析，（7）合成反应。本发明提高了生产加工过程中副产品的利用率，增加了产品的科技含量和经济价值；其次，最大程度保留了 胶原蛋白 肽和香菇多糖的活性官能团，避免两种成分的活性流失；最后，胶原蛋白肽和香菇多糖的结合，使两者的功能性质相得益彰，在医疗保健、生理活性方面具有更大的应用潜 力 。，下面是一种利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法专利的具体信息内容。
1.一种利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的的方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）高压浸提：将鸡骨与水混合，脱血后升温至110-115℃，恒温4小时，另将香菇冲洗干净后与水混合，升温至120-125℃，恒温3小时；
（2）加压过滤：在压力0.2MPa条件下，使用200目滤网分别对鸡骨提取液和香菇提取液进行过滤；
（3）离心分离：鸡骨提取液通过管式离心机，将鸡油分离出来；
（4）真空浓缩：对步骤（2）过滤后的香菇提取液进行浓缩，得香菇浓缩液，对步骤（3）离心分离后的鸡骨提取液进行浓缩，得骨胶原蛋白浓缩液：
（5）酶解：用复合蛋白酶对骨胶原蛋白浓缩液进行酶解，得骨胶原多肽液；用天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶对香菇浓缩液进行酶解，得香菇多糖溶液；
（6）柱层析：利用葡聚糖凝胶分子筛作用，分别对骨胶原多肽和香菇多糖进行纯化、透析和收集得到香菇多糖纯化液和骨胶原多肽纯化液；
（7）合成反应：香菇多糖纯化液和骨胶原多肽纯化液反应得多糖蛋白聚合物。
2.根据权利要求1所述的利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法，其特征在于：所述步骤（1）中鸡骨与水的质量比为1:(1.2 1.5)，香菇与水的质量比为1:(6 7)，脱血~ ~
条件为40℃，恒温30分钟。
3.根据权利要求1所述的利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法，其特征在于：所述步骤（4）中鸡骨提取液和香菇提取液都分别浓缩至原来体积的1/10。
4.根据权利要求1所述的利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法，其特征在于：所述步骤（5）中复合蛋白酶与骨胶原蛋白浓缩液的质量比为2:1000，酶解条件为：先用氢氧化钙调节pH至8.0，升温至55-58℃，恒温1小时后升温至100℃，保温10分钟。
5.根据权利要求1所述的利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法，其特征在于：所述步骤（5）中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶与香菇浓缩液的质量比为1:2000，酶解条件为：升温至36-40℃，恒温1小时后升温至100℃，保温10分钟。
6.根据权利要求1所述的利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法，其特征在于：所述步骤（6）中骨胶原多肽的分子量为2KDa-10KDa，香菇多糖的分子量为40KDa-
100KDa。
7.根据权利要求1所述的利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法，其特征在于：所述步骤（6）中使用部分收集器收集层析液，以管数为横坐标，以吸光度为纵坐标，分别得到骨胶原多肽液和香菇多糖溶液的洗脱曲线，并分别收集不同洗脱峰对应管的洗脱液，使用液相色谱检测不同洗脱峰对应洗脱液的分子量，找到所需蛋白或多糖对应的洗脱峰收集液。
8.根据权利要求7所述的利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法，其特征在于：使用紫外光谱仪检测吸光度时，香菇多糖选择200nm处波长，骨胶原多肽选择280nm处波长。
9.根据权利要求1所述的利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法，其特征在于：所述步骤（7）中合成反应条件为：取2000g香菇多糖纯化液与20g溴化氢在pH=10.6条件下反应15分钟后加入400g骨胶原多肽纯化液，于40℃条件下反应4小时，之后加入20g甘氨酸，在超纯水中透析8小时，加入4mol/L NaCl盐析，最后在6000r/min的转速条件下离心并收集沉淀，得多糖蛋白聚合物。
一种利用鸡骨和香菇制备新型多糖蛋白聚合物的方法
技术领域
背景技术
发明内容
分钟，进行脱血，之后升温至110-115℃，恒温4小时，另将香菇冲洗干净后与水按质量比为
1:(6 7)混合，升温至120-125℃，恒温3小时；
~
（2）加压过滤：在压力0.2MPa条件下，使用200目滤网分别对鸡骨提取液和香菇提取液进行过滤；
（3）离心分离：鸡骨提取液通过管式离心机，将鸡油分离出来；
（4）真空浓缩：分别对鸡骨提取液和香菇提取液进过浓缩，浓缩至原来体积的1/10，得骨胶原蛋白浓缩液和香菇浓缩液：
（5）酶解：复合蛋白酶与骨胶原蛋白浓缩液按质量比2:1000混合，酶解条件为：先用氢氧化钙调节pH至8.0，升温至55-58℃，恒温1小时后升温至100℃，维持温度10分钟，得骨胶原多肽液；天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶与香菇浓缩液按质量比1:2000混合，酶解条件为：升温至36-40℃，恒温1小时后升温至100℃，维持温度10分钟，得香菇多糖溶液；
（6）柱层析：利用葡聚糖凝胶分子筛作用，分别对骨胶原多肽和香菇多糖进行层析，使用部分收集器收集层析液，以管数为横坐标，以吸光度为纵坐标，分别得到骨胶原多肽液和香菇多糖溶液的洗脱曲线，并分别收集不同洗脱峰对应管的洗脱液。使用液相色谱检测不同洗脱峰对应洗脱液的分子量，找到所需蛋白（2KDa-10KDa）或多糖（40KDa-100KDa）对应的洗脱峰收集液，将收集液进行透析，得到相应的纯化液。
具体实施方式
（1）高压浸提：分别将鸡骨与水按质量比为1:1.2混合，升高温度到40℃，恒温30分钟，进行脱血，之后升温至110℃，恒温4小时，另将香菇冲洗干净后与水按质量比为1:6混合，升温至120℃，恒温3小时；
（2）加压过滤：在压力0.2MPa条件下，使用200目滤网分别对鸡骨提取液和香菇提取液进行过滤；
（3）离心分离：鸡骨提取液通过管式离心机，将鸡油分离出来；
（4）真空浓缩：分别对鸡骨提取液和香菇提取液进过浓缩，浓缩至原来体积的1/10，得骨胶原蛋白浓缩液和香菇浓缩液：
（5）酶解：复合蛋白酶与骨胶原蛋白浓缩液按质量比2:1000混合，酶解条件为：先用氢氧化钙调节pH至8.0，升温至55-58℃，恒温1小时后升温至100℃，维持温度10分钟，得骨胶原多肽液；天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶与香菇浓缩液按质量比1:2000混合，酶解条件为：升温至36-40℃，恒温1小时后升温至100℃，维持温度10分钟，得香菇多糖溶液；
（6）柱层析：利用葡聚糖凝胶分子筛作用，分别对骨胶原多肽和香菇多糖进行层析，使用部分收集器收集层析液，以管数为横坐标，以吸光度为纵坐标，分别得到骨胶原多肽液和香菇多糖溶液的洗脱曲线，并分别收集不同洗脱峰各管洗脱液。使用液相色谱检测不同洗脱峰对应洗脱液的分子量，找到所需蛋白（2KDa-4KDa）或多糖（40KDa-60KDa）对应的洗脱峰收集液，将收集液进行透析，得到相应的纯化液。
（1）高压浸提：分别将鸡骨与水按质量比为1:1.5混合，升高温度到40℃，恒温30分钟，进行脱血，之后升温至113℃，恒温4小时，另将香菇冲洗干净后与水香菇与水按按质量比为
1:7混合，升温至123℃，恒温3小时；
（2）加压过滤：在压力0.2MPa条件下，使用200目滤网分别对鸡骨提取液和香菇提取液进行过滤；
（3）离心分离：鸡骨提取液通过管式离心机，将鸡油分离出来；
（4）真空浓缩：分别对鸡骨提取液和香菇提取液进过浓缩，浓缩至原来体积的1/10，得骨胶原蛋白浓缩液和香菇浓缩液：
（5）酶解：复合蛋白酶与骨胶原蛋白浓缩液按质量比2:1000混合，酶解条件为：先用氢氧化钙调节pH至8.0，升温至55-58℃，恒温1小时后升温至100℃，维持温度10分钟，得骨胶原多肽液；天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶与香菇浓缩液按质量比1:2000混合，酶解条件为：升温至36-40℃，恒温1小时后升温至100℃，维持温度10分钟，得香菇多糖溶液；
（6）柱层析：利用葡聚糖凝胶分子筛作用，分别对骨胶原多肽和香菇多糖进行层析，使用部分收集器收集层析液，以管数为横坐标，以吸光度为纵坐标，分别得到骨胶原多肽液和香菇多糖溶液的洗脱曲线，并分别收集不同洗脱峰各管洗脱液。使用液相色谱检测不同洗脱峰对应洗脱液的分子量，找到所需蛋白（2KDa-4KDa）或多糖（40KDa-60KDa）对应的洗脱峰收集液，将收集液进行透析，得到相应的纯化液。
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